CN107727436B - 一种小型昆虫血淋巴收集方法 - Google Patents

一种小型昆虫血淋巴收集方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107727436B
CN107727436B CN201710971015.6A CN201710971015A CN107727436B CN 107727436 B CN107727436 B CN 107727436B CN 201710971015 A CN201710971015 A CN 201710971015A CN 107727436 B CN107727436 B CN 107727436B
Authority
CN
China
Prior art keywords
insect
small
hemolymph
abdomen
needle
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201710971015.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107727436A (zh
Inventor
张晓红
石瑛
赵文婧
郝雪峰
郭利敏
温海英
霍海燕
王媚媚
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Taiyuan Normal University
Original Assignee
Taiyuan Normal University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Taiyuan Normal University filed Critical Taiyuan Normal University
Priority to CN201710971015.6A priority Critical patent/CN107727436B/zh
Publication of CN107727436A publication Critical patent/CN107727436A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107727436B publication Critical patent/CN107727436B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/02—Devices for withdrawing samples
    • G01N1/10—Devices for withdrawing samples in the liquid or fluent state
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Catching Or Destruction (AREA)

Abstract

本发明属于昆虫生理生化领域，具体涉及一种小型昆虫血淋巴收集方法，所要解决的技术问题是提供一种小型昆虫血淋巴收集方法，能最大程度的保证收集的小型昆虫的血量，有利于下一步研究，采用的技术方案为：一种小型昆虫血淋巴收集方法，包括以下步骤：麻醉虫体，然后分离虫体胸腹部，使血淋巴溢出，得到小型昆虫血淋巴。

Description

一种小型昆虫血淋巴收集方法
技术领域
本发明属于昆虫生理生化领域，具体涉及一种小型昆虫血淋巴收集方法。
背景技术
昆虫血淋巴是血液和淋巴液的混合物，在昆虫的开放式循环系统中循环，是昆虫代谢的重要场所，也是代谢过程中各种物质储存和交换的场所，在昆虫的防御、抗冻、免疫、损伤应用等方面起重要作用。
小型昆虫尤其是果蝇（Drosophila）血液代谢途径、血细胞生成机制与哺乳动物高度保守，相对于哺乳动物模型而言，果蝇有着较少的冗余基因。研究发现胰岛素和营养物阻止果蝇血干细胞分化，饮食变化导致的炎症反应和对血液发育产生影响。II型糖尿病和肥胖症与慢性炎症紧密地关联在一起，而慢性炎症是由血细胞的异常激活所引发的。研究表明，位于细胞膜上并能将外部信号传递转化成细胞机能的PVR基因在果蝇属的血液形成系统中起着关键的作用，果蝇和脊椎动物中的血细胞生成机制的相似性为白血病的研究提供了有利的条件。目前科学家正在探索以果蝇血液作为血液研究的新模型。
目前，血淋巴已成为昆虫研究中最常用的研究材料之一，但是由于昆虫大多个体较小，血淋巴含量少，离体后容易发生凝血和黑化反应，给收集工作带来一定的难度。
血淋巴的收集方法有很多种，如蜡盘法、离心法、背血管取血法、灌注法、压榨或匀浆法、发射流血法、撕裂法、切割法、剪开法、穿刺法等，但是这些方法各有利弊，且主要针对收集大中型昆虫，对于小型昆虫血淋巴的收集，经常会损伤小型昆虫体壁或内部结构（如肠道），造成收集的血淋巴不纯或被污染，且血淋巴量较少，给后续研究造成困难和不便。
发明内容
本发明解决的技术问题在于提供一种小型昆虫血淋巴收集方法，能最大程度的保证收集的小型昆虫的血量和纯度，有利于下一步研究。
为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：一种小型昆虫血淋巴收集方法，包括以下步骤：麻醉虫体，然后分离虫体胸腹部，使血淋巴溢出，得到小型昆虫血淋巴。
具体包括以下步骤：
（1）用胶带将离心管固定于与视觉平行的台面上，滴加生理液，以保证血液的生理活性；
（2）将小型昆虫麻醉；
（3）将麻醉的小型昆虫背部朝后横向侧放离心管口1/3处，用昆虫针在左侧轻压固定小型昆虫胸部，在右侧轻压固定小型昆虫腹部，左右昆虫针与离心管内壁和小型昆虫身体纵轴分别成45°角；
（4）左右昆虫针沿45°角向斜后方轻拉，使小型昆虫身体在胸、腹部连接处分离，移动右侧昆虫针少许，使肠伸展而未断裂为止，或右侧昆虫针沿45°角向斜后方轻划，使身体在腹部侧面划开一裂缝；
（5）右侧昆虫针平放于小型昆虫腹部侧面，与小型昆虫身体纵轴垂直，从尾部依次向断裂处轻压，使小型昆虫胸腹部血淋巴从胸、腹连接处溢出，溢出结束后，用左右昆虫针移除小型昆虫，得到小型昆虫血淋巴。
本发明所述生理液为0.65%生理盐水。
本发明所述血淋巴包括淋巴液、血清及血细胞。
如上所述，本发明与现有技术相比具有的有益效果是：
1、本发明先将小型昆虫麻醉，避免了昆虫受外界刺激，体内生理环境改变，血细胞变异，影响血淋巴的研究；
2、本发明最大程度的保证取血量：小型昆虫的血量特别少，取血极其困难，不能满足血液研究模型血量的需要，本发明独创的方法可以最大程度的保证取血量；
3、纯净的血淋巴：本发明得到的血淋巴包括淋巴液、血清及血细胞，没有消化液、组织液等其他杂质，血淋巴污染概率小，有利于后期血细胞及血液的研究。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
一种小型昆虫血淋巴收集方法，包括以下步骤：麻醉虫体，然后分离虫体胸腹部，使血淋巴溢出，得到小型昆虫血淋巴。
具体包括以下步骤：
（1）用胶带将离心管固定于与视觉平行的台面上，滴加0.65%生理盐水，以保证血液的生理活性；
（2）将黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）麻醉；
（3）将麻醉的黑腹果蝇背部朝上横向侧放离心管口1/3处，用昆虫针在左侧轻压固定黑腹果蝇胸部，在右侧轻压固定黑腹果蝇腹部，左右昆虫针与离心管内壁和黑腹果蝇身体纵轴分别成45°角；
（4）左右昆虫针沿45°角向斜后方轻拉，使黑腹果蝇身体在胸、腹部连接处分离，移动右侧昆虫针少许，使肠伸展而未断裂为止，或右侧昆虫针沿45°角向斜后方轻划，使身体在腹部侧面划开一裂缝；
（5）右侧昆虫针平放于黑腹果蝇腹部侧面，与黑腹果蝇身体纵轴垂直，从尾部依次向断裂处轻压，使黑腹果蝇胸腹部血淋巴从胸、腹连接处溢出，溢出结束后，用左右昆虫针移除黑腹果蝇，得到黑腹果蝇血淋巴。
实施例2
一种小型昆虫血淋巴收集方法，包括以下步骤：麻醉虫体，然后分离虫体胸腹部，使血淋巴溢出，得到小型昆虫血淋巴。
具体包括以下步骤：
（1）用胶带将离心管固定于与视觉平行的台面上，滴加0.65%生理盐水，以保证血液的生理活性；
（2）将按蚊（Anopheles）麻醉；
（3）将麻醉的按蚊背部朝上横向侧放离心管口1/3处，用昆虫针在左侧轻压固定按蚊胸部，在右侧轻压固定按蚊腹部，左右昆虫针与离心管内壁和按蚊身体纵轴分别成45°角；
（4）左右昆虫针沿45°角向斜后方轻拉，使按蚊身体在胸、腹部连接处分离，移动右侧昆虫针少许，使肠伸展而未断裂为止，或右侧昆虫针沿45°角向斜后方轻划，使身体在腹部侧面划开一裂缝；
（5）右侧昆虫针平放于按蚊腹部侧面，与按蚊身体纵轴垂直，从尾部依次向断裂处轻压，使按蚊胸腹部血淋巴从胸、腹连接处溢出，溢出结束后，用左右昆虫针移除按蚊，得到按蚊血淋巴。
实施例3
一种小型昆虫血淋巴收集方法，包括以下步骤：麻醉虫体，然后分离虫体胸腹部，使血淋巴溢出，得到小型昆虫血淋巴。
具体包括以下步骤：
（1）用胶带将离心管固定于与视觉平行的台面上，滴加0.65%生理盐水，以保证血液的生理活性；
（2）将白蛉子（Phlebotomus）麻醉；
（3）将麻醉的白蛉子背部朝上横向侧放离心管口1/3处，用昆虫针在左侧轻压固定白蛉子胸部，在右侧轻压固定白蛉子腹部，左右昆虫针与离心管内壁和白蛉子身体纵轴分别成45°角；
（4）左右昆虫针沿45°角向斜后方轻拉，使白蛉子身体在胸、腹部连接处分离，移动右侧昆虫针少许，使肠伸展而未断裂为止，或右侧昆虫针沿45°角向斜后方轻划，使身体在腹部侧面划开一裂缝；
（5）右侧昆虫针平放于白蛉子腹部侧面，与白蛉子身体纵轴垂直，从尾部依次向断裂处轻压，使白蛉子胸腹部血淋巴从胸、腹连接处溢出，溢出结束后，用左右昆虫针移除白蛉子，得到白蛉子血淋巴。
本发明可用其他的不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概述。因此，无论从哪一点来看，本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不能限制发明，权利要求书指出了本发明的范围，而上述的说明并未指出本发明的范围，因此，在与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何变化，都应认为是包括在权利要求书的范围内。

Claims (3)

1.一种小型昆虫血淋巴收集方法，其特征在于，包括以下步骤：麻醉虫体，然后分离虫体胸腹部，使血淋巴溢出，得到小型昆虫血淋巴，具体步骤为：
（1）用胶带将离心管固定于与视觉平行的台面上，滴加生理液；
（2）将小型昆虫麻醉；
（3）将麻醉的小型昆虫背部朝后横向侧放离心管口1/3处，用昆虫针在左侧轻压固定小型昆虫胸部，在右侧轻压固定小型昆虫腹部，左右昆虫针与离心管内壁和小型昆虫身体纵轴分别成45°角；
（4）左右昆虫针沿45°角向斜后方轻拉，使小型昆虫身体在胸、腹部连接处分离，移动右侧昆虫针少许，使肠伸展而未断裂为止，或右侧昆虫针沿45°角向斜后方轻划，使身体在腹部侧面划开一裂缝；
（5）右侧昆虫针平放于小型昆虫腹部侧面，与小型昆虫身体纵轴垂直，从尾部依次向断裂处轻压，使小型昆虫胸腹部血淋巴从胸、腹连接处溢出，得到小型昆虫血淋巴；
所述小型昆虫为白蛉子（Phlebotomus）、按蚊（Anopheles）和黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）中的一种。
2.如权利要求1所述的一种小型昆虫血淋巴收集方法，其特征在于：所述生理液为重量百分比为0.65%的生理盐水。
3.如权利要求1所述的一种小型昆虫血淋巴收集方法，其特征在于：所述血淋巴包括淋巴液、血清及血细胞。
CN201710971015.6A 2017-10-18 2017-10-18 一种小型昆虫血淋巴收集方法 Active CN107727436B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710971015.6A CN107727436B (zh) 2017-10-18 2017-10-18 一种小型昆虫血淋巴收集方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710971015.6A CN107727436B (zh) 2017-10-18 2017-10-18 一种小型昆虫血淋巴收集方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107727436A CN107727436A (zh) 2018-02-23
CN107727436B true CN107727436B (zh) 2020-08-21

Family

ID=61210721

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710971015.6A Active CN107727436B (zh) 2017-10-18 2017-10-18 一种小型昆虫血淋巴收集方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107727436B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114350592B (zh) * 2021-12-30 2023-07-04 北京林业大学 一种天牛成虫血淋巴收集方法、装置及其制备方法与应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0927515A1 (en) * 1997-04-28 1999-07-07 JAPAN as repr. by DIR. GENERAL of NATIONAL INST. OF SERICULTURAL & ENTOMOLOGICAL SCIENCE MINISTRY OF AGR, FORESTRY & FISHERI Method of collecting insect humors
CN102928278A (zh) * 2012-11-12 2013-02-13 吉林大学 适用于双向电泳的亚洲玉米螟幼虫血浆蛋白样品制备方法
CN104076144A (zh) * 2014-07-08 2014-10-01 福建农林大学 一种稻飞虱血淋巴内病毒蛋白的免疫荧光标记检测方法
KR101679406B1 (ko) * 2015-09-02 2016-11-24 충남대학교산학협력단 곤충의 질병 진단용 혈림프 조성물, 이의 제조방법 및 이로부터의 생체분자 분리방법

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SE519350C2 (sv) * 1997-01-28 2003-02-18 Anette Carlsson Antibakteriellt protein med specifik effekt mot gram-negativa bakterier, farmaceutiskt aktiva fragment därav med samma specifika effekt, samt farmaceutisk komposition innehållande proteinet eller fragment därav
CN102827803A (zh) * 2012-09-25 2012-12-19 西南大学 家蚕去细胞血淋巴液的制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0927515A1 (en) * 1997-04-28 1999-07-07 JAPAN as repr. by DIR. GENERAL of NATIONAL INST. OF SERICULTURAL & ENTOMOLOGICAL SCIENCE MINISTRY OF AGR, FORESTRY & FISHERI Method of collecting insect humors
CN102928278A (zh) * 2012-11-12 2013-02-13 吉林大学 适用于双向电泳的亚洲玉米螟幼虫血浆蛋白样品制备方法
CN104076144A (zh) * 2014-07-08 2014-10-01 福建农林大学 一种稻飞虱血淋巴内病毒蛋白的免疫荧光标记检测方法
KR101679406B1 (ko) * 2015-09-02 2016-11-24 충남대학교산학협력단 곤충의 질병 진단용 혈림프 조성물, 이의 제조방법 및 이로부터의 생체분자 분리방법

Also Published As

Publication number Publication date
CN107727436A (zh) 2018-02-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Zang et al. A novel, reliable method for repeated blood collection from aquarium fish
CN107727436B (zh) 一种小型昆虫血淋巴收集方法
CN104818242A (zh) 原代肝细胞的分离制备方法
CN111955632A (zh) 一种含唾液酸的饮料及其制备方法
CN205087344U (zh) 生物组织冻存容器
CN205082616U (zh) 一种养蜂用的蜂蜜过滤搅拌机
Collip GLUCOKININ. SECOND PAPER. By JB COLLIP.
CN115594773A (zh) 一种多糖得率高的杜仲叶提取方法及其应用
CN205042126U (zh) 一种养蜂用的蜂蜜真空浓缩提纯机
CN108607017A (zh) 一种枣仁安神液的制备方法
CN107446889A (zh) 一种脐血造血干细胞分离及存储的方法
CN103191579A (zh) 一种超临界CO2萃取螺旋藻中γ-亚麻酸的方法
CN205322337U (zh) 一种提取双壳贝类血淋巴的操作装置
CN103966357A (zh) 一种仿刺参体腔液病毒的快速定量检测方法
CN207680717U (zh) 用于榨取鱼腥草汁的装置
CN110214728A (zh) 一种使牡蛎快速开壳的溶液及方法
Yang et al. Subchronic and genetic safety assessment of a new medicinal Dendrobium species: Dendrobium taiseed Tosnobile in rats
CN103555527A (zh) 蛇肽保健酒及其制备方法
CN205839000U (zh) 一种用于成熟脂肪细胞消化分离的收集器
CN205569837U (zh) 一种用于脂肪移植的静止分离支架
CN204589173U (zh) 一种精子上游试管
CN112931483B (zh) 一种保持高存活的浪人鲹精子冷冻液及其制备方法
CN103159619A (zh) 从银杏外种皮中提取银杏酸、银杏内酯的工业化生产技术
Hsu Factors affecting blood glycolysis in vitro and in vivo
Su et al. Detection and Analysis of Routine Blood Indexes in Guike Pig

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant