CN107593455B - 一种利用led灯促进油橄榄快速育苗的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，涉及油橄榄育苗技术领域，包括以下步骤：外植体选择、愈伤诱导培养、增殖培养、生根培养、移栽，上述整个培养基培养过程中采用LED灯光照培养。本发明选择当年抽生的带芽新梢切成茎段，将茎段分别经愈伤诱导培养、增殖培养和生根培养后，将其移栽到苗圃上进行育苗，整个组织培养过程中光环境调控采用LED灯作为光源，调节其发育过程，且600‑700nm的红光或400‑500nm的暖白光对愈伤组织有很好的诱导作用，与培养基共同作用，满足油橄榄在营养上和生理上对细胞分裂分化的要求，促进愈伤组织的生长，采用本方法繁殖周期短，繁殖系数大，扩繁出的油橄榄小植株生长健壮、生长能力强，能够保持油橄榄的优良性状。

Description

一种利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法
技术领域
本发明涉及油橄榄育苗技术领域，具体涉及一种利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法。
背景技术
油橄榄(Olea europaea.)是木犀科木犀榄属常绿乔木，是世界著名的木本油料兼果用树种，栽培品种有较高食用价值，含丰富优质食用植物油--橄榄油。橄榄油中含有油橄榄鲜果中的所有营养成分，含有65.8～84.9％的单不饱和脂肪酸和3.5～22％的多不饱和脂肪酸。单不饱和脂肪酸除了供给人体大量的热能外，还能调整人体血浆中高、低密度脂蛋白胆固醇的比例，食用橄榄油可以增加人体内的高密度脂蛋白HDL的平衡浓度，保证人体对胆固醇的要求，而且还会降低血浆中低密度脂蛋白LDL的浓度，防止人体内胆固醇过量。多不饱和脂肪酸可分为ω-3脂肪酸(主要为亚麻酸)和ω-6脂肪酸(主要为亚油酸)，这些是人体所必需的且人体又不能自身合成的脂肪酸。医学研究证明：当人体的必需脂肪酸含量ω-3脂肪酸和ω-6脂肪酸的比率为1:4时，各种疾病很难入侵人体，而橄榄油中所含的必需脂肪酸的比例正好是1:4，同人乳相似，说明橄榄油的食用价值非常高。除此之外，橄榄油中还含有丰富的微量元素角鲨烯、黄酮类物质和多酚化合物，这些物质具有增强人体免疫力，延缓衰老的作用。因此，当今医学界公认橄榄油为最益于健康的食用油之一，长期食用有助于促进骨骼发育，增强消化系统功能，有促进新陈代谢、降低胆固醇、预防心血管疾病、抗癌防癌、美容护发等功效。
油橄榄原产于地中海沿岸国家，迄今已有3000年的栽培历史，19世纪中期引入我国，主要分布在甘肃、四川和云南等。油橄榄其主要的育苗方法：播种育苗、扦插繁殖、嫁接繁殖和组织培养，播种育苗、扦插繁殖和嫁接繁殖已经是很成熟的技术，但育苗速度较慢进而限制了应用。组织培养是一种快速高效的育苗方法，利用组织培养技术进行油橄榄育苗的研究相对较少。组织培养中愈伤组织的形成是植物通过组织培养的方式诱导成苗的关键步骤。目前常见的用于油橄榄的愈伤组织培养的培养基大都存在诱导愈伤组织的形成率低等现状。
光是植物生长中最重要的环境因子之一，它不仅为植物光合作用提供辐射能，还为植物提供信号转导，调节其发育过程，植物随着周围光环境的变化来调整植株形态、生理机能和基因选择表达，高效的适应周围的环境。LED光源为冷光源，与传统的光源相比，具有较高的光电转化效率。LED光源使用直流电，具有节能、体积小、寿命长、波长固定及低发热量等优点，同时还可调整发光强度与光质，大大提高了栽培的空间利用效率。因此，LED光源被认为是闭锁式植物工厂、组培室以及太空农业等领域应用较为理想的人工光源。但是目前将LED灯用于油橄榄的组织培养还未见相关报道。
发明内容
针对现有油橄榄育苗方法中的播种育苗、扦插繁殖、嫁接繁殖等育苗方法存在育苗速度慢的缺陷，以及利用组织培养诱导愈伤组织形成率低的现状，本发明提出了一种利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，愈伤组织形成率高。
为解决上述问题，本发明采用以下技术方案：
一种利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，包括以下步骤：
（1）外植体选择：取油橄榄健壮植株当年抽生的带芽新梢，取枝条中段切成茎段，用洗衣粉水溶液清洗干净，冲洗，用次氯酸钠溶液浸泡消毒杀菌，用无菌水冲洗；
（2）愈伤诱导培养：将油橄榄茎段置于培养室，接种到愈伤诱导培养基进行培养，得到愈伤组织，所述愈伤诱导培养基为MS + 2.0~3.0mg/L 6-BA + 0.2~0.5mg/L SA + 0.5~0.7mg/L IAA + 5.0~8.0g/L蔗糖 + 2.0~3.0g/L琼脂，调节pH至5.0-6.0，先暗培养，再采用LED灯光照培养；
（3）增殖培养：将愈伤组织转移到增殖培养基进行继代培养，得到继代苗，所述增殖培养基为MS + 1.8~2.5mg/L 6-BA + 2.0~3.0 mg/L 2,4-D + 0.7~1.0 mg/LKT + 7.0~10.0g/L蔗糖 + 2.0~3.0g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用LED灯光照培养；
（4）生根培养：将继代苗转移到生根培养基进行生根培养，得到组培苗，所述生根培养基为1/2MS + 0.3~0.5mg/L IAA + 1.0~2.0mg/L NAA + 0.3~0.6 mg/L 2,4-D + 4.0~7.0g/L蔗糖+ 2.0~3.0g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用LED灯光照培养；
（5）移栽：将组培苗从培养室中取出，用水冲洗干净表面的培养基，晾干，将其移栽到苗圃上，当幼苗高度达15-20cm时移栽到种植园中；
上述采用LED灯光照培养，所述LED灯为红光LED灯或暖白光LED灯，红光LED灯发出的红光波长为600-700nm，暖白光LED灯发出的暖白光波长为400-500nm。
植物细胞都具有全能性，能够再生新植株，但是不同品种、不同器官之间的分化能力有巨大差异，直接影响组织培养的成功率，本发明中选择当年抽生的带芽新梢，正是其生长旺季，且该部位组织代谢旺盛，再生能力强，组织培养成功率大，对其进行清洗消毒处理，能够有效去除其表明附着的微生物，进一步提高组织培养的成功率。将茎段分别经愈伤诱导培养、增殖培养和生根培养后，将其移栽到苗圃上进行进行育苗，整个育苗期短。选择的愈伤诱导培养基中的细胞分裂素6-BA和生长素 IAA配合MS培养基，能够保证组织生长所需的营养成分，加速愈伤组织的生长，水杨酸SA具有调控植物生长的作用，将低浓度的SA添加到愈伤诱导培养基中，能够促进愈伤组织的形成，愈伤组织形成率高；增殖培养基中的细胞分裂素6-BA 、生长素2,4-D ，以及激动素KT配合MS培养基，增殖效果好，具有良好的组织培养速度，且增殖培养基中蔗糖含量高，能够满足快速增殖新陈代谢所需要的能量，从而扩大组培苗的产量，进而降低生产成本；选择的生根培养基能够很好的诱导促使愈伤组织分化成根，且采用IAA和NAA配合作用，诱导出的根较为健壮，提高其成活率。整个组织培养过程中光环境调控采用LED灯作为光源，为植物提供信号转导，调节其发育过程，且600-700nm的红光或400-500nm的暖白光能被叶绿素强烈吸收，光合作用最强，对愈伤组织有很好的诱导作用，与培养基共同作用，满足油橄榄在营养上和生理上对细胞分裂分化的要求，促进愈伤组织的生长，采用本方法繁殖周期短，繁殖系数大，30天左右仅能获得大量的组培苗，移栽后的幼苗生长状况良好，扩繁出的油橄榄小植株生长健壮、生长能力强，能够保持油橄榄的优良性状。
只有选取优良的种质，其基因较为优良，组织培养容易成功。且外植体的大小选择对组织培养成功率也有影响，材料太大，不易彻底消毒，污染率高，材料太小，多形成愈伤组织，甚至难以成活，优选地，所述步骤（1）中，取油橄榄健壮植株当年抽生的带芽新梢，取枝条中段切成1-2cm的茎段，用洗衣粉水溶液清洗干净，冲洗，用10%次氯酸钠溶液浸泡5-10min消毒杀菌，用无菌水冲洗3-4次。
优选地，所述油橄榄健壮植株为五年生以上的油橄榄健壮植株。
优选地，所述步骤（2）中，愈伤诱导培养基为MS + 2.5mg/L 6-BA + 0.4mg/L SA +0.6mg/L IAA + 7.0g/L蔗糖 + 2.5g/L琼脂，调节pH至5.0-6.0。
优选地，所述步骤（2）中，先在12-18℃下暗培养2-3d，再在18-22℃下采用LED灯光照培养7-10d，光照时间12h/d。
优选地，所述步骤（3）中，增殖培养基为MS + 2.2mg/L 6-BA + 2.5 mg/L 2,4-D +0.9 mg/LKT + 9.0g/L蔗糖 + 2.5g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0。
优选地，所述步骤（3）中，在22-26℃下采用LED灯光照培养9-12d，光照时间12h/d。
优选地，所述步骤（4）中，生根培养基为1/2MS + 0.4mg/L IAA + 1.5mg/L NAA +0.5 mg/L 2,4-D + 5.0g/L蔗糖+ 2.8g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0。
优选地，所述步骤（4）中，在22-26℃下采用LED灯光照培养10-14d，光照时间12h/d。
有益效果：本发明选择当年抽生的带芽新梢，组织代谢旺盛，再生能力强，组织培养成功率大，将茎段分别经愈伤诱导培养、增殖培养和生根培养后，将其移栽到苗圃上进行进行育苗，整个组织培养过程中光环境调控采用LED灯作为光源，为植物提供信号转导，调节其发育过程，且600-700nm的红光或400-500nm的暖白光对愈伤组织有很好的诱导作用，与培养基共同作用，满足油橄榄在营养上和生理上对细胞分裂分化的要求，促进愈伤组织的生长，采用本方法繁殖周期短，繁殖系数大，30天左右仅能获得大量的组培苗，移栽后的幼苗生长状况良好，扩繁出的油橄榄小植株生长健壮、生长能力强，能够保持油橄榄的优良性状。
具体实施方式
以下通过具体实施方式对本发明作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明的范围仅限于以下的实例。在不脱离本发明上述方法思想的情况下,根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或变更,均应包含在本发明的范围内。
实施例1
本发明提出了一种利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，包括以下步骤：
（1）外植体选择：取五年生以上的油橄榄健壮植株当年抽生的带芽新梢，取枝条中段切成1cm的茎段，用洗衣粉水溶液清洗干净，冲洗，用10%次氯酸钠溶液浸泡5min消毒杀菌，用无菌水冲洗3次；
（2）愈伤诱导培养：将油橄榄茎段置于培养室，接种到愈伤诱导培养基进行培养，得到愈伤组织，所述愈伤诱导培养基为MS + 2.0mg/L 6-BA + 0.2mg/L SA + 0.5mg/L IAA+ 5.0g/L蔗糖 + 2.0g/L琼脂，调节pH至5.0-6.0，先在12℃下暗培养2d，再在18℃下采用暖白光LED灯光照培养7d，光照时间12h/d；
（3）增殖培养：将愈伤组织转移到增殖培养基进行继代培养，得到继代苗，所述增殖培养基为MS + 1.8mg/L 6-BA + 2.0 mg/L 2,4-D + 0.7 mg/LKT + 7.0g/L蔗糖 +2.0g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用暖白光LED灯光照在22℃下光照培养9d，光照时间12h/d；
（4）生根培养：将继代苗转移到生根培养基进行生根培养，得到组培苗，所述生根培养基为1/2MS + 0.3mg/L IAA + 1.0mg/L NAA + 0.3 mg/L 2,4-D + 4.0g/L蔗糖+2.0g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用暖白光LED灯光照在22℃下光照培养10d，光照时间12h/d；
（5）移栽：将组培苗从培养室中取出，用水冲洗干净表面的培养基，晾干，将其移栽到苗圃上，当幼苗高度达15cm时移栽到种植园中；
上述采用暖白光LED灯光照培养，暖白光波长为400nm。
实施例2
本发明提出了一种利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，包括以下步骤：
（1）外植体选择：取五年生以上的油橄榄健壮植株当年抽生的带芽新梢，取枝条中段切成1.5cm的茎段，用洗衣粉水溶液清洗干净，冲洗，用10%次氯酸钠溶液浸泡8min消毒杀菌，用无菌水冲洗3次；
（2）愈伤诱导培养：将油橄榄茎段置于培养室，接种到愈伤诱导培养基进行培养，得到愈伤组织，所述愈伤诱导培养基为MS + 2.7mg/L 6-BA + 0.4mg/L SA + 0.7mg/L IAA+ 7.5g/L蔗糖 + 2.4g/L琼脂，调节pH至5.0-6.0，先在15℃下暗培养3d，再在20℃下采用红光LED灯光照培养10d，光照时间12h/d；
（3）增殖培养：将愈伤组织转移到增殖培养基进行继代培养，得到继代苗，所述增殖培养基为MS + 2.0mg/L 6-BA + 2.6 mg/L 2,4-D + 0.8mg/LKT + 9.5g/L蔗糖 + 2.2g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用红光LED灯光照在25℃下光照培养10d，光照时间12h/d；
（4）生根培养：将继代苗转移到生根培养基进行生根培养，得到组培苗，所述生根培养基为1/2MS + 0.3mg/L IAA + 1.6mg/L NAA + 0.4 mg/L 2,4-D + 4.5g/L蔗糖+2.4g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用红光LED灯光照在25℃下光照培养13d，光照时间12h/d；
（5）移栽：将组培苗从培养室中取出，用水冲洗干净表面的培养基，晾干，将其移栽到苗圃上，当幼苗高度达17cm时移栽到种植园中；
上述采用红光LED灯光照培养，红光波长为654nm。
实施例3
本发明提出了一种利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，包括以下步骤：
（1）外植体选择：取五年生以上的油橄榄健壮植株当年抽生的带芽新梢，取枝条中段切成1.5cm的茎段，用洗衣粉水溶液清洗干净，冲洗，用10%次氯酸钠溶液浸泡10min消毒杀菌，用无菌水冲洗4次；
（2）愈伤诱导培养：将油橄榄茎段置于培养室，接种到愈伤诱导培养基进行培养，得到愈伤组织，所述愈伤诱导培养基为MS + 2.5mg/L 6-BA + 0.4mg/L SA + 0.6mg/L IAA+ 7.0g/L蔗糖 + 2.5g/L琼脂，调节pH至5.0-6.0，先在16℃下暗培养3d，再在20℃下采用红光LED灯光照培养9d，光照时间12h/d；
（3）增殖培养：将愈伤组织转移到增殖培养基进行继代培养，得到继代苗，所述增殖培养基为MS + 2.2mg/L 6-BA + 2.5 mg/L 2,4-D + 0.9 mg/LKT + 9.0g/L蔗糖 +2.5g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用红光LED灯光照在25℃下光照培养11d，光照时间12h/d；
（4）生根培养：将继代苗转移到生根培养基进行生根培养，得到组培苗，所述生根培养基为1/2MS + 0.4mg/L IAA + 1.5mg/L NAA + 0.5 mg/L 2,4-D + 5.0g/L蔗糖+2.8g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用红光LED灯光照在25℃下光照培养13d，光照时间12h/d；
（5）移栽：将组培苗从培养室中取出，用水冲洗干净表面的培养基，晾干，将其移栽到苗圃上，当幼苗高度达20cm时移栽到种植园中；
上述采用红光LED灯光照培养，红光波长为700nm。
实施例4
本发明提出了一种利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，包括以下步骤：
（1）外植体选择：取五年生以上的油橄榄健壮植株当年抽生的带芽新梢，取枝条中段切成2cm的茎段，用洗衣粉水溶液清洗干净，冲洗，用10%次氯酸钠溶液浸泡10min消毒杀菌，用无菌水冲洗4次；
（2）愈伤诱导培养：将油橄榄茎段置于培养室，接种到愈伤诱导培养基进行培养，得到愈伤组织，所述愈伤诱导培养基为MS + 3.0mg/L 6-BA + 0.5mg/L SA +0.7mg/L IAA+8.0g/L蔗糖 + 3.0g/L琼脂，调节pH至5.0-6.0，先在18℃下暗培养3d，再在22℃下采用红光LED灯光照培养10d，光照时间12h/d；
（3）增殖培养：将愈伤组织转移到增殖培养基进行继代培养，得到继代苗，所述增殖培养基为MS + 2.5mg/L 6-BA + 3.0 mg/L 2,4-D + 1.0 mg/LKT + 10.0g/L蔗糖 +3.0g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用红光LED灯光照在26℃下光照培养12d，光照时间12h/d；
（4）生根培养：将继代苗转移到生根培养基进行生根培养，得到组培苗，所述生根培养基为1/2MS + 0.5mg/L IAA + 2.0mg/L NAA + 0.6 mg/L 2,4-D + 7.0g/L蔗糖+3.0g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用红光LED灯光照在26℃下光照培养14d，光照时间12h/d；
（5）移栽：将组培苗从培养室中取出，用水冲洗干净表面的培养基，晾干，将其移栽到苗圃上，当幼苗高度达20cm时移栽到种植园中；
上述采用红光LED灯光照培养，红光波长为600nm。
实施例5
本发明提出了一种利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，包括以下步骤：
（1）外植体选择：取五年生以上的油橄榄健壮植株当年抽生的带芽新梢，取枝条中段切成1.5cm的茎段，用洗衣粉水溶液清洗干净，冲洗，用10%次氯酸钠溶液浸泡5min消毒杀菌，用无菌水冲洗3次；
（2）愈伤诱导培养：将油橄榄茎段置于培养室，接种到愈伤诱导培养基进行培养，得到愈伤组织，所述愈伤诱导培养基为MS + 2.0mg/L 6-BA + 0.5mg/L SA + 0.5mg/L IAA+ 7.0g/L蔗糖 + 2.8g/L琼脂，调节pH至5.0-6.0，先在15℃下暗培养3d，再在20℃下采用暖白光LED灯光照培养10d，光照时间12h/d；
（3）增殖培养：将愈伤组织转移到增殖培养基进行继代培养，得到继代苗，所述增殖培养基为MS + 2.5mg/L 6-BA + 2.5 mg/L 2,4-D + 1.0 mg/LKT + 8.0g/L蔗糖 +2.5g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用暖白光LED灯光照在24℃下光照培养11d，光照时间12h/d；
（4）生根培养：将继代苗转移到生根培养基进行生根培养，得到组培苗，所述生根培养基为1/2MS + 0.5mg/L IAA + 1.5mg/L NAA + 0.5mg/L 2,4-D + 5.0g/L蔗糖+ 2.0g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用暖白光LED灯光照在26℃下光照培养12d，光照时间12h/d；
（5）移栽：将组培苗从培养室中取出，用水冲洗干净表面的培养基，晾干，将其移栽到苗圃上，当幼苗高度达20cm时移栽到种植园中；
上述采用暖白光LED灯光照培养，暖白光波长为500nm。
对比例1
一种油橄榄快速育苗的方法，包括以下步骤：
（1）外植体选择：取五年生以上的油橄榄健壮植株当年抽生的带芽新梢，取枝条中段切成1.5cm的茎段，用洗衣粉水溶液清洗干净，冲洗，用10%次氯酸钠溶液浸泡10min消毒杀菌，用无菌水冲洗4次；
（2）愈伤诱导培养：将油橄榄茎段置于培养室，接种到愈伤诱导培养基进行培养，得到愈伤组织，所述愈伤诱导培养基为MS + 2.5mg/L 6-BA + 0.4mg/L SA + 0.6mg/L IAA+ 7.0g/L蔗糖 + 2.5g/L琼脂，调节pH至5.0-6.0，先在16℃下暗培养3d，再在20℃下采用普通日光灯光照培养9d，光照时间12h/d；
（3）增殖培养：将愈伤组织转移到增殖培养基进行继代培养，得到继代苗，所述增殖培养基为MS + 2.2mg/L 6-BA + 2.5 mg/L 2,4-D + 0.9 mg/LKT + 9.0g/L蔗糖 +2.5g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用普通日光灯光照在25℃下光照培养11d，光照时间12h/d；
（4）生根培养：将继代苗转移到生根培养基进行生根培养，得到组培苗，所述生根培养基为1/2MS + 0.4mg/L IAA + 1.5mg/L NAA + 0.5 mg/L 2,4-D + 5.0g/L蔗糖+2.8g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用普通日光灯光照在25℃下光照培养13d，光照时间12h/d；
（5）移栽：将组培苗从培养室中取出，用水冲洗干净表面的培养基，晾干，将其移栽到苗圃上，当幼苗高度达20cm时移栽到种植园中。
本发明实施例1-5和对比例1中愈伤组织形成率、生根率和移栽成活率数据见表1。
表1 油橄榄组织培养性能参数
实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 实施例5 对比例1
愈伤组织形成率/% 68 83 85 78 72 45
生根率/% 80 91 88 82 85 72
移栽成活率/% 92 95 96 96 94 81
将本发明实施例1-5和对比例1中移栽到苗圃上生长的幼苗移栽到种植园前观察其根部，发现实施例1-5中的油橄榄幼苗的根部要明显比对比例1中的强壮些。从表1中可以看出，实施例1-5中愈伤组织形成率、生根率和移栽成活率均明显优于对比例1。相较于对比例1，实施例3中的愈伤组织形成率约为其2倍，生根率和移栽成活率均高于10%以上。由此说明，经由LED灯光照培养，能明显促进油橄榄组织育苗的形成率和生根率。

Claims (6)

1.一种利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）外植体选择：取油橄榄健壮植株当年抽生的带芽新梢，取枝条中段切成茎段，用洗衣粉水溶液清洗干净，冲洗，用次氯酸钠溶液浸泡消毒杀菌，用无菌水冲洗；
（2）愈伤诱导培养：将油橄榄茎段置于培养室，接种到愈伤诱导培养基进行培养，得到愈伤组织，所述愈伤诱导培养基为MS+2.0～3.0mg/L 6-BA + 0.2～0.5mg/L SA + 0.5～0.7mg/L IAA+5.0～8.0g/L蔗糖+ 2.0～3.0g/L琼脂，调节pH至5.0-6.0，先暗培养，再采用LED灯光照培养，具体为：先在12-18℃下暗培养2-3d，再在18-22℃下采用LED灯光照培养7-10d，光照时间12h/d；
（3）增殖培养：将愈伤组织转移到增殖培养基进行继代培养，得到继代苗，所述增殖培养基为MS+1.8～2.5mg/L 6-BA+2.0～3.0mg/L 2，4-D+0.7～1.0mg/LKT+7.0～10.0g/L蔗糖+2.0～3.0g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用LED灯光照培养，具体为：在22-26℃下采用LED灯光照培养9-12d，光照时间12h/d；
（4）生根培养：将继代苗转移到生根培养基进行生根培养，得到组培苗，所述生根培养基为1/2MS + 0.3～0.5mg/L IAA+1.0～2.0mg/L NAA+0.3～0.6 mg/L 2，4-D+4.0～7.0g/L蔗糖+2.0～3.0g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0，采用LED灯光照培养，具体为：在22-26℃下采用LED灯光照培养10-14d，光照时间12h/d；
（5）移栽：将组培苗从培养室中取出，用水冲洗干净表面的培养基，晾干，将其移栽到苗圃上，当幼苗高度达15-20cm时移栽到种植园中；上述采用LED灯光照培养，所述LED灯为红光LED灯或暖白光LED灯，红光LED灯发出的红光波长为600-700nm，暖白光LED灯发出的暖白光波长为400-500nm。
2.根据权利要求1所述的利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，其特征在于，所述步骤（1）中，取油橄榄健壮植株当年抽生的带芽新梢，取枝条中段切成1-2cm的茎段，用洗衣粉水溶液清洗干净，冲洗，用10%次氯酸钠溶液浸泡5-10min消毒杀菌，用无菌水冲洗3-4次。
3.根据权利要求2所述的利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，其特征在于，所述油橄榄健壮植株为五年生以上的油橄榄健壮植株。
4.根据权利要求1所述的利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，其特征在于，所述步骤（2）中，愈伤诱导培养基为MS+2.5mg/L 6-BA + 0.4mg/L SA + 0.6mg/L IAA + 7.0g/L蔗糖+ 2.5g/L琼脂，调节pH至5.0-6.0。
5.根据权利要求1所述的利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，其特征在于，所述步骤（3）中，增殖培养基为MS + 2.2mg/L 6-BA + 2.5 mg/L 2，4-D + 0.9 mg/LKT + 9.0g/L蔗糖+ 2.5g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0。
6.根据权利要求1所述的利用LED灯促进油橄榄快速育苗的方法，其特征在于，所述步骤（4）中，生根培养基为1/2MS +0.4mg/L IAA + 1.5mg/L NAA + 0.5 mg/L 2，4-D +5.0g/L蔗糖+ 2.8g/L琼脂，调节pH至5.6-6.0。
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