CN107417698A - 一种三萜化合物及其制备方法与用途 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种如式(A)所示的三萜化合物，所述三萜化合物以金钱松种子为原料，经石油醚脱脂、乙醇浸提、二氯甲烷萃取、反复硅胶色谱分离得到；本发明从金钱松种子中提取的新型高度氧化环阿屯烷型三萜，具有11β羟类固醇脱氢酶1型的抑制活性，在降血糖保健品及药品中有一定应用价值；

Description

一种三萜化合物及其制备方法与用途
(一)技术领域
本发明涉及一种从金钱松种子中提取的新型三萜化合物，及其制备方法，以及在制备治疗糖尿病药物中用途。
(二)技术背景
本发明属医药技术领域，涉及金钱松种子中三萜提取物及其制备与用途，本发明以金钱松种子为原料，经多次溶剂萃取，获得浸膏经反复硅胶色谱，分离获得新化合物。经体外酶抑制活性测试及动物体内试验，结果表明，本发明新化合物具有明显的11β羟类固醇脱氢酶1型(11β-HSD1)抑制活性和降血糖效果，可用于制备治疗临床常见的糖尿病及相关代谢性疾病的药物。
近年来中草药资源中筛选11β-HSD1抑制剂逐渐引起相关关注。金钱松(Pseudolarix kaempferi Gord.)是松科(Pinaceae)金钱松属(Pseudolarix)植物。上世纪80年代以来，国内外学者对金钱松的化学成分、药理作用等方面做了一定的研究工作，从种子和根皮中分离出了三萜和二萜类等活性化合物。但是，对金钱松种子中具有11β-HSD1抑制活性的有效成分研究较少。
(三)发明内容
本发明的目的是提供一种从金钱松种子中提取的新型三萜化合物，及其制备方法，以及在制备治疗糖尿病药物中的用途。
本发明的技术方案如下：
一种如式(A)所示的三萜化合物，其名称为：25S-(1R,4),(16R,23S)-diepoxy-9β,10β-epidioxy-3(4),9(10)-disecocycloartan-26(23)-olide-3-butyl ester：
所述式(A)所示的三萜化合物按如下方法制备得到：
(1)将金钱松种子干燥后粉碎，用石油醚脱脂，得到脱脂产物；
具体的，所述石油醚脱脂的操作方法为：室温(20～30℃)下，将干燥粉碎的金钱松种子按料液质量体积比1～2：1(kg：L)用石油醚浸泡3～5天，期间每天搅拌一次，过滤，滤渣重复以上操作1～3次，即得脱脂产物；
(2)将步骤(1)所得脱脂产物用体积分数95％的乙醇浸提，过滤，收集滤液；蒸除溶剂，得到乙醇浸膏；
具体的，所述步骤(2)的操作方法为：将步骤(1)所得脱脂产物按料液质量体积比1～2：1(kg：L)用体积分数95％的乙醇浸提2～4天，期间每天搅拌一次，过滤，收集滤液；滤渣重复浸提2～4次，合并每次所得滤液，蒸除溶剂，得到乙醇浸膏；
(3)将步骤(2)所得乙醇浸膏分散于水中，再用二氯甲烷萃取，收集萃取液蒸除溶剂，得到二氯甲烷浸膏；
具体的，所述步骤(3)的操作方法为：将步骤(2)所得乙醇浸膏按料液质量体积比0.2～1：1(kg：L)分散于水中，得到分散液，再用二氯甲烷萃取2～3次，每次萃取二氯甲烷的用量为所述分散液体积的0.5～1倍，收集萃取液蒸除溶剂，得到二氯甲烷浸膏；
(4)对步骤(3)所得二氯甲烷浸膏进行柱层析分离，以100～200目硅胶为柱填料，石油醚/丙酮体积比4～6：1的混合液为洗脱剂进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液，蒸除溶剂得到一次柱层析产物；
(5)继续对步骤(4)所得一次柱层析产物进行柱层析分离，以200～300目硅胶为柱填料，石油醚/二氯甲烷/丙酮体积比5～10：2：1的混合液为洗脱剂进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液，蒸除溶剂得到式(A)所示的三萜化合物。
本发明中，所述的金钱松种子可常规商购获得。结合理化性质和现代波谱(IR,1HNMR,13CNMR和2D NMR)鉴定确证本发明制得的式(A)所示三萜化合物的结构。
本发明所述步骤(4)、(5)的柱层析过程中，可通过薄层层析(TLC)检测收集含目标化合物的洗脱液；所述的目标化合物用TLC检测时，以石油醚/二氯甲烷/丙酮(5：1：1)为展开剂，其Rf值为0.35。
本发明所述式(A)所示高度氧化的环阿屯烷型三萜具有对11β羟类固醇脱氢酶1型(11β-HSD1)的抑制活性，可用于制备降血糖食品或药品。
本发明的有益效果在于：从金钱松种子中提取的新型高度氧化环阿屯烷型三萜，具有11β羟类固醇脱氢酶1型(11β-HSD1)的抑制活性，在降血糖保健品及药品中有一定应用价值。
(四)具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不仅限于此。
以下实施例中用到的金钱松种子购自江西九江恒峰园林绿化有限公司。
实施例1金钱松种子中新化合物25S-(1R,4),(16R,23S)-diepoxy-9β,10β-epidioxy-3(4),9(10)-disecocycloartan-26(23)-olide-3-butyl ester的制备与结构鉴定
(1)将金钱松种子干燥后粉碎，室温下，将干燥粉碎的金钱松种子8.0kg用4.0L石油醚浸泡4天，期间每天搅拌一次，过滤，滤渣重复以上操作2次，即得脱脂产物3.8kg。
(2)将步骤(1)所得脱脂产物3.8kg用4.0L体积分数95％的乙醇浸提3天，期间每天搅拌一次，过滤，收集滤液；滤渣重复浸提3次，合并每次所得滤液，蒸除溶剂，得到乙醇浸膏0.58kg；
(3)将步骤(2)所得乙醇浸膏0.58kg分散于2.0L水中，再用二氯甲烷萃取3次，每次萃取二氯甲烷的用量为1.0L，收集萃取液蒸除溶剂，得到二氯甲烷浸膏0.15kg；
(4)对步骤(3)所得二氯甲烷浸膏进行柱层析分离，以100～200目硅胶为柱填料，石油醚/丙酮体积比4～6：1的混合液为洗脱剂进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液，蒸除溶剂得到一次柱层析产物3.74g；
(5)继续对步骤(4)所得一次柱层析产物进行柱层析分离，以200～300目硅胶为柱填料，石油醚/二氯甲烷/丙酮体积比5～10：2：1的混合液为洗脱剂进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液，蒸除溶剂得到式(A)所示的三萜化合物0.33g。
化合物A为白色块状结晶，Liebermann-Burchard反应显蓝紫色，结合碳谱与氢谱数据说明该化合物分子式为C34H54O6；
红外光谱中信号3530cm-1有强吸收显示存在OH，1770cm-1有强吸收峰表明结构中存在内酯及酯单元；
1H-NMR数据表明结构中存在7个甲基(δ1.25,d J＝7.0Hz),(δ1.23,s),(δ1.22,s),(δ1.11,s),(δ1.04,s),(δ0.93,t,J＝5.5Hz),(δ0.87,d,J＝6.5Hz)；环丙烷亚甲基(δ0.73,δ0.55)；
13C-NMR中共有34组峰，共对应于34个碳原子；结合HMQC谱表明：其中8个季碳原子，6个叔碳原子，13个仲碳原子，7个伯碳原子，其中δ179.7，174.7为羰基碳原子峰，一个缩酮δ107.4，一个连氧叔碳δ77.5，一个连氧季碳δ76.2，一个连氧仲碳δ64.2，另外在δ31.9,25.1,23.2,19.5,19.2,15.0,13.7位置为7个甲基碳。
综合考虑这些因素表明化合物中含有9,10-cycloartane骨架的三萜和正丁基单元。比较化合物A与已知化合物Pseudolarolide C氢谱碳谱数据，化合物A中含有与Pseudolarolide C相似的结构三萜单元。1H-1H COSY信号可知结构中存在片段H1’-H2’-H3’-H4’，HMBC信号H-1’与C-3相关表明化合物A由C-3位与正丁基相连形成酯键。NOESY显示H5与H-28,H-28与H17,H17与H-21和H-24,H9与H-16,H-18和H-19,H-16与H-20,H-27与H-20,H-21与H-25相关。综上所述确定化合物A结构。
化合物A的1H-1H COSY(1)、HMBC(2)、NOESY(3)相关性
实施例2化合物A对四氧嘧啶型糖尿病大鼠空腹血糖的影响
在给药前、给药14天、给药28天时采用葡萄糖测定试剂盒测定大鼠空腹血糖。空腹血糖的测定主要是用来衡量基础血糖水平，空腹血糖高，说明该大鼠血糖高，是糖尿病的症状之一。上述结果表明：化合物A可显著降低大鼠的空腹血糖。见表1。
表1大鼠血糖值变化(mmol/L,)
注：a与模型对照组比较，P＜0.05。b与给药前比较，P＜0.05。
实施例3化合物A对11β-HSD1抑制活性
酶抑制率检测在48孔板中进行，每孔溶液体积100μL，含30mM,pH 7.4的HEPES缓冲液，1mMEDTA，底物混合物可的松/NADPH(200nM/200μM)以及系列稀释的抑制剂。加入10μL(2μg)来自大肠杆菌的11β-HSD1，以及大鼠的肝微粒体组分(2.5μg)以启动反应，然后混合，在37℃振摇板150分钟，用10μL甘草次酸终止反应。以酶标仪检测制备物中皮质醇水平，计算酶抑制剂率。
对化合物A进行了初步的对11β-羟化类固醇脱氢酶的抑制活性测试，其活性与甘草次酸相当。
表2化合物A活性测试结果
*：阳性对照(化合物浓度约10μM)
化合物A波谱数据
表3化合物A的1H NMR测定数据
表4化合物A的13C NMR测定数据

Claims (7)

1.一种如式(A)所示的三萜化合物：
2.如权利要求1所述式(A)所示的三萜化合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：
(1)将金钱松种子干燥后粉碎，用石油醚脱脂，得到脱脂产物；
(2)将步骤(1)所得脱脂产物用体积分数95％的乙醇浸提，过滤，收集滤液；蒸除溶剂，得到乙醇浸膏；
(3)将步骤(2)所得乙醇浸膏分散于水中，再用二氯甲烷萃取，收集萃取液蒸除溶剂，得到二氯甲烷浸膏；
(4)对步骤(3)所得二氯甲烷浸膏进行柱层析分离，以100～200目硅胶为柱填料，石油醚/丙酮体积比4～6：1的混合液为洗脱剂进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液，蒸除溶剂得到一次柱层析产物；
(5)继续对步骤(4)所得一次柱层析产物进行柱层析分离，以200～300目硅胶为柱填料，石油醚/二氯甲烷/丙酮体积比5～10：2：1的混合液为洗脱剂进行梯度洗脱，收集含目标化合物的洗脱液，蒸除溶剂得到式(A)所示的三萜化合物。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述石油醚脱脂的操作方法为：室温下，将干燥粉碎的金钱松种子按料液质量体积比1～2：1用石油醚浸泡3～5天，期间每天搅拌一次，过滤，滤渣重复以上操作1～3次，即得脱脂产物。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)的操作方法为：将步骤(1)所得脱脂产物按料液质量体积比1～2：1用体积分数95％的乙醇浸提2～4天，期间每天搅拌一次，过滤，收集滤液；滤渣重复浸提2～4次，合并每次所得滤液，蒸除溶剂，得到乙醇浸膏。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)的操作方法为：将步骤(2)所得乙醇浸膏按料液质量体积比0.2～1：1分散于水中，得到分散液，再用二氯甲烷萃取2～3次，每次萃取二氯甲烷的用量为所述分散液体积的0.5～1倍，收集萃取液蒸除溶剂，得到二氯甲烷浸膏。
6.如权利要求1所述式(A)所示的三萜化合物在制备降血糖食品或药品中的应用。
7.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述式(A)所示三萜化合物的降血糖作用在于对11β羟类固醇脱氢酶1型的抑制活性。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108896695A (zh) * 2018-07-04 2018-11-27 广州白云山敬修堂药业股份有限公司 一种中药复方中土槿皮的鉴别方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103665080A (zh) * 2013-12-05 2014-03-26 杭州华东医药集团新药研究院有限公司 三萜化合物及其在糖尿病治疗药物中的应用
CN104013614A (zh) * 2014-05-15 2014-09-03 浙江工业大学 一种金钱松内酯h的制备方法及应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103665080A (zh) * 2013-12-05 2014-03-26 杭州华东医药集团新药研究院有限公司 三萜化合物及其在糖尿病治疗药物中的应用
CN104013614A (zh) * 2014-05-15 2014-09-03 浙江工业大学 一种金钱松内酯h的制备方法及应用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GUO-FU CHEN ET AL.: "The isolation and structural elucidation of four novel triterpene lactones,pseudolarolides A,B,C,and D,from pseudolarix kaempferi", 《JOURNAL OF NATURAL PRODUCTS》 *
JUN-MING TAN ET AL.: "Three New Peroxy Triterpene Lactones from Pseudolarix kaempferi", 《HELVETICA CHIMICA ACTA》 *
WEN-JUN HE ET AL.: "Antimicrobial, Cytotoxic Lignans and Terpenoids from the Twigs of Pseudolarix kaempferi", 《PLANTA MED》 *
XING-DE WU ET AL.: "Pseudoferic acids A–C, three novel triterpenoids from the root bark of Pseudolarix kaempferi", 《TETRAHEDRON LETTERS》 *
董小萍等: "《天然药物化学》", 28 February 2015, 中国医药科技出版社 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108896695A (zh) * 2018-07-04 2018-11-27 广州白云山敬修堂药业股份有限公司 一种中药复方中土槿皮的鉴别方法

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