CN107683137A - 用于使用stat3途径抑制剂和激酶抑制剂治疗癌症的方法 - Google Patents

Abstract

包括施用以下各项的方法和包括以下各项的试剂盒：至少一种式A化合物：(A)、任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物；和至少一种式B化合物：(B)、任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物。

Description

用于使用STAT3途径抑制剂和激酶抑制剂治疗癌症的方法

本申请根据美国法典第35篇第119条要求2015年4月27日提交的美国临时专利申请号62/153,385的优先权益，所述临时专利申请的内容以引用的方式整体并入本文。

本文公开了方法，所述方法包括向受试者施用下述组合，所述组合包括治疗有效量的至少一种式A化合物与治疗有效量的至少一种式B化合物的组合。

至少一种式A化合物选自具有式A的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物。

至少一种式B化合物选自具有式B的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物。

仅在美国，癌症造成的死亡数量每年就有数十万人。虽然在通过手术、放射疗法和放射疗法来治疗某些形式的癌症方面取得了进展，但许多类型的癌症基本上是不能治愈的。即使当可以有效治疗特定癌症的时候，这种治疗的副作用可能是严重的，并且导致生活质量的显著降低。

大部分常规化学治疗剂具有毒性和有限功效，尤其是对于患有晚期实体肿瘤的患者。常规化学治疗剂导致损伤非癌性以及癌性细胞。这些化学治疗化合物的治疗指数(即疗法区分癌性细胞和正常细胞的能力的量度)可能非常低。通常，有效杀死癌细胞的化学治疗药物的剂量也杀死正常细胞，尤其是进行频繁细胞分裂的那些正常细胞(诸如上皮细胞和骨髓细胞)。当正常细胞经受化学疗法时，常常出现副作用，诸如脱发、抑制血细胞生成和恶心。根据患者的一般健康状况，此类副作用可同时妨碍化学疗法的施用，或至少对癌症患者造成明显不舒适感，这降低了他们的生活质量。即使对化学疗法作出应答的癌症患者伴有肿瘤消退，但是在对化学疗法产生初始应答之后，癌症常常迅速再发、进展，并且通过转移进行传播。此类复发性癌症变得对化学治疗剂具有高耐受性，或用化疗治疗剂难以治疗。如下文所论述，认为在传统的化学疗法后观察到的这种快速肿瘤复发性和耐受性是由癌症干细胞(CSC)或具有高干性(stemness)的癌细胞(高干性癌细胞)所引起的。

认为CSC具有下述四个特性：

1.干性-如本文所用，干性意指自我更新并分化成癌细胞的能力(Gupta PB等人,Nat,Med.2009；15(9):1010-1012)。虽然CSC仅是总癌细胞群体的较少部分(Clarke MF,BioL Blood Marrow Transplant.2009；11(2增刊2):14-16)，但是它们可产生癌细胞的构成肿瘤本体的异质谱系(参见Gupta等人2009)。此外，CSC具有移动至不同位点，同时保持其干性特性并且因此在这些位点再生肿瘤的能力(Jordan CT等人N.Engl.J.Med.2006；355(12):1253-1261)。

2.异常的信号传导途径-CSC干性与信号传导途径的调节异常相关联，这可促成其再生肿瘤并迁移至远位点的能力。在正常干细胞中，干性信号途径是严格控制的并且在遗传上是完整的。相比之下，CSC中的干性信号传导途径是调节异常的，从而允许这些细胞自我更新并且分化成癌细胞(参见Ajani等人2015)。干性信号传导途径的调节异常促成CSC对化学疗法和放射疗法的耐受性并且促成癌症复发和转移。涉及CSC中干性的诱导和保持的示例性干性信号传导路径包括：JAK/STAT、Wnt/β-连环蛋白、Hedgehog、Notch和Nanog(Boman BM等人,J.Clin.Oncol.2008；26(17)；2828-2838)。

3.对传统疗法的耐受性-证据表明CSC对常规化学疗法和放射具有耐受性。虽然这种耐受性潜在的详细机制尚未完全清楚，但是CSC的干性途径(参见Boman等人2008)以及肿瘤微环境和信号传导途径的异常调节(Borovski T.等人,Cancer Res.2011；71(3):634～639)可促成这种耐受性。

4.促成肿瘤复发和转移的能力-虽然化学疗法和放射可杀死肿瘤中的大部分细胞，但是因为CSC耐受传统疗法，所以未根除的CSC可导致原发位点处或远位点处的肿瘤再生或复发(参见Jordan等人2006)。如上所提及，CSC可获得移动至不同位点，并且可通过与微环境相互作用在这些位点处维持干性，从而允许转移性肿瘤生长的能力(参见Boman等人2008)。

转录因子信号转导及转录激活因子3(在本文中称之为STAT3)是STAT家族成员，所述STAT家族是响应于细胞因子/生长因子而被激活以促进增殖、存活和其他生物学过程的潜在转录因子。STAT3是癌基因，其可被受生长因子受体酪氨酸激酶，包括但不限于例如Janus激酶(JAK)、SRC家族激酶、EGFR、ABL、KDR、c-MET和HER2介导的关键酪氨酸残基的磷酸化激活。(Yu,H.Stat3:Linking oncogenesis with tumor immune evasion in AACR2008Annual Meeting.2008.San Diego,CA)。在酪氨酸磷酸化后，磷酸化STAT3(“pSTAT3”)形成同源二聚体并且易位到核，在此处其与靶基因的启动子中的特异性DNA-应答元件结合，并且诱导基因表达(Pedranzini,L.等人J,Clin,invest,2004,114(5):第619-22页)。

在正常细胞中，STAT3激活是短暂的并且是严格调节的，持续例如约30分钟至数小时。但是，在各种各样的人类癌症，包括所有的主要癌以及一些血液学肿瘤中，发现STAT3是具有异常活性的。持久活动性STAT3在所有乳腺癌和肺癌、结肠直肠癌(CRC)、卵巢癌、肝细胞癌和多种骨髓瘤等的一半以上中出现，并且在所有头颈癌中的95％以上中出现。STAT3在癌症进展中起着多种作用，并且被认为是癌细胞获得耐药性的主要机制之一。STAT3是强力的转录调节剂，其靶向涉及细胞周期、细胞存活、肿瘤生成、肿瘤侵入和转移的基因，诸BCL-XL、c-MYC、细胞周期蛋白D1、VEGF、MMP-2和存活蛋白。(Catlett-Falcone,R.等人Immunity,1999.10(1):第105-15页；Bromberg,J.F.等人Cell,1999.98(3):第295-303页；Kanda,N.等人Oncogene,2004.23(28):第4921-29页；Schiette,E.J.等人J Clin Oncol,2004.22(9):第1682-88页；Niu,G.等人Oncogene,2002.21(13):第2000-08页；Xie,T.X.等人Oncogene,2004,23(20):第3550-60页)。STAT3还是肿瘤免疫监视和免疫细胞募集的关键的负调节物。(Kortylewski,M.等人Nat,Med.,2005.11(12):第1314-21页；Burdelya,L.等人,J.Immunol.,2005.174(7):第3925-31页；和Wang,T.等人Nat Med.,2004.10(1):第48-54页)。

通过使用STAT3的反义寡核苷酸、siRNA、显性阴性形式终止STAT3信号传导，和/或终止对酪氨酸激酶活性的靶向抑制在体外和/或体内均引起了癌细胞生长停滞、细胞凋亡以及转移频率降低。(Pedranzini,L.等人J Clin.Invest,2004.114(5):第619-22页；Bromberg,J.F.等人Cell,1999.98(3):第295-303页；Darnell,J.E.Nat.Med.,2005.11(6):第595-96页；和Zhang,L.等人Cancer Res,2007.67(12):第5859-64页)。

此外,STAT3可在CSC跨广谱癌症的存活和自我更新能力方面起关键作用。因此，具有抗CSC活性的药剂对于癌症患者具有很大前景(Boman,B.M.等人J.Clin.Oncol.2008.26(17):第2795-99页)。

如上所论述，CSC是具有通常与干细胞相关联的特征的癌细胞亚群(在实体肿瘤或血液学癌症内发现)。这些细胞在通过化学疗法减少非干普通癌细胞之后快速生长，这可提供癌症能够在化学疗法治疗之后迅速再发的机制。与本体癌细胞相反，CSC是高致瘤性的(肿瘤形成性的)。在人急性髓性白血病中，这些细胞的频率小于万分之一。(Bonnet,D.和J.E.Dick.Nat.Med.,1997.3(7):第730-37页)。有越来越多的证据表明在几乎所有的肿瘤类型中都存在此类细胞。然而，选自特异性地适于在组织培养物中生长的癌细胞亚群的癌细胞系可获得显著不同于体内癌细胞的生物学特性和功能特性。因此，不是所有的癌细胞系都含有CSC。

CSC具有干细胞特性，诸如自我更新和分化成多种细胞类型的能力。它们作为独特的群体在肿瘤中持久存在，并且它们产生形成肿瘤块本体并在表型上表征疾病的分化细胞。已经证明CSC在根本上导致癌发生、癌症转移、癌症复发和再发。CSC还称为例如肿瘤起始细胞、癌症干样细胞、干样癌细胞、高致瘤性细胞或超恶性细胞。

CSC固有地对常规化学疗法具有耐受性，这意指它们在杀死本体肿瘤细胞的常规疗法中存活下来。因此，CSC的存在就癌症治疗和疗法而言具有若干种意义。这些意义包括例如疾病鉴别、选择药物靶标、预防癌症转移和复发、治疗用化学疗法和/或放射疗法难以治疗的癌症、治疗固有地对化学疗法或放射疗法具有耐受性的癌症，以及开发对抗癌症的新策略。

在测试初级阶段，癌症治疗的功效常常通过它们所消灭的肿瘤块的量来测定。因为CSC形成肿瘤细胞群体的较少部分并且与其分化后代相比具有显著不同的生物学特征，所以基于其减小肿瘤块的能力选择治疗方案可能无法选择特异性地作用于干细胞的药物。实际上，CSC具有放射耐受性，并且用化学治疗药物和靶向药物是难以治疗的。正常的体干细胞天然地对化学治疗剂具有耐受性—它们具有各种使药物流出的泵(例如多药耐受性蛋白泵)、它们具有更高的DNA修复能力，并且它们具有缓慢的细胞更新速率。为正常干细胞的突变型对应物的CSC可以具有类似功能。例如，CSC可逃避由标准化学疗法诱导的细胞死亡，因为化学治疗剂主要靶向形成肿瘤本体的快速复制细胞。因此，驻留在肿瘤中的CSC群体的存活最终导致疾病再发和广泛转移。使用化学治疗剂的治疗实际上可选择耐受化学疗法的CSC，所述CSC能够播种最有可能耐受化学疗法的肿瘤。此外，还已经证明癌症干细胞对放射疗法(XRT)具有耐受性。(Hambardzumyan等人Cancer Cell,2006.10(6):第454-56页；和Baumann,M.等人Nat.Rev.Cancer,2008.8(7):第545-54页)。

因为存活的CSC可能是再发的主要原因，所以特异性靶向CSC的抗癌疗法具有很大前景(Jones RJ等人,J Natl Cancer Inst.2004；96(8):583-585)。通过靶向CSC途径，可能治疗患有侵袭性、不可切除的肿瘤和难治性或复发性癌症的患者以及防止肿瘤转移和复发。这种方法还可改善癌症患者，尤其是罹患转移性疾病的患者的存活和生活质量。解开这种未曾利用过的潜能可涉及鉴别和验证对于CSC自我更新和存活具有选择重要性的途径。虽然调节胚胎干细胞或成人干细胞增殖和分化的信号传导途径是熟知的，但是仍然要看这些相同途径是否为癌症干细胞自我更新和存活所需要的。

用于鉴别和分离CSC的方法依赖于CSC使药物流出或表达特异性细胞表面标记物的能力。

例如，因为CSC对许多化学治疗剂具有耐受性，所以并不出人意料的是：CSC几乎无所不在地过表达药物流出泵诸如ABCG2(BCRP-1)，和其他ATP结合盒(ABC)超家族成员。(Ho,M.M.等人Cancer Res.,2007,67(10):第4827-33页；Wang,J.等人Cancer Res.,2007.67(8):第3716-24页；Haraguchi,N.等人Stem Cells,2006.24(3):第506-13页；Doyle,L.A.和D.D.Ross.Oncogene,2003,22(47):第7340-58页；Alvi,A.J.等人Breast Cancer Res.,2003.5(1):第R1-R8页；Frank,N.Y.等人Cancer Res.,2005.65(10):第4320-33页；和Schatton,T.等人Nature,2008.451(7176):第345-49页)。因此，最初用于富集造血干细胞和白血病干细胞的侧群(SP)技术也用于鉴别和分离CSC。(Kondo,T.等人Proc,NatlAcad.Sci.USA,2004.101(3):第781-86页)。首先由Goodell等人描述的这种技术利用了荧光染料诸如Hoechst 33342的差异性ABC转运蛋白依赖性流出，以限定CSC中富集的细胞群体。(Doyle,L.A.和D.D.Ross.Oncogene,2003.22(47):第7340-58页；和Goodell,M.A.等人J.Exp.Med.,1996.183(4):第1797-806页)。具体地，SP通过用维拉帕米(verapamil)阻断药物流出来识别，在阻断时染料可不再从SP泵送出。

还致力于发现将CSC与肿瘤细胞本体区分开的特异性标记物。已经发现最初与正常成人干细胞相关联的标记物也标记CSC并且与CSC的增强致肿瘤性共分离。CSC常常表达的表面标记物包括CD44、CD133和CD166。(Al-Hajj,M.等人Proc,NatlAcad.Sci.USA,2003.100(7):第3983-88页；Collins,A.T.等人Cancer Res.,2005.65(23):第10946-51页；Li,C.等人Cancer Res.,2007.67(3):第1030-37页；Ma,S.等人Gastroenterology,2007,132(7):第2542-56页；Ricci-Vitiani,L.等人Nature,2007.445(7123):第111-15页；Singh,S.K.等人Cancer Res.,2003.63(18):第5821-28页；和Bleau,A.M.等人,Neurosurg,Focus,2008.24(3-4):第E28页)。主要基于这些表面标记物的差异性表达的分选肿瘤细胞已经占据了迄今所述的高致瘤性CSC的大多数。因此，验证这些表面标记物以用于将CSC从癌症细胞系和从肿瘤组织本体中鉴别出和分离出。

蛋白激酶是调节各种各样的细胞过程，包括细胞生长、细胞增殖、细胞分化和代谢的酶的家族。蛋白激酶通过途径配偶体的连续化学修饰传达细胞生长信号。因此，任何激酶对指定信号转导级联的药理学抑制在理论上将阻断整个途径上的传达。此外，已知蛋白激酶在疾病状态和病症中起作用，例如在许多癌症中经常存在激酶突变和/或过表达，从而导致常常与失控的细胞生长相关的过度激活的活性。由于这一原因，蛋白激酶代表了用于治疗性抑制的潜在靶标。

如美国专利号8,299,106中所公开的，近期已证实激酶是杀死或抑制癌症干细胞的重要靶标，并且将所述激酶统称为癌症干细胞途径激酶(CSCPK)。CSCPK的非限制性实例包括STK33、MELK、AXL、p70S6K和PDGFRα。例如，PDGFRα是受体酪氨酸激酶(RTK)，其在结合其配体PDGF后被激活，并且从而促成细胞增殖、血管新生和细胞凋亡。PDGFRα属于III类受体酪氨酸激酶家族，并且其与CFS-1受体/c-fms和干细胞生长因子/c-kit原癌基因家族相关。在早期胚胎发育中具有活性的PDGFRα途径也在许多癌症中被再激活，所述癌症诸如肝细胞癌(HCC)、头颈癌、脑肿瘤、胃肠肿瘤、皮肤癌、前列腺癌、卵巢癌、乳腺癌、肉瘤和白血病。此外，近期已证实PDGFRα激活在前列腺癌的骨转移中起关键作用。PDGFRα-p70S6K途径也是体内血管新生所必不可少的。使用单克隆抗体特异性地靶向PDGFRα导致肿瘤细胞增殖和存活显著减少，并且毒性极小。因此，PDGFRα代表了开发对抗广谱癌症并具有极小毒性的疗法的关键靶标。

除癌症之外，还已知染色体重排通过与FIP1L1融合来激活PDGFRα，这导致特发性嗜酸性细胞增多综合征。此外，通过启动子多态现象激活PDGFRα与神经管缺陷诸如脊柱裂相关。PDGFRα激活还与纤维变性相关。因此，PDGFRα还代表了用于抗纤维变性疗法的潜在靶标。

在一些实施方案中，至少一种式A化合物是CSC生长和存活的抑制剂。根据美国专利号8,877,803，已证实式A化合物抑制STAT3途径活性，细胞IC50为～0.25μM。例如，美国专利号8,877,803实施例13还提供合成至少一种式A化合物的示例性方法。在一些实施方案中，至少一种式A化合物用于治疗癌症的方法中。例如，在PCT专利申请号PCT/US2014/033566实施例6中，至少一种式A化合物被选择来加入患有晚期癌症的患者的临床试验。美国专利号8,877,803和PCT专利申请号PCT/US2014/033566的公开内容以引用的方式整体并入本文。

在一些实施方案中，至少一种式B化合物是CSCPK的抑制剂。如美国专利号8,299,106中所公开，式B化合物抑制CSC。美国专利号8,299,106的实施例1-5还提供合成至少一种式B化合物的示例性方法。美国专利号8,299,106的公开内容以引用的方式整体并入本文。

本公开报告出令人意外的发现：至少一种式A化合物和至少一种式B化合物的治疗组合在抑制癌细胞(包括癌症干细胞)方面具有比两种化合物单独添加的效应更大的效应。例如，观察到：相比于用单独化合物A或化合物B的治疗，本公开的治疗组合对体外和体内的癌细胞干性相关因子以及体外和体内的癌症干细胞的表达的抑制增强。

例如，我们意外地发现：当相比于用单独化合物A或化合物B的治疗时，用化合物A和化合物B对人胰腺癌细胞(Panc-1)和人头颈癌细胞(FaDu)的治疗组合使得对磷酸-STAT3表达的抑制增强。例如，我们意外地发现：相比于用单独化合物A或化合物B的治疗，用化合物A和化合物B对人胃癌细胞(MKN28)的治疗组合使得对Nanog表达的抑制增强。例如，我们意外地发现：相比于用单独化合物A或化合物B的治疗，施用化合物A和化合物B的治疗组合使得对人结肠癌(SW480)异种移植组织中的癌细胞干性相关因子Nanog和STK33的敲减增强。

例如，我们意外地发现：当相比于用单独化合物A或化合物B的治疗时，施用化合物A和化合物B的治疗组合使得对体外CSC球形成的抑制增强。例如，我们意外地发现：用化合物A和化合物B对具有人结肠(SW480)异种移植肿瘤的小鼠的治疗组合使得体内抗CSC活性增强。

例如，我们观察到：相比于用单独化合物A或化合物B的治疗，在用化合物A和化合物B的治疗组合治疗具有各种人异种移植肿瘤的小鼠之后抗癌活性增强。在人结肠癌(SW480)异种移植模型中，相比于以亚治疗剂量单独使用化合物A或化合物B，用化合物A和化合物B的治疗组合增强肿瘤生长抑制，其中对于化合物A+化合物B组合计算的肿瘤生长抑制为77％(p<0.0005)。在人胃癌(MKN45)异种移植模型(69％肿瘤生长抑制；p<0.0121)的情况下，在用化合物A和化合物B的治疗组合之后我们观察到类似的结果。

在不受任何特定观察结果或假设限制的情况下，认为本公开的治疗组合的组分在与癌细胞(例如，CSC)相关联的不同途径上起作用。化合物A和化合物B的治疗组合本身发挥的效应比两种化合物的单独添加效应更大(有时称之为“增强”或“协同”效应)。如图1所示，化合物A可通过抑制STAT3信号传导途径起作用。具体地，化合物A可直接结合激活的STAT3(例如磷酸化STAT3)并且抑制激活的STAT3的活性，从而防止STAT3依赖性靶基因的转录，所述靶基因包括干性相关转录因子c-MYC、OCT4、SOX2和β-连环蛋白。与可通过激酶依赖性机制阻断STAT3活性的化合物A相比之下，化合物B可抑制多种恶性肿瘤相关的丝氨酸-苏氨酸激酶(或癌症干细胞途径激酶(CSCPK))的活性。如图1进一步所示，化合物B对CSCPK的阻断还可导致各种癌细胞干性相关因子(包括Nanog)的下调。如本文所论述，当用化合物A和化合物B的治疗组合处理癌细胞时，观察到比化合物A或化合物B的单独添加效应更大的效应。

在一些实施方案中，本文公开了用于治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用：

治疗有效量的选自以下各项的至少一种式A化合物：具有式A的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物，以及

治疗有效量的选自以下各项的至少一种式B化合物：具有式B的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物。

在一些实施方案中，本文公开了治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用(a)治疗有效量的癌症干性抑制剂、前述项的前药、前述项的衍生物、任何前述项的药学上可接受的盐或任何前述项的溶剂合物；和(b)治疗有效量的激酶靶向剂、前述项的前药、前述项的衍生物、任何前述项的药学上可接受的盐或任何前述项的溶剂合物。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂是STAT3途径抑制剂。

在一些实施方案中，癌症干性抑制剂选自2-(1-羟乙基)-萘并[2,3-b)]呋喃-4,9-二酮、2-乙酰基-7-氯代-萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮、2-乙酰基-7-氟代-萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮、2-乙酰基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮、2-乙基-萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮、任何前述项的前药、任何前述项的衍生物、任何前述项的药学上可接受的盐或任何前述项的溶剂合物。

在一些实施方案中，激酶靶向剂是激酶抑制剂。在一些实施方案中，激酶靶向剂是癌症干细胞途径激酶抑制剂。在一些实施方案中，激酶靶向剂选自

任何前述项的前药、任何前述项的衍生物、任何前述项的药学上可接受的盐或任何前述项的溶剂合物。

在一些实施方案中，公开了试剂盒，所述试剂盒包括(1)选自具有式A的化合物、任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物的至少一种化合物，和(2)选自具有式B的化合物、任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物的至少一种化合物，连同用于施用和/或使用的说明书。

在一些实施方案中，公开了试剂盒，所述试剂盒包括(1)至少一种癌症干性抑制剂、前述项的前药、前述项的衍生物、任何前述项的药学上可接受的盐或任何前述项的溶剂合物；和(2)至少一种激酶靶向剂、前述项的前药、前述项的衍生物、任何前述项的药学上可接受的盐或任何前述项的溶剂合物，连同用于施用和/或使用的说明书。

本公开的方面和实施方案通过以下详细描述列出或通过以下详细描述而显而易见。应该理解，上述一般描述和以下详细描述均仅为示例性和解释性的并且不旨在限制权利要求。

附图简述

图1说明化合物A和化合物B的治疗组合对癌细胞干性的抑制增强。

图2示出在化合物A(“608”)和化合物B(“503”)的治疗组合之后对STAT3磷酸化的抑制增强。

图3示出在化合物A和化合物B的治疗组合之后对Nanog蛋白表达的抑制增强。

图4示出在化合物A和化合物B的治疗组合之后对786-0、RKO和DLD-1细胞集落形成的抑制增强。

图5示出化合物A和化合物B的治疗组合使得对癌症干细胞生存力的抑制增强。

图6(A)-(B)示出在化合物A和化合物B的治疗组合之后对化合物A和化合物B的药效学标记物的蛋白质表达的敲低增强。

图7示出在化合物A和化合物B的治疗组合之后体内抗癌症干细胞活性增强。

图8示出在化合物A和化合物B的治疗组合之后人结肠癌的小鼠异种移植模型中的抗肿瘤活性增强。

图9示出在化合物A和化合物B的治疗组合之后人胃癌的小鼠异种移植模型中的抗肿瘤活性增强。

下面是本说明书中使用的术语的定义。为本文的基团或术语所提供的初始定义单独地或作为其他基团的一部分应用于本说明书全篇中的基团或术语，除非另有指明。

当术语“约”连同数值范围一起使用时，它通过使边界延伸高于及低于这些数值来修饰那个范围。一般而言，术语“约”在本文中用于以高于及低于所述值20％、10％、5％或1％变化来修饰数值。在一些实施方案中，使用术语“大约”来使一个数值改变到所指出的值以上和以下的10％偏差值。在一些实施方案中，使用术语“大约”来使一个数值改变到所指出的值以上和以下的5％偏差值。在一些实施方案中，使用术语“大约”来使一个数值改变到所指出的值以上和以下的1％偏差值。

术语“施用(administer/administering/administration)”在本文中以其最广泛意义使用。这些术语是指将本文所述的化合物或药物组合物引入到受试者的任何方法并且可包括例如将化合物全身地、局部地或以原位方式引入到受试者。因此，在受试者中由组合物产生的本公开的化合物(无论所述组合物是否包含所述化合物)由这些术语涵盖。当这些术语结合术语“全身性的”或“全身性地”使用时，它们通常是指化合物或组合物在体内全身性吸收或积聚在血液流中，之后分布在整个身体。

术语“受试者”通常是指本文所述的化合物或药物组合物可施用于的生物体。受试者可以是哺乳动物或哺乳动物细胞，包括人类或人类细胞。所述术语也是指生物体，所述生物体包括细胞或这种细胞的供体或受体。在各种实施方案中，术语“受试者”是指有待作为本文所述的化合物或药物组合物的任何动物(例如，哺乳动物)，包括但不限于人、哺乳动物和非哺乳动物，诸如非人灵长类动物、小鼠、兔、羊、狗、猫、马、牛、鸡、两栖动物、爬行动物、鱼、线虫和昆虫。在一些情况下，术语“受试者”和“患者”在指人类受试者时可在本文中互换使用。

术语“有效量”和“治疗有效量”是指足以实现预期结果(包括但不限于如以下示出的疾病治疗)的本文所述的化合物或药物组合物的量。在一些实施方案中，“治疗有效量”是可有效地检测出对癌细胞的杀死或对癌细胞的生长或传播、肿瘤的大小或数量的抑制和/或癌症的水平、阶段、进展和/或严重性的其他量度的量。在一些实施方案中，“治疗有效量”是指全身性地、局部地或以原位方式施用的量(例如，在受试者中原位产生的化合物的量)。治疗有效量可依预期的应用(体外或体内)或所治疗的受试者和疾病病状(例如受试者的体重和年龄、疾病病状的严重程度、施用方式等)而变化，其可由本领域一般技术人员容易地确定。所述术语也适用于可在靶细胞中诱发特定应答(例如细胞迁移的减少)的剂量。具体剂量可根据以下各项而变化：例如受试者的体重、特定药物组合物、受试者及其年龄和现有健康状况或健康状况的风险、待遵循的给药方案、疾病的严重性、是否与其他药剂组合施用、施用的时间安排、所施用的组织和携带其的物理递送系统。

如本文所用，术语“治疗("treatment/treating)”、“改善”和“激发”在本文中可互换使用。这些术语是指用于获得有益或希望的结果(包括但不限于治疗益处和/或预防益处)的途径。所谓治疗益处意指所治疗的基本病症的根除或改善。此外，治疗益处是通过与基本病症相关联的一种或多种生理症状的根除或改善以使得在受试者中观察到改善而实现，尽管所述受试者仍可能被所述基本病症困扰。对于预防益处，可对有发展成特定疾病风险的受试者或对报告疾病的一种或多种生理症状的受试者(即使可能还未作出该疾病的诊断)施用药物组合物。

如本文所用，术语“组合”、“组合性的”、或“组合治疗”意指施用至少两种不同的药剂(例如，选自具有式A的化合物的至少一种化合物或/和选自具有式B的化合物的至少一种化合物，以及一种或多种附加药剂)来治疗病症、病状或症状，例如癌症病状。这种组合/组合治疗可以涉及在施用第二药剂之前、期间和/或之后施用一种药剂。第一药剂和第二药剂可以在分开的药物组合物中同时、单独地或依序施用于受试者。第一药剂和第二药剂可通过相同或不同的施用路径施用于受试者。在一些实施方案中，治疗组合包含治疗有效量的选自具有式A的化合物的至少一种式A化合物和治疗有效量的选自具有式B的化合物的至少一种式B化合物。

例如，选自具有式A的化合物的至少一种化合物和选自具有式B的化合物的至少一种化合物可具有不同的作用机制。在一些实施方案中，组合治疗通过在一起作用以具有附加、协同或增强效应而改善了选自具有式A的化合物的至少一种化合物和选自具有式B的化合物的至少一种化合物的预防或治疗效果。在某些实施方案中，本公开的组合治疗减少了与选自具有式A的化合物的至少一种化合物或选自具有式B的化合物的至少一种化合物相关联的副作用。施用选自具有式A的化合物的至少一种化合物和选自具有式B的化合物的至少一种化合物可在时间上间隔最多至数周，但是更通常是48小时内，并且最通常是在24小时内。

如本文所用，术语“协同作用”、“协同的”、“协同地”或“增强的”是指两种或更多种组分的相互作用或组合产生大于其单独效应的总和(或“附加效应”)的效应。

如本文所用，术语“进展(progress/progressed/progression)”是指以下各项中的至少一项：(1)对进行性疾病(PD)的先前疗法(例如化学疗法)的应答；(2)用先前疗法(例如化学疗法)治疗后出现一种或多种新病变；和(3)靶标病变直径的总和的至少5％(例如，10％、20％)的增加，将研究中的最小总和作为参考(所述最小总和包括基线总和，如果其是研究中最小的)。

如本文所用，“敏化”意指使先前对疗法(例如化学疗法)方案具有耐受性、无应答或具有稍微应答的受试者对所述疗法(例如化学疗法)方案敏感、具有应答或更多应答。

术语“癌症”在受试者中是指存在具有致癌细胞的典型特征的细胞，所述典型特征诸如不受控的增殖、永生化、转移潜能、快速的生长和增殖速率以及某些形态学特征。通常，癌细胞呈肿瘤或块的形式，但是此类细胞可以单独存在于受试者中，或者可以作为独立细胞诸如白血病细胞或淋巴细胞在血液流中循环。如本文所用的癌症的实例包括但不限于肺癌、胰腺癌、骨癌、皮肤癌、头颈癌、皮肤或眼内黑素瘤、乳腺癌、子宫癌、卵巢癌、腹膜癌、结肠癌、直肠癌、结肠直肠腺癌、肛区癌、胃癌(stomach cancer)、胃癌(gastric cancer)、胃肠癌、胃腺癌、肾上腺皮质激素癌(adrenocorticoid carcinoma)、子宫癌、输卵管癌、子宫内膜癌、阴道癌、外阴癌、何杰金氏病(Hodgkin's Disease)、食道癌、胃食管交界处癌、胃食管腺癌、软骨肉瘤、小肠癌、内分泌系统癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、软组织肉瘤、尤文氏肉瘤(Ewing’s sarcoma)、尿道癌、阴茎癌、前列腺癌、膀胱癌、睾丸癌、输尿管癌、肾盂癌、间皮瘤、肝细胞癌、胆癌、肾癌、肾细胞癌、慢性或急性白血病、淋巴细胞性淋巴瘤、中枢神经系统肿瘤(CMS)、脊柱轴肿瘤、脑干胶质瘤、多形性成胶质细胞瘤、星形细胞瘤、神经鞘瘤、室管膜瘤、成神经管细胞瘤、脑膜瘤、鳞状细胞癌、垂体腺瘤，包括任何上述癌症的难治形式，或上述癌症中的一种或多种的组合。一些示例性癌症包括在通用术语中并且包括在所述术语中。例如，通用术语泌尿科癌包括膀胱癌、前列腺癌、肾癌、睾丸癌等；并且另一通用术语肝胆管癌包括肝癌(本身是包括肝细胞癌或胆管癌的通用术语)、胆囊癌、胆癌或胰腺癌。泌尿科癌和肝胆管癌均由本公开涵盖并且包括在术语“癌症”中。

也包括在术语“癌症”中的是“实体肿瘤”。如本文所用，术语“实体肿瘤”是指形成异常肿瘤块诸如肉瘤、癌瘤和淋巴瘤的那些病状诸如癌症。实体瘤的实例包括但不限于非小细胞肺癌(NSCLC)、神经内分泌肿瘤、胸腺瘤(thyomas)、纤维性肿瘤、转移性结肠直肠癌(mCRC)等。在一些实施方案中，实体肿瘤疾病是腺癌、鳞状细胞癌、大细胞癌等。

在一些实施方案中，癌症为食道癌、胃食管交界处癌、胃食管腺癌、胃癌、软骨肉瘤、结肠直肠腺癌、乳腺癌、卵巢癌、头颈癌、黑素瘤、胃腺癌、肺癌、胰腺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、多发性骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、前列腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、小肠腺癌、子宫肉瘤或肾上腺皮质激素癌。在一些实施方案中，癌症为食道癌、胃食管交界处癌、胃食管腺癌、结肠直肠腺癌、乳腺癌、卵巢癌、头颈癌、黑素瘤、胃腺癌、肺癌、胰腺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、多发性骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、前列腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、小肠腺癌、子宫肉瘤或肾上腺皮质激素癌。在一些实施方案中，癌症为乳腺癌。在一些实施方案中，癌症为结肠直肠腺癌。在一些实施方案中，癌症为小肠腺癌。在一些实施方案中，癌症为肝细胞癌。在一些实施方案中，癌症为头颈癌。在一些实施方案中，癌症为肾细胞癌。在一些实施方案中，癌症为卵巢癌。在一些实施方案中，癌症为前列腺癌。在一些实施方案中，癌症为肺癌。在一些实施方案中，癌症为子宫肉瘤。在一些实施方案中，癌症为食道癌。在一些实施方案中，癌症为子宫内膜癌。在一些实施方案中，癌症为胆管癌。在一些实施方案中，每种癌症是不可切除的、晚期的、难治性的、复发性的或转移性的。

如本文所用，术语“至少一种式A化合物”和“化合物A”各自意指选自以下各项的化合物：具有式A的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物。

在一些实施方案中，具有式A的化合物的前药和衍生物是STAT3抑制剂。具有式A的化合物的前药的非限制性实例是例如美国授权前公布号2012/0252763中描述为化合物4011和4012的磷酸酯和磷酸二酯，以及美国专利号9,150,530中所述的合适化合物。具有式A的化合物的衍生物的非限制性实例包括例如美国专利号8,977,803中公开的衍生物。美国授权前公布号2012/0252763以及美国专利号9,150,530和8,977,803的公开内容以引用的方式整体并入本文。

具有下面示出的式A的化合物

也可称为2-乙酰基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮、那布卡辛(napabucasin)或BBI608并且包括其互变异构体。

制备2-乙酰基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(包括其结晶形式)和另外的癌症干性抑制剂的合适方法描述于以WO 2009/036099、WO2009/036101、WO 2011/116398、WO 2011/116399和WO2014/109078公布的共同拥有的PCT申请中；这些申请中的每一个的内容均以引用的方式整体并入本文。

如本文所用，术语“至少一种式B化合物”和“化合物B”各自意指选自以下各项的化合物：具有式B的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物。

在一些实施方案中，具有式B的化合物及其衍生物是激酶靶向剂或激酶抑制剂。在一些实施方案中，具有式B的化合物及其衍生物是癌症干细胞途径激酶(CSCPK)抑制剂。在一些实施方案中，具有式B的化合物及其衍生物是STK33、MELK、AXL、p70S6K和PDGFRα的抑制剂。在一些实施方案中，选自具有式B的化合物及其衍生物的至少一种化合物是STK33抑制剂。在一些实施方案中，选自具有式B的化合物及其衍生物的至少一种化合物是MELK抑制剂。在一些实施方案中，选自具有式B的化合物及其衍生物的至少一种化合物是AXL抑制剂。在一些实施方案中，选自具有式B的化合物及其衍生物的至少一种化合物是p70S6K抑制剂。在一些实施方案中，选自具有式B的化合物及其衍生物的至少一种化合物是PDGFRα抑制剂。在一些实施方案中，选自具有式B的化合物及其衍生物的至少一种化合物抑制NANOG表达。具有式B的化合物及其衍生物的非限制性实例包括例如公开于美国专利号8,299,106和PCT专利申请公布号WO2014160401中的衍生物。美国专利号8,299,106和PCT专利申请公布号WO2014160401的公开内容以引用的方式整体并入本文。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂或CSCPK抑制剂选自

任何前述项的前药、任何前述项的衍生物、任何前述项的药学上可接受的盐或任何前述项的溶剂合物。

制备具有式B的化合物及其衍生物的合适方法描述于美国专利号8,299,106和PCT专利申请公布号W02014160401中；每个申请的内容均以引用的方式整体并入本文。

如本文所用，术语“盐”包括与无机和/或有机酸和碱形成的酸式和/或碱式盐。如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指在合理的医学判断的范围内的那些盐，其适用于与受试者的组织接触而没有不当的毒性、刺激、过敏性应答等，并且与合理的益处/风险比率相称。药学上可接受的盐在本领域中是熟知的。例如，Berge等人在J.PharmaceuticalSciences(1977)66:1-19中详细描述了药学上可接受的盐。

药学上可接受的盐可以是与无机酸或有机酸形成的。合适的无机酸的非限制性实例包括盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸。合适的有机酸的非限制性实例包括乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸和丙二酸。合适的药学上可接受的盐的其他非限制实例包括己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐(benzenesulfonate)、苯磺酸盐(besylate)、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙烷磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙烷磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲烷磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟碱酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐(pamoate)、果胶酸盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一酸盐和戊酸盐。在一些实施方案中，可衍生出盐的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、乳酸、三氟乙酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸和水杨酸。

盐可以在分离和纯化本公开化合物期间原位制备，或者诸如通过使化合物分别与合适碱或酸反应来分开制备。衍生自碱的药学上可接受的盐的非限制性实例包括碱金属、碱土金属、铵和N⁺(C_1-4烷基)₄盐。合适的碱金属盐或碱土金属盐的非限制性实例包括钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐和铝盐。适当时，合适的药学上可接受的盐的另外非限制性实例包括使用平衡离子，诸如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低烷基磺酸根和芳基磺酸根形成的无毒铵、季铵和胺阳离子。可衍生出盐的合适有机碱的非限制性实例包括伯胺、仲胺、叔胺、取代胺(包括天然存在的取代胺)、环胺和碱性离子交换树脂，诸如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺和乙醇胺。在某些实施方案中，药学上可接受的碱加成盐可选自铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。

术语“溶剂合物”表示包含本公开的化合物的一个或多个分子与一种或多种溶剂的一个或多个分子的聚集体。本公开的化合物的溶剂合物包括例如水合物。

本文公开的至少一种化合物可以呈药物组合物的形式。在一些实施方案中，药物组合物可包含至少一种式A化合物和至少一种药学上可接受的载体。在一些实施方案中，药物组合物可包含至少一种式B化合物和至少一种药学上可接受的载体。在一些实施方案中，药物组合物可包含一种或多种化合物和至少一种药学上可接受的载体，其中一种或多种化合物能够在受试者中转化为至少一种式A化合物(即前药)。在一些实施方案中，药物组合物可包含一种或多种化合物和至少一种药学上可接受的载体，其中一种或多种化合物能够在受试者中转化为至少一种式B化合物(即前药)。

如本文所用，术语“载体”意指涉及或能够将主题药物化合物自身体的一个器官或部分携带或运输至身体的另一器官或部分的药学上可接受的材料、组合物或媒介物，例如像液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或包封材料。各载体在可与制剂的其他成分相容并且不损伤患者的意义上必须是“可接受的”。药学上可接受的载体、载体和/或稀释剂的非限制性实例包括：糖，诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石粉；赋形剂，诸如可可脂和栓剂蜡；油，诸如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和豆油；二醇，诸如丙二醇；多元醇，诸如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，诸如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，诸如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原质的水；等渗盐水；林格氏溶液(Ringer's solution)；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；和其他用于药物制剂中的无毒相容物质。润湿剂、乳化剂和润滑剂诸如十二烷基硫酸钠、硬脂酸镁和聚氧化乙烯-聚氧化丙烯共聚物以及着色剂、释放剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可存在于组合物中。

在一些实施方案中，至少一种式A化合物可以范围为约80mg至约1500mg的量施用。在一些实施方案中，至少一种化合物可以范围为约160mg至约1000mg的量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物每日可以范围为约300mg至约700mg的量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物可以范围为约700mg至约1200mg的量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物可以范围为约800mg至约1100mg的量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物可以范围为约850mg至约1050mg的量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物可以范围为约960mg至约1000mg的量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物的总量每日施用一次。在一些实施方案中，至少一种式A化合物以每日约480mg的剂量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物以每日约960mg的剂量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物以每日约1000mg的剂量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物的总量以分剂量每日施用一次以上，诸如每日施用两次(BID)或更频繁。在一些实施方案中，至少一种式A化合物可以范围为约80mg每日两次至约750mg每日两次的量施用。在一些实施方案中，至少一种化合物可以范围为约80mg每日两次至约500mg每日两次的量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物以约240mg每日两次的剂量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物以约480mg每日两次的剂量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物以约500mg每日两次的剂量施用。在一些实施方案中，至少一种式A化合物口服施用。

在一些实施方案中，癌症干性抑制剂可以范围为约300mg至约700mg的量施用。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂可以范围为约700mg至约1200mg的量施用。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂可以范围为约800mg至约1100mg的量施用。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂可以范围为约850mg至约1050mg的量施用。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂可以范围为约960mg至约1000mg的量施用。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂的总量每日施用一次。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂以每日约480mg的剂量施用。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂以每日约960mg的剂量施用。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂以每日约1000mg的剂量施用。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂的总量以分剂量每日施用一次以上，诸如每日施用两次(BID)或更频繁。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂以约240mg每日两次的剂量施用。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂以约480mg每日两次的剂量施用。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂以约500mg每日两次的剂量施用。在一些实施方案中，癌症干性抑制剂口服施用。

在一些实施方案中，至少一种式B化合物可以范围为约20mg至约600mg的量施用。在一些实施方案中，至少一种式B化合物可以范围为约50mg至约500mg的量施用。在一些实施方案中，至少一种式B化合物可以范围为约80mg至约400mg的量施用。在一些实施方案中，至少一种式B化合物可以范围为约80mg至约300mg的量施用。在一些实施方案中，至少一种式B化合物每日施用一次。在一些实施方案中，至少一种式B化合物以每日约100mg的剂量施用。在一些实施方案中，至少一种式B化合物以每日约200mg的剂量施用。在一些实施方案中，至少一种式B化合物以每日约300mg的剂量施用。在一些实施方案中，至少一种式B化合物的总量以单一日剂量施用。在一些实施方案中，至少一种式B化合物的总量以分剂量每日施用一次以上，诸如每日施用两次(BID)或更频繁。在一些实施方案中，至少一种式B化合物以约100mg每日一次的剂量施用。在一些实施方案中，至少一种式B化合物以约200mg每日一次的剂量施用。在一些实施方案中，至少一种式B化合物口服施用。

在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂可以范围为约20mg至约600mg的量施用。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂可以范围为约50mg至约500mg的量施用。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂可以范围为约80mg至约400mg的量施用。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂可以范围为约80mg至约300mg的量施用。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂每日施用一次。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂以每日约100mg的剂量施用。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂以每日约200mg的剂量施用。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂以每日约300mg的剂量施用。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂的总量以单一日剂量施用。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂的总量以分剂量每日施用一次以上，诸如每日施用两次(BID)或更频繁。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂以约100mg每日一次的剂量施用。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂以约200mg每日一次的剂量施用。在一些实施方案中，激酶靶向剂或激酶抑制剂口服施用。

在一些实施方案中，所述癌症干性抑制剂以范围为约80mg每日两次至约960mg每日两次的剂量，或以范围为约160mg每日两次至约240mg每日两次的剂量或约480mg每日两次的剂量口服施用，并且所述激酶靶向剂以范围为约100mg每日一次至约600mg每日一次或范围为200mg每日一次的剂量口服施用。在一些实施方案中，所述癌症干性抑制剂以约480mg每日两次的剂量口服施用，并且所述激酶靶向剂以约300mg每日一次的剂量口服施用。

本文公开的适合用于口服施用的药物组合物可呈如下形式：胶囊剂、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂(使用经调味的基质，通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶)、粉剂、颗粒剂、水性液体或非水性液体中的溶液剂、水性液体或非水性液体中的混悬剂、水包油、油包水乳剂、酏剂、糖浆剂、软锭剂(pastille)(使用惰性基质，诸如明胶、甘油、蔗糖和/或阿拉伯胶)和/或漱口剂，每种均含有预定量的本公开的至少一种化合物。

本文公开的药物组合物可以作为大丸剂、药糖剂或糊剂施用。

用于口服施用的固体剂型(胶囊剂、片剂、丸剂、糖锭剂、粉剂、颗粒剂等)可与一种或多种药学上可接受的载体(诸如柠檬酸钠或磷酸二钙)和/或以下中的任何一项进行混合：填充剂或增充剂，诸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、和/或硅酸；粘合剂，例如像羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；湿润剂，诸如甘油；崩解剂，诸如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐、碳酸钠和羧甲淀粉钠；溶液延迟剂，诸如石蜡；吸收加速剂，诸如季铵化合物；润湿剂，例如像，乙酰醇、单硬脂酸甘油酯和聚氧化乙烯-聚氧化丙烯共聚物；吸收剂，诸如高岭土和膨润土；润滑剂，诸如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠及其混合物；和着色剂。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，药物组合物还可以包含缓冲剂。类似类型的固体组合物还可使用诸如乳糖或奶糖的赋形剂以及高分子量聚乙二醇等来用作软质和硬质填充明胶胶囊中的填充剂。

用于口服施用的液体剂型可包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。除活性成分以外，液体剂型可含有通常在本领域中使用的惰性稀释剂，例如像水或其他溶剂、溶解剂和乳化剂诸如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(具体地是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油以及芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和山梨醇酐的脂肪酸酯及其混合物。另外，环糊精例如羟丙基-β-环糊精可用于增溶化合物。

药物组合物还可包含佐剂，诸如润湿剂、乳化剂和助悬剂、甜味剂、调味剂、着色剂、芳香剂和防腐剂。除根据本公开的组合物之外，混悬剂可含有助悬剂，例如像乙氧基化异十八醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶及其混合物。

用于直肠或阴道施用的本文公开的药物组合物可作为栓剂呈现，所述栓剂可通过将根据本公开的一种或多种化合物与一种或多种适合的无刺激性赋形剂或载体(包括，例如，可可脂、聚乙二醇、栓剂蜡或水杨酸酯)混合来制备，所述栓剂在室温下为固体，但在体温下为液体并且因此在直肠或阴道腔中将会熔化并且释放化合物。适合用于阴道施用的药物组合物还可包括包含本领域已知适合的载体的阴道栓剂、止血栓、霜剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾制剂。

用于本公开的药物组合物或药物片剂的局部或经皮施用的剂型可包括粉剂、喷雾剂、软膏、糊剂、霜剂、洗剂、凝胶剂、溶液剂、贴剂以及吸入剂。可在无菌条件下将药物组合物或药物片剂与药学上可接受的载体以及与可能需要的任何防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。

除本公开的药物组合物或药物片剂之外，软膏、糊剂、霜剂和凝胶剂可含有赋形剂，诸如动物或植物脂肪、油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅氧烷、膨润土、硅酸、滑石粉和氧化锌或其混合物。

除本公开的药物组合物或药物片剂之外，粉剂和喷雾剂可含有赋形剂，诸如乳糖、滑石粉、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉或这些物质的混合物。另外，喷雾剂可含有常规推进剂，诸如氯氟烃和挥发性未取代烃(诸如丁烷和丙烷)。

眼用制剂、眼用软膏、粉剂、溶液剂等也包括于本公开的范围内。

适合用于胃肠外施用的组合物可包括至少一种或多种药学上可接受的无菌等渗水性溶液或非水性溶液、分散体、混悬剂、乳剂或在临用之前可被重构成无菌可注射溶液或分散体的无菌粉剂，所述组合物可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、使所述制剂与预期受体的血液等渗的溶质，或助悬剂或增稠剂。

在各种实施方案中，本文所述的组合物包含选自式A化合物及其药学上可接受的盐和溶剂合物的至少一种化合物以及一种或多种表面活性剂。在一些实施方案中，表面活性剂是月桂基硫酸钠(SLS)、十二烷基硫酸钠(SDS)或一种或多种聚氧甘油酯。例如，聚氧甘油酯可以是月桂酰基聚氧甘油酯(有时称之为Gelucire^TM)或亚油酯酰聚氧甘油酯(有时称之为Labrafil^TM)。此类组合物的实例示出在PCT专利申请号PCT/US2014/033566中，所述专利申请的内容整体并入本文。

本发明提供了具有选定粒度分布的合适药物制剂的另外实施方案以及用于鉴别最佳粒度分布、合适药物方案、剂量和间隔的方法、制备2-乙酰基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮(包括其结晶形式)和另外特定适合的癌症干性抑制剂和激酶抑制剂的合适方法，如以WO2009/036099、WO 2009/036101、WO 2011/116398、WO2011/116399、WO 2014/169078和WO2009/033033公布的共同拥有的PCT申请中所述的，所述申请的内容均以引用的方式整体并入。

在各种实施方案中，本文所述的组合物包含选自式B化合物及其药学上可接受的盐和溶剂合物的至少一种化合物以及一种或多种表面活性剂。在一些实施方案中，表面活性剂是月桂基硫酸钠(SLS)、十二烷基硫酸钠(SDS)或一种或多种聚氧甘油酯。例如，聚氧甘油酯可以是月桂酰基聚氧甘油酯(有时称之为Gelucire^TM)或亚油酯酰聚氧甘油酯(有时称之为Labrafil^TM)。

在一些实施方案中，本文所述的化合物或药物组合物与多种已知治疗剂中的任一种组合施用，所述治疗剂包括例如化学治疗剂和其他抗赘生性剂、抗炎化合物和/或免疫抑制化合物。在一些实施方案中，本文所述的化合物、产物和/或药物组合物可与多种已知治疗中的任一种结合使用，所述治疗包括(以举例的方式)外科治疗和方法、放射疗法、化学疗法和/或激素或其他内分泌性相关治疗。

本文公开了抑制、减少和/或减弱CSC存活和/或自我更新的方法，所述方法包括施用治疗有效量的包含至少一种式A化合物的至少一种药物组合物与治疗有效量的包含至少一种式B化合物的至少一种药物组合物的组合。本文还公开了抑制、减少和/或减弱CSC存活和/或自我更新的方法，所述方法包括施用治疗有效量的至少一种式A化合物与治疗有效量的至少一种式B化合物的组合。

本文还公开了在受试者中治疗用常规化学疗法和/或靶向疗法难以治疗的至少一种癌症的方法，所述方法包括施用治疗有效量的至少一种式A化合物与治疗有效量的至少一种式B化合物的组合。在一些实施方案中，至少一种式A化合物包含在药物组合物中。在一些实施方案中，至少一种式B化合物包含在药物组合物中。

本文公开了在历经手术、肿瘤疗法(例如化学疗法)和/或放射疗法失败的受试者中治疗复发性癌症的方法，所述方法包括施用治疗有效量的至少一种式A化合物与治疗有效量的至少一种式B化合物的组合。在一些实施方案中，至少一种式A化合物包含在药物组合物中。在一些实施方案中，至少一种式B化合物包含在药物组合物中。

本文还公开了在受试者中治疗或预防癌症转移的方法，所述方法包括施用治疗有效量的至少一种式A化合物与治疗有效量的至少一种式B化合物的组合。在一些实施方案中，至少一种式A化合物包含在药物组合物中。在一些实施方案中，至少一种式B化合物包含在药物组合物中。

本文还公开了在受试者中预防癌症再发或抑制癌症的再生或复发的方法，所述方法包括施用治疗有效量的至少一种式A化合物与治疗有效量的至少一种式B化合物的组合。在一些实施方案中，所述方法为辅助疗法的一部分。在一些实施方案中，所述方法包括在癌症的初始治疗之后或与癌症的初始治疗同时地施用本公开的治疗组合。在一些实施方案中，初始治疗选自化学疗法、放射疗法、激素疗法、靶向疗法或生物疗法。在一些实施方案中，至少一种式A化合物包含在药物组合物中。在一些实施方案中，至少一种式B化合物包含在药物组合物中。

本文公开了在受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括施用治疗有效量的至少一种式A化合物与治疗有效量的至少一种式B化合物的组合。在一些实施方案中，至少一种式A化合物包含在药物组合物中。在一些实施方案中，至少一种式B化合物包含在药物组合物中。

在一些实施方案中，癌症为食道癌、胃食管交界处癌、胃食管腺癌、胃癌、软骨肉瘤、结肠直肠腺癌、乳腺癌、卵巢癌、头颈癌、黑素瘤、胃腺癌、肺癌、胰腺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、多发性骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、前列腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、小肠腺癌、子宫肉瘤或肾上腺皮质激素癌。在一些实施方案中，癌症为食道癌、胃食管交界处癌、胃食管腺癌、结肠直肠腺癌、乳腺癌、卵巢癌、头颈癌、黑素瘤、胃腺癌、肺癌、胰腺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、多发性骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、前列腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、小肠腺癌、子宫肉瘤或肾上腺皮质激素癌。在一些实施方案中，癌症为乳腺癌。在一些实施方案中，癌症为结肠直肠腺癌。在一些实施方案中，癌症为小肠腺癌。在一些实施方案中，癌症为肝细胞癌。在一些实施方案中，癌症为头颈癌。在一些实施方案中，癌症为肾细胞癌。在一些实施方案中，癌症为卵巢癌。在一些实施方案中，癌症为前列腺癌。在一些实施方案中，癌症为肺癌。在一些实施方案中，癌症为子宫肉瘤。在一些实施方案中，癌症为食道癌。在一些实施方案中，癌症为子宫内膜癌。在一些实施方案中，癌症为胆管癌。

在一些实施方案中，癌症可以是不可切除的。在一些实施方案中，癌症可以是晚期的。在一些实施方案中，癌症可以是难治性的。在一些实施方案中，癌症可以是复发性的。在一些实施方案中，癌症可以是转移性的。在一些实施方案中，癌症可以与STAT3的过表达相关联。在一些实施方案中，癌症可以与核β-连环蛋白相关联。

实施例

以下提供实施例以进一步说明本发明的不同特征。实施例还说明可用于实践本发明的方法。这些实施例不限制受权利要求书保护的发明。

本文所公开的方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的至少一种式A化合物与治疗有效量的至少一种式B化合物的组合。

实施例1：在用化合物A和化合物B的体外组合治疗之后对磷酸-STAT3的抑制增强

研究了化合物A、化合物B及其组合抑制癌细胞中的磷酸-STAT3的效应。对于这些研究，将Panc-1胰腺癌细胞用单独化合物A、用单独化合物B或用组合的化合物A和化合物B处理。参考图2，对于组合治疗，将人胰腺癌细胞(Panc-1)与化合物B(5μM)一起孵育20小时，然后用化合物B(5μM)和化合物A(1μM)共处理4小时。然后制备细胞裂解液并且通过蛋白质印迹检查STAT3、p-STAT3和β-肌动蛋白的水平。

如图2所示，相比于用单独化合物A或用单独化合物B的治疗，用组合的化合物A和化合物B的治疗使得对p-STAT3的抑制增强。

实施例2：在用化合物A和化合物B的体外治疗组合之后对Nanog的抑制增强

研究了化合物A和化合物B的治疗组合抑制癌细胞中的干性相关转录因子的影响。对于这些研究，将MKN28胃癌细胞用单独化合物A或用单独化合物B或用组合的化合物A和化合物B处理。参考图3，将人胃癌细胞(MKN28)用化合物B(5μM)、化合物A(1μM)或化合物B和化合物A(分别5μM和1μM)共处理24小时。然后制备细胞裂解液并且通过蛋白质印迹检查Nanog和β-肌动蛋白的水平。

如图3所示，当相比于用单独化合物A或用单独化合物B的治疗时，用组合的化合物A和化合物B的治疗使得对Nanog蛋白表达的抑制增强。

实施例3：用化合物A和化合物B的治疗组合体外增强对本体癌细胞集落形成的抑 制

通过集落形成测定关于本体癌细胞经历克隆源性扩增的能力来检查用化合物A和化合物B的治疗组合。对于这些研究，将人肾癌细胞(786-0)、人克隆癌细胞(RKO)和人克隆癌细胞(DLD-1)用单独化合物A、用单独化合物B或用组合的化合物A和化合物B处理。参考图4，将786-0人肾癌细胞、RKO人克隆癌细胞和DLD-1人克隆癌细胞以1000个细胞/孔接种到6孔板上。在涂铺后24小时，将细胞暴露于指定剂量的媒介物、化合物A(持续4小时)、化合物B(持续24小时)或化合物A和化合物B(持续24小时)。然后将细胞培养10-14天、固定并用Giemsa染色。

如图4所示，相比于用单独化合物A或用单独化合物B的治疗，用组合的化合物A和化合物B的治疗使得对786-0、RKO和DLD-1集落形成的抑制增强。在SW480结肠癌细胞、AGS胃癌细胞和MKN28胃癌细胞情况下观察到类似数据。

实施例4：在用化合物A和化合物B的体外治疗组合之后对癌症干细胞球形成的抑 制增强

研究了用化合物A和化合物B的组合治疗对癌症干细胞球形成(即球形成)的影响。对于这些研究，将DLD-1、RKO结肠癌细胞和ACHN肾癌细胞用细胞分离溶液解离出、用PBS洗涤并且以1x 10³个细胞/mL的浓度重悬于CSC培养基中。在培养72小时之后，将所得CSC与化合物A(0.5-1.0μM)、化合物B(1.25-2.5μM)或化合物A和化合物B两者(分别0.5-1.0μM和1.25-2.5μM)一起孵育。然后使CSC球生长72小时，之后使用发光细胞生存力测定(Promega)确定细胞生存力。

如图5所示，相比于用单独化合物A或用单独化合物B的治疗，化合物A和化合物B的治疗组合使得对DLD-1、RKO和ACHN CSC生存力的抑制增强。

概括地说，实施例1-4中所述的研究证实化合物A和化合物B在体外协同作用，并且这些数据表明了使用化合物A和化合物B的组合疗法用于各种各样的人类癌症的显著潜力。

实施例5：在体内组合药物疗法之后对化合物A和化合物B治疗的药效学标记物的 敲低增强

研究了化合物A和化合物B的治疗组合对针对体内药剂的各种药效学(PD)标记物的水平的影响。使用了人结肠癌(SW480)的小鼠异种移植模型。

使用异种移植组织的免疫荧光染色检查STK33和Nanog的水平。用8x 10⁶个人SW480结肠癌细胞皮下接种雌性裸小鼠。每日用媒介物、化合物A(100mg/kg)、化合物B(50mg/kg)或化合物A和化合物B(分别100mg/kg和50mg/kg)对动物口服治疗，总共14个剂量。在治疗结束时，从安乐死小鼠收获肿瘤。将剖离肿瘤的部分在4℃下在3.7％中性缓冲甲醛中固定过夜，并且然后进行石蜡包埋、切割成四微米切片，并且贴到带正电的载玻片上。在烘干和脱蜡之后，将具有肿瘤和对照组织的载玻片在98℃下在10mM pH 6.0柠檬酸钠溶液中孵育以便抗原修复。然后，将载玻片用针对P-STAT3(Tyr705)(兔，细胞信号传导，1:100)、STK33(小鼠，Abnova，1:200)、Nanog(兔，Santa Cruz，1:100)的一级抗体在4℃下过夜检测，并且然后用AlexaFluor荧光染料缀合的二级抗体(Invitrogen，1:300)在室温下检测一小时。在用含有DAPI(Invitrogen)的Prolong封固剂封装之后，将载玻片在带有20x物镜的Zeiss Axio Imager M2竖式荧光显微镜上检查并且用Zen软件分析。

如图6A所示，用化合物A而不是化合物B的治疗显著降低p-STAT3的细胞水平。如图6B所示，用化合物A的治疗还降低STK33和Nanog的细胞质水平(图6B)。通过对比，用化合物B的治疗减少两种蛋白质的核水平。化合物A和化合物B的治疗组合与增强异种移植组织中的STK33和Nanog的细胞质水平和核水平的降低相关联。

如图6(A)-(B)所示，通过免疫荧光染色分析异种移植组织中化合物A和/或化合物B的PD标记物(图6(A)和图6(B))。相比于用单独化合物A或用单独化合物B的治疗，化合物A和化合物B的治疗组合使得对人SW480结肠癌异种移植组织中的p-STAT3、STK33和Nanog水平的抑制增强。

实施例6：在用化合物A和化合物B的组合治疗之后体内抗癌症干细胞活性增强

使用上文在实施例5中所述的人结肠癌(SW480)的小鼠异种移植模型检查化合物A+化合物B组合在体内靶向CSC的能力。具体地，每日用媒介物、化合物A(100mg/kg)、化合物B(50mg/kg)或化合物A+化合物B(分别100mg/kg和50mg/kg)对小鼠口服治疗，总共14个剂量。在治疗14天之后，从安乐死小鼠收获肿瘤。通过用含有200U/mL胶原酶(Sigma)和100U/mLDNA酶I(Sigma)的DMEM(Gibco)在37℃下酶消化30分钟将肿瘤组织的部分解离到单细胞悬液中。然后将所得细胞通过40μm网式过滤器过滤并且在室温下在ACK裂解缓冲液(ThermoFisher)中孵育5min以去除红细胞。将1000个活肿瘤细胞(如通过台盼蓝(Gibco)染色评估的)悬浮于1mL球培养基中并且一式三份地涂铺在低附着力的细胞培养12孔板中。癌症球培养基包含于DMEM/F12(Gibco)中的B-27(Gibco)、20ng/ml EGF(R&D)、10ng/ml basicFGF(bFGF，R&D)、0.4％BSA Gemini和0.3％琼脂糖。在10天之后对所得肿瘤球进行计数。对具有>50个细胞的球进行评分。

如图7所示，相比于用单独化合物A或化合物B治疗的动物，用化合物A和化合物B组合对具有异种移植肿瘤的小鼠的治疗增强了CSC数目的减少。

实施例7：用化合物A和化合物B的组合治疗使得人类癌症的多个小鼠异种移植模 型的抗肿瘤活性增强

在人结肠癌的小鼠异种移植模型中，将SW480细胞皮下接种到雄性无胸腺裸小鼠中(8x 10⁶个细胞/只小鼠)并且使得形成明显肿瘤。一旦肿瘤达到大约200mm³，则用媒介物、化合物A(100mg/kg)、化合物B(50mg/kg)或化合物A和化合物B(分别100mg/kg和50mg/kg)对动物口服治疗，如图8中所指示。动物接受了总共9个剂量。相比于用单独化合物A或化合物B治疗的动物，用化合物A和化合物B作为组合疗法的治疗协同地抑制了肿瘤生长。针对化合物A+化合物B组合的肿瘤生长抑制计算为77％(p＝0.0005)。这些数据表明化合物A和化合物B可在有效的方案中安全地给药，这支持了用于人结肠癌治疗的另外临床评估。

在人胃癌的小鼠异种移植模型中，将MKN-45细胞皮下接种到雄性无胸腺裸小鼠中(8x 10⁶个细胞/只小鼠)并且使得形成明显肿瘤。一旦肿瘤达到大约170mm³，则用媒介物、化合物A(100mg/kg)、化合物B(50mg/kg)或化合物A和化合物B(分别100mg/kg和50mg/kg)对动物口服治疗，如图9中所指示。所有方案每日施用，总共12剂量。在治疗期间周期性地评价肿瘤尺寸。每个点表示5种肿瘤的平均值+SEM。

相比于用单独化合物A或化合物B治疗的动物，用化合物A和化合物B作为组合疗法的治疗增强了对肿瘤生长的抑制。针对化合物A+化合物B组合的肿瘤生长抑制计算为69％并且具有统计意义上的显著性(p＝0.0121)。这些数据表明化合物A和化合物B可在有效的方案中安全地给药，这支持了用于人胃癌治疗的另外临床评估。

本公开的许多特征和优点通过详细说明书是显而易见的，并且因此所附权利要求旨在涵盖落入本公开的真实精神和范围内的本公开的所有此类特征和优点。此外，因为许多修改和变型容易为本领域技术人员思及，所以不希望将本公开限制于所举例说明和描述的结构和操作，因此所有合适修改和等同物均可以被视为落入本公开的范围内。

Claims (19)

1.一种在受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用：

(a)治疗有效量的选自以下各项的至少一种癌症干性抑制剂：癌症干性抑制剂、其前药、任何前述项的药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物；以及

(b)治疗有效量的选自以下各项的至少一种激酶靶向剂：激酶靶向剂、其前药、任何前述项的药学上可接受的盐或任何前述项的溶剂合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少一种癌症干性抑制剂选自STAT3途径抑制剂。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述至少一种激酶靶向剂选自激酶抑制剂。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述至少一种癌症干性抑制剂选自2-(1-羟乙基)-萘并[2,3-b)]呋喃-4,9-二酮、2-乙酰基-7-氯代-萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮、2-乙酰基-7-氟代-萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮、2-乙酰基萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮和2-乙基-萘并[2,3-b]呋喃-4,9-二酮。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述至少一种激酶靶向剂选自

6.一种在受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用：

治疗有效量的选自以下各项的至少一种式A化合物：具有式A的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物，以及

治疗有效量的选自以下各项的至少一种式B化合物：具有式B的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物。

7.一种抑制、减少和/或减弱CSC存活和/或自我更新的方法，所述方法包括施用：

治疗有效量的选自以下各项的至少一种式A化合物：具有式A的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物，以及

治疗有效量的选自以下各项的至少一种式B化合物：具有式B的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物。

8.一种在受试者中治疗用常规化学疗法和/或靶向疗法难以治疗的至少一种癌症的方法，所述方法包括施用：

治疗有效量的选自以下各项的至少一种式A化合物：具有式A的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物，以及

治疗有效量的选自以下各项的至少一种式B化合物：具有式B的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物。

9.一种在受试者中预防癌症再发的方法，所述方法包括施用：

治疗有效量的选自以下各项的至少一种式A化合物：具有式A的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物，以及

治疗有效量的选自以下各项的至少一种式B化合物：具有式B的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物。

10.一种在受试者中抑制癌症的再生或复发的方法，所述方法包括施用：

治疗有效量的选自以下各项的至少一种式A化合物：具有式A的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物，以及

治疗有效量的选自以下各项的至少一种式B化合物：具有式B的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物。

11.根据权利要求6-10中任一项所述的方法，其中所述至少一种式A化合物以范围为约80mg每天两次至约960mg每天两次的量口服施用。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述至少一种式A化合物以范围为约160mg每天两次至约240mg每天两次的量口服施用。

13.根据权利要求11或12所述的方法，其中所述至少一种式A化合物以约240mg每天两次的量口服施用。

14.根据权利要求6-13中任一项所述的方法，其中所述至少一种式B化合物以范围为约50mg每天一次至约600mg每天一次的量口服施用。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述至少一种式B化合物以范围为约100mg每天一次至约300mg每天一次的量的剂量口服施用。

16.根据权利要求14所述的方法，其中所述至少一种式B化合物以每天约100mg或每天约200mg的量口服施用。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的方法，其中所述癌症为食道癌、胃食管交界处癌、胃食管腺癌、胃癌、软骨肉瘤、结肠直肠腺癌、乳腺癌、卵巢癌、头颈癌、黑素瘤、胃腺癌、肺癌、胰腺癌、肾细胞癌、肝细胞癌、子宫颈癌、脑肿瘤、多发性骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、前列腺癌、胆管癌、子宫内膜癌、小肠腺癌、子宫肉瘤或肾上腺皮质激素癌。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述癌症是不可切除的、晚期的、难治性的、复发性的或转移性的。

19.一种试剂盒，其包括：(1)选自以下各项的至少一种化合物：具有式A的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物，

(2)选自以下各项的至少一种化合物：具有式B的化合物、

任何前述项的前药、衍生物、药学上可接受的盐和任何前述项的溶剂合物，以及

用于施用和/或使用的说明书。