CN111759826B - 一种姜黄素粉雾吸入制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种姜黄素粉雾吸入制剂，包括有以下原料：姜黄素、脂质材料、硬脂酸聚氧乙烯酯、泊洛沙姆188、吐温‑80、冻干保护剂、乳糖和水；制备方法为：(1)称取各原料；(2)将姜黄素、脂质材料和硬脂酸聚氧乙烯酯加入无水乙醇中溶解，得到有机相；(3)将泊洛沙姆188和吐温‑80加入水中溶解，得到水相；(4)将有机相加入水相中，除去无水乙醇；(5)加入冷水中，冷水浴持续搅拌，过滤；(6)加入冻干保护剂，冻干；(7)加入乳糖，过筛，即得。本发明由于不使用抛射剂和溶剂，依靠气流使药物粉末雾化，进而使药物粉末传递到肺部，具有应用方便、吸收迅速、靶向定位的特点。

Description

一种姜黄素粉雾吸入制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体的说是涉及一种粉雾吸入制剂，更具体的说是涉及一种姜黄素粉雾吸入制剂及其制备方法。
背景技术
姜黄素是从姜科、天南星科中的一些植物的根茎中提取的一种化学成分，其中，姜黄约含3％-6％，是植物界很稀少的具有二酮的色素，为二酮类化合物。其主要生物活性成分为姜黄素类和挥发油，前者具有降血脂、抗凝、抗氧化、利胆、抗癌等作用，后者主要起抗炎、抗菌以及止咳作用。姜黄素类通过诱导恶性肿瘤细胞分化、诱导肿瘤细胞凋亡及对肿瘤生长各期的抑制效应来发挥其抗癌作用，临床应用十分广泛，特别是姜黄素通过抗炎发挥对慢性阻塞性肺疾病(COPD)和哮喘等具有显著的治疗作用，因此在预防和治疗肺部疾病如肺纤维化、肺癌等方面展现出良好的治疗价值和应用前景。但是姜黄素口服吸收较差，生物利用度低，而药物到达肺部的剂量决定其疗效，从而限制了姜黄素药效的发挥。
粉雾吸入制剂，系指微粉化药物或与载体以胶囊、泡囊或多剂量贮存形式，采用特制的干粉吸入装置，由患者主动吸入雾化药物至肺部的制剂，亦称为干粉吸入剂。采用粉雾吸入制剂具有以下优点：1.药物到达肺部后，可直接进入体循环发挥治疗作用；2.药物吸收迅速、起效快、无肝脏首过效应；3. 无胃肠道刺激或降解作用；4.可用于胃肠道难以吸收的水溶性药物(代替注射剂)；5.局部作用的药物，给药剂量明显降低，毒副作用小；6.可用于大分子药物或小分子药物。
但是，目前有关姜黄素粉雾吸入制剂的研究未见报道。
因此，如何提供一种用于治疗肺部炎症、肺纤维化的姜黄素缓释粉雾吸入制剂是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种姜黄素粉雾吸入制剂及其制备方法，以解决现有技术中的不足。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种姜黄素粉雾吸入制剂，包括有以下重量比的原料：姜黄素：脂质材料：硬脂酸聚氧乙烯酯：泊洛沙姆188：吐温-80：冻干保护剂：乳糖：水＝1-1.25： 9-11：19-22：9-11：19-22：36-44：64-79：1800-2200，优选为：姜黄素：脂质材料：硬脂酸聚氧乙烯酯：泊洛沙姆188：吐温-80：海藻糖：乳糖：水＝1： 10：20：10：20：40：70：2000。
本发明的有益效果在于，本发明将姜黄素脂质纳米混悬液微粉化后与吸入用乳糖以一定比例混匀后用于肺部吸入给药，靶向肺部，在提高姜黄素生物利用度、肺内沉积量和滞留时间的同时，减少其吸收入血，改善姜黄素治疗肺部疾病的疗效和降低毒副作用的目的，并进一步对该肺部递药系统吸入给药后的肺内细胞摄取、细胞毒性和肺部刺激性进行评估，为姜黄素治疗肺部炎症和纤维化提供了一种安全高效的肺部缓释递送策略。
进一步，上述脂质材料为单硬脂酸甘油酯、山嵛酸甘油酯、硬脂酸、双硬脂酸甘油酯和三棕榈酸甘油酯中的至少一种。
采用上述进一步的有益效果在于，纳米载体作为给药系统，特别是作为肺部给药系统的一个困难在于其载药量低。由于当液态的纳米给药系统的固态脂质浓度较小时，制备的固体脂质纳米粒溶液体系较稳定，而在液态纳米粒固化的过程中，粒子间不容易碰撞絮集；而随着固态脂质的浓度增大时，粒子相互间碰撞絮凝的几率变大，在固化过程中容易相互碰撞变成大粒子，固体脂质纳米粒的粒径变大，导致整个体系不稳定。因此采用脂溶性的固态脂质材料对难溶性药物(姜黄素)具有很好的包封效果，即使用较少的脂质材料可实现对难溶性药物的良好包载。单硬脂酸甘油酯和三硬脂酸甘油酯均是由长链脂肪酸和甘油经酯化而成，由于两种脂质材料所含的碳链数量的不同，导致其油水分配细数的不同；山嵛酸甘油酯是由山嵛酸与甘油经酯化，是单、双、三山嵛酸甘油酯的混合物。申请人对上述几种脂质材料制备的姜黄素固体脂质纳米粒进行考察结果显示，采用相同工艺参数(不同脂质材料) 制得的姜黄素固体脂质纳米粒，其粒径均为20nm左右，粒径分布较窄，Zeta 电位均为-20mV以上，IC50均为2.5mg/mL左右。
进一步，上述硬脂酸聚氧乙烯酯为PEG-25硬脂酸酯、PEG-36硬脂酸酯、 PEG-40硬脂酸酯和PEG-45硬脂酸酯中的至少一种。
采用上述进一步的有益效果在于，聚氧乙烯脂肪酸酯型非离子表面活性剂是环氧乙烷与含有活泼氢的化合物进行加成反应的产物，具有优异的表面性能，特点是在水溶液中不离解，具有优良分散、乳化和增溶等性能。本发明所选聚氧乙烯型表面活性剂在溶液中稳定性高，相容性好，易生物降解，还具有混合复配性能强等优点。
进一步，上述冻干保护剂为海藻糖或甘露醇。
采用上述进一步的有益效果在于，脂质纳米载体微粉化采用冷冻干燥法，冷冻干燥的过程中形成的冰晶可能会使脂质颗粒聚集融合，因膜内外冰晶形成速度不同，会引起渗透压差，造成颗粒裂解，因此在冻干前加入冻干保护剂，可减弱或消除冻干工艺对脂质纳米载体的破坏。与其他作为冻干保护剂的糖类相比，海藻糖或甘露醇具有更强的水合能力、高玻璃化相转变温度、抗高温潮湿能力，对于夏季高温高湿的情况性能尤为明显。
进一步，上述乳糖为400目吸入用乳糖，具体为α-一水乳糖：
Figure BDA0002619610170000031
400。
采用上述进一步的有益效果在于，通过筛分和研磨得到的乳糖符合相关的药典要求并且有严格控制的粒径分布。在干粉吸入剂中乳糖不仅仅是个填充剂，它还和吸入干粉的有效性和安全性息息相关。
Figure BDA0002619610170000041
400为经研磨得到的超细粉α-一水乳糖，中位值8μm，与普通乳糖相比，具有符合肺部吸入给药的粉体学性能，并严格控制其微生物指标和内毒素稳定的高质量的产品是通过一套经过优化的标准生产过程来确保的。
一种姜黄素粉雾吸入制剂的制备方法，具体包括以下步骤：
(1)按上述姜黄素粉雾吸入制剂的重量比称取各原料；
(2)将姜黄素、脂质材料和硬脂酸聚氧乙烯酯加入无水乙醇中，在温度为75-80℃、速度为420-900rpm的条件下恒温磁力搅拌1-3min至溶解，得到有机相，备用；其中，无水乙醇的加入量为姜黄素、单硬脂酸甘油酯和硬脂酸聚氧乙烯酯质量之和的15.2-17.8倍；
(3)将泊洛沙姆188和吐温-80加入水中，在温度为70-78℃、速度为 420-900rpm的条件下恒温磁力搅拌3-5min至溶解，得到水相；
(4)将有机相在温度为70-78℃、速度为1020-1300r/min的恒温磁力搅拌条件下加入水相中，然后升温至80-88℃持续搅拌6-10h除去无水乙醇，得到热悬液；
(5)将热悬液在速度为1000-1360r/min的恒温磁力搅拌条件下加入等体积的0-4℃冷水浴中，冷水浴持续搅拌2-3h，过0.45μm滤膜，得到姜黄素纳米混悬液；
(6)向姜黄素纳米混悬液中加入海藻糖，溶解混匀后进行冻干，得到姜黄素纳米冻干混合粉末；其中，冻干的温度为程序冻干，具体设置如下：S1： -35℃，2-3h；S2：-25℃，6-8h(S2开始抽真空)；S3：-20℃，6-8h；S4：-15℃， 5-7h；S5：-10℃，4-6h；S6：0℃，6-8h；S7：10℃，2-6h，冻干完毕；
(7)向姜黄素纳米冻干混合粉末中加入乳糖，混匀后过180-250目筛，即得用于肺部缓释递送姜黄素的纳米粉雾吸入制剂(Cur-SLN-DPI，姜黄素固体脂质纳米粒干粉吸入剂，其中Cur指姜黄素，SLN指固体脂质纳米粒，DPI 指干粉吸入剂)。
经由上述的技术方案可知，与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
1、本发明粉雾吸入制剂为可吸入纳米药物，在肺部能实现提高其生物利用度和缓释性能，将药物(姜黄素)包裹于纳米载体内能减少药物对肺部的不良反应和对肺黏膜纤毛的损伤，从而达到降低给药剂量和用药频率、减少全身作用和提高疗效的目的；
2、本发明粉雾吸入制剂经吸入可以快速沉降在肺部，能避免或减少身体其他部位的毒副作用，肺部吸收面积大，膜通透性高，血流丰富，药物吸收迅速，无肝脏首过效应，有利于提高药物的生物利用度和在肺部的药物浓度；
3、由于不使用抛射剂和溶剂，依靠气流使药物粉末雾化，进而使药物粉末传递到肺部，具有应用方便、吸收迅速、靶向定位的特点，是一种新型给药系统。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
其中：
图1为实施例1Cur-SLN混悬液粒径分布图；
图2为实施例1Cur-SLN混悬液Zeta电位图；
图3为实施例1制得的Cur-SLN-DPI干粉粒径分布图；
图4为空白SLN-DPI干粉SEM电镜图；
图5为实施例1制得的Cur-SLN-DPI干粉SEM电镜图；
图6为实施例1姜黄素的DSC图；
图7为实施例1
Figure BDA0002619610170000061
400吸入乳糖的DSC图；
图8为实施例1空白SLN干粉的DSC图；
图9为实施例1Cur-SLN干粉的DSC图；
图10为实施例1Cur-SLN-DPI干粉的DSC图；
图11为给药7d后空气对照组大鼠的肺脏病理切片图；
图12为给药7d后空白-SLN-DPI干粉组大鼠的肺脏病理切片图；
图13为给药7d后Cur-SLN-DPI干粉组大鼠的肺脏病理切片图；
图14为模型组气管HE染色结果；
图15为吸入Cur-SLN-DPI干粉高剂量组气管HE染色结果；
图16为模型组肺HE染色结果；
图17为吸入Cur-SLN-DPI干粉高剂量组肺HE染色结果。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
姜黄素粉雾吸入制剂，包括有以下重量的原料：姜黄素1g、单硬脂酸甘油酯10g、PEG-25硬脂酸酯20g、泊洛沙姆18810g、吐温-8020g、海藻糖40g、
Figure BDA0002619610170000062
400吸入乳糖70g和水2000g。
制备方法，具体包括以下步骤：
(1)按上述姜黄素粉雾吸入制剂的重量称取各原料；
(2)将姜黄素、单硬脂酸甘油酯和PEG-25硬脂酸酯加入500g无水乙醇中，置于恒温磁力搅拌器上，在温度为78℃、速度为900rpm的条件下恒温磁力搅拌2min至溶解，得到有机相，备用；
(3)将泊洛沙姆188和吐温-80加入水中，置于恒温磁力搅拌器上，在温度为75℃、速度为900rpm的条件下恒温磁力搅拌5min至溶解，得到水相；
(4)将有机相在温度为75℃、速度为1200r/min的恒温磁力搅拌条件下缓慢加入水相中，然后升温至80-88℃持续搅拌8h除去无水乙醇，得到热悬液；
(5)将热悬液在速度为1200r/min的恒温磁力搅拌条件下快速加入等体积的0℃冷水中，冷水浴持续搅拌3h，过0.45μm滤膜，得到Cur-SLN混悬液；
(6)向Cur-SLN混悬液中加入海藻糖作为冻干保护剂，溶解混匀后装入表面皿，放入FDU-2110程序冻干仓内，设置程序，在S1：-35℃，3h；S2： -25℃，8h(S2开始抽真空)；S3：-20℃，8h；S4：-15℃，6h；S5：-10℃， 6h；S6：0℃，8h；S7：10℃，6h下冻干，得到淡黄色、疏松的Cur-SLN混合粉末；
(7)向Cur-SLN混合粉末中加入
Figure BDA0002619610170000071
400，混匀后过250目筛，即得姜黄素粉雾吸入制剂。
实施例2
姜黄素粉雾吸入制剂，包括有以下重量的原料：姜黄素1g、山嵛酸甘油酯9g、PEG-36硬脂酸酯19g、泊洛沙姆1889g、吐温-8019g、海藻糖36g、
Figure BDA0002619610170000072
40064g和水1800g。
制备方法，具体包括以下步骤：
(1)按上述姜黄素粉雾吸入制剂的重量称取各原料；
(2)将姜黄素、山嵛酸甘油酯和PEG-36硬脂酸酯加入440g无水乙醇中，置于恒温磁力搅拌器上，在温度为75℃、速度为420rpm的条件下恒温磁力搅拌1min至溶解，得到有机相，备用；
(3)将泊洛沙姆188和吐温-80加入水中，置于恒温磁力搅拌器上，在温度为70℃、速度为420rpm的条件下恒温磁力搅拌3min至溶解，得到水相；
(4)将有机相在温度为70℃、速度为1020r/min的恒温磁力搅拌条件下缓慢加入水相中，然后升温至80℃持续搅拌6h除去无水乙醇，得到热悬液；
(5)将热悬液在速度为1000r/min的恒温磁力搅拌条件下快速加入等体积的0℃冷水中，冷水浴持续搅拌2h，过0.45μm滤膜，得到Cur-SLN混悬液；
(6)向Cur-SLN混悬液中加入海藻糖作为冻干保护剂，溶解混匀后装入表面皿，放入FDU-2110程序冻干仓内，设置程序，在S1：-35℃，2h；S2： -25℃，6h(S2开始抽真空)；S3：-20℃，6h；S4：-15℃5h；S5：-10℃，4h； S6：0℃，6h；S7：10℃，2h下冻干，得到淡黄色、疏松的Cur-SLN混合粉末；
(7)向Cur-SLN混合粉末中加入
Figure BDA0002619610170000081
400，混匀后过180目筛，即得姜黄素粉雾吸入制剂(Cur-SLN-DPI)。
实施例3
姜黄素粉雾吸入制剂，包括有以下重量的原料：姜黄素1.25g、双硬脂酸甘油酯11g、PEG-40硬脂酸酯22g、泊洛沙姆18811g、吐温-8022g、甘露醇 44g、
Figure BDA0002619610170000082
40079g和水2200g。
制备方法，具体包括以下步骤：
(1)按上述姜黄素粉雾吸入制剂的重量称取各原料；
(2)将姜黄素、双硬脂酸甘油酯和PEG-40硬脂酸酯加入610g无水乙醇中，置于恒温磁力搅拌器上，在温度为80℃、速度为900rpm的条件下恒温磁力搅拌3min至溶解，得到有机相，备用；
(3)将泊洛沙姆188和吐温-80加入水中，置于恒温磁力搅拌器上，在温度为78℃、速度为900rpm的条件下恒温磁力搅拌5min至溶解，得到水相；
(4)将有机相在温度为78℃、速度为1300r/min的恒温磁力搅拌条件下缓慢加入水相中，然后升温至88℃持续搅拌8h除去无水乙醇，得到热悬液；
(5)将热悬液在速度为11360r/min的恒温磁力搅拌条件下快速加入等体积的4℃冷水中，冷水浴持续搅拌3h，过0.45μm滤膜，得到Cur-SLN混悬液；
(6)向Cur-SLN混悬液中加入甘露醇作为冻干保护剂，溶解混匀后装入表面皿，放入FDU-2110程序冻干仓内，设置程序，在S1：-35℃，3h；S2： -25℃，8h(S2开始抽真空)；S3：-20℃，8h；S4：-15℃，7h；S5：-10℃， 6h；S6：0℃，8h；S7：10℃，6h下冻干，得到淡黄色、疏松的Cur-SLN混合粉末；
(7)向Cur-SLN混合粉末中加入
Figure BDA0002619610170000091
400，混匀后过250目筛，即得姜黄素粉雾吸入制剂(Cur-SLN-DPI)。
性能测试
以下性能测试试验过程中，所有取材均来自于实施例1。
1、Cur-SLN混悬液粒径测定试验
取实施例1步骤(5)得到的Cur-SLN混悬液适量，蒸馏水稀释，使用纳米粒度仪(SZ-100V2型纳米颗粒分析仪，HORIBA日本堀场)测定粒径及 Zeta电位。试验结果如图1和图2所示。
由图1可知，粒径测定结果D50为14.7nm，平均粒径为16.0nm；
由图2可知，PI(等电点)为0.319，Zeta电位为-21.6mV。
2、Cur-SLN-DPI粒径测定试验
取实施例1制得的Cur-SLN-DPI干粉适量，使用HELOS激光粒度仪 (HELOS-OASIS型激光粒度仪，德国新帕泰克)测定粉末粒径。试验结果如图3所示。
由图3可知，实施例1制得的Cur-SLN-DPI干粉的体积平均粒径(VMD) 为4.48μm。
3、Cur-SLN-DPI形态测定试验
取实施例1制得的Cur-SLN-DPI干粉适量，以空白SLN-DPI干粉作为对照，分别使用扫描电子显微镜(SEM)(S3400型扫描电子显微镜，日立Hitachi) 进行测定。试验结果如图4和图5所示。
由图4和图5可知，与具有多孔结构的空白SLN-DPI干粉相比，加入赋形剂的载药Cur-SLN-DPI干粉具有更为粗糙的表面，可以吸附更多的载药 SLN，最大程度减少了微粒间的接触面积防止结块和团聚，从而提高微粒的流动性和吸入性能。
4、Cur-SLN-DPI的理化性质测定试验
取实施例1制得的Cur-SLN-DPI干粉适量，进行理化性质测定。测定结果如下：
本品为淡黄色粉末，在水中约30s可完全溶解，经测定休止角为24.02°，流动性较好，临界相对湿度为67％，水分测试结果为5.2％，主药含量为99.28％。
5、Cur-SLN-DPI体外气溶胶分散性能测定试验
取实施例1制得的Cur-SLN-DPI干粉适量，采用NGI(Next generation impactor，Copley气雾粉雾两用新一代NGI药用撞击器)测定Cur-SLN-DPI 干粉干粉的体外气溶胶分散性能，将每个阶段收集的沉积粉末溶于流动相，高效液相色谱(HPLC)法测定Cur的浓度，计算排空率(EF)、细颗粒比例 (FPF)和可吸入分数(RF)，根据NGI结果计算质量中值空气动力学直径 (MMAD)和几何标准偏差(GSD)。结果如表1所示。
表1Cur-SLN-DPI体外气溶胶分散性能测定结果
Figure BDA0002619610170000101
Figure BDA0002619610170000111
由表1可知，实施例1制得的Cur-SLN-DPI干粉具有较好的流动性和FPF (42.38±0.15％)。
6、Cur-SLN-DPI差示扫描量热(DSC)分析试验
分别对实施例1原料中的姜黄素、
Figure BDA0002619610170000112
400以及空白SLN干粉、 Cur-SLN干粉和Cur-SLN-DPI干粉进行热分析。试验结果如图6-11所示。
由图6-10可知，DSC结果显示，姜黄素在183℃具有特征吸热峰，而
Figure BDA0002619610170000113
400、空白SLN干粉、Cur-SLN干粉和Cur-SLN-DPI干粉的DSC显示相应的特征峰，而无药物峰，表明SLN在干粉微粒中均匀分散，药物以无定形状态存在。
7、Cur-SLN-DPI体外释放试验
称取姜黄素溶液和实施例1制得的Cur-SLN-DPI干粉适量，分别加入 50mL新鲜配置的人工肺液(含0.5％吐温-80)，将锥形瓶放于100rpm，37℃的摇床中，于0.083、0.25、0.5、1、2、3、4、6、8、12、24、36、48h取样测定姜黄素的含量。结果如表2所示。
表2姜黄素溶液和Cur-SLN-DPI体外释放试验结果
Figure BDA0002619610170000114
由表2可知，姜黄素原药溶液在12h内累积释放达到90％以上，而 Cur-SLN-DPI干粉具有更好的释放性能。对累积释药曲线拟合结果显示 Higuchi模型模拟度最高。
8、体外细胞毒性试验
(1)根据细胞的大小和生长速度将适量细胞接种到96孔细胞培养板中，使待检测时细胞密度不超过80-90％；
(2)吸去培养液，用PBS液洗涤一次，然后换新鲜培养液(无血清培养液，200μL/孔)，将各培养孔分成如下几组：包括无细胞的培养液孔(背景空白对照孔)，未经药物处理的对照细胞孔(样品对照孔)，未经药物处理的用于后续裂解的细胞孔(样品最大酶活性对照孔)，以及药物处理的细胞孔(药物处理样品孔)，1小时后从细胞培养箱里取出细胞培养板，在“样品最大酶活性对照孔”中加入试剂盒提供的LDH释放试剂10μL，反复吹打数次混匀，然后继续在细胞培养箱中孵育1小时；
(3)到达预定时间后，将细胞培养板用离心机400g离心5min，分别取各孔的上清液120μL，加入到一新的96孔板相应孔中；
(4)各孔分别加入60μL LDH检测工作液；
(5)混匀，室温(约25℃)避光孵育30min，然后在490nm处测定吸光度；
(6)计算细胞毒性或死亡率(％)＝(处理样品吸光度－样品对照孔吸光度)/(细胞最大酶活性的吸光度－样品对照孔吸光度)×100％。
结果显示，空白SLN-DPI细胞毒性实验结果为IC50＝2.81mg/mL。
9、大鼠肺部及气道刺激性研究试验
取SD大鼠15只，分为3组，空气对照组、空白-SLN-DPI干粉组和 Cur-SLN-DPI干粉组，采用肺部干粉给药器一次最大剂量推注进行肺部给药，连续给药7d，然后处死大鼠，分离肺组织，置35％甲醛液中固定，染色，制作病理切片，观察肺组织损伤情况。试验结果如图11-13所示。
由图11-13可知，对大鼠给予含药SLN干粉和空白SLN干粉7d后，同空气对照组相比，大鼠肺部未见明显炎性反应。
以上试验结果表明，本发明制得的Cur-SLN-DPI干粉无明显肺部毒性。
10、小鼠急性毒性给药研究试验
(1)分组：小鼠适应性喂养3d，隔夜禁食后，随机分成3组，即正常对照组、空白SLN-DPI组和Cur-SLN-DPI组，每组13只，10只为正式观察动物，3只为备用动物；
(2)给药：正常对照组小鼠尾静脉注射生理盐水；空白SLN-DPI组小鼠采用急性毒性试验方法中的最大给药量法给予空白Cur-SLN生理盐水溶液，浓度为80mg/mL，尾静脉注射25mL/kg；Cur-SLN-DPI组小鼠按照急性毒性试验方法中序贯法规定限度试验进行，因为限度剂量为2000mg/kg，将 Cur-SLN-DPI配制成80mg/mL的溶液，尾静脉注射25mL/kg，单次给药，连续观察14d。
正常对照组和空白SLN-DPI组小鼠注射2000mg/kg剂量即刻未见死亡，空白SLN-DPI组小鼠注射后自发活动、梳理毛发活动及进食量与正常对照组无差异；而Cur-SLN-DPI组小鼠注射1500mg/kg剂量未见死亡，但出现自发活动、梳理毛发活动明显减少，多为俯卧状态，部分小鼠出现行动迟缓、进食量明显减少的情况。注射2h～14d期间，各组小鼠均未见死亡，且 Cur-SLN-DPI组小鼠注射即刻出现的不良反应于注射2h后逐渐减轻，8h后完全消失。
(3)体质量及其增长率：分别称量各组小鼠给药前和给药后7、14d的体质量并记录进行体重检验。检验结果如表3所示。
表3小鼠不同时间的体质量变化结果(x±s，n＝10)
组别 n 给药前体重 7d体重 14d体重
正常对照组 10 21.170±0.925 34.990±2.235 41.250±3.186
空白SLN-DPI组 10 21.440±0.753 33.960±2.479 40.640±1.886
Cur-SLN-DPI组 10 21.500±1.275 34.240±2.984 40.740±2.783
由表3可知，给药后7d和14d，Cur-SLN-DPI组和空白SLN-DPI组小鼠体质量及其增长率与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。
11、大鼠肺部组织分布试验
健康的SD大鼠，随机分成3组，实验过程中严格遵守动物伦理委员会的规定。实验前禁食至少12h，自由饮水，按照50mg/kg给药剂量配置A组(Cur 原药溶液)、B组(Cur-SLN-DPI复溶混悬液)和C组(Cur-SLN-DPI干粉)。 A组和B组为尾静脉给药组，C组为肺部给药组采用DP-4肺部给药器。分别于0.083、0.167、0.25、0.5、1、2、4、6、8、12、24、36和48h将6只大鼠用乙醚麻醉后放血处死，解剖分离大鼠肺组织，用生理盐水清洗表面血水，定性滤纸将肺表面擦干。精密称定，-20℃条件贮存待测，测定姜黄素含量。
经测定，与静脉给药组相比，C组大鼠肺组织AUC为(28.15±5.18)μg.h/g， B组为(12.52±2.41)μg.h/g，A组为(6.28±1.40)μg.h/g，由于肺部为病变的主要部位。
因此，大鼠肺部组织分布试验表明，采用肺部给药递送Cur-SLN-DPI干粉可使得姜黄素更多的分布于大鼠肺组织，更有利于药效的发挥。
12、Cur-SLN-DPI改善小鼠小鼠肺部炎症的情况试验
健康雄性小鼠，随机分为4组，模型组、阳性对照组(布地奈德)、吸入 Cur-SLN-DPI干粉高剂量组和吸入Cur-SLN-DPI干粉低剂量组。采用气管内滴注猪胰蛋白酶(100U/kg体重)造模，7d后模型组和给药组分别连续14d 吸入给予布地奈德干粉和Cur-SLN-DPI干粉，造模21d后，取材进行气管BALF 灌洗液检测，肺部HE染色检查。试验结果如图14-17所示。
BALF灌洗液白细胞分类计数结果显示，与正常组比较，模型组小鼠BALF 中白细胞总数、淋巴细胞数、中性粒细胞数、嗜酸性粒细胞数均明显增加(p ＜0.01)，表明肺部炎症模型建立成功。与模型组相比，各给药组BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数和淋巴细胞数均明显减少(p＜ 0.01)，其中以吸入Cur-SLN-DPI干粉高剂量组效果最佳。
HE染色结果显示，模型组气管组织水肿，可见中度嗜酸性粒细胞及淋巴细胞浸润，少量血管扩张，局部软骨受累，大量炎细胞浸润；肺内可见肺泡壁明显增厚，间隔增宽，大量炎细胞浸润(以嗜中性粒细胞及淋巴细胞为主)，肺泡壁毛细血管丰富，可见肺出血；局部纤维化明显；可见肺脓肿。吸入 Cur-SLN-DPI干粉高剂量组小鼠气管轻度组织水肿，少量嗜酸性粒细胞浸润；肺内病变较模型组明显减轻，可见肺泡壁增厚，间隔增宽，少量炎细胞浸润(以淋巴细胞为主)，肺泡壁毛细血管丰富；偶见肺泡断裂。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (2)

1.一种姜黄素粉雾吸入制剂，其特征在于，包括有以下重量比的原料：姜黄素：脂质材料：硬脂酸聚氧乙烯酯：泊洛沙姆188：吐温-80：冻干保护剂：乳糖：水＝1-1.25：9-11：19-22：9-11：19-22：36-44：64-79：1800-2200；
所述脂质材料为单硬脂酸甘油酯、山嵛酸甘油酯、硬脂酸、双硬脂酸甘油酯和三棕榈酸甘油酯中的至少一种；
所述硬脂酸聚氧乙烯酯为PEG-25硬脂酸酯、PEG-36硬脂酸酯、PEG-40硬脂酸酯和PEG-45硬脂酸酯中的至少一种；
所述冻干保护剂为海藻糖或甘露醇；
所述乳糖为400目吸入用乳糖。
2.一种姜黄素粉雾吸入制剂的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：
(1)按权利要求1所述姜黄素粉雾吸入制剂的重量比称取各原料；
(2)将姜黄素、脂质材料和硬脂酸聚氧乙烯酯加入无水乙醇中，恒温磁力搅拌溶解，得到有机相，备用；其中，所述无水乙醇的加入量为姜黄素、脂质材料和硬脂酸聚氧乙烯酯质量之和的15.2-17.8倍；所述恒温磁力搅拌的温度为75-80℃，速度为420-900rpm，时间为1-3min；
(3)将泊洛沙姆188和吐温-80加入水中，恒温磁力搅拌溶解，得到水相；其中，所述恒温磁力搅拌的温度为70-78℃，速度为420-900rpm，时间为3-5min；
(4)将有机相在恒温磁力搅拌条件下加入水相中，然后升温持续搅拌除去无水乙醇，得到热悬液；其中，所述恒温磁力搅拌的温度为75-78℃，速度为1020-1300r/min；所述升温至80-88℃，所述升温持续搅拌的时间为6-10h；
(5)将热悬液在恒温磁力搅拌条件下加入冷水中，冷水浴持续搅拌，过0.45μm滤膜，得到混悬液；其中，所述恒温磁力搅拌的速度为1000-1360r/min；所述冷水与所述热悬液的体积比为1:1，冷水温度为0-4℃；所述持续搅拌的时间为2-3h；
(6)向混悬液中加入冻干保护剂，溶解混匀后进行冻干，得到混合粉末；其中，所述冻干过程为程序冻干，具体设置为：S1：-35℃，2-3h；S2：-25℃，6-8h；S3：-20℃，6-8h；S4：-15℃，5-7h；S5：-10℃，4-6h；S6：0℃，6-8h；S7：10℃，2-6h；
(7)向混合粉末中加入乳糖，混匀后过筛，即得所述姜黄素粉雾吸入制剂，其中，所述过筛的筛网目数为180-250目。
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Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1301535A (zh) * 1999-12-24 2001-07-04 天津市医药科学研究所 姜黄色素治疗乙型肝炎的应用
CN101396334A (zh) * 2008-10-16 2009-04-01 南京医科大学 姜黄素脂质载体及其制备方法
CN105343003A (zh) * 2015-11-16 2016-02-24 南京中医药大学 用于治疗阿尔兹海默病的鼻用粉雾剂及其制备方法
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Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1301535A (zh) * 1999-12-24 2001-07-04 天津市医药科学研究所 姜黄色素治疗乙型肝炎的应用
CN101396334A (zh) * 2008-10-16 2009-04-01 南京医科大学 姜黄素脂质载体及其制备方法
CN105343003A (zh) * 2015-11-16 2016-02-24 南京中医药大学 用于治疗阿尔兹海默病的鼻用粉雾剂及其制备方法
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