CN107475158B - 一种乳酸菌培养基的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种乳酸菌培养基的制备方法，属于食品制备技术领域。本发明的乳酸菌培养基的碳源主要来源于马铃薯发酵液，生成多种有机酸、维生素、生物酶、未知生长因子，提高乳酸菌的营养成分含量，玉米浆中含有丰富的可溶性蛋白，对乳酸菌是易吸收的氮源，玉米浆中一些木质纤维也被分解为乳酸菌可吸收的碳源，浓度得以快速提升；本发明的乳酸菌培养基添加的番茄柠檬汁中含有大量的乳酸菌所需的多种培养因子，另外番茄柠檬中所含的有机弱酸与添加的无水磷酸氢二钾所组成的pH缓冲物在溶液中的缓冲效果比乳酸与其他弱碱所起的缓冲效果更稳定，乳酸菌在培养后期浓度增加到较高状态，有效解决了目前乳酸菌培养基在培养后期乳酸菌浓度不高的问题。

Description

一种乳酸菌培养基的制备方法
技术领域
本发明公开了一种乳酸菌培养基的制备方法，属于食品制备技术领域。
背景技术
菌类生长需要从土壤或培养基中吸收碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等来生存。培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）以及维生素和水等。不同培养基可根据实际需要，添加一些自身无法合成的化合物，即生长因子。有些微生物，如自养型微生物，不需要碳源，所以上述物质只具有一般性。
培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类，培养基按微生物的种类可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基和霉菌培养基等四类，培养基按其特殊用途可分为加富培养基、选择性培养基和鉴别培养基。
培养基由于配制的原料不同，使用要求不同，而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基（如组织培养基），较长时间的贮存，必须放在3～6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管，均改制成粉末。乳酸菌培养基由多种成分组成，适用于乳酸菌的生长，用来分离培养乳酸菌的一类培养基。
因此，发明一种高浓度乳酸菌培养基对食品制备技术领域具有积极意义。
发明内容
本发明主要解决的技术问题，针对目前乳酸菌培养基在培养后期乳酸菌浓度不高的缺陷，提供了一种乳酸菌培养基的制备方法。
为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：
一种乳酸菌培养基的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：
（1）称取300～500g鲜嫩玉米粒用水冲洗后，放入400～500mL亚硫酸溶液中，浸泡得到浸泡后的玉米，将浸泡后的玉米放在榨汁机中鲜榨后过滤，去除滤渣得到玉米汁
（2）将玉米汁倒入烧杯中，加热升温，保温，再冷却至室温，搅拌后得到玉米浆，称取200～300g番茄、100～200g柠檬，放入榨汁机鲜榨，过滤去除滤饼得到番茄柠檬汁；
（3）向发酵罐中加入200～300g切碎的马铃薯块，5～10g酵母膏，密封静置，发酵后，过滤去除发酵滤渣得到马铃薯发酵液；
（4）按重量份数计，向高速分散机中加入30～40份玉米浆、20～25份番茄柠檬汁、40～45份马铃薯发酵液，搅拌，得到分散营养液；
（5）按重量份数计，向培养皿中加入60～70份分散营养液、3～5份无水磷酸氢二钾、20～30份蛋白胨、5～10份硫酸铵，搅拌混合后，将培养皿放入高压蒸汽中灭菌，得到乳酸菌培养基。
步骤（1）所述的洗涤次数为3～5次，亚硫酸溶液质量分数为20%，浸泡玉米的时间为4～5h，鲜榨时间为15～20min。
步骤（2）所述的加热升温后的温度为90～100℃，保温时间为5～10min，搅拌时间为1～2min，鲜榨时间为10～15min。
步骤（3）所述的马铃薯块粒径为1～2cm，密封静置的温度为50～60℃，发酵时间为5～10天。
步骤（4）所述的搅拌转速为1000～1500r/min，搅拌时间为30～45min。
步骤（5）所述的搅拌混合时间为5～10min，高压蒸汽温度为120～125℃、压强为0.104～0.106MPa，杀菌时间为15～30min。
本发明的有益效果：
（1）本发明的乳酸菌培养基的碳源主要来源于马铃薯发酵液，酵母菌群能摧毁植物细胞壁，将纤维素、果胶质降解为单糖和寡糖，并生成多种有机酸、维生素、生物酶、未知生长因子，这大大提高乳酸菌的营养成分含量，玉米浆中含有丰富的可溶性蛋白，对乳酸菌是易吸收的氮源，随着乳酸菌繁殖浓度增加，乳酸含量增加，玉米浆中一些木质纤维也被分解为乳酸菌可吸收的碳源，因而培养基对乳酸菌繁殖有利，浓度得以快速提升；
（2）本发明的乳酸菌培养基添加的番茄柠檬汁中含有大量的乳酸菌所需的多种培养因子，另外番茄柠檬中所含的有机弱酸与添加的无水磷酸氢二钾所组成的pH缓冲物在溶液中的缓冲效果比乳酸与其他弱碱所起的缓冲效果更稳定，玉米浆中含有弱碱不断中和高浓度乳酸，从而减小乳酸菌繁殖受酸胁迫的影响，乳酸菌在培养后期浓度增加到较高状态，有效解决了目前乳酸菌培养基在培养后期乳酸菌浓度不高的问题。
具体实施方式
称取300～500g鲜嫩玉米粒用水冲洗3～5次后，放入400～500mL质量分数为20%的亚硫酸溶液中，浸泡4～5h得到浸泡后的玉米，将浸泡后的玉米放在榨汁机中鲜榨15～20min后过滤，去除滤渣得到玉米汁，将玉米汁倒入烧杯中，加热升温至90～100℃，保温5～10min，再冷却至室温，搅拌1～2min后得到玉米浆；称取200～300g番茄、100～200g柠檬，放入榨汁机鲜榨10～15min，过滤去除滤饼得到番茄柠檬汁；向发酵罐中加入200～300g切碎的粒径为1～2cm马铃薯块，5～10g酵母膏，在50～60℃条件下密封静置，发酵5～10天后，过滤去除发酵滤渣得到马铃薯发酵液；按重量份数计，向高速分散机中加入30～40份玉米浆、20～25份番茄柠檬汁、40～45份马铃薯发酵液，以1000～1500r/min转速搅拌30～45min，后得到分散营养液；按重量份数计，向培养皿中加入60～70份分散营养液、3～5份无水磷酸氢二钾、20～30份蛋白胨、5～10份硫酸铵，搅拌混合5～10min后，将培养皿放入120～125℃、0.104～0.106MPa的高压蒸汽中灭菌15～30min，得到乳酸菌培养基。
实例1
称取300g鲜嫩玉米粒用水冲洗3次后，放入400mL质量分数为20%的亚硫酸溶液中，浸泡4h得到浸泡后的玉米，将浸泡后的玉米放在榨汁机中鲜榨15min后过滤，去除滤渣得到玉米汁，将玉米汁倒入烧杯中，加热升温至90℃，保温5min，再冷却至室温，搅拌1min后得到玉米浆；称取200g番茄、100g柠檬，放入榨汁机鲜榨10min，过滤去除滤饼得到番茄柠檬汁；向发酵罐中加入200g切碎的粒径为1cm马铃薯块，5g酵母膏，在50℃条件下密封静置，发酵5天后，过滤去除发酵滤渣得到马铃薯发酵液；按重量份数计，向高速分散机中加入30份玉米浆、20份番茄柠檬汁、40份马铃薯发酵液，以1000r/min转速搅拌30min，后得到分散营养液；按重量份数计，向培养皿中加入60份分散营养液、3份无水磷酸氢二钾、20份蛋白胨、5份硫酸铵，搅拌混合5min后，将培养皿放入120℃、0.104MPa的高压蒸汽中灭菌15min，得到乳酸菌培养基。
实例2
称取400g鲜嫩玉米粒用水冲洗4次后，放入450mL质量分数为20%的亚硫酸溶液中，浸泡4.5h得到浸泡后的玉米，将浸泡后的玉米放在榨汁机中鲜榨17min后过滤，去除滤渣得到玉米汁，将玉米汁倒入烧杯中，加热升温至95℃，保温7min，再冷却至室温，搅拌1min后得到玉米浆；称取250g番茄、150g柠檬，放入榨汁机鲜榨12min，过滤去除滤饼得到番茄柠檬汁；向发酵罐中加入250g切碎的粒径为1cm马铃薯块，7g酵母膏，在55℃条件下密封静置，发酵7天后，过滤去除发酵滤渣得到马铃薯发酵液；按重量份数计，向高速分散机中加入35份玉米浆、22份番茄柠檬汁、42份马铃薯发酵液，以1200r/min转速搅拌40min，后得到分散营养液；按重量份数计，向培养皿中加入65份分散营养液、4份无水磷酸氢二钾、25份蛋白胨、7份硫酸铵，搅拌混合7min后，将培养皿放入122℃、0.105MPa的高压蒸汽中灭菌20min，得到乳酸菌培养基。
实例3
称取500g鲜嫩玉米粒用水冲洗5次后，放入500mL质量分数为20%的亚硫酸溶液中，浸泡5h得到浸泡后的玉米，将浸泡后的玉米放在榨汁机中鲜榨20min后过滤，去除滤渣得到玉米汁，将玉米汁倒入烧杯中，加热升温至100℃，保温10min，再冷却至室温，搅拌2min后得到玉米浆；称取300g番茄、200g柠檬，放入榨汁机鲜榨15min，过滤去除滤饼得到番茄柠檬汁；向发酵罐中加入300g切碎的粒径为2cm马铃薯块，10g酵母膏，在60℃条件下密封静置，发酵10天后，过滤去除发酵滤渣得到马铃薯发酵液；按重量份数计，向高速分散机中加入40份玉米浆、25份番茄柠檬汁、45份马铃薯发酵液，以1500r/min转速搅拌45min，后得到分散营养液；按重量份数计，向培养皿中加入70份分散营养液、5份无水磷酸氢二钾、30份蛋白胨、10份硫酸铵，搅拌混合10min后，将培养皿放入125℃、0.106MPa的高压蒸汽中灭菌30min，得到乳酸菌培养基。
对比例 以上海市某公司生产的乳酸菌培养基作为对比例 对本发明制得的乳酸菌培养基和对比例中的乳酸菌培养基进行性能检测，检测结果如表1所示： 1、测试方法：
pH值测试方法：测试缓冲盐中的pH值，pH值越高，培养基中的缓冲盐含量越多，乳酸菌培养基的浓度越高。
活菌数测试采用正交试验方法进行检测。
表1
检测项目 实例1 实例2 实例3 对比例
pH值 6.5 6.4 6.3 6.0
活菌数（×10<sup>9</sup>个） 5.5 5.4 5.3 4.5
根据表1中数据可知，本发明制得的乳酸菌培养基在培养后期乳酸菌浓度高，具有广阔的应用前景。

Claims (6)

1.一种乳酸菌培养基的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：
（1）称取300～500g鲜嫩玉米粒用水冲洗后，放入400～500mL亚硫酸溶液中，浸泡得到浸泡后的玉米，将浸泡后的玉米放在榨汁机中鲜榨后过滤，去除滤渣得到玉米汁
（2）将玉米汁倒入烧杯中，加热升温，保温，再冷却至室温，搅拌后得到玉米浆；称取200～300g番茄、100～200g柠檬，放入榨汁机鲜榨，过滤去除滤饼得到番茄柠檬汁；
（3）向发酵罐中加入200～300g切碎的马铃薯块，5～10g酵母膏，密封静置，发酵后，过滤去除发酵滤渣得到马铃薯发酵液；
（4）按重量份数计，向高速分散机中加入30～40份玉米浆、20～25份番茄柠檬汁、40～45份马铃薯发酵液，搅拌，得到分散营养液；
（5）按重量份数计，向培养皿中加入60～70份分散营养液、3～5份无水磷酸氢二钾、20～30份蛋白胨、5～10份硫酸铵，搅拌混合后，将培养皿放入高压蒸汽中灭菌，得到乳酸菌培养基。
2.根据权利要求1所述的一种乳酸菌培养基的制备方法，其特征在于：步骤（1）所述的洗涤次数为3～5次，亚硫酸溶液质量分数为20%，浸泡玉米的时间为4～5h，鲜榨时间为15～20min。
3.根据权利要求1所述的一种乳酸菌培养基的制备方法，其特征在于：步骤（2）所述的加热升温后的温度为90～100℃，保温时间为5～10min，搅拌时间为1～2min，鲜榨时间为10～15min。
4.根据权利要求1所述的一种乳酸菌培养基的制备方法，其特征在于：步骤（3）所述的马铃薯块粒径为1～2cm，密封静置的温度为50～60℃，发酵时间为5～10天。
5.根据权利要求1所述的一种乳酸菌培养基的制备方法，其特征在于：步骤（4）所述的搅拌转速为1000～1500r/min，搅拌时间为30～45min。
6.根据权利要求1所述的一种乳酸菌培养基的制备方法，其特征在于：步骤（5）所述的搅拌混合时间为5～10min，高压蒸汽温度为120～125℃、压强为0.104～0.106MPa，杀菌时间为15～30min。
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