CN107737121A - 补骨脂宁用于制备治疗动脉粥样硬化的药物的用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了补骨脂宁用于制备治疗动脉粥样硬化的药物的用途，补骨脂宁可以用于预防或治疗动脉粥样硬化、高脂血症、非酒精性脂肪肝。

Description

补骨脂宁用于制备治疗动脉粥样硬化的药物的用途

技术领域

本发明涉及药物新应用领域，公开了补骨脂宁(Corylin)的抗动脉粥样硬化活性以及补骨脂宁在制备抗动脉粥样硬化药物中的新用途。

背景技术

心脑血管疾病是当代危害人体生命和健康的最严重疾病，是中、老年人的常见病和多发病，在许多国家和地区的发病率和死亡率皆位于重病之首。动脉粥样硬化(Atherosclerosis，AS)是冠心病、脑梗死、外周血管病的主要原因。脂质代谢障碍为动脉粥样硬化的病变基础，以受累动脉病变从内膜开始，一般先有脂质和复合糖类积聚、出血及血栓形成，进而纤维组织增生及钙质沉着，并有动脉中层的逐渐蜕变和钙化，导致动脉壁增厚变硬、血管腔狭窄等现象为特点。Richard等经过大量流行病学调查和实验研究表明，高血脂、吸烟、糖尿病、高血压、遗传因素等都是与动脉粥样硬化发生有关的危险因素，而血脂过高是导致动脉粥样硬化的最严重因素之一。其中血清胆固醇水平与动脉粥样硬化的发生呈正相关。因此，限制胆固醇吸收，升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL)水平，抑制氧化应激水平及动脉壁炎症已成为防治动脉粥样硬化的重要手段。

目前对于治疗动脉粥样硬化的药物仍以西药为主，临床上主要以他汀类降血脂西药治疗为主，需要长期服药，且副作用较多，具有药物依赖性。近年来，随着人们生活水平的提高，加上人口结构的老龄化，心血管疾病的发病率呈逐年上升的趋势，开发治疗效果较好的心脑血管疾病的药物已经成为当今药物研究的热点，我们的实验结果显示：高纯度的补骨脂宁在治疗动脉粥样硬化方面具有良好的应用前景。

《雷公炮炙论》记载：“补骨脂，其性辛、苦、温，归肾、脾经，具温肾助阳、纳气平喘、温脾止泻之功效；外用消风祛斑，用于肾阳不足，阳痿遗精，遗尿尿频，腰膝冷痛，肾虚作喘，五更泄泻；外用治白癜风，斑秃。现代药理学研究表明补骨脂具有非常高的药用价值，具有扩张血管、增加心肌收缩力、抗菌、抗肿瘤、免疫调节等多种药理作用。补骨脂宁为补骨脂有效成分之一。至今未见有关补骨脂宁治疗或预防动脉粥样硬化的报道。因此，对于本发明涉及的补骨脂宁在制备治疗动脉粥样硬化药物中的用途属于首次公开，具备突出的实质性特点，同时用于动脉粥样硬化的防治显然具有显著的进步。

发明内容

本发明就是针对上述问题提供补骨脂宁在制备抗动脉粥样硬化药物中的应用，用补骨脂宁制备的抗动脉粥样硬化的药物，具有较好的疗效。

本发明提供的药物新应用领域是：补骨脂宁在制备抗动脉粥样硬化药物中的作用。

按药剂学方法，拟将本发明的补骨脂宁制备成多个临床药物剂型用于抗动脉粥样硬化，包括口服给予剂型。所指的口服制剂选自片剂、胶囊剂、滴丸剂、口服液体制剂中的任意一种。

本发明的抗动脉粥样硬化药物的辅料是指溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂等常规赋形剂。本发明抗动脉粥样硬化药物的其他配伍用药物，指的是有效剂量的补骨脂宁为一定的药物原料，配伍其他允许合用的中药或化学药品。

所述化合物补骨脂宁，结构如式(I)所示：

结构类似物compound A

结构类似物Neobavasioflavone

以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。

具体实施方式

对本发明所述技术方案作进一步的详细说明。

附图说明

附图1.补骨脂宁对高脂诱导的动脉粥样硬化模型小鼠主动脉油红染色，

附图2.补骨脂宁对高脂诱导的动脉粥样硬化模型小鼠主动脉HE染色，

附图3.补骨脂宁对高脂诱导的动脉粥样硬化模型小鼠VCAM-1染色，

附图4.补骨脂宁对高脂诱导的动脉粥样硬化模型小鼠LAPM-1染色

附图5.补骨脂宁及其类似物对甾醇调节元件结合蛋白SREBPs荧光酶素报告基因影响的结果图

表1.补骨脂宁对高脂诱导的小鼠动脉粥样硬化模型体重变化

表2.补骨脂宁对高脂诱导的小鼠动脉粥样硬化模型进食量变化

表3.血浆中总胆固醇含量

表4血浆中甘油三酯含量

表5血浆中高密度脂蛋白含量

表6.血浆中低密度脂蛋白含量

实施例1

补骨脂宁在防治动脉粥样硬化疾病方面用途研究

1、动物模型制备以及分组

(1)动物造模

6周龄雄性ApoE-/-小鼠40只，普通饲养适应性喂养1周后，每天喂食高脂饲料，记录体重，持续16周。

(2)动物分组及给药：

将小鼠共分为5组：分别为ApoE-/-(空白组)、ApoE-/-(模型组)、阳性药 (洛伐他汀组)，ApoE-/-(补骨脂宁低浓度组)、ApoE-/-(补骨脂宁高浓度组)每组为8只，每天给予高脂喂食，同时模型组灌胃CMC-Na，给药组每天灌胃 CMC-Na配制的洛伐他汀和高低浓度补骨脂宁

空白组：ApoE-/-小鼠一直给予高脂饲料，同时每天根据体重给予相应体积的CMC-Na，持续16周。

模型组：ApoE-/-小鼠每天高脂饲料，同时每天根据体重给予相应体积的 CMC-Na

给药组：ApoE-/-小鼠每天喂高脂饲料，同时每天根据体重给予相应浓度为 30mg/kg的洛伐他汀，15mg/kg的补骨脂宁和30mg/kg的Corglin，持续16周。

2、样本采集

(1)血浆样本的采集

给药到16周，死前禁食不禁水，取血方式：心脏取血，置于肝素化的离心管中，4℃下3500rpm离心15分钟，血浆样品储存于-80℃中。

3、表型和生化指标检测

(1)体重：

16周可诱导小鼠动脉粥样硬化形成，我们观察到模型组小鼠体重显著增加，洛伐他汀组和补骨脂宁高低浓度给药组均能降低小鼠的体重。

表1.高脂诱导的小鼠模型体重原始数据

表2.高脂诱导的小鼠模型进食量原始数据

(2)血脂水平的检测

血浆生化因子：血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。

脂质代谢异常中TC-CHO与LDL-C两者的升高是诱发AS的首要条件，是判断模型成功的重要标准。根据文献动脉粥样硬化斑块的形成与低密度脂蛋白胆固醇 (LDL-C)升高有关，实验结果显示血浆中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇在洛伐他汀处理组和补骨脂宁给药组均能显著降低。动脉粥样硬化指标中HDL-C的含量升高是具有抗动脉粥样硬化的作用，HDL-C是动脉粥样硬化的保护因子，在治疗动脉粥样硬化疾病中不仅关注降低LDL-C水平，升高血浆中 HDL-C也是非常重要的，我们的模型组和给药组虽然相比于空白组无显著性差异，但是从结果可以看出补骨脂宁明显的治疗作用。

表3.血清中总胆固醇含量单位：mg/dL

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

表4.血清中总甘油三酯含量，单位：mg/dL

*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

表5.血清中高密度脂蛋白含量单位：mg/dL

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

表6.血清中低密度脂蛋白单位：mg/dL

与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001

实例2

补骨脂宁在防治动脉粥样硬化疾病方面用途研究

1、动物模型制备以及分组

(1)动物造模

6周龄雄性ApoE-/-小鼠40只，普通饲养适应性喂养1周后，每天喂食高脂饲料，记录体重，持续16周。

(2)动物分组及给药：

将小鼠共分为5组：分别为ApoE-/-(空白组)、ApoE-/-(模型组)、阳性药 (洛伐他汀组)，ApoE-/-(补骨脂宁低浓度组)、ApoE-/-(补骨脂宁高浓度组)每组为8只，每天给予高脂喂食，同时模型组灌胃CMC-Na，给药组每天灌胃 CMC-Na配制的洛伐他汀和高低浓度补骨脂宁

空白组：ApoE-/-小鼠一直给予高脂饲料，同时每天根据体重给予相应体积的CMC-Na，持续16周。

模型组：ApoE-/-小鼠每天高脂饲料，同时每天根据体重给予相应体积的 CMC-Na

给药组：ApoE-/-小鼠每天喂高脂饲料，同时每天根据体重给予相应浓度为 30mg/kg的洛伐他汀，15mg/kg的补骨脂宁和30mg/kg的Corglin，持续16周。

2、样本采集

(1)组织样本的采集

打开胸腹腔，沿腹中线切开皮肤，暴露肝、脾、肺、肾等器官，将其置于4％多聚甲醛溶液中，而将心脏和主动脉一起置于4％多聚甲醛溶液。

(2)组织病理形态学观察及图像分析：取出带有主动脉弓的心脏，将主动脉弓处多余脂肪剔除干净，横切左右心房，使切面垂直于主动脉根部冰冻切片进行油红0染色。同时将小鼠主动脉窦的横向切片做HE染色。

实验数据中最重要的部分是小鼠动脉粥样硬化斑块形成和病变程度检测，分离不同处理组小鼠的主动脉弓进行油红染色。

数据结果附图1，显示他汀组和补骨脂宁组的斑块脂质堆积于对照组相比有明显改善，主动脉弓和胸主动脉处斑块的形成补骨脂宁组均明显改善，这一结果显示补骨脂宁具有抗动脉粥样硬化的重要依据。

数据结果附图2，主动脉HE病理切片染色观察。显示空白组动脉内膜光滑、完整、无损伤，腔内无血栓形成。模型组组小鼠动脉内膜见吞噬脂质的泡沫细胞聚集形成灶状占据血管内，即大量泡沫细胞沉积，内膜增厚，平滑肌细胞增生，且光镜下可见斑块形成，表明ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型建立成功。阳性药和给药组小鼠中主动脉纤维斑块有明显改善，有少量泡沫细胞聚集为主的灶状斑块。

VCAM-1、LAPM-1等黏附分子的表达与炎症性反应的动脉粥样硬化发生发展有重大关系。。随着各种炎症因素刺激内皮细胞，引起血管内皮功能障碍，从而引起一系列有大量介质参与的炎症反应。受损的内皮细胞上调表达的黏附分子VCAM-1、LAPM-1，调节血液中的单核细胞、淋巴细胞的黏附，其后诱导化学趋化因子的表达，其后诱发一系列生理反应最终导致AS的发生与发展。如附图3，4，所示，VCAM-1和LAPM-1在模型组主动脉表达高于空白组，洛伐他汀组和补骨脂宁给药组均有明显改善。

实例3

SREBPs是甾醇调节元件结合蛋白，是脂质代谢的重要转录因子，在脂质代谢的调节过程中起到重要的作用，补骨脂宁能够以SREBP为靶点调节脂质代谢，如附图5所示，相似的我们发现了补骨脂宁的类似物compound A和 Neobavasioflavone，也能够影响SREBPs，那么也在脂质调节过程起到关键的作用。

Claims (4)

1.补骨脂宁用于制备治疗或预防治疗动脉粥样硬化的组合物。

2.补骨脂宁用于制备治疗或预防高脂血症的组合物。

3.补骨脂宁用于制备治疗或预防非酒精性脂肪肝的组合物。

4.补骨脂宁用于制备治疗或预防动脉粥样硬化、高脂血症、非酒精性脂肪肝中任意一种或多种的组合物，其特征在于

为市售或按已知方法制备的补骨脂宁或其药用盐、水合物或无水物；

其中补骨脂宁药用盐包括碱式盐、酸式盐、如钠盐、钾盐和钙盐，马来酸盐，柠檬酸盐；

组合物制成：药物、保健品、或功能性食品，赋形剂或载体为制药或食品领域中常用的赋形剂或载体，如稀释剂，崩解剂，润滑剂等。