CN107809999A - 用于治疗组织病变的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用作用于预防和/或治疗组织病变的药物的药物组合物，其包含与真核细胞、血小板提取物和/或裂解物或生长因子联合的生物相容性聚合物。本发明还涉及一种药物试剂盒，其包含与用于预防和/或治疗组织病变的真核细胞联合的生物相容性聚合物。本发明还涉及包含与真核细胞、血小板提取物和/或裂解物或生长因子联合的生物相容性聚合物的药物组合物用于制备治疗组织病变的药物的用途。本发明可特别地用于兽医和药学领域。

Description

用于治疗组织病变的组合物

技术领域

本发明涉及一种作为用于预防和/或治疗组织病变的药物的药物组合物。

本发明还涉及用于预防和/或治疗组织病变的药物试剂盒。

本发明还涉及药物组合物在制备用于治疗组织病变的药物中的用途。

本发明可特别地用于制药领域和兽药领域。

在下面的描述中，括号()之间的参考文献返回查阅文本结尾处提供的参考文献列表。

背景技术

现有技术

用于治疗目的细胞、组织或器官的植入是医学的重大挑战。遍布近一个世纪的许多研究已经证明这些植入在许多应用中的治疗益处，并且多种技术已经使得可以在将样本植入或再引入到受体患者中之前控制和改善样本的质量、它们的存储和保存或它们的扩增。同样地，出于为受体患者提供再引入后治疗益处的目的，已经对在方法、装置和产品中使用的器官、组织或细胞的性能水平和性质进行了许多改善。最后，更好地了解和控制有时与这种再引入有关的不良反应也使得可以确保更好的成功。

然而，在给予细胞之后，关于它们的整合率和/或考虑到给予的细胞数目的治疗效果仍然非常低，因此需要重复治疗和非常高的治疗成本。此外，低产量和高成本限制了能够借助这些方法进行治疗的病理状态和/或患者。

因此，现有技术中真正的需求是能够进一步改善所使用的这些方法和/或生物学工具以优化它们的应用并且能够拓宽治疗应用领域。

在现有技术中存在能够改善组织环境的化合物，例如被称为“类肝素结合生长因子保护剂和增效剂”、缩写为HBGFPP的聚合物。通过它们保护对肝素具有亲和力的生长因子(例如，FGF、TGFb等)抵抗蛋白酶降解以及用于增强这些因子的活性而在所用剂量下不显示任何显著的抗凝血活性的性质来定义这些HBGFPP。这些HBGFPP表现出在肌肉组织、神经组织和消化道组织病变的修复以及在炎性反应的活性方面的令人惊讶的性质，具体地由国际申请WO 1995/026739或在美国专利US 7 998 922中例示的。这些聚合物也被化学地定义并且在皮肤、骨、角膜和局部缺血性组织病变的临床前模型中被例示为组织再生剂。它们还表现出抗纤维化作用，用于防止局部缺血模型中的氧化应激的作用的单一能力(单一容量，single capacity)、抗老化和神经变性的保护作用，以及，总体上，它们促进再生过程。一种特殊形式的HBGFPP，RGTA，在其使用过程中显示出在组织病变(例如，皮肤、角膜、骨或肌肉)的修复中的加速和改善；并且可能减少疤痕以及更一般地在减少纤维化(参见综述VanNeck et al.，Heparan Sulfate Proteoglycan Mimetics Promote TissueRegeneration:An Overview chapter 4in Tissue Regeneration–From Basic Biologyto Clinical Application ISBN 978-953-51-0387-5，Jamie Davies编辑)。还已知RGTA能够防止由以下各项引起的不良影响：辐照-(Mangoni M et al.；Int.J.RadiationOncology Biol.Phys.2009,74,1242-1250)、在由辐照引起的病变的情况下的氧化应激(Yue Xl et al.；Cell Death and Differentiation 2009,1-12)、由局部缺血期间的氧化应激(Desgranges et al.；FASEB J.1999Apr；13(6):761-6)或者还在组织老化的情况下(Larramendy-Gozalo C,D et al.；J Gen Virol.2007,88:1062-7)。

在另一个治疗领域中，还观察到RGTA的其他作用，特别是在治疗疼痛和瘙痒中，并且本领域技术人员不能预见与组织修复或再生过程的联系，因为作用非常迅速，并因此不依赖花费长得多的时间进行的修复或再生过程。

已经描述了RGTA并用于修复病变的组织，特别是通过保护存在于病变部位处的生长因子和细胞通讯以及招募存在于受治疗的患者中的细胞。例如，出版物已证实RGTA对内源性干细胞如造血祖细胞或血源性干细胞的动员的作用(Albanes et al.，ExperimentalHematology 2009；37:1072-1083)或体外或体内间充质干细胞的生长、克隆形成、迁移和/或分化的作用。

在国际申请WO 2003/101201中已经设想了包含苄胺的RGTA与骨髓细胞用于治疗心肌梗死以增加侧支血管血管化的形成的用途。然而，该公开不包括实验，也没有任何科学结果。因此，包含在所述文献中的要素不能再现所描述的要素或设想任何治疗。特别地，文献Mullanghi et al.(Coronary；22:71)报道了RGTA与从骨髓同一天采集的间充质细胞共注射，并且报道了直接注射到狒狒的降支冠状动脉结扎后梗死区域与单独注射到该肌肉中的RGTA相比没有更多的功能效率，因此再现Yamauchi H et al.，FASEB J.2000(14):2133-4的观察结果，这表明单独的RGTA具有改善心肌梗死后的恢复的强大能力。因此，与单独使用RGTA相比，细胞和RGTA的共注射对于心肌梗死后的恢复没有提供另外的有益效果。换言之，在注射细胞和RGTA时没有观察到/显示出另外的有益效果。

文献还涉及旨在通过各种方法植入不同来源和不同性质的细胞以重新定植病变组织或功能受损组织的区域的许多细胞治疗研究。从所有这些研究中可以看出，获得植入到目标区域中的细胞的存活是极其困难的，并且甚至更难以获得空间的定植，并且被如此重新定植的器官或组织的功能随时间恢复甚至更难。这个问题仍然是一个尚未得到满意解决的真正挑战。

因此，真正需要的是找到能够改善组织病变的治疗和/或细胞治疗的效率的新的化合物和/或方法。

现有技术中描述了与骨替代生物材料混合的RGTA的应用(Billy et al.，专利US2006/0257449)。所述文献还设想将该(三钙)生物材料与干细胞而不是RGTA结合以试图促进骨替代物的植入和定植，但对可能的实现方式、步骤等没有给出解释或描述。此外，本公开不包括实验，也不包含任何科学结果。因此，所述文献中描述的要素及其教导不能实现骨替代生物材料和细胞的任何组合的复制或开发，或任何组合的任何应用。

许多病理状况，特别是由衰老引起的那些包括组织和/或细胞变性现象，例如阿尔茨海默氏病、黄斑变性和/或由生物现象如组织/细胞的氧化减少等引起的那些。

对于这些病理状况，且如上所述，现有技术中非常需要寻找有效的治疗，和/或特别是改善现有的治疗，特别是关于细胞治疗。

还有许多遗传性病理状况涉及特别是不良的组织和/或细胞功能，对于此，治疗几乎是不存在的或不是非常有效。对于这些病理状况，一种治疗途径包括细胞治疗。然而，这些治疗的效率受到质疑，特别是由于注射后细胞植入较弱和/或这些治疗的成本非常高。

因此，真实需要寻找一种新的组合物和治疗，其使得可以治疗组织病变，而不管它们的起源和/或提高已知组合物和/或细胞治疗的治疗效率，同时降低它们的成本。

发明内容

本发明的目的特别地为通过提供一种作为用于预防和/或治疗组织病变的药物的药物组合物来满足这些需要，所述组合物包含：

-下面通式(I)的生物相容性聚合物

AaXxYy(I)

其中：

A表示单体，

X表示-R₁COOR₂或-R₉(C＝O)R₁₀基团；

Y表示O-或N-磺酸酯基团，其对应于下式-R₃OSO₃R₄、-R₅NSO₃R₆、-R₇SO₃R₈中的一种，

其中：

R₁、R₃、R₅和R₉独立地表示可选地支化的和/或不饱和的且可选地包含一个或多个芳环的基于脂族烃的链，R₂、R₄、R₆和R₈独立地表示氢原子或阳离子，

R₇和R₁₀独立地表示键，或可选地支化的和/或不饱和的基于脂族烃的链，

“a”表示单体的数量，

“x”表示单体A由基团X的取代度，

“y”表示单体A由基团Y的取代度，和

-真核细胞。

有利地，本发明人已经令人惊讶地证明了、并且与现有技术的教导相反，如上所定义的通式(I)的生物相容性聚合物(在本文中也表示为RGTA)和细胞的组合使得二者可以制备或调节例如受体患者的组织和器官，并且促进外部细胞和/或器官和/或组织移植物例如在受体患者中的植入、扩增和定植。

具体地，本发明人已经令人惊讶地证实，结合细胞、器官、血小板提取物使用通式(I)的生物相容性聚合物有利地并且令人惊讶地使得可以显著改善由此治疗的组织和/或器官的受损功能的恢复，对患者有很大的益处。

此外，发明人已经证明，通式(I)的生物相容性聚合物与根据本发明的细胞的组合可以用于/应用于大量的病理状况/病变等。实际上，无论病变的/植入的或接枝的组织或器官，无论所使用的细胞，本发明可应用于例如如单独注射或与例如富含生长因子的血小板裂解物组合注射，或者例如注射纯化的生长因子，特别是对RGTA或硫酸类肝素具有亲和力的生长因子。

本发明人还令人惊讶地证明，关于治疗的组织的功能恢复所获得的效果大于通过单独植入或注射以下各项获得的效果：亦或单独的RGTA或单独的细胞亦或组织或器官或生物材料或血小板裂解物或纯生长因子。

本发明人还令人惊讶地和出乎意料地证明，用于给予组合物的给药方案、治疗方案有利地使得可以优化治疗效果并且还具有在受治疗的组织或器官的功能和愈合恢复中观察到的强协同作用。

观察到的结果更加出人意料，因为根据本发明使用的细胞的性质和来源可以具有与存在于其中可植入它们的组织或器官中的细胞的那些不同。令人惊讶地，根据本发明的组合物促进植入的细胞的定植达到例如观察到再次起作用的组织或器官的程度，尽管事实上这些植入的细胞可能具有不同的表型和不同的组织来源。此外，这不需要实验性地诱导已经归属于待定植的组织或器官的细胞的分化途径的多能干细胞或干细胞的出现。

本发明人令人惊讶地证明，使用根据本发明的RGTA使得可以获得新的和出乎意料的技术/治疗效果，即，特别是通过制备植入区来调理病变部位，并且获得的细胞植入/治疗性治疗的功效比单独使用RGTA和/或单独使用细胞时获得的那些更大，特别是关于细胞治疗的效率和/或细胞或组织或器官的植入能力。

因此，发明人已经令人惊讶地和出人意料地证明，本发明通过例如顺序给予，即，根据RGTA的给药方案，随后在一段时间范围之后，例如从几分钟至几天，通过给予已经选择的任何性质和/或来源的细胞，有利地使得可以出乎意料地促进这些移植物的植入或这些细胞的功能植入，而与它们的来源、它们的发育状态和制备方法无关，条件是在适当情况下控制与受体免疫系统有关的排斥情况(rejection aspect)。

此外，本发明人特别地在实施例中已经证明，本发明可以应用于且特别是能够由根据本发明的组合物治疗的病变，病变可以是任何类型的组织病变，与来源以及任何类型的组织或器官无关。特别地，本领域技术人员鉴于其中各种病变被有效治疗的以下实施例容易地理解，并且能够鉴于该知识外推到能够通过本发明被治疗的其他组织病变。

在本文件中，术语“组织病变”意在指本领域技术人员已知的哺乳动物的任何生物组织的任何病变。它可以例如是结缔组织、肌肉组织、神经组织、骨组织、软骨组织和/或上皮组织病变。它可以是例如本领域技术人员已知的任何哺乳动物器官或细胞器的任何病变。它可以是例如以下各项的病变：消化道组织，胃肠道组织，消化道消化和排泄系统，生殖道，生殖系统，视觉、嗅觉或听觉系统，感觉系统，循环和/或心血管系统，呼吸系统，肌肉系统或运动系统。它可以是例如胃组织病变，颊部病变，角膜病变，鼓膜病变，耳蜗病变，皮肤病变例如创伤、慢性创伤例如糖尿病创伤、溃疡性创伤、褥疮、皮肤烧伤、坏死性创伤，静脉病变，局部缺血性病变例如局部缺血性坏死，由梗死引起的病变例如心肌梗死，骨病变例如骨折，具有骨缺损的骨折、骨坏死(“骨不连接骨折”)、骨软骨病变、软骨病变，肌腱病变，手术病变，由手术程序引起的病变，由医疗处置例如放射治疗引起的病变，神经组织病变例如脑病变例如由肿瘤切除术引起的病变、脊髓病变、神经纤维病变例如运动和/或感觉系统病变，呼吸系统病变例如肺病变，循环系统病变例如动脉和/或血管的病变，消化道、肾、泌尿系统的病变。

在本文件中，术语单体意在指例如选自包括糖、酯、醇、氨基酸或核苷酸的组的单体。

在本文件中，构成式I的聚合物的基本要素的单体A可以相同或不同。

在本文件中，单体的连接使得可以形成聚合物骨架，例如聚酯、多元醇或多糖性质的聚合物骨架，或者核酸或蛋白质类型的聚合物骨架。

在本文件中，在聚酯之中，它们可以例如是生物合成的或化学合成的共聚物，例如脂族聚酯或天然来源的聚酯，例如聚羟基脂肪酸酯。

在本文件中，多糖及其衍生物可以是细菌、动物、真菌和/或植物来源的那些。它们可以是例如单链多糖，例如多聚葡萄糖，例如右旋糖酐、纤维素、β-葡聚糖或包含更复杂单元的其他单体，例如黄原胶，例如葡萄糖、甘露糖和葡糖醛酸，或者glucuronans和glucoglucuronan。

在本文件中，植物来源的多糖可以是单链的，例如纤维素(葡萄糖)、果胶(半乳糖醛酸)、岩藻聚糖或淀粉，或可以是更复杂的，例如海藻酸盐(古罗糖醛酸(galuronic)和甘露糖醛酸)。

在本文件中，真菌来源的多糖可以是例如steroglucan。

在本文件中，动物来源的多糖可以是例如甲壳素或壳聚糖(葡萄糖胺)。

式(I)中定义的单体A的数量“a”可以使得所述式(I)的聚合物的重量大于约2000道尔顿(其对应于10个葡萄糖单体)。式(I)中定义的单体A的数量“a”可以使得式(I)的所述聚合物的重量小于约2 000 000道尔顿(其对应于10 000个葡萄糖单体)。有利地，所述式(I)聚合物的重量可以为2至100k道尔顿。

在本文件中，在代表X的-R₁COOR₂基团中，R₁可以是C₁至C₆烷基，例如甲基、乙基、丁基、丙基或戊基，优选为甲基，而R₂可以是键、C₁至C₆烷基，例如甲基、乙基、丁基、丙基或戊基，或是R₂₁R₂₂基团其中R₂₁是阴离子而R₂₂选自碱金属的组的阳离子。

优选地，基团X是式-R₁COOR₂的基团，其中R₁为甲基-CH₂-，且R₂为R₂₁R₂₂基团，其中R₂₁为阴离子且R₂₂为选自碱金属的组的阳离子，优选地基团X为式-CH₂-COO^-的基团。

在本文件中，在代表X的-R₉(C＝O)R₁₀基团中，R₉可以是C₁至C₆烷基，例如甲基、乙基、丁基、丙基或戊基，优选为甲基，并且R₁₀可以是键，或C₁至C₆烷基，例如甲基、乙基、丁基、丙基、戊基或己基。

在本文件中，在对应于下式-R₃OSO₃R₄、-R₅NSO₃R₆和-R₇SO₃R₈中的一种并代表基团Y的基团中，R₃可以是键、C₁至C₆烷基，优选为甲基、乙基、丁基、丙基或戊基，例如甲基，R₅可以是键、C₁至C₆烷基，例如甲基、乙基、丁基、丙基或戊基，优选为甲基，R₇可以是键，C₁至C₆烷基，例如甲基、乙基、丁基、丙基或戊基，优选为甲基，并且R₄、R₆和R₈可以独立地为氢原子或阳离子M⁺，例如M⁺可以是碱金属。

优选地，基团Y是式-R₇SO₃R₈的基团，其中R₇是键，且R₈是选自包括锂、钠、钾、铷和铯的组的碱金属。优选地，基团Y是-SO₃ ^-Na⁺基团。

所有单体A被通式(I)中定义的基团Y的取代度“y”可以为30％至150％，且优选为约100％。

在本文件中，在上述取代度的定义中，术语“取代度“x”为100％”意在指本发明的聚合物的各个单体A统计学上含有基团X的事实。同样地，术语“取代度“y”为100％”意在指本发明的聚合物的各个单体统计学上含有基团Y的事实。大于100％的取代度反映各个单体统计学上具有多于一个所讨论类型的基团的事实；相反，小于100％的取代度反映各个单体统计学上具有少于一个所讨论类型的基团的事实。

聚合物还可以包含功能性化学基团，表示为Z，不同于X和Y。

在本文件中，基团Z可以是相同的或不同的，并且可以独立地选自包括氨基酸、脂肪酸、脂肪醇、神经酰胺或它们的衍生物或靶向核苷酸序列的组。

基团Z还可以表示活性剂，其可以是相同的或不同的。它们可以例如是治疗剂、诊断剂、抗炎剂、抗微生物剂、抗生素、生长因子、酶。

在本文件中，基团Z可以有利地为饱和或不饱和脂肪酸。它可以例如是选自包括以下各项的组的脂肪酸：乙酸、辛酸、癸酸、月桂酸(十二烷酸)、肉豆蔻酸(十四烷酸)、棕榈酸(十六烷酸)、硬脂酸(十八烷酸)、花生酸(二十烷酸)、山嵛酸(二十二烷酸)、木蜡酸(二十四烷酸)、虫蜡酸(二十六烷酸)、肉豆蔻脑酸(十四碳烯酸)、棕榈油酸(十六碳烯酸)、萨芬酸(sapienic acid)、油酸(十八碳烯酸)、反油酸、反式-异油酸、亚油酸、反亚油酸、α-亚麻酸、γ-亚麻酸、二高-γ-亚麻酸、花生四烯酸、二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸或二十二碳六烯酸。优选地，脂肪酸是乙酸。

在本文件中，基团Z可以有利地为选自包括以下各项的组的L或D系列的氨基酸：丙氨酸、天门冬胺酸，芳族链氨基酸例如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、甲状腺氨酸(thyroxine)或组氨酸。

有利地，基团Z可赋予聚合物另外的生物学或物理化学性质。例如，基团Z可以增加所述聚合物的溶解度或亲脂性，使得实现例如更好的组织扩散或渗透。

其中存在Z的聚合物对应于下式II：

Aa Xx Yy Zz

其中A、X、Y、a、x和y如上定义，且z表示由基团Z的取代度。

在本文件中，由“z”表示的基团Z的取代度可以为0至50％，优选等于30％。

基团X、Y和Z可以独立地与单体A键合和/或独立地彼此键合。当基团X、Y和Z中的至少一个独立地与不同于第一个的基团X、Y和Z键合时，所述基团X、Y或Z中的一种与单体A键合。

因此，基团Z可以直接共价键合至单体A或共价键合至基团X和/或Y。

在本文件中，相对于组合物的总重量，组合物可以包含以重量计为0.01微克至100毫克的浓度的生物相容性聚合物。例如，相对于组合物的总重量，组合物可包含以重量计为10微克至10毫克。

在本文件中，可以根据它的给予来配制和/或调整组合物。例如，对于静脉内或肌肉内给予，可以给予组合物以递送0.1至5mg/kg体重的剂量的生物相容性聚合物，或者对于口服给予，可以例如以每天2至5相等摄取量给予组合物，以例如1至500mg的每日总量的量，例如10μg至5mg/kg的生物相容性聚合物，例如10μg至5mg/kg，例如对于体重为100kg的成年人，持续几天到几星期。例如，对于颅内给予，它可以包括1至5ml的单次给予，或者在几天的时间内通过微型泵给予；组合物可以包含0.001至1mg.ml^-1的浓度的生物相容性聚合物，或者对于舌下给予，例如每日1至5ml，组合物可以包含0.1至100mg.ml^-1的浓度的生物相容性聚合物，或者对于区域(areal)给予，可以给予组合物以递送每千克体重所述聚合物的剂量为0.1至5mg的生物相容性聚合物。

例如，对于口服给予，聚合物可以在溶液中，例如在水中或在本领域技术人员已知的适合口服给予的任何溶剂中。组合物也可以是片剂、凝胶胶囊形式或与本领域技术人员已知的口服摄取相容的任何其他形式。它可以是体积为10至50ml的水性溶液，其包含例如在溶液中浓度为0.1mg.ml^-1的聚合物。例如，对于全身给予，聚合物可以例如为生理盐水中的溶液形式，例如注射质量的生理盐水或与注射剂相容的任何其他形式，例如本领域技术人员已知的含葡萄糖和/或其他合适的赋形剂的溶液，例如包含多糖，例如肝素。例如，对于静脉内(IV)和/或肌内(IM)给予，聚合物的浓度可以为0.1至5mg.kg^-1，优选为1至2.5mg.kg^-1。

根据本发明，组合物还可以包含生长因子。它们可以是本领域技术人员已知的能够促进或刺激细胞生长的任何生长因子。它们可以是例如选自包括以下各项的组的生长因子：成纤维细胞生长因子(FGF)例如FGF1或FGF2，血管内皮生长因子(VEGF)，血小板衍生生长因子(PDGF)或它们的混合物。根据本发明，组合物可以包含10ng.ml^-1至100μg.ml^-1的生长因子。

根据本发明，组合物还可以包含粗制的或富含生长因子的血小板提取物或裂解物。它可以是例如本领域技术人员已知的和/或可商购的任何血小板提取物或裂解物。

在本文件中，术语“真核细胞”意在指本领域技术人员已知的任何真核细胞。它可以是例如哺乳动物真核细胞，例如动物或人真核细胞。它可以是例如任何真核细胞而无论其分化阶段，例如选自包括以下各项的组的细胞：成熟或胚胎真核细胞、胚胎干细胞和成熟干细胞。它们可以是例如来自脐带血、来自骨髓细胞、来自脂肪组织细胞、来自间充质细胞的真核细胞。它们也可以是来自移植物和/或器官的细胞组。

真核细胞可以是例如相对于个体是异源的、同源的或自体的细胞。优选地，细胞是自体细胞。

它还可以是多能干细胞或全能干细胞或归属于分化途径的细胞，例如间充质干细胞。它还可以是多能干细胞或全能干细胞，除胚胎干细胞之外。

有利地，当细胞是自体细胞时，由于监管、安全性、可行性、效率和经济原因，根据本发明的组合物可以是优选的。

有利地，当细胞是自体时，优选将它们从个体中分离出来，并在切除和分离后24小时内用于根据本发明的组合物中和/或用于治疗中而无需其他添加。有利地，这种单一给予使得可以克服和符合监管要求/限制。

在本文件中，包含在组合物中的细胞的量可以是1至5×10⁷个细胞。

有利地，本发明人已经证明，治疗与细胞类型、其来源以及用于选择、扩增、调节和修饰细胞的手段无关。特别地，本发明人已经令人惊讶地证明实，本发明因此适用于所有细胞，无论其来源和导致进行细胞分化或去分化途径的选择操作，只要给予RGTA有利地使它可以、特别是当它与细胞组合给予时，产生/形成适合于细胞的微环境，有利地使得能够实现RGTA和细胞之间协同合作，使得可以增加细胞植入。

根据本发明，当组合物包含移植物或移植器官或可植入材料时，聚合物和移植物或器官或可植入材料的给予可以是同时的。例如，可以例如通过将其浸泡在含有生物聚合物的溶液中，或通过灌注，或通过喷雾或本领域技术人员已知的任何其他合适的方法来浸渍待移植的器官或可植入材料。在可植入材料的情况下，聚合物可以早在制造可植入材料时加入，有利地使得能够实现预孵育或浸渍。

根据本发明，浸渍时间可以是几分钟至几小时，例如1分钟至18小时、5分钟至16小时、过夜。

有利地，当将移植物或器官浸渍大于5分钟，例如16小时的时间时，浸渍还使得可以提高移植体植入的效率。这是因为发明人惊讶地证实，用于保存移植物和/或器官的溶液中聚合物的存在有利地具有保护性和抗凋亡作用。

有利地，浸渍有聚合物的移植物、器官或材料可以在再植入或移植之前或之后接受生长因子或血小板提取物的给予，以促进在植入时或之后给予的细胞的定植。

在本文件中，术语“药物组合物”意在指本领域技术人员已知的任何形式的药物组合物。在本文件中，药物组合物可以例如是可注射溶液，例如用于局部或全身注射，例如在生理盐水中，在可注射葡萄糖溶液中，在如葡聚糖的赋形剂存在下，例如以本领域技术人员已知的浓度，例如从1微克到几毫克/ml。

药物组合物可以例如是意在用于口服给予的药物，其选自包括以下各项的组：液体制剂、口腔泡腾剂量方案形式、口服粉末、多颗粒系统和口分散盖仑制剂形式。

例如，当药物组合物用于口服给予时，它可以是选自包括溶液、糖浆、悬浮液和乳液的组的液体制剂的形式。当药物组合物为口服泡腾剂量方案形式时，它可以是选自包括片剂、颗粒剂和粉末剂的组的形式。当药物组合物为口服粉末或多颗粒系统形式时，它可以是选自包括珠粒剂、颗粒剂、小片剂和微颗粒剂的组的形式。当药物组合物为口腔分散剂型方案形式时，它可以选自包括以下各项的组的形式：口腔分散片剂、冻干薄片剂、薄膜剂、咀嚼片剂、片剂、胶囊剂或医用口香糖。

根据本发明，药物组合物可以是用于口服给予的药物组合物，例如颊部和/或舌下给予，例如选自包括颊部或舌下片剂、锭剂、滴剂和喷雾溶液的组。

根据本发明，药物组合物可以是用于局部、透皮给予的药物组合物，例如选自包括软膏剂、乳膏剂、凝胶剂、洗剂、贴剂和泡沫剂的组。

根据本发明，药物组合物可以是用于鼻部给予的药物组合物，例如选自包括滴鼻剂、鼻喷雾剂和鼻用粉末剂的组。

根据本发明，药物组合物可以是用于肠胃外给予的药物组合物，例如皮下、肌内、静脉内或鞘内给予。

根据所使用的盖仑制剂，本发明的组合物还可以包含至少一种其他活性成分，特别是另一种治疗活性成分，例如用于同时、分开或顺序地随时间使用。这种其他成分可以例如是用于例如治疗可以在患有组织病变的患者中发展的机会性疾病的活性成分。

在本文件中，生物相容性聚合物和细胞的给予可以是同时的、连续的或伴随的。

根据本发明，至少一种给予可以口服或注射进行。两种给予可以用相同的方式或不同的方式进行。例如，生物相容性聚合物和细胞的给予可以通过注射进行，生物相容性聚合物的给予可以口服进行而细胞可以通过局部注射进行。给予还可以取决于病变的部位。

根据本发明，可以在首次给予所述生物相容性聚合物5分钟至1周之后，进行真核细胞的使用，特别是其给予。

在移植组织或器官或使用预浸渍聚合物的可植入材料的情况下，可在植入之前或恰好之后，例如在一小时内进行细胞的给予。

根据本发明，组合物可以例如每天、每天两次或每周给予。例如，它可以是每天给予一次、每天两次或更多次。

根据本发明，组合物可以例如在1天至3个月的时间内给予，例如2个月。例如，组合物可以每15天的给予频率在3个月的时间内给予。

根据本发明，生物聚合物可以例如在1天至3个月的时间内给予，例如2个月，例如频率为每天一次，并且给予的真核细胞可以在相同或不同的时间内给予，例如从1天到3个月的时间段，以每周的频率。

根据本发明，当聚合物的给予和细胞的给予是连续时，每次给予的剂量方案可以是聚合物的给予，然后是细胞的给予。例如，可以在给予聚合物后1分钟至24小时，给予聚合物后30分钟至12小时，给予聚合物后45分钟至6小时或给予聚合物后1小时后给予细胞。

根据本发明，组合物还可以包含血小板提取物。它可以是例如本领域技术人员已知的适合给予给哺乳动物的任何血小板提取物。它可以是例如可商购的血小板提取物，或根据文献D R Knighton et al.，Ann Surg.Sep 1986；204(3):322-330“Classificationand treatment of chronic nonhealing wounds.Successful treatment withautologous platelet-derived wound healing factors(PDWHF)”或在文献Everts，P.A.Met al.，Autologous platelet gel growth factor release and leukocyte kineticsusing three devices，Transf.Med.,2006,16(5),363-368或“Is Use of AutologousPlatelet-Rich Plasma Gels in Gynecologic,Cardiac,and General,ReconstructiveSurgery Beneficial？”Pharmaceutical Biotechnology,2012,Vol.13No.13)获得的血小板提取物。它可以是与富含生长因子活性的血小板裂解物对应的血小板提取物，其可被例如局部给予，其可被注射或可被沉积在不同的载体中，例如凝胶、乳膏剂、喷雾剂之中或之上和/或在病变的组织之中。根据本发明，血小板提取物可以是相对于待治疗个体为自体或异源的提取物。优选地，血小板提取物是自体提取物。它可以是例如已经浓缩的血小板提取物和/或裂解物，例如通过本领域技术人员已知的和/或可商购的方法和/或试剂盒。

根据本发明，组合物可以包含0.1ml至100ml的血小板提取物和/或裂解物。

有利地，血小板提取物包含促进形成有利于细胞植入的“环境”的形成的生长因子。这些因子可以添加到血小板提取物中，或者单独使用而没有提取物。根据本发明，可以添加FGF1或FGF2或VEGF或TGFβ1或BMP因子或其他生长因子，优选至少一种选自包含因子FGF1或FGF2或VEGF或TGFβ1或BMP的组的因子。根据本发明，可以以10ng至100μg/ml的提取物的浓度添加包含在血小板提取物中的因子。

根据本发明，在给予组合物之前，可以例如通过重新开放病灶，通过刮削或通过用解剖刀进行机械去除来“再激活”病变的组织。例如，可以在旧创伤例如愈合的(consolidated)骨折、旧疤痕或慢性创伤上进行再激活。

本发明的主题还是作为用于预防和/或治疗组织病变的药物的药物组合物或皮肤病学组合物，所述组合物包含式AaXxYy或AaXxYyZz的生物聚合物和至少一种血小板提取物。

根据本发明，血小板提取物是如上所定义的。

根据本发明，式AaXxYy或AaXxYyZz的生物聚合物是如上所定义的。

根据本发明，药物组合物或皮肤病学组合物是如上所定义的。

根据本发明，生物相容性聚合物的给予频率可以是如上所定义的。

根据本发明，生物相容性聚合物的给予方法和/或途径可以是如上所定义的。

本发明的主题还是作为用于预防和/或治疗组织病变的药物的药物组合物或皮肤病学组合物，所述组合物包含式AaXxYy或AaXxYyZz的生物聚合物和至少一种生长因子。

根据本发明，生长因子是如上所定义的。根据本发明，式AaXxYy或AaXxYyZz的生物聚合物是如上所定义的。

药物组合物或皮肤病学组合物是如上所定义的。

根据本发明，生物相容性聚合物的给予频率可以是如上所定义的。

根据本发明，生物相容性聚合物的给予方法和/或途径可以是如上所定义的。

本发明还涉及一种用于治疗患有组织病变的患者的方法，其包括以任何顺序的以下步骤：

i.给予至少一种生物相容性聚合物；和

ii.给予至少一种真核细胞，

其中给予是伴随的、连续的或交替的。

生物相容性聚合物是如上所定义的。

真核细胞是如上所定义的。

根据本发明，患者可以是任何哺乳动物。它可以是例如动物或人类。

根据本发明，给予的真核细胞可以是相对于所述患者是异源的或同源的细胞。

根据本发明，生物相容性聚合物的给予方法和/或途径可以是如上所定义的。

根据本发明，细胞的给予方法和/或途径可以是如上所定义的。

根据本发明，生物相容性聚合物的给予频率可以是如上所定义的。

根据本发明，真核细胞的给予频率可以是如上所定义的。

根据本发明，当生物相容性聚合物的给予和细胞的给予是连续时，每次给予的剂量方案可以是生物相容性聚合物的给予，然后是细胞的给予。例如，可以在给予生物相容性聚合物后1分钟至48小时，给予聚合物后30分钟至12小时，给予聚合物后45分钟至6小时或给予聚合物后1小时后给予细胞。

有利地，真核细胞是间充质成体干细胞。

本发明还涉及一种用于治疗患有组织病变的患者的方法，其包括以任何顺序的以下步骤：

i.给予至少一种生物相容性聚合物；和

ii.给予至少一种血小板提取物和/或裂解物，

其中给予是伴随的、连续的或交替的。

生物相容性聚合物是如上所定义的。

血小板提取物和/或裂解物是如上所定义的。

根据本发明，患者可以是任何哺乳动物。它可以是例如动物或人类。

根据本发明，生物相容性聚合物的给予方法和/或途径可以是如上所定义的。

根据本发明，生物相容性聚合物的给予频率可以是如上所定义的。

根据本发明，当生物相容性聚合物的给予和血小板提取物和/或裂解物的给予是连续时，每次给予的剂量方案可以是生物相容性聚合物的给予，然后是血小板提取物和/或裂解物的给予。例如，血小板提取物和/或裂解物可以立即给予，即伴随地，或者在给予之后几分钟，优选为10分钟至几小时，例如1分钟至120分钟，优选为10至60分钟，例如局部给予或注射生物相容性聚合物之后，例如在口服给予生物相容性聚合物之后几小时，优选为4小时至24小时之后。

本发明还涉及一种用于治疗患有组织病变的患者的方法，其包括以任何顺序的以下步骤：

i.给予至少一种生物相容性聚合物；和

ii.给予至少一种生长因子，

其中给予是伴随的、连续的或交替的。

生物相容性聚合物是如上所定义的。

生长因子是如上所定义的。

根据本发明，患者可以是任何哺乳动物。它可以是例如动物或人类。

根据本发明，生物相容性聚合物的给予方法和/或途径可以是如上所定义的。

根据本发明，生物相容性聚合物的给予频率可以是如上所定义的。

根据本发明，当生物相容性聚合物的给予和所述至少一种生长因子的给予是连续时，每次给予的剂量方案可以是生物相容性聚合物的给予，然后是所述至少一种生长因子的给予。例如，所述至少一种生长因子可以立即给予，即伴随地，或者例如为1分钟至几小时，例如1分钟至120分钟，优选为10至60分钟，例如局部给予或注射生物相容性聚合物之后，在口服给予生物相容性聚合物之后几小时，优选为4小时至24小时之后。

换言之，尽管在本说明书中涉及组合物，但应当清楚地理解，组合物的每种化合物可以与其他化合物伴随给予(例如，以单一组合物或以两种组合物的形式，这些组合物中的每一种包含一种或多种上述组分，每种化合物或组合物(多种)的给予方法可以相同或不同)，或彼此独立，例如相继地，例如独立给予生物相容性聚合物以及独立给予真核细胞，这些给予是以伴随或相继或以交替方式、以上述顺序或另一种顺序在一个和相同患者上进行的。这些不同的给予可以彼此独立地或以联系的方式(组合物或共同给予)，通过相同或不同的给予方式(注射、摄食、局部应用等)进行，一周一次或多次、持续一个或多个连续或不连续周。

本发明的主题还是用于预防和/或治疗组织病变的药物试剂盒，其包含：

i.生物相容性聚合物，和

ii.至少一种真核细胞。

生物相容性聚合物是如上所定义的。

真核细胞是如上所定义的。

本发明的主题还是用于预防和/或治疗组织病变的药物试剂盒，其包含：

i.生物相容性聚合物，和

ii.至少一种血小板提取物和/或裂解物。

生物相容性聚合物是如上所定义的。

提取物和/或裂解物是如上所定义的。

本发明的主题还是药物组合物的用途，其包含：

i.生物相容性聚合物，和

ii.至少一种用于生产用于治疗组织病变的药物的生长因子。

生物相容性聚合物是如上所定义的。

生长因子是如上所定义的。

在该实施方案中，术语“药物”意在指如上定义的药物组合物。

有利地，本发明人已经证明，在几分钟至几天的一段时间之后，不管它们的性质和来源，RGTA随后是细胞的相继给予有利地和出乎意料地使得有可能促进所述细胞的功能植入或植入物移植的程度。此外，本发明人还证明，无论来源、发育阶段和/或所用细胞的制备方法，都可以观察到上述优点。

因此，有利地，本发明为复杂的技术问题提供了一般和简单的答案，并且在现有技术中对其存在真正和持续的需求。在下面的实施例中以非限制性方式特别说明它，对于本领域技术人员而言，可以容易地外推到任何类型的组织病变，不管其来源，并且还外推到任何类型的组织或器官。

具体地，本发明人已经证明，本发明可以推广到所有组织病变，特别是凭借组织病变的某些共同特征，包括病变部位的水平的细胞和细胞外基质的破坏。

本发明的主题还是用于制备移植物的离体方法，其包括将待移植的移植物和/或器官浸渍在包含生物相容性聚合物的溶液中。

本发明的主题还是如上定义的式AaXxYy或AaXxYyZz的生物聚合物用于离体制备移植物和/或器官的用途。

生物相容性聚合物是如上所定义的。

根据本发明，浸渍可以通过本领域技术人员已知的任何方法进行。它可以例如包括浸泡器官和/或将其浸泡在包含生物聚合物的溶液中，或灌注或喷雾。

本发明的主题还是如上所定义的式AaXxYy或AaXxYyZz的生物聚合物在体外和/或离体制备可植入生物材料中的用途。

例如，对于可植入的生物材料，可以例如通过在生产生物材料之后的浸渍来添加生物相容性聚合物，例如用于组织或器官。例如还可以在从一开始生产生物材料期间就添加它，例如可以按照与3D打印相似的方式的连续层形式添加下面定义的式AaXxYy或AaXxYyZz的生物聚合物。

在本文件中，术语“可植入的生物材料”意在指本领域技术人员已知和/或可商购的任何可植入的生物材料。可植入的生物材料例如可以是相容的可植入材料，例如任何性质的可植入材料，其为可生物降解的、交联的或非交联的，优选为可定植的。可植入的生物材料可以是基于蛋白质例如胶原蛋白、纤维蛋白，多糖例如葡聚糖、甲壳素、透明质酸、海藻酸盐、纤维素及其衍生物的交联的可植入生物材料，和基于乙醇酸、乳酸或苹果酸，或基于例如可通过温度可控的聚合，或通过酶或辐射或其他方法进行液体-凝胶转变的聚合物的可生物降解和生物相容性共聚物。它可以是例如基于聚己内酯、聚氨酯、聚四氟乙烯硅酮或基于无机盐例如磷酸钙或羟基磷灰石的聚合物。可植入的生物材料可以是例如基于以下各项或由以下各项制成的材料：陶瓷、金属例如铝、钢、钛和/或它们的合金。有利地，当材料是基于陶瓷和/或金属或由陶瓷和/或金属制成的材料时，浸渍使得可以覆盖材料的外表面；浸渍可以有利地通过喷雾进行。

根据本发明，浸渍溶液可以包含浓度为0.1μg.ml^-1至1mg.ml^-1的是如上所定义的生物相容性聚合物。

根据本发明，浸渍时间可以是5分钟至24小时。有利地，浸渍时间可以取决于可植入移植物和/或器官和/或材料的结构。

有利地，浸渍还使得可以改善移植物植入的效率。实际上，发明人已经令人惊讶地证实，在用于保存移植物和/或器官的溶液中聚合物的存在有利地具有保护和抗凋亡作用。

如上所述，在使用生物相容性聚合物浸渍之后，通过浸渍生长因子和/或血小板提取物可以有利地完成浸渍。根据本发明，生长因子和/或血小板提取物浸渍时间可以是5分钟至24小时。

浸渍可以有利地通过离体和/或体外浸渍和/或在用生物相容性聚合物浸渍的可植入生物材料上沉积细胞来完成。

根据本发明，细胞是如上所定义的。

根据本发明，用于浸渍和/或沉积细胞的溶液可以包含几千至几百万个细胞的浓度，优选为10 000至1 000 000个细胞。

根据本发明，离体和/或体外浸渍和/或沉积细胞的时间可以为5分钟至24小时。

在本文件中，可以通过本领域技术人员已知的任何合适的方法进行在用生物相容性聚合物浸渍的可植入生物材料上浸渍和/或沉积细胞。

此外，根据本发明，在用生物相容性聚合物浸渍和/或离体和/或体外浸渍或沉积细胞之后，可以有利地通过浸渍至少一种生长因子完成可植入生物材料的浸渍。

根据本发明，可以通过本领域技术人员已知的任何合适的方法进行在用至少一种生长因子浸渍的可植入生物材料上的浸渍。

根据本发明，生长因子是如上所定义的。

根据本发明，用于浸渍至少一种生长因子的溶液可以包含浓度为10ng/ml至100μg/ml的生长因子。

根据本发明，血小板提取物和/或血小板裂解物是如上所定义的。它可以是例如浓缩的血小板提取物，例如5至100ml的血液，通过例如使用本领域技术人员已知的和可商购的血小板浓缩试剂盒，例如来自Curasan(注册商标)、Plateltex(注册商标)、GPS(注册商标)II和RegenLab(注册商标)的试剂盒。

根据本发明，浸渍溶液可以包含浓度为0.1至6ml的血小板提取物。

本领域技术人员经阅读由附图示出并且通过例示的方式给出的下面的实施例可以进一步得到其他优点。

具体实施方式

实施例

实施例1：RGTA的制备和给予方法：

在现有技术中广泛描述了RGTA合成，例如在标题为-“PROCEDE DE SULFONATIONDE COMPOSES COMPRENANT DES GROUPEMENTS HYDROXYLES(OH)LIBRES OU DES AMINESPRIMAIRES OU SECONDAIRES”[“PROCESS FOR SULFONATION OF COMPOUNDS COMPRISINGFREE HYDROXYL(OH)GROUPS OR PRIMARY OR SECONDARY AMINES”]的专利中以及在参考文献：Yasunori I.et al.，Biomaterials 2011,32:769e776)和Petit E.et al.，Biomacromolecules.2004 Mar-Apr；5(2):445-52中。

在下面的实施例中，使用了几种已知和描述的RGTA，其中OTR4120(在Khammari-Chebbi et al.,J Fr Ophtalmol.2008May；31(5):465-71中描述的)和OTR4131(在Frescaline G.et al.,Tissue Eng Part A.2013Jul；19(13-14):1641-53.doi:10.1089/ten.TEA.2012.0377中描述的)是可商购的。此外，化合物OTR4131是包含作为脂肪酸的Z基团的化合物，即在Virginie Coudry et al.，Long-Term Follow-up of SuperficialDigital Flexor Tendonitis Treated by a Single Intralesional Injection of aReGeneraTing Agent in 51Horses Journal of Equine Veterinary Science 34(2014)1357-1360中描述的乙酸，以及在美国专利7 998 922和美国专利8 790 631中描述的其中Z为氨基酸如苯丙氨酸的化合物也用于下面的实施例中。

在下面的实施例中，如上所述进行给予。换言之，当RGTA不与细胞混合成单一溶液时，根据对于该化合物已知的给予方法给予所述RGTA。

有利地，当通过独立的组合物给予RGTA时，获得的效果之一可以是待治疗的组织或器官的制备，以通过选择的细胞促进植入、定植和扩增，这允许凭借RGTA和细胞的组合更有效的和协同的组织修复和再生。

给予频率可以是单次或每周或十五天甚至每月一次或重复，很少持续几个月的总时间，这取决于定植的成功和所需的细胞注射/给予数、植入前制备生态位(niche)所需的时间。

给予的RGTA的浓度和剂量取决于局部或全身给予形式、频率、待治疗的组织、器官或区域，以及病变体积或表面积。

在下面的实施例中，当口服进行给予时，RGTA可以是水溶液形式或任何其他口服呈现形式的形式，但还可以是片剂、凝胶胶囊剂的形式或与口服摄取相容的任何其他形式。此外，有利地，口服给予的RGTA表现出对酸和消化液降解的显著抗性。有利地，由于产品没有味道并且完全可溶于水，因此优选的摄取量为10至25ml的体积的水溶液形式，且浓度为0.1mg.ml^-1，使得每次摄取的量为1至2.5mg，每天2至5次。在大多数实施例中，这些摄取量是在早晨饭前进和在晚上睡觉时，患者体重为50到100kg的范围内，剂量和频率可能本身也是变化的；因此总的来说，每天的摄取量在1至500毫克/天。这种给予的时间可以是几个月，而没有观察到不良反应。特别地，在大于一年的时间内，25毫克/天的个体摄取量不会引起任何损害，也不会引起明显的副作用。

在用细胞治疗消化道以修复和再生病变的情况下，可以有利地减少RGTA的量。这是因为RGTA分子可以有利地直接与病变的组织重新组装，并且例如重新创造生态位，有利地允许更好地植入细胞，并且在适当的情况下使得可以促进它们的增殖。消化道治疗期间使用的剂量可以是例如每天100μg.ml^-1下的1至50ml。它们可以是例如与文献Meddahi etal.，J Biomed Mater Res 60:497-501 2002中描述的例如用于治疗胃溃疡或消化性溃疡相同或类似的剂量，与文献Alexakis et al.，Gut 2004；53：85-90中描述的用于治疗克罗恩氏病相同或类似的剂量，或与文献Alexakis et al.，FASEB J.2001,15,1546-1554中描述的用于辐照后病变的组织相同或类似的剂量。

在下面的实施例中，当通过全身注射进行给予时，RGTA优选为可注射量的生理盐水的溶液形式或与注射相容的任何其他形式，特别地具有葡萄糖的溶液或通常具有多糖如肝素的其他赋形剂或与具有其他性质的治疗产品混合的任何其他形式，条件是已评估与其他活性成分相互作用的风险。以为0.1至5mg.kg^-1，优选为1至2.5mg.ml^-1的浓度静脉内(IV)或肌内(IM)使用RGTA。对于这种注射途径，注射可以是单次、每日或每周注射。

在下面的实施例中，当可能时，在病变组织之中或附近的局部给予是优选的。具体地，这种给予途径优选针对粘膜，例如颊、阴道、尿道、具有内窥镜血管或心脏通路的消化道粘膜，和/或在其中通路更加困难但可以直接到达的区域如骨髓、视网膜周区域、心室内区域、肺气道的区域中或在手术过程中打开直接通路或使用导管、针头或合适内窥镜直接通过其他组织或器官。

在植入分离的细胞或薄片形式的细胞或者浸渍在作为用于现有或未来细胞定植的载体的植入材料中的细胞的情况下，还可以喷雾剂形式将RGTA给予在组织表面上。

关于气道，还可以设想通过吸入的给予。

关于消化道或子宫肌或韧带的粘膜和/或壁，当可及时直肠或阴道途径是优选的。

对于眼部组织的治疗，优选的给予形式是例如洗眼水形式，例如用于治疗角膜，通过跨角膜注射例如在后弹力层膜的治疗中，在覆盖眼球基底的组织的治疗中，例如用于治疗视力缺陷，或者例如用于治疗与听力相关的细胞病变，例如用于植入耳蜗纤毛细胞。

在这些实施例中，局部给予或注射可以是单次的、每天的或每周的，然后剂量与病变的表面积或体积相关。特别地，在实施例中，RGTA浓度优选为100μg/ml，这是优选的浓度，并且选择使用的体积以覆盖病变表面积或浸渍病变体积。因此，向组织或器官或部位病灶周注射0.1至0.5ml的RGTA的部位使得能够以5至100倍更大的体积浸渍组织。在表面应用或喷雾剂形式的应用中，在RGTA通过吸附渗透时，病变区域的覆盖度是足够的。因此，在离病变为5cm的距离处，每140ml的三至四次“喷雾剂”足以浸渍10cm²的表面积，或者可以将几毫升的乳膏剂或凝胶剂或软膏剂展开在病灶上或病灶附近，从而提供RGTA的可及。乳膏剂、软膏剂、凝胶剂、乳剂、泡沫剂、乳液剂、粉末糊剂等的盖仑形式是本领域技术人员已知的那些，并由于它们与多糖如透明质酸相容的亲水性和湿润性而优选选择。

在实施例中，所使用的RGTA的另一种给予方法是浸渍组织，例如在组织或器官的移植的情况中，组织或器官例如肾、肝、心脏、肺、皮肤、角膜、鼓膜、肌肉、神经、肌腱、韧带、骨骼、血管或肠、结肠、在吻合区和在植入物二者中、膀胱等，该列表并非穷举的。在可用于所有组织和移植物的该实施方案中，待移植的器官，例如可以通过将它浸入在RGTA的溶液中、或通过灌注、或通过喷雾或本领域技术人员已知的任何其他方法被浸渍。有利地，如上所述，组织的浸渍有利地使得可以重建组织微环境。实际上，RGTA有利地特异性结合在病变后可用的并且通过移植物的收获或移植受体的制备而诱导的肝素结合位点。有利地，这种结合使得可以重新创建促进被细胞定植的生态位。RGTA的优选浓度为0.01至100微克(mg)/ml。浸渍时间短，因为几分钟就足够了。有利地，几小时或者一天或几天的浸渍使得可以简化该操作，因为可以将RGTA加入到防腐溶液中，并且可以被证明是现有技术中描述的保护性和抗凋亡剂(Barritault D.,Caruelle J-P.BIP121532,“POLYMERES BIOCOMPATIBLES,LEUR PROCEDE DE PREPARATION ET LES COMPOSITIONS LES CONTENANT”[“BIOCOMPATIBLEPOLYMERS,PROCESS FOR PREPARING SAME AND COMPOSITIONS CONTAINING SAME”]；和YueX-L,Lehri S,Li P,Barbier-Chassefière V,Petit V,Huang Q-F,Albanese P,Barritault D,Caruelle J-P,Papy-Garcia D and Morin C.，Insights on a new pathof pre-mitochondrial apoptosis regulation by a glycosaminoglycan mimetic.)；Yue X-L and al.，Cell Death and Differentiation),2009,1-12)。然后视情况而定，将组织暴露于用期望的特异性的细胞富集的溶液或悬浮液，这在植入之前或之后。可能的是将富含生长因子的血小板提取物或裂解物添加到该技术。

在植入之前或之后，将自体细胞与移植物一起加入，有利地使得可以促进宿主-移植物结合区的定植并促进移植物植入。这种方法允许移植物植入，防止坏死并增加功能恢复。

在实施例中，在给予RGTA之后单独地或与RGTA一起给予小板提取物。在这种情况下，用RGTA/PRP提取物比例制备混合物，使得在凝血酶存在下或者在100mg的RGTA下放置从悬浮在1ml的生理盐水中的10⁹个血小板获得的血小板裂解物。在血小板脱粒结束时，以低速离心溶液。然后，将含有血小板因子和RGTA的上清液给予在病变部位上。

在另一个实施方案中，将单独的RGTA或与血小板提取物(PRP)或分离的因子混合的RGTA与治疗细胞一起注入。

在这些实施例中，最迟在第一次给予细胞时进行RGTA的给予，或者优选在几小时或几天之前进行。因此，在口服摄取RGTA的情况下，观察到细胞治疗前一周一次或多次每日摄取增加了最终的组织再生结果，然后优选的剂量是在早晨饭前和在晚上睡觉时以100mg/ml饮用25ml的RGTA OTR4120持续至少一周。当给予IV或局部注射RGTA时，细胞治疗可以在给予RGTA后一小时内进行。

在下面描述的实施例中，细胞是自体的，并且优选在获取它们的同一天给予。

实施例2：在小鼠模型中给予RGTA和间充质干细胞(MSC)治疗组织病变的实施例

在本实施例中，所使用的小鼠是来自Charles River的70只10周龄雌性(C57/Bl6)小鼠，被分成7组，每组10只小鼠，并对应于现有技术中公认的小鼠模型。

使用直径6mm的打孔凿(临床上用于活组织检查)在小鼠背部制造皮肤创伤，然后将创伤暴露于空气。每只动物制造四处创伤。

所使用的聚合物是OTR4120，并且在两个(直径上相对的)点处以100μl按25微升(μl)的溶液的比例通过皮下(SC)注射给予它。将根据例如在“A protocol for isolationand culture of mesenchymal stem cells from mouse bone marrow”,Soleimani M,Nadri S.Nat Protoc.2009；4(1):102-6中描述的那些的常规方案分离的来自骨髓(胫骨)的间充质干细胞(MSC)以1×10⁶个细胞/ml的浓度悬浮于磷酸盐缓冲盐水PBS中，并在不同时间在两个点(对称于，正交于RGTA的那些)处以每个创伤50μl的2次注射的比例注射，然后在损伤后的第3、第5、第7和第10天测量创伤。

在实验期间，对于每只小鼠，制造几个创伤，并在以下之间进行比较：

-在直径上相对于用于RGTA的创伤的两次注射之间，

-在直径上相对于用于MSC的创伤的两次注射之间，和

-在联合RGTA和MSC的4个轴节点处的4次注射之间。

根据按照上述方法给予的组合物限定各个分组的小鼠，并在下面详细给出：

-第1组：对照(安慰剂)：创伤/病变后15分钟内给予生理盐水。

-第2组：给予MSC：在损伤后24小时，在与RGTA注射部位相对的2个对称点处每次给予100万个MSC。

-第3组：损伤后给予RGTA。

-第4组：给予与MSC混合的RGTA(共注射的)。

-第5组：损伤后给予RGTA，随后在5分钟后给予MSC。

-第6组：损伤后给予RGTA，随后在6小时后给予MSC。

-第7组：损伤后给予RGTA，随后在12小时后给予MSC。

-第8组：损伤后给予RGTA，随后在24小时后给予MSC。

下表总结了关于根据治疗在每只动物上以％计测量的创伤闭合动力学的结果。在时间零时，对于每只动物病变的表面积定义为100％，当创伤闭合时该值等于0％。

表1：创伤作为时间的函数的变化

表1表明，MSC和RGTA的给予使得可以改善组织修复，并且特别地使得可以显著加速愈合。具体地，在RGTA之后24小时给予细胞允许创伤的闭合，其比使用单独的RGTA或单独的MSC获得的结果好得多。

使用源自相同窝的小鼠的脂肪细胞的细胞获得可比较的效果。

在临床实践中观察到的本发明的实施例

如下所述，在临床实践中进行的许多实施例说明了本发明的效果。处于其商业形式的OTR4120或的RGTA产品很容易获得。另一方面，对象化(objectification)是不可能的，并且只有临床观察结果记录了本发明的效果。

实施例3：在慢性创伤愈合中用RGTA和自体间充质干细胞(MSC)联合治疗的作用

在这些实施例中，具有不同病因的各种类型的慢性创伤如糖尿病性溃疡、静脉性溃疡、局部缺血性溃疡、褥疮、烧伤和移植物植入的患者已经历数月的治疗失败。已经尝试了几种治疗方法，但没有成功，包括根据制造商的建议使用(RGTA OTR4120)进行局部治疗。

该临床医生还用于将RGTA技术与血小板提取物组合，或使用通过从自愿患者的胸骨采集的5ml骨髓获得的自体MSC进行细胞治疗。将已经按照针对MSC描述的技术经过过滤并通过离心来富集的样品悬浮在1.5ml的生理盐水中，并将细胞溶液皮下注射到创伤的边缘中并且也在创伤的中心中。在溃疡轮廓周围总共约十二次注射0.1ml(并根据图像将溃疡比作钟的方向(quarter)并在每个小时的位置注射)。根据该临床医生，单独使用RGTA或单独使用细胞治疗不能使创伤愈合。

还进行根据本发明的RGTA和细胞的联合给予。根据推荐用于CACIPLIQ产品的方案局部施用将含有100μl的(RGTA OTR4120)的5ml溶液倾倒至15×15cm的压布上，并将浸渍的压布施加到清洁良好的创伤5分钟，然后取出。然后，如上所述(实施例1)在给予RGTA后一小时内注射MSC。然后，每周两次局部给予对于少数患者，3周后取第二份骨髓样本，并如前所述再次用MSC注射治疗患者。结果是非常迅速的，因为在少于6周内观察到所有溃疡的闭合。

对其他患者进行了另一系列的临床试验：通过注射(RGTA)，然后在细胞取样后一小时内(制备细胞的时间)注射细胞。然后，结果更令人惊讶，因为所有患者在不到一个月的时间内就能完全愈合。此外，他甚至指出，其中一些患者在15天内出现他们的创伤闭合，尽管所述创伤已经持续数月而没有任何改善的迹象。该临床医生从未观察到这样的速度，无论应用何种治疗，特别是在用单独的或用单独的MSC治疗期间。

因此，该实施例清楚地表明，根据本发明的组合物有利地并且令人惊讶地使得可以有效地治疗组织病变，特别是慢性创伤，并且有利地允许明显加速愈合。

此外，该实施例清楚地表明，根据本发明的组合物为现有技术中不存在解决方案的问题提供了新的解决方案。

此外，在使用RGTA、PRP和细胞的共同给予的患者中观察到如果不是甚至更好也是相当的效果。在一个优选的实施方案中，RGTA的给予之后是PRP的注射，然后是细胞的注射，出于监管原因，所述给予是在相同的操作期间进行的。单独给予RGTA(在100mg/ml的OTR4120下1ml)，与PRP一起或顺序给予PRP(源自来自患者血液样品的血小板的裂解物，例如50ml)，与例如但不限于来自各种组织来源的间充质自体细胞一起或顺序给予间充质自体细胞。

在另一个实施方案中，通过抽脂术从待治疗的患者的脂肪组织取出间充质干细胞样品。用于分离MSC的方法与上述实施例1中描述的方法相同。

在使用根据本发明的组合物治疗的另一个实施例中，患者呈现覆盖脚下方(underneath)的部分的深部创伤，包括大脚趾并且包括在脚趾下方的至少一半处的可见的坏死区域。在诊察室里有一股强烈的腐烂气味。通过使用在创伤周围的几个点处注射0.1ml、总共1ml的直接源自患者胸骨的骨髓的间充质细胞的细胞疗法的首次治疗没有成功进行，此外创伤的状况恶化。使用局部仅给予CACIPLIQ(注册商标)的第二次治疗也不能改善创伤，只能防止更大程度的变性和“维持”关于创伤的进展和恶化的现状的状况，从而避免立即截肢。在这些失败之后，在仍健康的区域和脚趾坏死区之间的交界处注射0.5ml的5个点处的0.1μg.ml^-1至100μg.ml^-1的RGTA(CACIPLIQ)，在5次注射之后1小时后，给予每次0.1ml的细胞，细胞直接来源于通过胸骨穿刺另外0.5ml的细胞样品。在给予根据本发明的组合物之后，观察到创伤的消退，使得可以避免任何截肢，并且尽可能完全恢复创伤。具体地，坏死区被完全消除，然后使用来源于邻接创伤的仍健康的组织的萌芽替换，直到创伤完全覆盖。在该实施例中，单次注射序列(RGTA，然后间充质自体细胞)足以治疗该患者，并允许所述患者的创伤闭合。

实施例4：RGTA和细胞治疗的联合治疗在骨组织愈合中的作用

在该实施例中，使用根据本发明的组合物进行骨不连骨折放置(non unionfracture placing)的治疗。

同样地，即，现有技术中描述了在现有技术中进行RGTA给予与细胞治疗的组合是无效和劝戒的，但这在几个月之后，不能获得骨折的任何改善。开放创伤上的结果使得可以获得愈合过程的显著加速。

患有胫骨的骨不连骨折的患者在通过根据上述技术方案或者Hernigou P,HommaY,Flouzat-Lachaniette CH,Poignard A,Chevallier N,Rouard H.，Cancer risk is notincreased in patients treated for orthopaedic diseases with autologous bonemarrow cell concentrate，J Bone Joint Surg Am.2013；95:2215-21描述的单独的或者给予来自骨髓的细胞后的RGTA应用没有成功改善。

用根据本发明的组合物治疗对使用单独的RGTA治疗和使用直接从骨髓取得的自体细胞的治疗均没有反应的患者。令人惊讶地和出乎意料地，特别是根据现有技术的教导，使用根据本发明的组合物，特别是RGTA与来自骨髓的细胞的组合，使得可能触发这些患者中的愈合过程并且获得没有单独取得成功的治疗，由此显示了本发明的优点。特别地，用根据本发明的组合物治疗三名经历治疗失败的患者，并且能够从这种双重治疗中受益。在这些案例中，在给予1ml的RGTA后1小时，通过在骨不连区域中局部注射和1ml的间充质细胞给予来自骨髓的细胞，这些细胞是通过穿刺患者的胸骨而取出的并再注射到骨不连骨折的区域中而没有任何其他治疗步骤。

还进行另外包含血小板提取物的组合，并且当在RGTA和细胞的给予之间使用它时提供优异的结果。特别地，用RGTA给予，随后一小时后是PRP然后细胞，获得了非常积极的结果。

在该其他实施例中，还研究了根据本发明的组合物对骨保存和对股骨头局部缺血性坏死作用的影响。进行使用RGTA和细胞或RGTA、PRP和细胞的治疗。在引起巨大疼痛的深部坏死之前呈现早期股骨头局部缺血的病例的患者已经开始。使用根据本发明的RGTA和细胞的治疗使得可以防止股骨头的损坏并且需要进行外科手术以植入假体。治疗包括在接近病灶的骨膜局部缺血区域以10μg.ml^-1局部注射1ml的RGTA OTR4131，接着在30分钟后局部注射5ml的自体细胞，该自体细胞来自同一天取自髂窝的骨髓。

在另一种情况下，进行使用PRP的共同治疗；根据常规方法从10ml的外周血样品制备PRP，并在样品的细胞之前几分钟局部注射。通过这两种治疗获得的结果显示了股骨头的保存。应该注意，在这些已经开始呈现组织坏死的几个患者中，坏死完全消失，提示了坏死组织的再生和置换的过程。RGTA和自体细胞的组合有利地使得可以获得具有通过注射PRP改善的协同和令人惊讶的效果的再生。在该实施例中，研究了在感染后骨坏死的情况下根据本发明的组合物在治疗骨破坏中的效果。

骨组织破坏是通常用抗生素长期治疗的传染性细菌来源的骨髓炎之后慢性创伤的治疗的常见后果和并发症。使用根据本发明的组合物/方法并且使得可以挽救并重新形成骨组织。通过细胞治疗补充的RGTA的协同作用能使病变的骨组织再生，这是用单独的RGTA或单独的细胞治疗从未观察到的。如此治疗几位患者：在坏死区域周围的健康组织部分中几次局部注射0.1ml的CACIPLIQ(在100μg.ml^-1下的OTR4120)，然后注射相同体积的取自患者胸骨的间充质细胞而没有任何其他制剂，从而能够在骨组织被完全破坏之前恢复骨组织，如果没有这种治疗，这是不可能的。应该注意，这种治疗是在维持抗生素治疗的同时给予的，然而，没有观察到完整的骨再生，治疗使得可以挽救甚至恢复，但不能使完全被破坏的骨无中生有地(ex nihilo)再生。

实施例4：用根据本发明的组合物的实施例治疗关节和肌腱病变

现有技术描述了单独注射RGTA，特别是OTR4131在治疗体育和赛马中的肌腱和关节病变中的作用(Coudry V et al.，Journal of Equine Veterinary Science,2014,34第1357-1360页,David Carnicer,research report “Preliminary report:ultrasonographic evolution of tendon lesions treated with RGTA in horses”école nationale vétérinaire de[national veterinary school of]Maison Alfort)；使用细胞治疗、特别是取自马的髂窝或更常见胸骨处的间充质细胞同样如此(PechayreM.and Betizeau C.S0704,AVAC Conference,2011年12月2-4日，Lyon annualconference)。

PRP也用于相同的适应症(http://fr.slideshare.net/dvmfun/platelet-rich-plasma-prp-therapy)。

与仅用细胞治疗比较，使用通过结合根据本发明的RGTA和细胞，RGTA和PRP，或RGTA、PRP和细胞疗法治疗的马进行比较研究。

在该实施例中，马呈现肌腱病变(在SDF肌腱水平下)或关节病变(骨软骨病软骨炎、软骨下骨囊肿、半月板病变)。在所有病例中，组合的RGTA和间充质细胞治疗使得赛马恢复得更快(在约5-6个月内恢复，即，与用单独RGTA治疗或单独的细胞治疗后的恢复时间相比，1到2个月的获利)。根据从跛行恢复评估这种恢复；几乎所有受治疗的马的更快地恢复训练和恢复到以前的表现。对于这些马，在回声描记术下的肌腱病变后一周内首先注射RGTA。根据需要，在同一天但在RGTA的注射之后(最通常约30分钟至1小时，对应于制备细胞所需的时间)进行细胞的注射。有时在注射PRP几分钟后注射RGTA，然后注射自体细胞。

RGTA、细胞和PRP的量分别是1ml的OTR4131，1.5ml的PRP裂解物(来自采集的10ml血液)和1ml的自体细胞，在第一次注射RGTA后一小时进行PRP和细胞的给予。

在关节病变的病理中，当注射与生物材料如胶原或透明质酸或两者的组合混合的细胞时获得最好的结果。在这些情况下，这些产品在溶液中具有可注射的质量(用于人类的皱纹或关节的整形手术)，并且在注射之前直接加入到细胞溶液中。然后，将细胞溶液稀释约两倍：1ml的细胞和1ml生物材料溶液，优选为0.1-3mg.ml^-1之间。

在另一个实施方案中，进行包含RGTA和细胞或RGTA、PRP和细胞的丸剂形式的给予。与使用仅包含上述要素之一的治疗相比，所获得的结果显示出有效且显著改善的治疗。此外，通过将RGTA和细胞的给予间隔30-60分钟至几小时(优选相同)，获得甚至更令人惊讶的结果。

目前，使用细胞疗法且特别是通过局部注射源自骨髓或来自脂肪组织的自体间充质细胞来进行患者遭受的关节病变的治疗。

然而，这种治疗方法不能获得有效的治疗，并且有失败的情况。因此，在经历单独的细胞疗法失败的几个患者中进行使用根据本发明的组合物的治疗，特别是通过将RGTA给予(注射)到滑液中，随后注射自体间充质细胞或脂肪细胞。为此，RGTA和细胞的量分别为1ml，以100μg.ml^-1，1ml至5ml的通过离心富集有脂肪细胞间充质细胞的自体细胞，并在同一天注射，通常在注射RGTA后的30分钟至一小时。通过注射细胞给予的时机在注射RGTA后一小时内进行，或注射两种溶液，一种RGTA之后立即注射细胞，或者通过单一溶液同时给予RGTA和细胞。

在注射RGTA之后但在注射细胞以及其他生物材料如2型胶原的组合之前或同时加入透明质酸在某些患者中给出更好的结果。

在这种治疗之后且令人惊讶地，病变和相关的痛苦被消除，有利地使患者能够逐渐地再次行走而不需要植入膝关节假体并且没有疼痛。

特别地，在约十二名患有骨软骨病变的患者中，完全丧失他们的运动能力并且遭受疼痛，他们先前用单独的RGTA或细胞治疗失败；在上述治疗之后，其中的8名患者能够凭借RGTA接着是自体细胞的双重治疗恢复运动能力，清楚地表明了根据本发明的组合物的令人惊讶和出人意料的优点。

实施例5：用根据本发明的组合物治疗消化系统组织病变

现有技术描述了RGTA在消化道粘膜、颊粘膜(Morvan et al.，Am JPathol.2004Feb；164(2):739-46)、牙龈粘膜(Escartin et al.，FASEB J.2003 Apr；17(6):644-51)和在胃或肠溃疡(Meddahi et al.，J Biomed Mater Res.2002,60(3):497-501)上的性质；以及它们在正常或辐照分离的细胞上(Alexakis C.et al.，FASEBJ.2001Jul；15(9):1546-54)以及在来自患有克罗恩氏病的患者的组织的活组织检上(Alexakis C.et al.，Gut.2004Jan；53(1):85-90)通过作用于胶原合成来减少纤维化的能力。然而，没有观察到或识别到RGTA对消化系统组织病变，特别是关于可能的病变修复的效果。

在该实施例中，将使用根据本发明的组合物即RGTA和细胞的治疗应用于患有克罗恩氏病且患有会阴瘘几年的患者。在该实施例中，将以100μg.ml^-1的浓度使用的0.5ml的RGTA注射到瘘管附近(0.1ml/每次注射并在3部位处)，然后在30分钟内注射富含源自10ml的抽脂术样品的细胞的级分(每次注射0.1ml细胞，在两个或三个部位处)。

给予根据本发明的组合物的使得可以闭合肛周瘘，而单独的RGTA或这些相同细胞的给予都不可能获得这种闭合和恢复。

第二例患者，其接受了非常接近括约肌的表皮样癌的手术消融，随后进行放化疗，他丧失了其括约肌功能，他能够受益于在几个部位处局部注射RGTA OTR4120(0.1ml，以100μg.ml^-1)，然后在30分钟后，局部注射自体脂肪细胞(来自10ml的最初抽脂术体积的100微升/注射)。在该给予之后，观察到病变部位的细胞快速定植，使患者经历括约肌的功能恢复，这似乎不是不可能的。

实施例6：包括给予根据本发明的组合物的组织病变的治疗：

在这些实施例中，结合RGTA和细胞治疗的累加效应没有对象化，因为每个病例都是孤立的和独特的，这不允许实现一种或多种效果的对象化。观察到并且能够被研究的唯一标准是患者在治疗后是否改善。

在该实施例中，研究了根据本发明的组合物在肺再生中的作用。患有由于暴露于来自火焰的毒性蒸气而引起的肺粘膜病变的患者吸入放置于在雾化器中的RGTA OTR4120，并且在同一天在吸入后一小时注射自体脂肪细胞。雾化器含有100μg.ml^-1的OTR4120溶液，且吸入持续10分钟使得能够吸入约5ml。在接下来的半小时内，注射通过抽脂术在同一天采集的(无浓度)自体细胞(5ml，IV)。这种给予令人惊讶地和出乎意料地使患者快速和功能性恢复，即，改善了呼吸，而所治疗的患者已经经历几个月的治疗失败。

在该实施例中，观察到在植入支架之后根据本发明的组合物对病变组织的作用。为此，在植入支架的当天进行RGTA的口服给予，并在24小时后，IV给予自体脂肪细胞(源自50ml的抽脂术)。RGTA OTR4120的口服摄取量为50ml的100μg.ml^-1的溶液的量，并且维持1个月。10天和20天后重复细胞的注射。

观察到植入支架后病变的区域的再定植，但没有记录，出乎意料地显示了支架植入区域的再内皮化，这是使用单独的RGTA或单独的细胞从未观察到的。

在该实施例中，根据本发明的组合物对病变的组织的作用，在这个案例中是意外照射的肌肉，并且遭受功能丧失了其功能。为此，进行RGTA的口服给予，即，以100mg/ml的25ml，持续2天，随后在肌肉的辐照区域中给予细胞，即5次注射1ml的细胞溶液，该细胞来自同一天从髂窝采集的50ml的骨髓样品然后通过离心富集并悬浮在5ml的生理盐水中。给予后，对其功能活性进行评估。令人惊讶和出乎意料地，治疗允许功能运动恢复，这似乎是不可能的。

在该实施例中，研究了根据本发明的组合物对角膜的再上皮化的作用。为此，在用每个角膜两滴RGTA局部预处理的角膜上，接种在同一天取自患者的颊粘膜的细胞样品。这种治疗使得可以获得病变组织的修复，且特别地通过给予单独的CACICOL，效果显著增加。

最后，还对根据本发明的组合物的实施例对脊髓病变的效果进行评估。一名20岁的患者在最近的脊髓病变后出现运动功能降低，使他的下肢瘫痪。使用根据本发明的组合物的一个实施例进行三天的治疗，其中RGTA和细胞的量分别为口服25ml/天的RGTA的100mg/ml的OTR4120溶液和在4个点处局部注射(在脊髓病变周围的区域)1ml的来源于来自髂窝的50ml的骨髓穿刺的细胞。在第10天和第20天重复这种注射，而RGTA的每日口服摄取维持两个月的时间。

出乎意料和非常积极地，在治疗的第一个三天后，患者开始恢复了少量的神经运动功能，并在运动恢复方面逐渐显著改善。

Claims (27)

1.一种其应用是作为用于预防和/或治疗组织病变的药物的药物组合物或皮肤病学组合物，所述组合物包含：

-下面通式(I)的生物相容性聚合物

AaXxYy (I)

其中：

A表示单体，

X表示R₁COOR₂基团，

Y表示表示O-或N-磺酸酯基团，其对应于下式-R₃OSO₃R₄、-R₅NSO₃R₆中的一种，其中：

R₁、R₃和R₅独立地表示可选地支化的和/或不饱和的并且可选地包含一个或多个芳环的基于脂族烃的链，而R₂、R₄和R₆独立地表示氢原子或阳离子，

a表示单体的数量，

x表示单体A由基团X的取代度，

y表示单体A由基团Y的取代度，和

-真核细胞。

2.一种其应用是作为用于预防和/或治疗组织病变的药物的药物组合物或皮肤病学组合物，所述组合物包含：

-下面通式(I)的生物相容性聚合物

AaXxYy (I)

其中：

A表示单体，

X表示R₁COOR₂基团，

Y表示表示O-或N-磺酸酯基团，其对应于下式-R₃OSO₃R₄、-R₅NSO₃R₆中的一个，其中：

R₁、R₃和R₅独立地表示可选地支化的和/或不饱和的并且可选地包含一个或多个芳环的基于脂族烃的链，而R₂、R₄和R₆独立地表示氢原子或阳离子，

a表示单体的数量，

x表示单体A由基团X的取代度，

y表示单体A由基团Y的取代度，和

-血小板提取物和/或裂解物。

3.一种其应用是作为用于预防和/或治疗组织病变的药物的药物组合物或皮肤病学组合物，所述组合物包含：

-下面通式(I)的生物相容性聚合物

AaXxYy (I)

其中：

A表示单体，

X表示R₁COOR₂基团，

Y表示表示O-或N-磺酸酯基团，其对应于下式-R₃OSO₃R₄、-R₅NSO₃R₆中的一个，其中：

R₁、R₃和R₅独立地表示可选地支化的和/或不饱和的并且可选地包含一个或多个芳环的基于脂族烃的链，而R₂、R₄和R₆独立地表示氢原子或阳离子，

a表示单体的数量，

x表示单体A由基团X的取代度，

y表示单体A由基团Y的取代度，和

-至少一种生长因子。

4.如权利要求1至3中任一项所述的用于其应用的组合物，其中，所述单体A可以是相同的或不同的，所述单体A选自糖、酯、醇、氨基酸、核苷酸、核酸、蛋白质或其衍生物。

5.如权利要求1至4中任一项所述的用于其应用的组合物，其中，所述单体A可以是相同的或不同的，所述单体A选自糖或其衍生物。

6.如权利要求1至5中任一项所述的用于其应用的组合物，其中，最多20％的所述单体A独立地是具有下式的单体：

其中R₉和R₁₀独立地表示氧原子、可选地支化的和/或不饱和的基于脂族烃的链、独立地包含一个或多个氧原子和/或氮原子的杂芳基、醛官能团、羧酸基团、二醇、取代的二醇、式-R₁₁-(X)_n-R₁₂的基团，其中R₁₁表示可选地支化的和/或不饱和的C₁至C₄脂族碳基链，X表示选自氧和氮的杂原子，n是1至4的整数，而R₁₂是氢原子，可选地支化的和/或不饱和的基于脂族烃的链、独立地包含一个或多个氧原子和/或氮原子的杂芳基、醛官能团、羧酸基团、二醇、取代的二醇。

7.如权利要求1至6中任一项所述的用于其应用的组合物，其中所述单体“a”的数量使得所述式(I)聚合物的重量大于2000道尔顿。

8.如权利要求1至7中任一项所述的用于其应用的组合物，其中所述取代度“x”为20％至150％之间。

9.如前述权利要求中任一项所述的用于其应用的组合物，其中所述取代度“y”为30％至150％之间。

10.如前述权利要求中任一项所述的用于其应用的组合物，其特征在于所述基团R选自直链或支链的烷基、烯丙基和芳基。

11.如前述权利要求中任一项所述的用于其应用的组合物，其中所述生物相容性聚合物还包含能够赋予所述聚合物另外的生物学或物理化学性质的不同于X和Y的官能性化学基团Z。

12.如权利要求11所述的用于其应用的组合物，其中所有所述单体A由基团Z的取代度“z”为0％至50％。

13.如权利要求11或12所述的用于其应用的组合物，其中所述基团Z是能够赋予所述聚合物更好的溶解性或亲脂性的物质。

14.如权利要求13所述的用于其应用的组合物，其中所述基团Z是相同的或不同的，并且选自包括氨基酸、脂肪酸、脂肪醇、神经酰胺或其衍生物，或者靶向核苷酸序列的组。

15.如权利要求6至14中任一项所述的用于其应用的组合物，其中基团R₉和R₁₀独立地并且可选地由基团Z取代。

16.如权利要求1或权利要求4至15中任一项所述的用于其应用的组合物，当它们从属于权利要求1时，其中所述真核细胞选自包括成体真核细胞或胚胎真核细胞、骨髓细胞和脂肪组织细胞的组。

17.如权利要求1或权利要求4至16中任一项所述的用于其应用的组合物，当它们从属于权利要求1时，其中在组织病变的治疗中给予所述生物相容性聚合物：

-以0.1至5mg/kg体重的剂量静脉内或肌内给予，或

-通过以1至100微克/毫升的剂量局部注射，

-以10μg至5mg/kg的每日总量、每天口服2至5次相等的摄取量，

-在用1至100mg/ml的浓缩的水溶液在餐前舌下给予，

-通过给予鼻气雾剂或喷雾剂形式的溶液，

并且其中所述真核细胞在首次摄取所述生物相容性聚合物之后5分钟至24小时的时间内通过注射给予在所述治疗的组织病变中。

18.如权利要求1或权利要求4至17中任一项所述的用于其应用的组合物，当它们不从属于权利要求2或3时，其中所述组合物包含至少一种生长因子，所述生长因子选自包括成纤维细胞生长因子(FGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)或它们的混合物的组。

19.如权利要求1或权利要求4至18中任一项所述的用于其应用的组合物，当它们不从属于权利要求2或3时，其中所述组合物包含血小板提取物和/或血小板裂解物。

20.如前述权利要求中任一项所述的用于其应用的组合物，其中所述组织病变选自运动系统病变、血管病变、心脏病变、中枢神经系统病变，优选除局部缺血性中枢神经系统病变、外周神经系统病变、感觉系统病变、呼吸神经系统病变、消化道病变、骨组织病变、胰腺组织病变、肝组织病变、肾组织病变、尿道病变和/或阴道组织病变之外，优选除下肢的局部缺血性病变之外。

21.一种意在用于预防和/或治疗组织病变的药物试剂盒，其包含：

i.下面通式(I)的生物相容性聚合物

AaXxYy (I)

其中：

A表示单体，

X表示R₁COOR₂基团，

Y表示O-或N-磺酸酯基团，其对应于下式-R₃OSO₃R₄、-R₅NSO₃R₆中的一个，其中：

R₁、R₃和R₅独立地表示可选地支化的和/或不饱和的并且可选地包含一个或多个芳环的基于脂族烃的链，而R₂、R₄和R₆独立地表示氢原子或阳离子，

a表示单体的数量，

x表示单体A由基团X的取代度，

y表示单体A由基团Y的取代度，和

ii.真核细胞。

22.如权利要求21所述的意在应用的药物试剂盒，其中可以如下使用所述生物相容性聚合物：

-以0.1至5mg/kg体重的剂量静脉内或肌内使用，或

-以1.5至500mg的每日总量每天口服2至5次相等的摄取量，

-以0.001至1mg.ml^-1的剂量颅内使用，

-在用1至100mg.ml^-1的浓缩的水溶液在餐前舌下使用，

-通过喷雾包含0.1至5mg/kg体重的所述聚合物的溶液局部使用，

并且其中可以在首次给予所述生物相容性聚合物之后5分钟至24小时的时间将所述真核细胞内用于注射。

23.如权利要求21或22所述的意在应用的药物试剂盒，其中在一天至三个月的时间内给予所述生物相容性聚合物和/或所述细胞。

24.如权利要求21至23中任一项所述的意在应用的药物试剂盒，其中所述生物相容性聚合物和/或所述细胞的所述给予是每日、每日两次或每周的。

25.药物组合物在生产用于治疗组织病变的药物中的用途，所述药物组合物包含：

i.以下通式(I)的生物相容性聚合物

AaXxYy (I)

其中：

A表示单体，

X表示R₁COOR₂基团，

Y表示O-或N-磺酸酯基团，其对应于下式-R₃OSO₃R₄、-R₅NSO₃R₆中的一个，其中：

R₁、R₃和R₅独立地表示可选地支化的和/或不饱和的并且可选地包含一个或多个芳环的基于脂族烃的链，而R₂、R₄和R₆独立地表示氢原子或阳离子，

a表示单体的数量，

x表示单体A由基团X的取代度，

y表示单体A由基团Y的取代度，和

ii.真核细胞。

26.药物组合物在生产用于治疗组织病变的药物中的用途，所述药物组合物包含：

i.以下通式(I)的生物相容性聚合物

AaXxYy (I)

其中：

A表示单体，

X表示R₁COOR₂基团，

Y表示O-或N-磺酸酯基团，其对应于下式-R₃OSO₃R₄、-R₅NSO₃R₆中的一个，其中：

R₁、R₃和R₅独立地表示可选地支化的和/或不饱和的并且可选地包含一个或多个芳环的基于脂族烃的链，且R₂、R₄和R₆独立地表示氢原子或阳离子，

a表示单体的数量，

x表示单体A由基团X的取代度，

y表示单体A由基团Y的取代度，和

ii.血小板提取物和/或裂解物。

27.药物组合物在生产用于治疗组织病变的药物中的用途，所述药物组合物包含：

i.以下通式(I)的生物相容性聚合物

AaXxYy (I)

其中：

A表示单体，

X表示R₁COOR₂基团，

Y表示O-或N-磺酸酯基团，其对应于下式-R₃OSO₃R₄、-R₅NSO₃R₆中的一个，其中：

R₁、R₃和R₅独立地表示可选地支化的和/或不饱和的并且可选地包含一个或多个芳环的基于脂族烃的链，而R₂、R₄和R₆独立地表示氢原子或阳离子，

a表示单体的数量，

x表示单体A由基团X的取代度，

y表示单体A由基团Y的取代度，和

ii.至少一种生长因子。