CN107510797A - 一种竹叶总黄酮的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种从竹叶中提取竹叶总黄酮的方法。该方法包括以下步骤：首先取竹叶，加水提取，加乙酸乙酯分次萃取，至水液盐酸镁粉测试反应较弱；然后收集乙酸乙酯萃取液，浓缩制干膏，加水溶解，加三氯甲烷，析出的不溶物为目标产品。本发明方法所得竹叶总黄酮产品产率纯度高。总黄酮含量超过50％，产率为0.83％‑1.64％，得到的竹叶总黄酮相对于原料竹叶含有的竹叶总黄酮转移率可达60％以上。且制备工艺简单易行，可实现大规模化工业生产。
Description
技术领域
本发明属于天然产物提取分离技术领域，具体涉及一种从竹叶中制备竹叶总黄酮的方法。
背景技术
竹子是禾本科多年生常绿植物，具有丰富的使用价值。我国的竹林资源约占全国森林总面积的3％，占世界竹林总面积的25％，有“竹子王国”之美称。竹叶在我国具有悠久的药用和食用历史，其医疗保健作用早已为人们所认识。《文经逢原》记载：“竹叶兼行肌表，能疗疮杀虫，竹茹专清胃腑，能止呕除烦”。《中药大辞典》记载：“竹叶清热除烦，生津利尿”。随着现代科学研究的深入，发现竹叶中含有大量对人体有益的活性物质。其中，黄酮是竹叶中一类重要的活性成分，具有抗氧化、清除自由基、抗衰老、抗辐射、抑菌、抗菌防腐、降血脂及保护心脑血管等功效，其显著的功效和广阔的应用前景，引起了研究人员的广泛关注，正成为研究的一个热点。竹叶黄酮具有来源丰富、天然安全等优点，更因其具有优良的保健功能，可用作药品、保健品、香料、化妆品、食品防腐剂、天然抗氧化剂等功能性添加剂。对黄酮类成分进行深层次的开发利用，必将提高竹业生产的经济效益，对于促进竹产业向纵深发展具有重要意义。
现有从竹叶中提取纯化竹叶总黄酮的方法，多为色谱方法，多从纯天然产物化学实验室的角度进行研究，存在方法复杂、不适合工业放大、产率低、效率不高、成本高等问题。因此，有必要寻找一种较为简单、高效的提取分离竹叶总黄酮的方法。
发明内容
为克服以上缺陷，本发明提供一种竹叶总黄酮的提取方法。该方法包括以下步骤：
1、取竹叶，加水提取，加乙酸乙酯分次萃取，至水液盐酸镁粉测试反应较弱；
2、收集乙酸乙酯萃取液，浓缩制干膏，加水溶解，加三氯甲烷，析出的不溶物为目标产品。
作为优选方案：
步骤(1)所述的加水提取的料液比为1:(6-10),次数为2-3次，每次提取时间为30-90min。
步骤(1)所述的加水提取后，水提取液浓缩至相对密度为1.10-1.20，再用乙酸乙酯萃取。
步骤(1)所述的乙酸乙酯用量与竹叶的体积/质量比为1升/5千克，提取次数为2-3次。
步骤(2)所述的加水用量与竹叶的体积/质量比为1升/10千克，所述三氯甲烷用量按体积计与水等同。
步骤(2)中加三氯甲烷后静置12～24h。
作为最优方案包括以下步骤：
1、取竹叶，按料液比1:10加水提取3次，每次30min；水提取液浓缩至相对密度为1.15；再按料液比5kg：1L用乙酸乙酯萃取3次；
2、收集乙酸乙酯萃取液，浓缩制干膏，按料液比10kg：1L加水溶解，再加与水等体积的三氯甲烷，静置24h，析出的不溶物为目标产品。
本发明方法优点在于：工艺简单易行，易实现大规模化工业生产；竹叶总黄酮产品产率高、纯度高。采用《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》所收载总黄酮的测定方法测定，总黄酮含量超过50％，产率在0.83％-1.64％，得到的竹叶总黄酮相对于原料竹叶含有的竹叶总黄酮转移率可达60％以上。
具体实施方式
下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，但本发明并不局限于此。
实施例1竹叶提取工艺优化
提取竹叶中所含黄酮类成分，结合其理化性质，选择水煎煮法提取，为选择最佳提取工艺，对影响水煎煮提取效率的三个主要因素加水量(A)、提取次数(B)、提取时间(C)，以总黄酮的转移率为考核指标，通过正交试验进行了优化。按三因素三水平，用L9(34)正交表进行正交试验。结果见表1、表2及表3。
表1因素及水平表
表2方差分析表
注：F1-0.05(2，2)＝19.0
表3正交试验结果(以总黄酮计)
在三个因素中，A因素(加水量)、B因素(煎煮次数)对总黄酮的提出有影响，而C因素(加热时间)对其无影响。如想得到最大的总黄酮得量，并从生产周期成本方面考虑，最佳工艺方案是每次提取加水10倍量，每次煎煮0.5小时，共煎煮三次。
实施例2竹叶黄酮的乙酸乙酯萃取分离
取竹叶10千克，煎煮提取3次，每次提取加水10倍量，煎煮0.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至稠膏后，平均分成四份，分别加纯净水调匀至相对密度(室温)1.10、1.15、1.20、1.25，用同体积乙酸乙酯萃取。当浓缩太稠时，不利于萃取，太稀，则萃取所用乙酸乙酯量大，耗费溶剂，不经济环保。在1.10、1.15、1.20均萃取得到成功，1.25太稠不易分层。
当相对密度为1.15；乙酸乙酯萃取3次，每次用量0.5升，萃取后的水液用盐酸镁粉反应检测残留黄酮情况，反应已较弱，反映萃取较好。
实施例3竹叶黄酮的氯仿除杂纯化
取竹叶10千克，煎煮提取3次，每次提取加水10倍量，煎煮0.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.15；乙酸乙酯萃取3次，每次用量2升，萃取后的水液用盐酸镁粉反应检测残留黄酮情况，反应已较弱。将乙酸乙酯萃取液合并回收乙酯乙酯，得干膏(乙酸乙酯味较浓)，加入1升纯净水，加热搅拌均匀，平均分成两份。放冷，然后分别加入0.5升三氯甲烷，搅拌后，一个放置12小时，一个放置24小时后观察。二者均分为水层和三氯甲烷层，在上层水层和下层三氯甲烷层之间均有棕黄色固体析出，分别滤过，以冷水适量冲洗，干燥，分别得81.2克、85.1克。
采用《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》所收载总黄酮的测定方法测定，总黄酮含量分别为53.21％、54.87％。
实施例4不同产地竹叶总黄酮的制备
对采自广宁县的不同乡镇的竹叶五份，每份10千克，煎煮提取3次，每次提取加水10倍量，煎煮0.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至相对密度为1.15；乙酸乙酯萃取3次，每次用量2升，萃取后的水液用盐酸镁粉反应检测残留黄酮情况，反应已较弱。将乙酸乙酯萃取液合并，回收乙酯乙酯，得干膏(乙酸乙酯味较浓)，加入1升纯净水，加热搅拌均匀，放冷，分别加入1升三氯甲烷，搅拌后，放置24小时。均在上层水层和下层三氯甲烷层之间有棕黄色固体析出，分别滤过，以冷水适量冲洗，干燥。
采用《保健食品检验与评价技术规范(2003年版)》所收载总黄酮的测定方法，测定原料竹叶与各总黄酮的含量。结果见表4。
表4不同产地竹叶总黄酮提取结果
Claims (7)
1.一种竹叶总黄酮的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取竹叶，加水提取，加乙酸乙酯分次萃取，至水液盐酸镁粉测试反应较弱；
(2)收集乙酸乙酯萃取液，浓缩至干膏，加水溶解，加三氯甲烷，析出的不溶物为目标产品。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的加水提取的料液比为1:(6-10),次数为2-3次，每次提取时间为30-90min。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的加水提取后，水提取液浓缩至相对密度为1.10-1.20，再用乙酸乙酯萃取。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述的乙酸乙酯用量与竹叶的体积/质量比为1升/5千克，提取次数为2-3次。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述的加水用量与竹叶的体积/质量比为1升/10千克，所述三氯甲烷用量按体积计与水等同。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中加三氯甲烷后静置12～24h。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取竹叶，按料液比1:10加水提取3次，每次30min；水提取液浓缩至相对密度为1.15；再按料液比5kg：1L用乙酸乙酯萃取3次；
(2)收集乙酸乙酯萃取液，浓缩制干膏，按料液比10kg：1L加水溶解，再加与水等体积的三氯甲烷，静置24h，析出的不溶物为目标产品。
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| CN1907994A (zh) * | 2006-08-25 | 2007-02-07 | 胡林福 | 一种从竹叶中提取竹叶黄酮的生产方法 |
| CN101889594A (zh) * | 2010-07-06 | 2010-11-24 | 江南大学 | 一种用水从竹叶中提取抑菌剂的方法 |
| CN105777826A (zh) * | 2016-03-04 | 2016-07-20 | 黔南民族师范学院 | 一种从麻竹叶中提取黄酮的方法 |
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2017
- 2017-08-02 CN CN201710650230.6A patent/CN107510797B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1907994A (zh) * | 2006-08-25 | 2007-02-07 | 胡林福 | 一种从竹叶中提取竹叶黄酮的生产方法 |
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| CN112137103A (zh) * | 2020-09-15 | 2020-12-29 | 劲牌持正堂药业有限公司 | 一种竹叶黄酮提取物、制备方法及其应用 |
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