CN107751697A - 小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备方法，属于生物技术领域。该方法将小球藻粉和去离子水按照1:20～50比例混合均匀，将混合液在110～121℃加热30～60分钟，离心15～30分钟后弃去沉淀，将上清液超滤、超滤液冷冻干燥获得小球藻精。将螺旋藻粉和水按照1:10～20比例混合，溶胀24小时，然后在25～40℃、搅拌转速为100～400rpm条件下搅拌浸出2～4小时，浸出液离心15～30分钟，上清液通过超滤除去小分子杂质，获得色价值大于0.8的藻蓝蛋白溶液，将藻蓝蛋白溶液超滤、超滤液冷冻干燥获得藻蓝蛋白粉。将获得的藻蓝蛋白和小球藻精和白砂糖及苯甲酸钠、茶多酚等食品添加剂和水混合配制成具有保健功能的功能饮品，用0.22μm滤膜过滤除菌，然后封装。该方法操作简单、可靠，可以进行工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，特别是指一种小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备方法。
背景技术
螺旋藻含有多种维生素、蛋白质、脂肪、碳水化合物、矿物质和微量元素，比例科学合理，具有广泛的食用、保健和药用价值，可以促进人体新陈代谢，提高机体免疫力，抗辐射，辅助癌症放、化疗，降低放疗、化疗副作用等作用，是一种理想的纯天然保健食品，被联合国粮农组织和联合国世界食品协会推荐为“二十一世纪最理想的食品”，从螺旋藻中提取的活性物质也被认为是无害的。
螺旋藻中含有丰富的藻蓝蛋白(藻粉重量的6～15％)，是非常少见的天然蓝色色素和营养素，具有独特的药用功效和荧光性质。研究表明藻蓝蛋白是抗氧化剂，具有清除自由基和抗炎症的功效；可以辅助治疗癌症，可以作为荧光试剂用于临床诊断。
世界上没有任何动植物像小球藻那样能够每20h增长4倍，主要是由于小球藻的生长因子决定的。小球藻生长因子(Chlorella Growth Factor，CG F)，也叫小球藻精，是细胞活性物质，包括氨基酸、核酸、多糖、多肽、蛋白质、酶、维生素、矿物质，被称为“类荷尔蒙”。小球藻精具有：激活淋巴细胞、增强人机体免疫能力，活化人体细胞，促进儿童生长发育，抵抗外来疾病入侵，含有许多修复人体器官所需要的核蛋白，可治疗有机物、重金属等中毒；防治胃溃疡、高血压和心血管等疾病。因此，小球藻精在食品、饮品、保健品、医药等领域具有广阔的应用前景。
虽然藻蓝蛋白和小球藻精的保健功能研究很多，但是目前市场上尚未有藻蓝蛋白和小球藻精的功能性饮品，本发明提供了一种制备小球藻精藻蓝蛋白功能性饮品的方法，对改善亚健康人群的健康状况和促进我国整体健康水平具有重要意义。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备方法。
该方法具体包括如下步骤：
(1)小球藻精制备：
A称取小球藻粉，加入去离子水，搅拌均匀后配成2％～5％的小球藻液，在110～121℃加热提取30～80分钟，得到小球藻热提取物；
B将步骤A得到的小球藻热提取物冷却至室温，在4℃、6000～10 000g下离心15～30分钟，得到小球藻精溶液；
C将步骤B得到的小球藻精溶液超滤，超滤液冷冻干燥得到小球藻精冻干粉；
(2)藻蓝蛋白制备：
D称取螺旋藻粉，加入去离子水，搅拌均匀后配成5％～10％的螺旋藻液，室温溶胀12～24小时，然后在25～40℃、搅拌转速为100～400rpm条件下搅拌浸出2～4小时；
E将步骤D所得浸出液在4℃、6000～10 000g下离心15～30分钟，上清液超滤除去小分子杂质，获得色价值(OD620/OD280)大于0.8的藻蓝蛋白溶液；
F将步骤E中得到的藻蓝蛋白溶液超滤，超滤液冷冻干燥获得藻蓝蛋白冻干粉；
(3)小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备：
称取步骤(1)制备的小球藻精冻干粉和步骤(2)制备的藻蓝蛋白冻干粉加入去离子水中，制成小球藻精藻蓝蛋白饮品，并加入食品添加剂调节功能饮品的口味，用0.22μm滤膜过滤除菌，然后封装。
其中，步骤C和步骤E中超滤截留分子量为8000～15000Da。
步骤A中加热提取采用高压锅或灭菌锅。
步骤(3)小球藻精藻蓝蛋白功能饮品中小球藻精含量为0.4mg/L～1.0mg/L，藻蓝蛋白含量为0.4mg/L～1.0mg/L。
步骤(3)中食品添加剂包括白砂糖、茶多酚和柠檬酸等。
步骤(3)小球藻精藻蓝蛋白功能饮品中柠檬酸含量为0.4g/L～1g/L。
本发明的上述技术方案的有益效果如下：
上述方案中，采用热提法提取小球藻精，再通过超滤纯化小球藻精，冷冻干燥获得小球藻精冻干粉；采用去离子水提取藻蓝蛋白过程中不添加化学试剂，安全可靠，同时采用冷冻离心和冷冻干燥方法制备藻蓝蛋白，藻蓝蛋白生化活性损失小，因此采用本方法提取的藻蓝蛋白冻干粉可最大程度的保持其生化活性，采用冻干粉配制功能样品操作简单、可靠，可以进行工业化生产。
附图说明
图1为本发明的小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备方法技术路线图。
具体实施方式
为使本发明要解决的技术问题、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图及具体实施例进行详细描述。
本发明提供一种小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备方法，其技术路线如图1所示。
实施例1
(1)称取小球藻粉40克，加入含有1200毫升去离子水的2L三角瓶中搅拌均匀，在高压灭菌锅中121℃条件下浸出40分钟。
(2)浸出液用冷冻离心机在4℃、离心力为8000g条件下离心15分钟，上清液即小球藻精溶液。
(3)将小球藻精溶液用截留分子量为8 000Da的超滤膜超滤，即得小球藻精溶液。
(4)将小球藻精溶液减压蒸馏至1/4体积，浓缩液放在冰箱中-20℃冷冻，然后在冷冻干燥机中冷冻干燥即得小球藻精冻干粉。
(5)称取螺旋藻粉100克，加入到含有1500毫升去离子水的2升烧杯中搅拌均匀后室温静置24小时，使螺旋藻溶胀。
(6)将溶胀的螺旋藻溶液在200rpm、35℃条件下搅拌浸出2小时。
(7)将螺旋藻浸出液在4℃、离心力为8 000g条件下离心15分钟，上清液即藻蓝蛋白粗提液。
(8)将藻蓝蛋白粗提液用截留分子量为8 000Da的超滤膜超滤，超滤液即藻蓝蛋白溶液，用紫外可见光分光光度计检测藻蓝蛋白溶液的OD620和OD280,其OD620/OD280为0.96，属于食品级藻蓝蛋白。
(9)将藻蓝蛋白溶液在冰箱中-20℃冷冻，然后在真空冷冻干燥机中冷冻干燥获得藻蓝蛋白冻干粉。
(10)称取小球藻精冻干粉1mg、藻蓝蛋白冻干粉1mg、白砂糖16g、柠檬酸1mg、茶多酚1.6g，加入2升去离子水配成小球藻精藻蓝蛋白功能饮品，用0.22μm滤膜过滤除菌，然后封装。
实施例2
(1)称取小球藻粉30克，加入到含有1200毫升去离子水2L三角瓶中，搅拌均匀后在高压灭菌锅中115℃条件下浸出50分钟。
(2)浸出液用冷冻离心机在4℃、离心力为10 000g条件下离心20分钟，上清液即是小球藻精溶液。
(3)将小球藻精溶液用截留分子量为10 000Da的超滤膜超滤，即得小球藻精溶液。
(4)将小球藻精溶液减压蒸馏至约1/5体积，浓缩液放在冰箱中-20℃冷冻，然后在冷冻干燥机中冷冻干燥即得小球藻精冻干粉。
(5)称取螺旋藻粉80克，加入到含有1200毫升去离子水的2升烧杯中搅拌均匀后室温静置24小时，使螺旋藻溶胀。
(6)将溶胀的螺旋藻溶液在300rpm、40℃条件下搅拌浸出2小时。
(7)将螺旋藻浸出液在4℃、离心力为10 000g条件下离心15分钟，上清液即藻蓝蛋白粗提液。
(8)将藻蓝蛋白粗提液用截留分子量为10 000Da的超滤膜超滤，超滤液即藻蓝蛋白溶液，用紫外可见光分光光度计检测藻蓝蛋白溶液的OD620和OD280,其OD620/OD280为1.0，属于食品级藻蓝蛋白。
(9)将藻蓝蛋白溶液在冰箱中-20℃冷冻，然后在真空冷冻干燥机中冷冻干燥获得藻蓝蛋白冻干粉。
(10)称取小球藻精冻干粉0.6mg、藻蓝蛋白冻干粉0.4mg、白砂糖10g、柠檬酸0.4mg、茶多酚0.6g，加入1升去离子水配成小球藻精藻蓝蛋白功能饮品，用0.22μm滤膜过滤除菌，然后封装。
实施例3
(1)称取小球藻粉30克，加入到含有1200毫升去离子水2L三角瓶中，搅拌均匀后在高压灭菌锅中121℃条件下浸出60分钟。
(2)浸出液用冷冻离心机在4℃、离心力为10 000g条件下离心20分钟，上清液即是小球藻精溶液。
(3)将小球藻精溶液用截留分子量为10 000Da的超滤膜超滤，即得小球藻精溶液。
(4)将小球藻精溶液减压蒸馏至约1/5体积，浓缩液放在冰箱中-20℃冷冻，然后在冷冻干燥机中冷冻干燥即得小球藻精冻干粉。
(5)称取螺旋藻粉80克，加入到含有1200毫升去离子水的2升烧杯中搅拌均匀后室温静置24小时，使螺旋藻溶胀。
(6)将溶胀的螺旋藻溶液在300rpm、40℃条件下搅拌浸出2小时。
(7)将螺旋藻浸出液在4℃、离心力为10 000g条件下离心15分钟，上清液即藻蓝蛋白粗提液。
(8)将藻蓝蛋白粗提液用截留分子量为10 000Da的超滤膜超滤，超滤液即藻蓝蛋白溶液，用紫外可见光分光光度计检测藻蓝蛋白溶液的OD620和OD280,其OD620/OD280为1.06，属于食品级藻蓝蛋白。
(9)将藻蓝蛋白溶液在冰箱中-20℃冷冻，然后在真空冷冻干燥机中冷冻干燥获得藻蓝蛋白冻干粉。
(10)称取小球藻精冻干粉0.6mg、藻蓝蛋白冻干粉0.4mg、白砂糖10g、柠檬酸0.4mg、茶多酚0.5g，加入1升去离子水配成小球藻精藻蓝蛋白功能饮品，用0.22μm滤膜过滤除菌，然后封装。
以上所述是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明所述原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (6)
1.一种小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
(1)小球藻精制备：
A称取小球藻粉，加入去离子水，搅拌均匀后配成2％～5％的小球藻液，在110～121℃加热提取30～80分钟，得到小球藻热提取物；
B将步骤A得到的小球藻热提取物冷却至室温，在4℃、6000～10 000g下离心15～30分钟，得到小球藻精溶液；
C将步骤B得到的小球藻精溶液超滤，超滤液冷冻干燥得到小球藻精冻干粉；
(2)藻蓝蛋白制备：
D称取螺旋藻粉，加入去离子水，搅拌均匀后配成5％～10％的螺旋藻液，室温溶胀12～24小时，然后在25～40℃、搅拌转速为100～400rpm条件下搅拌浸出2～4小时；
E将步骤D所得浸出液在4℃、6000～10 000g下离心15～30分钟，上清液超滤除去小分子杂质，获得色价值大于0.8的藻蓝蛋白溶液；
F将步骤E中得到的藻蓝蛋白溶液超滤，超滤液冷冻干燥获得藻蓝蛋白冻干粉；
(3)小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备：
称取步骤(1)制备的小球藻精冻干粉和步骤(2)制备的藻蓝蛋白冻干粉加入去离子水中，制成小球藻精藻蓝蛋白饮品，并加入食品添加剂调节功能饮品的口味，用0.22μm滤膜过滤除菌，然后封装。
2.根据权利要求1所述的小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备方法，其特征在于：所述步骤C和步骤E中超滤截留分子量为8000～15000Da。
3.根据权利要求1所述的小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备方法，其特征在于：所述步骤A中加热提取采用高压锅或灭菌锅。
4.根据权利要求1所述的小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备方法，其特征在于：所述步骤(3)小球藻精藻蓝蛋白功能饮品中小球藻精含量为0.4mg/L～1.0mg/L，藻蓝蛋白含量为0.4mg/L～1.0mg/L。
5.根据权利要求1所述的小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中食品添加剂包括白砂糖、茶多酚和柠檬酸。
6.根据权利要求1所述的小球藻精藻蓝蛋白功能饮品制备方法，其特征在于：所述步骤(3)小球藻精藻蓝蛋白功能饮品中柠檬酸含量为0.4g/L～1g/L。
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