CN107419004A - lncRNA‑RP11‑290F20.3及其小干扰RNA的应用 - Google Patents

lncRNA‑RP11‑290F20.3及其小干扰RNA的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种长链非编码RNA lncRNA‑RP11‑290F20.3在制备用于诊断和/或预后评估胃癌疾病的试剂盒中的用途,以及所述lncRNA‑RP11‑290F20.3的小干扰RNA在制备用于预防或治疗胃癌疾病的药物中的用途。本发明所述的lncRNA‑RP11‑290F20.3在人类胃癌组织和胃癌细胞系中高表达,而lncRNA‑RP11‑290F20.3的小干扰RNA具有抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的功能,因此,lncRNA‑RP11‑290F20.3的小干扰RNA可以作为一种新型的药物作用靶点,对于胃癌的预防及治疗在临床上具有重要意义。

Description

lncRNA-RP11-290F20.3及其小干扰RNA的应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域,尤其是涉及一种lncRNA-RP11-290F20.3及其小干扰RNA的应用或应用其的产品。
背景技术
胃癌是威胁人类健康的一种常见病,全球范围内胃癌的死亡率很高,其中男性约为14.3/10万,女性约为6.9/10万。胃癌是源自胃黏膜上皮的恶性肿瘤,占全部恶性肿瘤的第3位,占消化道恶性肿瘤的首位,占胃恶性肿瘤的95%。胃癌的发病率有明显的地域差异:东亚、东欧和南美最高,非洲南北部最低。中国的胃癌发病率以西北最高、东北及内蒙古次之、华东及沿海又次之、中南及西南最低,每年约有17万人死于胃癌,且每年还有2万以上新的胃癌病人。目前关于胃癌的发病机理尚不完全清楚,胃癌的预防、诊断和治疗尚不能达到让人满意的效果,急需开发新的技术、方法用于胃癌的诊断、防治。
lncRNA是新近研究发现的一类内源性长链非编码RNA分子,许多研究表明lncRNA对于维持胃正常生理功能具有重要作用,胃中的lncRNA异常表达与许多胃部疾病的发生相关。因此,将lncRNA作为胃癌治疗的靶点,开发相关药物具有潜在的临床应用价值。单一的lncRNA可以同时作用于多个靶基因的mRNA的表达,这样药物作用于一个lncRNA可以调节多个参与胃癌发病基因的表达,影响多个信号通路,从整体上达到治疗疾病的目的。由于lncRNA在胃癌病理状态下表达水平不同,因此可以通过检测lncRNA的表达水平来预测诊断疾病。
细胞增殖、细胞分化和细胞凋亡是任何一个多细胞生物在个体发育过程中的三项基本活动,相互依存,缺一不可。它们是一个主动的、高度有序的、由基因控制及一系列酶参与的过程,对正常胚胎发育,维持细胞群体及恶性病变过程中均起重要作用,在保证多细胞生物的健康生存过程中扮演着关键的角色。恶性肿瘤的两大特征,一是细胞无休止分裂,二是恶性分化。如何抑制肿瘤细胞的恶性增殖,限制其向邻近组织或者远处组织器官进行转移是肿瘤治疗的关键问题。
目前研究发现许多lncRNA通过调控增殖或侵袭相关靶蛋白的表达参与细胞增殖、细胞分化的发生,这些lncRNA有促增殖或侵袭的,也有抑增殖或侵袭的。寻找胃癌组织中特异表达的、参与肿瘤细胞增殖和侵袭的lncRNA,阐明其作用机理,对于开发以lncRNA为策略的胃癌的诊断、治疗具有及其重要的意义和应用前景。
针对现有技术中存在的上述问题,特提出本发明。
发明内容
本发明旨在确定或发现调控胃癌发生、发展的胃组织特异性高表达的lncRNA,确定其在胃癌细胞增殖、侵袭和迁移中的关键作用,将其应用到胃癌的诊断和防治中。所以本发明的第一个目的在于提供lncRNA-RP11-290F20.3在制备用于诊断和/或预后评估胃癌的试剂盒中的应用,本lncRNA-RP11-290F20.3的序列为SEQ ID No.2所示的核苷酸序列。
本发明的第二个目的在于提供一种用于诊断和/或预后评估胃癌的试剂盒。
所述试剂盒含有如SEQ ID No.2所示的RNA分子。
优选地,所述试剂盒包括特异性检测lncRNA-RP11-290F20.3的全长引物和特异性片段引物。
其中,扩增lncRNA-RP11-290F20.3全长的上游引物为:
5′-CACAGCTGGGATGTGGCAGAG-3′(SEQ ID NO.3)
扩增lncRNA-RP11-290F20.3全长的下游引物为:
5′-CCGAGAGCCAAGGAAGGAATC-3′(SEQ ID NO.4);
其中,特异性检测lncRNA-RP11-290F20.3片段的上游引物为:
5′-GATCCTAGAGGAAAGTGGCAAG-3′(SEQ ID NO.5)
特异性检测lncRNA-RP11-290F20.3片段的下游引物为:
5′-AGGGTGTACAGCAGTGAACAA-3′(SEQ ID NO.6)。
同时,由于本发明发现针对lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA可有效抑制胃癌细胞的增殖、迁移和浸润,本发明的第三个目的在于提供一种用于预防和/或治疗胃癌的药物组合物,所述lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
为解决上述技术问题,本发明采用如下技术方案:
lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA在制备用于预防和/或治疗胃癌药物中的应用;所述lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
一种用于预防和/或治疗胃癌的药物组合物,所述药物组合物含有如下任一种物质:
I、SEQ ID No.1所示的RNA分子、生物活性功能片段或变体;;
II、编码I所示RNA分子的重组载体;
III、编码I所示RNA分子的重组病毒;
Ⅳ、编码I所示RNA分子的重组病毒载体;
所述胃癌包括自隆起型胃癌、局限溃疡型胃癌、浸润溃疡型胃癌和弥漫浸润型胃癌中的一种或几种。
优选地,所述药物组合物还包括药学上可接受的载体或辅料。
优选地,所述药学上可接受的载体选自壳聚糖、胆固醇、脂质体和纳米颗粒中的一种或几种。
优选地,所述药物的给药方式选自口服、静脉注射、肌肉注射或直接胃内注射。
lncRNA-RP11-290F20.3在制备用于诊断和/或预后评估胃癌试剂盒中的应用;所述lncRNA-RP11-290F20.3的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
上述的胃癌包括自隆起型胃癌、局限溃疡型胃癌、浸润溃疡型胃癌和弥漫浸润型胃癌中的一种或几种。
本发明的有益效果如下:
本发明提供的lncRNA-RP11-290F20.3通过实验发现在人类胃癌组织和胃癌细胞系中的表达显著上调,通过对其进行特异性的检测能达到到诊断和/或预后评估胃癌的目的;同时,lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA通过抑制lncRNA-RP11-290F20.3的表达,能够起到抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移进而抗肿瘤的作用;将lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA作为药物,导入胃组织或体内,对胃癌将具有预防及治疗作用。因此,lncRNA-RP11-290F20.3可以作为一种新的生物标志物,应用于胃癌的诊断和/或预后评估;而与之相应的lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA,可以作为一种新型的药物,对多种类型胃癌具有潜在的预防和治疗价值。
附图说明
图1A为实施例1中临床胃癌组织中lncRNA-RP11-290F20.3表达水平;
图1B为实施例1胃癌细胞系中lncRNA-RP11-290F20.3表达水平;
图2A为实施例2中抑制内源性的lncRNA-RP11-290F20.3对胃癌细胞BGC823增殖的抑制作用在采用MTT方法检测时的BGC823细胞增殖情况;
图2B为实施例2中抑制内源性的lncRNA-RP11-290F20.3对胃癌细胞BGC823增殖的抑制作用在采用EdU染色法检测时的BGC823细胞增殖情况;
图3为实施例3中lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA对胃癌细胞BGC823侵袭和迁移能力的影响。
具体实施方式
下面将结合附图对本发明的技术方案进行清楚、完整的描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明的发明人发现lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA通过抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移,起到抗肿瘤作用。在胃癌组织和胃癌细胞系中lncRNA-RP11-290F20.3的表达显著上调,lncRNA-RP11-290F20.3的上调可能诱导了胃癌的发生;抑制细胞系内的内源性的lncRNA-RP11-290F20.3,可以抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移。将lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA与适当的载体结合形成药物,导入胃组织或体内,对胃癌将具有预防及治疗作用。可以考虑将lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA与壳聚糖、胆固醇、脂质体、纳米颗粒等组合形成药物分子,通过口服、静脉注射、肌肉注射、或直接胃内注射的方式,用于防治胃癌发生。
lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA(siRNA-lncRNA-RP11-290F20.3)在制备用于预防和/或治疗胃癌药物中的应用。
其中,本发明合成的上述lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA
(siRNA-lncRNA-RP11-290F20.3)的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;
5′-GGAGAAUAAACCCUCGGAU-3′(SEQ ID No.1)
用于预防和/或治疗胃癌的药物组合物,该药物组合物含有如下任一种物质:
I、SEQ ID No.1所示的RNA分子、生物活性功能片段或变体;
II、编码I所示RNA分子的重组载体;
III、编码I所示RNA分子的重组病毒;
Ⅳ、编码I所示RNA分子的重组病毒载体;
上述胃癌包括自隆起型胃癌、局限溃疡型胃癌、浸润溃疡型胃癌和弥漫浸润型胃癌中的一种或几种;
该药物组合物还包括药学上可接受的载体或辅料。
在一个优选的实施例中,药学上可接受的载体选自壳聚糖、胆固醇、脂质体和纳米颗粒中的一种或几种。
在另一个优选的实施例中,药物的给药方式选自口服、静脉注射、肌肉注射或直接胃内注射。
lncRNA-RP11-290F20.3在制备用于诊断和/或预后评估胃癌试剂盒中的应用。
其中,上述lncRNA-RP11-290F20.3的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示:
5′-CACAGCUGGGAUGUGGCAGAGCUGGGGUUCCAGCUCCUGUUCCCAUUGCUGGACAGCUGCCACAUCUGGCACCCAAUUUAGGACCCCGCGGGGAGGCCCAAGCCCCGGGGGUGGCGGGGGAUCCUAGAGGAAAGUGGCAAGGCCAGGACCCUGGAGCAGAGCCAGUGGAAUGUCACCAUCGCCCAGGUGGGGAUUUUUGUGUGUUUUGUUCACUGCUGUACACCCAGCCCCCAGCACAGCGCCUGUCCAGGACAAGUGCCCAGUAAACACUUGGGAAGCAAUGCAAGCGUCCUCCCAGCAGCUCCUGCAAACAGACCCCCGACCCAAGCCCUUCCUUCUGCCUCCACUGCCACCACUGCUGCUCAUCUCUGCUGGCACAGAAGUCUCUUCCCUGGUCUUCCAGAAAUCCCCUCUCCACACUCAGCCAGAGGGAGCUAUUAAAACUGUGGGCCAGCCCACAUCAGUCCACAGCAAAGUCCUCUCUAAGGGAUCUCUGUUGCUUGGAGAAUAAACCCUCGGAUUCCUUCCUUGGCUCUCGG-3′(SEQ ID No.2)
用于诊断和/或预后评估胃癌的试剂盒,该试剂盒含有如SEQ ID No.2所示的RNA分子;
上述的胃癌包括自隆起型胃癌、局限溃疡型胃癌、浸润溃疡型胃癌和弥漫浸润型胃癌中的一种或几种。
除非特别指明,以下实施例中采用的细胞系均为胃癌细胞系BGC823。
除非特别指明,以下实施例中所用的试验方法均为本领域中所用的常规方法。
除非特别指明,以下实施例中所用的试剂均为分析纯级试剂,且可从正规渠道商购获得。
除非另有说明,否则本发明以下各实施例中涉及的各种实验方法和操作,包括细胞培养,RNA的提取,RCR扩增,荧光定量PCR,细胞染色等等,均可参见以下文献:Wang JX,Zhang XJ,Li Q,et al.,MicroRNA-103/107Regulate Programmed Necrosis andMyocardial Ischemia/Reperfusion Injury Through Targeting FADD.CircRes.2015Jul 31;117(4):352-363。
实施例1
临床胃癌组织和胃癌细胞系中lncRNA-RP11-290F20.3表达情况检测
本实施例中,采用的临床胃癌组织及其癌旁组织均来源于青岛市肿瘤医院,为新鲜分离的肿瘤组织,经切割成小组织块后冻于-80℃备用。
在本实施例中,采用的正常胃黏膜上皮细胞和胃癌细胞系均来自实验室在常规正常培养条件下培养和冻存。
利用Trizol试剂法提取胃癌及癌旁组织总RNA,并利用实时荧光定量PCR技术检测lncRNA-RP11-290F20.3的表达水平。
PCR扩增lncRNA-RP11-290F20.3,扩增后的核苷酸序列全长为539bp,序列如SEQID No.2所示,
PCR反应体系以50μL计,
PCR条件如下:
95℃,5min,一个循环;
95℃,30sec,
56℃,30sec,
72℃,1min,共30个循环;
最后72℃延伸5min;
PCR引物设计如下:
扩增全长用之上游引物:
5'-CACAGCTGGGATGTGGCAGAG-3'(SEQ ID No.3);
扩增全长用之下游引物:
5'-CCGAGAGCCAAGGAAGGAATC-3'(SEQ ID No.4)。
对lncRNA-RP11-290F20.3表达水平进行实时荧光定量PCR检测,PCR反应体系以25μL计,为:SYBR Green Real-time PCR Master Mix 12.5μL;Primer F 1.0μL;Primer R1.0μl;cDNA 2.0μL;三蒸水补充至25.0μL。
PCR条件如下:
95℃,30sec,一个循环;
95℃,5sec,
60℃,30sec,
72℃,1min,共39个循环;
最后72℃延伸10min;
PCR引物设计如下:
特异性检测lncRNA-RP11-290F20.3片段的上游引物为:
5′-GATCCTAGAGGAAAGTGGCAAG-3′(SEQ ID NO.5);
特异性检测lncRNA-RP11-290F20.3片段的下游引物为:
5′-AGGGTGTACAGCAGTGAACAA-3′(SEQ ID NO.6)。
本实施例在胃癌及癌旁组织检测到的lncRNA-RP11-290F20.3表达水平如图1A所示(本图采用的引物对为SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6),图1A中纵坐标表示以癌旁组织为基准,胃癌组织中lncRNA-RP11-290F20.3的表达水平,从图中显示相对于癌旁组织,胃癌组织中lncRNA-RP11-290F20.3的表达水平显著上调。
本实施例在不同胃癌细胞系中利用实时荧光定量PCR技术检测lncRNA-RP11-290F20.3的表达水平(PCR反应及条件同上),检测结果如图1B所示,图1B中纵坐标表示以正常胃粘膜上皮细胞系GES-1为基准,胃癌细胞系SGC7901、MGC803、BGC823、AGS、NCI-N87中lncRNA-RP11-290F20.3的表达水平,图1B表明相对于胃黏膜上皮细胞GES-1,lncRNA-RP11-290F20.3在胃癌细胞BGC823、AGS和NCI-N87中的表达水平显著上升。
实施例2
lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA抑制胃癌细胞增殖的实验
本实施例中,针对lncRNA-RP11-290F20.3合成的小干扰RNA中的序列是
5’-GGAGAAUAAACCCUCGGAU-3’(SEQ ID NO.1)。转染处理是通过脂质体lipofectamine2000进行,分别设立空白组,对照组和小干扰RNA实验组。转染操作按照试剂盒操作说明书进行,脂质体lipofectamine2000购自Invitrogen公司;
本实施例中的EdU溶液购自广州锐博;
本实施例中的细胞固定液为含4%多聚甲醛的PBS缓冲液;
本实施例中的渗透剂为0.5%TritonX-100的PBS缓冲液;
使用实施例1中胃癌细胞系BGC823为细胞模型,对胃癌细胞BGC823(细胞量约为1×106)进行lncRNA-RP11-290F20.3的双链小干扰RNA转染处理,转染4小时后换正常培养基,继续培养1-5天,于培养箱中孵育不同时间后弃去100μL培养基,加入10μLMTT(终浓度500μg/mL),继续培养4小时后加入150μLDMSO溶解形成的甲瓒颗粒,用酶标仪检测OD490nm光吸收值。
实验结果如图2A所示,图2A示出了采用MTT方法检测的BGC823细胞增殖情况,图中结果表明抑制内源性lncRNA-RP11-290F20.3可以显著抑制胃癌细胞BGC823的增殖能力。
在本实施例中,采用的EdU染色法检测lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA抑制胃癌细胞增殖的影响。将胃癌细胞BGC823(细胞量约为1×106)随机分为空白组,对照组和实验组:空白组BGC823只使用正常细胞培养液进行培养;实验组进行lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA转染处理,转染4小时后换正常培养基,继续培养20小时;对照组与实验组的处理方法相同,仅将lncRNA-RP11-290F20.3的干扰物替换为无意义序列的阴性对照RNA。。用细胞培养基按1000:1的比例稀释EdU溶液,制备适量50μM EdU培养基,每孔加入100μL的50μM EdU培养基孵育2小时,弃培养基;PBS清洗细胞1-2次,每次5分钟;每孔加入100μL细胞固定液室温孵育30分钟;弃固定液,每孔加入2mg/mL甘氨酸,脱色摇床孵育5分钟后,弃甘氨酸溶液;每孔加入100μL PBS,脱色摇床清洗5分钟,弃PBS;每孔加入100μL 1×Apollo染色反应液,室温、避光、脱色摇床孵育30分钟;弃染色反应液,每孔加入100μL渗透剂脱色摇床清洗10分钟,2-3次;用去离子水按100:1的比例稀释100×Hoechst33342储存液,制备适量1×Hoechst33342反应液,避光保存;每孔加入100μL 1×Hoechst33342反应液,避光、室温、脱色摇床孵育30分钟后,弃染色反应液;每孔每次加入100μL PBS清洗1-3次;每孔加入100μLPBS保存待用,最后进行图像获取及分析,调试仪器时,将曝光时间调整为30毫秒左右,尽量不要大于1秒。
实验结果如图2B所示,图2B示出了采用EdU染色法检测到BGC823细胞增殖情况,图中结果表明抑制内源性lncRNA-RP11-290F20.3可以显著抑制胃癌细胞的增殖能力。
实施例3
lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA抑制胃癌细胞的侵袭和迁移能力
使用实施例2中lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA处理的胃癌细胞系BGC823为细胞模型。采用Transwell法检测细胞的侵袭能力,具体操作如下:
用50mg/L Matrigel 1:10稀释液包被Transwell小室底部膜的上室面,37℃温育;将lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA处理后12小时细胞消化,用PBS和无血清培养基先后洗涤一次,用无血清培养基悬浮细胞,计数,调整浓度为3×105/mL;在Transwell下室(即24孔板底部)加入600-800μL含20%血清的培养基,上室加入100-150μL细胞悬液,继续在孵箱培养24-48小时;用镊子小心取出上室,吸干上室液体,移到预先加入约800μL甲醇的孔中,室温固定60分钟;取出上室,吸干上室固定液,移到预先加入约800μL结晶紫染液的孔中,室温染色15-30分钟;轻轻用清水冲洗浸泡数次,取出上室,吸去上室液体,用湿棉棒小心擦去上室底部膜表面上的细胞;每孔每次加入100μL PBS清洗1-3次;显微镜下取5个随机视野计数,统计结果。
实验结果如图3所示,图上示出了抑制内源性的lncRNA-RP11-290F20.3对BGC823细胞迁移能力的影响;图下示出了抑制内源性的lncRNA-RP11-290F20.3对BGC823细胞侵袭能力的影响;图中结果表明抑制内源性lncRNA-RP11-290F20.3可以显著抑制胃癌细胞的迁移和侵袭能力。
综上,本发明提供了一种长链非编码RNA lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA在制备用于预防或治疗胃癌疾病的药物中的用途,所述lncRNA-RP11-290F20.3在制备用于诊断和/或预后评估胃癌疾病的试剂盒中的用途。证明了lncRNA-RP11-290F20.3在人类胃癌组织和胃癌细胞系中的高表达,以及其小干扰RNA在胃癌进展过程中的抑制作用。本发明所述的lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA具有抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的功能,因此,lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA可以作为一种新型的药物作用靶点,对于胃癌的预防及治疗在临床上具有重要意义。
最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 青岛大学
<120> lncRNA-RP11-290F20.3及其小干扰RNA的应用
<160> 6
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 19
<212> RNA
<213> 人工序列
<400> 1
ggagaauaaa cccucggau 19
<210> 2
<211> 539
<212> RNA
<213> 人工序列
<400> 2
cacagcuggg auguggcaga gcugggguuc cagcuccugu ucccauugcu ggacagcugc 60
cacaucuggc acccaauuua ggaccccgcg gggaggccca agccccgggg guggcggggg 120
auccuagagg aaaguggcaa ggccaggacc cuggagcaga gccaguggaa ugucaccauc 180
gcccaggugg ggauuuuugu guguuuuguu cacugcugua cacccagccc ccagcacagc 240
gccuguccag gacaagugcc caguaaacac uugggaagca augcaagcgu ccucccagca 300
gcuccugcaa acagaccccc gacccaagcc cuuccuucug ccuccacugc caccacugcu 360
gcucaucucu gcuggcacag aagucucuuc ccuggucuuc cagaaauccc cucuccacac 420
ucagccagag ggagcuauua aaacuguggg ccagcccaca ucaguccaca gcaaaguccu 480
cucuaaggga ucucuguugc uuggagaaua aacccucgga uuccuuccuu ggcucucgg 539
<210> 3
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
cacagctggg atgtggcaga g 21
<210> 4
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 4
ccgagagcca aggaaggaat c 21
<210> 5
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 5
gatcctagag gaaagtggca ag 22
<210> 6
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 6
agggtgtaca gcagtgaaca a 21

Claims (10)

1.lncRNA-RP11-290F20.3在制备用于诊断和/或预后评估胃癌试剂盒中的应用;所述lncRNA-RP11-290F20.3的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;
所述胃癌包括自隆起型胃癌、局限溃疡型胃癌、浸润溃疡型胃癌和弥漫浸润型胃癌中的一种或几种。
2.一种用于诊断和/或预后评估胃癌的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒含有如SEQ IDNo.2所示的RNA分子。
3.根据权利要求2所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括用于特异性扩增和检测lncRNA-RP11-290F20.3全长或者其片段的引物,所述用于特异性扩增的引物包括序列如SEQ ID No.3所示的上游引物和如SEQ ID No.4所示的下游引物,所述用于特异性检测lncRNA-RP11-290F20.3片段的引物包括序列如SEQ ID No.5所示的上游引物和如SEQ IDNo.6所示的下游引物。
4.lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA在制备用于预防和/或治疗胃癌药物中的应用,其特征在于,所述lncRNA-RP11-290F20.3的小干扰RNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述胃癌包括自隆起型胃癌、局限溃疡型胃癌、浸润溃疡型胃癌和弥漫浸润型胃癌中的一种或几种。
6.一种用于预防和/或治疗胃癌的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物含有如下任一种物质:
I、SEQ ID No.1所示的RNA分子、生物活性功能片段或其反义核酸等的变体;
II、编码I所示RNA分子的重组载体;
III、编码I所示RNA分子的重组病毒;
Ⅳ、编码I所示RNA分子的重组病毒载体。
7.根据权利要求6所述的药物组合物,其特征在于,所述胃癌包括自隆起型胃癌、局限溃疡型胃癌、浸润溃疡型胃癌和弥漫浸润型胃癌中的一种或几种。
8.根据权利要求6所述的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物还包括药学上可接受的载体或辅料。
9.根据权利要求8所述的药物组合物,其特征在于,所述药学上可接受的载体选自壳聚糖、胆固醇、脂质体和纳米颗粒中的一种或几种。
10.根据权利要求6所述的药物组合物,其特征在于,所述药物的给药方式选自口服、静脉注射、肌肉注射或直接胃内注射。
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