CN107475335A - 一种以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，涉及胶原蛋白提取技术领域，包括以下步骤：将鱼鳞清洗干净，晾干，粉碎，过筛；将鱼鳞加入到碳酸钠溶液中，搅拌，超声，再浸泡；将鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到2％的柠檬酸溶液中处理；将鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到5％的EDTA溶液中处理；将鱼鳞进行搅拌清洗，加入到水中，然后再加入蛋白酶进行酶解，升温灭活，冷却，离心，取上清液；将上清液用超滤膜进行脱盐浓缩至，闪蒸，冷冻干燥，即得。本发明制得的胶原蛋白质量好，纯度高，可广泛应用于食品、化妆品、生物医学等领域。
Description
技术领域
本发明涉及胶原蛋白提取技术领域，具体涉及一种以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法。
背景技术
近年来，随着我国水产品产量的大幅度提高，水产品消费快速增长，在鱼类加工过程中产生了大量的废料，其数量约占原料鱼的40-55％，主要包括鱼鳞、鱼骨、鱼头等。由于产业链的不完善，这些废料通常直接被丢弃，或者经过粗加工用于饲料行业，造成环境污染和资源浪费。
淡水鱼鱼鳞约占鱼体重的1.5-2％。鱼鳞的组成成分中有机物约占60％，无机物占40％。有机物中胶原约占75％，另外25％左右是鱼鳞硬朊蛋白、粘液质、色素、光鳞、脂肪等；而无机物中绝大部分为磷酸钙，还有极少量的碳酸钙、碳酸镁、碳酸钠等。因此，以鱼鳞为原料提取胶原蛋白，充分利用鱼类加工中的废弃物具有重大的意义。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供了一种以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，制得的胶原蛋白质量好，纯度高。
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：
一种以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，包括以下步骤：
S1、将鱼鳞清洗干净，去除泥沙和漂浮物，晾干，粉碎，过筛；
S2、将鱼鳞加入到3％碳酸钠溶液中，搅拌10-30min，超声3-10min，再浸泡2-4h；
S3、将经过步骤S2处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到2％的柠檬酸溶液中处理2-4h；
S4、将经过步骤S3处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到5％的EDTA溶液中处理2-4h；
S5、将经过步骤S4处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，加入到水中，然后再加入蛋白酶，在40-50℃、pH为6-8下酶解3-6h，升温至121℃灭活10min，冷却，离心，取上清液；
S6、将上清液用超滤膜进行脱盐浓缩至20％-25％，闪蒸，冷冻干燥，即得。
优选地，所述步骤S1中过100-200目筛。
优选地，所述步骤S2中料液比为1:10-20，所述碳酸钠溶液中还含有3％的氯化钠。
优选地，所述步骤S3中料液比为1:10-20。
优选地，所述步骤S4中料液比为1:10-20。
优选地，所述步骤S5中料液比为1:6-10，所述蛋白酶添加量为鱼鳞粉质量的1％-5％。
优选地，所述蛋白酶为中性蛋白酶和碱性蛋白酶按照1：1-3质量比混合而成的。
有益效果：本发明先用碳酸钠和氯化钠溶液处理鱼鳞，能够去除盐溶性和水溶性杂蛋白，以及粘液，此外，在碱性条件下，超声能够帮助鱼鳞中钙离子的迁出，便于后续柠檬酸脱钙；采用EDTA进一步处理，消除微量重金属离子对后续酶催化反应的抑制，有利于后续工艺中有效成分的提取，缩短后续酶解提取胶原蛋白的时间，制得的胶原蛋白质量好，纯度高，可广泛应用于食品、化妆品、生物医学等领域。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
一种以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，包括以下步骤：
S1、将鱼鳞清洗干净，去除泥沙和漂浮物，晾干，粉碎，过150目筛；
S2、将鱼鳞加入到含有3％碳酸钠和3％氯化钠的水中，料液比为1:15，搅拌20min，超声5min，再浸泡3h；
S3、将经过步骤S2处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到2％的柠檬酸溶液中，料液比为1:15，处理3h；
S4、将经过步骤S3处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到5％的EDTA溶液中，料液比为1:15，处理4h；
S5、将经过步骤S4处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，加入到水中，料液比为1:9，然后再加入由中性蛋白酶和碱性蛋白酶按照1：1质量比混合而成的蛋白酶，蛋白酶添加量为鱼鳞粉质量的3％，在40℃、pH为7下酶解3h，升温至121℃灭活10min，冷却，离心，取上清液；
S6、将上清液用超滤膜进行脱盐浓缩至22％，闪蒸，冷冻干燥，即得。
实施例2：
一种以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，包括以下步骤：
S1、将鱼鳞清洗干净，去除泥沙和漂浮物，晾干，粉碎，过180目筛；
S2、将鱼鳞加入到含有3％碳酸钠和3％氯化钠的水中，料液比为1:10，搅拌10min，超声7min，再浸泡2.5h；
S3、将经过步骤S2处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到2％的柠檬酸溶液中，料液比为1:10，处理2h；
S4、将经过步骤S3处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到5％的EDTA溶液中，料液比为1:10，处理4h；
S5、将经过步骤S4处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，加入到水中，料液比为1:6，然后再加入由中性蛋白酶和碱性蛋白酶按照1：2质量比混合而成的蛋白酶，蛋白酶添加量为鱼鳞粉质量的2％，在45℃、pH为6.5下酶解5h，升温至121℃灭活10min，冷却，离心，取上清液；
S6、将上清液用超滤膜进行脱盐浓缩至25％，闪蒸，冷冻干燥，即得。
实施例3：
一种以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，包括以下步骤：
S1、将鱼鳞清洗干净，去除泥沙和漂浮物，晾干，粉碎，过120目筛；
S2、将鱼鳞加入到含有3％碳酸钠和3％氯化钠的水中，料液比为1:12，搅拌15min，超声10min，再浸泡2h；
S3、将经过步骤S2处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到2％的柠檬酸溶液中，料液比为1:12，处理3h；
S4、将经过步骤S3处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到5％的EDTA溶液中，料液比为1:12，处理3.5h；
S5、将经过步骤S4处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，加入到水中，料液比为1:6，然后再加入由中性蛋白酶和碱性蛋白酶按照1：2质量比混合而成的蛋白酶，蛋白酶添加量为鱼鳞粉质量的4％，在44℃、pH为7.5下酶解4h，升温至121℃灭活10min，冷却，离心，取上清液；
S6、将上清液用超滤膜进行脱盐浓缩至24％，闪蒸，冷冻干燥，即得。
实施例4：
一种以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，包括以下步骤：
S1、将鱼鳞清洗干净，去除泥沙和漂浮物，晾干，粉碎，过150目筛；
S2、将鱼鳞加入到含有3％碳酸钠和3％氯化钠的水中，料液比为1:15，搅拌25min，超声3min，再浸泡3h；
S3、将经过步骤S2处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到2％的柠檬酸溶液中，料液比为1:14，处理3h；
S4、将经过步骤S3处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到5％的EDTA溶液中，料液比为1:14，处理4h；
S5、将经过步骤S4处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，加入到水中，料液比为1:8，然后再加入由中性蛋白酶和碱性蛋白酶按照1：3质量比混合而成的蛋白酶，蛋白酶添加量为鱼鳞粉质量的5％，在44℃、pH为7.5下酶解5h，升温至121℃灭活10min，冷却，离心，取上清液；
S6、将上清液用超滤膜进行脱盐浓缩至20％，闪蒸，冷冻干燥，即得。
实施例5：
一种以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，包括以下步骤：
S1、将鱼鳞清洗干净，去除泥沙和漂浮物，晾干，粉碎，过100目筛；
S2、将鱼鳞加入到含有3％碳酸钠和3％氯化钠的水中，料液比为1:18，搅拌20min，超声5min，再浸泡3.5h；
S3、将经过步骤S2处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到2％的柠檬酸溶液中，料液比为1:15，处理4h；
S4、将经过步骤S3处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到5％的EDTA溶液中，料液比为1:20，处理3h；
S5、将经过步骤S4处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，加入到水中，料液比为1:8，然后再加入由中性蛋白酶和碱性蛋白酶按照1：2.5质量比混合而成的蛋白酶，蛋白酶添加量为鱼鳞粉质量的1％，在50℃、pH为8下酶解5h，升温至121℃灭活10min，冷却，离心，取上清液；
S6、将上清液用超滤膜进行脱盐浓缩至25％，闪蒸，冷冻干燥，即得。
实施例6：
一种以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，包括以下步骤：
S1、将鱼鳞清洗干净，去除泥沙和漂浮物，晾干，粉碎，过200目筛；
S2、将鱼鳞加入到含有3％碳酸钠和3％氯化钠的水中，料液比为1:20，搅拌30min，超声8min，再浸泡4h；
S3、将经过步骤S2处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到2％的柠檬酸溶液中，料液比为1:20，处理3.5h；
S4、将经过步骤S3处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到5％的EDTA溶液中，料液比为1:15，处理2h；
S5、将经过步骤S4处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，加入到水中，料液比为1:10，然后再加入由中性蛋白酶和碱性蛋白酶按照1：1.5质量比混合而成的蛋白酶，蛋白酶添加量为鱼鳞粉质量的2.5％，在50℃、pH为8下酶解6h，升温至121℃灭活10min，冷却，离心，取上清液；
S6、将上清液用超滤膜进行脱盐浓缩至22％，闪蒸，冷冻干燥，即得。
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。
Claims (7)
1.一种以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将鱼鳞清洗干净，去除泥沙和漂浮物，晾干，粉碎，过筛；
S2、将鱼鳞加入到3％碳酸钠溶液中，搅拌10-30min，超声3-10min，再浸泡2-4h；
S3、将经过步骤S2处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到2％的柠檬酸溶液中处理2-4h；
S4、将经过步骤S3处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，然后加入到5％的EDTA溶液中处理2-4h；
S5、将经过步骤S4处理后的鱼鳞进行搅拌清洗，加入到水中，然后再加入蛋白酶，在40-50℃、pH为6-8下酶解3-6h，升温至121℃灭活10min，冷却，离心，取上清液；
S6、将上清液用超滤膜进行脱盐浓缩至20％-25％，闪蒸，冷冻干燥，即得。
2.如权利要求1所述的以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，其特征在于，所述步骤S1中过100-200目筛。
3.如权利要求1所述的以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，其特征在于，所述步骤S2中料液比为1:10-20，所述碳酸钠溶液中还含有3％的氯化钠。
4.如权利要求1所述的以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，其特征在于，所述步骤S3中料液比为1:10-20。
5.如权利要求1所述的以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，其特征在于，所述步骤S4中料液比为1:10-20。
6.如权利要求1所述的以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，其特征在于，所述步骤S5中料液比为1:6-10，所述蛋白酶添加量为鱼鳞粉质量的1％-5％。
7.如权利要求1所述的以鱼鳞为原料制备胶原蛋白的方法，其特征在于，所述蛋白酶为中性蛋白酶和碱性蛋白酶按照1：1-3质量比混合而成的。
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2017
- 2017-08-04 CN CN201710659382.2A patent/CN107475335A/zh active Pending
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