CN107624159B - 用于检查和处理显微的样本的方法和检查系统 - Google Patents

Abstract

利用成像装置和激光显微切割系统检查和处理布置在载物片上的显微的样本的方法。利用激光显微切割系统在载物片上产生至少两个标注记号；把样本放置到同一个载物片上；利用成像装置在载物片上产生样本的包括标注记号的数字图像；确定出图像的图像区，并产生表明图像区的位置的第一位置信息数据。识别图像中的标注记号并产生表明图像中的标注记号位置的第二位置信息数据。在把第一和第二位置信息数据提供给激光显微切割系统之后，使得带有样本和标注记号的载物片成像，识别标注记号，产生表明激光显微切割系统中的标注记号位置的第三位置信息数据。使得第一、第二和第三位置信息数据相关联，并利用激光显微切割系统处理与图像区相应的样本区域。

Description

用于检查和处理显微的样本的方法和检查系统

技术领域

本发明涉及一种用于利用放大的数字光学的成像装置并利用激光显微切割系统来检查和处理布置在载物片上的显微的样本的方法和检查系统，通过该成像装置利用光学器件使得所述样本成像并产生所述样本的数字的图像，该激光显微切割系统具有显微光学机构和激光单元，利用该激光显微切割系统产生用于处理所述样本的激光束。

背景技术

用于通过所谓的激光显微切割来处理显微的样本或样品的方法自从1970年代中期就已经存在了，并且此后持续地进一步发展。

在激光显微切割时，可以从组织复合物中隔离出细胞、组织区等，并获取为所谓的切片。激光显微切割的特殊优点是，组织与激光束短暂接触，通过这种接触，激光束旁边的组织几乎不改变。在此可以采取各种不同的方式来特定地获取切片。

例如可以借助红外或紫外激光束从样本隔离出切片，该切片在重力的影响下落入到合适的切片收纳容器中。在此，也可以与附着的膜片一起从样本切割出所述切片。

另一种方法是所谓的激光捕获显微切割。在这种情况下，借助相应的激光束加热热塑性的膜片，该膜片也可以与反应器皿连接。在此，膜片与样品的所希望的区域熔合，且可以在随后的步骤中去除。另一种替代的做法是，借助激光束使得切片贴附到切片收纳容器的顶盖上。用于激光显微切割的倒置式显微镜系统也是已知的。

用于激光显微切割的已知的显微镜系统具有入射光机构，在其光路中输入激光束。该激光束通过分别采用的显微镜透镜聚焦到样本上，该样本放置在可机动地自动移动的显微镜台上。切割线的产生方式例如为，在切割时使得显微镜台移动，以便使得样本相对于静止不动的激光束移动。但这还有如下缺点：在切割线产生期间无法良好地观察样本，因为该样本在可见区内移动。

因此，其它的具有激光扫描机构的激光显微切割系统更为有利，这些激光扫描机构被设计用来使得激光束或其照射点在此时静止不动的样本上相应地移动。这种激光显微切割系统也在本发明的范围内提供了特殊的优点。在EP 1 276 586 B1中记载了所述类型的一种特别有利的激光显微切割系统，其具有带楔形棱镜的激光扫描机构。

在两种情况下，也就是无论在让显微镜台在其中移动的激光显微切割系统中，还是在具有激光扫描机构的激光显微切割系统中，通常都用脉冲式激光处理，其中，每个激光脉冲都在样本中产生一个孔眼。使得这些孔眼彼此相连，必要时重叠，就产生了切割线。

对于显微检查方法而言，例如在医疗诊断中，除了使用严格意义下的显微镜外，还使用放大的数字光学的成像装置，特别是所谓的幻灯片式扫描仪。幻灯片式扫描仪被设计用来产生载物片的部分的或完整的图像，在该载物片上放置着显微的样本，随后可以在显示屏上分析和/或存储所述图像。所述分析也可以部分地或完全地自动进行，例如采用模式识别方法进行，采用这种方法例如能够识别出发生疾病变化的细胞或组织类型。幻灯片式扫描仪由此能够实现根据样本的数字图像进行检查或诊断，而无需直接使用显微镜。幻灯片式扫描仪提供了高效能的优点，能实现大规模地自动处理多个样本。

如果在相应的数字光学的成像装置例如幻灯片式扫描仪的数字成像中识别出了需要附加的分子生物学和/或生物化学的净化的细胞或组织类型，则可以在激光显微切割系统中处理即在那里从样本切割出显微样本的相应的区域。

样本在以前借助放大的数字光学的成像装置例如所提到的幻灯片式扫描仪予以检查，然而，通过激光显微切割事后处理这些样本通常已表明非常昂贵。尤其通常不可行的是，借助显微的样本的数字图像来规定一定的区域，并在激光显微切割系统中精确地处理同一个样品或载物片的同一些区域。

确切地说，相关的现有技术是产生连续切片，例如在US 2012/0045790 A1中所公开的那样。在这种情况下，从组织块例如利用切片机制得两个相邻的薄的组织切片，并予以不同的处理。对第一切片进行标准处理，随后产生相应的图像。在此例如对样本进行着色，并在幻灯片式扫描仪中予以数字化。病理学家借助该切片对要在激光显微切割系统中予以检查的样本区域进行选择。相应的区域信息存储在实验室信息系统中。与此并行地把第二切片供应给激光显微切割系统。在激光显微切割系统中，该第二切片然后基于针对第一切片做出的区域选择予以处理。相关地也可以采用比较缓慢地处理的且对于可靠的结果来说并非足够精确的数字的图像叠加程序。

相应的方法特别是具有如下缺点：第二切片上的相应的组织区在激光显微切割系统中并未精确地出现。这一点也在后面的说明中详述。

发明内容

在这种背景下，存在改善检查可行性的需求，用来特别是利用提到的放大的数字光学的成像装置和激光显微切割系统来检查和处理显微样本。

本发明涉及一种用来利用放大的数字光学的成像装置来检查布置在载物片上的显微的样本并用来利用激光显微切割系统来处理布置在载物片上的显微的样本的方法，通过该成像装置利用光学器件使得样本成像并产生样本的数字的图像，该激光显微切割系统具有显微光学机构和激光单元，利用该激光显微切割系统产生用于处理样本的激光束。

本发明涉及的这种方法具有如下步骤：

a)利用激光显微切割系统的激光束在载物片上产生至少两个标注记号，这些标注记号既可借助数字光学的成像装置识别，又可借助激光显微切割系统识别；

b)在按照前述步骤a)于载物片上产生标注记号之前或之后，把样本放置到同一个载物片上；

c)利用数字光学的成像装置在载物片上产生样本的数字图像，其中，该图像也包括标注记号；

d)确定出该图像的至少一个图像区，并产生第一位置信息数据，这些第一位置信息数据表明了图像中的至少一个图像区的位置；

e)在按照前述步骤d)确定出图像的至少一个图像区之前、期间或之后，识别图像中的标注记号并产生第二位置信息数据，这些第二位置信息数据表明了图像中的标注记号的位置；

f)把第一和第二位置信息数据提供给激光显微切割系统；

g)使得带有样本和标注记号的载物片成像，并利用激光显微切割系统识别标注记号，以及产生第三位置信息数据，这些第三位置信息数据表明了激光显微切割系统中的标注记号的位置；

h)使得第一位置信息数据、第二位置信息数据和第三位置信息数据相关联，并利用激光显微切割系统处理样本的至少一个样本区域，该至少一个样本区域与图像的在前述步骤d)中确定出的至少一个图像区对应。

根据本发明，因而首先利用激光显微切割系统的激光束在载物片上产生可借助成像装置和激光显微切割系统识别的至少两个标注记号。由于这些标注记号是利用激光显微切割系统的激光产生的，所以无需额外的标记器件或单独的标记机构。因而与已知的方法相反，在本发明的范围中并未采用或者并非必须采用比如由DE 10 2012 214 664 A1已知的具有已经存在的标注记号的载物片。

在按照刚刚介绍过的步骤于载物片上产生标注记号之前或之后，把样本放置在同一些载物片上，并可选地在载物片上予以合适的处理。样本可以在放置到载物片上之后例如予以固定、着色或脱水。

在本发明的范围内，随后借助独立于激光显微切割系统例如在另一地点提供的成像装置，既产生样本的数字的图像，又产生事先在载物片上生成的标注记号的数字的图像。载物片因而利用数字光学的成像装置例如利用幻灯片式扫描仪予以数字化，其中，得到了包括样本本身(或者有选择地也可仅仅包括其一部分)和标注记号的数字图像。

根据本发明还规定，例如通过病理学家的检查，或者采用自动的检查方法，确定出这种图像的至少一个图像区，并产生第一位置信息数据，其表明图像中的至少一个图像区的位置。该步骤本身相应于如下通常的方法：在所述方法中，病理学家手动地在样本切片或其数字图像中标记出例如用标记线圈出一定的区域，例如发生病理变化的组织区。对相应图像区的确定也可以部分地或完全地自动进行，如所述例如采用模式识别方法或组织识别方法。

表明图像中的至少一个图像区的位置的“位置信息数据”例如是与相应的标记线相对应的数字的数据，且可以采用本身已知的方式例如利用XML-文件予以提供，且必要时予以暂存。在本申请的惯用语中，图像中的至少一个图像区的“位置”在此包括图像中的例如一个或多个点的位置，但也包括可以由使用者或者借助相应的识别规则以任意方式规定的几何造型或不规则形状。

在确定出图像的至少一个图像区并产生第一位置信息数据之前、之后或同时，在本发明的方法的范围内，对图像中的标注记号进行识别，并产生表明图像中的标注记号的位置第二位置信息数据。对标注记号的识别也可以手动地进行，其方式例如为，病理学家借助鼠标或另一种数字的输入单元以规定的方式例如利用叉号标出相应图像中的标注记号。但替代地在这种情况下也可以规定，借助自动的识别规则来识别出图像中的标注记号。

这些标注记号为此可以具有预定的形式，其事先借助激光显微切割系统以所述形式产生。此外可以有帮助的是，至少两个标注记号不同地设计，并把第一、第二等标注记号具有何种形式存储起来。这种形式上的差别有助于识别出标注记号的顺序。这些标注记号例如可以设计成叉号形或十字形。第二位置信息数据原则上可以采用与第一位置信息数据相同的方式即例如以XML-文件的形式予以提供且必要时暂存起来。

本发明的方法规定，把第一位置信息数据和第二位置信息数据(和按照相应的顺序必要时其它的位置信息数据)提供给激光显微切割系统，并把事先数字化的即用来在成像装置中产生数字图像的载物片装入到激光显微切割系统中且在那里再次成像，在该载物片上放置着样本。这里当然也可行的是，例如首先在成像装置中将一系列载物片数字化并暂存起来。在此，这个或这些载物片可以在合适的仓储条件下保存。也就是说，在当前的方法的范围内并不明确需要在产生数字图像或诊断之后，即在确定出图像的至少一个图像区之后，或者在成像装置中识别出标注记号之后，立即把载物片放入到激光显微切割系统中。把带有样本的载物片装入到激光显微切割系统中并在那里成像可以在要执行的检查之前马上进行，从而样本能够得到保护。为了在激光显微切割系统中成像，例如采用在那里存在的数字的或部分数字的成像系统。

现在借助激光显微切割系统中对标注记号进行重新识别。这里也可以采用部分地或完全地手动的做法，或者采用部分地或完全地自动的做法。在任何情况下，在识别标注记号时或之后，产生表明激光显微切割系统中的标注记号的位置的第三位置信息数据。也可以提供与第一和第二位置信息数据相同或不同的相应的位置信息数据。

根据本发明现在可行的是，第一、第二和第三位置信息数据相互关联。因而尤其可行的是，使得第二和第三位置信息数据彼此关联，从而也能在激光显微切割系统中补偿相应的载物片的移动、转动、位移等。如所述，第二和第三位置信息数据分别涉及在相应载物片上的标注记号，从而特别是在相同的放大率情况下简单地且毫无问题地进行位置矫正。在成像装置中产生图像之前且在激光显微切割系统中处理之前定位载物片的精度因此会比较低。载物片是否有时略微转动地或移动地装入到成像装置或激光显微切割系统中尤其无关紧要。同样在不同的放大率情况下，在成像装置和激光显微切割系统中进行成像时，通常可以通过放大或缩小(缩放)位置信息数据进行简单的换算。如果进行相应的位置矫正，激光显微切割系统便通过有利地相应一同矫正的第一位置信息数据而精确地认知到样本的样本区域在相应的载物片上设置在何处，该样本区域与样本图像的根据成像装置的图像确定的至少一个图像区相应。因而可以有利地在本发明的范围内例如通过由第二和第三位置信息数据得到的矫正因数来矫正第一位置信息数据，这些第一位置信息数据涉及样本中的对应的样本区域的图像区。

通过这种方式始终都可以在激光显微切割系统中精确地处理例如要借助激光切割出的样本区域，该样本区域事先例如由病理学家或者通过数字的、处理图像数据的软件在图像中被确定为成像区。

本发明消除了现有技术的多个缺点。如参照US 2012/0045790 A1所述，通常必须制作连续切片，但这将引起特别是在例行诊断中无法忍受的显著的额外耗费(制作两个接口、多次着色和使用两个载物片)。特别是在考虑到并非诊断中的每个切片都被识别为需要净化的事实情况下更是如此。由此徒劳地产生不必借助激光显微切割系统予以处理的平行切片。如果在确定出需要净化时才制作连续切片，那么这需要重新处理样本，其对时间要求严格并潜藏着混淆的可能。另外，样本必须相应地存放起来。

在使用连续切片时的另一缺点是切割线的传递，这些切割线虽然能够在标准载物片上比较简单地规定，然而非常难以将其传递到另一个连续切片或者根本就未着色的、特别是未用盖玻片覆盖的连续切片上。两个切片即相应的显微的样本往往略微不同地在载物片上朝向，另外，由于切割过程和随后的处理步骤，出现组织压缩以及产生标本赝品。因此按照现有技术，这需要使用昂贵的图像重叠方法，如已述，这些图像重叠方法缓慢并且有时容易出错。此外，连续切片中的特别是较小的样本区域比如肿瘤转移区未同等地显现出来。

相比之下，为了扫描载物片和随后选出用于激光显微切割的一定的样本或样本区和随后的生物化学的或分子生物学的检查方法，本发明通过按所述方式采用标注记号提出了一种精致的、成本低廉的且普遍适用的方案。在DE 10 2012 214 664 A1中提出使用已经设有记号的载物片，例如与此相反，如已述，在本发明的范围内，这些记号简单地且成本低廉地在激光显微切割系统本身中产生。在激光显微切割系统中产生标注记号可以在规定的放大率情况下进行，比如在随后的数字摄像和产生数字图像时也采用该放大率。此外，可以通过专门地产生标注记号来考虑到用于识别相应的标注记号的数字成像装置的能力。这些标注记号因而可以借助激光显微切割系统例如在特别容易找到方面以任意方式产生。

例如在DE 10 2012 214 664 A1中使用了具有已经划设于其上的标注记号的载物片，与此相比，本发明的巨大优势在于能广泛地采用任意的玻璃载物片或膜片式载物片。本发明的方法的成本优势因而是显著的。在本发明的范围内，如已述，标注记号可以借助激光显微切割系统在载物片上在放置样本之前产生。这特别是当标注记号在载物片上或者在相应的基底上产生时是有利的，该基底在以后被一个无法再通过激光显微切割系统上标记的层覆盖。

特别有利的是，这些标注记号基于第四位置信息数据产生，这些第四位置信息数据规定了在载物片上的标注记号的位置。相应的第四位置信息数据例如也可以按相同的方式应用于多个载物片，从而可以给多个载物片相同地或者至少相仿地上标记。这例如可以便于在不同的各载物片上再次找到相应的标注记号，因为在这种情况下可以借助成像装置在相应的图像的一定的、预知的图像区内寻找这种标注记号。此点以相同的方式也适用于在激光显微切割系统中寻找标注记号。因此有利的是，利用第四位置信息数据在图像和/或激光显微切割系统中识别标注记号。

如已述，在本发明的范围内，可以使用至少部分地由玻璃或金属或塑料制成的和/或具有膜片的载物片，其中，在玻璃或金属或塑料和/或膜片中产生标注记号。产生标注记号在此例如也可以包括调整相应的激光显微切割系统的激光束特性，其中，例如为了处理玻璃或金属或塑料，规定了特别高的激光功率。

同样如已述，识别标注记号可以分别至少部分地采用自动的方法进行，但也可以手动地进行。实施自动的方法能实现特别是可重复地找到相应的标注记号，而没有被使用者解释错误的风险。

同样如已述，在本发明的方法中有利地也通过手动地和/或自动地划设要由激光显微切割系统采用的切割线来确定出图像的至少一个图像区，该切割线是相应图像中的边界线。相关地例如可以采用本身已知的用于规定和处理相应的切割线的方法。

同样如已述，有利的是，第一位置信息数据除了包括图像的至少一个图像区的纯粹的几何位置外，例如还包括其几何形状。该形状也可以是不规则的，且可以按任意方式规定。

本发明也涉及一种检查系统，其被设计用来检查和处理设置在载物片上的显微的样本，其具有放大的数字光学的成像装置且具有激光显微切割系统，该成像装置利用光学器件使得样本成像并产生样本的数字图像，该激光显微切割系统具有显微光学机构和激光单元，该激光单元产生用于处理样本的激光束。

该检查系统以控制机构为特征，这些控制机构被设计用来控制数字光学的成像装置和激光显微切割系统，并控制和/或实施和/或操作如前已述的方法。

检查系统的控制机构特别是包括安装在放大的数字光学的成像装置和/或激光显微切割系统上的软件。

检查系统按照本发明的一种特别优选的实施方式来构造，且优选还包括用于把第一和第二位置信息数据提供给激光显微切割系统的数据转移机构。

被设计用来控制和/或实施和/或操作前述方法的软件也是本发明的主题。

为了避免误解，这里需要强调，在本发明的范围内采用的方法或相应的检查系统明确地利用已经预备好的适合于显微的样本。所述样本例如可以是借助切片机从较大的组织块例如固定的器官或相应器官的活检中分割出来的薄切片。本发明因此不仅用于获取相应的样本，而且用于其检查和处理，特别是用于隔离出一定的样本区域。

切片机只有在预备显微的样本时采用。切片机为此也可以具有激光器。如上所述，借助切片机得到的切片放置到载物片上，必要时固定在那里，予以着色等。所述切片然后才供应用在本发明的方法或相应的检查系统中使用。切片机在其工作中与激光显微切割系统的根本性区别还有：在那里获取具有尽可能均匀的切片厚度的切片。切片机因此被构造用于产生大量相同的具有平行切面的切片，而激光显微切割系统则被设计用来按照与样本相关的标准、例如按照视觉标准分割出切片。本领域技术人员因此不会把在切片机上采用的技术方案转用至涵盖激光显微切割系统的应用的方法和检查系统。

本发明的其它优点和设计可由说明书和附图得到。

附图说明

图1以示意性的流程图的形式示出了根据本发明的一个实施方式的方法；

图2以示意图示出根据本发明的一个实施方式的检查系统；

图3以示意图示出根据本发明的一个实施方式标记的载物片。

具体实施方式

在这些附图中，彼此相应的部件标有相同的附图标记，故不予赘述。

图1中以示意性的流程图的形式示出了根据本发明的一个实施方式的方法，并在整体上标有100。

在该方法100的第一步骤101中，借助激光显微切割系统对载物片50进行手动的或至少部分自动的标注，这里极其简化地仅示出了激光单元11和用透镜表征的显微光学机构13，该激光单元发出激光束12。

在此，如前详述，以相同的或不同的形式在相应的载物片50上划设至少两个标注记号51。这例如使用前述的(第四)位置信息数据进行。关于标注记号51的相应数据可以存储在激光显微切割系统内的相应的文件中或存储在相应的软件中。

在一个未示出的步骤中—该步骤也可以与本发明的方法并行地或独立地在其之前或之后进行，对例如埋入在石蜡中的组织块或冷冻的组织样本予以加工，例如在切片机中切割，以便产生显微的样本。

相应的样本或切片(切片在此被视为样本)可以放置到事先在步骤101中被上标记的载物片50上，或者，按照步骤101产生标注记号51在放置样本之后进行。图1中所示的步骤102表明了此点，其中，这里示出了带有相应的样本52和标注记号51的载物片50。在所示例子中，样本52包括例如两个将要进行深入检查的组织区521和522。在步骤102中，也可以对相应的载物片50进行另一种预处理，在该载物片上放置有样本52。例如，这里可以进行着色、固定、脱水等等。为了在步骤102中在专门为此构造的激光显微切割系统内处理，相应的样本52例如也可以用膜片盖住。

在步骤103中，利用放大的数字光学的成像装置20，例如利用幻灯片式扫描仪，给在载物片50上准备好的样本52并给标注记号51产生数字图像。

在步骤104中，确定图像的至少一个图像区，并产生第一位置信息数据，该第一位置信息数据表明了图像中的至少一个图像区的位置。图像区在此标有41，图像标有40。此点例如可以在检查相应的图像40的过程中由病理学家进行，在这种情况下，病理学家用边界线规划出相应图像的感兴趣的图像区41，和/或，此点通过自动检查相应的数字图像来进行。在所示例子中，图像区41被示为方形，但它也可以具有任何其它形状，如已述。在本例中，图像区41相应于组织区521所在的样本区域。数字的图像40例如也可以标注到参考点42上。

在随后的步骤105中，同样对已在步骤101中在载物片上产生并在步骤103中成像的标注记号51进行识别，以便提供第一位置信息数据的参考点。如所述，参考点识别和其它探测步骤的顺序并不重要。基于此，在步骤105中例如产生合适的文件，比如XML文件。在所示例子中，针对步骤105，为了说明，示出了x、y坐标。然而如已述，也可以特别是针对图像区41规定复杂的形式。针对图像区41(参见步骤104)，用x、y示出了坐标，并示出了带有坐标x₁、y₁或x₂、y₂的标注记号。全部的位置信息都能以参考点42(参见步骤104)为参考，该参考点的坐标在此用x₀、y₀表示。

在步骤106中，把第一和第二位置信息数据例如通过相应的文件和/或相应的传输机构提供给激光显微切割系统10。

在随后的步骤107中，在激光显微切割系统10中对带有样本52和参考点51的载物片50进行重新检查并进行能产生图像的摄像。为此采用激光显微切割系统10的图像摄取机构14，其中，成像光路在此标有15。该光路可以延伸经过与激光束12相同的显微光学机构。

在步骤108中—其在此与步骤107一起示出，对载物片50的事先已在步骤101中在同一个或另一个激光显微切割系统10内产生的标注记号51进行识别，从而重新存在一个坐标系，用于处理载物片50上的相应样本52。基于此，可以产生第三位置信息数据，这些第三位置信息数据表明了在装入到激光显微切割系统10中的载物片50上的标注记号51的位置，进而最终表明了在激光显微切割系统10本身中的标注记号51的位置。

在根据图1中所示的实施方式的方法的步骤109中，如前所述，第一、第二和第三位置信息数据彼此相关，另外按照步骤109处理样本52的样本区域53，该样本区域相应于图像40的至少一个在步骤104中确定的图像区41。因为这一点始终都基于彼此相关的数据借助标注记号51进行，所以这种处理特别可靠。

图2中示意性地示出根据本发明的一个实施方式的检查系统，并在整体上标有200。相应的检查系统的各个部件极其简化地示出。

检查系统200包括放大的数字光学的成像装置20和激光显微切割系统10。(放大的数字光学的成像装置20和激光显微切割系统10分别具有合适的软件。)为了在成像装置20和激光显微切割系统10之间传递数据，即特别是第一和第二位置信息数据或者一个或多个相应的含有它们的文件，设置了数据传输装置30。该数据传输装置或数据转移机构30设有合适的接口31和32，这些接口能实现成像装置20或激光显微切割系统10的连接。成像装置20或激光显微切割系统10也被设置用来与合适的接口10a或20a相应地连接。

在图3中示意性地示出了在本发明的范围内使用的、已经被标记的载物片，并在整体上标有50。该载物片50是在产生这里也标有51的标注记号之后，且在把样本52放置到载物片50上之后被示出的。在所示例子中，载物片50包括膜片55，样本52放置在该膜片上，并且在该膜片上产生标注记号51。膜片55固定在合适的框架56例如可重复使用的钢框架内。

在图3中还用虚线示出了样本52的数字的图像40，该图像可以借助比如在图2中所示的数字光学的成像装置20得到。产生相应的图像40可以包括产生样本52的图像，但也可以包括产生整个载物片50的图像。然而在任何情况下，所产生的图像40都包括标注记号51。病理学家可以在相应的图像上确定出至少一个图像区41，例如带有在分子生物学和/或生物化学上要予以检查的特性的图像区41。这里与图1中所示的例子相反，该图像区具有不规则的形状。在本发明的范围内产生的位置信息数据(“第一”)位置信息数据表明在图像40中的至少一个图像区41的位置。其它的位置信息数据(“第二”)位置信息数据表明在图像40中的标注记号51的位置。

附图标记清单

10 激光显微切割系统

11 激光单元

12 激光束

13 显微光学机构

14 图像摄取机构

15 成像光路

20 成像装置

30 数据传输装置

31、32 接口

10a、20a 接口

50 载物片

51 标注记号

52 样本

521、522 组织区

53 样本区域

55 膜片

40 数字的图像

41 图像区

42 参考点

100 根据本发明的方法

101 第一步骤

102 第二步骤

103 第三步骤

104 第四步骤

105 第五步骤

106 第六步骤

108 第八步骤

109 第九步骤

200 检查系统

Claims (12)

1.一种利用放大的数字光学的成像装置(20)并利用激光显微切割系统(10)来检查和处理布置在载物片(50)上的显微的样本(52)的方法(100)，通过该成像装置利用光学器件使得所述样本(52)成像并产生所述样本的数字的图像，该激光显微切割系统具有显微光学机构(13)和激光单元(11)，利用该激光显微切割系统产生用于处理所述样本(52)的激光束(12)，该方法具有如下步骤：

a)利用所述激光显微切割系统(10)的所述激光束(12)在所述载物片(50)上产生至少两个标注记号(51)，所述标注记号既可借助数字光学的所述成像装置(20)识别，又可借助所述激光显微切割系统(10)识别；

b)在按照前述步骤a)于所述载物片(50)上产生所述标注记号(51)之前或之后，把所述样本(52)放置到同一个载物片(50)上；

c)利用数字光学的所述成像装置(20)在所述载物片(50)上产生所述样本(52)的数字图像(40)，其中，该图像(40)也包括所述标注记号(51)；

d)确定出所述图像(40)的至少一个图像区(41)，并产生第一位置信息数据，所述第一位置信息数据表明了所述图像(40)中的至少一个图像区(41)的位置；

e)在按照前述步骤d)确定出所述图像(40)的至少一个图像区(41)之前、期间或之后，识别所述图像(40)中的所述标注记号(51)并产生第二位置信息数据，所述第二位置信息数据表明了所述图像(40)中的所述标注记号(51)的位置；

f)把第一和第二位置信息数据提供给所述激光显微切割系统(10)；

g)使得带有所述样本(52)和所述标注记号(51)的所述载物片(50)成像，并利用所述激光显微切割系统(10)识别所述标注记号(51)，以及产生第三位置信息数据，所述第三位置信息数据表明了所述激光显微切割系统(10)中的所述标注记号(51)的位置；

h)使得第一位置信息数据、第二位置信息数据和第三位置信息数据相关联，并利用所述激光显微切割系统(10)处理所述样本(52)的至少一个样本区域(53)，所述至少一个样本区域与所述图像(40)的在前述步骤d)中确定出的至少一个图像区(41)对应。

2.如权利要求1所述的方法(100)，其中，按照步骤a)借助所述激光显微切割系统(10)基于第四位置信息数据产生至少两个所述标注记号(51)，所述第四位置信息数据规定了在所述载物片(50)上的所述标注记号的位置。

3.如权利要求2所述的方法(100)，其中，利用所述第四位置信息数据识别所述图像(40)中的和/或所述激光显微切割系统(10)中的所述标注记号(51)。

4.如权利要求1所述的方法(100)，其中，利用所述数字光学的所述成像装置(20)的光学器件使得所述样本放大地成像。

5.如权利要求1所述的方法(100)，其中，使用至少部分地由玻璃、金属或塑料制成的和/或具有膜片(55)的载物片(50)，其中，在所述玻璃、金属、塑料和/或所述膜片中产生所述标注记号(51)。

6.如权利要求1所述的方法(100)，其中，按照步骤e)和/或按照步骤g)对所述标注记号(51)的识别至少部分地采用手动的和/或自动的方法进行。

7.如权利要求1所述的方法(100)，其中，按照步骤d)通过手动地和/或自动地划设要由所述激光显微切割系统(10)采用的切割线来确定出所述图像(40)的至少一个图像区(41)。

8.如权利要求1所述的方法(100)，其中，所述第一位置信息数据还描述了所述图像(40)的至少一个图像区(41)的形状。

9.一种被设计用来检查和处理设置在载物片(50)上的显微的样本(52)的检查系统(200)，具有：

-放大的数字光学的成像装置(20)，该成像装置利用光学器件使得设置在所述载物片(50)上的样本(52)成像并产生所述样本(52)的数字的图像(40)，

-激光显微切割系统(10)，该激光显微切割系统具有显微光学机构(13)和激光单元(11)，该激光单元产生用于处理所述样本(52)的激光束，

其特征在于控制机构，所述控制机构被设计用来控制数字光学的所述成像装置(20)和所述激光显微切割系统(10)，并控制和/或实施和/或操作根据权利要求1-8中任一项所述的方法(100)。

10.如权利要求9所述的检查系统(200)，其中，所述控制机构包括安装在放大的数字光学的所述成像装置(20)和/或所述激光显微切割系统(10)上的软件。

11.如权利要求9或10所述的检查系统(200)，其特征在于，

a)所述激光显微切割系统(10)被设计用来利用所述激光束(12)在所述载物片(50)上产生至少两个标注记号(51)，所述标注记号既可借助数字光学的所述成像装置(20)识别，又可借助所述激光显微切割系统(10)识别；

b)其中，所述样本(52)放置在同一个载物片(50)上，其中，所述放置在按照前述步骤a)产生所述标注记号(51)之前或之后在所述载物片(50)上进行；

c)数字光学的所述成像装置(20)被设计用于在所述载物片(50)上产生所述样本(52)的数字图像(40)，其中，该图像(40)也包括所述标注记号(51)；

d)数字光学的所述成像装置(20)被设计用于产生所述图像(40)的至少一个图像区(41)和第一位置信息数据，所述第一位置信息数据表明了所述图像(40)中的至少一个图像区(41)的位置；

e)数字光学的所述成像装置(20)还被设计用于识别所述图像(40)中的所述标注记号(51)并产生第二位置信息数据，所述第二位置信息数据表明了所述图像(40)中的所述标注记号(51)的位置，其中，这可以在按照前述步骤d)确定出至少一个图像区(41)之前、期间或之后进行；

f)所述检查系统(200)被设计用于把第一和第二位置信息数据提供给所述激光显微切割系统(10)；

g)激光显微切割系统(10)被设计用于使得带有所述样本(52)和所述标注记号(51)的所述载物片(50)成像，并识别所述标注记号(51)，以及产生第三位置信息数据，所述第三位置信息数据表明了所述激光显微切割系统(10)中的所述标注记号(51)的位置；和

h)所述激光显微切割系统(10)被设计用于使得第一位置信息数据、第二位置信息数据和第三位置信息数据相关联，并处理所述样本(52)的至少一个样本区域，所述至少一个样本区域与所述图像(40)的在步骤d)中确定出的至少一个图像区(41)对应。

12.如权利要求11所述的检查系统(200)，其包括用于把第一和第二位置信息数据提供给激光显微切割系统(10)的数据转移机构(30)。

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