CN107582782A - 一种含槟榔成分的药物制备方法及其抗缺氧应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及天然药物技术领域,特别是一种含槟榔成分的药物制备方法及其抗缺氧应用。本发明通过整体动物实验表明,槟榔提取物具有显著的抗缺氧活性,不仅可以延长常压密闭缺氧小鼠的存活时间,同时能够提高急进高原实地缺氧大鼠的抗高原缺氧能力。其机理可能与增加大鼠每分通气量,清除组织中产生的过多自由基和提高抗氧化能力有关。槟榔提取物成分天然,对动物和人体无毒副作用,适用于抗缺氧应用。
Description
技术领域
本发明涉及天然药物技术领域,特别是一种含槟榔成分的药物制备方法及其抗缺氧应用。
背景技术
我国是世界上高原面积最大的国家,海拔3000m以上的地区占我国国土总面积的1/4,主要分布在西藏、青海、云南和甘肃、内蒙古等西部省区,青藏高原有“世界屋脊”之称。低氧是高原环境的显著特征,也是高原病的致病原因。从平原进入高原,气压会随着海拔的升高而下降,高原环境氧含量降低,不能满足机体对氧的需求,进而对人体各系统产生不同程度的影响。急进高原地区时,通常会发生急性缺氧,出现胸闷、气短、头疼、恶心等 症状,一些人甚至会出现高原肺水肿、高原脑水肿症状,严重影响急进高原人群的身体健康。
槟榔为棕榈科植物,性辛温,含有多种人体所需的营养元素和有益物质,其中11种为人体必需的微量元素,槟榔原果的主要成分为31.1%的酚类、18.7%的多糖、14.0%的脂肪、10.8%的粗纤维、9.9%的水分、3.0%的灰分和0.5%的生物碱。我国海南、东南沿海及湖南等地居民有嚼食槟榔的习惯,槟榔也是他们迎宾敬客的佳品。同时槟榔有着丰富的药理作用,具有杀虫消积、降七、行水、消食、祛痰的功效,是我国名贵的“四大南药”之一,现代药理学研究表明槟榔多酚具有抑菌、促胃肠运动、抗血栓、降血糖、抗氧化、抗衰老等多种生物活性。
目前临床常用的抗高原缺氧药物主要有乙酰唑胺、醋甲唑胺、地塞米松、茶碱及抗氧化抗疲劳的天然药物银杏、红景天、丹参、雪莲、人参皂苷及其提取物或制剂。这些治疗药物西药的副作用大,天然药物价格高,获取不易,而槟榔种植范围广,产量高,药材来源方便,价格低廉,具有良好的开发应用前景。
发明内容
本发明解决现有技术的不足提供一种适用于高原抗缺氧、价格低廉、原料易得的含槟榔成分的药物制备方法及其抗缺氧应用。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案为:
一种含槟榔成分的药物制备方法,包括如下步骤:
A、称取槟榔干果切片,粉碎成槟榔粉;
B、槟榔粉1-3kg置于动态热回流提取浓缩机中,加入槟榔粉20-40倍体积的无水乙醇温度50~60℃时回流提取3~4h制得提取液;
C、将提取液在浓缩罐中蒸发乙醇至仅留存1L提取液,提取液用旋转蒸发仪浓缩至提取液中无乙醇,将浓缩液置于-50℃冷冻干燥机上干燥后收集;
D、将上述干燥物用水溶解制成3mg/mL的上样液,注入AB-8型大孔吸附树脂中,以流出液中多酚含量为上样液中多酚含量的10%时停止吸附;
E、流出液用质量分数60%的乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,40~50℃旋转蒸发浓缩至无乙醇,将浓缩液置于冷冻干燥机-50℃下干燥,收集干燥物制得槟榔提取物;
F、将槟榔提取物用传统方法制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂。
所述步骤A中槟榔粉过100目筛。
所述步骤B中槟榔粉1kg置于动态热回流提取浓缩机中,加入槟榔粉30倍体积的无水乙醇温度50~60℃时回流提取3~4h制得提取液。
所述步骤D中AB-8型大孔吸附树脂预先水洗去除乙醇残留。
一种含槟榔成分的药物抗缺氧应用方法,服用上述权利要求1至4任一项所述的胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂,试剂中槟榔多酚摄入量为200—1200mg/kg。
所述试剂中槟榔多酚摄入量为800mg/kg。
本发明通过整体动物实验表明,槟榔提取物具有显著的抗缺氧活性,不仅可以延长常压密闭缺氧小鼠的存活时间,同时能够提高急进高原实地缺氧大鼠的抗高原缺氧能力。其机理可能与增加大鼠每分通气量,清除组织中产生的过多自由基和提高抗氧化能力有关。槟榔提取物成分天然,对动物和人体无毒副作用,适用于抗缺氧应用。
本发明通过小鼠常压密闭缺氧实验、大鼠急进玉树高原实地急性缺氧实验证明槟榔提取物具有明显的抗缺氧活性。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明。
图1为本发明对比实例2的常氧对照组大鼠心肌病理图;
图2为本发明对比实例2的低氧模型组大鼠心肌病理图;
图3为本发明对比实例2的乙酰唑胺组大鼠心肌病理图;
图4为本发明对比实例2的多酚低剂量组大鼠心肌病理图;
图5为本发明对比实例2的多酚中剂量组大鼠心肌病理图;
图6为本发明对比实例2的多酚高剂量组大鼠心肌病理图。
具体实施方式
一种含槟榔成分的药物制备方法,包括如下步骤:
A、称取槟榔干果切片,粉碎成槟榔粉;
B、槟榔粉1-3kg置于动态热回流提取浓缩机中,加入槟榔粉20-40倍体积的无水乙醇温度50~60℃时回流提取3~4h制得提取液;
C、将提取液在浓缩罐中蒸发乙醇至仅留存1L提取液,提取液用旋转蒸发仪浓缩至提取液中无乙醇,将浓缩液置于-50℃冷冻干燥机上干燥后收集;
D、将上述干燥物用水溶解制成3mg/mL的上样液,注入AB-8型大孔吸附树脂中,以流出液中多酚含量为上样液中多酚含量的10%时停止吸附;
E、流出液用质量分数60%的乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,40~50℃旋转蒸发浓缩至无乙醇,将浓缩液置于冷冻干燥机-50℃下干燥,收集干燥物制得槟榔提取物;
F、将槟榔提取物用传统方法制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂。
优选的,所述步骤A中槟榔粉过100目筛。100目筛可使粉碎物粒度减小,提高提取率,但粒度太小会影响过滤,粒度太大会影响提取率。与50目和200目槟榔粉相比提取率高30%。
所述步骤B中槟榔粉1kg置于动态热回流提取浓缩机中,加入槟榔粉30倍体积的无水乙醇温度50~60℃时回流提取3~4h制得提取液。
所述步骤D中AB-8型大孔吸附树脂预先水洗去除乙醇残留。
一种含槟榔成分的药物抗缺氧应用方法,服用上述胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂,试剂中槟榔多酚摄入量为200—1200mg/kg。
优选的所述试剂中槟榔多酚摄入量为800mg/kg。
实施例1
一种含槟榔成分的药物制备方法,包括如下步骤:
A、称取槟榔干果切片,粉碎成槟榔粉,槟榔粉过100目筛;
B、槟榔粉1kg置于动态热回流提取浓缩机中,加入槟榔粉20倍体积的无水乙醇温度50~60℃时回流提取3~4h制得提取液;
C、将提取液在浓缩罐中蒸发乙醇至仅留存1L提取液,提取液用旋转蒸发仪浓缩至提取液中无乙醇,将浓缩液置于-50℃冷冻干燥机上干燥后收集;
D、将上述干燥物用水溶解制成3mg/mL的上样液,注入AB-8型大孔吸附树脂中,以流出液中多酚含量为上样液中多酚含量的10%时停止吸附;
E、流出液用质量分数60%的乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,40~50℃旋转蒸发浓缩至无乙醇,将浓缩液置于冷冻干燥机-50℃下干燥,收集干燥物制得槟榔提取物;
F、将槟榔提取物用传统方法制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂。
实施例2
一种含槟榔成分的药物制备方法,包括如下步骤:
A、称取槟榔干果切片,粉碎成槟榔粉,槟榔粉过100目筛;
B、槟榔粉1kg置于动态热回流提取浓缩机中,加入槟榔粉30倍体积的无水乙醇温度50~60℃时回流提取3~4h制得提取液;
C、将提取液在浓缩罐中蒸发乙醇至仅留存1L提取液,提取液用旋转蒸发仪浓缩至提取液中无乙醇,将浓缩液置于-50℃冷冻干燥机上干燥后收集;
D、将上述干燥物用水溶解制成3mg/mL的上样液,注入AB-8型大孔吸附树脂中,以流出液中多酚含量为上样液中多酚含量的10%时停止吸附;
E、流出液用质量分数60%的乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,40~50℃旋转蒸发浓缩至无乙醇,将浓缩液置于冷冻干燥机-50℃下干燥,收集干燥物制得槟榔提取物;
F、将槟榔提取物用传统方法制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂。
实施例3
一种含槟榔成分的药物制备方法,包括如下步骤:
A、称取槟榔干果切片,粉碎成槟榔粉,槟榔粉过100目筛;
B、槟榔粉3kg置于动态热回流提取浓缩机中,加入槟榔粉40倍体积的无水乙醇温度50~60℃时回流提取3~4h制得提取液;
C、将提取液在浓缩罐中蒸发乙醇至仅留存1L提取液,提取液用旋转蒸发仪浓缩至提取液中无乙醇,将浓缩液置于-50℃冷冻干燥机上干燥后收集;
D、将上述干燥物用水溶解制成3mg/mL的上样液,注入AB-8型大孔吸附树脂中,以流出液中多酚含量为上样液中多酚含量的10%时停止吸附;
E、流出液用质量分数60%的乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,40~50℃旋转蒸发浓缩至无乙醇,将浓缩液置于冷冻干燥机-50℃下干燥,收集干燥物制得槟榔提取物;
F、将槟榔提取物用传统方法制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂。
其中实施例2中槟榔提取物的多酚含量高于实施例1和3的多酚含量20%。
一种含槟榔成分的药物抗缺氧应用方法,服用上述胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂,试剂中槟榔多酚摄入量为200—1200mg/kg。
优选的所述试剂中槟榔多酚摄入量为800mg/kg。下述抗缺氧应用采用实施例2的槟榔提取物。
对比实施例1小鼠常压密闭缺氧实验
1实验材料受试药物:槟榔提取物多酚;受试动物:雄性昆明小鼠,体重20~22g,兽医研究所实验动物中心提供。
2 方法与结果将受试动物随机分为5组,每组6只,分为空白组对照组,乙酰唑胺组(100mg/kg),槟榔多酚低剂量组(400mg/kg)、槟榔多酚中剂量组(800mg/kg)、槟榔多酚高剂量组(1200mg/kg),灌胃给药,每日2次,给药体积0.4ml·20g-1,连续5日。空白对照组给予等体积灭菌注射用水。第5天末次给药1h后,将小鼠分别置于250ml广口瓶中(瓶中放置5g钠石灰,瓶口涂抹凡士林以保证密闭性),盖紧瓶盖,开始计时,小鼠停止腹式呼吸时停止计时。比较各组小鼠在广口瓶中存活时间,结果见表1。
3讨论与空白对照组相比,槟榔多酚中、高剂量组可显著性延长常压密闭缺氧小鼠存活时间,延长率分别为34.19%、17.71%,且中剂量对常压密闭缺氧小鼠存活时间的延长优于乙酰唑胺。
对比实例2槟榔多酚对急进玉树高原实地急性缺氧大鼠的保护作用
1实验材料受试药物:槟榔醇提物多酚;受试动物:雄性Wistar大鼠,体重180~220g,兽医研究所实验动物中心提供。
2方法与结果将受试动物随机分为6组,每组6只,分为常氧对照组、低氧模型组、乙酰唑胺组(63 mg/kg)、槟榔多酚低剂量组(250mg/kg)、槟榔多酚中剂量组(500mg/kg)、槟榔多酚高剂量组(750mg/kg),平原组饲养于兰州军区总医院动物科,急进高原大鼠以恒温箱式货车在12h内运送至玉树巴塘高原(海拔4100m),运送途中自由饮食,果冻补水。到达玉树高原后,灌胃给药,给药体积2ml·200g-1,每日2次,连续5日。平原对照组、低氧空白组给予相同体积灭菌注射用水。第5天末次给药1h后,注射0.8ml10%水合氯醛将大鼠麻醉,用肝素钠润湿的1ml一次性注射器采集腹主动脉,立即用血气分析仪进行检测。取大鼠心组织,用冷冻生理盐水洗净并用滤纸吸干水分,切取左半边置于10%福尔马林溶液中,用于病理切片观察,右半边冷冻于液氮罐中用于组织匀浆,用于槟榔多酚对大鼠心肌组织的抗氧化指标的测定。血气分析结果、抗氧化指标测定结果用SPSS 11.0软件处理,分别见表2、表3。病理切片结果如附图所示。
*p<0.05,**p<0.01 vs平原对照组;#p<0.05,##p<0.01 vs 低氧空白组
*p<0.05,**p<0.01 vs平原空白对照;#p<0.05,##p<0.01 vs低氧空白组
槟榔多酚低、中剂量给药组均能使急进高原缺氧大鼠动脉氧分(PaO2)、血氧饱和度(SatO2)、氧合指数值(PO2/FIO2)显著性升高,缓冲碱值(BB)显著性降低。说明槟榔多酚低、中剂量对急进高原实地缺氧大鼠血气有一定的改善作用。如表3结果所示,与平原对照组相比,缺氧模型组大鼠心肌组织MDA显著升高,SOD、GSH活力,NO含量显著下降(p<0.05),而槟榔多酚高剂量给药组使MDA含量显著下降,SOD、GSH活力,NO含量显著升高(p>0.05)。表明槟榔多酚可有效清除缺氧大鼠心肌组织中产生的过多氧自由基,并提高抗氧化酶的活力,减轻组织因低氧造成的氧化损伤,具有良好的抗缺氧损伤作用。同时附图所示,平原组大鼠心肌组织细胞结构清晰完整,核仁清晰,排列整齐,细胞周围间隙致密无水肿。急进高原缺氧组细胞层析模糊,核固缩,少量细胞凋亡胞浆深染,组织损伤严重。而乙酰唑胺、槟榔多酚给药组细胞排列较整齐,细胞形态正常,胞浆无深染,表明乙酰唑胺、槟榔多酚对急进高原大鼠心肌组织有一定的保护作用。
综上所述,槟榔多酚具有显著的抗缺氧作用,且作用与常用抗高原缺氧药物乙酰唑胺相当,以其为活性成分制备的抗高原缺氧药物,可用于预防治疗因高原缺氧而引起的各种病理损伤和氧化损伤。
Claims (6)
1.一种含槟榔成分的药物制备方法,其特征在于包括如下步骤:
A、称取槟榔干果切片,粉碎成槟榔粉;
B、槟榔粉1-3kg置于动态热回流提取浓缩机中,加入槟榔粉20-40倍体积的无水乙醇温度50~60℃时回流提取3~4h制得提取液;
C、将提取液在浓缩罐中蒸发乙醇至仅留存1L提取液,提取液用旋转蒸发仪浓缩至提取液中无乙醇,将浓缩液置于-50℃冷冻干燥机上干燥后收集;
D、将上述干燥物用水溶解制成3mg/mL的上样液,注入AB-8型大孔吸附树脂中,以流出液中多酚含量为上样液中多酚含量的10%时停止吸附;
E、流出液用质量分数60%的乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,40~50℃旋转蒸发浓缩至无乙醇,将浓缩液置于冷冻干燥机-50℃下干燥,收集干燥物制得槟榔提取物;
F、将槟榔提取物用传统方法制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂。
2.根据权利要求1所述一种含槟榔成分的药物制备方法,其特征在于所述步骤A中槟榔粉过100目筛。
3.根据权利要求1所述一种含槟榔成分的药物制备方法,其特征在于所述步骤B中槟榔粉1kg置于动态热回流提取浓缩机中,加入槟榔粉30倍体积的无水乙醇温度50~60℃时回流提取3~4h制得提取液。
4.根据权利要求1所述一种含槟榔成分的药物制备方法,其特征在于所述步骤D中AB-8型大孔吸附树脂预先水洗去除乙醇残留。
5.一种含槟榔成分的药物抗缺氧应用方法,其特征在于服用上述权利要求1至4任一项所述的胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂,试剂中槟榔多酚摄入量为200—1200mg/kg。
6.根据权利要求5所述的一种含槟榔成分的药物抗缺氧应用方法,其特征在于所述试剂中槟榔多酚摄入量为800mg/kg。
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