CN107823136A

CN107823136A - 一种西罗莫司自组装胶束及其制备方法

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Publication number: CN107823136A
Application number: CN201711200093.2A
Authority: CN
Inventors: 郭丽颖
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2017-11-27
Filing date: 2017-11-27
Publication date: 2018-03-23

Abstract

本发明公开了一种载药量大、稳定性高、制备工艺简单、制备流程无有机溶剂、能够有效抑制肠道外排、显著提高西罗莫司生物利用度的西罗莫司自组装胶束及其制备方法。发明采用泊洛沙姆L‑61、泊洛沙姆188和羟丙基环糊精作为辅料，制备时将西罗莫司和羟丙甲纤维素充分混合，加入到泊洛沙姆L‑61和泊洛沙姆188熔融液中，经过搅拌，形成澄清的液体，待液体冷却凝固后，粉碎，过筛，得到西罗莫司自组装胶束粉末。该粉末可以直接用水溶解，水化制得西罗莫司自组装胶束，也可以将该粉末与其他药学上可接受的辅料混合，采用一定的工艺制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂、滴丸剂或口服液。本发明的目的是提供自组装胶束及其制备方法。

Description

一种西罗莫司自组装胶束及其制备方法

技术领域

本发明涉及药物制剂技术领域，尤其是涉及一种西罗莫司口服自组装胶束及其制备方法。

背景技术

西罗莫司(Sirolimus，SRL)，又称雷帕霉素，黄色固体，化学名称为：(3S,6R,7E,9R,10R,12R,14S,15E,17E,19E,21S,23S,26R,27R,34aS)-9,10,12,13,14,21,22,23,24,25,26,27,32,33,34,34a-十六氢-9,27-二羟基-3-[(1R)-2-[(1S,3R,4R)-4-羟基-3-甲氧环己基]-1-甲基乙基]-10,21-二甲氧-6,8,12,14,20,26-六甲基-23,27-环氧-3H-吡啶并[2,1-c][1,4]氧杂氮杂三十一环烯-1,5,11,28,29(4H,6H,31H)-戊酮。分子式为C₅₁H₇₉NO₁₃，相对分子质量为914.19，熔点在183-185℃之间。

西罗莫司原料价格非常昂贵，可溶于甲醇、乙醇、丙醇和氯仿等有机溶剂，极微溶于水(2.6μg/mL)，属于强疏水性化合物。《中国药事》2011年25卷7期 “P-糖蛋白最新研究进展”一文指出，西罗莫司作为P-糖蛋白外排的底物，能够与P-gp蛋白竞争性结合，导致西罗莫司被泵到细胞外，降低药物在细胞内的浓度，使疗效显著降低。而且人体口服西罗莫司溶液后，在进入消化道后很容易被酶分解，导致进入血液的西罗莫司药物量很少，生物利用度很低，口服溶液剂仅为14％，且溶液状态下不稳定，西罗莫司口服液需保存于2～8℃条件下，开封后，在1个月内须用完，室温下保存不可超过30天。Elan公司开发的纳米结晶片，制备工艺复杂，生产周期长，其口服生物利用度也仅提高到27％，而且其溶出度低，不能维持平稳的血药浓度，直接导致治疗窗变窄、毒副作用增大。

作为一种新型、强效的大环内酯类免疫抑制剂，西罗莫司主要用于治疗器官移植后的抗排异反应，商品名为雷帕鸣(Rapamycin)。西罗莫司作为第三代免疫抑制剂，是迄今为止发现的毒性较小的有巨大潜力的免疫抑制剂，正成为肾移植患者长期免疫抑制治疗的基本药物。器官移植患者由于需终身使用免疫抑制剂来降低移植排斥，医药费的高额支出(按器官移植后存活十年计，需支出的药费高达三十万左右)成为患者及其家庭的沉重负担。而且，临床上低的药物生物利用度直接造成了药物应用的较大损失，并在很大程度上限制了药物的临床使用。因此，改善西罗莫司的溶解性，提高西罗莫司药物制剂的生物利用度，增加西罗莫司在胃肠道中的吸收，提高西罗莫司制剂的疗效，减轻患者用药负担，给患者提供更优的用药选择、提高患者的生活质量具有重要的现实意义。

为了提高西罗莫司药物的溶解度，改善其生物利用度，增强疗效，现有技术公开了大量相关技术文献。公开号为CN103655486A的发明专利申请公开了一种西罗莫司微乳颗粒及其制备方法和应用，该发明使用加热熔融法制备得到西罗莫司微乳颗粒，可以提高制剂的稳定性和溶出速率；公开号为CN103239399A的中国发明专利申请文件中，公开了一种西罗莫司纳米混悬剂的制备方法，该方法将西罗莫司与共聚维酮的乙醇溶液滴入共聚维酮水溶液中，制得纳米混悬液；公开号为CN105640886A的中国发明专利申请文件中，公开了一种西罗莫司自微乳制剂的制备方法，该方法将西罗莫司加入油相，乳化剂中溶解后，再加入其他原料混合均匀，制得微乳制剂。

2012年12月发表在《中国现代应用药学》第 29卷第12期上的“羟丙基-β-环糊精对西罗莫司的增溶作用研究”一文中公开了一种西罗莫司-羟丙基-β-环糊精包合物的技术，该工艺为：称取羟丙基-β-环糊精适量置于烧杯中加水使溶解，将西罗莫司溶于少量丙酮，西罗莫司与羟丙基-β-环糊精的摩尔比为 1∶6，缓慢逐滴加入到羟丙基-β-环糊精水溶液中，25 ℃下超声 2小试，置冰箱 4 ℃下冷藏 12 h 后，用0.45 μm 微孔滤膜过滤，滤液经冷冻干燥后用丙酮洗脱游离的西罗莫司，即得包合物，过 80目筛，减压干燥，备用。该工艺使用到了羟丙基-β-环糊精，但其制备工艺复杂，无法应用于工业生产，且该包合物并不具有抑制肠道外排的效果，生物利用度提升不显著，并没有起到很好的增效作用。

目前关于西罗莫司纳米的现有技术大都是关于载药纳米粒、脂质体、自乳化系统、纳米混悬剂等，但没有关于西罗莫司口服自组装胶束的报道。对于上述现有技术在中提到的剂型，生物利用度提高有限，没有针对西罗莫司的肠道外排缺陷进行针对性弥补，且制备方法大都较为复杂，存在耗时长、成本高、易金属残留、对设备要求高等问题。另外上述技术方案中大都需要有机溶剂加入生产体系，因此，需要进一步后续处理去除有机溶剂，导致整个制备步骤繁琐，生产成本陡增，难以放大和连续制备。

因此，针对以上问题，目前急需提供一种新的制备西罗莫司纳米药物组合物的方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种载药量大、稳定性高、制备工艺简单、制备流程无有机溶剂、能够有效抑制肠道P-gp外排、显著提高西罗莫司生物利用度的自组装胶束及其制备方法。

为了达到上述目的，发明人采用泊洛沙姆L-61、泊洛沙姆188和羟丙基环糊精作为辅料制备自组装胶束。在试验中发明人意外发现，西罗莫司虽然不能溶于熔融状态的泊洛沙姆L-61和泊洛沙姆188混合物中，但是在溶解过程中先将西罗莫司和羟丙甲纤维素充分混合，再加入到泊洛沙姆L-61和泊洛沙姆188熔融液中，经过搅拌，可以很快形成澄清的液体，将上述液体冷却后，粉碎，过筛，得到的粉末水溶剂良好，溶液澄清透明。经过分析，发明人认为西罗莫司能够在泊洛沙姆L-61和泊洛沙姆188得以溶解主要是由于西罗莫司能够穿过环糊精空腔，溶于熔融泊洛沙姆L-61和泊洛沙姆188中。

因此，本发明所述的西罗莫司自组装胶束由活性成分西罗莫司和辅料组成，所述辅料为泊洛沙姆L-61、泊洛沙姆188和羟丙基环糊精。通过优化，各组分的质量比为西罗莫司：泊洛沙姆L-61：泊洛沙姆188：羟丙基环糊精=（1~20）：（5~30）：（30~80）：（1~10）。通过马尔文粒径仪测定该比例范围内自组装胶束的粒径范围在30~500nm之间，粉末水化后稳定性良好，细胞外排得到一定抑制，大鼠生物利用度提升约81%~1445%。

通过对自主装胶束的粒径、稳定性、细胞渗透性和生物利用度进一步优化，得到各组分的质量比为西罗莫司：辅料泊洛沙姆L-61：泊洛沙姆188：羟丙基环糊精=（8~12）：（15~25）：（40~60）：（1~5）。在该比例下，西罗莫司自组装胶束粒径范围为40~250nm，粉末水化后稳定性良好，细胞外排得到一定抑制，大鼠生物利用度提升与242%~1445%。

经过进一步对配方组成的筛选，本发明意外的发现本发明最优选的西罗莫司自组装胶束，各组分的含量比例为西罗莫司：泊洛沙姆L-61：泊洛沙姆188：羟丙基环糊精=10：20：50：2。

该西罗莫司自组装胶束的制备工艺为：首先将泊洛沙姆L-61与泊洛沙姆188充分混合，加热（52℃以上）至熔融，之后将西罗莫司和羟丙基环糊精充分混合，加入至上述熔融液中至溶解，形成澄清溶液；待溶液冷却至室温凝固后，粉碎，过筛，得到西罗莫司自组装胶束粉末。该粉末可以直接用水溶解，水化制得西罗莫司自组装胶束，也可以将该粉末与其他药学上可接受的辅料混合，采用一定的工艺制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂、滴丸剂或口服液。

本发明所述的西罗莫司自组装胶束具有如下有点：

（1）相比于现有技术，本发明在西罗莫司自组装胶束的制备过程中不使用有机溶剂，因此不存在有机溶剂残留等问题，提高了制剂的安全性、

（2）本发明提供的西罗莫司自组装胶束制备工艺简单，操作步骤少，易于放大生产。

（3）本发明所用的泊洛沙姆L-61能后显著抑制西罗莫司的肠道外排，能够显著提升西罗莫司的口服生物利用度。

（4）泊洛沙姆188-泊洛沙姆L-61-羟丙基环糊精系统稳定性良好，干燥后形成粉末复溶后依然具有良好的稳定性，且干燥粉末也可与其他辅料混合，采用一定的工艺制成片剂、颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂、滴丸剂或口服液，应用范围广。

附图说明

图1是本发明实施例5所述的西罗莫司自组装胶束的透射电镜图。

具体实施方式

实施例1

称取30g泊洛沙姆L-61、80g泊洛沙姆188加入至圆底烧瓶中，并将圆底烧瓶置于80℃恒温水浴锅中，至熔融；将20g西罗莫司原料药与10g羟丙基环糊精混合均匀加入至上述圆底烧瓶中，充分搅拌至形成透明溶液；趁热将熔融液转移至研钵中，待熔融液冷却凝固后，倒入打粉机中粉碎1分钟，将粉碎后的粉末过100目筛，流化床干燥，进风温度40℃，出风温度32℃，风量8.5m³/h，持续25min，即得西罗莫司自组装胶束粉末132.7g，收率94.8%，测得水分含量为1.57%。将上述西罗莫司自组装胶束粉末进行含量检测，测得粉末中西罗莫司的平均含量未14.30%，高于理论值14.28%。称取10 g上述西罗莫司自组装胶束粉末溶于50 mL双蒸水中溶解，马尔文粒径仪测得粒径为495 nm。

实施例2

称取5g泊洛沙姆L-61、30g泊洛沙姆188加入至圆底烧瓶中，并将圆底烧瓶置于70℃恒温水浴锅中，至熔融；将1g西罗莫司原料药与1g羟丙基环糊精混合均匀加入至上述圆底烧瓶中，充分搅拌至形成透明溶液；趁热将熔融液转移至研钵中，待熔融液冷却凝固后，倒入打粉机中粉碎20秒，将粉碎后的粉末过100目筛，烘箱42℃干燥2 h，即的西罗莫司自组装胶束粉末，称重为35.7g，收率96.5%。称取10 g上述西罗莫司自组装胶束粉末溶于100 mL双蒸水中，加入高压均质机中，150bar循环5分钟，1000bar循环10分钟，出料得到西罗莫司自组装胶束，马尔文粒径仪测得粒径为32nm。

实施例3

称取15g泊洛沙姆L-61、40g泊洛沙姆188加入至圆底烧瓶中，并将圆底烧瓶置于75℃恒温水浴锅中至熔融；将8g西罗莫司原料药与2g羟丙基环糊精混合均匀加入至上述圆底烧瓶中，充分搅拌至形成透明溶液；趁热将熔融液转移至研钵中，待熔融液冷却凝固后，倒入打粉机中粉碎50s，将粉碎后的粉末过80目筛，烘箱40℃干燥2 h，即的西罗莫司自组装胶束粉末，称重为54.8g，收率96.1%。称取10 g上述西罗莫司自组装胶束粉末溶于30 mL双蒸水中，0.22μm过滤，用马尔文粒径仪测得粒径为41 nm。

实施例4

称取25g泊洛沙姆L-61、60g泊洛沙姆188加入至圆底烧瓶中，并将圆底烧瓶置于70℃恒温水浴锅中至熔融；将12g西罗莫司原料药与5g羟丙基环糊精混合均匀加入至上述圆底烧瓶中，充分搅拌至形成透明溶液；趁热将熔融液转移至研钵中，待熔融液冷却凝固后，转移至打粉机中粉碎1min，将粉碎后的粉末过100目筛，烘箱40℃干燥2h，即的西罗莫司自组装胶束粉末，称重为99.4g，收率97.5%。称取10 g上述西罗莫司自组装胶束粉末溶于10 mL双蒸水中，200w超声20 min后，用马尔文粒径仪测得粒径为247 nm。

实施例5

称取20g泊洛沙姆L-61、50g泊洛沙姆188加入至圆底烧瓶中，并将圆底烧瓶置于65℃恒温水浴锅中至熔融；将10g西罗莫司原料药与2g羟丙基环糊精混合均匀加入至上述圆底烧瓶中，充分搅拌至形成透明溶液；趁热将熔融液转移至研钵中，待熔融液冷却凝固后，倒入打粉机中粉碎120s，将粉碎后的粉末过100目筛，烘箱42℃干燥2 h，即的西罗莫司自组装胶束粉末，称重为79.2g，收率96.6%。称取10 g上述西罗莫司自组装胶束粉末溶于50 mL双蒸水中，加入高压均质机中，150bar循环5分钟，1000bar循环10分钟，出料得到西罗莫司自组装胶束，马尔文粒径仪测得粒径为49 nm。西罗莫司自组装胶束的TEM透射电镜如图1。

实施例6

将实施例1-5得到的西罗莫司自组装胶束干燥粉末100g、微晶纤维素450g、乳糖300g、硬脂酸镁2g、二氧化硅3g、羧甲基淀粉钠3g均匀混合，干法制粒，压片，制成片剂，并进行溶出度检测（37℃，桨法75转/min，pH7.4，含1%SDS）。

表1. 各实施例溶出度

实施例7

采用Caco-2模型测定实施例5得到西罗莫司自组装胶束及西罗莫司原料药小肠绒毛上皮细胞膜渗透性。结果表明西罗莫司自组装胶束能能显著增加肠道吸收、抑制肠道外排。

表2. 西罗莫司原料药及西罗莫司自组装胶束（实施例5）细胞渗透性

实施例8

将实施例5制备得到的西罗莫司自组装胶束和西罗莫司原料药给SD大鼠灌胃，剂量均为50mg/kg，测定大鼠生物利用度，结果表明，西罗莫司口服自组装胶束半衰期明显增加，达峰时间明显延长，体内暴露量提高了约14.4倍。结果充分说明，西罗莫司纳米混悬剂具有更高的生物利用度。

表3. 西罗莫司原料药及西罗莫司自组装胶束（实施例5）药代动力学参数表

参数	西罗莫司	西罗莫司自组装胶束
			AUC_0-t (µg/L*h)	167.4	2418.4
AUC_0-∞ (µg/L*h)	224.0	2599.7
			t_1/2(h)	3.4	3.9
T_max (h)	0.6	0.8
			C_max (µg/L)	87.4	470.3

实施例9

将西罗莫司自组装胶束100g(由实施例5的方法制备得到)、蔗糖100g分别过80目筛，混合均匀，加入1g聚维酮K30制备得到的水溶液制软材，过20目筛制粒，45℃烘干，20目整粒，再加入硬脂酸镁2g混合均匀；将干燥的颗粒进行胶囊分装，制备胶囊剂。

实施例10

将西罗莫司微乳100g(由实施例5的方法制备得到)、蔗糖100g、淀粉50g、羧甲基淀粉钠50g分别过100目筛，混合均匀，加入2g聚维酮K30制备得到的水溶液制软材，过30目筛制粒，45℃ 烘干，20目整粒，再加入高岭土6g混合均匀，制备成颗粒剂。

实施例11

将西罗莫司微乳100g(由实施例5的方法制备得到)、阿斯巴甜1g、双蒸水1000g，混匀，灌装，制备口服液。

Claims

1.一种西罗莫司自组装胶束，其特征在于，包括西罗莫司和辅料；其中，所述辅料包括泊洛沙姆L-61、泊洛沙姆188、羟丙基环糊精。

2.如权利要求1所述的西罗莫司自组装胶束，其特征在于，所述西罗莫司与辅料泊洛沙姆L-61、泊洛沙姆188、羟丙基环糊精的质量比为（1~20）：（5~30）：（30~80）：（1~10）。

3.如权利要求2所述的西罗莫司自组装胶束，其特征在于，所述西罗莫司与辅料泊洛沙姆L-61、泊洛沙姆188、羟丙基环糊精的质量比为（8~12）：（15~25）：（40~60）：（1~5）。

4.如权利要求3所述的西罗莫司自组装胶束，其特征在于，所述西罗莫司与辅料泊洛沙姆L-61、泊洛沙姆188、羟丙基环糊精的质量比为10：20：50：2。

5.如权利要求2-4任一权利要求所述的西罗莫司自组装胶束，其特征在于，所述西罗莫司自组装胶束粒径为30-500nm。

6.如权利要求3或4所述的西罗莫司自组装胶束，其特征在于，所述西罗莫司自组装胶束粒径为40-250nm。

7.如权利要求4所述的所述的西罗莫司自组装胶束，其特征在于，所述西罗莫司自组装胶束粒径为49nm。

8.一种西罗莫司自组装胶束，其制备方法为：

将泊洛沙姆L-61与泊洛沙姆188混合，加热至熔融，制得溶液；将西罗莫司和羟丙基环糊精加入至溶液A中，搅拌至溶解，制得溶液；将溶液B冷却凝固后，粉碎，过筛，得到粉末C；将粉末C溶于水中，制得西罗莫司自组装胶束。

9.一种含有西罗莫司自组装胶束粉末的药物制剂，其特征在于，包含权利要求8中所述的粉末C和药学可接受的辅料。

10.如权利要求9所述的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂为片剂、颗粒剂、胶囊剂、散剂、丸剂、滴丸剂或口服液。