CN107488238A - 一种红藻多糖的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种红藻多糖的提取方法，包括以下步骤：取红藻原料洗净切段，加入0.3~0.4mol/L NaOH和活性多肽混合液，搅拌提取，得混合液A；待混合液A冷却后，加入4.5~6.4mol/L的HCL溶液，离心处理得上清液B；取上清液B浓缩，后加入2.6~4倍体积的食用乙醇，静置取沉淀，得红藻多糖粗料；取红藻多糖粗料加水溶解，水浴下加入溶剂后，匀速滴加9~11%H2O2溶液，反应完成后，进行超滤处理，得纯红藻多糖，本发明所采用的红藻原料来源稳定，所制备的红藻多糖纯度高，品质质量好，且制备过程简单，操作便利，能耗低，红藻多糖提取率高，使红藻资源充分利用，符合绿色环保的要求。
Description
技术领域
本发明属于藻类多糖提取技术领域，具体涉及一种红藻多糖的提取方法。
背景技术
多糖（polysaccharide）是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式(C6H10O5)n表示。由相同的单糖组成的多糖称为同多糖，如淀粉、纤维素和糖原；以不同的单糖组成的多糖称为杂多糖，如阿拉伯胶是由戊糖和半乳糖等组成。多糖不是一种纯粹的化学物质，而是聚合程度不同的物质的混合物。多糖类一般不溶于水，无甜味，不能形成结晶，无还原性和变旋现象。多糖也是糖苷，所以可以水解，在水解过程中，往往产生一系列的中间产物，最终完全水解得到单糖。多糖作为免疫促进剂在临床上已广泛应用，因因此多糖的提取具有巨大的价值。
现有技术如，中国发明专利授权公告文献，授权公告号为CN1157416C, 该发明的絮凝提取海藻多糖的方法：首先采用循环超声破碎或者水煮法浸提制得含海藻多糖的浸提料液，将含海藻多糖的浸提料液置入反应器中，调节反应器内温度20-60℃，pH 5-8；在300-1500rpm搅拌速度下，加入絮凝剂，对含海藻多糖浸提料液进行絮凝或电场絮凝提取，得到海藻多糖粗产品，之后再对海藻多糖粗产品进行纯化或烘干处理，即制得海藻多糖产品，本发明所用絮凝剂量少，絮凝剂成本仅为乙醇成本的1/10左右，从而可大大降低海藻多糖的提取成本，该发明的提取方法中絮凝剂加入后，海藻多糖不能完全被絮凝提取，使得原料的利用率不高。
发明内容
本发明的目的在于提供一种制备过程简单，易于操作，制备过程能耗低，制备提取率高的一种红藻多糖的提取方法。
本发明为解决上述技术问题所采取的方案为：
一种红藻多糖的提取方法，包括以下步骤：
1）取红藻原料洗净切段，加入0.3~0.4mol/L NaOH和活性多肽混合液，搅拌提取，得混合液A；
2）待混合液A冷却后，加入4.5~6.4mol/L的HCL溶液，离心处理得上清液B；
3）取上清液B浓缩，后加入2.6~4倍体积的食用乙醇，静置取沉淀，得红藻多糖粗料；
4）取红藻多糖粗料加水溶解，水浴下加入溶剂后，匀速滴加9~11%H2O2溶液，反应完成后，进行超滤处理，得纯红藻多糖，本制备方法条件要求低，操作简单，制备过程能耗低，原料的利用高。
作为优选，制备步骤1中NaOH溶液和活性多肽混合液的加入量为红藻原料的12~24倍重量体积比，其中NaOH溶液和活性多肽的重量比为1:0.02~0.04，活性多肽的氨基酸序列为：HSHACACSKHSHAGTASYLSCLCHPGKLCACVNCSR，搅拌提取的温度为55℃~63℃，提取时间为1.8~2.3h，在搅拌提取过程中，NaOH溶液的作用效果有限，加入活性多肽后，活性多肽和NaOH溶液共同作用，可大大促进细胞壁的破裂和多糖的释放，降低了热水浸提的阻力，减少了提取时间，提高了红藻多糖提取率，使红藻资源充分利用。
作为优选，制备步骤2中制得上清液B的pH值为2.4~2.8，pH值的控制不仅提高了溶液稳定性，还可为后续反应提供有利环境。
作为优选，制备步骤3中浓缩至上清液B含水量为60~80%，食用乙醇的浓度为92~96%，上清液B浓缩后可减少使用乙醇的添加量，且多糖溶于热水而不溶于高浓度乙醇，控制加入的使用乙醇的浓度后，可使红藻多糖以沉淀的形式从水中析出，且食用乙醇无毒无害，不影响红藻多糖性质，使得所制得的红藻多糖纯度高，品质质量好。
作为优选，制备步骤4中溶剂的成分及其重量份为：0.4mol/L NaCl溶液1~3份、0.6mol/L NaAc溶液1.6~2.3份、3.5mol/L乙酸0.8~1.5份，H2O2溶液加入量为1.2~2.4份，利用化学物质之间的反应，可有效除去红藻多糖中的杂质，且反应快速，所得的红藻多糖纯度高。
作为优选，红藻原料为紫菜、石花菜、海人草、串珠藻、珊瑚藻中的一种或多种，所选的红藻原料来源稳定，成本低廉。
作为优选，纯红藻多糖中的单糖组成为半乳糖和3,6-内醚半乳糖，硫酸基含量为15~18%，单糖的组成稳定，硫酸基含量适宜，使得红藻多糖具有良好的抗氧化、抗病毒、消炎等作用。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明所采用的红藻原料来源稳定，所制备的红藻多糖纯度高，品质质量好，且制备过程简单，操作便利，能耗低，活性多肽的添加可大大促进细胞壁的破裂和多糖的释放，减少了提取时间，提高了红藻多糖提取率，使红藻资源充分利用，符合绿色环保的要求。
具体实施方式
以下结合实施例作进一步详细描述：
实施例1：
一种红藻多糖的提取方法，包括以下步骤：取红藻原料洗净切段，加入0.35mol/L NaOH和活性多肽混合液，NaOH溶液和活性多肽混合液的加入量为红藻原料的12~24倍重量体积比，其中NaOH溶液和活性多肽的重量比为1:0.026，活性多肽的氨基酸序列为：HSHACACSKHSHAGTASYLSCLCHPGKLCACVNCSR，搅拌提取，搅拌提取的温度为58℃，提取时间为2.1h，得混合液A，加入活性多肽后，活性多肽和NaOH溶液共同作用，可大大促进细胞壁的破裂和多糖的释放，降低了热水浸提的阻力，减少了提取时间，提高了红藻多糖提取率，使红藻资源充分利用；待混合液A冷却后，加入5.3mol/L的HCL溶液至混合液的pH值为2.5，离心处理得上清液B；取上清液B浓缩至含水量为68%，后加入3.3倍体积的95%食用乙醇，静置取沉淀，得红藻多糖粗料，多糖溶于热水而不溶于高浓度乙醇，控制加入的使用乙醇的浓度后，可使红藻多糖以沉淀的形式从水中析出，且食用乙醇无毒无害，不影响红藻多糖性质，使得所制得的红藻多糖纯度高，品质质量好；最后取红藻多糖粗料加水溶解，水浴下加入0.4mol/L NaCl溶液2份、0.6mol/L NaAc溶液1.7份、3.5mol/L乙酸1.2份后，匀速滴加10.5%H2O2溶液1.9份，反应完成后，进行超滤处理，得纯红藻多糖，其中，红藻原料为紫菜、石花菜、海人草，所得的纯红藻多糖中的单糖组成为半乳糖和3,6-内醚半乳糖，硫酸基含量为16%。
本实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，在此不作详细叙述。
实施例2：
一种红藻多糖的提取方法，包括以下步骤：
1）取海人草和串珠藻原料洗净切段，加入21倍体积的0.3~0.4mol/L NaOH和活性多肽混合液，其中NaOH溶液和活性多肽的重量比为1:0.033，在温度为61℃条件下，搅拌提取2h，得混合液A；
2）待混合液A冷却后，加入4.8mol/L的HCL溶液至混合液pH值为2.6，离心处理得上清液B；
3）取上清液B浓缩至含水量为67%，后加入2.6~4倍体积的浓度为93%食用乙醇，静置取沉淀，得红藻多糖粗料；
4）取红藻多糖粗料加水溶解，水浴下加入0.4mol/L NaCl溶液1.3份、0.6mol/L NaAc溶液1.8份、3.5mol/L乙酸1.3份，匀速滴加10.7%H2O2溶液1.8份，反应完成后，进行超滤处理，得纯红藻多糖，本制备方法条件要求低，操作简单，制备过程能耗低，原料的利用高。
本实施例中的常规技术为本领域技术人员所知晓的现有技术，在此不作详细叙述。
本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的或者超越所附权利要求书所定义的范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 磐安县派普特生物科技有限公司
<120> 一种红藻多糖的提取方法
<130> 1
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 36
<212> PRT
<213> 人工合成
<400> 1
His Ser His Ala Cys Ala Cys Ser Lys His Ser His Ala Gly Thr Ala
1 5 10 15
Ser Tyr Leu Ser Cys Leu Cys His Pro Gly Lys Leu Cys Ala Cys Val
20 25 30
Asn Cys Ser Arg
35
Claims (7)
1.一种红藻多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）取红藻原料洗净切段，加入0.3~0.4mol/L NaOH和活性多肽混合液，搅拌提取，得混合液A；
2）待混合液A冷却后，加入4.5~6.4mol/L的HCL溶液，离心处理得上清液B；
3）取上清液B浓缩，后加入2.6~4倍体积的食用乙醇，静置取沉淀，得红藻多糖粗料；
4）取红藻多糖粗料加水溶解，水浴下加入溶剂后，匀速滴加9~11%H2O2溶液，反应完成后，进行超滤处理，得纯红藻多糖。
2.根据权利要求1所述的一种红藻多糖的提取方法，其特征在于，所述的制备步骤1中NaOH溶液和活性多肽混合液的加入量为红藻原料的12~24倍重量体积比，其中NaOH溶液和活性多肽的重量比为1:0.02~0.04，活性多肽的氨基酸序列为：HSHACACSKHSHAGTASYLSCLCHPGKLCACVNCSR，搅拌提取的温度为55℃~63℃，提取时间为1.8~2.3h。
3.根据权利要求1所述的一种红藻多糖的提取方法，其特征在于，所述的制备步骤2中制得上清液B的pH值为2.4~2.8。
4.根据权利要求1所述的一种红藻多糖的提取方法，其特征在于，所述的制备步骤3中浓缩至上清液B含水量为60~80%，食用乙醇的浓度为92~96%。
5. 根据权利要求1所述的一种红藻多糖的提取方法，其特征在于，所述的制备步骤4中溶剂的成分及其重量份为：0.4mol/L NaCl溶液1~3份、0.6mol/L NaAc溶液1.6~2.3份、3.5mol/L乙酸0.8~1.5份，H2O2溶液加入量为1.2~2.4份。
6.根据权利要求1所述的一种红藻多糖的提取方法，其特征在于，所述的红藻原料为紫菜、石花菜、海人草、串珠藻、珊瑚藻中的一种或多种。
7.根据权利要求1所述的一种红藻多糖的提取方法，其特征在于，所述的纯红藻多糖中的单糖组成为半乳糖和3,6-内醚半乳糖，硫酸基含量为15~18%。
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