CN107468739A - 菊花提取物的用途、以及菊花纳米制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种菊花提取物的用途、以及菊花纳米制剂及其制备方法，属于药物领域。这种用于治疗肺部慢性炎症损伤的菊花纳米制剂，其制备方法包括：用有机溶剂溶解菊花提取物和卵磷脂，得到混合料液；以及将纯化水在搅拌下加热至50～60℃，再在50～60℃下持续搅拌后，在搅拌下逐滴加入混合料液、并在50～60℃下搅拌28～32h。菊花提取物可以用来制备预防或治疗肺部慢性炎症损伤的药物，从而为肺部慢性炎症损伤的治疗和预防提供新的思路。所制得的这种菊花纳米制剂可以采用雾化吸入的方式给药，有效提高了该制剂在治疗或预防肺部慢性炎症损伤时的治疗效果，并延长了保质期。

Description

菊花提取物的用途、以及菊花纳米制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及药物领域，具体而言，涉及一种菊花提取物的用途、以及菊花纳米制剂及其制备方法。
背景技术
近年来,我国区域性灰霾天气的波及范围越来越广,严重影响人群的身心健康。大气中高浓度的悬浮颗粒物,尤其是空气动力学直径(AED)小于2.5μm的PM2.5颗粒是雾霾频发的重要原因之一。随着城市化进程加快,城市交通网络扩张和私家车拥有量的不断增加,我国大气污染模式将由燃煤型污染逐渐转变为汽车尾气型污染,因此PM2.5的污染水平及其在总悬浮颗粒物中的比重仍将继续升高。另一方面，大气细颗粒物是一种成分极其复杂的多相混合物,主要包括有OC/EC含碳组分,多环芳烃等有机物,铅、镍、铜、铬等微量重金属,各类无机盐离子的液态颗粒,甚至有花粉、真菌、病毒等生物性物质。此外，一次颗粒物还可以与空气中氮氧化物、硫氢化物、臭氧等其他气态污染物反应生成二次颗粒物。
大量流行病学、毒理学资料表明,大气颗粒物污染可导致居民肺功能下降、COPD.哮喘等呼吸系统疾病的发生,甚至累及心血管系统、神经系统、免疫系统等多系统疾病的发病率和病死率,大大降低了人均期望寿命。鉴于此，现在急需一种能够有效降低雾霾对人体肺部造成损伤的药物。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种菊花提取物在制备预防或治疗肺部慢性炎症损伤的药物中的用途，为肺部慢性炎症损伤的治疗提供新的思路。
本发明的第二目的在于提供一种用于治疗肺部慢性炎症损伤的菊花纳米制剂，该制剂能够实现菊花提取物的雾化吸入给药，有效提高了产品的治疗效果。
本发明的第三目的在于提供一种用于治疗肺部慢性炎症损伤的菊花纳米制剂的制备方法，该方法采用卵磷脂为外壳，将菊花有效成分包裹在内，制成纳米粉剂，有效解决了菊花提取物中部分有效成分难以雾化的难题。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
菊花提取物在制备预防或治疗肺部慢性炎症损伤的药物中的用途。
一种用于治疗肺部慢性炎症损伤的菊花纳米制剂的制备方法，其包括：
用有机溶剂溶解菊花提取物和卵磷脂，得到混合料液；以及
将纯化水在搅拌下加热至50～60℃，再在50～60℃下持续搅拌后，在搅拌下逐滴加入混合料液、并在50～60℃下搅拌28～32h。
一种用于治疗肺部慢性炎症损伤的菊花纳米制剂，该菊花纳米制剂由上述制备方法制得。
与现有技术相比，本发明的有益效果例如包括：
本公开内容提供的菊花提取物的新用途，发明人研究发现，菊花提取物能够有效缓解肺部慢性炎症损伤症状，其主要表现在：菊花提取物能够降低肺部组织充血水肿、粘膜上皮脱落、淋巴细胞浸润、肺泡间隔增厚等病变。基于此，菊花提取物可以用来制备预防或治疗肺部慢性炎症损伤的药物，从而为肺部慢性炎症损伤的治疗和预防提供新的思路。
本公开内容提供的菊花纳米制剂及其制备方法，以菊花提取物为唯一的活性药物，该方法采用卵磷脂为外壳，将菊花有效成分包裹在内，制成纳米粉剂。其可以采用雾化吸入的方式给药，有效提高了该制剂在治疗或预防肺部慢性炎症损伤时的治疗效果，并延长了保质期。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为实验例中小鼠的组织病理学检查图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本实施方式提供一种菊花提取物在制备预防或治疗肺部慢性炎症损伤的药物中的用途。
菊花为菊科多年生草本植物，是中国传统的常用中药材之一，主要以头状花序供药用。据古籍记载，菊花味甘苦，性微寒；有散风清热、清肝明目和解毒消炎等作用。对口干、火旺、目涩，或由风、寒、湿引起的肢体疼痛、麻木的疾病均有一定的疗效。主治感冒风热，头痛病等，对眩晕、头痛、耳鸣有防治作用。
发明人研究发现菊花提取物能够有效缓解肺部慢性炎症损伤症状，其主要表现在：菊花提取物能够降低肺部组织充血水肿、粘膜上皮脱落、淋巴细胞浸润、肺泡间隔增厚等病变。基于此，菊花提取物可以用来制备预防或治疗肺部慢性炎症损伤的药物，从而为肺部慢性炎症损伤的治疗和预防提供新的思路。
此处，需要说明的是，菊花提取物是以菊花为原料、并采用溶剂提取法提取或加工而成的物质，其可以直接从市场上购买得到，也可以自己制备。可选的，制备菊花提取物的方法包括：煎煮法、加热回流提取法、渗漉法、浸泡法、微波震荡提取法；提取的溶剂为水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯中的任意一种或至少两种的混合溶剂，较为优选的，采用乙醇为提取溶剂进行提取，并将所得的提取液减压浓缩后得到菊花提取物。可选的，菊花提取物采用野菊花(Dendranthema indicum)为原料。
进一步的，肺部慢性炎症损伤由雾霾引起。
发明人以C57BL/6雄性小鼠为试验对象，以冬季的大气PM2.5样品的悬浊液作为染毒剂，通过气管滴注的方式分别进行急性和亚慢性的PM2.5暴露，从氧化应激和免疫损伤两方面研究PM2.5的肺毒性机制。
研究发现，支气管肺泡灌洗液(BALF)中氧化应激指标超氧化物歧化酶(SOD)随着染毒剂量的升高而降低，脂质过氧化指标丙二醛(MDA)随着染毒剂量的升高而升高，与对照组相比差异有统计学意义。
肺组织病理学检查也显示了各染毒组出现不同程度的炎症反应和组织损伤，随着染毒时间的延长和染毒剂量的升高，颗粒物沉积量不断增多，组织充血水肿、粘膜上皮脱落、淋巴细胞浸润、肺泡间隔增厚等病变程度不断加重。肺泡灌洗液中白介素-6(IL-6)、白介素-17(IL-17)和转化生长因子-β(TGF-β)的含量呈剂量效应增加的趋势，白介素-10(IL-10)的含量随染毒剂量的升高而显著降低。
由此说明，机体接受持续性PM2.5暴露的情况下，肺部免疫平衡被打破，调节性T细胞的增殖分化、分泌功能难以维持，因而导致白介素-10的水平降低，免疫抑制功能被削弱，进而导致了肺部持续性的慢性炎症损伤。
进一步研究发现，菊花提取物可以降低雾霾引起的肺部慢性炎症，降低雾霾引起的组织充血水肿、粘膜上皮脱落、淋巴细胞浸润、肺泡间隔增厚等病变，可以作为一种优良的防治雾霾的药物，应用在由雾霾引起的肺部慢性炎症损伤的预防和治疗中。
本实施方式还提供一种用于治疗肺部慢性炎症损伤的菊花纳米制剂，该纳米制剂以菊花提取物为唯一的活性药物。
在治疗肺部疾病时，最直接、高效的给药方式就是雾化吸入给药。然而，野菊花提取物中的药效成分部分为脂溶性的，其不溶于水，不能被雾化，由此导致治疗效果低下。介于此，本实施方式提供的这种菊花纳米制剂，采用卵磷脂为外壳，将菊花有效成分包裹在内，制成纳米粉剂，其可以采用雾化吸入的方式给药，有效提高了该制剂在治疗或预防肺部慢性炎症损伤时的治疗效果，并延长了保质期。
本实施方式还提供这种用于治疗肺部慢性炎症损伤的菊花纳米制剂的制备方法，其包括：
步骤S1：用有机溶剂溶解菊花提取物和卵磷脂，得到混合料液。
其中，该有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、石油醚中的至少一种，或者为乙醇和乙醚。
可选的，采用有机溶剂分别溶解菊花提取物和卵磷脂，再将得到的菊花溶液和卵磷脂溶液混合，得到混合料液。
较为具体的，菊花溶液为采用乙醇溶解菊花提取物所得；进一步的，在菊花溶液中菊花提取物与乙醇的质量体积比为1：8～12，或者为1：9～11，或者为1～10。
较为具体的，卵磷脂溶液为采用乙醚溶解卵磷脂所得；进一步的，在卵磷脂溶液中，卵磷脂与乙醚的质量体积比为1：8～12，或者为1：9～11，或者为1～10。
可选的，混合料液中菊花提取物与卵磷脂的质量比为1：3～5，或者为1：3，或者为1：4，或者为1：5。
步骤S2：将纯化水在搅拌下加热至50～60℃，再在50～60℃下持续搅拌，在搅拌下逐滴加入混合料液、并在50～60℃下搅拌28～32h。
在本实施方式中，纯化水包括水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得的供药用的水，不含任何添加剂。可选的，采用双蒸水(DD水)，双蒸水的纯度高、且所含的矿物质少，更加有利于制备该菊花纳米制剂。
将纯化水在搅拌下加热至50～60℃，或者为53～57℃，或者为55℃，再在该温度下持续搅拌一段时间后滴加混合料液。将纯化水在该温度下持续搅拌一段时间后(可选的，持续搅拌20～40min，或者为25～35min，或者为30min)，纯化水中的水分子热运动加剧，有利于后续当第一混合物料中在滴入后，第一混合物料中的溶质(即菊花提取物与卵磷脂)能够迅速的分散在水分子中。发明人研究发现，相比于未搅拌的纯化水，这种在50～60℃持续搅拌一段时间后的纯化水中滴加混合料液，溶质的分散性更好，更加有助于形成纳米级的菊花脂质体，即菊花纳米制剂。
在50～60℃且搅拌下采用逐滴加入的方式添加混合料液，有利于在加入的过程中，每滴混合料液中所含的有机溶剂在加入纯化水的瞬间挥发，而其中所含的菊花提取物与卵磷脂则迅速分散在水分子之间。由于卵磷脂的分子结构中同时具有正、负电荷基团，在水中会容易形成卵磷脂小球并将菊花提取物包裹在其中。可选的，混合料液的滴加速率为1～3滴/秒，或者为2滴/秒，以这种速率滴加，所形成的纳米级的菊花脂质体，粒径更小、且更加均匀。
进一步的，该菊花纳米制剂的制备方法还包括：
步骤S3:在纯化水中逐滴加入混合料液并在50～60℃下搅拌28～32h后形成的溶液，即反应终止液，进行冷冻干燥，得到菊花纳米制剂冻干粉。
进一步的，在制备混合料液和反应终止液的过程中，搅拌的转速为700～1000rmp，或者为750～900rmp，或者为800～850rmp，或者为800rmp。采用这个范围的转速高速搅拌，有利于形成粒径更小、且更加均匀的纳米级菊花脂质体。
这种菊花纳米制剂的制备方法，采用卵磷脂为外壳，将菊花有效成分包裹在内，制成菊花粉剂为纳米级的，粒径小且均匀，便于雾化给药，有效解决了菊花提取物中部分有效成分难以雾化的难题，提高了菊花提取物预防或治疗肺部慢性炎症损伤的功效。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述：
实施例1
本实施例提供一种菊花纳米制剂，用于治疗肺部慢性炎症损伤，其制备方法包括：
a.用乙醇溶解菊花提取物，得到菊花溶液，其中菊花提取物与乙醇的质量体积比为1：10；用乙醚溶解卵磷脂，得到卵磷脂溶液，其中卵磷脂与乙醚的质量体积比为1：10；再将所得的菊花溶液与卵磷脂溶液混合，得到混合料液，其中菊花提取物与卵磷脂的质量比为1：4。
b.将纯化水在搅拌下加热至55℃，再在55℃下持续搅拌30min后，在搅拌下逐滴加入所述混合料液、并在55℃下搅拌30h，得到反应终止液，再干燥反应终止液，即得菊花纳米制剂。
实施例2
本实施例提供一种菊花纳米制剂，用于治疗肺部慢性炎症损伤，其制备方法包括：
a.用乙醇溶解菊花提取物，得到菊花溶液，其中菊花提取物与乙醇的质量体积比为1：12；用乙酸乙酯溶解卵磷脂，得到卵磷脂溶液，其中卵磷脂与乙酸乙酯的质量体积比为1：12；再将所得的菊花溶液与卵磷脂溶液混合，得到混合料液，其中菊花提取物与卵磷脂的质量比为1：3。
b.将纯化水在搅拌下加热至60℃，再在60℃下持续搅拌20min后，在搅拌下逐滴加入所述混合料液、并在60℃下搅拌28h，得到反应终止液，再干燥反应终止液，即得菊花纳米制剂。
实施例3
本实施例提供一种菊花纳米制剂，用于治疗肺部慢性炎症损伤，其制备方法包括：
a.用乙醇溶解菊花提取物，得到菊花溶液，其中菊花提取物与乙醇的质量体积比为1：8；用乙醚溶解卵磷脂，得到卵磷脂溶液，其中卵磷脂与乙醚的质量体积比为1：8；再将所得的菊花溶液与卵磷脂溶液混合，得到混合料液，其中菊花提取物与卵磷脂的质量比为1：5。
b.将纯化水在搅拌下加热至50℃，再在50℃下持续搅拌40min后，在搅拌下逐滴加入所述混合料液、并在50℃下搅拌32h，得到反应终止液，再干燥反应终止液，即得菊花纳米制剂。
实施例4
本实施例提供一种菊花纳米制剂，用于治疗肺部慢性炎症损伤，其制备方法包括：
a.本实施例中制备混合料液的a步骤请参见实施例1。
b.将纯化水在搅拌下加热至55℃，再在55℃下持续搅拌30min后，在搅拌下以3滴/秒的速率逐滴加入混合料液、并在55℃下搅拌30h，得到反应终止液。在此步骤中搅拌的转速为1000rmp。
c.采用冷冻干燥法干燥反应终止液，得冻干粉剂，即菊花纳米制剂。
实施例5
本实施例提供一种菊花纳米制剂，用于治疗肺部慢性炎症损伤，其制备方法包括：
a.本实施例中制备混合料液的a步骤请参见实施例1。
b.将纯化水在搅拌下加热至55℃，再在55℃下持续搅拌30min后，在搅拌下以1滴/秒的速率逐滴加入混合料液、并在55℃下搅拌30h，得到反应终止液。在此步骤中的搅拌为磁力搅拌，转速为700rmp。
c.采用冷冻干燥法干燥反应终止液，得冻干粉剂，即菊花纳米制剂。
实施例6
本实施例提供一种菊花纳米制剂，用于治疗肺部慢性炎症损伤，其制备方法包括：
a.本实施例中制备混合料液的a步骤请参见实施例1。
b.将纯化水在搅拌下加热至55℃，再在55℃下持续搅拌30min后，在搅拌下以2滴/秒的速率逐滴加入混合料液、并在55℃下搅拌30h，得到反应终止液。在此步骤中的搅拌为磁力搅拌，转速为800rmp。
c.采用冷冻干燥法干燥反应终止液，得冻干粉剂，即菊花纳米制剂。
实验例
下面结合动物试验对本发明实施例1提供的菊花纳米制剂在对雾霾引起的肺部慢性炎症的治疗效果进行评价。
一.试验动物造模
将60只6-8周龄的C57BL/6小鼠随机分为3组，每组20只。雾霾分散液低、高剂量组分别为1.5和15mg/kg BW，对照组给予相同体积的生理盐水。雾霾分散液和生理盐水均采用连续肺部滴灌的方式给药3个月。
二.给药方案
从用雾霾分散液或生理盐水给实验小鼠连续肺部滴灌给药的第4个月开始，将每组(对照组、雾霾低剂量组、雾霾高剂量组)中的20只实验小鼠均机分为两组，分别为给药组和空白组。
给药组的实验小鼠每天吸入4mL菊花纳米制剂溶液(配制方法为：将0.2g的实施例1提供的菊花纳米制剂粉末溶于4mL的纯化水)，1h内给药完毕，给药1个月。空白组的实验小鼠每天吸入4mL的生理盐水。
末次给药24小时后收集肺泡灌洗液进行生化分析、取未经灌洗的右肺进行组织病理学检查。
三.实验结果
1.野菊花脂质纳米制剂对雾霾小鼠肺灌洗液免疫细胞的影响
将肺泡灌洗液进行生化分析，其中免疫细胞的分析结果如表1所示：
表1雾霾小鼠肺灌洗液免疫细胞分析结果
由表1可知：
就空白组而言，相比于对照组，雾霾低剂量组和雾霾高剂量组的总细胞数、中性粒细胞数均远大于对照组，淋巴细胞数也大于对照组；同时，巨噬细胞数小于对照组的巨噬细胞数，由此说明，由雾霾引起的小鼠肺部慢性炎症造模成功。
给药后，相比于空白组，雾霾低剂量组和雾霾高剂量组的总细胞数、中性粒细胞数和淋巴细胞数均相应的减少，且巨噬细胞数量相应增多。由此说明，本发明实施例1中提供的菊花纳米制剂经雾化吸入给药后，能够显著的改善由雾霾引起的小鼠肺部慢性炎症。
2.野菊花脂质纳米制剂对雾霾小鼠肺部炎症因子的治疗效果
将肺泡灌洗液进行生化分析，其中肺部炎症因子的分析结果如表2所示：
表2雾霾小鼠肺部炎症因子的分析结果
注：*与对照相比P≤0.05，**与对照相比P≤0.01。
由表2可知：
相比于对照组，雾霾低剂量组和雾霾高剂量组的肺泡灌洗液中IL-6、IL-17和TGF-β含量呈剂量效应增加的趋势，IL-10含量随染毒剂量的升高而显著降低。提示机体接受持续性PM2.5暴露的情况下，肺部免疫平衡被打破，Treg细胞的增殖分化、分泌功能难以维持，因而IL-10水平降低，免疫抑制功能被削弱，导致了肺部持续性的慢性炎症损伤。
给药后，相比于空白组，雾霾低剂量组和雾霾高剂量组的IL-6、IL-17以及TGF-β的含量均相应的减少；同时IL-10的含量相应的增多。由此说明，本发明实施例1中提供的菊花纳米制剂经雾化吸入给药后，能够有效纠正由雾霾引起的小鼠肺部炎症因子分泌异常，从而改善小鼠肺部慢性炎症。
3.野菊花脂质纳米制剂对雾霾小鼠肺部病变的治疗效果
由图1可知，在给药前，雾霾低剂量组和雾霾高剂量组与对照组相比，随着染毒时间的延长和染毒剂量的升高，颗粒物沉积量不断增多、组织充血水肿、粘膜上皮脱落、淋巴细胞浸润、肺泡间隔增厚等病变程度不断加重。
而在给药后，相比于雾霾低剂量组和雾霾高剂量组没有给用前，小鼠肺部的颗粒物沉积量减少，组织充血水肿、粘膜上皮脱落、淋巴细胞浸润以及肺泡间隔增厚症状减轻，由此说明，本发明实施例1中提供的菊花纳米制剂经雾化吸入给药后，能够有效改善小鼠肺部慢性炎症引起的损失。
另外，将其它实施例2～6提供的菊花纳米制剂用于进行上述实验，试验结果与实施例1类似，故不一一赘述。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。

Claims (10)

1.菊花提取物在制备预防或治疗肺部慢性炎症损伤的药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肺部慢性炎症损伤包括组织充血水肿、粘膜上皮脱落、淋巴细胞浸润、肺泡间隔增厚。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述肺部慢性炎症损伤由雾霾引起。
4.一种用于治疗肺部慢性炎症损伤的菊花纳米制剂的制备方法，其特征在于，其包括：
用有机溶剂溶解菊花提取物和卵磷脂，得到混合料液；以及
将纯化水在搅拌下加热至50～60℃，再在50～60℃下持续搅拌后，在搅拌下逐滴加入所述混合料液、并在50～60℃下搅拌28～32h。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，在将所述纯化水在搅拌下加热至50～60℃后，再在50～60℃下持续搅拌20～40min后，再滴加所述混合料液。
6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，还包括：将反应终止液进行冷冻干燥的步骤，所述反应终止液为在所述纯化水中逐滴加入所述混合料液并在50～60℃下搅拌28～32h后形成的溶液。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，在制备所述混合料液和所述反应终止液的过程中，搅拌的转速为700～1000rmp。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，在制备所述反应终止液的过程中，所述混合料液的滴加速率为1～3滴/秒。
9.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述混合料液中所述菊花提取物与所述卵磷脂的质量比为1：3～5。
10.一种用于治疗肺部慢性炎症损伤的菊花纳米制剂，其特征在于，所述菊花纳米制剂由权利要求4～9任一项所述的制备方法制得的。
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CN104840807A (zh) * 2015-04-20 2015-08-19 黔西南苗药研究所 一种清肺解毒抗霾饮品及其制备方法
CN107137473A (zh) * 2017-05-09 2017-09-08 江磊 一种山楂脂质纳米制剂及其制备方法与应用

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