CN107484814A - 复合成膜保鲜剂 - Google Patents

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CN107484814A CN201710544877.0A CN201710544877A CN107484814A CN 107484814 A CN107484814 A CN 107484814A CN 201710544877 A CN201710544877 A CN 201710544877A CN 107484814 A CN107484814 A CN 107484814A
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Abstract

本发明公开了复合成膜保鲜剂，其组成及其重量份为：羧甲基壳聚糖1.5‑2份、海藻酸钠1.5‑2份、茶多酚2‑3份、ε‑聚赖氨酸0.5‑0.6份、VC0.2‑0.3份、纳米TiO20.05‑0.06份、骨多肽2‑2.6份、乳酸链球菌素0.15‑0.2份、植酸钠0.3‑0.5份、山梨酸钠0.3‑0.5份、去腥剂0.5‑0.8份、植物提取物0.3‑0.6份、成膜剂1.2‑1.5份、乳化剂0.5‑0.6份、蒸馏水90‑100份。有益效果为：制作简单，成膜效果好、速度快，具有超强的去腥、抑菌、抗氧化性、抑制酶活性、延缓鱼肉到达极限pH等功效，是一种可去腥、效率高、安全、无毒副残留的复合成膜保鲜剂。

Description

复合成膜保鲜剂
技术领域
本发明涉及保鲜剂领域，尤其是涉及一种复合成膜保鲜剂。
技术背景
鱼类富含蛋白质、脂肪、维生素和矿物质等，能够为人体提供多种氨基酸、多种维生素和多种不饱和脂肪酸，有很好的保健作用。鱼类含有相当丰富的矿物质，每100克海鱼含磷310毫克，含钙35毫克，含钾300毫克，含钠90毫克，含硫200毫克，含氯120毫克。鱼类等水产品肉质鲜美营养丰富，已经成为人类饮食的重要组成部分。与陆地的畜、禽相比，鱼类因其栖息环境、渔获方式以及自身特点等更易腐败变质，首先，鱼类生活的环境(海洋、江河湖泊、池塘等)容易受到污染使其污染微生物；其次，捕获时容易造成鱼类死伤，致使微生物有更多的机会侵入，且渔获后一般不立即清洗，多数情况下带着容易腐败的内脏和鳃运输；另外，鱼类的肌肉组织较松软、水分含量高、组织蛋白酶的活性强，死后僵硬期短，自溶作用迅速发生，很容易造成腐败变质；另外，鱼类存在严重的鱼腥味，而鱼类轻微腐败就可以产生大量的氨、三甲胺、甲硫醇和硫化氢等腐臭气味的气体，更重要的是，鱼类的腐败也会造成极大的资源浪费及巨大的经济损失。因此，对渔获后的鱼类应当及时采取相应的保鲜措施，并根据鱼的种类采取不同的贮藏保鲜方法，以满足鱼类加工企业和消费者的需要。目前常用的保险方法如冷冻、化学保鲜剂、惰性气体保鲜等有诸多成本、工序、保鲜效果等方面的不足，因此发展鱼类的复合保鲜技术就显得尤为重要。
目前，关于复合成膜保鲜技术有很多方法，现有技术如授权公众号为CN102259965 B的中国发明专利，公开了一种大黄鱼复合成膜保鲜剂及其制备方法，该方法具有取材天然、制备简易的优点，但是它不具有去腥效果，并且仅仅是数种保鲜物质的简单组合，保鲜效果不强，因为是大黄鱼专用的保鲜剂，不适用于别的水产品，因此不具有很高的经济前景。
发明内容
本发明的目的在于提供一种保鲜效果好、可去除腥味的复合成膜保鲜剂。
本发明针对背景技术中提到的问题，采取的技术方案为：复合成膜保鲜剂，其组成及其重量份为：羧甲基壳聚糖1.5-2份、海藻酸钠1.5-2份、茶多酚2-3份、ε-聚赖氨酸0.5-0.6份、VC 0.2-0.3份、纳米TiO2 0.05-0.06份、骨多肽2-2.6份、乳酸链球菌素0.15-0.2份、植酸钠0.3-0.5份、山梨酸钠0.3-0.5份、去腥剂0.5-0.8份、植物提取物0.3-0.6份、成膜剂1.2-1.5份、乳化剂0.5-0.6份、蒸馏水90-100份，本保鲜剂具有去除水产品腥味的功能，并且具有超强的抑菌性、抗氧化性、抑制酶活性等优点，还能够延长鱼肉到达极限pH值的时间，因此是一种可去腥、效率高、无毒副残留的复合成膜保鲜剂。
作为优选，复合成膜保鲜剂，其制备方法包括：
胰凝乳蛋白酶酶解：称取新鲜的鲫鱼骨与等量的蒸馏水经粉碎匀浆，加入鲫鱼骨重量0.1-0.3%的胰凝乳蛋白酶，调整pH为7.5-8.5，在微波功率为100-120W、频率为20-30kHZ的条件下，置于45-55℃温度下酶解15-25分钟，酶解结束后沸水浴10-15分钟灭酶；微波辅助酶解能大幅缩短蛋白酶酶解时间，减少时间成本和人工成本，降低生产成本，胰凝乳蛋白酶将粘稠的鲫鱼骨匀浆酶解成粘度和分子量较小的固液混合物，将更多的酶切位点暴露出来，为下一步酶解作准备；
木瓜蛋白酶酶解：在酶解液中加入0.2-0.5%的木瓜蛋白酶，调整pH为5.0-6.5，在微波功率为150-180W、频率为30-35kHZ的条件下，置于50-60℃温度下酶解时间15-25分钟，酶解结束后沸水浴10-15分钟灭酶；采用分步酶解方式对鲫鱼骨进行酶解，酶解效率高，降低成本，木瓜蛋白酶对胰凝乳蛋白酶酶解得到的固液混合物进行进一步酶解，鲫鱼鱼肉蛋白分子量进一步减小，得到大量小分子蛋白质和多肽；
等电点沉淀：取酶解液以氢氧化钠溶液调节pH为7.5-8.0，经3000-3500r/min离心10-15分钟取清液；以盐酸调节pH为3.2-3.5，经3500-4000r/min离心10-15分钟取沉淀，经冷冻干燥得固体骨多肽，将其溶解于2-3倍量的蒸馏水中混合均匀待用；调节酶解液为碱性时让碱性蛋白肽沉淀析出除去，当调节酶解液pH值为3.2-3.5时，在不破坏其活性的同时沉淀析出目标骨多肽，该骨多肽不仅对鱼类滋生的腐败菌有抑制杀灭作用，还能够延长鱼肉到达极限pH值的时间，从而具有保鲜的功效，该骨多肽的氨基酸序列为：SCASRCKSRCRARRCGYYVSVRCFYRGRCYCRCLRC；
凝胶层析：选用葡萄糖凝胶对粗提液进行凝胶层析，先将葡萄糖凝胶用蒸馏水浸泡45-48小时使其充分溶胀并除去漂浮凝胶颗粒，应用已知分子量的标准品乳酸菌肽（3.354kDa）和胰岛素（5.778kDa）的混合物来获取洗脱时间与分子量的关系，将预处理后的粗提液上柱，收集分子量为3-5kDa的组分，在真空度为0.1-0.2kPa，温度为65-70℃条件下进行真空浓缩干燥，即得骨多肽固体，通过纯化，骨多肽的含量大大提高，不仅增强了终产物保鲜剂的保鲜效果，还能节约成本与工效；
复配：称取羧甲基壳聚糖1.5-2份、海藻酸钠1.5-2份、茶多酚2-3份、ε-聚赖氨酸0.5-0.6份、VC0.2-0.3份、纳米TiO20.05-0.06份、骨多肽2-2.6份、乳酸链球菌素0.15-0.2份、植酸钠0.3-0.5份、山梨酸钠0.3-0.5份、去腥剂0.5-0.8份、植物提取物0.3-0.6份、成膜剂1.2-1.5份、乳化剂0.5-0.6份、蒸馏水90-100份，调整pH至6.5-7，在30-35℃温度下均匀搅拌混合10-15分钟即得复合成膜保鲜剂；本复合成膜保鲜剂取材天然环保，制作过程简单易行，不仅成膜效果好、速度快，还具有去除水产品腥味的功能，具有超强的抑菌性、抗氧化性、抑制酶活性等优点，鱼骨肽不仅具有抑菌效果，还能够延长鱼肉到达极限pH值的时间，因此是一种可去腥、效率高、无毒副残留的复合成膜保鲜剂。
作为优选，所用的去腥剂为红茶或β环糊精或碳酸氢钠氯化钙。
作为优选，所用的植物提取物为山楂黄酮或凌枣黄酮或迷迭香提取物或魔芋粉或葡萄籽提取物。
作为优选，所用的成膜剂为质量比为2-3:1的海藻酸钠与葡甘聚糖。
作为优选，所用的乳化剂为质量比为1-1.5:1的单甘脂与蔗糖酯。
与现有技术相比，本发明的优点在于：1）取材天然环保，制作过程简单易行，成膜效果好、速度快；2）不仅具有去除水产品腥味的功能，还具有超强的抑菌性、抗氧化性、抑制酶活性等；3）鱼骨肽不仅具有抑菌效果，还能够延长鱼肉到达极限pH值的时间，因此是一种可去腥、效率高、安全、无毒副残留的复合成膜保鲜剂。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：
实施例1：
复合成膜保鲜剂，其组成及其重量份为：羧甲基壳聚糖1.5份、海藻酸钠1.5份、茶多酚2份、ε-聚赖氨酸0.5份、VC 0.2份、纳米TiO2 0.05份、骨多肽2份、乳酸链球菌素0.15份、植酸钠0.3份、山梨酸钠0.3份、β环糊精0.2份、氯化钙0.3份、迷迭香提取物0.2份、葡萄籽提取物0.1份、海藻酸钠0.8份、葡甘聚糖0.4份、单甘脂0.25份、蔗糖酯0.25份、蒸馏水90份，它的制备包括以下步骤：
1）称取新鲜的鲫鱼骨100g与100g蒸馏水经粉碎匀浆，加入0.1g胰凝乳蛋白酶，调整pH为7.5，在微波功率为100W、频率为20kHZ、45℃条件下酶解15分钟后沸水浴10分钟灭酶得酶解液；2）在酶解液中加入0.2g木瓜蛋白酶，调整pH为5.0，在微波功率为150W、频率为30kHZ、50℃条件下酶解15分钟后沸水浴10分钟灭酶； 3）取酶解液调节pH为7.5，经3000r/min离心10分钟取清液；调节pH为3.2，经3500r/min离心10分钟取沉淀，经冷冻干燥得固体骨多肽，将其溶解于2倍量的蒸馏水中混合均匀待用；4）选用葡萄糖凝胶对粗提液进行凝胶层析，先将葡萄糖凝胶用蒸馏水浸泡45小时使其充分溶胀并除去漂浮凝胶颗粒，应用标准品乳酸菌肽和胰岛素的混合物来获取洗脱时间与分子量的关系，将预处理后的粗提液上柱，收集分子量为3-5kDa的组分，在真空度为0.1kPa，温度为65℃条件下进行真空浓缩干燥，即得骨多肽固体；5）复配：称取羧甲基壳聚糖1.5份、海藻酸钠1.5份、茶多酚2份、ε-聚赖氨酸0.5份、VC 0.2份、纳米TiO2 0.05份、骨多肽2份、乳酸链球菌素0.15份、植酸钠0.3份、山梨酸钠0.3份、β环糊精0.2份、氯化钙0.3份、迷迭香提取物0.2份、葡萄籽提取物0.1份、海藻酸钠0.8份、葡甘聚糖0.4份、单甘脂0.25份、蔗糖酯0.25份、蒸馏水90份，调整pH至6.5，在30℃温度下均匀搅拌混合10分钟即得复合成膜保鲜剂。
实施例2：
复合成膜保鲜剂，其组成及其重量份为：羧甲基壳聚糖2份、海藻酸钠2份、茶多酚3份、ε-聚赖氨酸0.6份、VC0.3份、纳米TiO2 0.06份、骨多肽2.6份、乳酸链球菌素0.2份、植酸钠0.5份、山梨酸钠0.5份、红茶0.3份、碳酸氢钠0.5份、山楂黄酮0.2份、魔芋粉0.4份、海藻酸钠1.125份、葡甘聚糖0.375份、单甘脂0.36份、葡甘聚糖0.24份、蒸馏水100份，它的制备包括以下步骤：
1）胰凝乳蛋白酶酶解：称取新鲜的鲫鱼骨120g与蒸馏水120g经粉碎匀浆，加入0.36g胰凝乳蛋白酶，调整pH为8.5，在微波功率为120W、频率为30kHZ的条件下，置于55℃温度下酶解25分钟，酶解结束后沸水浴15分钟灭酶；微波辅助酶解能大幅缩短蛋白酶酶解时间，胰凝乳蛋白酶将粘稠的鲫鱼骨匀浆酶解成粘度和分子量较小的固液混合物，为下一步酶解作准备；
2）木瓜蛋白酶酶解：在酶解液中加入0.6g木瓜蛋白酶，调整pH为6.5，在微波功率为180W、频率为35kHZ的条件下，置于60℃温度下酶解时间25分钟，酶解结束后沸水浴15分钟灭酶；采用分步酶解方式对鲫鱼骨进行酶解，酶解效率高，木瓜蛋白酶对胰凝乳蛋白酶酶解得到的固液混合物进行进一步酶解，得到大量小分子蛋白质和多肽；
3）等电点沉淀：取酶解液调节pH为8.0，经3500r/min离心15分钟取清液；以盐酸调节pH为3.5，经4000r/min离心15分钟取沉淀，经冷冻干燥得固体骨多肽，将其溶解于3倍量的蒸馏水中混合均匀待用；调节酶解液为碱性时让碱性蛋白肽沉淀析出除去，当调节酶解液pH值为3.5时，在不破坏其活性的同时沉淀析出目标骨多肽，该骨多肽不仅对鱼类滋生的腐败菌有抑制杀灭作用，还能够延长鱼肉到达极限pH值的时间，从而具有保鲜的功效；
4）凝胶层析：将葡萄糖凝胶用蒸馏水浸泡48小时使其充分溶胀并除去漂浮凝胶颗粒，应用标准品乳酸菌肽和胰岛素的混合物来获取洗脱时间与分子量的关系，将预处理后的粗提液上柱，收集分子量为3-5kDa的组分，在真空度为0.2kPa，温度为70℃条件下进行真空浓缩干燥，即得骨多肽固体，通过纯化，骨多肽的含量大大提高，不仅增强了终产物保鲜剂的保鲜效果，还能节约成本与工效；
5）复配：称取羧甲基壳聚糖2份、海藻酸钠2份、茶多酚3份、ε-聚赖氨酸0.6份、VC0.3份、纳米TiO2 0.06份、骨多肽2.6份、乳酸链球菌素0.2份、植酸钠0.5份、山梨酸钠0.5份、红茶0.3份、碳酸氢钠0.5份、山楂黄酮0.2份、魔芋粉0.4份、海藻酸钠1.125份、葡甘聚糖0.375份、单甘脂0.36份、葡甘聚糖0.24份、蒸馏水100份，调整pH至7，在35℃温度下均匀搅拌混合15分钟即得复合成膜保鲜剂；本复合成膜保鲜剂具有超强的抑菌性、抗氧化性、抑制酶活性等优点，还能够延长鱼肉到达极限pH值的时间，因此是一种可去腥、效率高、无毒副残留的复合成膜保鲜剂。
实施例3：
复合成膜保鲜剂，其组成及其重量份为：羧甲基壳聚糖1.5份、海藻酸钠1.5份、茶多酚3份、ε-聚赖氨酸0.6份、VC 0.3份、纳米TiO2 0.05份、骨多肽2份、乳酸链球菌素0.2份、植酸钠0.5份、山梨酸钠0.5份、β环糊精0.3份、氯化钙0.3份、魔芋粉0.3份、海藻酸钠0.9份、葡甘聚糖0.3份、单甘脂0.3份、蔗糖酯0.3份、蒸馏水100份，它的制备包括以下步骤：
胰凝乳蛋白酶酶解：称取新鲜的100g鲫鱼骨与100g蒸馏水经粉碎匀浆，加入0.2g胰凝乳蛋白酶，调整pH为8.0，在微波功率为100W、频率为25kHZ的条件下，置于50℃温度下酶解20分钟，酶解结束后沸水浴10分钟灭酶；微波辅助酶解能大幅缩短蛋白酶酶解时间，减少时间成本和人工成本，降低生产成本，胰凝乳蛋白酶将粘稠的鲫鱼骨匀浆酶解成粘度和分子量较小的固液混合物，将更多的酶切位点暴露出来，为下一步酶解作准备；
木瓜蛋白酶酶解：在酶解液中加入0.4g的木瓜蛋白酶，调整pH为6.0，在微波功率为180W、频率为32kHZ的条件下，置于55℃温度下酶解时间20分钟，酶解结束后沸水浴10分钟灭酶；采用分步酶解方式对鲫鱼骨进行酶解，酶解效率高，降低成本，木瓜蛋白酶对胰凝乳蛋白酶酶解得到的固液混合物进行进一步酶解，鲫鱼鱼肉蛋白分子量进一步减小，得到大量小分子蛋白质和多肽；
等电点沉淀：取酶解液以氢氧化钠溶液调节pH为7.5，经3200r/min离心12分钟取清液；以盐酸调节pH为3.3，经3800r/min离心12分钟取沉淀，经冷冻干燥得固体骨多肽，将其溶解于3倍量的蒸馏水中混合均匀待用；调节酶解液为碱性时让碱性蛋白肽沉淀析出除去，当调节酶解液pH值为3.3时，在不破坏其活性的同时沉淀析出目标骨多肽，该骨多肽不仅对鱼类滋生的腐败菌有抑制杀灭作用，还能够延长鱼肉到达极限pH值的时间，从而具有保鲜的功效；
凝胶层析：选用葡萄糖凝胶对粗提液进行凝胶层析，先将葡萄糖凝胶用蒸馏水浸泡48小时使其充分溶胀并除去漂浮凝胶颗粒，应用已知分子量为3.354kDa的标准品乳酸菌肽和分子量为5.778kDa的胰岛素来获取洗脱时间与分子量的关系，将预处理后的粗提液上柱，收集分子量为3-5kDa的组分，在真空度为0.1kPa，温度为65℃条件下进行真空浓缩干燥，即得骨多肽固体，通过纯化，骨多肽的含量大大提高，不仅增强了终产物保鲜剂的保鲜效果，还能节约成本与工效；
复配：称取羧甲基壳聚糖1.5份、海藻酸钠1.5份、茶多酚3份、ε-聚赖氨酸0.6份、VC 0.3份、纳米TiO2 0.05份、骨多肽2份、乳酸链球菌素0.2份、植酸钠0.5份、山梨酸钠0.5份、β环糊精0.3份、氯化钙0.3份、魔芋粉0.3份、海藻酸钠0.9份、葡甘聚糖0.3份、单甘脂0.3份、蔗糖酯0.3份、蒸馏水100份，调整pH至6.8，在30℃温度下均匀搅拌混合13分钟即得复合成膜保鲜剂；本复合成膜保鲜剂取材天然环保，制作过程简单易行，不仅成膜效果好、速度快，还具有去除水产品腥味的功能，具有超强的抑菌性、抗氧化性、抑制酶活性等优点，鱼骨肽不仅具有抑菌效果，还能够延长鱼肉到达极限pH值的时间，因此是一种可去腥、效率高、无毒副残留的复合成膜保鲜剂。
本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 浦江县欧立生物技术有限公司
<120> 复合成膜保鲜剂
<130> 2
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 36
<212> PRT
<213> 人工合成
<400> 1
Ser Cys Ala Ser Arg Cys Lys Ser Arg Cys Arg Ala Arg Arg Cys Gly
1 5 10 15
Tyr Tyr Val Ser Val Arg Cys Phe Tyr Arg Gly Arg Cys Tyr Cys Arg
20 25 30
Cys Leu Arg Cys
35

Claims (9)

1.复合成膜保鲜剂，其组成及其重量份为：羧甲基壳聚糖1.5-2份、海藻酸钠1.5-2份、茶多酚2-3份、ε-聚赖氨酸0.5-0.6份、VC0.2-0.3份、纳米TiO20.05-0.06份、骨多肽2-2.6份、乳酸链球菌素0.15-0.2份、植酸钠0.3-0.5份、山梨酸钠0.3-0.5份、去腥剂0.5-0.8份、植物提取物0.3-0.6份、成膜剂1.2-1.5份、乳化剂0.5-0.6份、蒸馏水90-100份。
2.根据权利要求1所述的复合成膜保鲜剂，其特征在于：所述的去腥剂为红茶或β环糊精或碳酸氢钠氯化钙；植物提取物为山楂黄酮或凌枣黄酮或迷迭香提取物或魔芋粉或葡萄籽提取物；成膜剂为质量比为2-3:1的海藻酸钠与葡甘聚糖；乳化剂为质量比为1-1.5:1的单甘脂与蔗糖酯。
3.根据权利要求1所述的复合成膜保鲜剂，其特征在于：所述的保鲜剂的制备方法包括以下步骤：
1）胰凝乳蛋白酶酶解：微波条件下酶解鲫鱼骨；
2）木瓜蛋白酶酶解：在微波条件下进一步酶解；
3）等电点沉淀：等电点沉淀法提纯骨多肽；
4）凝胶层析：葡萄糖凝胶层析法提纯骨多肽；
5）复配：复配保鲜剂。
4.根据权利要求3所述的复合成膜保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述的等电点沉淀步骤中得到的骨多肽的氨基酸序列为：SCASRCKSRCRARRCGYYVSVRCFYRGRCYCRCLRC。
5.根据权利要求3所述的复合成膜保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述的胰凝乳蛋白酶酶解步骤为：称取新鲜的鲫鱼骨与等量的蒸馏水经粉碎匀浆，加入鲫鱼骨重量0.1-0.3%的胰凝乳蛋白酶，调整pH为7.5-8.5，在微波功率为100-120W、频率为20-30kHZ的条件下，置于45-55℃温度下酶解15-25分钟，酶解结束后沸水浴10-15分钟灭酶。
6.根据权利要求3所述的复合成膜保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述的木瓜蛋白酶酶解步骤为：在酶解液中加入0.2-0.5%的木瓜蛋白酶，调整pH为5.0-6.5，在微波功率为150-180W、频率为30-35kHZ的条件下，置于50-60℃温度下酶解时间15-25分钟，酶解结束后沸水浴10-15分钟灭酶。
7.根据权利要求3所述的复合成膜保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述的等电点沉淀步骤为：取酶解液以氢氧化钠溶液调节pH为7.5-8.0，经3000-3500r/min离心10-15分钟取清液；以盐酸调节pH为3.2-3.5，经3500-4000r/min离心10-15分钟取沉淀，经冷冻干燥得固体骨多肽，将其溶解于2-3倍量的蒸馏水中混合均匀待用。
8.根据权利要求3所述的复合成膜保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述的凝胶层析步骤中为用蒸馏水浸泡葡萄糖凝胶的时间为45-48小时，层析所用标准品为乳酸菌肽和胰岛素，真空浓缩干燥的真空度为0.1-0.2kPa，温度为65-70℃。
9.根据权利要求3所述的复合成膜保鲜剂的制备方法，其特征在于：所述的复配步骤为：称取羧甲基壳聚糖1.5-2份、海藻酸钠1.5-2份、茶多酚2-3份、ε-聚赖氨酸0.5-0.6份、VC0.2-0.3份、纳米TiO20.05-0.06份、骨多肽2-2.6份、乳酸链球菌素0.15-0.2份、植酸钠0.3-0.5份、山梨酸钠0.3-0.5份、去腥剂0.5-0.8份、植物提取物0.3-0.6份、成膜剂1.2-1.5份、乳化剂0.5-0.6份、蒸馏水90-100份，调整pH至6.5-7，在30-35℃温度下均匀搅拌混合10-15分钟即得复合成膜保鲜剂。
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