CN107469056A - 一种发酵型益母生化散、制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于生物中药技术领域，具体公开了一种发酵型益母生化散的制备方法，包括将地衣芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌中的任意两种或三个菌种混合制成复合菌剂；然后将复合菌剂接种到经灭菌的益母生化散中，厌氧固体发酵培养，干燥发酵产物，得到发酵型益母生化散。本发明公开的发酵型益母生化散的制备方法及应用，利用特定的肠道有益菌地衣芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌之间的协同和拮抗作用，模拟肠道环境对中药进行生物发酵，发酵后的益母生化散在防治母畜产后期疾病上疗效确实可靠。

Description

一种发酵型益母生化散、制备方法及应用
技术领域
本发明属于生物中药技术领域，具体涉及一种发酵型益母生化散、制备方法及应用。
背景技术
中药发酵是将中药提取液和经过优选的人体内的有益菌作为菌种，依据微生态学和仿生学理论，通过生物嫁接方式，在模拟人体胃肠环境的条件下对中药提取物进行生物转化而成的新型中药。利用现代生物技术使中药与有益菌完美结合，中药成份经过益生菌转化，由大分子变成小分子，极易被机体吸收、提高药效，发酵中药比传统中药药效提高数倍到几十倍，在抗生素耐药，超级细菌不断出现的形势下具有重要意义。
益母生化散具有清热解毒、消炎抗菌、活血调经的作用，主治奶牛产生恶露不行，血瘀腹痛，胎衣滞留，产后瘫痪等症状。现有技术存在的问题是，传统的中药发酵采用天然混合微生物发酵，菌种不纯，导致发酵型益母生化散的生产可控性差，影响其使用。
发明内容
为解决上述技术问题，本发明提供的一种发酵型益母生化散、制备方法及应用，采用已知的纯菌种发酵，发酵型益母生化散的生产可控性好，适于广泛推广使用。
本发明的第一个目的是提供一种发酵型益母生化散的制备方法，包括以下步骤：
S1，按重量份比例称取益母生化散的各中药原料，粉碎后混匀，过筛，得到益母生化散；
S2，制备复合菌剂：所述复合菌剂由地衣芽孢杆菌固体菌剂、酵母菌固体菌剂和乳酸菌固体菌剂中的任意两种混合而成，或三种固体菌剂混合而成；
S3，将S1的益母生化散灭菌，然后将复合菌剂与无菌水混匀后接种到灭菌的益母生化散中，于20-40℃厌氧固体发酵培养2-7d，发酵培养结束后，干燥发酵产物，得到发酵型益母生化散。
优选的，上述发酵型益母生化散的制备方法，S1中，益母生化散由以下重量份的中药原料制成：益母草120份，当归75份，川芎30份，桃仁30份，干姜15份，甘草5份。
优选的，上述发酵型益母生化散的制备方法，S2中，地衣芽孢杆菌固体菌剂的制备方法如下：将地衣芽孢杆菌菌种按体积分数3-5％接种量接种于发酵罐中进行液体培养，于温度20-40℃、搅拌转速100-300r/min培养时间18-48h，获得的发酵液经固态吸附剂吸附、干燥得地衣芽孢杆菌固体菌剂；
酵母菌固体菌剂的制备方法如下：将酵母菌种按体积分数2-3％的接种量接种于发酵罐中进行液体培养，于25-35℃、培养18-68h，获得的发酵液经固态吸附剂吸附、干燥得酵母菌固体菌剂；
乳酸菌固体菌剂的制备方法如下：将乳酸菌按体积分数5％接种量接种于发酵罐中进行液体培养培养，于30-35℃、220r/min培养18-24h，获得的发酵液经固态吸附剂吸附、干燥得乳酸菌固体菌剂。
优选的，上述发酵型益母生化散的制备方法，S2中，地衣芽孢杆菌采用的每升液体培养基配方为：蔗糖10g、蛋白胨10g、氯化钠5g、水定容至1L，pH7.0；
酵母菌采用的每升液体培养基配方为：玉米浆10g、硫酸铵4g、水定容至1L，pH5.5，其中玉米粉经液化、糖化，直至浓度为10°Bé后得到玉米浆；
乳酸菌采用MRS液体培养基培养；
所述固态吸附剂为稻糠粉。
优选的，上述发酵型益母生化散的制备方法，发酵液经稻糠粉吸附时，将发酵液与稻糠粉按照1L:1.5kg的比例混合。
优选的，上述发酵型益母生化散的制备方法，S2中，所述复合菌剂由地衣芽孢杆菌固体菌剂、酵母菌固体菌剂和乳酸菌固体菌剂中的任意两种按照1-3:1的质量比例混合而成，或三种固体菌剂按照1:1-2:1的质量比例混合而成。
优选的，上述发酵型益母生化散的制备方法，S3的具体步骤为：将S1的益母生化散于110-130℃灭菌10-30min，然后将复合菌剂与无菌水混匀后接种到灭菌的益母生化散中，于20-40℃厌氧固体发酵培养2-7d，期间每隔12-24h搅拌一次，发酵培养结束后，干燥发酵产物，得到发酵型益母生化散；其中，复合菌剂用量为益母生化散总重量的2-15％。
本发明的第二个目的是提供一种上述发酵型益母生化散的制备方法制备而成的发酵型益母生化散。
本发明的第三个目的是提供一种发酵型益母生化散的制备方法在生产发酵型益母生化散中的应用。
与现有技术相比，本发明的发酵型益母生化散的制备方法，具有以下有益效果：
本发明将中药发酵技术运用到益母生化散中，把现代生物技术和传统的中药炮制方法结合起来，经微生物发酵的方式，利用特定的肠道有益菌地衣芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌之间的协同和拮抗作用，模拟肠道环境对中药进行生物发酵，发酵型益母生化散的生产可控性好，适于广泛推广使用。
本发明的发酵型益母生化散能够有效解决规模猪场养殖过程中母猪产后恶露不行难题；能够有效提高仔猪机体免疫力和抗病能力，防治母畜产后期疾病，母猪便秘率下降52％、断奶健壮总数提高8.03％、仔猪死亡总数下降11.97％、仔猪成活率提高9.18％、仔猪拉稀情况下降2.73％、产程分别缩短34.98％、死胎率分别降低44.89％；本发明产品是替代抗生素药物控制产后恶露不行、在防治母畜产后期疾病上疗效确实可靠的理想绿色环保安全新型发酵中药。，在防治母畜产后期疾病上疗效确实可靠，纯中药方剂使用方便，经济实惠，且发酵后消除了中药特出的味道，增加了适口性。
具体实施方式
下面结合具体实例对本发明进行详细说明，但不应理解为本发明的限制。下面实例中未注明具体条件的实验方法，均按照本领域的常规方法和条件进行。
下述实施实例中，所用PD液体培养基、MRS液体培养基、营养肉汤液体培养基的配方组成采用本领域常规配方即可。其中，地衣芽胞杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心；啤酒酵母ATCC 9763购自中国普通微生物菌种保藏管理中心；乳酸菌购自广东省微生物研究所；下述实施例1-4中，益母生化散由以下重量份的中药原料制成：益母草120份，当归75份，川芎30份，桃仁30份，干姜15份，甘草5份。
实施例1
一种发酵型益母生化散的制备方法，包括以下步骤：
S1，按重量份比例称取益母生化散的各中药原料，粉碎后混匀，过50目筛，得到益母生化散；
S2，制备复合菌剂：所述复合菌剂为地衣芽孢杆菌固体菌剂、酵母菌固体菌剂和乳酸菌固体菌剂三种固体菌剂按照1:1:1的质量比例混合而成；
地衣芽孢杆菌固体菌剂的制备方法如下：将地衣芽孢杆菌菌种(预先活化好的液体菌种)按3％(体积分数)接种量接种于50L发酵罐中进行液体培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，温度35℃、搅拌转速200r/min，通气量15-18L/min、罐压0.03-0.04Mpa、发酵培养时20-48h，直至菌体量达4×109cfu/mL以上，获得的发酵液经50目的稻糠粉吸附、50℃真空干燥得地衣芽孢杆菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与稻糠粉按照1L:1.5kg的比例混合；
其中，地衣芽孢杆菌发酵采用的液体培养基配方为：蔗糖10g、蛋白胨10g、氯化钠5g、水定容至1L，pH7.0；
酵母菌固体菌剂的制备方法如下：将啤酒酵母ATCC9763菌种(预先活化好的液体菌种)按3％(体积分数)接种量接种于50L发酵罐中进行液体培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，于温度28℃、发酵培养时30-35h，直至菌体量达4×108cfu/mL以上，获得的发酵液经50目的稻糠粉吸附、50℃真空干燥得酵母菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与稻糠粉按照1L:1.5kg的比例混合；
啤酒酵母ATCC9763采用的液体培养基配方为：玉米浆10g、硫酸铵4g、水定容至1L，pH5.5，其中玉米粉经液化、糖化，直至浓度为10°Bé后得到玉米浆；
乳酸菌固体菌剂的制备方法如下：将乳酸菌菌种(预先活化好的液体菌种)按5％接种量接种于50L发酵罐中进行液体培养培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，于32℃、220r/min培养22-24h，直至菌体量达109cfu/mL以上，获得的发酵液经50目的稻糠粉吸附、50℃真空干燥得乳酸菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与稻糠粉按照1L:1.5kg的比例混合；
其中，乳酸菌采用MRS液体培养基培养；
S3，将S1的益母生化散于121℃灭菌15min，然后将复合菌剂与无菌水混匀后接种到灭菌的益母生化散中，其中，复合菌剂用量为益母生化散总重量的2％，所述无菌水的用量为益母生化散总重量的0.6倍，于30℃厌氧固体发酵培养5d，期间每隔12h搅拌一次，发酵培养结束后，在40℃真空干燥干燥发酵产物，得到发酵型益母生化散。
实施例2
一种发酵型益母生化散的制备方法，包括以下步骤：
S1，按重量份比例称取益母生化散的各中药原料，粉碎后混匀，过50目筛，得到益母生化散；
S2，制备复合菌剂：所述复合菌剂为酵母菌固体菌剂和乳酸菌固体菌剂两个菌剂按照1:1的质量比例混合；
酵母菌固体菌剂的制备方法如下：将啤酒酵母ATCC9763菌种(预先活化好的液体菌种)按2％(体积分数)接种量接种于50L发酵罐中进行液体培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，于温度35℃、发酵培养时18-24h，直至菌体量达4×108cfu/mL以上，获得的发酵液经50目的稻糠粉吸附、50℃真空干燥得酵母菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与稻糠粉按照1L:1.5kg的比例混合；
啤酒酵母ATCC9763采用的液体培养基配方同实施例1；
乳酸菌固体菌剂的制备方法如下：将乳酸菌菌种(预先活化好的液体菌种)按5％(体积分数)接种量接种于50L发酵罐中进行液体培养培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，于温度30℃、220r/min培养18-20h，直至菌体量达109cfu/mL以上，获得的发酵液经50目的稻糠粉吸附、50℃真空干燥得酵母菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与稻糠粉按照1L:1.5kg的比例混合；乳酸菌的液体培养基同实施例1；
S3，将S1的益母生化散于121℃灭菌15min，然后将复合菌剂与无菌水混匀后接种到灭菌的益母生化散中，其中，复合菌剂用量为益母生化散总重量的10％，所述无菌水的用量为益母生化散总重量的1.5倍，于20-25℃厌氧固体发酵培养7d，期间每隔24h搅拌一次，发酵培养结束后，在40℃真空干燥干燥发酵产物，得到发酵型益母生化散。
实施例3
一种发酵型益母生化散的制备方法，包括以下步骤：
S1，按重量份比例称取益母生化散的各中药原料，粉碎后混匀，过50目筛，得到益母生化散；
S2，制备复合菌剂：所述复合菌剂为地衣芽孢杆菌固体菌剂和乳酸菌固体菌剂两个菌剂按照3:1的质量比例混合；
地衣芽孢杆菌固体菌剂的制备方法如下：将地衣芽孢杆菌菌种(预先活化好的液体菌种)按4％(体积分数)接种量接种于50L发酵罐中进行液体培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，于温度20℃、搅拌转速250r/min，通气量15-18L/min、罐压0.03-0.04Mpa、发酵培养时36-48h，直至菌体量达6×109cfu/mL以上，获得的发酵液经50目的稻糠粉吸附、50℃真空干燥得地衣芽孢杆菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与稻糠粉按照1L:1.5kg的比例混合；
其中，地衣芽孢杆菌采用的液体培养基为营养肉汤液体培养基；
乳酸菌固体菌剂的制备方法如下：将乳酸菌菌种(预先活化好的液体菌种)按5％(体积分数)接种量接种于50L发酵罐中进行液体培养培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，于温度35℃、220r/min培养18-20h，直至菌体量达109cfu/mL以上，获得的发酵液经50目的稻糠粉吸附、50℃真空干燥得乳酸菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与稻糠粉按照1L:1.5kg的比例混合；
其中，乳酸菌采用的液体培养基配方同实施例1；
S3，将S1的益母生化散于121℃灭菌15min，然后将复合菌剂与无菌水混匀后接种到灭菌的益母生化散中，其中，复合菌剂用量为益母生化散总重量的15％，所述无菌水的用量为益母生化散总重量的1倍，于35-40℃厌氧固体发酵培养2d，期间每隔20h搅拌一次，发酵培养结束后，在40℃真空干燥干燥发酵产物，得到发酵型益母生化散。
实施例4
一种发酵型益母生化散的制备方法，包括以下步骤：
S1，按重量份比例称取益母生化散的各中药原料，粉碎后混匀，过50目筛，得到益母生化散；
S2，制备复合菌剂：所述复合菌剂为地衣芽孢杆菌固体菌剂和酵母菌固体菌剂两个菌剂按照1:2的质量比例混合；
地衣芽孢杆菌固体菌剂的制备方法如下：将地衣芽孢杆菌菌种(预先活化好的液体菌种)按3％(体积分数)接种量接种于50L发酵罐中进行液体培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，于温度40℃、搅拌转速200r/min，通气量15-18L/min、罐压0.03-0.04Mpa、发酵培养时20-24h，直至菌体量达5×109cfu/mL以上，获得的发酵液经50目的稻糠粉吸附、50℃真空干燥得地衣芽孢杆菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与稻糠粉按照1L:1.5kg的比例混合；
其中，地衣芽孢杆菌采用的液体培养基配方同实施例1
酵母菌固体菌剂的制备方法如下：将啤酒酵母ATCC9763菌种(预先活化好的液体菌种)按3％(体积分数)接种量接种于50L发酵罐中进行液体培养，发酵罐中液体培养基装液量占发酵罐总体积的40％，于温度25℃、发酵培养时50-68h，直至菌体量达3×108cfu/mL以上，获得的发酵液经50目的稻糠粉吸附、50℃真空干燥得酵母菌固体菌剂；其中吸附时，将发酵液与稻糠粉按照1L:1.5kg的比例混合；
啤酒酵母ATCC9763采用的液体培养基为PD液体培养基；
S3，将S1的益母生化散于121℃灭菌15min，然后将复合菌剂与无菌水混匀后接种到灭菌的益母生化散中，其中，复合菌剂用量为益母生化散总重量的13％，所述无菌水的用量为益母生化散总重量的0.8倍，于28-32℃厌氧固体发酵培养6d，期间每隔12h搅拌一次，发酵培养结束后，在40℃真空干燥干燥发酵产物，得到发酵型益母生化散。
益母生化散依据中兽医学理论之辨证论治原理，结合母畜产后发病具体情况，以经典处方为基础而得。在该处方中，益母草活血祛瘀，利水消肿；当归活血补血；川芎活血行气；桃仁活血祛瘀；甘草和中等。
本发明利用特定的肠道有益菌对中药进行生物发酵，结试验结果证明，益母生化散在用药后参试猪、牛的体温、呼吸、脉搏等生理指标均在正常范围内，精神状态正常，活动力强，食欲旺盛，粪便、尿液眼观无异常变化，发酵型益母生化散制品用于产后恶露不行，血瘀腹痛预防治疗效果好、疗效显著，在防治母畜产后期疾病上疗效确实可靠，纯中药方剂使用方便，经济实惠，且发酵后消除了中药特出的味道，增加了适口性。
本发明为了治疗猪的产后疾病，开发了发酵型益母生化散的制备方法，该方法采用酵母菌、乳酸菌、地衣芽孢杆菌对传统的益母生化散进行科学发酵处理，药物利用率高，药效好。通过优选的益生菌对组方中药进行发酵，益母生化散经微生物发酵处理后，主要成分发生较大的变化，其中难以吸收利用的大分子物质经过微生物的代谢作用变成易吸收的小分子，毒性物质的含量也随之降低，利用微生物和中药的相互作用得到的全新功能性高科技产品、具有益气活血、固本培元、健脾消食、扶正祛邪之功效，从而达致促情、促孕、增仔、壮仔、增乳的作用。
下面以实施例1为例，说明相关动物试验效果(动物试验在河南秀田农牧股份有限公司万头猪场进行)：
一、发酵型益母生化散治疗母猪产后疾病的临床效果
(1)临床病例：选自具有典型恶露不尽、胎衣不下、腹痛、子宫垂脱、子宫复旧不全、产后子宫内膜炎的患猪。
(2)试验方法：每只产后猪每次50g，开水冲调，候温灌服，每日一次，连用3天。从第1次给药后每天观察记录体温、呼吸、活动状态、精神、食欲、粪便、有无死亡等，连续观察7天。
(3)临床应用效果如表1所示。
表1发酵型益母生化散治疗母猪产后疾病的临床效果
病症 病例数/头 治愈数/头 无效头数/头 治愈率/％
恶露不尽 56 53 2 94.64
胎衣不下 30 28 2 93.33
子宫垂脱 24 21 3 87.5
子宫复旧不全 14 13 1 92.86
由表1结果可知，实施例1的发酵型益母生化散对母畜产后恶露不尽、胎衣不下、血瘀腹痛、子宫垂脱、子宫复旧不全、产后子宫内膜炎等产后期疾病疗效显著。
二、增强机体免疫
发酵型益母生化散在妊娠母猪的使用过程中有增强机体免疫。改善消化系统功能，从生理上解决母猪便秘问题，同时进一步提高乳仔猪的出生重、提高健仔数、增加母猪的泌乳能力和提高仔猪断奶重，降低母猪断奶后的返情率。
试验方案：选择同胎次或胎次相近的健康活泼的妊娠到70日龄的妊娠母猪140头，根据体重及性别和胎次比例相近的原则，将妊娠母猪分为A、B两组，其中A组为对照组140头，不设重复，B组为实验组，每组140头设两个重复。A组饲喂基础日粮，B组饲喂基础日粮添加发酵型益母生化散，发酵型益母生化散的用量为每只产后猪每次50g，每天一次，拌入基础日粮中使用。
各试验组日粮均为粉料，试验猪日粮配方及营养水平相同。母猪产后采食量、分娩舍母猪便秘等统计情况如表2所示。
表2发酵型益母生化散在使用过程中增强机体免疫的实验统计表
表2的结果表明，与对照组A组相比，母猪便秘率下降52％、断奶猪健壮总数提高8.03％、仔猪死亡总数下降11.97％、仔猪成活率提高9.18％、仔猪拉稀情况下降2.73％、平均断奶体重增加2.05kg。以上试验证明发酵型益母生化散能有效改善消化系统功能，从生理上解决母猪便秘问题，同时进一步提高乳仔猪的出生重、提高健仔数、增加母猪的泌乳能力和提高仔猪断奶体重。
三、发酵型益母散对母猪分娩情况的影响
1、试验方法：将80头临产母猪随机均分为对照(正常日粮)组和实施例1的发酵型益母散低剂量组(25g/头)、中剂量组(50g/头)、高剂量组(100g/头)剂量组，临产前5d持续拌料饲喂。试验母猪产床饲养，饮水不限，定点喂食，试验期保持环境温度为25℃左右，相对湿度在60-70％之间。按照常规程序进行消毒、免疫、驱虫。
2、母猪分娩情况的统计：记录母猪产程，即母猪分娩第1头仔猪起，至完全排出胎衣的时间间隔。记录每窝总产仔数、健仔数(体重≥800g)、弱仔数(体重＜800g)、死胎数、木乃伊数。
表3母猪分娩情况的统计结果
由表3可知：与对照组相比，益母散中、高剂量组的产程均极显著缩短(P＜0.01)，死胎率显著降低(P＜0.05，健仔率显著提高(P＜0.05)，平均窝产仔数、木乃伊率、弱仔数三组与对照相比均不显著(P＞0.05)；益母散中、高剂量组OT、PGE2含量均显著提高(P＜0.05)。说明益母散对临产母猪分娩能力有显著促进作用。
上述动物试验结果表明本发明的发酵型益母生化散制品用于产后恶露不行，血瘀腹痛预防治疗效果好、疗效显著，在防治母畜产后期疾病上疗效确实可靠。根据实验室反复发酵试验和产品在规模养殖猪场的实际使用效果。
本发明的发酵型益母生化散能够有效解决规模猪场养殖过程中母猪产后恶露不行难题；能够有效提高仔猪机体免疫力和抗病能力，防治母畜产后期疾病，母猪便秘率下降52％、断奶健壮总数提高8.03％、仔猪死亡总数下降11.97％、仔猪成活率提高9.18％、仔猪拉稀情况下降2.73％、产程分别缩短34.98％、死胎率分别降低44.89％；本发明产品是替代抗生素药物控制产后恶露不行、在防治母畜产后期疾病上疗效确实可靠的理想绿色环保安全新型发酵中药。
需要说明的是，为了防止赘述，本发明的描述了优选的实施例1-4，尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (9)

1.一种发酵型益母生化散的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1，按重量份比例称取益母生化散的各中药原料，粉碎后混匀，过筛，得到益母生化散；
S2，制备复合菌剂：所述复合菌剂由地衣芽孢杆菌固体菌剂、酵母菌固体菌剂和乳酸菌固体菌剂中的任意两种混合而成，或三种固体菌剂混合而成；
S3，将S1的益母生化散灭菌，然后将复合菌剂与无菌水混匀后接种到灭菌的益母生化散中，于20-40℃厌氧固体发酵培养2-7d，发酵培养结束后，干燥发酵产物，得到发酵型益母生化散。
2.根据权利要求1所述的发酵型益母生化散的制备方法，其特征在于，S1中，益母生化散由以下重量份的中药原料制成：益母草120份，当归75份，川芎30份，桃仁30份，干姜15份，甘草5份。
3.根据权利要求1所述的发酵型益母生化散的制备方法，其特征在于，S2中，地衣芽孢杆菌固体菌剂的制备方法如下：将地衣芽孢杆菌菌种按体积分数3-5％接种量接种于发酵罐中进行液体培养，于温度20-40℃、搅拌转速100-300r/min培养时间18-48h，获得的发酵液经固态吸附剂吸附、干燥得地衣芽孢杆菌固体菌剂；
酵母菌固体菌剂的制备方法如下：将酵母菌种按体积分数2-3％的接种量接种于发酵罐中进行液体培养，于25-35℃、培养18-68h，获得的发酵液经固态吸附剂吸附、干燥得酵母菌固体菌剂；
乳酸菌固体菌剂的制备方法如下：将乳酸菌按体积分数5％接种量接种于发酵罐中进行液体培养培养，于30-35℃、220r/min培养18-24h，获得的发酵液经固态吸附剂吸附、干燥得乳酸菌固体菌剂。
4.根据权利要求3所述的发酵型益母生化散的制备方法，其特征在于，S2中，地衣芽孢杆菌采用的每升液体培养基配方为：蔗糖10g、蛋白胨10g、氯化钠5g、水定容至1L，pH7.0；
酵母菌采用的每升液体培养基配方为：玉米浆10g、硫酸铵4g、水定容至1L，pH5.5，其中玉米粉经液化、糖化，直至浓度为10°Bé后得到玉米浆；
乳酸菌采用MRS液体培养基培养；
所述固态吸附剂为稻糠粉。
5.根据权利要求4所述的发酵型益母生化散的制备方法，其特征在于，发酵液经稻糠粉吸附时，将发酵液与稻糠粉按照1L:1.5kg的比例混合。
6.根据权利要求1所述的发酵型益母生化散的制备方法，其特征在于，S2中，所述复合菌剂由地衣芽孢杆菌固体菌剂、酵母菌固体菌剂和乳酸菌固体菌剂中的任意两种按照1-3:1的质量比例混合而成，或三种固体菌剂按照1:1-2:1的质量比例混合而成。
7.根据权利要求1所述的发酵型益母生化散的制备方法，其特征在于，S3的具体步骤为：将S1的益母生化散于110-130℃灭菌10-30min，然后将复合菌剂与无菌水混匀后接种到灭菌的益母生化散中，于20-40℃厌氧固体发酵培养2-7d，期间每隔12-24h搅拌一次，发酵培养结束后，干燥发酵产物，得到发酵型益母生化散；其中，复合菌剂用量为益母生化散总重量的2-15％。
8.根据权利要求1～7任一所述的制备方法制备而成的发酵型益母生化散。
9.根据权利要求1～7任一所述的制备方法在生产发酵型益母生化散中的应用。
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