CN107418906A - 一种提高彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种能显著促进彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂，属于微生物技术领域。所述复合菌剂由植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)P‑8、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)KT‑La9和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)KT‑Lp9组成。与现有技术相比，本发明涉及的复合菌剂具有如下优点和进步性：可以增强彩椒对根腐病的抗性，达到高效的防病效果；可以改善彩椒的品质(单果重、单果横茎、竖茎)；可以显著增加彩椒的产量，带来更好的经济效益。

Description

一种提高彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂及其应用
技术领域
本发明涉及一种微生物菌剂，尤其涉及一种能显著促进彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂及其应用，属于微生物技术领域。
背景技术
彩椒(Capsicum annuum var.grossum)是茄科辣椒属中的一个变种，其果肉肥厚多汁，口感甜中微辛，因其色彩鲜艳而得名，为近年来我国从荷兰、以色列等国家新引进的品种。彩椒富含多种维生素(丰富的维生素C)及微量元素，不仅可美容养颜，还有消暑、补血和促进血液循环等功效，是我国观光农业及日光温室的重要栽培品种之一。随着蔬菜产业的发展，彩椒种植面积不断扩大，生产效益日益显著。而在彩椒栽培方面，无论是传统的土壤栽培还是新兴的无土栽培都存在盲目施肥、过量施肥等现象，造成土壤质量退化以及环境严重污染等诸多问题，尤其是在设施栽培中，由于长期不平衡施肥造成土壤理化性质下降，土壤酶活性降低，最终导致彩椒产量和品质下降，这一现象已经影响到我国农产品安全及农业生产的可持续发展。
彩椒根腐病是一种典型的土壤传播病害，根腐病病原菌的孢子在环境中存活可长达十年以上，病原菌在发病植株残体和土壤中越冬，病菌从茎基部和根部创口侵染植株，发病后产生分生孢子，这些分生孢子借水流进行传播和再侵染。近几年来，随着保护地彩椒种植面积的逐年增加，常年连作、轮作倒茬越来越困难，土质较粘，温度变化较大，种植方式落后，技术粗放等原因造成辣椒根腐病的发生逐年加重，严重发病时常导致彩椒根系腐烂、植株枯死。进而导致彩椒产量降低、质量下降，轻者减产20-30％，重者减产50％以上，甚至绝产，造成巨大的经济损失。因此，彩椒根腐病现已成为我国辣椒生产中主要的限制性因素之一。彩椒根腐病的防治目前主要采取综合治理的方法。要及时清理田园，选用抗病性品种，培育无病壮苗，精耕细作，合理密植，轮作，科学管理，增施有机肥，减少化肥用量，并利用酵素菌技术处理田间废弃物，使有机物肥还田改土，提高作物抗病性和根腐病的发生，严重时使用化学药剂及生物防治。
微生物菌肥是继有机肥和化肥之后的一种新型生物肥料，大量研究结果表明，微生物肥料具有高效率、无毒害、无污染等特点，不但能减少农产品污染，而且能改良土壤，目前市场上，已有大量此类微生物肥。
公开号为CN 105461368 A的发明专利公开了一种微生物菌肥，以质量百分数计，包括84％～90％有机质，5％～11％水分，还包括菌种，菌种包括至少两种好氧菌，至少一种厌氧菌；好氧菌是枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、球形芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、酵母菌中的任意一种；厌氧菌是环状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳酸杆菌中的任意一种。本发明克服了现有化肥的不足，减少对环境的污染，活化土壤，微生物菌肥的有益生物菌含量每克大于3亿个，生物活化酶和多种微量元素得以供给，因此作物的品质得到质的飞跃。通过同时含有好氧菌与厌氧菌便于实现微生物菌肥在不同的条件下均能发生作用，提高作物的产出率。
公开号为CN 103011915 A的发明专利明公开了一种微生物菌肥。该微生物菌肥是以微生物的生命活动导致作物得到特定肥料效应的一种制品。但公知技术中的微生物菌肥只是单纯改善土壤肥力，对土壤中存在的病原微生物没有抑制作用。本发明通过鱼蛋白水解液制备、光合细菌液培养、5406放线菌菌液培养、枯草芽胞杆菌菌液培养等步骤，并按一定的比例将它们混合均匀而得。其中光合菌含有抗病毒物质，5406放线菌对30多种病原菌有抑制作用，枯草芽胞杆菌的增殖能达到改善土壤肥力提高作物产量及品质的目的。本发明中几种有益菌的协同作用，对提高植物的抗病、抗逆性，促进作物生长、改善作物品质起到了致关重要的作用。
公开号为CN 103936487 A的发明公开了一种微生物复合菌肥及其制备方法，属微生物菌肥技术领域。其含有机质≥30％，氮、磷、钾各≥4％，同时每克菌肥含有：解磷菌、解钾菌、固氮菌、嗜碱菌和嗜盐菌各1.5-2.5亿个，嗜热细菌和嗜热放线菌各2-3亿个。其中包含改良土壤结构的微生物，嗜盐嗜碱微生物以及嗜热微生物。改良土壤结构的微生物包含自生固氮菌和解磷解钾菌，能使板结的土壤(由化肥引起)变疏松,增加土壤有机质含量,改善土壤结构；嗜热细菌和嗜热放线菌，可以在几天内分解腐熟秸秆,使其成为农肥，增加土壤肥力；嗜盐嗜碱菌，能在盐碱土壤环境下生存繁殖,对于改善盐碱地的酸碱度有独特作用,使盐碱地变废为宝,使菌肥成为正常土壤和盐碱土壤的两用菌肥。
乳酸菌(lactic acid bacteria，LAB)是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的通称。这类细菌在自然界分布极为广泛，具有丰富的物种多样性。它们不仅是研究分类、生化、遗传、分子生物学和基因工程的理想材料，在理论上具有重要的学术价值，而且在工业、农牧业、食品和医药等与人类生活密切相关的重要领域应用价值也极高。此外，这类菌中有些细菌又是人畜的致病菌，因此受到人们极大的关注和重视。乳酸菌作为自然环境中普遍存在的一种安全的微生物，在农产品的种植及其质量安全中发挥着独有的优势。随着人们生活水平的提高，无农药和化学肥料施用的农产品越来越受到人们的欢迎，乳酸菌在农业种植和农产品品质安全领域的应用也越来越广泛。然而，目前尚没有微生物菌剂或菌肥用于彩椒种植，更没有将微生物菌剂用于彩椒的防病抗病的文献报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种液体复合菌剂，所述液体复合菌剂为适宜在彩椒中应用的乳酸菌，能够改变彩椒生长性状、显著提高彩椒产量，并且还能够抵抗彩椒根腐病。
为了实现上述目的，本发明通过以下技术方案实现：
一种提高彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂，由植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)P-8、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)KT-La9和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)KT-Lp9组成。
优选地，所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按(2-4)∶(0.5-1)∶1的活菌数添加比例进行发酵而成。
进一步优选地，所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按2∶1∶1的活菌数添加比例进行发酵而成。
所述复合菌剂可以采用如下方法制备：
(1)首先将所述植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的冷冻保藏菌种分别接种于MRS液体培养基中，在37±1℃条件下分别培养20-32小时，活化三代后分别用无菌生理盐水离心洗涤2-4次，在各菌体沉淀物上分别加入8％-12％灭菌脱脂乳液后，分别将三种种子液菌体浓度调整为108-109CFU/mL，即种子液制备完成；
(2)将步骤(1)得到的植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按照(2-4)∶(0.5-1)∶1的活菌数比例进行混合，混合菌种液按4-10％(V/V)的接种量接种于MRS培养液，并加入50ml/l的椰汁，在39±1℃条件下培养12-24小时后，调整其菌数为2.4-3.2×109cfu/ml，pH值为5.2-6.5，至此复合菌剂制备完成。
本发明还提供了一种提高彩椒产量和抗根腐病的微生物菌肥，所述微生物菌肥由基质和复合菌剂按(0.5-1)∶(100-200)(w/w)的比例混合制成；
优选地，所述的基质主要由腐殖酸类物质组成，所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按(2-4)∶(0.5-1)∶1活菌数添加比例进行发酵而成。
本发明人在筛选抑制彩椒根腐病病原菌的拮抗菌时意外发现，含有植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)P-8、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)KT-La9和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)KT-Lp9的复合菌液对病原菌具有明显抑制作用，从而提高了彩椒产量。基于此发现，本发明人通过接种于MRS培养液中培养发酵，将这三种菌制备成了液体复合菌剂。本发明提供了上述复合菌剂的应用，即：上述的复合菌剂在制备提高彩椒产量和抗根腐病的微生物菌肥中的应用。上述的复合菌剂在同时提高彩椒产量和抗根腐病中的应用。
有益效果：
与现有技术相比，本发明涉及的复合菌剂具有如下优点和进步性：(1)可以增强彩椒对根腐病的抗性，达到高效的防病效果。(2)可以改善彩椒的品质(单果重、单果横茎、竖茎)。(3)可以显著增加彩椒的产量，带来更好的经济效益。
附图说明
图1不同乳酸菌对彩椒单果竖径和横径的影响比较；
图2不同乳酸菌对彩椒单果重及亩产量的影响比较；
图3不同乳酸菌对彩椒抗根腐病的影响比较。
具体实施方式
以下通过实施例的形式对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。另外，下述实施例中的实验方法，如无特别说明，均为常规方法。
本发明所采用的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)P-8，分离自内蒙古传统自然发酵酸牛奶中，具有优异的抗胃肠道消化液耐受能力，能够存活于动物肠道内；该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏时间为2012年06月28日，保藏号为CGMCC NO.6312本发明所采用的嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)KT-La9，该菌株于2016年09月08日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏号为CGMCC NO.12949。本发明所采用的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)KT-Lp9该菌株于2016年09月08日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心，保藏号为CGMCC NO.12950。
实施例1
一种提高彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂，由植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)P-8、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)KT-La9和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)KT-Lp9组成。
所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按3∶0.5∶1的活菌数添加比例进行发酵而成。
所述复合菌剂可以采用如下方法制备：
(1)首先将所述植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的冷冻保藏菌种分别接种于MRS液体培养基中，在37±1℃条件下分别培养26小时，活化三代后分别用无菌生理盐水离心洗涤3次，在各菌体沉淀物上分别加入10％灭菌脱脂乳液后，分别将三种种子液菌体浓度调整为108-109CFU/mL，即种子液制备完成；
(2)将步骤(1)得到的植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按照3∶0.5∶1的活菌数比例进行混合，混合菌种液按7％(V/V)的接种量接种于MRS培养液，并加入50ml/l的椰汁，在39±1℃条件下培养18小时后，调整其菌数为2.8×109cfu/ml，pH值为5.8，至此复合菌剂制备完成。
本发明还提供了一种提高彩椒产量和抗根腐病的微生物菌肥，所述微生物菌肥由基质和复合菌剂按0.75∶150(w/w)的比例混合制成；
所述的基质主要由腐殖酸类物质组成，所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按3∶0.5∶1活菌数添加比例进行发酵而成。
实施例2
一种提高彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂，由植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)P-8、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)KT-La9和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)KT-Lp9组成。
所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按2∶1∶1的活菌数添加比例进行发酵而成。
所述复合菌剂可以采用如下方法制备：
(1)首先将所述植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的冷冻保藏菌种分别接种于MRS液体培养基中，在37±1℃条件下分别培养32小时，活化三代后分别用无菌生理盐水离心洗涤2次，在各菌体沉淀物上分别加入8％灭菌脱脂乳液后，分别将三种种子液菌体浓度调整为108-109CFU/mL，即种子液制备完成；
(2)将步骤(1)得到的植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按照2∶1∶1的活菌数比例进行混合，混合菌种液按4％(V/V)的接种量接种于MRS培养液，并加入50ml/l的椰汁，在39±1℃条件下培养12小时后，调整其菌数为2.4×109cfu/ml，pH值为5.2，至此复合菌剂制备完成。
本发明还提供了一种提高彩椒产量和抗根腐病的微生物菌肥，所述微生物菌肥由基质和复合菌剂按0.5∶100(w/w)的比例混合制成；
所述的基质主要由腐殖酸类物质组成，所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按2∶1∶1活菌数添加比例进行发酵而成。
实施例3
一种提高彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂，由植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)P-8、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)KT-La9和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)KT-Lp9组成。
所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按4∶1∶1的活菌数添加比例进行发酵而成。
所述复合菌剂可以采用如下方法制备：
(1)首先将所述植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的冷冻保藏菌种分别接种于MRS液体培养基中，在37±1℃条件下分别培养20小时，活化三代后分别用无菌生理盐水离心洗涤4次，在各菌体沉淀物上分别加入12％灭菌脱脂乳液后，分别将三种种子液菌体浓度调整为108-109CFU/mL，即种子液制备完成；
(2)将步骤(1)得到的植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按照4∶1∶1的活菌数比例进行混合，混合菌种液按10％(V/V)的接种量接种于MRS培养液，并加入50ml/l的椰汁，在39±1℃条件下培养24小时后，调整其菌数为3.2×109cfu/ml，pH值为6.5，至此复合菌剂制备完成。
本发明还提供了一种提高彩椒产量和抗根腐病的微生物菌肥，所述微生物菌肥由基质和复合菌剂按1∶200(w/w)的比例混合制成；
所述的基质主要由腐殖酸类物质组成，所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按4∶1∶1活菌数添加比例进行发酵而成。
实施例4：
1.、试验目的
彩椒富含多种维生素(丰富的维生素C)及微量元素，不仅可美容养颜，还有消暑、补血和促进血液循环等功效，是我国观光农业及日光温室的重要栽培品种之一。现在市民对生活品质的要求越来越高，彩椒的产量及营养水平还有待进一步提高。因此，本试验用3种不同的乳酸菌对彩椒进行灌根试验，并对各项生长指标进行测定，研究其对彩椒抗病性和产量的影响，以期为彩椒提质增产，降低环境污染提供科学依据。
2、试验时间
2016年5月-8月
3、试验地点和面积
内蒙古巴彦淖尔市杭锦后旗陕坝镇康尔徕生态园
4、试验材料与分组处理
试验材料：以彩椒(灯笼椒)为试验材料。
分组处理：
空白对照组：清水；
植物乳杆菌KT-Lp9：喷施植物乳杆菌KT-Lp9种子液活菌总数含量2.4-3.2×109cfu/ml；
复合菌1：由植物乳杆菌P-8和嗜酸乳杆菌KT-La9的种子液按比例进行混合发酵而成，所述植物乳杆菌P-8和嗜酸乳杆菌KT-La9的种子液活菌数量比为2:1，活菌总数含量2.4-3.2×109cfu/ml；
复合菌2：由喷施植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按比例进行混合发酵而成，植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液活菌数量比为2∶1∶1，活菌总数含量2.4-3.2×109cfu/ml。
空白对照组、植物乳杆菌KT-Lp9、、复合菌1组和复合菌2组分别设15个大棚，每个大棚0.7亩地。空白对照组在彩椒种植过程中灌根等体积的清水，其它农事与菌液处理组相同
试验方法：在苗期(移栽半个月后)、花期(移栽一个月后)使用，每次每个大棚采用滴灌方式滴灌2L菌液于根部。
5、彩椒取样检测方法及指标
在第二次滴灌一个月后统计发病率，每个大棚随机取三个样方，每个样方取100株观察是否发病，发病率(％)＝患病植株/全部植株×100％。在收获时间，每个大棚随机取三个样方，每个样方取10株彩椒统计彩椒单果重、单果横径、竖径；随机统计5个大棚的彩椒产量。
6、试验结果
如图1、表1所示，3种乳酸菌对彩椒单果竖径和横径较空白对照组均有不同程度的提高，其中复合菌2对单果径长的影响最明显，单果竖径和横径分别达到11.80±0.46cm和10.03±1.65，较空白对照组分别提高了28.26％和30.37％，其次为复合菌1和植物乳杆菌KT-Lp9，二者差别不明显。结果表明，3种处理对彩椒单果径长的提升效果表现为复合菌2>复合菌1>植物乳杆菌KT-Lp9>空白对照。
3种乳酸菌对彩椒单果重及产量的影响如图2、表1所示，植物乳杆菌KT-Lp9、复合菌1和复合菌2处理组的彩椒单果重分别为229±14.24g、241±7.07g、267±14.24g，较空白对照组(206±8.65g)分别提高了11.17％、16.99％和29.61％。复合菌2处理组相比其它2组处理能显著增加彩椒产量，达到3905±124.72kg/亩，与空白对照组产量(2978±98.39kg/亩)相比，增产达到为31.13％。其次为复合菌1和植物乳杆菌KT-Lp9，较空白对照组产量分别提高了14.64％和10.21％。因此，总体来看，复合菌2对彩椒单果重和产量的作用最明显。
3种乳酸菌对彩椒根腐病的影响效果如图3、表1所示，施加植物乳杆菌KT-Lp9、复合菌1后的彩椒其根腐病发病率分别为24.37％、17.90％，较空白对照组(27.79％)降低了3.42％和9.89％，而复合菌2对其影响作用最好，根腐病发病率仅为1.70％，较空白对照组降低了26.09％，说明乳酸菌对彩椒的根腐病具有良好的防治效果，特别是复合菌2，对根腐病病原菌起到较强的抑制作用，提高了彩椒的抗病性
表1乳酸菌对彩椒各项指标的影响
注：数值采用“平均值±标准差”的形式表示，同一行中不同小写字母表示差异显著(P＜0.05)。7、结论与讨论
不同乳酸菌对彩椒生长的影响不同，总体表现为复合菌2>复合菌1>植物乳杆菌KT-Lp9>空白对照组。结果表明，植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9可以协同抗根腐病，对彩椒增产能起到明显的促进作用。

Claims (9)

1.一种提高彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂，由植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)P-8、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)KT-La9CGMCC和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)KT-Lp9组成，所述植物乳杆菌P-8保藏号为CGMCC NO.6312，嗜酸乳杆菌KT-La9保藏号为NO.12949，植物乳杆菌KT-Lp9保藏号为CGMCC NO.12950。
2.根据权利要求1所述提高彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按(2-4)：(0.5-1)：1的活菌数添加比例进行发酵而成。
3.根据权利要求2所述提高彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按2：1：1的活菌数添加比例进行发酵而成。
4.根据权利要求1或2所述提高彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂，其特征在于，由以下方法制备；
(1)首先将所述植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的冷冻保藏菌种分别接种于MRS液体培养基中，在37±1℃条件下分别培养20-32小时，活化三代后分别用无菌生理盐水离心洗涤2-4次，在各菌体沉淀物上分别加入8％-12％灭菌脱脂乳液后，分别将三种种子液菌体浓度调整为108-109CFU/mL，即种子液制备完成；
(2)将步骤(1)得到的植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按照(2-4)：(0.5-1)：1的活菌数比例进行混合，混合菌种液按4-10％(V/V)的接种量接种于MRS培养液，并加入50ml/l的椰汁，在39±1℃条件下培养12-24小时后，调整其菌数为2.4-3.2×109cfu/ml，pH值为5.2-6.5，至此复合菌剂制备完成。
5.根据权利要求4所述提高彩椒产量和抗根腐病的复合菌剂，其特征在于，由植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)P-8、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)KT-La9和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)KT-Lp9组成；
所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按3：0.5：1的活菌数添加比例进行发酵而成；
所述复合菌剂可以采用如下方法制备：
(1)首先将所述植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的冷冻保藏菌种分别接种于MRS液体培养基中，在37±1℃条件下分别培养26小时，活化三代后分别用无菌生理盐水离心洗涤3次，在各菌体沉淀物上分别加入10％灭菌脱脂乳液后，分别将三种种子液菌体浓度调整为108-109CFU/mL，即种子液制备完成；
(2)将步骤(1)得到的植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按照3：0.5：1的活菌数比例进行混合，混合菌种液按7％(V/V)的接种量接种于MRS培养液，并加入50ml/l的椰汁，在39±1℃条件下培养18小时后，调整其菌数为2.8×109cfu/ml，pH值为5.8，至此复合菌剂制备完成。
6.一种提高彩椒产量和抗根腐病的微生物菌肥，所述微生物菌肥由基质和复合菌剂按(0.5-1)：(100-200)(w/w)的比例混合制成。
7.根据权利要求6所述提高彩椒产量和抗根腐病的微生物菌肥，其特征在于，所述的基质主要由腐殖酸类物质组成，所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按(2-4)：(0.5-1)：1活菌数添加比例进行发酵而成。
8.根据权利要求7所述提高彩椒产量和抗根腐病的微生物菌肥，其特征在于，所述微生物菌肥由基质和复合菌剂按0.75：150(w/w)的比例混合制成；
所述的基质主要由腐殖酸类物质组成，所述复合菌剂由植物乳杆菌P-8、嗜酸乳杆菌KT-La9和植物乳杆菌KT-Lp9的种子液按3：0.5：1活菌数添加比例进行发酵而成。
9.权利要求1或2所述的复合菌剂在提高彩椒产量和和抗根腐病中的应用。
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