CN107595922A - 一种山竹果壳中主要成分的制备方法及其在制药中的应用 - Google Patents
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Abstract
提供一种山竹果壳中富含捯捻子素类成分和山竹果壳中富含原花青素类成分的制备方法,以及制备物在药品、保健品与护肤品中的应用。本发明对山竹果壳中大量色素和主要化学成分进行了研发,从废弃的山竹果壳中提取色素及氧杂蒽酮,不仅降低了色素及氧杂蒽酮的生产成本,而且使果壳变废为宝,为其进一步开发利用提供了技术依据。
Description
技术领域
本发明属于生物医药健康领域,具体地,涉及一种从山竹果壳中制备其主要成分的方法,以及其在主要成分在制备保健品与护肤品中的应用。
背景技术
山竹(Garcinia mangostana),又称为山竺、莽吉柿,是藤黄科(Guttiferae)藤黄属(Garcinia)热带常绿乔木。山竹果实为球形果实,果壳厚硬呈紫红色,果肉占果实重量的29-45%,果壳约占鲜重的50%。在东南亚国家,山竹果壳一直作为传统医药,用于皮肤疾病。许多研究发现,山竹果壳含有大量的氧杂蒽酮,它是一种传统的多酚酸类物质,具有抗炎、抗氧化、抗血栓、抗肿瘤活性,并对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、霍乱弧菌等细菌具有抗菌活性。目前,山竹以鲜食为主,食用后产生大量的果壳被当做垃圾处理。目前,国内外多位研究者对山竹植物各个部分进行化学成分提取分离研究,大部分研究者主要得到的均是具有不同取代基的xanthone化合物,其中α-,β-和γ-mangostin(MAG)类。FujioAsai等人从藤黄属植物山竹果的外皮中提取出了8种xanthone,其中甲苯萃取部分得到α-MAG,进一步利用硅胶柱层析,高效液相色谱法和SephadexLH-20,分离得到了α-,β-和γ-MAG。申请人及其团队早期研究分离鉴定了大量MAG类化合物,并通过活性筛选首次阐明该类成分具有抑制脂肪酸合成酶的作用。Yu-Ling Huang等人利用萃取,多次硅胶柱色谱,凝胶色谱,从3kg山竹果壳中得到了54mgα-MAG,18mgβ-MAG和120mgγ-MAG。Sunit Suksamrarn等人通过萃取,多次硅胶柱色谱技术,从7.06kg山竹果壳中得到了400mgα-MAG,18mgβ-MAG。Chairungsrilerd将未成熟的山竹果实用乙醇提取、过滤、离心分层、干燥,得到水不溶部分进一步通过柱层析,以正己烷-氯仿-甲醇洗脱,得到α-和γ-MAG。
这些前人研究工作,大量的使用了硅胶柱、反相材料、凝胶分子排阻色谱等柱层析分离方法,时间漫长而得率不高,制约了该类成分的纯化与应用。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术存在的上述不足之处,提供一种从干燥山竹果壳中提取制备其主要成分部位的方法。本发明的目的之二是提供一种适合工业化生产山竹果壳中主要成分的最佳工艺。本发明的目的之三是提供一种生产山竹果壳中红色粉末状物质,富含花青素及表儿茶素,用于医药保健以及护肤。为了充分利用宝贵资源减少浪费,本发明对山竹壳中大量色素和主要化学成分进行了研究,从废弃的山竹果壳中提取色素及氧杂蒽酮,不仅降低了色素及氧杂蒽酮的生产成本,而且使果壳变废为宝,为其进一步开发利用提供了扶技术依据。
为了实现本发明的上述目的,本发明提供了如下的技术方案:
山竹果壳中富含捯捻子素类成分,所述的富含捯捻子素类成分是通过下述的方法获得的:
将山竹果实的果肉及果壳分离,自然风干山竹壳,测其水分,水分达到12%以下时,将其粉碎过10-60目筛;
以山竹粉末:80%乙醇=1:5-1:10(m:v)(g/ml)加热至85℃-92℃回流提取2-3次,每次120-180min,抽滤,合并滤液,减压浓缩滤液并回收乙醇至无醇味,得到水混悬浸膏,将浸膏由不同比例0-80%乙醇水搅拌溶解,之后离心,离心条件:4000rpm/min,10min,室温25℃;然后将离心后的上清液及沉淀分别放入冷冻干燥设备进行干燥,所得冻干物粉碎后得红色粉状上清液部分和黄色粉状沉淀部分,黄色沉淀部分富含捯捻子素类成分。
本发明同时提供了山竹果壳中富含原花青素类成分,所述的富含原花青素类成分是通过下述的方法获得的:
将山竹果实的果肉及果壳分离,自然风干山竹壳,测其水分,水分达到12%以下时,将其粉碎过10-60目筛;
以山竹粉末:80%乙醇=1:5-1:10(m:v)(g/ml)加热至85℃-92℃回流提取2-3次,每次120-180min,抽滤,合并滤液,减压浓缩滤液并回收乙醇至无醇味,得到水混悬浸膏,将浸膏由不同比例0-80%乙醇水搅拌溶解,之后离心,离心条件:4000rpm/min,10min,室温25℃;然后将离心后的上清液及沉淀分别放入冷冻干燥设备进行干燥,粉碎后得红色粉状上清液部分和黄色粉状沉淀部分,红色溶解物为富含原花青素类成分。
本发明还提供了所述的山竹果壳中富含捯捻子素类成分在制备抗炎剂、抗氧化剂、抗血栓、抗肿瘤药物中的应用。
以及,所述的山竹果壳中富含捯捻子素类成分在制备抗金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、霍乱弧菌中的应用。
和,所述的山竹果壳中富含捯捻子素类成分在制备功能食品中的应用。
此外,提供了所述的山竹果壳中富含原花青素类成分在制备功能食品中的应用。
以及,所述的山竹果壳中富含原花青素类成分在制备抗炎剂、抗氧化剂以及络氨酸酶抑制剂中的应用。
和,所述的山竹果壳中富含原花青素类成分在制备皮肤护理品和美白化妆品中的应用。
本发明另外还提供了从山竹果壳中制备其主要成分的方法,该方法利用80%乙醇水作为溶剂,提取干燥的山竹果壳,同时,过滤提取滤液并减压浓缩滤液并回收乙醇至无醇味,得到水混悬浸膏,将浸膏由不同比例0-80%乙醇水搅拌溶解,之后离心,得到黄色沉淀富含捯捻子素类成分,得到红色溶解物富含原花青素类成分,依据二者主成分构成不同,区别应用。
根据所述的从山竹果壳中制备其主要成分的方法,该方法包括下述步骤:
a.将山竹果实的果肉及果壳分离,自然风干山竹壳,测其水分,水分达到12%以下时,将其粉碎过10-60目筛;
b.以山竹粉末:80%乙醇=1:5-1:10(m:v)(g/ml)加热至85℃-92℃回流提取2-3次,每次120-180min,抽滤,合并滤液;
c.减压浓缩滤液,回收乙醇,使滤液乙醇含量降到30%时即刻停止,整体溶液呈混悬状态;
d.混悬液离心,离心条件:4000rpm/min,10min,室温25℃;然后将离心后的上清液及沉淀分别放入冷冻干燥设备进行干燥,粉碎后得红色粉状上清液部分和黄色粉状沉淀部分,黄色沉淀为富含捯捻子素类成分,红色溶解物为富含原花青素类成分。
本发明提供的从山竹果壳中制备其主要成分的方法,利用80%乙醇水作为溶剂,提取干燥的山竹果壳,同时,调节乙醇水的比例,使溶剂的乙醇含量降为30%,通过离心,得到黄色沉淀富含捯捻子素类成分,得到红色溶解物富含原花青素类成分,依据二者主成分构成不同,区别应用。本发明通过活性筛选表明,红色部位具有抗炎、抗氧化以及络氨酸酶抑制活性,能够用于皮肤护理以及美白应用。
与现有技术或产品相比,本发明具有如下优益性:
1.本发明所涉及的制备方法,可以直接将山竹果壳中的主要成分进行有效分离,(见附图)操作简单易行,生产成本低,山竹果壳利用率及产品得率高、经济效益好。
2.本发明所涉及的制备方法,生产过程不使用任何有毒有机溶剂,安全卫生,无因外来物质产生的副作用。
3.本发明所涉及的技术过程无污水、废气排放,山竹果壳渣还可以再做他用。
4.本发明所制备出的产物用途广泛,可作为中间体用于山竹系列产品的开发(如应用于医药、食品、日用品开发等领域)。
附图说明
图1为山竹果壳粗提物浸膏在不同浓度乙醇中的溶解度。
图2至图9为浸膏经不同浓度乙醇溶解后,离心所得其上清液及沉淀的HPLC图谱。(用水和7种不同浓度乙醇溶解浸膏,离心,分别得到8种上清液和沉淀,干燥,备用。将上清液和沉淀进行HPLC检测,流动相:甲醇:水=83:17,柱温25℃)。由HPLC分析表明,30%乙醇水进行溶解和离心能够得到不含捯捻子素类成分的上清液,富含原花青素。
图2.为0%乙醇水溶解上清液HPLC图谱。
图2-1.为0%乙醇水作为溶剂所得沉淀HPLC图谱。
图3.为10%乙醇水溶解上清液HPLC图谱。
图3-1.为10%乙醇水作为溶剂所得沉淀HPLC图谱。
图4.为30%乙醇水溶解上清液HPLC图谱。
图4-1.为30%乙醇水作为溶剂所得沉淀HPLC图谱。
图5.为40%乙醇水溶解上清液HPLC图谱。
图5-1.为40%乙醇水作为溶剂所得沉淀HPLC图谱。
图6.为50%乙醇水溶解上清液HPLC图谱。
图6-1.为50%乙醇水作为溶剂所得沉淀HPLC图谱。
图7.为60%乙醇水溶解上清液HPLC图谱。
图7-1.为60%乙醇水作为溶剂所得沉淀HPLC图谱。
图8.为70%乙醇水溶解上清液HPLC图谱。
图8-1.为70%乙醇水作为溶剂所得沉淀HPLC图谱。
图9.为80%乙醇水溶解上清液HPLC图谱。
图10为α-MAG(α-mangostin)对照品HPLC图谱(纯度:99.11%)。
图11为γ-MAG(γ-mangostin)对照品HPLC图谱(纯度:96.58%)。
图12为EC(epicatechin)对照品HPLC图谱(纯度97.01%)。
图13为α-MAG、γ-MAG9与EC的标准曲线。
图14为30%乙醇水溶解沉淀所得黄色粉状样品HPLC图谱。
图15为30%乙醇水溶解所得红色粉状样品HPLC图谱。
具体实施方式:
下面结合附图,用本发明的具体实施例来进一步说明本发明的实质性内容,但并不以此来限定本发明。
实施例1:
取干山竹果壳粉末1500g,按1:5加80%乙醇,在90℃下回流提取180min,冷却至室温,抽滤,重复再提取1次,合并2次滤液,减压浓缩回收乙醇,得山竹果壳粗提物浸膏,用30%乙醇水溶解浸膏,离心(4000rpm/min,10min),得上清液及沉淀,分别转入冷冻干燥箱,干燥,分别粉碎后即得红色粉状物、黄色粉状物。按原料计,红色产品得率为21.93%(经查阅文献,红色产品主要成分为原花青素类),红色粉状物中,表儿茶素含量为1.24%;黄色粉状产品得率为9.6%(经查阅文献,黄色产品主要成分为倒捻子素),黄色粉状物中,α-mangostin含量为49.05%;γ-mangostin含量为9.24%。
实施例2:
取干山竹果壳粉末2400g,按1:6加80%乙醇,在92℃下回流提取150min,冷却至室温,抽滤,重复再提取1次,合并2次滤液,减压浓缩回收乙醇,得山竹果壳粗提物浸膏,用30%乙醇水溶解浸膏,离心(4000rpm/min,10min),得上清液及沉淀,分别转入冷冻干燥箱,干燥,分别粉碎后即得红色粉状物、黄色粉状物。按原料计,红色产品得率为16.4%(经研究,证明红色产品主要成分为原花青素类),红色粉状物中,表儿茶素的含量为1.26%;黄色粉状产品得率为7.8%(经查阅文献,黄色产品主要成分为倒捻子素),黄色粉状物中,α-mangostin含量为49.2%;γ-mangostin含量为9.6%。
实施例3:
取干山竹果壳粉末7000g,按1:5加80%乙醇,在92℃下回流提取180min,冷却至室温,抽滤,重复再提取1次,合并2次滤液,减压浓缩回收乙醇,得山竹果壳粗提物浸膏,用30%乙醇水溶解浸膏,离心(4000rpm/min,10min),得上清液及沉淀,分别转入冷冻干燥箱,干燥,分别粉碎后即得红色粉状物、黄色粉状物。按原料计,红色产品得率为15.6%(经查阅文献,红色产品主要成分为原花青素类)红色粉状物中,表儿茶素含量为1.40%;黄色粉状产品得率为7.2%(经查阅文献,黄色产品主要成分为倒捻子素),黄色粉状物中,α-mangostin含量为49.5%;γ-mangostin含量为9.31%。
实施例4:
从山竹果壳中制备其主要成分的方法:
a.将10公斤山竹果实的果肉及果壳分离,自然风干山竹壳,测其水分,水分达到12%以下时,将其粉碎过60目筛,称重得2.5kg;
b.以山竹粉末:80%乙醇=1:5-1:10(m:v)(g/ml)加热至85℃-92℃回流提取2-3次,每次120-180min,抽滤,合并滤液,减压浓缩,回收乙醇,得到粗提物浸膏;
c.将粗提物浸膏用水或不同浓度乙醇溶解,所述的不同浓度乙醇为10%、30%、40%、50%、60%、70%及80%的乙醇;
d.离心4000rpm/min,10min,然后将离心后的上清液及沉淀分别放入冷冻干燥设备进行干燥,粉碎后得红色粉状上清液部分和黄色粉状沉淀部分,黄色沉淀为富含捯捻子素类成分,红色溶解物为富含原花青素类成分。
图2-9为浸膏经不同浓度乙醇溶解后,离心所得其上清液及沉淀的HPLC图谱。用水和7种不同浓度乙醇溶解浸膏,离心,分别得到8种上清液和沉淀,干燥,备用。将上清液和沉淀进行HPLC检测,流动相:甲醇:水=83:17,柱温25℃。由HPLC分析表明,30%乙醇水进行溶解和离心能够得到不含捯捻子素类成分的上清液,富含原花青素。
上述分析结果表明,以30%乙醇水作为最终处理的乙醇含量要求,通过简单的离心操作,能够轻松的将山竹果壳中两类有效成分,即捯捻子素类与原花青素类分开:得到以α-MAG为主的黄色沉淀物,富含捯捻子素;得到以表儿茶素为代表的原花青素类红色部位,且不含捯捻子素类成分。两类成分区分明显,交叉极低,所得产品即黄色沉淀与红色溶解物,能够用于不同的医药保健用途。山竹红色粉状物(GMP)生物活性研究。表1至表3为山竹红色粉状物生物活性。
表1.体外抗氧化活性(DPPH自由基清除实验)
表2.体外抗炎活性(NO生成抑制实验)
表3.酪氨酸酶抑制活性
生物活性结果表明,所得山竹红色粉状物(GMP)具有很好的体外抗氧化、抗炎活性,具有较好的络氨酸酶抑制活性。
实施例5:
按实施例1-4的方法先制得山竹果壳中黄色沉淀富含捯捻子素类成分或者红色溶解物富含原花青素类成分,按常规加注射用水,精滤,灌封灭菌制成注射液。
实施例6:
按实施例1-4的方法先制得山竹果壳中黄色沉淀富含捯捻子素类成分或者红色溶解物富含原花青素类成分,将其溶于无菌注射用水中,搅拌使溶,用无菌抽滤漏斗过滤,再无菌精滤,分装于2安瓿中,低温冷冻干燥后无菌熔封得粉针剂。
实施例7:
按实施例1-4的方法先制得山竹果壳中黄色沉淀富含捯捻子素类成分或者红色溶解物富含原花青素类成分,与赋形剂重量比为9:1的比例加入赋形剂,制成粉剂。
实施例8:
按实施例1-4的方法先制得山竹果壳中黄色沉淀富含捯捻子素类成分或者红色溶解物富含原花青素类成分,按其与赋形剂重量比为1:5–1:10的比例加入赋形剂,制粒压片。
实施例9:
按实施例1-4的方法先制得山竹果壳中黄色沉淀富含捯捻子素类成分或者红色溶解物富含原花青素类成分,按常规口服液制法制成口服液。
实施例10:
按实施例1-4的方法先制得山竹果壳中黄色沉淀富含捯捻子素类成分或者红色溶解物富含原花青素类成分,按其与赋形剂重量比为3:1的比例加入赋形剂,制成胶囊或颗粒剂或冲剂。
实施例11:
按实施例1-4的方法制得山竹果壳中黄色沉淀富含捯捻子素类成分或红色溶解物富含原花青素类成分12.4克,加入淀粉600克,乳糖200克,薄荷醇5克,羧甲基淀粉钠183克,制成含片,作为功能食品。
Claims (10)
1.山竹果壳中富含捯捻子素类成分,其特征在于所述的富含捯捻子素类成分是通过下述的方法获得的:
将山竹果实的果肉及果壳分离,自然风干山竹壳,测其水分,水分达到12%以下时,将其粉碎过10-60目筛;
以山竹粉末:80%乙醇=1:5-1:10(m:v)(g/ml)加热至85℃-92℃回流提取2-3次,每次120-180min,抽滤,合并滤液,减压浓缩滤液并回收乙醇至无醇味,得到水混悬浸膏,将浸膏由不同比例0-80%乙醇水搅拌溶解,之后离心,离心条件:4000rpm/min,10min,室温25℃;然后将离心后的上清液及沉淀分别放入冷冻干燥设备进行干燥,所得冻干物粉碎后得红色粉状上清液部分和黄色粉状沉淀部分,黄色沉淀部分富含捯捻子素类成分。
2.山竹果壳中富含原花青素类成分,其特征在于所述的富含原花青素类成分是通过下述的方法获得的:
将山竹果实的果肉及果壳分离,自然风干山竹壳,测其水分,水分达到12%以下时,将其粉碎过10-60目筛;
以山竹粉末:80%乙醇=1:5-1:10(m:v)(g/ml)加热至85℃-92℃回流提取2-3次,每次120-180min,抽滤,合并滤液,减压浓缩滤液并回收乙醇至无醇味,得到水混悬浸膏,将浸膏由不同比例0-80%乙醇水搅拌溶解,之后离心,离心条件:4000rpm/min,10min,室温25℃;然后将离心后的上清液及沉淀分别放入冷冻干燥设备进行干燥,粉碎后得红色粉状上清液部分和黄色粉状沉淀部分,红色溶解物为富含原花青素类成分。
3.权利要求1所述的山竹果壳中富含捯捻子素类成分在制备抗炎剂、抗氧化剂、抗血栓、抗肿瘤药物中的应用。
4.权利要求1所述的山竹果壳中富含捯捻子素类成分在制备抗金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、霍乱弧菌中的应用。
5.权利要求1所述的山竹果壳中富含捯捻子素类成分在制备功能食品中的应用。
6.权利要求2所述的山竹果壳中富含原花青素类成分在制备功能食品中的应用。
7.权利要求2所述的山竹果壳中富含原花青素类成分在制备抗炎剂、抗氧化剂以及酪氨酸酶抑制剂中的应用。
8.权利要求2所述的山竹果壳中富含原花青素类成分在制备皮肤护理品和美白化妆品中的应用。
9.从山竹果壳中制备其主要成分的方法,其特征在于该方法利用80%乙醇水作为溶剂,提取干燥的山竹果壳,同时,过滤提取滤液并减压浓缩滤液并回收乙醇至无醇味,得到水混悬浸膏,将浸膏由不同比例0-80%乙醇水搅拌溶解,之后离心,得到黄色沉淀富含捯捻子素类成分,得到红色溶解物富含原花青素类成分,依据二者主成分构成不同,区别应用。
10.根据权利要求9所述的从山竹果壳中制备其主要成分的方法,其特征在于该方法包括下述步骤:
a.将山竹果实的果肉及果壳分离,自然风干山竹壳,测其水分,水分达到12%以下时,将其粉碎过10-60目筛;
b.以山竹粉末:80%乙醇=1:5-1:10(m:v)(g/ml)加热至85℃-92℃回流提取2-3次,每次120-180min,抽滤,合并滤液;
c.减压浓缩滤液,回收乙醇,使滤液乙醇含量降到30%时即刻停止,整体溶液呈混悬状态;
d.混悬液离心,离心条件:4000rpm/min,10min,室温25℃;然后将离心后的上清液及沉淀分别放入冷冻干燥设备进行干燥,粉碎后得红色粉状上清液部分和黄色粉状沉淀部分,黄色沉淀为富含捯捻子素类成分,红色溶解物为富含原花青素类成分。
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