CN107794230A - 酵母菌株及其在脂类产生中的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及酵母菌株及其在脂类产生中的用途。本发明涉及经分离微生物以及生物质、培养物、微生物油和其组合物。本发明还提供了产生微生物油的方法和使用经分离微生物、生物质和微生物油的方法。

Description

酵母菌株及其在脂类产生中的用途
本申请是申请号为201180023694.5的中国专利申请的分案申请，原申请是申请日为2011年3月11日的国际申请PCT/US2011/028122的中国国家阶段申请。
技术领域
本发明涉及经分离微生物，以及生物质、培养物、微生物油和其组合物。本发明还提供了产生微生物油的方法和使用经分离微生物、生物质、培养物和微生物油的方法。
背景技术
基于碳链的长度和饱和特征，将脂肪酸分类。当碳原子之间不存在双键时脂肪酸被称为饱和脂肪酸，当存在双键时被称为不饱和脂肪酸。当仅存在一个双键时，不饱和长链脂肪酸是单不饱和的，当存在多于一个双键时，是多不饱和的。
基于从脂肪酸的甲基端的第一个双键的位置，将多不饱和脂肪酸(“PUFA”)分类：ω-3(n-3)脂肪酸在第三个碳处含有第一个双键，而ω-6(n-6)脂肪酸在第六个碳处含有第一个双键。例如，二十二碳六烯酸(“DHA”)是具有22个碳的链长度和6个双键的ω-3长链多不饱和脂肪酸(“LC-PUFA”)，通常命名为“22:6n-3”。其他ω-3LC-PUFA包括二十碳五烯酸(“EPA”)，命名为“20:5n-3”、ω-3二十二碳五烯酸(“DPA n-3”)，命名为“22:5n-3”。DHA和EPA已被称作“基本”脂肪酸。ω-6LC-PUFA包括花生四烯酸(“ARA”)，命名为“20:4n-6”和ω-6二十二碳五烯酸(“DPAn-6”)，命名为“22:5n-6”。
从各种来源比如植物(包括油籽)、微生物和动物中产生生物油对各种目的而言是必须的。例如，期望增加在生物油中发现的许多有益营养物的膳食摄入。特别有益的营养物包括脂肪酸比如ω-3和ω-6脂肪酸以及其酯。ω-3脂肪酸被认作是用于预防动脉硬化和冠心病、用于减轻炎症病况和用于延缓肿瘤细胞生长的重要的膳食化合物。ω-6脂肪酸不仅作为人体中的结构脂类，还作为炎症中的许多因子的前体，比如前列腺素、白三烯和羟脂(oxylipin)。
因为人类和许多其他动物不能直接合成ω-3和ω-6基本脂肪酸，它们必须在膳食中获得。基本脂肪酸的传统膳食来源包括植物油、海洋动物油、鱼油和油籽。此外，通过某些微生物产生的油已发现富有基本脂肪酸。
油酸是另一重要的有益脂肪酸。油酸是ω-9脂肪酸，其具有比如减慢心脏疾病发展并促进抗氧化剂产生等健康益处。其还用作Lorenzo油中的成分，Lorenzo油是被开发用来预防肾上腺脑白质营养不良(ALD)发作的药物。油酸由于其保湿作用还被用作化妆品成分。
亚油酸也是重要的脂肪酸的例子。其是是对各种生物过程，比如参与毛发脱落、伤口愈合、囊性纤维化、皮炎和糖尿病的那些生物过程而言必须的不饱和ω-6脂肪酸。亚油酸由于其对皮肤的有益作用还用作化妆品成分，并用在肥皂和乳化剂的制造中。
为了降低用于膳食、药物和化妆品用途的有益脂肪酸的产生相关的花费，对产生含有这些脂肪酸的生物油的低成本和高效方法存在需求。
发明内容
本发明涉及从由Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidioboluspararoseus和Rhodotorula ingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物，其中微生物能产生包含以重量计少于30％饱和脂肪酸的微生物油。
在一些实施方式中，经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少30％。在一些实施方式中，经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少40％、至少50％或至少60％。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计多于30％、以重量计多于40％、以重量计多于50％或以重量计多于60％油酸的微生物油。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计多于5％、以重量计多于10％或以重量计多于15％亚油酸的微生物油。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于25％饱和脂肪酸的微生物油。在一些实施方式中，本发明的微生物能产生包含以重量计少于25％、以重量计少于20％或以重量计少于15％棕榈酸的微生物油。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于10％或以重量计少于5％的20个或更多碳链长度的长链多不饱和脂肪酸的微生物油。
本发明涉及从由Pseudozyma aphidis，Pseudozyma rugulosa和Rhodotorulaingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物，其中微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少30％。在一些实施方式中，从由Pseudozyma aphidis，Pseudozyma rugulosa和Rhodotorula ingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少40％或至少50％。
本发明还涉及Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物，其中微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少50％。在一些实施方式中，Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少55％或至少60％。
本发明涉及从由Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidioboluspararoseus和Rhodotorula ingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物，其中微生物能产生包含以重量计0.5％至30％的饱和脂肪酸的微生物油，并且其中微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的30％至80％。
本发明还涉及从由Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidioboluspararoseus和Rhodotorula ingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物，其中微生物能产生包含以重量计30％至70％的油酸和以重量计5％至30％的亚油酸的微生物油。
本发明还涉及Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物，其中微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的50％至80％，并且其中微生物能产生包含以重量计5％至30％亚油酸的微生物油。
本发明涉及以ATCC登录号PTA-11615保藏的经分离微生物、以ATCC登录号PTA-11616保藏的经分离微生物和以ATCC登录号PTA-11617保藏的经分离微生物。
本发明还涉及具有以ATCC登录号PTA-11615保藏的微生物的特征的经分离微生物、具有以ATCC登录号PTA-11616保藏的微生物的特征的经分离微生物和具有以ATCC登录号PTA-11617保藏的微生物的特征的经分离微生物。
本发明涉及包含本发明的经分离微生物或本发明的经分离微生物混合物的经分离的生物质。
在一些实施方式中，经分离的生物质的以重量计干细胞重量的至少30％是脂肪酸。
本发明还涉及包含本发明的经分离微生物或本发明的经分离微生物混合物的培养物。
在一些实施方式中，培养物包含至少5g/L的经分离微生物的生物质。
本发明涉及产生微生物油的方法，其包括：使本发明的经分离微生物或本发明的经分离微生物混合物在培养基中生长以产生微生物油。
在一些实施方式中，所述方法还包括提取微生物油。
在一些实施方式中，在从由蔗糖、葡萄糖、果糖、木糖、甘油、甘露糖、阿拉伯糖、乳糖、半乳糖、麦芽糖、纤维素、木质纤维素及其组合组成的组中选择的碳源的存在下，培养经分离微生物。
在一些实施方式中，所述方法产生包含经分离微生物的生物质的培养物并且所述培养物包含至少5g/L的生物质。
本发明还涉及通过本发明的方法产生的微生物油和本发明的经分离微生物、生物质、培养物或微生物油用于制造针对非人类动物或人类的食物、补充剂、化妆品或药物组合物的用途。
附图说明
图1显示了菌株28428(ATCC登录号PTA-11615)的DNA序列。
图2显示了菌株28428(ATCC登录号PTA-11615)D1/D2DNA序列的系统树。
图3显示了菌株28428(ATCC登录号PTA-11615)ITS DNA序列的系统树。
图4显示了菌株29404(ATCC登录号PTA-11616)的DNA序列。
图5显示了菌株29404(ATCC登录号PTA-11616)D1/D2DNA序列的系统树。
图6显示了菌株29404(ATCC登录号PTA-11616)ITS DNA序列的系统树。
图7显示了菌株29794(ATCC登录号PTA-11617)的DNA序列。
图8显示了菌株29794(ATCC登录号PTA-11617)D1/D2DNA序列的系统树。
图9显示了菌株29794(ATCC登录号PTA-11617)ITS DNA序列的系统树。
具体实施方式
发明详述
本发明涉及Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidioboluspararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物，以及具有经分离微生物特征的微生物和其生物质、微生物油、组合物和培养物。本发明还涉及从本发明的经分离微生物产生微生物油的方法和使用经分离微生物、生物质、培养物和微生物油的方法。较之先前的分离物，本文描述的经分离微生物是高生产力的并且产生唯一的脂肪酸谱图，部分特征在于高水平的短链不饱和脂肪酸、低水平的饱和脂肪酸和低水平的长链多不饱和脂肪酸。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少30％。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％或至少65％。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的30％至80％、以重量计干细胞重量的35％至80％、以重量计干细胞重量的40％至80％、以重量计干细胞重量的45％至75％、以重量计干细胞重量的50％至75％、以重量计干细胞重量的55％至70％或以重量计干细胞重量的60％至70％。
在一些实施方式中，本发明涉及Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物，其中微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少30％。在一些实施方式中，Pseudozyma aphidis、Pseudozymarugulosa或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少35％、至少40％、至少45％、至少50％或至少55％。在一些实施方式中，Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的30％至80％、以重量计干细胞重量的35％至75％、以重量计干细胞重量的40％至70％、以重量计干细胞重量的45％至70％、以重量计干细胞重量的50％至65％或以重量计干细胞重量的55％至65％。
本发明还涉及Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物，其中微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的多于45％。在一些实施方式中，Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少46％、至少47％、至少48％、至少49％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％或至少70％。在一些实施方式中，Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的30％至85％、以重量计干细胞重量的40％至80％、以重量计干细胞重量的45％至80％、以重量计干细胞重量的46％至80％、以重量计干细胞重量的47％至80％、以重量计干细胞重量的48％至80％、以重量计干细胞重量的49％至80％、以重量计干细胞重量的50％至80％、以重量计干细胞重量的55％至75％、以重量计干细胞重量的60％至70％或以重量计干细胞重量的65％至70％。
在一些实施方式中，本发明涉及Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物，其中微生物能产生包含以重量计多于30％油酸(18:1n-9)的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计多于35％、多于40％、多于45％、多于50％、多于55％、多于60％或多于65％油酸的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计从30％至70％油酸、以重量计从35％至70％油酸、以重量计从40％至65％油酸、以重量计从45％至65％油酸、以重量计从50％至65％油酸、以重量计从55％至65％油酸或以重量计从60％至65％油酸的微生物油。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计多于5％亚油酸(18:2)的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计多于7％、多于10％、多于12％、多于15％、多于17％或多于20％亚油酸的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计从5％至30％亚油酸、以重量计从7％至28％亚油酸、以重量计从10％至25％亚油酸、以重量计从12％至25％亚油酸、以重量计从15％至25％亚油酸、以重量计从17％至25％亚油酸或以重量计从20％至23％亚油酸的微生物油。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于30％饱和脂肪酸的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于25％、少于20％、少于15％、少于10％、少于8％或少于5％饱和脂肪酸的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计从0.5％至30％饱和脂肪酸、以重量计从1％至25％饱和脂肪酸、以重量计从1％至20％饱和脂肪酸、以重量计从1％至15％饱和脂肪酸、以重量计从1％至10％饱和脂肪酸、以重量计从1％至8％饱和脂肪酸或以重量计从1％至5％饱和脂肪酸的微生物油。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于25％棕榈酸(16:0)的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于23％、少于20％、少于18％或少于15％棕榈酸的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计从0.5％至25％棕榈酸、以重量计从1％至20％棕榈酸、以重量计从1％至18％棕榈酸、以重量计从1％至15％棕榈酸、以重量计从5％至15％棕榈酸或以重量计从10％至15％棕榈酸的微生物油。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于10％的20个或更多碳链长度的长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于8％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％或少于0.5％的20个或更多碳链长度的LCPUFA的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计从0％至10％、以重量计从0％至8％、以重量计从0％至5％、以重量计从0％至4％、以重量计从0％至3％、以重量计从0％至2％或以重量计从0％至1％的20个或更多碳链长度的LCPUFA的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生具有不可检测量的20个或更多碳链长度的LCPUFA的微生物油。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于10％、少于8％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％或少于0.5％的二十二碳六烯酸(DHA)的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计从0％至10％的DHA、以重量计从0％至8％的DHA、以重量计从0％至5％的DHA、以重量计从0％至4％的DHA、以重量计从0％至3％的DHA、以重量计从0％至2％的DHA或以重量计从0％至1％的DHA的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生具有不可检测量的DHA的微生物油。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于10％、少于8％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％或少于0.5％的二十碳五烯酸(EPA)的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计从0％至10％的EPA、以重量计从0％至8％的EPA、以重量计从0％至5％的EPA、以重量计从0％至4％的EPA、以重量计从0％至3％的EPA、以重量计从0％至2％的EPA或以重量计从0％至1％的EPA的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生具有不可检测量的EPA的微生物油。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于10％、少于8％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％或少于0.5％的ω-3二十二碳五烯酸(DPAn-3)的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计从0％至10％的DPA n-3、以重量计从0％至8％的DPA n-3、以重量计从0％至5％的DPA n-3、以重量计从0％至4％的DPA n-3、以重量计从0％至3％的DPA n-3、以重量计从0％至2％的DPAn-3或以重量计从0％至1％的DPA n-3的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生具有不可检测量的DPA n-3的微生物油。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于10％、少于8％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％或少于0.5％的ω-6二十二碳五烯酸(DPA n-6)的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计从0％至10％的DPA n-6、以重量计从0％至8％的DPA n-6、以重量计从0％至5％的DPA n-6、以重量计从0％至4％的DPA n-6、以重量计从0％至3％的DPA n-6、以重量计从0％至2％的DPAn-6或以重量计从0％至1％的DPA n-6的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生具有不可检测量的DPA n-6的微生物油。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计少于10％、少于8％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％、少于1％或少于0.5％的ω-6花生四烯酸(ARA)的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生包含以重量计从0％至10％的ARA、以重量计从0％至8％的ARA、以重量计从0％至5％的ARA、以重量计从0％至4％的ARA、以重量计从0％至3％的ARA、以重量计从0％至2％的ARA或以重量计从0％至1％的ARA的微生物油。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物能产生具有不可检测量的ARA的微生物油。
在一些实施方式中，本发明涉及Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计0.5％至30％的饱和脂肪酸生物的微生物油，并且其中微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的30％至80％。在一些实施方式中，Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus或Rhodotorulaingeniosa种的经分离微生物能产生包含以重量计1％至25％的饱和脂肪酸的微生物油并且能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的40％至80％。在一些实施方式中，Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物能产生以重量计包含1％至20％饱和脂肪酸的微生物油，并且能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的50％至80％。在一些实施方式中，Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物能产生包含以重量计1％至20％饱和脂肪酸的微生物油，并且能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的55％至75％。在一些实施方式中，Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidioboluspararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物能产生包含以重量计1％至20％饱和脂肪酸的微生物油，并且能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的60％至75％。在一些实施方式中，Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物能产生包含以重量计1％至20％饱和脂肪酸的微生物油，并且能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量60％至70％。
在一些实施方式中，本发明涉及Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计30％至70％油酸和以重量计5％至30％亚油酸的微生物油。在一些实施方式中，Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物能产生包含以重量计35％至70％油酸和以重量计5％至25％亚油酸的微生物油。在一些实施方式中，Pseudozyma aphidis、Pseudozymarugulosa、Sporidiobolus pararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物能产生包含以重量计40％至65％的油酸和以重量计5％至20％亚油酸的微生物油。在一些实施方式中，Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物能产生包含以重量计45％至65％油酸和以重量计5％至20％亚油酸的微生物油。在一些实施方式中，Pseudozyma aphidis、Pseudozymarugulosa、Sporidiobolus pararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物能产生包含50％至65％以重量计油酸和以重量计7％至20％亚油酸的微生物油。在一些实施方式中，Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus或Rhodotorula ingeniosa种的经分离微生物能产生包含以重量计55％至65％油酸和以重量计7％至15％亚油酸的微生物油。
在一些实施方式中，本发明涉及Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的50％至80％，并且其中所述微生物能产生包含以重量计5％至30％亚油酸的微生物油。在一些实施方式中，Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的55％至75％，并且其中所述微生物能产生包含以重量计5％至25％亚油酸的微生物油。在一些实施方式中，Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的60％至70％，并且其中所述微生物能产生包含以重量计7％至20％亚油酸的微生物油。在一些实施方式中，Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的65％至70％，并且其中所述微生物能产生包含以重量计7％至15％亚油酸的微生物油。
在一些实施方式中，本发明涉及以ATCC登录号PTA-11615保藏的种的经分离微生物。本文中经分离微生物还被称为Pseudozyma aphidis/rugulosa ATCC PTA-11615。与ATCC登录号PTA-11615关联的经分离微生物在American Type Culture Collection,Patent Depository,10801University Boulevard,Manassas,Va.20110-2209处于2011年1月26日根据Budapest Treaty保藏。
在一些实施方式中，本发明涉及以ATCC登录号PTA-11616保藏的种的经分离微生物。本文中还经分离微生物被称为Sporidiobolus pararoseus ATCC PTA-11616。与ATCC登录号PTA-11616关联的经分离微生物在American Type Culture Collection,PatentDepository,10801University Boulevard,Manassas,Va.20110-2209处于2011年1月26日根据Budapest Treaty保藏。
在一些实施方式中，本发明涉及以ATCC登录号PTA-11617保藏的种的经分离微生物。本文中经分离微生物还被称为Rhodotorula ingeniosa ATCC PTA-11617。与ATCC登录号PTA-11617关联的经分离微生物在American Type Culture Collection,PatentDepository,10801University Boulevard,Manassas,Va.20110-2209处于2011年1月26日根据Budapest Treaty保藏。
在一些实施方式中，本发明涉及具有以ATCC登录号PTA-11615、ATCC登录号PTA-11616或ATCC登录号PTA-11617保藏的微生物的特征的经分离微生物。以ATCC登录号PTA-11615、ATCC登录号PTA-11616或ATCC登录号PTA-11617保藏的种的特征包括其生长和表型特性(表型特性的例子包括形态学和繁殖特性)，其物理和化学特性(比如干重和脂质谱图)和其基因序列。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物具有与ATCC登录号PTA-11615、ATCC登录号PTA-11616或ATCC登录号PTA-11617保藏的微生物基本上同一的表型特性。在一些实施方式中，本发明的经分离微生物具有以ATCC登录号PTA-11615、ATCC登录号PTA-11616或ATCC登录号PTA-11617保藏的微生物基本同一的生长特性。
本发明还涉及包含本发明的经分离微生物的经分离的生物质。本发明的经分离的生物质是通过用于分离微生物生物质的任何常规方法获得的收获的细胞生物质。
本发明的生物质含有高水平的脂肪酸。在一些实施方式中，本发明的生物质的以重量计干细胞重量的至少30％是脂肪酸。在一些实施方式中，本发明的生物质的以重量计干细胞重量的至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％或至少65％是脂肪酸。在一些实施方式中，本发明的生物质包含以干细胞重量计生物质的从30％至75％、从40％至75％、从45％至70％、从50％至70％、从55％至65％的脂肪酸。
本发明还涉及包含本发明的一种或多种经分离微生物的培养物。用于接种、生长并回收酵母菌株的各种发酵参数是本领域中已知的。可使用用于酵母生长的任何常规培养基。
本发明的培养物含有每升培养发酵液高量的生物质，这表示经分离微生物有效生长。在一些实施方式中，培养物包含至少1g/L的本发明的经分离微生物的生物质。在一些实施方式中，培养物包含至少2g/L、至少3g/L、至少4g/L、至少5g/L、至少6g/L、至少7g/L、至少8g/L、至少9g/L或至少10g/L的本发明的经分离微生物的生物质。在一些实施方式中，培养物包含1g/L至10g/L、2g/L至10g/L、3g/L至10g/L、4g/L至10g/L、5g/L至10g/L、6g/L至10g/L、7g/L至10g/L、8g/L至10g/L或9g/L至10g/L的本发明的经分离微生物的生物质。
本发明还涉及产生微生物油的方法。
在一些实施方式中，所述方法包括使本发明的经分离微生物或其混合物在培养基中生长以产生微生物油。本发明的经分离微生物可在各种碳源，包括，例如，蔗糖、葡萄糖、果糖、木糖、甘油、甘露糖、阿拉伯糖、乳糖、半乳糖、麦芽糖、纤维素、木质纤维素或其组合的存在下生长。所述方法还可包括提取微生物油。所述油可从新鲜收获的生物质中提取或可从已在防腐败的条件下存储的先前收获的生物质中提取。已知的方法可用来培养本发明的微生物，以便从培养物中分离生物质、从生物质中提取微生物油和分析从生物质中提取的油的脂肪酸谱图。
本发明还涉及通过本发明的方法产生的微生物油。在一些实施方式中，微生物油包含具有与本发明的经分离微生物的脂肪酸谱图相同特征的脂肪酸谱图。本发明的微生物油可以是得自微生物的任何油，包括，例如：从微生物的生物质提取的而没有进一步处理的粗制油；通过用进一步的处理步骤比如精炼、漂白和/或脱臭处理的粗制微生物油获得的精制油；通过稀释粗制或精制微生物油获得的稀释的微生物油；或浓缩油，其例如，通过用进一步的纯化方法处理粗制或精制微生物油以增加油中的脂肪酸浓度获得。
本发明还涉及本发明的经分离微生物、生物质、培养物或微生物油用于制造针对非人类动物或人类的食物、膳食补充剂、化妆品或药物组合物的用途。
组合物
本发明还涉及包含本发明的经分离微生物、本发明的经分离的生物质、本发明的微生物油或其组合的组合物。
可基于组合物的需求通过任何已知的技术，对本发明的经分离微生物、生物质或微生物油进一步化学或物理改良或处理。
在用在组合物中之前，可通过下述方法使微生物细胞或生物质干燥，所述方法包括，但不限于，冷冻干燥、风干、喷雾干燥、隧道干燥(tunnel drying)、真空干燥(低压冻干)或类似方法。或者，收获并洗过的生物质可直接用在组合物中而不用干燥。
本发明的微生物油可用作起始材料，来更有效地产生富集脂肪酸的产物。例如，本发明的微生物油可以经受本领域中已知的各种纯化技术，比如蒸馏或尿素包合，以产生具有更高浓度的具体脂肪酸的更高效力的产物。本发明的微生物油还可用在化学反应中以产生得自油中脂肪酸的化合物，比如脂肪酸酯和盐。
本发明的组合物可包括一种或多种赋形剂。本文中使用时，“赋形剂”是指下述组分或组分混合物，其用在本发明的组合物中以赋予组合物(包括食物以及药物、化妆品和工业组合物)期望的特征。当添加至药物组合物时，本发明的赋形剂可被描述为“药物上可接受的”赋形剂，这意味着赋形剂是正确的医疗判断范围内的适于与人类和动物组织接触而在与合理益处/风险比率相当的期望接触期间没有过度毒性、刺激、过敏反应或其他可疑并发症的化合物、材料、组合物，盐和/或剂量形式。在一些实施方式中，术语“药物上可接受的”表示被联邦或州政府的管理机构批准或在美国药典或其他公认的国际药典中列出可用于动物，更具体地可用于人类。可使用各种赋形剂。在一些实施方式中，赋形剂可以是，但不限于，碱剂、稳定剂、抗氧化剂、粘着剂、分离剂、涂布剂、外相(exteriorphase)组分、控制释放组分、溶剂、表面活性剂、湿润剂、缓冲剂、填充剂、润肤剂或其组合。除了本文中讨论的那些，赋形剂可包括但不限于Remington:The Science and Practice of Pharmacy,21st ed.(2005)中列出的赋形剂。本文中在具体分类中包括一种赋形剂(例如“溶剂”)意图阐释而不是限制赋形剂的作用。具体的赋形剂可落入多种分类中。
本发明的组合物包括，但不限于，食物产品、药物组合物、化妆品和工业组合物。
在一些实施方式中，组合物是食物产品。食物产品是用于动物或人类消费的任何食物并且包括固态和液态组合物二者。食物产品可以是给动物或人类食物的添加剂。食物包括，但不限于，通常的食物；液态产品，包括牛奶、饮料、治疗性饮品和营养饮品；功能性食物；补充剂；保健食物；婴儿配方，包括用于早产婴儿配方；用于怀孕妇女或哺乳妇女的食物；用于成人的食物；老年人食物；和动物食物。
在一些实施方式中，本发明的经分离微生物、生物质或微生物油可作为添加剂直接使用或作为添加剂包括在下述产品的一种或多种中：油、起酥油、涂抹酱(spread)、其他脂肪成分、饮料、酱汁、基于乳制品或基于大豆的食物(比如奶、酸奶酪、乳酪或冰激淋)、烘焙商品、营养产品，例如作为营养补充剂(以胶囊或片剂形式)、维生素补充剂、膳食补充剂、粉状饮品、加工的或半加工的粉状食物产品及其组合。
可包括本发明的微生物油的食物组合物的部分列表包括，但不限于，基于大豆的产品(牛奶、冰激淋、酸奶酪、饮品、奶油、涂抹酱、增白剂)；汤和汤粉(soup mixes)；面团、糊状物和烘焙食物项目包括例如，精制烘焙食物、早点用谷物片、蛋糕、干酪饼、馅饼、杯形饼、曲奇、条形饼(bar)、面包、卷饼、饼干、松饼、馅饼皮、烤饼、烤面包片、薄脆饼干、甜点、点心、馅饼、燕麦花卷/小吃和土司糕点；糖果；硬糖(hardconfectionery)；巧克力和其他糖；口香糖；液态食物产品，例如牛奶、能量饮品、婴儿配方、碳酸饮品、茶、液态膳食、果汁、基于水果的饮品、基于蔬菜的饮品、维他命糖浆、膳食替代品、医药食物和糖浆；粉状混合饮料；糊剂；加工的鱼产品；加工的肉产品；处理的家禽产品；肉汁和酱汁；调味品(番茄酱、蛋黄酱等等)；基于植物油的涂抹酱；乳制品产品；酸奶酪；黄油、冷冻乳制品产品；冰激淋；速冻点心；冷冻酸奶酪；半固态食物产品比如婴儿食物；布丁和明胶甜点心；处理过和未处理过的奶酪；薄烤饼粉食物棒(包括能量棒)；华夫粉；色拉辅料；替代蛋粉；坚果和基于坚果的涂抹酱；咸味零嘴比如炸土豆片和其他土豆片或炸薯片、玉米片、玉米薄饼(tortilla chip)、挤出型零嘴、玉米花、脆饼干、煎马铃薯片和坚果；特种零嘴比如浇汁、干果零嘴、肉类零嘴、猪皮、健康食物棒和米/玉米蛋糕。
在一些实施方式中，本发明的微生物油可用来补充婴儿配方。可单独用本发明的微生物油或与得自产生花生四烯酸(ARA)微生物的物理精制油组合补充婴儿配方。
在一些实施方式中，组合物是动物饲料。“动物”表示属于动物界的任何非人类生物并且包括但不限于，水栖动物和陆生动物。术语“动物饲料”或“动物食物”是指意图用于非人类动物的任何食物，所述非人类动物不限于鱼；商业鱼；观赏鱼；仔鱼；双壳类；软体动物；介虫；贝类；虾；仔虾；卤虫；轮虫；海虾；滤食性动物；两栖动物；爬行动物；哺乳动物；家养动物；农场动物；动物园动物；户外动物(sport animal)；种畜；竞赛动物；表演动物；后嗣动物(heirloom animal)；稀有动物或将要灭绝的动物；同伴动物；宠物比如狗、猫、豚鼠、兔、大鼠、小鼠或马；灵长类比如猴类(例如卷尾猴、恒河猴、非洲绿猴、赤猴、短尾猴和长尾猴)、猿类、猩猩、狒狒、长臂猿和黑猩猩；犬科比如狗和狼；猫科比如猫、狮和虎；马科比如马、驴和斑马；食用动物比如奶牛、牛、猪和羊；蹄类动物比如鹿和长颈鹿；啮齿类比如小鼠、大鼠、仓鼠和豚鼠；等等。动物饲料包括但不限于水产养殖饲料、家养动物饲料包括宠物饲料、动物学动物饲料、耕畜饲料、家畜饲料或其组合。
在一些实施方式中，组合物是用于其肉或产品被人类消耗的任何动物，比如得自其的肉、蛋或奶用于人类消耗的任何动物的饲料或饲料补充剂。当饲养此类动物时，营养物比如某些脂肪酸可被掺入此类动物的肉、奶、蛋或其他产品中，以增加这些营养物的营养物含量。
在一些实施方式中，组合物是可被粉碎以形成被浮游动物、卤虫、轮虫和滤食性动物消耗的适当大小的颗粒的喷雾干燥材料。在一些实施方式中，通过组合物饲养的浮游动物、卤虫、轮虫进而饲养仔鱼、鱼、贝类、双壳类或介虫。
在一些实施方式中，组合物是药物组合物。合适的药物组合物包括，但不限于，抗炎性组合物、用于治疗冠心病的药物、用于治疗动脉硬化的药物、化疗剂、活性赋形剂、骨质疏松药物、兴奋剂、抗惊厥药、抗幽门螺旋杆菌药、用于治疗神经变性疾病的药、用于治疗退化性肝脏疾病的药物、抗生素、降胆固醇组合物和降甘油三酯组合物。在一些实施方式中，组合物是医药食物。医药食物包括下述食物，在医师的监督下将被外用消耗或施用的组合物中的食物，或意图用于下述条件的具体膳食状况管理的食物，所述条件基于认可的科学原则通过医学评价为特殊营养需求确定。
在一些实施方式中，微生物油可以剂量形式配制。剂量形式可包括，但不限于片剂、胶囊、扁胶囊、丹剂、丸剂、粉剂和粒剂，以及肠胃外剂量形式，所述肠胃外剂量形式包括但不限于包含有效量的微生物油的溶液、悬液、乳液和干粉。下述也是本领域中已知的：此类配方还可含有药物上可接受的稀释剂、填充剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、表面活性剂、疏水载剂、水溶性载剂、乳化剂、缓冲剂、湿润剂、保湿剂、助溶剂、防腐剂等等。施用形式可包括，但不限于片剂、锭剂、胶囊、囊片和丸剂，其含有微生物油和一种或多种合适的药物上可接受的载体。
对于口服施用，微生物油可与本领域中熟知的药物上可接受的载体组合。此类载体使得本发明的微生物油能被配制为片剂、丸剂、锭剂、胶囊、液体、凝胶、糖浆、膏剂悬液等等，用于被将被治疗的受试者口服摄取。在一些实施方式中，剂量形式是片剂、丸剂或囊片。可通过添加固态赋形剂，任选地研磨得到的混合物，且如果需要的话添加合适的助剂，之后处理颗粒混合物，以获得片剂或锭剂核，来获得用于口服使用的药物制剂。合适的赋形剂包括但不限于填充剂，比如糖，包括但不限于乳糖、蔗糖、甘露醇和山梨醇；纤维素制剂比如但不限于，玉米淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羟甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和聚维酮(PVP)。如果需要的话，可添加崩解剂，比如但不限于，交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂或海藻酸或其盐比如海藻酸钠。可口服使用的药物制剂包括但不限于由明胶制成的推入式胶囊以及由明胶和增塑剂(比如甘油或山梨醇)制成的软的密封的胶囊。
在一些实施方式中，组合物是化妆品。化妆品包括，但不限于，乳状剂、乳膏剂、洗剂、面膜、肥皂、洗发剂、洗涤物、面霜、调节剂、彩妆品(make-ups)、沐浴剂和分散液。化妆剂可以是药用的或非药用的。
在一些实施方式中，组合物是工业组合物。在一些实施方式中，组合物是一种或多种制造品的起始材料。制造品包括，但不限于，聚合物；摄影感光材料；洗涤剂；工业油或工业洗涤剂。例如，U.S.Pat.No.7,259,006描述了使用含DHA的脂肪和油用于产生二十二烷酸以及使用二十二烷酸产生感光材料。
在一些实施方式中，组合物是通过本领域已知的手段(比如通过使生物油进行酯转移来产生生物柴油)使本发明的生物油转化为基于脂质的生物燃料来制造的基于脂质的生物燃料。用于基于脂质的生物燃料目的的本发明的生物油的不同用途包括，但不限于，用作导热油、运输生物柴油、喷气燃料、燃料添加剂、特种燃料和润滑剂。在一些实施方式中，将生物油转化为基于脂质的生物燃料包括本领域中已知的化学处理和精炼技术，所述化学处理和精炼技术还可产生或被用来产生类似于石油蒸馏物的特种化学化合物。
包含组合物的试剂盒
本发明还涉及含有一个或多个本发明的组合物单位的试剂盒或包装。试剂盒或包装可包括包含本发明的经分离微生物、生物质或微生物油或其组合的食物产品、药物组合物、化妆品或工业组合物单位。试剂盒或包装还可包括包含本发明的经分离微生物、生物质或微生物油或其组合的用于制备食物、化妆品、药物组合物或工业组合物的添加剂。
在一些实施方式中，试剂盒或包装含有根据本发明的方法将被施用的一个或多个药物组合物单位。试剂盒或包装可含有一个剂量单位或多于一个剂量单位(即多个剂量单位)。如果多个剂量单位在试剂盒或包装中存在，任选地多个剂量单位可被安排用于连续施用。
任选地，本发明的试剂盒可含有与试剂盒的单位或剂量形式关联的说明书。此类说明书可以是由管理药物产品的制造、使用或出售的政府机构规定的形式，其内容反映了被政府机构批准而制造、使用或出售可用于人类施用来治疗病况或病症。说明书可以是任何形式，所述形式在根据本发明的方法使用试剂盒中的单位或剂量形式时传达信息。例如，说明书可以是印刷品形式或预先录制的媒介设备。
在患者检查期间，医学专业人员可确定本发明的方法之一的施用对患者而言是适当的，或者医师可确定患者的病况可被本发明的方法之一的施用改善。在制定任何治疗方案之前，医师可就例如与方案关联的各种风险和益处向患者提供建议。可给患者提供与方案关联的全部已知和可疑风险的充分公开。在一些实施方式中，医师可给患者提供关于方案的文献材料比如产品信息、教育材料等等。
本发明还涉及就治疗的方法对消费者培训的方法，所述方法包括在销售点连同消费信息分配剂量形式。在一些实施方式中，分配可在有药剂师或医疗服务提供者的销售点处发生。
术语“消费信息”可包括，但不限于，英语文本、非英语文本、可见图像、图解、电话录制、网站和现场客户服务代表获得。在一些实施方式中，消费信息提供了使用根据本发明的方法的剂量形式的指导、适当的年龄使用、适应症、禁忌症、适当配量、警告、网址的电话号码。在一些实施方式中，方法还包括给在定位中的相关人员提供专业信息以回答关于根据本发明的方法的所公开方案的使用的消费者问题。术语“专业信息”包括但不限于，关于当根据本发明的方法施用时的方案的信息，其设计用来使医学专业人员回答消费者问题。
“医学专业人员”包括，例如医师、医师助理、从业护士、药剂师和客户服务代表。
实施例
实施例1
确定了三种酵母菌株：ATCC登录号PTA-11615(菌株28428)、ATCC登录号PTA-11616(菌株29404)和ATCC登录号PTA-11617(菌株29794)的身份。将酵母涂布在麦芽琼脂上。进行DNA提取并行进核糖体基因序列分析。在D1D2和ITS区域与来自公用数据库中的酵母菌株的已知DNA序列进行序列同源性比较。还针对与已知的酵母种的比较进行形态学检查。
菌株28428DNA序列(图1)在分析的第一个区域(大亚基的D1/D2结构域)中与Pseudozyma aphidis的典型菌株的Genbank序列100％匹配，并与Pseudozyma rugulosa的典型菌株(图2)相差一个错配。545个可能匹配的第二个区域(ITS)中，菌株显示了与P.aphidisd的典型菌株的2个错配和与P.rugulosa的典型菌株的又一次一个错配(图3)。这两个种显现出密切的相关性，显示在它们之中和之间的遗传变异性。P.aphidis和P.rugulosa之间的形态学特征也非常相似并且与菌株28428中的形态学观察匹配，所述形态学观察显示了具有流苏边缘的扁平、暗淡、微黄色奶油状的菌落和在短的齿状突起上有极芽的大小可变的纺锤形细胞。基于掌握的数据，如P.aphidis或P.rugulosa一样更具体地区别身份是不可能的。
菌株29404DNA序列(图4)与Sporidiobolus pararoseus CBS 484的Genbank序列在两个区域中都完美地匹配。与种CBS 491的典型菌株的比较在D1D2中具有2个错配并且在ITS中具有2个错配(图5和图6)。形态学特征(单个或以短链形式的卵形细胞，和具有光滑表面和边缘光滑的珊瑚红色菌落)证实了身份。该菌株的身份是Sporidiobolus pararoseus。
菌株29794DNA序列(图7)显示了与Rhodotorula ingeniosa(CBS 4240)的典型菌株在D1D2结构域(图8)中等同的序列匹配和在ITS区域(图9)中的590个可能匹配中仅一个错配，这可能是由于种内变异。细胞和菌落形态学(单个或以成对形式、薄的荚膜的卵形至圆柱形细胞，和微黄色、反光的、高粘液型菌落)证实身份。该菌株的身份是R ingeniosa。
实施例2
将Sporidiobolus pararoseus和Rhodotorula ingeniosa的经分离微生物在1/4XBFGM培养基(表1)中生长。从琼脂平板中挑取每一种菌株并接种进摇瓶中。接着摇瓶用来接种另一摇瓶(含有50ml培养基的250ml锥形瓶)，然后生长7天。7天后，通过离心收获摇瓶，用水洗涤球团并再次离心。将最终的球团冷冻干燥，测量重量，并通过FAME程序测定总脂肪(总脂肪酸)和脂肪酸谱图。
将Pseudozyma aphidis/rugulosa的经分离微生物在下述培养基(培养基2)中生长并测定脂肪酸谱图。关于所有三个菌株的脂肪酸谱图分析在表2中示出。
培养基2：
15g/L礁海晶(Reef Crystal)人造海盐
1g/L葡萄糖
1g/L谷氨酸一钠
0.2g/L酵母提取物
1mL/L维生素混合物*
5mL/L PII痕量金属混合物**
0.1g/L青霉素G
0.1g/L硫酸链霉素
*维生素混合物含有100mg/L硫胺、0.5mg/L生物素、0.5g/L氰钴胺
**PII痕量金属混合物含有：
6.0g/L Na2EDTA
0.29g/L FeCl3·6H2O
6.84g/L H3BO3
0.86g/L MnCl2·4H2O
0.06g/L ZnCl2
0.026g/L CoCl2·6H2O
0.052 g/L NiSO4·6H2O
0.002 g/L CuSO4·5H2O
0.005 g/L Na2MoO4·2H2O
实施例3
使与ATCC登录号PTA-11615(Pseudozyma aphidis/rugulosa；菌株28428)、ATCC登录号PTA-11616(Sporidiobolus pararoseus；菌株29404)和ATCC登录号PTA-11617(Rhodotorula ingeniosa；菌株29794)的微生物具有匹配的DNA序列的经分离微生物生长并测定总脂肪(总脂肪酸)和脂肪酸谱图。结果在表3和4中示出。
表4
本文描述的所有各个方面、实施方式和选项可以以任何和所有变化形式组合。
本说明书中提到的所有出版物、专利和专利申请通过引用并入本文，就像每一单独的出版物、专利或专利申请被特别地且单独地提到以通过引用并入本文一样。
以下内容对应于母案申请中的原始权利要求书，现作为说明书的一部分并入此处：
1.从由Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus和Rhodotorula ingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于30％饱和脂肪酸的微生物油。
2.根据项1的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少30％。
3.根据项1或2的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少40％。
4.根据项1至3的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少50％。
5.根据项1至4的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少60％。
6.根据项1至5的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于30％油酸的微生物油。
7.根据项1至6的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于40％油酸的微生物油。
8.根据项1至7的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于50％油酸的微生物油。
9.根据项1至8的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于60％油酸的微生物油。
10.根据项1至9的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于5％亚油酸的微生物油。
11.根据项1至10的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于10％亚油酸的微生物油。
12.根据项1至11的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于15％亚油酸的微生物油。
13.根据项1至12的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于25％饱和脂肪酸的微生物油。
14.根据项1至13的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于25％棕榈酸的微生物油。
15.根据项1至14的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于20％棕榈酸的微生物油。
16.根据项1至15的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于15％棕榈酸的微生物油。
17.根据项1至16的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于10％的20个或更多碳链长度的长链多不饱和脂肪酸的微生物油。
18.根据项1至17的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于5％的20个或更多碳链长度的长链多不饱和脂肪酸的微生物油。
19.从由Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa和Rhodotorula ingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少30％。
20.根据项19的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少40％。
21.根据项19或20的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少50％。
22.Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少50％。
23.根据项22的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少55％。
24.根据项22或23的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少60％。
25.从由Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidioboluspararoseus和Rhodotorula ingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计0.5％至30％饱和脂肪酸的微生物油，并且其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的30％至80％。
26.从由Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidioboluspararoseus和Rhodotorula ingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计30％至70％油酸和以重量计5％至30％亚油酸的微生物油。
27.Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物，其中所述微生物能以按重量计占干细胞重量的50％至80％的量产生脂肪酸，并且其中所述微生物能产生包含以重量计5％至30％亚油酸的微生物油。
28.以ATCC登录号PTA-11615保藏的经分离微生物。
29.以ATCC登录号PTA-11616保藏的经分离微生物。
30.以ATCC登录号PTA-11617保藏的经分离微生物。
31.具有以ATCC登录号PTA-11615保藏的微生物的特征的经分离微生物。
32.具有以ATCC登录号PTA-11616保藏的微生物的特征的经分离微生物。
33.具有以ATCC登录号PTA-11617保藏的微生物的特征的经分离微生物。
34.包含根据项1至33任一项的经分离微生物或其混合物的经分离的生物质。
35.根据项34的经分离的生物质，其中以重量计至少30％的生物质的干细胞重量是脂肪酸。
36.包含经根据项1至33任一项的分离微生物或其混合物的培养物。
37.根据项36的培养物，其中所述培养物包含至少5g/L的所述经分离微生物的生物质。
38.用于产生微生物油的方法，其包括：
使根据项1至33的任一项的经分离微生物或其混合物在培养基中生长以产生微生物油。
39.根据项38的方法，其中在从由蔗糖、葡萄糖、果糖、木糖、甘油、甘露糖、阿拉伯糖、乳糖、半乳糖、麦芽糖、纤维素、木质纤维素及其组合组成的组中选择的碳源的存在下，使所述经分离微生物生长。
40.根据项38的方法，还包括提取微生物油。
41.产生微生物油的方法，其包括从根据项34或35的经分离的生物质中提取微生物油。
42.项38至41的任一项的方法，其中产生了包含经分离微生物的生物质并且培养物包含至少5g/L的生物质。
43.通过项38至42的任一项的方法产生的微生物油。
44.根据项1至37和43的任一项的经分离微生物、生物质、培养物或微生物油用于制造针对非人类动物或人类的食物、补充剂、化妆品或药物组合物的用途。

Claims (27)

1.从由Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus和Rhodotorula ingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于30％饱和脂肪酸的微生物油。
2.根据权利要求1的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少30％。
3.根据权利要求1或2的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少40％。
4.根据权利要求1至3的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少50％。
5.根据权利要求1至4的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少60％。
6.根据权利要求1至5的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于30％油酸的微生物油。
7.根据权利要求1至6的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于40％油酸的微生物油。
8.根据权利要求1至7的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于50％油酸的微生物油。
9.根据权利要求1至8的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于60％油酸的微生物油。
10.根据权利要求1至9的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于5％亚油酸的微生物油。
11.根据权利要求1至10的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于10％亚油酸的微生物油。
12.根据权利要求1至11的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计多于15％亚油酸的微生物油。
13.根据权利要求1至12的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于25％饱和脂肪酸的微生物油。
14.根据权利要求1至13的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于25％棕榈酸的微生物油。
15.根据权利要求1至14的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于20％棕榈酸的微生物油。
16.根据权利要求1至15的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于15％棕榈酸的微生物油。
17.根据权利要求1至16的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于10％的20个或更多碳链长度的长链多不饱和脂肪酸的微生物油。
18.根据权利要求1至17的任一项的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计少于5％的20个或更多碳链长度的长链多不饱和脂肪酸的微生物油。
19.从由Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa和Rhodotorula ingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少30％。
20.根据权利要求19的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少40％。
21.根据权利要求19或20的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少50％。
22.Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少50％。
23.根据权利要求22的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少55％。
24.根据权利要求22或23的经分离微生物，其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的至少60％。
25.从由Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus和Rhodotorula ingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计0.5％至30％饱和脂肪酸的微生物油，并且其中所述微生物能以下述量产生脂肪酸，所述量是以重量计干细胞重量的30％至80％。
26.从由Pseudozyma aphidis、Pseudozyma rugulosa、Sporidiobolus pararoseus和Rhodotorula ingeniosa组成的组中选择的种的经分离微生物，其中所述微生物能产生包含以重量计30％至70％油酸和以重量计5％至30％亚油酸的微生物油。
27.Sporidiobolus pararoseus种的经分离微生物，其中所述微生物能以按重量计占干细胞重量的50％至80％的量产生脂肪酸，并且其中所述微生物能产生包含以重量计5％至30％亚油酸的微生物油。
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