CN107446913A - 具有表面层的用于以干燥模式递送物质的组合物和方法 - Google Patents

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Abstract

本发明总体上涉及以干燥模式递送物质的组合物和方法,其中所述组合物包含置于组合物的外表面且对二氧化碳和氧气是可渗透的表面层。该组合物可用于递送微生物以便从土壤、水或空气中去除污染物,例如油、化学品、废物或者污水。在其它实施方案中,所述组合物还可用于递送液体食物、液体食物添加剂、液体生物科技农业成分、传统的液体农业成分、液体人类健康和膳食补充剂和液体香料和美容产品。

Description

具有表面层的用于以干燥模式递送物质的组合物和方法
发明背景
相关申请
本申请要求2010年10月5日提交的美国临时专利申请序列号61/390029和2010年10月5日提交的美国申请序列号12/898435,现公开为美国专利公开号2011/0082040的优先权,其还要求了2009年10月5日提交的61/248,724,2009年10月5日提交的61/248,776,2009年12月8日提交的61/267520的优先权,所有这些均通过引用以其整体结合。
发明领域
本发明总体涉及以干燥模式递送物质的组合物和方法。更特别地,本发明涉及具有表面层的以干燥模式递送物质的组合物和方法。
相关技术的描述
以干燥形式递送各种物质是非常难的。例如,当处于干燥形式时用于食用作物生长的许多基本矿物表现出吸湿性。由于其易于从大气中吸收水分,产生不容易流动的湿的、粘性团块(mess),这使得难以以干燥形式处理和储存这些矿物。吸湿性矿物通常被变成颗粒状并被涂覆或者经结晶以限制其天然吸湿性。尽管这使固体保持在可用的和可流动的形式,但这限制了其溶解在其它液体中用于最终应用的能力。然而,如果在被变成颗粒状之前将这些相同矿物溶解在水中,那么运输和处理该液化形式的矿物带来难题并且显著增加了与装运和处理相关的成本。将有利的是,提供用于以干燥、可流动形式(其很容易在水中溶解或者分散并被施加到作物或者其它应用)递送吸湿性物质的组合物和方法。
细胞生物例如酶、细菌和其它微生物通常不能忍受干燥状态。因此,通常必须将这些生物保持在湿润条件,如上所述,这产生与其装运和处理有关的某些困难。提供用于以干燥形式递送细胞生物的方法和组合物将是有利的。
一些物质在其液态下是相对不稳定的。例如,挥发性物质或者包含一个或多个羟基的物质必须被迅速使用,因为这些不稳定的液态物质可在几周后失去其功效。因此,将有利的是,提供用于递送以干燥形式装运的在稳定状态下的挥发性或不稳定性流体的组合物和方法。
发明概述
本发明涉及满足这些需求中至少一种的组合物和方法。本发明涉及具有表面层的组合物和以干燥模式递送作为组合物一部分的物质的方法。如本文所使用的,递送还可以包括运输、装运等。在一个实施方案中,所述物质可以是细菌、酶类、其它微生物、或者其组合。在另一个实施方案中,所述物质可以是液体添加剂(其可为有机的或无机的)。如本文所使用的,关于液体添加剂,“有机的”是指与生物相关的、来源于生物的或者具有生物性质或特性的物质。如本文所使用的,关于液体添加剂,“无机的”是指由矿物而不是具有生物的性质或特性的物质组成。示例性的液体添加剂包括液体食物、液体食物添加剂、液体生物技术农业成分、传统的液体农业成分、液体人类健康和膳食补充剂(liquid human wellnessand dietary supplement)以及液体香料和美容产品。
本发明的一个实施方案是用于以干燥模式递送微生物的组合物,其包含具有多孔结构的惰性载体基质(substrate)、贯穿惰性载体基质的孔而负载的微生物、和置于惰性载体基质的外表面上的表面层。在一个实施方案中,表面层可以是可选择性渗透的,以便表面层允许某些分子的运动,这有助于维持贯穿惰性载体基质而负载的微生物的细胞生长。在一个实施方案中,表面层对氧气和二氧化碳可以是可渗透的,以便组合物可用于(与不具有表面层的组合物相比)允许增加惰性载体基质孔中的微生物的繁殖。如本文所使用的,繁殖是指物质再生的能力。在一个实施方案中,表面层可用于允许氧气交换、营养物交换、呼吸、二氧化碳产生和消耗以及酶产生。
在一个实施方案中,惰性载体基质选自硅藻土、胡桃和山核桃壳、稻壳、纤维素粘土、蒙脱土、膨润土、羊毛、棉花、纤维素、玉米棒、纤维素壳、沉淀二氧化硅及其组合。在一个实施方案中,所述惰性载体基质可以是沉淀二氧化硅。
在一个实施方案中,该表面层可以包括有机相。本文所使用的关于表面层的有机相是指包括其分子中含有碳的一大类化学化合物中的任何一个的相。在一个实施方案中,该有机相可以是脂质、多糖、脂肪酸或其组合。在一个实施方案中,所述脂肪酸具有12-20个碳原子。在另一实施方案中,所述脂肪酸具有15-17个碳原子。在一个实施方案中,有机相可以包括非离子型基于植物的表面活性剂。优选的基于植物的表面活性剂包括但不限于聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80。在一个实施方案中,有机相可以包括脂肪酸醇、脂肪酸、脂质、卵磷脂(lethicin)或其组合。在一个实施方案中,脂肪酸醇具有12-20个碳原子。在一个实施方案中,脂肪酸醇可以包括十六/十八醇(cetearyl alcohol)、鲸蜡酯或其组合。在一个实施方案中,脂肪酸可以是饱和的、不饱和的或它们的组合。示例性的饱和脂肪酸包括但不限于:棕榈酸、硬脂酸、花生酸、山萮酸、肉豆蔻酸、木蜡酸或其组合。示例性的不饱和脂肪酸包括但不限于:油酸、棕榈油酸、亚油酸、亚麻酸、ω-3、ω-6或其组合。在一个实施方案中,脂肪酸可能的来源可以包括椰子油、棕榈油、植物油、鱼油或其组合。
在一个实施方案中,当将乳液和惰性载体基质混合时可形成所述有机相。此外,通过混合各成分的组合可形成乳液,其中所述成分选自脂质、多糖、脂肪酸、卵磷脂、基于植物的表面活性剂、乳化剂及其组合。
在另一个实施方案中,表面层对淡水基本上是不可渗透的。在另一个实施方案中,表面层对去离子水基本上是不可渗透的。在一个实施方案中,表面层可以被表面活性剂、油、有机溶剂、盐水、潮湿土壤或其组合渗透。在另一个实施方案中,表面层对表面活性剂、油、有机溶剂、盐水、潮湿土壤或其组合至少部分是可溶的。在另一个实施方案中,表面层还可不包含蛋白质。
在另一个实施方案中,表面层可包括角鲨烯、角鲨烷、C40类异戊二烯、磷脂酰甘油、双磷脂酰甘油、心磷脂、磷脂酰乙醇胺、单甘油磷酸酯或其组合。
在一个实施方案中,表面层可包括与被包含在细菌(原核生物)和真菌(真核生物)细胞壁中的组分类似的组分。在一个实施方案中,表面层可以以类似细胞壁的方式起作用,以便表面层可用于支持微生物的生存和繁殖。
在另一个实施方案中,用于以干燥模式递送微生物的组合物可以在不含沸石、铝硅酸盐、矿物粉末、和/或酸性聚合物下实施。在一个实施方案中,在干燥状态下应用时该组合物可用于分解在水中或土壤中的烃沉积物。在另一个实施方案中,所述组合物还可包括负载在惰性载体基质中的营养物,以便营养物和微生物接触,其中该营养物可用于向贯穿惰性载体基质的孔而负载的微生物提供食物来源以增强微生物的繁殖。
在另一个实施方案中,沉淀二氧化硅的孔限定了孔径分布,其中大量的孔具有在38-240纳米范围内的直径。在另一个实施方案中,微生物可以是细菌、酶类、真菌、古细菌、病毒、藻类、浮游生物、涡虫、原生生物或其组合。在另一个实施方案中,微生物可以是杆状菌和/或酶。在另一个实施方案中,组合物还包括贯穿惰性载体基质的孔而负载的营养物。在另一个实施方案中,营养物可以是氨、氮、铵态氮、尿素、葡萄糖、糊精、糖、蛋白质或其组合。在另一个实施方案中,组合物具有初始微生物数,并且组合物可用于维持大约50-400%初始微生物数达一段时间,优选至少45天。
在另一个实施方案中,用于以干燥模式递送挥发性流体的组合物包含具有多孔结构的惰性载体基质、置于惰性载体基质的外表面上的表面层、和贯穿惰性载体基质孔而负载的挥发性流体,其中所述表面层对氧气和二氧化碳是可渗透的,所述组合物具有按重量计的25-75%挥发性流体浓度,所述组合物可用于维持大约50-100%挥发性流体浓度达一段时间,优选至少45天,更优选至少90天,其中所述挥发性流体具有在25℃至少0.03atm的蒸气压。如本文所述的,术语“流体”应理解为包括液体、等离子体和气体。在另一个实施方案中,挥发性流体具有在25℃至少0.08atm的蒸气压。示例性的挥发性液体包括但不限于醇、汽油、柴油。
另一个实施方案是用于以干燥模式递送精油的组合物,其包含具有多孔结构的惰性载体基质、置于惰性载体基质的外表面上的表面层、和贯穿惰性载体基质的孔而负载的精油,其中所述表面层对氧气和二氧化碳是可渗透的,所述组合物具有按重量计的25-75%精油浓度,所述组合物可用于维持大约50-100%的该精油浓度达至少45天的时间。示例性的精油包括但不限于:琼脂木油(agar oil)、ajwain油、当归根油、茴香油、阿魏胶、香脂油、罗勒油、月桂油、香柠檬油、黑胡椒、布枯油、白桦、樟脑、大麻花、葛缕子油、豆蔻种子油、胡萝卜种子油、柏木油、甘菊油、菖蒲根、肉桂油、木犀花(cistus)、香茅油、鼠尾草、丁香叶油、咖啡、丁香叶油、胡荽、艾菊油、木香根、酸果蔓种子油、荜澄茄、枯茗油、柏木、干膜莎草(cypriol)、咖喱叶、印蒿油(davana oil)、莳萝油、土木香、桉树油、茴香种子油、冷杉、乳香油、高良姜、白松香、天竺葵油、生姜油、一枝黄花、葡萄柚油、指甲花油、蜡菊、山葵油、牛膝草、爱达荷艾菊(Idaho tansy)、茉莉油、杜松子油、薰衣草油、月桂树、杜春(ledum)、柠檬油、柠檬香草、酸橙、山苍子油、柑橘、马郁兰、白千层、蜜蜂花油(柠檬香油)、辣薄荷、欧洲风轮菜(mountain savory)、艾蒿油、芥子油、没药油、桃金娘、尼姆树油、橙花油、肉豆蔻、橙油、牛至油、鸢尾草油、玉檀香油、欧芹油、广藿香油、紫苏精油、薄荷油、胡椒薄荷油(peppermint oil)、苦橙叶、松树油、罗文莎叶、红杉木、白花春黄菊、蔷薇油、蔷薇果油、迷迭香油、红木油、鼠尾草油、檀香油、黄樟树油、香薄荷油、五味子油、留兰香油、甘松香油、云杉、八角油、橘子、龙嵩油、茶树油、百里香油、铁杉、姜黄、颉草、香根草油、西部红杉、冬青油、西洋蓍草油、依兰油(ylang-ylang)、片姜黄或其组合。
在另一实施方案中,用于以保持流动的干燥模式递送吸湿性化合物的组合物包含具有多孔结构的惰性载体基质、置于惰性载体基质外表面上的表面层、和贯穿惰性载体基质孔而负载的吸湿性化合物,其中所述表面层对氧气和二氧化碳是可渗透的,所述组合物具有按重量计的25-75%吸湿性化合物浓度,所述组合物可用于维持大约75-100%吸湿性化合物浓度达一段时间,优选至少45天,其中所述组合物在水中是可溶的并且当处于干燥模式时该组合物保持其易于流动的能力。在另一个实施方案中,所述组合物可具有超过一种吸湿性化合物。
在另一个实施方案中,组合物包含具有二氧化硅孔的惰性载体基质,置于该惰性载体基质外表面上的表面层,和负载到惰性载体基质中的液体添加剂,其中所述表面层对氧气和二氧化碳是可渗透的,其中液体添加剂分子的平均孔径小于二氧化硅孔的平均直径,并且其中所述组合物可用于从污染区域减少污染物。在另一个实施方案中,液体添加剂是细菌、营养物或其组合,污染区域是土壤、水或空气,和污染物是污水、油、污染物质或其组合。在另一个实施方案中,组合物未使用化学反应而形成。在另一个实施方案中,组合物未化学改变惰性载体基质的表面而形成。在另一个实施方案中,组合物是基本干燥的以便其可容易流动。在一个实施方案中,组合物可显示出在29.9°和42°之间的休止角。在一个实施方案中,可以通过将组合物倒入漏斗并允许组合物落到基板上,从而形成圆锥形堆来测定该休止角。然后可以从一部分圆锥形堆的下面移除一部分基板。板边缘形成的角可使用直尺并且读取角度测量。在另一个实施方案中,组合物具有15以下的卡尔指数值(Carrindex value)。卡尔指数是粉末可压缩性的指示。其通过下式计算:
其中VB是给定质量的粉末的自由沉降体积,和VT是相同质量的粉末的拍实体积。卡尔指数还可以表述为:
其中ρB是粉末的自由沉降堆密度,和ρt是粉末的拍实堆密度。在另一个实施方案中,组合物是不吸湿的。
在另一个实施方案中,本发明涉及惰性载体基质作为以干燥模式用于物质的递送剂的用途。在一个实施方案中,如果所述物质为固体形式,则可通过将物质熔融或溶解在载体流体例如水、醇、丙酮等中使该物质液化。一旦该物质为液态形式,则在有机相存在下可以直接将该物质添加到惰性载体基质中,并且和惰性载体基质混合以便使该物质灌注贯穿惰性载体基质。在惰性载体基质的外表面上还形成包含有机相的表面层以形成负载的产品(loaded product)。在一个另外的实施方案中,有机相可包括有效量的油、脂肪酸、蜡或其组合。在一个实施方案中,该有效量的脂肪酸可包括2-15%重量。在另一个实施方案中,该有效量的蜡可包括10-20%重量。在另一个实施方案中,该有效量的油可包括1-30%重量。该负载的产品接着可以和其它产品合并或者混合并且可用于各种各样的产品。有利的是,吸湿性物质可以被液化并被负载到惰性载体基质,从而允许以干燥模式处理。另外,不同类型的吸湿性材料可以一起被液化形成良好混合的以改进整体稠度的液体混合物。可将该液体混合物添加到惰性载体基质,从而允许生产具有高度稠度的负载的产品。类似地,通常被保持在湿润条件下以维持生存力的诸如酶类、细菌、其它微生物、营养物或其组合的物质可被负载到惰性载体基质中,从而允许以干燥模式处理。
在另一实施方案中,额外的益处是负载的产品具有增加的储存期和/或可以提供流体状态无法达到的额外的稳定性。例如,挥发性物质或者包含一个或多个羟基的物质。这些不稳定的流体物质可常常在几周后失去其功效,这意味着最终使用者必须尽快使用该流体物质。在某些实施方案中,这些相对不稳定的流体物质可以被负载到沉淀二氧化硅以增加其储存期和/或提供在流体状态下无法达到的额外稳定性。如本文所使用的,储存期通常是指产品可以被储存的推荐时间,在此期间在预期(或者特定)的分布、储存或者显示的条件下特定比例货物的限定质量保持可接受的。一些在其流体状态下的物质是相对不稳定的。
在另一实施方案中,微生物、活培养物和营养物可以以干燥的形式被递送。在另一实施方案中,可通过用培养物、营养物和有机相一起或者分别负载到沉淀二氧化硅至期望的容量来递送这些培养物和营养物,使得在惰性载体基质的外表面上形成表面层,同时营养物和培养物保持负载贯穿惰性载体基质的孔。随后负载的产品可以被施加到水上或者土壤中的污染物。在另一个实施方案中,本发明适用于溢出物,例如污水、油或其它类型的水上化学污染物,这是因为负载的产品粘附污染物并且使得培养物直接与其食物源接触,而不像液体应用,其可不粘附污染物而分散。本发明的实施方案还可以适用于垃圾中的废物。如在液体应用中,与一次全部释放微生物相比,当在一段时间内释放微生物时,在微生物的繁殖(已经观察到从~1.5到约15的因数)和延时释放效果(time release effect)方面还可观察到额外益处。
在另一个实施方案中,用于生物除污的方法可包括使用乳液负载惰性载体基质至期望容量以形成负载的产品,和将该负载的产品施加到具有污染物的区域,使得负载的产品粘附污染物和随后将污染物转变为气态产物和水从而从该区域消除污染物。在一个实施方案中,所述乳液可以包括有机相和水相,其中水相可以包括水和微生物。在另一个实施方案中,水相还可以包括营养物,其中该营养物是水溶性的。在另一实施方案中,有机相可以包含非离子型基于植物的表面活性剂。在另一实施方案中,有机相可以包括脂肪酸醇、脂肪酸、脂质和卵磷脂。在另一实施方案中,有机相可以包括脂质、脂肪酸和多糖。在另一实施方案中,所述区域可选自水和土壤。在另一实施方案中,所述污染物可选自污水、油及其组合。在一个实施方案中,可以通过航空或手工撒播散布的典型方法施加该负载的产品。对于较小的溢出物,优选手工撒播。对于较大的溢出物,特别是在开放水域、沼泽、湿地、河口区域,优选航空撒粉或用机械粉末泵撒布。在一个实施方案中,每立方码土壤可以添加大约0.4磅负载的产品。在另一个实施方案中,每英亩开放平滑水域可以添加大约50磅负载的产品。在其中区域包括沼泽、湿地或河口的实施方案中,取决于油的类型和污染水平,每英亩可使用至多75磅负载的产品。在优选的实施方案中,负载的产品被直接施加到污染物上。
液体食物添加剂的实例包括但不限于:酶类、细菌、益生菌(probiotics)、油性树脂、香料、矿物、植物提取物和防腐剂。在一个实施方案中,这些成分的递送可通过使用液体成分一起或分别负载到沉淀二氧化硅(优选食品级)至期望容量以形成负载后产品来实现。负载的产品随后可以适用于较大的配制配方或经包装用于后来的应用或水合作用。在其它实施方案中,本发明可适用于浓缩成分,例如各种各样的提取物、矿物、螯合矿物、醋、酒、酱油、辣椒沙司、橄榄油、精油、香料和经配制液体食物。用于液体食物添加剂的示例性酶包括蛋白酶、淀粉酶、纤维素、脂肪酶、酵母。
液体生物技术农业成分的实例包括但不限于:酶、细菌、营养物、润湿剂和矿物。这些成分的递送通过如下实现:使用液体成分一起或分别负载沉淀二氧化硅至期望容量,然后将负载的产品施加到较大的配制配方或经包装用于后来的应用或水合作用。在另一个实施方案中,本发明可适用于浓缩成分例如酶、细菌、营养物和矿物。在一个实施方案中,液体生物技术农业成分对于处理“有机”产品或在肥料、杀虫剂、除草剂等的应用和配制中是有利的。
传统的液体农业成分的实例包括但不限于:尿素、柠檬酸钾、单磷酸钾、氯化钾、氯化镁、硫酸盐、营养物和矿物。这些成分的递送通过如下实现:使用液体成分一起或分别负载沉淀二氧化硅至期望容量,然后将负载的产品施加到较大的配制配方或经包装用于后来的应用或水合作用。在另一实施方案中,本发明可适用于浓缩成分例如锌、锰、镁、硼、钾和磷。在一个实施方案中,在基于植物或非基于植物中,还可将碳添加到组合物中。有利的是,在6.0-6.5之间的pH值允许提高任何可能在负载的产品中的微生物或细菌的繁殖。在另一个实施方案中,负载的产品可以在具有约4至约11.5的pH和在约35℉至约170℉水温的淡水或盐水应用中使用。
液体人类健康和膳食补充剂的实例包括但不限于:精油和植物提取物,例如鱼油和其它膳食制品。这些成分的递送通过如下实现:使用液体成分一起或分别负载沉淀二氧化硅至期望容量,然后将负载的产品施加到较大的配制配方或经包装用于后来的应用或水合作用。在另一实施方案中,本发明可适用于浓缩成分例如鱼油、氨基酸、蛋白质和其它补充物。
用于生命科学产品的液体培养基混合物的实例包括但不限于:培养基混合要素例如血液培养基、大豆培养基(soy media)、糖培养基、淀粉培养基和其它类似的培养基。在另一个实施方案中,这些成分的递送通过如下实现:使用液体成分一起或分别负载沉淀二氧化硅至期望容量,然后将负载的产品施加到较大的配制配方或经包装用于后来的应用或水合作用。
液体香料和美容产品的实例包括但不限于:精油和植物提取物,例如香料、氨基酸和乙醇酸。在另一个实施方案中,这些成分的递送通过如下实现:使用液体成分一起或分别负载沉淀二氧化硅至期望容量,然后将负载的产品施加到较大的配制配方或经包装用于后来的应用或水合作用。在另一个实施方案中,本发明可适用于浓缩成分例如香料、酸和油。
本发明的另一个实施方案是用于生物除污的方法。该方法包括在有机相的存在下使用液体物质负载惰性载体基质至期望容量以形成具有表面层的负载的产品,并且将该负载的产品施加到具有污染物的区域,以便负载的产品粘附污染物并且随后将污染物转变成气态产物和水从而从该区域消除污染物。在另一个实施方案中,液体物质是微生物、营养物或其组合。在另一个实施方案中,所述区域是水或土壤。在另一个实施方案中,污染物是污水、油或其组合。
本发明提供了比传统的液体添加剂更多的益处包括易于使用、降低装运成本、易于运输和减少储存要求。
附图简述
考虑下面的描述、权利要求书和附图将更好的理解本发明的这些和其它特征、方面和优势。然而,需要注意的是附图仅说明本发明的几个实施方案并且因而不应该被认为是限制本发明的范围,因为其可认可其它等效的实施方案。
图1是与本发明实施方案的组合物的截面图。
本发明实施方案的详述
本发明的实施方案允许以干燥模式递送物质。在其最基本的形式中,将预定量的物质(如果最初为液体形式)添加到一定量的惰性载体基质并混合形成具有半渗透性表面层的负载的产品。如果物质最初是干燥形式,可通过本领域已知的各种方式使该物质液化,然后将其添加到一定量的惰性载体基质并混合形成负载的产品。负载的产品具有干燥、沙子状物质的稠度。负载的产品包括惰性载体物质和贯穿惰性载体基质内外表面而负载的液体物质,和惰性载体基质的外表面上的表面层。在一个实施方案中,表面层对二氧化碳和氧气是可渗透的。另外,表面层包括可以使用各种技术制备的有机相。负载的产品含有该物质的特性,但在触觉上是干燥的。在一个实施方案中,表面层未被擦掉或未在皮肤上留下油腻感。
在本发明的一个实施方案中,以干燥模式递送微生物的组合物包含具有多孔结构的惰性载体基质,对二氧化碳和氧气可渗透的表面层,和贯穿惰性载体基质的孔而负载的微生物。在另一个实施方案中,惰性载体基质的孔具有在38-240纳米范围内的直径。在另一个实施方案中,微生物选自细菌、酶、真菌、古生菌、病毒、藻类、涡虫、浮游生物、原生生物及其组合。在另一个实施方案中,所述组合物还可以包括贯穿惰性载体基质而负载的营养物。在另一个实施方案中,所述营养物选自氨、氮、铵态氮、尿素、葡萄糖、糊精、糖、蛋白质及其组合。在另一个实施方案中,该组合物具有初始微生物数,和所述组合物可用于维持约75-400%的起始细胞生物数达一段时间,优选至少45天。在某些实施方案中,在数天内已经观察到繁殖水平为初始数的30至100倍,并持续繁殖远超过120天。在一个实施方案中,表面层作用类似于可存在于细菌(原核生物)和真菌(真核生物)中的细胞壁,从而支持微生物生存和繁殖。
如前所述,在本发明的某些实施方案中沉淀二氧化硅被用作惰性载体基质。典型的沉淀二氧化硅的特性如下:范围从38-240纳米的孔径和10-1400微米的粒度。可用作本发明组合物和方法的某些实施方案部分的沉淀二氧化硅的实例是获自PPG Industries,Inc的二氧化硅产品。沉淀二氧化硅还可获自其它提供商,例如W.R.Grace和Company。典型的沉淀二氧化硅的另一特性是每克约140到约160平方米的表面积。
该发明中使用的微生物的实例是细菌、酶、真菌、古生菌、病毒、藻类、浮游生物、涡虫、原生生物或其组合。
细菌的实例包括但不限于:杆菌、原核生物和真核生物、革兰氏阳性和革兰氏阴性、放线菌(Actinobacteria)、厚壁菌(Firmicutes)、软壁菌(Tenericutes)、产水菌(Aquificae)、拟杆菌/绿菌(Bacteroidetes/Chlorobi)、衣原体/疣微菌(Chlamydiae/Verrucomicrobia)、异常球菌-栖热菌(Deinococcus-Thermus)、梭杆菌(Fusobacteria)、芽单胞菌(Gemmatimonadetes)、硝化螺菌(Nitrospirae)、变形菌(Proteobacteria)、螺旋体(Spirochaetes)、互养菌(Synergistetes)、酸杆菌(Acidobacteria)、绿屈挠菌(Chloroflexi)、产金菌(Chrysiogenetes)、蓝细菌(Cyanobacteria)、脱铁杆菌(Deferribacteres)、网球菌(Dictyoglomi)、纤维杆菌(Fibrobacteres)、浮霉状菌(Planctomycetes)、热脱硫杆菌(Thermodesulfobacteria)、栖热袍菌(Thermotogae)、蜂房芽孢杆菌(B.alvei)、解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)、炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、蜡状芽孢杆菌(B.cereus,)、环状芽孢杆菌(B.circulans)、凝结芽孢杆菌(B.coagulans)、枯草杆菌(B.globigii)、B.infernus、幼虫芽孢杆菌(B.larvae)、侧孢芽孢杆菌(B.laterosporus)、地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)、巨大芽孢杆菌(B.megaterium)、胶质芽孢杆菌(B.mucilaginosus)、纳豆芽孢杆菌(B.natto)、多粘芽孢杆菌(B.polymyxa)、假炭疽杆菌(B.pseudoanthracis)、短小芽孢杆菌(B.pumilus)、球形芽孢杆菌(B.sphaericus)、耐热芽孢杆菌(B.sporothermodurans)、嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus)、枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)或其组合。
对于生物除污应用特别有用的示例性的细菌包括但不限于:假单胞菌、黄杆菌(flavobacteriaceaes)和杆菌、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescence)、绿脓假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、产碱假单胞菌(Pseudomonas alcoligenes)、黄杆菌(Flavobacterim)、卡明斯节杆菌(Arthrobactercumminsii)、嗜油菌(Alconivorax borkumensis)、副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus)或其组合。
示例性的产生酸的细菌实例包括但不限于:粪肠球菌、粪链球菌、乳酸片球菌、嗜酸乳杆菌、胚芽乳杆菌(Lactobacillus plantarum)或其组合。
酶是催化化学反应的蛋白质。酶的实例包括但不限于:乙酰乳酸脱羧酶、淀粉酶、淀粉葡萄糖苷酶、脱水酶、阿拉伯木聚糖酶、β-葡聚糖酶、羧化酶、过氧化氢酶、纤维素酶、环化酶、脱氢酶、歧化酶、葡聚糖酶、葡糖淀粉酶、水解酶、羟化酶、异构酶、激酶、漆酶、乳糖酶、木质酶、荧光素酶、连接酶、脂肪酶、裂解酶、氧化酶、氧化还原酶、果胶酶、磷酸酶、蛋白酶、支链淀粉酶、还原酶、凝乳酶、转移酶、转氨酶、硫胺酶、合酶、木聚糖酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、血浆铜蓝蛋白、限制酶、木瓜蛋白酶或其组合。
真菌的实例包括但不限于:牙枝霉(Blastocladiomycota)、壶菌(Chytridiomycota)、球囊菌门(Glomeromycota)、微孢子虫(Microsporidia)、新丽鞭毛菌(Neocallimastigomycota)、双核亚界(Dikarya)、半知菌门(Deuteromycota)、子囊菌门(Ascomycota)、盘菌亚门(Pezizomycotina)、酵母亚门(Saccharomycotina)、外囊菌亚门(Taphrinomycotina)、担子菌门(Basidiomycota)、伞菌亚门(Agaricomycotina)、柄锈菌亚门(Pucciniomycotina)、黑粉菌亚门(Ustilaginomycotina)、Subphyla Incertae sedis、虫霉菌亚门(Entomophthoromycotina)、梳霉菌亚门(Kickxellomycotina)、毛霉菌亚门(Mucoromycotina)、捕虫霉菌亚门(Zoopagomycotina)、或其组合。
古生菌的实例包括但不限于:泉古菌(Crenarchaeota)、广古菌(Euryarchaeota)、初古菌(Korarchaeota)、纳古菌(Nanoarchaeota)、奇古菌(Thaumarchaeota)或其组合。
病毒的实例包括但不限于:双链DNA病毒:科:肌病毒科(Myoviridae)、短尾病毒科(Podoviridae)、长尾噬菌体科(Siphoviridae)、鱼类疱疹病毒科(Alloherpesviridae)、疱疹病毒科(Herpesviridae)、贝类疱疹病毒科(Malacoherpesviridae)、囊泡病毒科(Ascoviridae)、腺病毒科(Adenoviridae)、非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae)、杆状病毒科(Baculoviridae)、Coccolithoviridae、覆盖噬菌体科(Corticoviridae)、微小纺锤形噬菌体科(Fuselloviridae)、滴状病毒科(Guttaviridae)、虹彩病毒科(Iridoviridae)、脂毛噬菌体科(Lipothrixviridae)、线头病毒科(Nimaviridae)、乳头瘤病毒科(Papillomaviridae)、藻类DNA病毒科(Phycodnaviridae)、芽生噬菌体科(Plasmaviridae)、多瘤病毒科(Polyomaviridae)、痘病毒科(Poxviridae)、古噬菌体科(Rudiviridae)、复层噬菌体科(Tectiviridae)、和拟菌病毒科(Mimiviridae)、和属:壶状病毒属(Ampullavirus)、Nudivirus、盐末端蛋白噬菌体(Salterprovirus)、sputnik噬病毒体(Sputnik virophage)和根前毛菌噬菌体属(Rhizidiovirus);单链DNA病毒:科:丝状噬菌体科(Inoviridae)、微小噬菌体科(Microviridae)、联体病毒科(Geminiviridae)、圆环病毒科(Circoviridae)、矮化病毒科(Nanoviridae)、和小DNA病毒科(Parvoviridae)、和指环病毒属(Anellovirus);双链RNA病毒:科:双RNA病毒科(Birnaviridae)、囊状噬菌体科(Cystoviridae)、减毒病毒科(Hypoviridae)、双组分双链RNA球状真菌病毒属(Partitiviridae)、呼肠孤病毒科(Reoviridae)、和单组分双链RNA球状真菌病毒属(Totiviridae)和内源RNA病毒属(Endornavirus);(+)单链RNA病毒:科:动脉炎病毒科(Arteriviridae)、冠状病毒科(Coronaviridae)、杆状套病毒科(Roniviridae)、二顺反子病毒科(Dicistroviridae)、软化病毒科(Iflaviridae)、海洋RNA病毒科(Marnaviridae)、小RNA病毒科(Piconaviridae)、伴生豇豆病毒科(secoviridae)、α弯曲病毒科(Alphaflexiviridae)、β弯曲病毒科(Betaflexiviridae)、γ弯曲病毒科(Gammaflexiviridae)、芜菁发黄镶嵌病毒科(Tymoviridae)、星状病毒科(Astroviridae)、杆状RNA病毒科(Barnaviridae)、雀麦花叶病毒科(Bromoviridae)、杯状病毒科(Caliciviridae)、长线形病毒科(Closteroviridae)、黄病毒科(Flaviviridae)、光滑病毒科(Leviviridae)、黄症病毒科(Luteoviridae)、裸露RNA病毒科(Narnaviridae)、马铃薯Y病毒科(Potyviridae)、四病毒科(Tetraviridae)、披膜病毒科(togaviridae)、和番茄丛矮病毒科(Tombusviridae)、和属:甜菜坏死黄脉病毒属(Benyvirus)、真菌传杆状病毒属(Furovirus)、戊型肝炎病毒属(Hepevirus)、大麦病毒属(Hordeivirus)、悬钩子病毒属(Idaeovirus)、甜瓜病毒属(Ourmiavirus)、花生丛簇病毒属(Pecluvirus)、马铃薯帚顶病毒属(Pomovirus)、南方菜豆花叶病毒属(Sobemovirus)、烟草镶嵌病毒属(Tobamovirus)、烟草脆裂病毒属(Tobravirus)、和伞形植物病毒属(Umbravirus);(-)ssRNA病毒:科:博尔纳病毒科(Bornaviridae)、丝状病毒科(Filoviridae)、副粘病毒科(Paramyxoviridae)、弹状病毒科(Rhabdoviridae)、沙粒病毒科(Arenaviridae)、布尼亚病毒科(Bunyaviridae)、和正粘病毒科(Orthomyxoviridae)、和属:δ病毒属(Deltavirus)、nyavirus、柑橘鳞皮病毒属(Ophiovirus)、纤细病毒属(Tenuivirus)和巨麦病毒属(Varicosavirus);单链RNA-RT病毒:科:转座病毒科(Metaviridae)、假病毒科(Pseudoviridae)、和逆转录病毒科(Retroviridae);双链DNA-RT病毒:科:肝DNA病毒科(Hepadnaviridae)和花椰菜花叶病毒科(Caulimoviridae)或其组合。
藻类的实例包括但不限于:泛植物(archaeplastida)、绿藻门(Chlorophyta)、红藻门(Rhodophyta)、灰色藻门(Glaucophyta)、有孔虫界(Rhizaria)、Excavata、绿裸藻门(Chlorarachniophytes)、眼虫类(Euglenids)、假菌界(Chromista)、囊泡虫类(Alveolata)、不等鞭毛类(Heterokonts)、硅藻纲(Bacillariophyceae)、axodine、bolidomonas、大眼藻纲(Eustigmatophyceae)、褐藻纲(Phaeophyceae)、金藻纲(Chrysophyceae)、针胞藻纲(Raphidophyceae)、黄群藻纲(Synurophyceae)、黄藻纲(Xanthophyceae)、隐藻门(Cryptophyta)、腰鞭毛虫(Dinoflagellates)、定鞭藻门(Haptophyta)、或其组合。
浮游生物的实例包括但不限于:浮游植物、自养、原核或真核藻类、蓝细菌、甲藻和钙板金藻(coccolithophores)、浮游动物、小原生动物或后生动物、细菌浮游生物或其组合。作为本发明一部分的预期的浮游生物的等效球面直径通常在240纳米以下。
涡虫的实例包括但不限于:东亚三角涡虫(Dugesia tigrina)、日本三角涡虫(Planaria maculate)、Dugesia dorotocephala、地中海圆头涡虫(Schmidteamediterranea)或其组合。
原生生物的实例包括但不限于:囊泡藻界(Chromalveolata)、不等长鞭毛门(Heterokontophyta)、定鞭藻门(Haptophyta)、隐藻门(Cryptophyta)、囊泡虫类(Alveolata)、腰鞭毛类(Dinoflagellata)、顶复门(Apicomplexa)、纤毛虫类(Ciliophora)、Excavata、眼虫门(Euglenozoa)、透色动物门(Percolozoa)、贾弟虫(Metamonada)、有孔虫界(Rhizaria)、放射虫类(Radiolaria)、多孔虫类(Foraminifera)、丝足虫类(Cercozoa)、原始色素体生物(Archaeplastida)、红藻门(Rhodophyta)、灰胞藻门(Glaucophyta)、单鞭毛生物(Unikonta)、变形虫界(Amoebozoa)、领鞭毛虫门(Choanozoa)、或其组合。
下面是如何将微生物负载到沉淀二氧化硅颗粒的实例:通过使用不锈钢带式掺和器将流体均匀分布到270克FLO-GARD SC72C沉淀二氧化硅颗粒,引入700ml具有31000000cfu/g的液体培养基中的微生物枯草芽孢杆菌。另外,当需要表面层时,可在添加其它流体之前或之后,或在添加其它流体同时添加有机相。搅拌随后的混合物直到全部的液体培养基基本上负载到沉淀二氧化硅颗粒中。在营养物用沉淀二氧化硅颗粒负载或者可将其负载到不同的沉淀二氧化硅颗粒原料之前,可将营养物和微生物混合以便在沉淀二氧化硅颗粒中营养物的量根据需要改变。混合物的温度可以维持在10-40℃。在开始引入液体培养基的五分钟之内,所得产品在触觉上是干燥的。该干燥状态在混合成分的搅拌期间达到并且在混合器卸载时作为干燥产品随即被处理。然后该产品可以在室温下储存,且具有改进的储存期。
如本文所使用的,术语“干燥模式”是指液体基本上被负载到惰性载体基质中。本领域普通技术人员将会理解,这在混合过程中当液体被负载到惰性载体基质中时得以实现。在一个实施方案中,在混合5分钟后,得到的产品在触觉上是干燥的并且作为干燥的产品被处理。此外,该干燥产品是完全自由流动的。
在另一个实施方案中,用于以干燥模式递送挥发性流体的组合物包含具有多孔结构的沉淀二氧化硅颗粒,置于惰性载体基质外表面上的表面层,和贯穿沉淀二氧化硅颗粒的孔而负载的挥发性流体,其中所述表面层对氧气和二氧化碳是可渗透的,所述组合物具有按重量计的25-75%挥发性流体浓度,所述组合物可用于将挥发性流体浓度维持在大约75-100%达至少45天的时间,其中所述挥发性流体在25℃具有至少0.03atm的蒸气压。在另一个实施方案中,用于以干燥模式递送精油的组合物包含具有多孔结构的沉淀二氧化硅颗粒,置于惰性载体基质外表面上的表面层,和贯穿沉淀二氧化硅颗粒的孔而负载的精油,其中所述表面层对氧气和二氧化碳是可渗透的,所述组合物具有按重量计的25-75%精油浓度,所述组合物可用于将精油浓度维持在大约75-100%达至少45天的时间。
在另一实施方案中,用于以保持流动的干燥模式递送吸湿性化合物的组合物包含具有多孔结构的惰性载体基质、置于惰性载体基质外表面上的表面层、和贯穿惰性载体基质孔而负载的吸湿性化合物,其中所述表面层对氧气和二氧化碳是可渗透的,所述组合物具有按重量计的25-75%吸湿性化合物浓度,所述组合物可用于维持大约75-100%吸湿性化合物浓度达至少45天的时间,其中所述组合物在水中是可溶的。
在另一个实施方案中,用于以干燥模式递送液体添加剂的组合物包含具有二氧化硅孔的惰性载体基质,置于惰性载体基质外表面上的表面层,和被负载到惰性载体基质的液体添加剂,其中表面层对氧气和二氧化碳是可渗透的,其中液体添加剂分子的平均孔径小于二氧化硅孔的平均直径,其中所述组合物可用于从被污染区域减少污染物。在另一个实施方案中,液体添加剂选自细菌、营养物及其组合;被污染区域选自土壤、水和空气;和所述污染物选自污水、油、污染物质及其组合。在另一个实施方案中,所述组合物未使用化学反应而形成。在另一个实施方案中,所述组合物未化学性改变惰性载体基质的表面而形成。在另一实施方案中,所述组合物基本上是干燥的以便其可容易流动。在另一个实施方案中,所述组合物是非吸湿性的。
在另一个实施方案中,所述物质可以是细菌、酶、其它微生物或其组合。在另一个实施方案中,所述物质是如美国农业部国家有机计划(USDA’NATIONAL ORGANIC PROGRAM)所定义的可为有机或者无机的液体添加剂或其组合。示例性的液体添加剂包括液体食物、液体食物添加剂、液体生物科技农业成分、传统的液体农业成分、液体人类健康和膳食补充剂、和液体香料和美容产品。
在另一个实施方案中,本发明涉及惰性载体基质作为以干燥模式用于物质的递送剂的用途。在一个实施方案中,如果所述物质为固体形式,则可通过将物质熔融或溶解在载体流体例如水、醇、甘油、糖浆、油、丙酮或其它可接受的流体介质(fluid media)中使该物质液化。一旦该物质为液态,则可将其在添加有机相之前、之后或与添加有机相的同时添加并且和惰性载体基质混合以便所述物质灌注贯穿惰性载体基质从而形成具有表面层的负载的产品。该负载的产品接着可与其它产品合并、或者混合并且可用于各种各样的产品。有利的是,吸湿性物质可以被液化并被负载到惰性载体基质,从而允许干燥模式下处理(即非结块)。另外,不同类型的吸湿性物质可以一起被液化形成良好混合以改进整体稠度的液体混合物。可将该液体混合物添加到惰性载体基质,从而允许生产具有高度稠度的负载的产品。类似地,通常被保持在湿润条件下以维持生存力的诸如酶类、细菌、其它微生物、营养物或其组合的物质可被负载到惰性载体基质中,从而允许以干燥模式处理。
在另一实施方案中,额外的益处是负载的产品具有增加的储存期和/或可以提供流体状态无法达到的额外的稳定性。一些物质在其流体状态下是相对不稳定的。例如,挥发性物质或者包含一个或多个羟基的物质。这些不稳定的流体物质可常常在几周后失去其功效,这意味着最终使用者必须尽快使用该流体物质。在某些实施方案中,这些相对不稳定的流体物质可以被负载到惰性载体基质以增加其储存期和/或提供在液体状态下无法达到的额外稳定性。
在另一实施方案中,微生物、活培养物和营养物可以以干燥的形式被递送。在另一实施方案中,可通过如下来递送这些培养物和营养物:用培养物、营养物一起或者分别与有机相负载到惰性载体基质至期望的容量,随后负载的产品可以被施加到水上或者土壤中的污染物。在另一个实施方案中,本发明可适用于溢出物,例如污水、油或其它类型的水上化学污染物,这是因为负载的惰性载体基质粘附污染物并且使得培养物直接与其食物源接触,而不像液体应用,其可不粘附污染物而分散。本发明的实施方案还可以适用于垃圾中的废物。在液体中,与一次全部释放微生物相比,当在一段时间内释放微生物时,在微生物的繁殖(已经观察到从~1.5到超过15的因数)和延时释放效果(time release effect)方面还可观察到额外益处。
液体食物添加剂的实例包括酶、细菌、益生菌、油性树脂、香料、矿物、植物提取物和防腐剂。在一个实施方案中,这些成分的递送可通过使用液体成分一起或分别与有机相负载到惰性载体基质(优选食品级)至期望容量以形成负载的产品来实现。负载的产品随后可以适用于较大的配制配方或经包装用于后来的应用或水合作用。在其它实施方案中,本发明可适用于浓缩成分,例如各种各样的提取物、矿物、螯合矿物、醋、酒、酱油、辣椒沙司、橄榄油、精油、香料和经配制液体食物。
液体生物技术农业成分的实例包括酶、细菌、营养物和矿物。这些成分的递送通过如下实现:使用液体成分一起或分别与有机相负载惰性载体基质至期望容量,形成具有表面层的负载的产品。然后将负载的产品施加到较大的配制配方或经包装用于后来的应用或水合作用。在另一个实施方案中,本发明可适用于浓缩成分例如酶、细菌、营养物和矿物。在一个实施方案中,液体生物技术农业成分对于处理“有机”产品或在肥料、杀虫剂、除草剂等的应用和配制中是有利的。
传统的液体农业成分的实例包括尿素、柠檬酸钾、单磷酸钾、氯化钾、氯化镁、硫酸盐、营养物和矿物。这些成分的递送通过如下实现:使用液体成分一起或分别与有机相负载惰性载体基质至期望容量,形成具有表面层的负载的产品。然后将负载的产品施加到较大的配制配方或经包装用于后来的应用或水合作用。在另一实施方案中,本发明可适用于浓缩成分例如锌、锰、镁、硼、钾和磷。
液体人类健康和膳食补充剂的实例包括精油和植物提取物,例如鱼油和其它膳食制品。这些成分的递送通过如下实现:使用液体成分一起或分别与有机相负载惰性载体基质至期望容量,形成具有表面层的负载的产品。然后将负载的产品施加到较大的配制配方或经包装用于后来的应用或水合作用。在另一实施方案中,本发明可适用于浓缩成分例如鱼油、氨基酸、蛋白质和其它补充物。
用于生命科学产品的液体培养基混合物的实例包括培养基混合要素例如血液培养基、大豆培养基、糖培养基、淀粉培养基和其它类似的培养基。在另一个实施方案中,这些成分的递送通过如下实现:使用液体成分一起或分别与有机相负载惰性载体基质至期望容量,形成具有表面层的负载的产品。然后将负载的产品施加到较大的配制配方或经包装用于后来的应用或水合作用。
液体香料和美容产品的实例包括精油和植物提取物,例如香料、氨基酸和乙醇酸。在另一个实施方案中,这些成分的递送通过如下实现:使用液体成分一起或分别与有机相负载惰性载体基质至期望容量,形成具有表面层的负载的产品。然后将负载的产品施加到较大的配制配方或经包装用于后来的应用或水合作用。在另一个实施方案中,本发明可适用于浓缩成分例如香料、酸和油。
与传统的液体添加剂相比,本发明提供了很多益处包括易于使用、降低装运成本、易于运输和减少储存要求。
在其中物质可以是液体食物添加剂的实施方案中,负载的产品可与发现容易用于制作汤、肉汤、沙司、调味汁(dip)等的其它预混香料混合。负载的产品还可以像甜味剂或茶包一样以单独包装出售。以这种方式,可将液体食物添加剂容易地包装为适合旅行的大小且呈干燥形式。干燥的、负载的产品(与其液体食物添加剂对应物相比)提供了许多益处。例如,负载的产品增加了整体的易用性、消除酸败、增加食物保存和食物安全性、降低装运成本、增加运输的便利和减少储存需求。另外的优点是负载的产品不需要冷藏储存的要求,这消除了当使用者在家里或者忙碌时对冷藏的需求。
在本发明的实施方案中涵盖许多不同的液体食物产品。各种提取物、矿物、螯合矿物、醋、酒、酱油、辣椒沙司、醇、伍斯特沙司(Worcester Sauce)、橄榄油和精油全部被本发明涵盖。当然,本领域普通技术人员还将会认识到其它等价物。
实验性结果
样品1-用枯草芽孢杆菌负载的沉淀二氧化硅颗粒的制备(无表面层)
使用不锈钢带式掺和器通过将液体均匀分布到干物质上的细喷雾技术将700ml在计数为31000000cfu/g的液体培养基中的微生物枯草芽孢杆菌引入到270克FLO-GARDSC72C沉淀二氧化硅颗粒中。搅拌随后的混合物直到全部的液体培养基基本上负载到沉淀二氧化硅颗粒中。在营养物用沉淀二氧化硅负载之前(然而,其可被负载到不同的沉淀二氧化硅原料),将营养物和微生物混合使得在沉淀二氧化硅颗粒中营养物的量可根据需要改变。混合物的温度可以维持在10-40℃。在开始引入液体培养基的五分钟之内,所得产品在触觉上是干燥的。该干燥状态在混合成分的搅拌期间达到并且在混合器卸载时作为干燥产品随即被处理。然后该产品可以在室温下储存。测量包含在沉淀二氧化硅颗粒中的微生物的活性。
可测量微生物活性的方式取决于微生物。例如,对于枯草芽孢杆菌,测量其活性的方法如下。将11克样品稀释并从100-1000000连续铺板。然后将各稀释液的0.1ml部分放置到MYP琼脂板上并散布到表面。然后将其在30℃孵育72小时。然后确认疑似菌落并报告为确认的菌落CFU/g(参见FDA FDA Bacteriolog.Analytical Manual,第8版,第14章(该方法最初被开发用于测量B.cereus但根据Gorton Industries Protocol改进以测量枯草芽孢杆菌))。下表Ⅰ描述了那些测量结果。
表1:随时间的杆菌计数
制备后的天数 杆菌计数(xMM)
1 200
10 210
20 310
30 230
样品2-负载有营养物的沉淀二氧化硅颗粒的制备(无表面层)
制备Tri-Phasic-12TM的55:1稀释液。Tri-Phasic-12TM获自Micro-Bac国际公司,3200N.IH-35,Round Rock,电话78681-2410。稀释的溶液具有1:55的营养物与水之比。将522.1ml稀释的营养物添加到装有206.8克沉淀二氧化硅颗粒的不锈钢掺和器中,产生72%负载的负载的产品。
样品3-使用枯草芽孢杆菌负载的并具有表面层的沉淀二氧化硅颗粒的制备
通过在165℉下溶解10g十六/十八醇和10g鲸蜡酯并使用慢速机械掺和器制备第一溶液。通过将0.5g卵磷脂、5g橄榄油和5g芥花籽油(canola oil)一起混合制备第二溶液。通过混合1.5ml枯草芽孢杆菌和70.5ml蒸馏水制备第三溶液。将前两种溶液合并并一起混合。随后添加第三溶液形成具有有机相和水相的乳液。尽管该实施方案以该方式合并三种溶液,但应当理解的是其亦可以以其它顺序合并。优选地,溶液在低于细菌被破坏的温度下合并。在一些实施方案中,该最高温度是大约110℉。因此,优选的混合温度可在80℉到90℉范围内。混合步骤后,还有任选的冷却到室温的步骤。当冷却到室温时该乳液通常为糊状,奶油状乳液。
然后使用混合/掺和系统将该乳液添加到沉淀二氧化硅颗粒中。优选慢混合速度。在约5分钟后,形成具有表面层的负载的产品。在本发明的实施方案中,所述表面层由脂肪酸醇、脂肪酸和脂质组成,而水和枯草芽孢杆菌位于沉淀二氧化硅颗粒中。
样品4-使用枯草芽孢杆菌负载的并具有表面层的沉淀二氧化硅颗粒的制备
通过在165℉下溶解85g十六/十八醇和85g鲸蜡酯并使用慢速机械/掺和器制备第一溶液。通过将8g卵磷脂、84g橄榄油和40g芥花籽油一起混合制备第二溶液。通过混合2.4ml枯草芽孢杆菌和115.6ml蒸馏水制备第三溶液。将前两种溶液合并并一起混合。随后添加第三溶液被形成具有有机相和水相的乳液。尽管该实施方案以该方式合并三种溶液,但应当理解的是其亦可以以其它顺序合并。优选地,溶液在低于细菌被破坏的温度下合并。在一些实施方案中,该最高温度是大约110℉。因此,优选的混合温度可在80℉到90℉范围内。混合步骤后,还有任选的冷却到室温的步骤。当冷却到室温时该乳液通常为糊状,奶油状乳液。
然后使用混合/掺和系统将该乳液添加到沉淀二氧化硅颗粒中。优选慢混合速度。在约5分钟后,形成具有表面层的负载的产品。在本发明的实施方案中,所述表面层由脂肪酸醇、脂肪酸和脂质组成,而水和枯草芽孢杆菌位于沉淀二氧化硅颗粒中。
样品5-使用枯草芽孢杆菌负载的并具有表面层的沉淀二氧化硅颗粒的制备
通过在165℉下溶解63g十六/十八醇和63g鲸蜡酯并使用慢速机械掺和器制备第一溶液。通过将11g卵磷脂、126g橄榄油和0g芥花籽油一起混合制备第二溶液。通过混合3.1ml枯草芽孢杆菌和153.9ml蒸馏水制备第三溶液。将前两种溶液合并并一起混合。随后添加第三溶液被形成具有有机相和水相的乳液。尽管该实施方案以该方式合并三种溶液,但应当理解的是其亦可以以其它顺序合并。优选地,溶液在低于细菌被破坏的温度下合并。在一些实施方案中,该最高温度是大约110℉。因此,优选的混合温度可在80℉到90℉范围内。混合步骤后,还有任选的冷却到室温的步骤。当冷却到室温时该乳液通常为糊状,奶油状乳液。
然后使用混合/掺和系统将该乳液添加到沉淀二氧化硅颗粒中。优选慢混合速度。在约5分钟后,形成具有表面层的负载的产品。在本发明的实施方案中,所述表面层由脂肪酸醇、脂肪酸和脂质组成,而水和枯草芽孢杆菌位于沉淀二氧化硅颗粒中。
在另一个实施方案中,组合物可通过将蜡、十六/十八醇、脂肪酸、乳化剂、水和微生物与惰性载体基质混合来制备。在一个实施方案中,所述蜡可包括蜂蜡。其它示例性蜡包括小烛树蜡(candelilla wax)、霍霍巴蜡(jojoba wax)和巴西棕榈蜡。在另一个实施方案中,脂肪酸可包括橄榄油、芥花籽油、葵花油、植物油或其组合。在另一个实施方案中,乳化剂可为卵磷脂。在一个实施方案中,所述蜡可以以1%-40%重量,更优选10%重量的量存在。在一个实施方案中,十六/十八醇可以以1%-15%重量,更优选2%重量的量存在。在一个实施方案中,脂肪酸可以以2%-40%,更优选15%重量的量存在。在一个实施方案中,乳化剂可以以1%-7%重量,更优选3%重量的量存在。在一个实施方案中,水/微生物溶液可以以1%-50%,更优选2-3%重量的量存在。在一个实施方案中,水/微生物溶液包含按体积计70%-99%的水,更优选97%的水,和1%-30%的微生物,更优选3%的微生物。
在另一个实施方案中,可通过将蜡、十六/十八醇和/或鲸蜡酯、脂肪酸、乳化剂、水和微生物与惰性载体基质混合来制备组合物。在一个实施方案中,所述蜡可包括蜂蜡。在另一个实施方案中,脂肪酸可包括橄榄油、芥花籽油、葵花油、植物油或其组合。在另一个实施方案中,乳化剂可为卵磷脂。在一个实施方案中,所述蜡可以以1%-40%重量,更优选10%重量的量存在。在一个实施方案中,十六/十八醇可以以1%-15%重量,更优选2%重量的量存在。在一个实施方案中,鲸蜡酯可以以1%-15%重量,更优选2%重量的量存在。在一个实施方案中,脂肪酸可以以2%-40%,更优选15%重量的量存在。在一个实施方案中,乳化剂可以以1%-7%重量,优选3%重量的量存在。在一个实施方案中,水/微生物溶液可以以1%-50%,更优选2-3%重量的量存在。在一个实施方案中,水/微生物溶液包含按体积计70%-99%的水,更优选97%的水,和1%-30%的微生物,更优选3%的微生物。
在一个实施方案中,水/微生物溶液可包含按体积计98%的水和2%的微生物。在另一个实施方案中,如按体积计所测量的,水/微生物溶液可包含95%-98%的水和2%-5%的微生物。
以下表Ⅱ至表Ⅳ提供了制备乳液的配方实例的概述,当与有效量的沉淀二氧化硅充分混合时,所述配方可用于制备具有表面层的负载的产品。百分比为在与沉淀二氧化硅混合之前按重量计的乳液。脂肪酸油选自橄榄油、芥花籽油、葵花油、植物油及其组合。所述蜡选自小烛树蜡、蜂蜡、霍霍巴蜡及其组合。
表Ⅱ:配方1的组成
表Ⅲ:配方2的组成
成分 下限(PBW) 上限(PBW)
50 72
微生物 1 8
乳化剂(卵磷脂) 1 7
脂肪酸醇(十六/十八醇) 1 15
脂肪酸油 2 40
1 40
表Ⅳ:配方3的组成
成分 下限(PBW) 上限(PBW)
50 72
微生物 1 8
乳化剂(卵磷脂) 1 7
脂肪酸醇(十六/十八醇) 1 15
脂肪酸油 2 40
鲸蜡酯 2 15
1 40
本领域普通技术人员将会认识到以上提及的实例仅仅是示例性的。
图1表示具有表面层的负载有水、微生物、酶和营养物的负载产品的横截面视图。如图1中所示,水相位于惰性载体基质的孔内并且基本上被截留在表面层内。在表面层和水相之间可以形成表面层界面。表面层界面和表面层的虚线代表表面层有利的渗透性,其允许氧气和二氧化碳在负载的产品内外移动。这使得水相保持在负载的产品中同时还允许微生物和酶“呼吸”,这有助于繁殖。另外,表面层使复制受到控制并且使其包含在表面层界面内。
使用本发明用于生物除污的实施方案的组合物进行的性能测试
使用500mg油制备总计五个油样品。将三个作为对照组并将其它两个用于测试本发明实施方案的组合物,(“负载的产品”)。在第0天,对照组具有平均约41277ng/mg的烷烃和6100ng/mg的芳族化合物。在第28天,对照组具有平均约42451ng/mg的烷烃和4546ng/mg的芳族化合物。在第0天对于负载产品测试组,有40239ng/mg的烷烃和5814ng/mg的芳族化合物。在第28天对于负载产品测试组,烷烃和芳族化合物浓度分别显著降低到155ng/mg和444ng/mg。其为烷烃和芳族化合物浓度分别大约99.6%和92.4%的降低。结果的概述可以在下表Ⅴ中看出:
表Ⅴ:负载产品的性能测试
下表Ⅵ显示了目前市售产品的比较的生物除污结果。该结果获自EPA’s网站www.epa.gov/OEM/content/ncp/tox_tables.htm(上次访问在2010年11月12日)。当负载的 产品和以下性能最好的产品比较时,清楚的是,负载的产品(即本发明实施方案的组合物) 胜过每一种市售产品,特别是在芳族化合物的减少方面。
表Ⅵ:比较的生物除污结果
改进的微生物繁殖
进行实验以确定表面层可为微生物繁殖提供的优势。在该实验中,使用20ml液体微生物和8.57g沉淀二氧化硅制备用微生物负载但不具有表面层的沉淀二氧化硅。根据本发明的实施方案制备,使用20ml聚山梨醇酯80、20ml聚乙二醇400、20ml液体微生物、38ml中链三甘油酯、2ml乳清蛋白浓度80和42.86g沉淀二氧化硅制备第二批。根据CMMEF第4版,方法19.5在两样品上进行乳酸菌板计数。液体微生物的初始量是230,000,000。不具有表面层的负载产品增加到440,000,000,而具有表面层的负载产品增加到19亿。因此,根据本发明实施方案制备的具有表面层的负载产品与不具有表面层的负载二氧化硅相比,微生物繁殖的增加超过330%。
本领域技术人员将会认识到在不偏离本发明的范围和精神下对实施本发明的方法可做出许多变化和改进。在附图和说明书中,已经披露了本发明的实施方案,尽管使用了专门术语,但它们仅仅是在一般的和描述性的意义上使用并且不是出于限制的目的,本发明的范围由在下面的权利要求书限定。具体参考这些说明的实施方案,已经相当详细的描述了本发明。然而,很明显如前面说明书所描述的在本发明的精神和范围内可以做出各种改进和变化。此外,涉及到顺序的语言,例如第一和第二,应当被理解为示意性含义而不是限制性含义。例如,本领域技术人员可认识到某些步骤可被合并成单个步骤。
本发明可适宜包含所公开的要素、由所公开的要素组成或基本上由所公开的要素组成并且可在不存在未公开要素下实施。此外,涉及到顺序的语言,例如第一和第二,应当被理解为示意性含义而不是限制性含义。例如,本领域技术人员可认识到某些步骤可被合并成单个步骤。
单数形式“一个”,“一种”和“所述”包括复数对象,除非上下文另有明确说明。作为实例,术语“食物添加剂”可包括一种或多种用于所述目的的食物添加剂。
任选的或任选地是指随后描述的事件或情况可发生或可不发生。该描述包括其中事件或情况发生的情形和其不发生的情形。
可将本文的范围表示为从大约一个特定值,和/或到大约另一个特定值。当表述这样的范围时,应当理解的是另一个实施方案是从一个特定值和/或到另一个特定值,以及所述范围内所有的组合。
贯穿本申请,其中参考了专利或出版物,这些参考文献以其整体的公开内容意欲通过引用结合到本申请,以便更加完整的描述本发明所涉及的现有技术,除了当这些参考文献与本文所做出的描述相抵触时。

Claims (20)

1.一种用于以干燥模式递送微生物的组合物,所述组合物包含:
具有多孔结构的惰性载体基质,并且其中所述多孔结构包含具有平均直径的孔;
负载到所述惰性载体基质上的微生物,其中所述微生物具有平均直径,其中所述微生物的平均直径小于所述孔的平均直径,并且其中所述负载到所述惰性载体基质上的微生物形成基本上是干燥到按压的并且可以很容易流动的组合物。
2.权利要求1所述的组合物,还包含置于所述惰性载体基质外表面上的表面层。
3.权利要求2所述的组合物,其中所述表面层是有机相。
4.权利要求2所述的组合物,其中所述表面层内含有的水相。
5.权利要求1所述的组合物,其中所述惰性载体基质是沉淀二氧化硅、硅藻土、胡桃和山核桃壳、稻壳、纤维素粘土、蒙脱土、膨润土、羊毛、棉花、纤维素、玉米棒、纤维素壳或它们的任意组合。
6.权利要求1所述的组合物,其中所述微生物在所述惰性载体基质的所述孔内繁殖。
7.权利要求1所述的组合物,还包含与所述微生物接触的营养物,其中所述营养物向所述负载到所述惰性载体基质上的微生物提供食物来源,并且其中所述微生物消耗食物并繁殖。
8.权利要求7所述的组合物,其中所述营养物包含氨、氮、铵态氮、尿素、葡萄糖、糊精、糖、蛋白质或它们的任意组合。
9.权利要求1所述的组合物,其中所述组合物具有初始微生物量,并且其中所述组合物在负载后维持50-400%初始微生物量至少45天。
10.权利要求1所述的组合物,其中所述微生物包含细菌、真菌、古细菌、藻类、浮游生物、涡虫、原生生物或它们的任意组合。
11.权利要求10所述的组合物,其中所述微生物是杆菌。
12.权利要求1所述的组合物,其中所述组合物从污染区域减少污染物的浓度。
13.权利要求12所述的组合物,其中所述污染物包括污水、石油、化学物质、废物、污染物质或它们的任意组合。
14.权利要求12所述的组合物,其中所述污染区域包括土壤、水、空气或它们的任意组合。
15.权利要求1所述的组合物,其中所述组合物用于土壤和水的生物去污。
16.权利要求1所述的组合物,其中所述组合物减少在水中或土壤中沉淀的碳氢化合物的浓度。
17.权利要求1所述的组合物,其进一步不包含沸石。
18.权利要求1所述的组合物,其进一步不包含铝硅酸盐。
19.权利要求1所述的组合物,其中所述孔的平均直径在38-240纳米范围内。
20.权利要求1所述的组合物,其中所述组合物具有至少两年的存储期。
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