CN107495366A - 对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方,其包括盐生杜氏藻粉、葛根提取物和黄芪提取物。本发明的优点在于,经动物试验证实,本发明能显著降低大鼠胃粘膜急性酒精损伤大体评分总积分以及大鼠胃粘膜急性酒精损伤病理组织学观察总积分;经人体试食试验证实,试食由本发明制备而成的软胶囊能显著降低临床症状积分和剑突下压痛积分,其中剑突下压痛可得到有效改善,改善有效率为89.5%;盐生杜氏藻粉为新食品原料、葛根提取物和黄芪提取物为药食同源的原料,均可用于保健食品,经动物试验及人体试食试验证实,本发明制备而成的软胶囊安全可靠,可以长期服用,没有毒副作用,未见过敏及其它不良反应,不会对人体其他器官造成损害。
Description
技术领域:
本发明涉及一种保健食品配方,特别涉及一种对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方。
背景技术:
胃粘膜损伤是指各种原因引起的胃粘膜炎性反应,发生局部糜烂或累及粘膜肌层的坏死性缺损病变。胃粘膜损伤作为临床常见病和多发病,包括胃炎和胃溃疡等,其严重影响人们的健康,并给患者及家属带来极大的痛苦。通常认为,影响胃粘膜的因子有两种,即保护胃粘膜的防御因子与损伤胃粘膜的攻击因子,防御因子主要是机体的自身保护修复作用,即胃粘膜保护机制(胃粘膜屏障),攻击因子有胃酸、胃蛋白酶、反流的上部小肠液、幽门螺杆菌等。在神经内分泌调节下,胃粘膜防御因子与损伤胃粘膜的攻击因子保持相对的平衡状态,正常情况下各种攻击因子均不能损伤胃粘膜,但胃粘膜的攻击因子和防御因子失衡,就会导致胃粘膜损伤。
目前,胃粘膜损伤治疗手段包括西医治疗、中草药治疗、针灸治疗和食疗等方法。尽管西医治疗、中草药治疗对胃粘膜损伤治疗取得了明显的治疗效果,但同时也出现了不同的副作用,长期服用中药或西药的患者也容易因副作用的影响对身体其他器官造成损害,因此,寻找一种对人体安全有效的产品便成为胃粘膜损伤防治研究的当务之急和未来发展趋势。
发明内容:
本发明的目的在于提供一种对胃粘膜损伤有辅助保护功能、安全无毒、可长期服用的对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方。
本发明由如下技术方案实施:对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方,其包括盐生杜氏藻粉、葛根提取物和黄芪提取物。盐生杜氏藻粉来源于内蒙古兰太实业股份有限公司生物工程分公司,是经卫生部批准的新食品原料;葛根提取物来源于西安中盈技术发展有限公司;黄芪提取物来源于西安奥晶科技发展有限公司。
进一步的,所述盐生杜氏藻粉、所述葛根提取物、所述黄芪提取物的质量比为(5-5.5):(5-12.5):(5-27)。
进一步的,所述盐生杜氏藻粉、所述葛根提取物、所述黄芪提取物的质量比为(5-5.5):(5-8.3):(5-18)。
进一步的,将所述盐生杜氏藻粉、所述葛根提取物和所述黄芪提取物制成保健品软胶囊剂。
本发明的优点:1、经动物试验证实,本发明能显著降低大鼠胃粘膜急性酒精损伤大体评分总积分以及大鼠胃粘膜急性酒精损伤病理组织学观察总积分;经人体试食试验证实,试食由本发明制备而成的软胶囊能显著降低临床症状积分和剑突下压痛积分,其中剑突下压痛可得到有效改善,改善有效率为89.5%;2、盐生杜氏藻粉为新食品原料、葛根提取物和黄芪提取物为药食同源的原料,均为可用于保健食品,经小鼠急性毒性试验证实,根据急性毒性分级标准,本发明属无毒级;经动物试验及人体试食试验证实,本发明及由本发明制备而成的软胶囊安全可靠,可以长期服用,没有毒副作用,未见过敏及其它不良反应,不会对人体其他器官造成损害;3、制成软胶囊剂型,一方面可将盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物等主要组分与氧气隔绝,最大限度保护功效成分不发生变化,确保产品质量稳定可靠;另一方面软胶囊封闭性好,可以掩盖盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物等主要组分的不良气味,使用者更容易接受。
具体实施方式:
实施例1:
对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方,其包括如下质量比的组分:盐生杜氏藻粉:葛根提取物:黄芪提取物为5:5:5。
其中,盐生杜氏藻粉来源于内蒙古兰太实业股份有限公司生物工程分公司,是经卫生部批准的新食品原料;盐生杜氏藻粉来自天然、无污染的地理环境中,富含天然β-胡萝卜素,主要由全反式和9-顺式β-胡萝卜素组成,易于人体吸收,β-胡萝卜素是一种较强的抗氧化剂,可以有效淬灭氧自由基,抵御氧自由基对正常细胞的破坏作用,尤其是在体内“低氧浓度”区域,如上皮组织、内脏器官、皮肤组织与末梢器官等处能有效对抗自由基,所以被誉为是氧自由基最强的“克星”。β-胡萝卜素可以抑制幽门螺旋杆菌诱导产生的活性氧,使炎症信号活性的减弱,并抑制诱导型氧化氮合酶和环氧合酶-2在人体胃粘膜上皮AGS细胞中的表达,从而发挥对胃粘膜损伤的辅助保护功能。
葛根提取物来源于西安中盈技术发展有限公司;葛根为豆科植物野葛的干燥根,始载于《神农本草经》,被列为中品,可药食兼用。其味甘、平、微凉,入脾、胃经。具有解肌退热、生津止渴、升阳止泻等功效。葛根的药理作用主要为,抗心律失常、降血压、促进血管内皮的修复与再生、保护脑功能、降血糖、抗癌、解酒、护肝等。
黄芪提取物来源于西安奥晶科技发展有限公司。黄芪始载于《神农本草经》,又称北芪。来源于豆科多年生草本植物蒙古黄芪的根,性温味甘,具有补气固表、利尿托毒、敛疮生肌、益气补中等功效。因其极高的药用价值在历代本草中均而被列为上品。黄芪有提高免疫力、抗病毒、抗癌、改善心肌缺血缺氧、抗炎、抗骨质疏松、清除氧自由基等作用。
为了最大限度保护功效成分不发生变化,确保产品质量稳定可靠,本实施例制备成软胶囊形式运输及使用,制备方法如下:
(1)主要组分的称取:称取如下质量的组分:盐生杜氏藻粉50g,葛根提取物50g,黄芪提取物50g,悬浮剂315g,助悬剂30g,润滑剂5g;其中,悬浮剂为玉米油,将盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物悬浮于玉米油中可以避免其因氧化或吸潮而导致有效成分发生变化,确保产品质量稳定,且玉米油中含有丰富的不饱和脂肪酸及维生素E,具有抗氧化作用;助悬剂为蜂蜡,蜂蜡可以保证盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物均匀悬浮于玉米油中,避免盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物在玉米油中分层;润滑剂为磷脂,磷脂可以增加物料的润滑性,避免物料粘黏在一起而造成悬浮不均匀的现象。
(2)胶囊壳组分的称取:称取如下重量份的胶囊壳组分:明胶250g,甘油112.5g,二氧化钛0.5g,纯化水250g,色素0.6475g。其中,色素为胭脂红0.375g、日落黄0.25g、亮蓝0.0225g。
(3)胶囊液的制备:将称量好的悬浮剂与助悬剂混合,加热至60-70℃,至助悬剂完全溶解,得混合液;混合液降温至40℃,向冷却后的混合液中加入称量好的盐生杜氏藻粉、称量并过筛的葛根提取物和黄芪提取物、以及称量好的润滑剂,搅拌均匀后,过胶体磨2-4次,得混合料;混合料乳化60min,抽真空排除气泡,降温至20-40℃,过100目筛,制得胶囊液;
(4)胶皮溶液的制备:将称量好的甘油和纯化水混合,并预热30min,向其中加入称量好的明胶、二氧化钛和色素,混合后升温至70-80℃,保温1h,保温完成后,在-0.06MPa的条件下抽真空至无气泡,过100目筛,65℃保温,得胶皮溶液;
(5)软胶囊的制备:分别将胶囊液和胶囊壳胶液输送至软胶囊机的储料槽和储胶槽中,启动软胶囊机压制软胶囊,胶囊液500mg/粒,即得成品软胶囊。
将本实施例制备成软胶囊形式运输及使用具有以下优点:1、软胶囊可将盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物等主要组分与氧气隔绝,最大限度保护功效成分不发生变化,确保产品质量稳定可靠;2、软胶囊封闭性好,可以掩盖盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物等主要组分的不良气味,使用者更容易接受。
实施例2:
对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方,其包括如下质量比的组分:盐生杜氏藻粉:葛根提取物:黄芪提取物为5.2:6.7:13。
其中,盐生杜氏藻粉来源于内蒙古兰太实业股份有限公司生物工程分公司,是经卫生部批准的新资源食品;盐生杜氏藻粉来自天然、无污染的地理环境中,富含天然β-胡萝卜素,主要由全反式和9-顺式β-胡萝卜素组成,易于人体吸收,β-胡萝卜素是一种较强的抗氧化剂,可以有效淬灭氧自由基,抵御氧自由基对正常细胞的破坏作用,尤其是在体内“低氧浓度”区域,如上皮组织、内脏器官、皮肤组织与末梢器官等处能有效对抗自由基,所以被誉为是氧自由基最强的“克星”。β-胡萝卜素可以抑制幽门螺旋杆菌诱导产生的活性氧,使炎症信号活性的减弱,并抑制诱导型氧化氮合酶和环氧合酶-2在人体胃粘膜上皮AGS细胞中的表达,从而发挥对胃粘膜损伤的辅助保护功能。
葛根提取物来源于西安中盈技术发展有限公司;葛根为豆科植物野葛的干燥根,始载于《神农本草经》,被列为中品,可药食兼用。其味甘、平、微凉,入脾、胃经。具有解肌退热、生津止渴、升阳止泻等功效。葛根的药理作用主要为,抗心律失常、降血压、促进血管内皮的修复与再生、保护脑功能、降血糖、抗癌、解酒、护肝等。
黄芪提取物来源于西安奥晶科技发展有限公司。黄芪始载于《神农本草经》,又称北芪。来源于豆科多年生草本植物蒙古黄芪的根,性温味甘,具有补气固表、利尿托毒、敛疮生肌、益气补中等功效。因其极高的药用价值在历代本草中均而被列为上品。黄芪有提高免疫力、抗病毒、抗癌、改善心肌缺血缺氧、抗炎、抗骨质疏松、清除氧自由基等作用。
为了最大限度保护功效成分不发生变化,确保产品质量稳定可靠,本实施例制备成软胶囊形式运输及使用,制备方法如下:
(1)主要组分的称取:称取如下重量份的组分:盐生杜氏藻粉31.8g,葛根提取物40.2g,黄芪提取物78g,悬浮剂315g,助悬剂30g,润滑剂5g;其中,悬浮剂为玉米油,将盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物悬浮于玉米油中可以避免其因氧化或吸潮而导致有效成分发生变化,确保产品质量稳定,且玉米油中含有丰富的不饱和脂肪酸及维生素E,具有抗氧化作用;助悬剂为蜂蜡,蜂蜡可以保证盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物均匀悬浮于玉米油中,避免盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物在玉米油中分层;润滑剂为磷脂,磷脂可以增加物料的润滑性,避免物料粘黏在一起而造成悬浮不均匀的现象。
(2)胶囊壳组分的称取:称取如下重量份的胶囊壳组分:明胶250g,甘油112.5g,二氧化钛0.5g,纯化水250g,色素0.6475g。其中,色素为胭脂红0.375g、日落黄0.25g、亮蓝0.0225g。
(3)胶囊液的制备:将称量好的悬浮剂与助悬剂混合,加热至60-70℃,至助悬剂完全溶解,得混合液;混合液降温至40℃,向冷却后的混合液中加入称量好的盐生杜氏藻粉、称量并过筛的葛根提取物和黄芪提取物、以及称量好的润滑剂,搅拌均匀后,过胶体磨2-4次,得混合料;混合料乳化60min,抽真空排除气泡,降温至20-40℃,过100目筛,制得胶囊液;
(4)胶皮溶液的制备:将称量好的甘油和纯化水混合,并预热30min,向其中加入称量好的明胶、二氧化钛和色素,混合后升温至70-80℃,保温1h,保温完成后,在-0.06MPa的条件下抽真空至无气泡,过100目筛,65℃保温,得胶皮溶液;
(5)软胶囊的制备:分别将胶囊液和胶囊壳胶液输送至软胶囊机的储料槽和储胶槽中,启动软胶囊机压制软胶囊,胶囊液500mg/粒,即得成品软胶囊。
将本实施例制备成软胶囊形式运输及使用具有以下优点:1、软胶囊可将盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物等主要组分与氧气隔绝,最大限度保护功效成分不发生变化,确保产品质量稳定可靠;2、软胶囊封闭性好,可以掩盖盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物等主要组分的不良气味,使用者更容易接受。
实施例3:
对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方,其包括如下质量比的组分:盐生杜氏藻粉:葛根提取物:黄芪提取物为5.3:8.3:18。
其中,盐生杜氏藻粉来源于内蒙古兰太实业股份有限公司生物工程分公司,是经卫生部批准的新资源食品;盐生杜氏藻粉来自天然、无污染的地理环境中,富含天然β-胡萝卜素,主要由全反式和9-顺式β-胡萝卜素组成,易于人体吸收,β-胡萝卜素是一种较强的抗氧化剂,可以有效淬灭氧自由基,抵御氧自由基对正常细胞的破坏作用,尤其是在体内“低氧浓度”区域,如上皮组织、内脏器官、皮肤组织与末梢器官等处能有效对抗自由基,所以被誉为是氧自由基最强的“克星”。β-胡萝卜素可以抑制幽门螺旋杆菌诱导产生的活性氧,使炎症信号活性的减弱,并抑制诱导型氧化氮合酶和环氧合酶-2在人体胃粘膜上皮AGS细胞中的表达,从而发挥对胃粘膜损伤的辅助保护功能。
葛根提取物来源于西安中盈技术发展有限公司;葛根为豆科植物野葛的干燥根,始载于《神农本草经》,被列为中品,可药食兼用。其味甘、平、微凉,入脾、胃经。具有解肌退热、生津止渴、升阳止泻等功效。葛根的药理作用主要为,抗心律失常、降血压、促进血管内皮的修复与再生、保护脑功能、降血糖、抗癌、解酒、护肝等。
黄芪提取物来源于西安奥晶科技发展有限公司。黄芪始载于《神农本草经》,又称北芪。来源于豆科多年生草本植物蒙古黄芪的根,性温味甘,具有补气固表、利尿托毒、敛疮生肌、益气补中等功效。因其极高的药用价值在历代本草中均而被列为上品。黄芪有提高免疫力、抗病毒、抗癌、改善心肌缺血缺氧、抗炎、抗骨质疏松、清除氧自由基等作用。
为了最大限度保护功效成分不发生变化,确保产品质量稳定可靠,本实施例制备成软胶囊形式运输及使用,制备方法如下:
(1)主要组分的称取:称取如下重量份的组分:盐生杜氏藻粉24.77g,葛根提取物39.52g,黄芪提取物85.71g,悬浮剂315g,助悬剂30g,润滑剂5g;其中,悬浮剂为玉米油,将盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物悬浮于玉米油中可以避免其因氧化或吸潮而导致有效成分发生变化,确保产品质量稳定,且玉米油中含有丰富的不饱和脂肪酸及维生素E,具有抗氧化作用;助悬剂为蜂蜡,蜂蜡可以保证盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物均匀悬浮于玉米油中,避免盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物在玉米油中分层;润滑剂为磷脂,磷脂可以增加物料的润滑性,避免物料粘黏在一起而造成悬浮不均匀的现象。
(2)胶囊壳组分的称取:称取如下重量份的胶囊壳组分:明胶250g,甘油112.5g,二氧化钛0.5g,纯化水250g,色素0.6475g。其中,色素为胭脂红0.375g、日落黄0.25g、亮蓝0.0225g。
(3)胶囊液的制备:将称量好的悬浮剂与助悬剂混合,加热至60-70℃,至助悬剂完全溶解,得混合液;混合液降温至40℃,向冷却后的混合液中加入称量好的盐生杜氏藻粉、称量并过筛的葛根提取物和黄芪提取物、以及称量好的润滑剂,搅拌均匀后,过胶体磨2-4次,得混合料;混合料乳化60min,抽真空排除气泡,降温至20-40℃,过100目筛,制得胶囊液;
(4)胶皮溶液的制备:将称量好的甘油和纯化水混合,并预热30min,向其中加入称量好的明胶、二氧化钛和色素,混合后升温至70-80℃,保温1h,保温完成后,在-0.06MPa的条件下抽真空至无气泡,过100目筛,65℃保温,得胶皮溶液;
(5)软胶囊的制备:分别将胶囊液和胶囊壳胶液输送至软胶囊机的储料槽和储胶槽中,启动软胶囊机压制软胶囊,胶囊液500mg/粒,即得成品软胶囊。
将本实施例制备成软胶囊形式运输及使用具有以下优点:1、软胶囊可将盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物等主要组分与氧气隔绝,最大限度保护功效成分不发生变化,确保产品质量稳定可靠;2、软胶囊封闭性好,可以掩盖盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物等主要组分的不良气味,使用者更容易接受。
实施例4:
对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方,其包括如下质量比的组分:盐生杜氏藻粉:葛根提取物:黄芪提取物为5.2:12.5:27。
其中,盐生杜氏藻粉来源于内蒙古兰太实业股份有限公司生物工程分公司,是经卫生部批准的新资源食品;盐生杜氏藻粉来自天然、无污染的地理环境中,富含天然β-胡萝卜素,主要由全反式和9-顺式β-胡萝卜素组成,易于人体吸收,β-胡萝卜素是一种较强的抗氧化剂,可以有效淬灭氧自由基,抵御氧自由基对正常细胞的破坏作用,尤其是在体内“低氧浓度”区域,如上皮组织、内脏器官、皮肤组织与末梢器官等处能有效对抗自由基,所以被誉为是氧自由基最强的“克星”。β-胡萝卜素可以抑制幽门螺旋杆菌诱导产生的活性氧,使炎症信号活性的减弱,并抑制诱导型氧化氮合酶和环氧合酶-2在人体胃粘膜上皮AGS细胞中的表达,从而发挥对胃粘膜损伤的辅助保护功能。
葛根提取物来源于西安中盈技术发展有限公司;葛根为豆科植物野葛的干燥根,始载于《神农本草经》,被列为中品,可药食兼用。其味甘、平、微凉,入脾、胃经。具有解肌退热、生津止渴、升阳止泻等功效。葛根的药理作用主要为,抗心律失常、降血压、促进血管内皮的修复与再生、保护脑功能、降血糖、抗癌、解酒、护肝等。
黄芪提取物来源于西安奥晶科技发展有限公司。黄芪始载于《神农本草经》,又称北芪。来源于豆科多年生草本植物蒙古黄芪的根,性温味甘,具有补气固表、利尿托毒、敛疮生肌、益气补中等功效。因其极高的药用价值在历代本草中均而被列为上品。黄芪有提高免疫力、抗病毒、抗癌、改善心肌缺血缺氧、抗炎、抗骨质疏松、清除氧自由基等作用。
为了最大限度保护功效成分不发生变化,确保产品质量稳定可靠,本实施例制备成软胶囊形式运输及使用,制备方法如下:
(1)主要组分的称取:称取如下重量份的组分:盐生杜氏藻粉18.33g,葛根提取物41.67g,黄芪提取物90g,悬浮剂315g,助悬剂30g,润滑剂5g;其中,悬浮剂为玉米油,将盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物悬浮于玉米油中可以避免其因氧化或吸潮而导致有效成分发生变化,确保产品质量稳定,且玉米油中含有丰富的不饱和脂肪酸及维生素E,具有抗氧化作用;助悬剂为蜂蜡,蜂蜡可以保证盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物均匀悬浮于玉米油中,避免盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物在玉米油中分层;润滑剂为磷脂,磷脂可以增加物料的润滑性,避免物料粘黏在一起而造成悬浮不均匀的现象。
(2)胶囊壳组分的称取:称取如下重量份的胶囊壳组分:明胶250g,甘油112.5g,二氧化钛0.5g,纯化水250g,色素0.6475g。其中,色素为胭脂红0.375g、日落黄0.25g、亮蓝0.0225g。
(3)胶囊液的制备:将称量好的悬浮剂与助悬剂混合,加热至60-70℃,至助悬剂完全溶解,得混合液;混合液降温至40℃,向冷却后的混合液中加入称量好的盐生杜氏藻粉、称量并过筛的葛根提取物和黄芪提取物、以及称量好的润滑剂,搅拌均匀后,过胶体磨2-4次,得混合料;混合料乳化60min,抽真空排除气泡,降温至20-40℃,过100目筛,制得胶囊液;
(4)胶皮溶液的制备:将称量好的甘油和纯化水混合,并预热30min,向其中加入称量好的明胶、二氧化钛和色素,混合后升温至70-80℃,保温1h,保温完成后,在-0.06MPa的条件下抽真空至无气泡,过100目筛,65℃保温,得胶皮溶液;
(5)软胶囊的制备:分别将胶囊液和胶囊壳胶液输送至软胶囊机的储料槽和储胶槽中,启动软胶囊机压制软胶囊,胶囊液500mg/粒,即得成品软胶囊。
将本实施例制备成软胶囊形式运输及使用具有以下优点:1、软胶囊可将盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物等主要组分与氧气隔绝,最大限度保护功效成分不发生变化,确保产品质量稳定可靠;2、软胶囊封闭性好,可以掩盖盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物等主要组分的不良气味,使用者更容易接受。
实施例5:
一、小鼠急性毒性试验
选用18g-22g昆明种小鼠20只,雌雄各半,进行试验。称取本发明24.00g,加玉米油至40.0mL,配制成0.6g/mL最大混选度,制成样品。灌胃容量为20mL/kgBW,即以12.00g/kgBW的剂量,2次灌胃,制隔6h,灌胃剂量相当于24.00g/kgBW(相当于人推荐日摄入量的720倍),连续观察14d,观察并记录动物的一般状态、体重变化、中毒体征以及死亡情况等,确定最大耐受剂量(MTD)。试验结果如表1所示。
表l小鼠急性毒性试验结果
表1结果表明,给两种性别的小鼠灌胃2次样品,灌胃剂量为24.OOg/kgBW,在观察的14d期问,动物状态正常,无中毒体征和死亡等异常情况。第15d将受试小鼠处死进行大体解剖检查,主要器官未见明显异常。样品对雌、雄小鼠的经口最大耐受剂量(MTD)均大于15g/kgBW,根据急性毒性分级标准,样品属无毒级。
二、动物试验
1、受试动物的选择与分组设计:受试动物选用SPF级雄性SD大鼠,体重为180-220克,分为5组,每组12只。按照人体推荐剂量0.033g/kgBW/d计,设置相当于人体推荐剂量的2.5倍、5倍、15倍的低、中、高三个剂量组,即高剂量组称取本发明10.00g,加玉米油至100mL;中剂量组取高剂量组受试物溶液20.0mL加玉米油至60.0mL;低剂量组取高剂量组受试物溶液10.0mL加玉米油至60.0mL。三个剂量组小鼠每日一次经口给予,灌胃体积为0.5mL/100gBW,连续灌胃30d后检测各项指标。同时设置正常对照组(0g/kgBW)和模型对照组(0g/kgBW),用玉米油代替受试物,灌胃方法和每日灌胃体积与三个剂量组相同。各组均给予基础饲料。
2、模型的建立:低、中、高三个剂量组及正常对照组、模型对照组连续灌胃30d后,全部动物严格禁食24h(不禁水),此期间亦禁止给予受试物。实验结束当天除正常对照组外,其他所有组别动物均给予无水乙醇1.0mL/只,1h后处死动物。
3、指标检测的方法
3.1取材:暴露完整胃,结扎幽门,灌注适量10%福尔马林溶液,固定20min,然后沿胃大弯剪开,洗净胃内容物,展开胃粘膜。
3.2大体观察及评分:在体视显微镜下或肉眼下用游标卡尺测量出血点或出血带的长度和宽度。因宽度所代表损伤的严重性远大于长度所代表损伤,故双倍积分。其评分标准见表2。
表2急性酒精损伤肉眼观查评分标准
观察指标:各试验组胃粘膜损伤程度以损伤发生率(%)、损伤积分指数和损伤抑制率表示。损伤发生率(%)=某组出现出血或溃疡的大鼠数量/该组大鼠数量×100%;损伤积分指数=组损伤评分总和/组动物数量;损伤抑制率(%)=(A-B)/A×l00%(A、B分别为模型对照组与剂量组的损伤积分)。
3.3病理组织学观察及评分:大体检查完毕,选取每只动物胃粘膜损伤最严重的部位,切下约10×2mm2的组织块,固定于10%福尔马林溶液,常规制片,HE染色,镜下观察。注意选择胃粘膜正横切面,包括粘膜全层的区域观察。评分方法:以充血、出血、粘膜细胞变性坏死在整个粘膜上皮层的累及程度分为5级。充血权重为1,出血权重为2,上皮细胞变性坏死权重为3,评分标准及病变总积分公式见表3。
表3急性胃粘膜损伤镜下评分标准
4、数据处理:用SPSS软件进行数据处理,组间比较可用方差分析,但需按方差分析的程序先进行方差齐性检验,方差齐,计算F值。F值<F0.05的结论:各组均数间差异无显著性;F值≥F0.05,即P≤0.05,用多个试验组和对照组间均数的两两比较方法进行统计。对非『F态或方差不齐的数据进行适当的变量转换,待满足正态或方差齐要求后,用转换后的数据进行统计。若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的,改用秩和检验进行统计。对照组比较采用独立样本T检验。
5、结果判定依据:受试物剂量组与模型对照组进行比较,大体观察评分与病理组织学检查评分结果均表明胃粘膜损伤明显改善,可判定该受试样品动物实验结果为阳性。
6、结果
6.1本发明对大鼠体重的影响:结果如表4所示。
表4试验前后各组大鼠体重
由表4可知,大鼠的初始体重在各剂量组与模型对照组(Og/kgBW)组间比较,差异均无显著性(P>0.05),即大鼠的初始体重在各组间较为均衡。经口给予大鼠本发明30d后,大鼠体重在各剂量组与模型对照组(Og/kgBW)间比较,差异均无显著性(P>0.05),即本发明对大鼠体重无不良影响。
6.2本发明对大鼠急性胃粘膜损伤酒精模型大体评分的影响:结果如表5所示。
表5本发明对大鼠急性胃粘膜损伤酒精模型大体评分总积分的影响
*:与模型对照组(Og/kgBW)比较有显著差异
由表5可知,经口给予大鼠本发明30d后,模型对照组与正常对照组比较,大鼠胃粘膜急性酒精损伤大体评分总积分显著上升(P<0.001),表明模型建立成功。高剂量组与模型对照组比较,大鼠胃粘膜急性酒精损伤大体评分总积分显著降低(P<0.05),即本发明在高剂量组能显著降低大鼠胃粘膜急性酒精损伤大体评分总积分。
6.3本发明对大鼠急性胃粘膜损伤酒精模型病理组织学影响:结果如表6所示。
表6本发明对大鼠急性胃粘膜损伤酒精模型病理组织学的影响
*:与模型对照组(Og/kgBW)比较有显著差异
由表6可知,经口给予大鼠本发明30d后,模型对照组与正常对照组比较,大鼠胃粘膜急性酒精损伤病理组织学观察总积分显著上升(P<0.001),表明模型建立成功。中剂量组与模型对照组比较,大鼠胃粘膜急性酒精损伤病理组织学观察总积分显著降低(P<0.05);高剂量组与模型对照组比较,大鼠胃粘膜急性酒精损伤病理组织学观察总积分显著降低(P<0.001),即本发明在中剂量组、高剂量组能显著降低大鼠胃粘膜急性酒精损伤病理组织学观察总积分。
6.4本发明对大鼠急性胃粘膜损伤酒精模型观察指标:结果如表7所示。
表7本发明对大鼠急性胃粘膜损伤酒精模型观察指标
7、结论
经口给予大鼠本发明30d后,建立胃粘膜急性酒精损伤模型。与模型对照组(Og/kgBW)比较,该受试物在中剂量组能显著降低大鼠胃粘膜急性酒精损伤病理组织学观察总积分(P<0.05);在高剂量组能显著降低大鼠胃粘膜急性酒精损伤大体评分总积分(P<0.05)、能显著降低大鼠胃粘膜急性酒精损伤病理组织学观察总积分(P<0.001)。该受试物对大鼠体重增长无不良影响。根据国家食品药品监督管理局国食药监保化[2012]107号附件2:对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法(急性酒精损伤模型)的判定标准可知,本发明对胃粘膜损伤有辅助保护功能动物实验结果阳性。
三、人体试食试验
1、样品与对照物:样品为由本发明制备而成的软胶囊,样品性状为咖啡色软胶囊,内容物为棕褐色混悬油状物,核准净含量为500mg/粒,贮藏方法为密封、避光、置干燥阴凉处存放,保质期为24个月,人体推荐量为每日2次,每次2粒,口服,即服用量为2000mg/d。对照物为善元堂牌贝乐舒软胶囊,内容物为混悬油状物,核准净含量为500mg/粒,贮藏方法为密封、避光、置干燥阴凉处存放,保质期为24个月,人体推荐量为每日2次,每次2粒,口服,即服用量为2000mg/d。
2、受试对象的选择:符合慢性浅表性胃炎诊断标准且经胃镜筛选确诊为胃粘膜损伤的自愿受试者。慢性浅表性胃炎诊断标准:病程迁延,有不同程度的消化不良、上腹痛、烧心、嗳气、反酸、腹胀等临床症状,可有上腹部轻度压痛。符合慢性浅表性胃炎纤维胃镜诊断标准及活体组织检查诊断标准。排除胃溃疡患者。
具有以下情况的受试者应排除:年龄在18岁以下或65岁以上,妊娠或哺乳期妇女,对本品过敏者;继发性慢性胃炎;合并有心血管、脑血管、肝、肾和造血系统严重疾病,精神病患者;经常用药、嗜酒、吸烟,4周内参加过其他实验;3个月内用过已知对胃肠功能有损害的药物;症状、体征分级为重症者;有严重消化系统溃疡的病人;正在服用其他治疗药物或接受其他治疗者;未按规定服用受试样品,无法判断功效,或资料不全等影响功效或安全性判断者。
3、分组设计:采用自身和组间两种对照设计。按受试者的症状轻重随机分为试食组和对照组,尽可能考虑到影响结果的主要因素如年龄、性别、病程等,进行均衡性检验,以保证组间的可比性。每组受试者不少于50例。
4、食用剂量及时间:试验前对每一位受试者按性别、年龄、不同劳动强度、理想体重参照原来生活习惯规定相应的饮食,试食期间两组均坚持饮食控制。试食组服用样品,对照组服用有相同作用的对照物。每日2次,每次2粒,连续服用30天。
5、观察指标:以下观察指标试验前后各检查一次。
5.1症状观察:胃痛、嗳气、反酸、腹胀、食欲不振、少食等临床症状,体征观察剑突下压痛程度。按症状轻重统计积分,症状轻重分级表如表8所示。
表8症状轻重分级表
5.2胃镜检查与体征观察:剑突下压痛程度检查,根据疼痛程度分为轻、中、重。轻度(1分):用力时才出现疼痛,压痛轻微。中度(2分):用力时即出现疼痛,但疼痛尚能忍受,压痛明显。重度(3分):稍微用力即出现疼痛,疼痛不能忍受,压痛剧烈。试食结束后,抽取30例受试者(试食组15、对照组15例)进行胃镜复查,观察试食前后胃镜结果的变化情况。
5.3安全性观察:观察受试者如下情况,一般状况包括精神、睡眠、饮食、大小便、血压等;血、尿、便常规检查包括红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、白细胞计数(WBC),尿、大便常规检查;肝肾功能包括谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL);以及腹部B超、心电图、X线胸部透视。
6、数据处理及结果判定:采用配对t检验,两组均数比较采用成组t检验,后者需进行方差齐性检验,对非正态分布或方差不齐的数据进行适当的变量转换,待满足正态方差齐后,用转换的数据进行t检验。若转换数据仍不能满足正态方差齐要求,改用t’检验或秩和检验,但变异系数太大(如CV>50%)的资料应用秩和检验。
试食前后试食组自身比较,以及试食后试食组与阳性对照组组间比较,临床症状、体征积分明显减少,胃镜复查结果有改善或不加重,可以判定该样品对胃粘膜损伤有辅助保护功能。
7、结果
7.1均衡性比较:纳入受试者114人,除去试验过程中试食组脱失1人,实际受试者为113名,年龄在40-65岁,男性27人,女性86人。均衡性比较如表9所示。
表9试食前两组受试者基本资料的均衡性比较
由表9可知,试食前试食组临床病症、年龄、病程、性别与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。表明两组临床症状、年龄、病程、性别具有均衡可比性。
7.2安全性观察比较:对试食者精神、睡眠、饮食、大小便情况进行了问诊调查,按良好、一般、差分级统计,并测量血压、心率,结果如表10所示。对受试者进行血、尿、便常规检查包括红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、白细胞计数(WBC),尿、大便常规检查;以及肝肾功能的检查包括谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、尿素(Urea)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL),结果如表11所示。
表10试食前后两组一般情况比较
表11试食前后血、尿、便常规及血生化改变
由表10可知,大部分试食者一般情况良好,试食组试食后精神状态、饮食情况正常,且由表10可知,两组试食前后自身比较,所有指标差异均无显著性(P>0.05),表明试食对人体一般情况无不良影响。由表11可知,试食前后试食组和对照组各项检测指标均基本在正常范围。对试食前后试食组和对照组进行腹部B超、心电图、X线胸部透视的检查,结果显示,试食前后试食组和对照组的腹部B超、心电图、X线胸部透视结果未见异常,均在正常范围。
7.3症状总积分、主要症状改善、体征观察与胃镜检查的变化:试食前后,对试食组和对照组的受试者症状进行观察,并按照标准统计积分,结果如表12所示;
表12试食前后症状总积分变化
***自身比较P<0.001,###组间比较P<0.001
由表12可知,试食前后,试食组症状总积分显著降低(P<0.001),即食用样品可以显著降低受试者症状总积分。试食后,试食组与对照组相比,症状总积分显著降低(P<0.001),即样品较对照物而言可以显著降低受试者症状总积分。
试食后,对试食组和对照组的受试者的主要症状改善情况进行观察和统计,结果如表13所示;
表13主要症状改善情况
试食组(对照组)
由表13可知,试食后,试食组主要症状得到有效的改善,各项主要症状的改善有效率均在70-80%。
试食前后,对试食组和对照组的受试者的临床体征剑突下压痛进行观察,并按照标准统计积分,结果如表14所示;
表14临床体征剑突下压痛积分统计
***自身比较P<0.001,###组间比较P<0.001
由表14可知,试食前后,试食组临床体征剑突下压痛总积分显著降低(P<0.001),即食用样品可以显著降低受试者临床体征剑突下压痛总积分。试食后,试食组与对照组相比,临床体征剑突下压痛总积分显著降低(P<0.001),即样品较对照物而言可以显著降低受试者临床体征剑突下压痛总积分。
试食后,对试食组和对照组的受试者的临床体征剑突下压痛改善情况进行观察和统计,结果如表15所示;
表15试食前后剑突下压痛改善率的比较
###组间比较P<0.001
由表15可知,试食后,试食组临床体征剑突下压痛显著降低(P<0.001),即食用样品可以有效的改善临床体征剑突下压痛,临床体征剑突下压痛的改善有效率为89.5%。
试食前后,对试食组和对照组的受试者进行胃镜检查并统计结果,结果如表16所示;
表16试食前后胃镜检查的结果比较
###组间比较P<0.001
由表16可知,试食后,试食组胃镜检查未改善情况显著降低(P<0.001),即食用样品后可有效改善胃镜检查情况,胃镜检查改善率为80.0%。
7.4不良反应观察:试食前后,对试食组和对照组的受试者出现的过敏以及恶心、胀气、腹泻、腹痛等不良反应进行观察,并进行统计,结果如表17所示;
表17试食后两组在试食期间过敏及其他不良反应情况
由表16可知,试食后,试食组与对照组均未见过敏及其他不良反应。
8、结论:
采用随机分组,自身与组恻两种对照设计,纳入受试者114例。有效受试者113例,试食组57例、对照组56例。对照组服用有相同作用的对照物,试食组样品,口服,每日2次,每次2粒,试食组与对照组试验前临床症状、剑突下压痛积分无显著差异,两组具有可比性。30天后,试食组试食前后自身比较,临床症状、剑突下压痛积分明显降低(P<0.001),其中剑突下压痛有效51例,有效率89.5%。对照组试食前后自身比较,临床症状、剑突下压痛积分无明显降低(P>0.05),其中剑突下压痛有效6例,有效率10.7%。与对照组比较,试食组试食后临床症状积分、剑突下压痛积分均降低,有显著差异(P<0.001)。试食后,胃镜检查结果,试食组改善率明显高于对照组(P<0.001)。根据国家食品药品监督管理局(国食药监保化[2012]107号)附件2对胃粘膜损伤有辅助保护功能评价方法,认为由本发明制备而成的软胶囊对胃粘膜损伤有辅助保护功能。试食者胸透、腹部B超、心电图均基本在正常范围。试食由本发明制备而成的软胶囊前后相比,血常规、血生化、尿常规及使常规指标均基本在正常范围,说明由本发明制备而成的软胶囊对试食者身体健康无不良影响。试食由本发明制备而成的软胶囊过程中未见过敏及其它不良反应。
四、软胶囊稳定性试验
取本发明制成的软胶囊15粒,平均分为3组并编号为组1、组2和组3,将组1-3软胶囊置于温度为39±1℃,相对湿度为75±1.5%的环境中三个月,每个月对组1-3软胶囊的感官指标、盐生杜氏藻粉中的β-胡萝卜素、葛根提取物中的葛根素、黄芪提取物中的粗多糖等指标进行相关标准的检测,每月检测结果表18、表19和表20所示。
表18第0个月软胶囊稳定性检测结果
表19第1个月软胶囊稳定性检测结果
表20第2个月软胶囊稳定性检测结果
由表18、表19和表20对比可知,本发明制成软胶囊可将盐生杜氏藻粉、葛根提取物、黄芪提取物等主要组分与氧气隔绝,最大限度保护功效成分不发生变化,软胶囊质量稳定可靠。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (4)
1.对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方,其特征在于,其包括盐生杜氏藻粉、葛根提取物和黄芪提取物。
2.根据权利要求1所述的对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方,其特征在于,所述盐生杜氏藻粉、所述葛根提取物、所述黄芪提取物的质量比为(5-5.5):(5-12.5):(5-27)。
3.根据权利要求2所述的对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方,其特征在于,所述盐生杜氏藻粉、所述葛根提取物、所述黄芪提取物的质量比为(5-5.5):(5-8.3):(5-18)。
4.根据权利要求1-3任一所述的对胃粘膜损伤具有辅助保护功能的保健食品配方,其特征在于,将所述盐生杜氏藻粉、所述葛根提取物和所述黄芪提取物制成保健品软胶囊剂。
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