CN107523575B

CN107523575B - 水稻抗稻瘟病基因pi-G3及其应用

Info

Publication number: CN107523575B
Application number: CN201710951624.5A
Authority: CN
Inventors: 康厚祥; 邓雨飞
Original assignee: Institute of Plant Protection of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Institute of Plant Protection of Chinese Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2017-10-13
Filing date: 2017-10-13
Publication date: 2020-07-24
Anticipated expiration: 2037-10-13
Also published as: CN107523575A

Abstract

本发明公开了一种水稻抗稻瘟病基因pi‑G3及其应用。pi‑G3基因与水稻稻瘟病抗性呈负相关，在感病品种中突变pi‑G3基因可以增强水稻的抗病性。同时，超表达或突变pi‑G3基因后水稻植株并没有出现明显的表型变化。水稻抗稻瘟病基因pi‑G3可用于培育抗稻瘟病水稻品种。

Description

水稻抗稻瘟病基因pi-G3及其应用

技术领域

本发明属于基因工程领域，具体涉及一种水稻抗稻瘟病基因pi-G3及其应用。

背景技术

稻瘟病是水稻重要病害之一，可引起大幅度减产，严重时减产40％～50％，甚至颗粒无收。世界各稻区均匀发生。本病在各地均有发生，其中以叶部、节部发生为多，发生后可造成不同程度减产，尤其穗颈瘟或节瘟发生早而重，可造成白穗以致绝产。

植物在与病原菌长期协同进化过程中形成了两种天然免疫机制，即病原菌相关分子模式(Pathogen-associated molecular patterns，PAMPs)诱导的抗病反应机制(PAMP-triggered immunity，PTI)和病原菌效应蛋白(Effector)诱导的抗病反应机制(Effector-triggered immunity，ETI)。PTI通常由植物细胞表面模式识别受体(Patternrecognitionreceptors，PRRs)识别保守的病原菌PAMPs分子，然后激活植物体内相对较弱的基础防御反应。ETI则依赖于植物抗病蛋白(R proteins)直接或间接识别病原菌分泌的效应蛋白，进而激发更为强烈的抗性反应，以抑制病原菌侵染，通常表现为植物过敏反应(Hypersensitive response，HR)。目前，植物PTI和ETI防卫反应分子机制在拟南芥(Arabidopsis thaliana)中已研究得比较深入。

不论PTI还是ETI途径，转录因子都参与了抗病信号传导，如Xa21是PAMP的病程识别蛋白，通过与AvrXa21相互作用介导白叶枯抗性，Xa21在体内剪切释放胞内激酶，该结构域与锌指蛋白转录因子WRKY62发生互作产生抗病反应。Pb1编码NBS-LRR类蛋白，且具有持久的抗穗颈瘟特性，Pb1与WRKY45互作，使水杨酸表达量升高，Pb1所介导的抗病通路必须有WRKY45的参与，该免疫反应主要在ETI水平上进行调节。转录因子的类型也非常丰富，包括锌指蛋白、同源异性结构域、亮氨酸拉链、MYB等多个家族。这类转录因子在调控植物感受昼夜节律变化及开花过程中发挥着重要作用，已有研究表明香蕉aCOL1参与调控植物响应生物及非生物胁迫反应。

鉴定抗病相关基因有助于深入揭示水稻的抗病机理及水稻与病原菌的具体互作机制，进一步的选育或者培育相关的抗病品种，可以更好的更好地控制和降低稻瘟病菌对水稻的危害，增强植物的抗病性。这些研究对水稻基因功能研究及抗病水稻育种都具有重要的应用价值。

发明内容

本发明所要解决的技术问题为：如何提供一种与水稻抗稻瘟病相关的基因，以便进一步的选育或者培育相关的抗病品种，更好地控制和降低稻瘟病菌对水稻的危害。

本发明的技术方案为：水稻抗稻瘟病基因pi-G3，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，或与SEQ ID No.1所示序列具有95％以上同源性、编码相同功能蛋白的核苷酸序列。

水稻抗稻瘟病基因pi-G3编码的蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。

水稻抗稻瘟病基因pi-G3在调控水稻抗稻瘟病上的应用。

通过降低基因pi-G3在水稻中的表达来提高水稻抗稻瘟病能力。

获得水稻抗稻瘟病基因pi-G3的引物对，其正向引物的序列如SEQ ID No.3所示，反向引物的序列如SEQ ID No.4所示。

制备水稻抗稻瘟病基因pi-G3的突变体的方法，通过CRISPR敲除制备突变体，靶点引物对的序列分别如SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。

本发明利用基因工程方法克隆得到了pi-G3基因的核苷酸序列，该基因序列可编码氧化还原酶(oxidoreductase)，氧化还原酶(oxidoreductase)对于水稻的胁迫反应具有重要影响。

为了进一步确认pi-G3的抗病功能，本发明人获得了该基因的T-DNA插入诱导的超表达突变体、以及基因敲除的突变体，分别对其进行喷雾接种和打孔接种稻瘟病抗性鉴定。抗性鉴定结果表明，超表达pi-G3基因使得水稻更容易被稻瘟病侵染；对pi-G3基因进行突变后其对稻瘟病的抗性明显增强。表明，pi-G3基因与水稻稻瘟病抗性呈负相关，在感病品种中突变pi-G3基因可以增强水稻的抗病性。同时，发现超表达或突变pi-G3基因后水稻植株并没有出现明显的表型变化。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明的pi-G3基因表现出与抗病呈负相关的现象，并且与几个小种都有关联。与传统抗稻瘟病基因不同，pi-G3基因带来的抗性无小种特异性，且遗传和分子生物学功能分析证明其可能起隐性抗性作用，这些基因的缺失突变体对稻瘟病的抗性显著提高且不会造成明显的水稻常规表型性状的改变。

附图说明

图1：pi-G3基因的诱导超表达突变体的RT-PCR检测图；其中，DJ1为背景材料，4A-1-1为突变纯合体，4A-2-1为突变杂合体；从图1可以看出，超表达突变体中pi-G3的表达量明显上调。

图2：pi-G3基因的诱导超表达突变体喷雾接种鉴定；pi-G3-1为突变纯合体，pi-G3-2为突变纯合体，pi-G3-3为突变杂合体，pi-G3(WT)为突变野生型。

图3：pi-G3敲除突变打孔接种鉴定；其中，图3中A为对照品种日本晴(9DPI)，图3中B为pi-G3敲除突变体(9DPI)。

具体实施方式

实施例1水稻抗稻瘟病基因pi-G3的克隆

1)、引物设计：

正向：ATGGCGGAGCAAGCTCCACT(SEQ ID No.3)

反向：TTACTTCTTTGGCGTGTCAGC(SEQ ID No.4)

2)、pi-G3基因全长扩增

3)PCR产物回收

4)产物连接及转化。

实施例2抗稻瘟病基因pi-G3的诱导超表达突变体的制备。

1)、引物设计：

正向CGGGATCCCGATGGCGGAGCAAGCTCCACT加酶切位点BamHI

反向CCAAGCTTGGTTACTTCTTTGGCGTGTCAGC加酶切位点HindIII

2)、pi-G3基因全长扩增

3)、PCR产物纯化以及酶切回收，内切酶：BamHI,HindIII

4)、超表达载体PROXs-HA酶切回收，内切酶：BamHI,HindIII

5)、产物连接和转化，感受态细胞：Trans5ɑ

6)、农杆菌转化。

实施例3抗稻瘟病基因pi-G3的基因突变(敲除)体的制备

CRISPR敲除突变体制备实验步骤与方法：

1)、靶点引物设计：

正向GCTCGGCACCCGGGGCCTAG(SEQ ID No.5)

反向CTAGGCCCCGGGTGCCGAGC(SEQ ID No.6)

2)、磷酸化和双链RNA合成

3)、入门载体pENTR4-gRNA4酶切以及回收，内切酶：BsaI,BtgzI

4)、连接和转化完成入门载体构建，感受态细胞：JM109

5)、入门载体酶切及回收，内切酶：ApaI

6)、入门载体酶切回收产物和大载体PBY02-Cas9-ccdb重组

7)、农杆菌转化。

实施例4pi-G3基因的诱导超表达突变体喷雾接种鉴定

1)准备用于接种处于三叶一心时期水稻苗和产孢良好的稻瘟菌

2)制备接种用的孢子液

3)喷雾接种

4)24小时黑暗处理后正常生长6天后调查。

温度：25度，湿度90％-95％。

实验结果如图2所示，突变野生型没有病斑，而超表达突变体叶片有较大病斑，说明突变体对稻瘟菌的更加感病，表明pi-G3在水稻对稻瘟菌的抗性作用中起负调控作用。

实施例5pi-G3敲除突变打孔接种鉴定

1)准备用于接种大约生长两个月的水稻苗和产孢良好的稻瘟菌

2)制备接种用的孢子液

3)打孔接种

4)24小时黑暗处理后正常生长13天后调查。

实验结果如图3所示，跟野生型比较(图中A)，pi-G3敲除突变(图中B)的叶片病斑面积明显变小，表明对pi-G3基因进行敲除突变后其对稻瘟病的抗性明显增强。

实施例4和5的结果表明，pi-G3基因与水稻稻瘟病抗性呈负相关，在感病品种中突变pi-G3基因可以增强水稻的抗病性。同时，发现超表达或突变pi-G3基因后水稻植株并没有出现明显的表型变化。

以上所述实施例仅表达了本申请的具体实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本申请保护范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本申请技术方案构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本申请的保护范围。

序列表

<110> 中国农业科学院植物保护研究所

<120> 水稻抗稻瘟病基因pi-G3及其应用

<130> 20170917

<160> 6

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 6138

<212> DNA

<213> 水稻(Oryza sativa)

<400> 1

gaacaattca taaagtcgtc ggtatattat agaaggagat aatgtcgatg gcaaatcgtt 60

gaactcgatc aaactcagtg gtatagaata gattctctca ttcatatatg tcttgggatt 120

gacgaagtga caataaacgg ataataatta gtcgtaaata taagcgtccg agtcaacccg 180

tacattagag aaaatctcag ggtgcgtttg gatccaaggc tagatcaagg gtgttcctac 240

tgcgcgcgca cgcgacagaa cgggaagccg cgcgcgttcc tactaaccct agcgcttacc 300

gtgtaaaaaa aacggcgtgc gttttttttc atgttcgcac cttttttttt ttgtctctga 360

gcgcgttttt ttcctctgtt tctttccgat tttttttaat cttttacaca cctctttaca 420

aatgtagaat tggaaagttt tttattttga cttgaaagtt tttaaatttt gtattgaaag 480

tttttaaatt tgagttaaaa gttttcaaat ttgacttgaa agttttgaaa tcttgacttg 540

aaagttttta aattttgtat tgaaagtttt taaatttgag ttgaaagttt ttatatttga 600

gttgaaagtt ttcaaatatg gcttgaaagt tttcaaatct aggatgaaaa gttttaaatt 660

tgggatgaaa agttgaaagt tttcaaaatt taacttcaaa atgttttcaa atctaggttg 720

aaagttttca aatctggatt gaaagttttc ataatttgac ttcacgtata gatttctttt 780

caatctatta cttaaaataa tcttcaaaaa aagacaaatc ttatcttaat tattatcatt 840

acctagaact aaccgaatca gttttatacg tatagagaaa aaattccgaa aaaaaataaa 900

cgcgcgtctc gccagcacaa gcgctgagaa tggctgacga tgggacgtgt gggccggcgc 960

gtgcgcgccg ggcgggggcg cgtacgcgcc aattatgatt tgcactagat caaacctagc 1020

ctagccaggc aagaccaggc gtttagaatt gtgaaaaaat cctaactttt gagggtgagc 1080

tggcccgcag gggcgagaaa atgctggctc acaagggaga gccaaatcgg ctcgcctccg 1140

acggcaaact cctcgcgtga aaaaaatagc gatatgacga agcaatttat tttcctccga 1200

gacatgtgcg actttcttca acaaccaggc tccattcttg ccgaactatc gggctagcag 1260

atcgtgtatc tatttcgctg ccatcttctt gttaataaat cactccatct ttccagtcat 1320

ggatgaatgc taaaagcaaa cgaaccaatt ggacgggtac ggcaaaccca gcaagcaggc 1380

aataagttgg tttgcctttg cctagcaagt ctagctaggc aagggaacca aacgctccct 1440

cagtctccag tggccagggc atcgtcttca caaatcactg tttttatgta ctgatacgcg 1500

tctgtgtatg tacacccatt tttcagagtg tgcatataca tctgcttgcc tcacaaattt 1560

gttgcgaaca tacaaccgat aaaccatacc ttaagggctt gtgtggcatc cgcatttcgc 1620

cacaatggtg gcaactagag gcattgccat tgacttaaaa gtgtggtgtg tcacaattat 1680

ggcattaatc agtttcaatt ggttaaattt gcttgccaca agtgtgacag aattagccaa 1740

ttagccacca aaccaacgaa cactccactt tcagtctata caaggactaa aagaatgcag 1800

acataaaaat tgtgcttaag caagttttat atgtttcgtg aagctctcaa aggcgagtgg 1860

aagtgcagta atttgttatt ggcagtacat tattagaacc gcagagagca ttcacaaggc 1920

atacatttaa caccatccag cacatacgca gggagaatag caatcaggca atatctttga 1980

tatactaata tttttttagc tttacttctt tggcgtgtca gcatacttcc aggtgtaatg 2040

tgcaaatgag gtatactgtc ttccaccagc gacatcttct tcgcgtacct ggctagagat 2100

ctctttcagg tcatcatccg tgaggttcac ctttaaggag tcaatgttgg catctaggtt 2160

ttttatcttg gttgttcctg agaaaatgta acgaattgtt tctcagtgat ggatcaatca 2220

cggcatatta gagcatacaa acaacgagct ttgctgctta tgtccgtgct tgggacttga 2280

agagttgaag gtaacaacaa gcattaagag gaacaatatt gtagaatcat accatttttt 2340

ggagccacaa ttttttttgg gctatagatt agtaaaaaaa gatgcatcac tacaagtttg 2400

aagttaacat catgtagcac aaactgtgag gcaaaagagg ggtgtttctc ctttgtttta 2460

caaccaaata aactactaca agtatatcac aattgaaacc tcaatgttac catgaaatgc 2520

ttcgcagcca tgtttttttt ccccgaacaa aacactatca caaattcaca attaaactac 2580

atgcttatcc gattatatta tctctttgtg tatcttgctc tattgtcaga actacacatt 2640

tcactaacaa ggaaagagat ttgaatatcc atcaatccct ttatctcaag gtaaaaaaga 2700

aaagggagaa agcattggcc atatagatct gcattgtgca ctatcagtta catcaggacg 2760

gggttatagc actcacctgg tattgggacc acatcatccc cttgatgaag aacccaagct 2820

aaagctagct gagcagggct gcactggtgc ttcttggcca gctcttccgt tttcagataa 2880

agctgtttat tcttctccaa attttcagca gaaaatcgtg gatgtccttg ctggaaagaa 2940

taaaacaaag ttcataccta agtaactgaa agtaattgta tgctgcagat caaggaatgg 3000

cacttagagt agagtgtacc aaattagatt cagcagacaa ttgttctgtc actcctctcc 3060

ctccgaaaaa cccgcgggcg atagggctgt agggaacaat tccaatgccc aactccctgg 3120

aatggagtcc atggattgcg atgagtttac ttgcatgagc aatcaatcat tagtaaaacc 3180

tgcgatgcgg aattcacctg cagagcggca caatttcggg ttcaatgtca cgagcccaga 3240

gagaccactc catctgaact gcagtgattg ggtgcacggc atgagctcgc ctgatggtgt 3300

cagggctcgc ctccgatagc ccaatgtacc tcaccttccc ctcctccacc aatttcttga 3360

gctcaccaat ctagttcagc accaacccga atggcaatac aagaatttac aaggtgtgtg 3420

tgaggaaggg taaagaactg aagaaagaaa tcaagaaagg gggcgaggtg gagcaagaga 3480

ccgtgtcctc gatggggatg gtggtgtcga cgcggtgctg gtagtagagg tcgatgtagt 3540

cgacgccgag gcggccgagg ctggcctcgc agcaggcgcg cacgtactcc ggccggccgc 3600

acacggcgcg cacgccgtcg gcgccccgcc gaatcccgaa cttggtggcc acctgcacct 3660

gctcccgcgg cagctgcttc agcgcctgga aatccgaagg cgatggggtt agctcatcat 3720

catccaatcc aaccacaaga aaccacgaac gatgaaggaa gggaagggcc ccgaccagac 3780

cttgccgagg aggatctcgt tggcgagggg gccgtagacg tcggaggtgt cgaagaaggt 3840

gacgccgcgg cggaaggcgt gcgcgatgac ggcggcgccg gcgtcgtcgt cgagcggcga 3900

gttgtacgcg cccgtgagcc ccatgcaccc gaaccccagc ttggacacct acagcaaggt 3960

cgtcgaattc aacatccatc gattcacact cactgtcact ggccgattca gcgcaaaccg 4020

aacgaacgga aatacgggga agtaggaatt gacgatcgag caagcgggca tgttcacctc 4080

taggccccgg gtgccgagct tgactcgagg catcggcgcc agtggagctt gctccgccat 4140

ggcctctcgg cggcggtcgc agggggagtg agagtgagag gaggaaggca gtggggaagg 4200

gagtggaagt gaatcgcagt ctccaccttt gttctgttct ccaacgcctc tggcctcttg 4260

ctttggatat ttaggtgctc agtcactgcc acaacgccac gtgccatttg ccagtgtttc 4320

atacggttcc cttgatttga tgatgagagt gattttctcg tgacatcatt cttatttgca 4380

ggtaaattta atagttataa aaaattaaac attttaagaa gaggtattaa atgtgatata 4440

tcactctaca gccatataag ttaaaattga tttcttttca cacacaaaaa aaatcaaatt 4500

acgactagtt aacgtatatt tctacggtca aatttgtttt ttctttgcaa cattttgaag 4560

ttacatttga catcgcatgt ttgtggagtg gtctatcgca tattaattta tcttgttgat 4620

ttttttaata attatttaag tgagacgcaa acaacaagta aatgtctcct cgatagttta 4680

gataattatc ctttgacaat gatgatgttt tatggaacac ggtaaaaaat ttaattagaa 4740

gaatcggcct tagtaaaaaa aaagaatttt aaaactgttg ggttattagt tcgttatagt 4800

ctgttttctg acattagttg tttaaacctt aatatcacaa gtggttgctg tatttatttt 4860

ttacagttta acagtcgtat ctcaaaccat taaaatattt tagttactac tagactttga 4920

aagacaattt tatccaaaaa tatatgatca aagaaataaa aaagtatttt taatggttaa 4980

tacttacttc gtatattgtt agttgtctta tagcatcacc aacagattag caataattta 5040

tctccaaaat ttaaatttta ggtttactaa attgaaaatc ggaagtggaa aatctcctcc 5100

ctccaagacg taggctaaat tcaatttaat cccaacatct aaaagtgggc cttatgttaa 5160

actaccaata gaaatttctg ttttttttcc ttccacacgc gtagaaagat tgatcgccgc 5220

tcacgcggga agcacatgag aaatgcgcaa actagagatt gggagtcgct ctctcgccct 5280

caaatccaaa atacaaaata tatggggatg agaactccaa aactagtgta aggcctttgg 5340

ggatatgttg gatccgattt tttaagtaaa aatccccaaa tcaattttgg gaaggaaata 5400

agataacggt tggtgatgct cttaagggtc aaatcttagc gatgaaaatg gaggaaaaaa 5460

acccataaac taatttaaaa atttgaaatt ggttgccctt agttgttgta taaatcaata 5520

gaaattttgc actcccttag ttggtaggat ccctttctca cgtcacatgc cgacatgcgt 5580

ttgccaatac ttattgtact gaaagtatta aaatataaat ctgctataca tgctatgtga 5640

aacacaatag atatcgatct tttattttta ttttgtttaa tataattacc tcttttatta 5700

tcaccatcag aatatgagta gattaataac cttgctctat ataaaaatgt agttttatga 5760

taattttatt attaaatatg tagtttgtgg tacttagcct taaatttata gttttatgat 5820

gaatttattg ttaaatatgt agttttacaa taattttatc aaacatctat aattttgtaa 5880

aaaaaattac ttttagaaca aatgtagatt tgaaattctc cgacagccga caggtgacaa 5940

atctattttt gtgcaattgc aatgaatttt ccattaccat ttacgacata tatattgtag 6000

cagtgcaacg tattttgttt tgctgccccc gtttgctctc gttgtacgca tgattttttt 6060

ctggttcttt gatcttttaa ttttgtttgt ttgtttgttt tgaaatagct atgccatgtt 6120

caaaaagaaa agctctgc 6138

<210> 2

<211> 344

<212> PRT

<213> 水稻(Oryza sativa)

<400> 2

Met Ala Glu Gln Ala Pro Leu Ala Pro Met Pro Arg Val Lys Leu Gly

1 5 10 15

Thr Arg Gly Leu Glu Val Ser Lys Leu Gly Phe Gly Cys Met Gly Leu

20 25 30

Thr Gly Ala Tyr Asn Ser Pro Leu Asp Asp Asp Ala Gly Ala Ala Val

35 40 45

Ile Ala His Ala Phe Arg Arg Gly Val Thr Phe Phe Asp Thr Ser Asp

50 55 60

Val Tyr Gly Pro Leu Ala Asn Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Leu Lys

65 70 75 80

Gln Leu Pro Arg Glu Gln Val Gln Val Ala Thr Lys Phe Gly Ile Arg

85 90 95

Arg Gly Ala Asp Gly Val Arg Ala Val Cys Gly Arg Pro Glu Tyr Val

100 105 110

Arg Ala Cys Cys Glu Ala Ser Leu Gly Arg Leu Gly Val Asp Tyr Ile

115 120 125

Asp Leu Tyr Tyr Gln His Arg Val Asp Thr Thr Ile Pro Ile Glu Asp

130 135 140

Thr Ile Gly Glu Leu Lys Lys Leu Val Glu Glu Gly Lys Val Arg Tyr

145 150 155 160

Ile Gly Leu Ser Glu Ala Ser Pro Asp Thr Ile Arg Arg Ala His Ala

165 170 175

Val His Pro Ile Thr Ala Val Gln Met Glu Trp Ser Leu Trp Ala Arg

180 185 190

Asp Ile Glu Pro Glu Ile Val Pro Leu Cys Arg Glu Leu Gly Ile Gly

195 200 205

Ile Val Pro Tyr Ser Pro Ile Ala Arg Gly Phe Phe Gly Gly Arg Gly

210 215 220

Val Thr Glu Gln Leu Ser Ala Glu Ser Asn Leu Gln Gly His Pro Arg

225 230 235 240

Phe Ser Ala Glu Asn Leu Glu Lys Asn Lys Gln Leu Tyr Leu Lys Thr

245 250 255

Glu Glu Leu Ala Lys Lys His Gln Cys Ser Pro Ala Gln Leu Ala Leu

260 265 270

Ala Trp Val Leu His Gln Gly Asp Asp Val Val Pro Ile Pro Gly Thr

275 280 285

Thr Lys Ile Lys Asn Leu Asp Ala Asn Ile Asp Ser Leu Lys Val Asn

290 295 300

Leu Thr Asp Asp Asp Leu Lys Glu Ile Ser Ser Gln Val Arg Glu Glu

305 310 315 320

Asp Val Ala Gly Gly Arg Gln Tyr Thr Ser Phe Ala His Tyr Thr Trp

325 330 335

Lys Tyr Ala Asp Thr Pro Lys Lys

340

<210> 3

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

atggcggagc aagctccact 20

<210> 4

<211> 21

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

ttacttcttt ggcgtgtcag c 21

<210> 5

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 5

gctcggcacc cggggcctag 20

<210> 6

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 6

ctaggccccg ggtgccgagc 20

Claims

1.水稻抗稻瘟病基因pi-G3在调控水稻抗稻瘟病上的应用，所述水稻抗稻瘟病基因pi- G3核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，通过降低基因pi-G3在水稻中的表达来提高水稻抗稻瘟病能力。