CN107422062A - 一种同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法 - Google Patents

一种同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，包括以下步骤：(1)样品前处理；(2)配制标准溶液；(3)苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量测定。该法中待测样品采用氨水‑乙腈提取后进行QuEChERS Extract净化，采用HPLC‑MS/MS方法进行正负离子切换扫描，解决了苯溴马隆、别嘌醇、丙磺舒三种物质化学性质差异大，难以实现同时提取检测的技术难点，也解决了保健食品基质干扰严重，回收率低的问题；建立了一个同时在线检测抗痛风保健食品中苯溴马隆、别嘌醇、丙磺舒含量的方法，该法填补了同时测定对抗痛风保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的技术空白。

Description

一种同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的 方法
技术领域
本发明属于保健食品技术领域，具体涉及一种同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法。
背景技术
痛风是一种嘌呤代谢紊乱所致的慢性代谢紊乱疾病。临床症状主要表现为高尿酸血症，尿酸盐在关节、肾脏及结缔组织中析出结晶，可引起关节局部炎症及粒细胞浸润。痛风常反复发作，缠绵难愈，为一种终生性疾病，它的病情常是急性期与间歇期交替，如果只在急性期治疗而在间歇期不治疗，只会使病情发作反反复复，并逐渐加重，直至造成严重的不良后果，所以痛风病的治疗关键是坚持治疗。近年来，由于人口的老龄化、生活方式和饮食习惯的改变，痛风症呈逐年上升趋势，痛风相关并发症严重影响患者的生活质量。然而目前痛风的药物治疗效果并不理想，痛风患者对现有可用的药物耐受性较差与预后不良。因此有40％～50％的痛风患者通过使用抗痛风保健食品来改善尿酸偏高的症状。由于抗痛风保健食品可以长期安全的食用，使得抗痛风保健食品的产业和规模不断壮大。
以往某种功能性保健食品盛行后，一些不法商家为了提高保健功效，降低成本牟取暴利，在保健食品中非法添加化学药物。化学药物一般有严格的适用症、禁忌症和副作用。当消费者在不知情的情况下长期食用添加化学药物的保健食品，会对身体产生很大的危害。
反复发作的慢性痛风患者的治疗药物主要是通过抑制尿酸生成和促进尿酸排泄这两大类。属于传统处方药的别嘌醇主要通过抑制尿酸生成而达到降低血尿酸浓度的作用。动物毒理研究实验表明别嘌醇会引起较大的肝肾功能损伤，临床用药期间必须定期检查血常规及肝肾功能。促进尿酸排泄的代表药物有丙磺舒和苯溴马隆，此类药物如果不是在医生的正确指导下服用，很有可能会引起尿酸盐晶体在尿路系统沉积从而导致肾绞痛、肾结石、肾功能损害等症状。因此，如果抗痛风保健食品中含有这三类化学药物，消费者在不知情的情况下长期服用的话，将对肝肾功能产生很大的副作用，甚至会引起本身肝肾功能不全的消费者出现肝肾功能衰竭致死的危害。
《中华人民共和国食品安全法》明确规定保健食品中严禁添加非食品成分的物质(包括化学药物)。在国家食品药品监督管理总局定期公布的保健食品抽检结果中此类事件层出不穷。当前，我国对保健食品违禁添加化学药物的研究主要集中在补益、减肥、降血糖血脂类的违禁药物检测，随着抗痛风保健食品中的市场需求不断增加，加强对抗痛风保健食品中添加违禁药物的检测和监管已是刻不容缓。
目前针对抗痛风保健食品中化学药物的检测研究非常少，国外到目前为止还没有文献报道。国内仅有杨园园等发表关于用液相法测定抗痛风保健食品中8种激素类化学药物(地塞米松、泼尼松、醋酸可的松等)的含量。该研究发现采集的大部分抗痛风保健食品中都检测出激素类化学药物，说明抗痛风保健食品中添加化学药物的问题严重。但是该方法研究的药物组分仅限于激素药物，对常见的痛风类处方药物(苯溴马隆、别嘌醇、丙磺舒)没有监测。
国内外对痛风类处方药物(苯溴马隆、别嘌醇、丙磺舒)的检测方法研究主要集中在单纯的西药成分和生物样本(动物的血液和尿液等)中单一药品组分的测定。而针对化学成分复杂的保健食品中痛风类处方药物的检测，特别是苯溴马隆、别嘌醇、丙磺舒这三种药物的溶解度、电离极性等都存在很大差异的情况下，对样品中待测物质的提取和净化，检测方法的灵敏度都提出了更高的要求。到目前为止还没有相关文献报道。
发明内容
为了弥补现有技术的空白，本发明的目的在于提供一种同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，该方法前处理简单高效，采用高效液相色谱-串联质谱检测灵敏度高、准确度好，可广泛应用于抗痛风类保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的同时测定。
本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：一种同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，包括以下步骤：
(1)样品前处理：选取抗痛风类保健食品，加入氨水-乙腈溶液和NaCl，涡旋震荡混匀，超声提取，离心收集上清液，在上清液中加入氨水-乙腈溶液重复上述提取操作，合并两次上清液，在上清液中加入QuEChERS试剂和无水Na2SO4，涡旋混合后，离心，移取上清液，氮气吹干，用氨水-乙腈溶液复溶，上清液采用滤膜过滤，获得待测样品；
(2)配制标准溶液：称取苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒标准品，配制成混合标准工作溶液；
(3)苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量测定：将步骤(1)制得的待测样品和混合标准工作溶液分别上高效液相色谱-串联质谱仪进行测定，并进行数据处理和定量分析后，同时获得抗痛风类保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒的含量。
在上述同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法中：
本发明步骤(1)中的保健食品可以为市售的常见的固体粉状或口服液类抗痛风保健食品。
本发明步骤(1)中所述的采用氨水-乙腈溶液作为待测样品提取液，其中保健食品、氨水-乙腈溶液和NaCl的质量份配比优选为1:1～5:0.5～5，更佳为1:2.5:0.5，其中所述的氨水-乙腈溶液中氨水的体积百分含量优选为0.05～2％，更佳为0.1％，再重复提取一次。
因为别嘌醇、丙磺舒和苯溴马隆三种药物溶解性差异比较大，都不溶于水。别嘌醇、丙磺舒在甲醇、乙腈中略溶，在乙酸乙酯和正己烷中不溶，在碱性溶液中易溶。苯溴马隆在乙腈、酸性溶液中易溶。因此，需要筛选出一种能同时较好的溶解提取三种药物同时杂质提取少的提取液。经采用多种溶剂提取后对比回收率的结果，发现氨水能较好地溶解别嘌醇和丙磺舒，而乙腈可以有效提取苯溴马隆，加入适量的NaCl有利于防止乳化。因为氨水呈碱性，为了减少对待测药物和后期对色谱柱的影响，因此在氨水-乙腈溶液中氨水的体积百分含量应该严格控制在0.05～2％范围内，更佳为0.1％。
本发明步骤(1)中优选涡旋震荡1～5min混匀，更佳为1min，超声频率优选为30～60kHz，更佳为40kHz，超声时间优选为5～10min，更佳为5min，离心时离心机的转速优选为5000～10000r/min离心3～6min，更佳为80000r/min离心5min。在此条件下，能确保在最短的时间内，有效混匀并提取出样品中待测药物。
本发明步骤(1)中在提取的上清液中优选加入100～300mg QuEChERS试剂(内含PSA粉末和C18粉末比例为2:1)和0.5～2g无水Na2SO4净化，更佳为150mg QuEChERS试剂(内含PSA粉末和C18粉末比例为2:1)和1g无水Na2SO4净化，优选涡旋混合3min，以5000～10000r/min离心3～6min，更佳为以8000r/min离心5min。
因为很多痛风类保健食品采用的是植物类作为原料，PSA粉末可有效去除样品中有机酸、一些极性色素以及糖类等干扰物，同时，它也是很有用的螯合剂。C18粉末具有较高的含碳量和高疏水性，可以大大增加载样量和回收率。经采用多种试剂净化后对比回收率的结果，最终选择QuEChERS试剂(内含PSA粉末和C18粉末比例为2:1)和无水Na2SO4净化，这三种试剂的复合是相互协调，缺一不可的。
本发明步骤(1)中净化后移取上清液，优选在40～60℃(更佳为50℃)下氮气吹干，用氨水-乙腈溶液(其中氨水体积百分含量较佳为0.1％)复溶，上清液优选采用孔径为0.22μm的滤膜过滤，获得待测样品。
本发明步骤(2)中称取苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒标准品，先加入200～600μL氨水，提高标准品的溶解度，再加入甲醇溶解，稀释定容配制成(优选浓度为0.1mg/mL)的混合标准储备液，避光保存(优选于4℃)，使用前放置恢复到室温，使用时用甲醇优选配制成(浓度范围优选为25～3000μg/L)混合标准工作溶液，现配现用。
本发明步骤(3)中上高效液相色谱-串联质谱仪进行测定时，高效液相色谱条件优选为：色谱柱：C18柱，2.6μm，100mm×4.6μm；流速：0.20～0.40mL/min；柱温：40～60℃；样品室温度：15～25℃；进样体积：10～20μL；流动相：A-甲醇；B-0.1～0.5％甲酸水溶液，梯度洗脱程序：0～2.0min，5％A；2.0～6.0min，5％A～80％A；6.0～9.0min，80％A；9.0～10.0min，80％A～5％A。
更佳的，色谱条件为：色谱柱：菲罗门Kinetex C18(2.6μm)，100mm×4.6μm；流速：0.20mL/min；柱温：40℃；样品室温度：15℃；进样体积：10μL；流动相：A-甲醇；B-0.1％甲酸水溶液，梯度洗脱程序：0～2.0min，5％A；2.0～6.0min，5％A～80％A；6.0～9.0min，80％A；9.0～10.0min，80％A～5％A。
因为丙磺舒、别嘌醇、苯溴马隆这三种物质的溶解度、电离模式等性质差异较大，而流动相对目标化合物的离子化效率影响很大。为了提高离子化效率和改善峰形，通常在流动相中添加少量的挥发性酸或挥发性盐。经试验筛选发现，流动相中添加适量的甲酸，经梯度洗脱，可以使丙磺舒、别嘌醇、苯溴马隆分离开来，且峰形对称，综合考虑三种物质的特性，最终选择0.1～0.5％(体积百分含量)甲酸水溶液-甲醇体系作为流动相。
本发明步骤(3)中上高效液相色谱-串联质谱仪进行测定时，质谱条件优选为：离子源：电喷雾离子源ESI；离子化方式：ESI(+)和ESI(－)；检测模式：多反应监测MRM模式；离子源温度150～200℃；检测器电压：0.50～3.50kV；离子源电压：正离子模式+0.50～+5.5kV，负离子模式-1.0～-5.5kV；脱溶剂气温度：450～550℃；脱溶剂气流量：600～800L/h；碰撞气流量：0.1～0.5mL/min。
更佳的，质谱条件：离子源：电喷雾离子源(ESI)；离子化方式：ESI(+)和ESI(－)；检测模式：多反应监测(MRM)模式；离子源温度150℃；检测器电压：2.83kV；离子源电压：正离子模式+4.5kV，负离子模式-3.5kV；脱溶剂气温度：500℃；脱溶剂气流量：800L/h；碰撞气流量：0.13mL/min。
在试验过程中，将丙磺舒、别嘌醇、苯溴马隆三种物质的混合标准溶液分别在ESI+和ESI-模式下进行电离检测，结果发现别嘌醇在ESI+模式下有更好的响应，而丙磺舒和苯溴马隆在ESI-模式下有更好的响应。因此利用正、负离子转化功能，对样品同时进行正、负离子模式扫描，实现一次进样得到所有化合物的质谱信息，节省分析时间。通过调节仪器参数使母离子的丰度最大，进一步对子离子进行二级质谱扫描，得到碎片离子信息，选取丰度较强、干扰较小的两对子离子作为定性、定量离子，使三种物质的灵敏度达到最佳。
与现有技术相比，本发明具有如下优点：
(1)本发明提供一种同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，该方法解决了苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒三种物质溶解度、电离模式等性质差异较大的难点，实现了三种物质同时在线检测；
(2)本发明填补了对抗痛风保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量检测方法的技术空白，可作为监管部门对抗痛风类保健食品中非法添加化学药物的监测手段，为痛风类保健食品的安全生产与消费提供违禁物质检测的技术支撑。
(3)本发明提供的方法，相比已报道的集中在单纯的西药成分和生物样本(动物的血液和尿液等)中单一药品组分的测定，本发明通过将成分更复杂的保健食品中三种性质差异大的待测物质经氨水-乙腈溶液提取、QuEChERS试剂净化，以C18色谱柱分离，0.1％甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱，采用电喷雾串联质谱(ESI-MS/MS)多反应监测，正、负离子模式同时扫描监测，实现三种药物的同时检测。
附图说明
图1为实施例1中的标准品TIC图(A:别嘌醇；B:丙磺舒；C:苯溴马隆)；
图2为实施例2中固体粉状抗痛风保健食品液相色谱-串联质谱图；
图3为实施例3中液体抗痛风保健食品液相色谱-串联质谱图。
具体实施方式
下面结合附图以及具体实施方式，对本发明做进一步描述：
实施例1
本实施例提供的同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，包括以下步骤：
(1)样品前处理：以市售的某品牌的固体粉状抗痛风保健食品作为待测样品，经充分混合后准确称取样品2g，置于50mL离心管中，加入10mL 0.1％氨水-乙腈(v/v)溶液和1gNaCl，涡旋震荡混合1min，超声频率为40kHz，再超声提取5min，以8000r/min离心5min，收集上清液；再加入10mL 0.1％氨水-乙腈(v/v)溶液至离心管中重复上述提取操作，合并两次上清液，加入150mg QuEChERS试剂(内含PSA粉末和C18粉末比例为2:1)和1g无水Na2SO4净化，涡旋混合3min，以8000r/min离心5min；移取上清液5mL至玻璃管中，在40℃下氮气吹干，用1mL0.1％氨水-乙腈(v/v)复溶；上清液过0.22μm滤膜，待测。
(2)标准溶液的配制：分别准确称取10.0mg丙磺舒、别嘌醇、苯溴马隆标准品于100mL棕色容量瓶中，先加入400μL氨水，再加入适量的甲醇溶解后，稀释定容后配制成浓度为0.1mg/mL的混合标准储备液，用甲醇配制成25μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L、1000μg/L、2000μg/L的混合标准工作溶液。
(3)检测分析
将配置的混合标准工作溶液和待测样品上机检测，测定条件如下：
色谱条件：色谱柱：菲罗门Kinetex C18(2.6μm)，100mm×4.6μm；流速：0.20mL/min；柱温：40℃；样品室温度：15℃；进样体积：10μL；流动相：A：甲醇；B：0.1％甲酸水溶液。梯度洗脱程序：0～2.0min，5％A；2.0～6.0min，5％A～80％A；6.0～9.0min，80％A；9.0～10.0min，80％A～5％A。
质谱条件：离子源：电喷雾离子源(ESI)；离子化方式：ESI(+)和ESI(－)；检测模式：多反应监测(MRM)模式；离子源温度150℃；检测器电压：2.83kV；离子源电压：正离子模式+4.5kV，负离子模式-3.5kV；脱溶剂气温度：500℃；脱溶剂气流量：800L/h；碰撞气流量：0.13mL/min。
上述方法中采用的主要的仪器设备和试剂为：UPLC-Xevo TQ超高效液相色谱-串联质谱/质谱仪；超声波清洗机；高速冷冻离心机；DT-502A电子天平；IKA MS3漩涡混合器；QuEChERS试剂(内含100mg PSA、50mg C18粉末)；丙磺舒、别嘌醇、苯溴马隆(纯度均为≥97％)；甲醇(色谱纯)；甲酸、氨水(优级纯)；实验用水为二级蒸馏超纯水；氮气(纯度大于99.999％)。
丙磺舒、别嘌醇、苯溴马隆三种药物的质谱参数见表1：
表1测定丙磺舒、别嘌醇、苯溴马隆的质谱参数
备注：*定量离子对。
(4)结果分析：
将步骤(3)获得的检测数据，绘制成标准曲线，得出三种药物的线性范围与检出限，如表2所示：
表2测定丙磺舒、别嘌醇、苯溴马隆的线性参数
混合标准工作溶液经检测得到的标准品TIC图(见图1)和标准曲线，以及三种药物的线性范围(见表2)。通过标准曲线计算得出固体粉状抗痛风保健食品中三种药物的含量，同一待测样品重复检测三次，取平均值，结果见表3。
对比例1
本对比例检测方法大体与实施例1相同，不同之处在于10mL 0.1％氨水-乙腈(v/v)溶液换成如下处理：处理①为换成10mL乙腈溶液；处理②为换成10mL0.1％甲酸-乙腈(v/v)溶液。
采用上述处理的样品检测结果见表3。处理①和处理②的检测结果发现别嘌醇、丙磺舒的回收率均小于50％，检测结果都具有较高的假阴性。原因可能与别嘌醇、丙磺舒在乙腈和酸性溶液中略溶，不利于这两种待测药物的有效提取。
对比例2
本对比例检测方法大体与实施例1相同，不同之处在于QuEChERS试剂(内含100mgPSA、50mg C18粉末)换成如下处理：处理①取消QuEChERS试剂净化，直接将0.1％氨水-乙腈(v/v)溶液提取离心收集的上清液移取5mL至玻璃管中，在40℃下氮气吹干，用1mL0.1％氨水-乙腈(v/v)复溶；上清液过0.22μm滤膜，待测；处理②换成另一种成分的QuEChERS试剂(内含100mg PSA、50mg C18粉末，50mg GCB粉末)。
采用上述处理的样品检测结果见表3。处理①的检测结果发现，三种物质液相色谱-质谱图发现杂峰较多，基质的抑制效应明显，无法采用回收率进行计算分析。原因可能与保健食品成分复杂，未经净化处理导致。处理②的检测结果发现液相色谱-质谱图发现杂峰较少，但是三种物质回收率只有25-40％，原因可能与三种物质都带有平面结构，GCB粉末对这三种物质都有很强的吸附能力，导致回收率偏低，假阴性升高。
实施例2
以市售的另一品牌的固体类抗痛风保健食品为待测样品，样品检测包括以下步骤：
(1)样品前处理、标准溶液的配制、检测分析同实施例1。
(2)结果分析
将待测样品的液相色谱-串联质谱图(见图2)与标准样品比对进行定性分析，通过标准曲线计算得出固体粉状抗痛风保健食品中三种药物的含量，同一待测样品重复检测三次，取平均值，检验结果见表3。
实施例3
以市售的某品牌的液体类抗痛风保健食品为待测样品，样品检测包括以下步骤：
(1)样品前处理：经充分混合后准确称取样品2g，置于50mL离心管中，加入5mL0.1％氨水-乙腈(v/v)溶液和2g NaCl，涡旋震荡混合1min，超声频率为40kHz，再超声提取5min，以8000r/min离心5min，收集上清液；再加入5mL 0.1％氨水-乙腈(v/v)溶液至离心管中重复上述提取操作，合并两次上清液，加入QuEChERS试剂和1g无Na2SO4，涡旋混合3min，以8000r/min离心5min；移取上清液5mL至玻璃管中，在40℃下氮气吹干，用1mL0.1％氨水-乙腈(v/v)复溶；上清液过0.22μm滤膜，待测。
(2)标准溶液的配制、检测分析同实施例1。
(3)结果分析
将待测样品的液相色谱-串联质谱图(见图3)与标准样品比对进行定性分析，通过标准曲线计算得出固体粉状抗痛风保健食品中三种药物的含量，同一待测样品重复检测三次，取平均值，检验结果见表3。
表3不同抗痛风保健食品中三种药物的测定结果
注：苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒的加标量分别为200mg/kg。
对本领域的技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，做出其它各种相应的改变以及形变，而所有的这些改变以及形变都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，其特征是包括以下步骤：
(1)样品前处理：选取抗痛风类保健食品，加入氨水-乙腈溶液和NaCl，涡旋震荡混匀，超声提取，离心收集上清液，在上清液中加入氨水-乙腈溶液重复上述提取操作，合并两次上清液，在上清液中加入QuEChERS试剂和无水Na2SO4，涡旋混合后，离心，移取上清液，氮气吹干，用氨水-乙腈溶液复溶，上清液采用滤膜过滤，获得待测样品；
(2)配制标准溶液：称取苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒标准品，配制成混合标准工作溶液；
(3)苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量测定：将步骤(1)制得的待测样品和混合标准工作溶液分别上高效液相色谱-串联质谱仪进行测定，并进行数据处理和定量分析后，同时获得抗痛风类保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒的含量。
2.根据权利要求1所述的同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，其特征是：步骤(1)中所述的保健食品、氨水-乙腈溶液和NaCl的质量份配比为1:1～5:0.5～5，其中所述的氨水-乙腈溶液中氨水的体积百分含量为0.05～2％。
3.根据权利要求1所述的同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，其特征是：步骤(1)中涡旋震荡1～5min混匀，超声频率为30～60kHz，超声时间为5～10min，离心时离心机的转速为5000～10000r/min离心3～6min。
4.根据权利要求1所述的同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，其特征是：步骤(1)中氨水-乙腈溶液提取后的上清液中加入100～300mg QuEChERS试剂和0.5～2g无水Na2SO4净化，涡旋混合2～5min，离心时离心机的转速为5000～10000r/min离心3～6min。
5.根据权利要求1所述的同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，其特征是：步骤(1)中移取上清液，在40～60℃下氮气吹干，用氨水-乙腈溶液复溶，上清液采用孔径为0.22μm的滤膜过滤，获得待测样品。
6.根据权利要求1所述的同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，其特征是：步骤(2)中称取苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒标准品，先加入氨水，再加入甲醇溶解，稀释定容配制成混合标准储备液，避光保存，使用前放置恢复到室温，使用时用甲醇配制成一系列浓度的混合标准工作溶液，现配现用。
7.根据权利要求1所述的同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，其特征是：步骤(3)中上高效液相色谱-串联质谱仪进行测定时，高效液相色谱条件为：色谱柱：C18柱，2.6μm，100mm×4.6μm；流速：0.20～0.40mL/min；柱温：40～60℃；样品室温度：15～25℃；进样体积：10～20μL；流动相：A-甲醇；B-0.1～0.5％甲酸水溶液，梯度洗脱程序：0～2.0min，5％A；2.0～6.0min，5％A～80％A；6.0～9.0min，80％A；9.0～10.0min，80％A～5％A。
8.根据权利要求1所述的同时测定保健食品中苯溴马隆、别嘌醇和丙磺舒含量的方法，其特征是：步骤(3)中上高效液相色谱-串联质谱仪进行测定时，质谱条件为：离子源：电喷雾离子源ESI；离子化方式：ESI(+)和ESI(－)；检测模式：多反应监测MRM模式；离子源温度150～200℃；检测器电压：0.50～3.50kV；离子源电压：正离子模式+0.50～+5.5kV，负离子模式-1.0～-5.5kV；脱溶剂气温度：450～550℃；脱溶剂气流量：600～800L/h；碰撞气流量：0.1～0.5mL/min。
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