CN107405295B - 千屈菜提取物的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及千屈菜植物提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜中的胶原表达、用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜的紧致性和/或维持和/或增加皮肤脂肪细胞的脂解用以诱导对皮肤的减肥作用和/或用于减少、预防和/或治疗赘肉的不美观表现、例如皮肤的橘皮样外观和/或马裤样大腿外观的化妆美容和/或营养/保健用途。本发明的另一个主题涉及化妆美容护理方法，其包括施用、优选地局部施用根据本发明的千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素或包含其的化妆美容组合物，用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜中的胶原表达用以增加皮肤和/或粘膜的紧致性和/或维持和/或增加皮肤脂肪细胞的脂解用以诱导对皮肤的减肥作用和/或减少、预防和/或治疗赘肉的不美观表现、例如皮肤的橘皮样外观和/或马裤样大腿外观。

Description

千屈菜提取物的用途
技术领域
本发明涉及千屈菜(Lythrum salicaria)植物的提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素(vescalagin)和/或栗木鞣花素(castalagin)的化妆美容或营养/保健用途，其用于维持和/或增加胶原在皮肤和/或粘膜中的表达，特别是用于维持和/或增加其紧致性和/或用于增加皮肤脂肪细胞的脂解，特别是用于诱导减肥作用和/或减少赘肉(cellulite)的不美观外观，例如皮肤的橘皮样外观和/或马裤样大腿外观(jodhpur thigh appearance)。本发明还涉及该提取物和/或没食子酸或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素用于治疗涉及胶原表达降低和/或赘肉的病理性皮肤病症的皮肤病学用途。
背景技术
胶原是存在于脊椎动物组织中的细胞外基质的结构蛋白，其是包含29种不同类型的蛋白质家族的一部分。
在各种胶原类型中，在许多人体组织中发现I型胶原，例如腱、韧带、角膜和皮肤。I型胶原是皮肤中主要的胶原。它是原纤维胶原蛋白与胶原III和V的一部分。
原纤维胶原蛋白由前体——前胶原形成，前胶原在成熟成为原胶原的步骤之后将自发组装成原纤维，其随后将形成纤维，最后形成直径可达1至10μM的束。这些束通过交联稳定。
它是给予组织机械强度的胶原，因此在维持其坚固性方面起主要作用。
一生中的各种生理变化，例如饮食或连续饮食的变化、青春期、怀孕或更年期的激素变化，将导致皮肤组织的改变、诱导紧致性的丧失和组织的松弛。这种紧致性的丧失涉及胶原水平的降低。这种胶原水平的降低与几种伴随的机制相关：皮肤成纤维细胞的增殖减少、胶原合成减少，金属蛋白酶、特别是胶原酶(其是负责胶原降解的酶)增加了胶原的降解。
因此，胶原蛋白是化妆美容和皮肤化妆美容领域、还是营养保健品领域的研究和创新的优选靶标，市场上有许多组合物，其目的在于使皮肤组织紧致和改善皮肤紧致性。
因此，持续需要鉴定能够维持和/或增加组织、特别是皮肤的紧致性的新型活性成分。
此外，在化妆美容和皮肤病学领域中特别需要开发减肥的和/或作用于赘肉和/或降低皮肤、特别是在女性皮肤中的橘皮效应的活性成分。事实上，以前的非病理性的生理变化、例如饮食中的变化、激素变化(特别是在青春期，怀孕或更年期期间的激素变化)，还有饮食不佳、以及久坐的生活方式，都是体重增加和/或赘肉(也称为肥胖水肿(adiposisedematosa))出现的原因。赘肉与不美观的表现有关，例如皮肤的填充效应(paddedeffect)的外观，称为“橘皮”效应，其特别是位于女性的大腿、髋部、腰部和臀部，以及/或当赘肉位于大腿的顶部、臀部和髋部时的马裤样大腿外观(jodhpur thigh appearance)，和/或与水分保持有关，产生审美上的不适感。
细胞外基质(ECM)是组织的支持结构，其含有胶原的，ECM也存在于连接脂肪的组织的细胞(为脂肪细胞)之间。
因此，能够用于维持ECM的功能(特别是通过胶原表达来进行)而且能够减肥和/或降低橘皮皮肤的不美观效应的化妆美容成分的鉴别，具有极大的化妆美容和皮肤病学意义。而且，这正是应用本发明针对的问题。
发明内容
非常令人惊讶的是，发明人实际上已经发现，千屈菜植物提取物、没食子酸和没食子酸衍生物、特别是栎木鞣花素和栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素，使得维持和/或增加皮肤和/或粘膜中的胶原表达并因此保持和/或增加其紧致性成为可能。他们还发现所述提取物、没食子酸和没食子酸衍生物、特别是栎木鞣花素和栗木鞣花素还可以使得增加皮肤脂肪细胞的脂解成为可能，因此它们对皮肤具减肥作用。因此，根据本发明的千屈菜植物提取物、没食子酸和没食子酸衍生物、特别是栎木鞣花素和栗木鞣花素，由于其性质，最特别适用于减少、预防和/或治疗赘肉的不美观外观，例如橘皮样外观和/或马裤样大腿(jodhpurthigh)外观和/或水分保持。
本发明具有以下优点：提供新的活性成分，该活性成分在维持和/或增加胶原表达方面是有活性的，使得可以维持和/或增加组织、特别是人皮肤的紧致性，使该活性成分成为特别适合作为对扩张的、松弛的皮肤组织具有活性的活性成分。根据本发明的提取物、没食子酸和没食子酸衍生物、特别是栎木鞣花素和栗木鞣花素，还使得维持和/或增加皮肤脂肪细胞的脂解成为可能，这使得它们成为一种新的减肥成分，其对减少、预防和/或治疗赘肉的不美观表现，例如橘皮样外观和/或马裤样大腿外观和/或水分保持特别有效。因此，根据本发明的提取物、没食子酸和没食子酸衍生物、特别是栎木鞣花素和栗木鞣花素的作用具有双重作用，因此具有极大的化妆美容、皮肤病学和营养保健品方面的优势。它们还使减少化妆美容组合物、皮肤病学组合物和营养/保健组合物中成分的数量成为可能。
本发明的另一个优点是根据本发明的提取物是口服和/或局部用可接受的、无毒的、天然植物提取物，其可以被容易地配制，并且可以在完全适合可持续发展的条件下以工业规模生产。此外，没食子酸和没食子酸衍生物、特别是栎木鞣花素和栗木鞣花素能够从所述提取物(例如通过纯化)获得(有利地获得)。
根据本发明的提取物是千屈菜植物的提取物，通常被称为紫色珍珠菜(purpleloosestrife)或彩虹草(rainbow weed)。它是一种在欧洲(包括在法国)分布非常广泛的千屈菜科(Lythraceae)植物，由于其穗状花序形式的粉红色到紫罗兰色的花朵，很容易识别。它是一种以其抗腹泻、滋补和止血特性而闻名的植物。此外，它具有舒缓和镇静的性质，并且对某些皮肤疾病如湿疹和擦烂有活性。
专利申请KR100852737描述了千屈菜根提取物的抗氧化作用，以及是对肝纤维化发展的抑制作用，而专利申请CN103861030描述了包括千屈菜的几种植物的组合，用于治疗银屑病的效果。
在由申请人提交的申请FR2883749和申请FR2835183中，千屈菜植物在化妆品中也被称为皮肤着色剂。
此外，申请WO 2015/140470描述了可以来自千屈菜植物的没食子酸和没食子酸衍生物的应用，其作为化妆美容组合物中的活性成分，用于刺激或修复表皮的屏障功能，用于对抗皮肤老化，用于保湿，并用于对抗与污染相关和与干性皮肤(具有特应性倾向)中的应力相关的外部攻击。
此外，专利申请JP2003002820描述了千屈菜提取物由于其抗皮肤弹性蛋白酶活性的用于化妆美容用途。
然而，所述申请和任何现有技术都没有描述维持和/或增加胶原表达的性质，或者维持和/或增加皮肤和/或粘膜的紧致性的性质。
此外，申请KR20130060446描述了一种治疗组合物，其包含用于抵抗肥胖症的千屈菜提取物和Aceriphyllum rossii植物提取物的组合。
此外，已知千屈菜是滋补剂。然而，用于本发明的目的，“滋补”剂不同于本发明的千屈菜提取物，所述“滋补”剂使得可以闭合皮肤的毛孔、从而通过提供不持久的即时紧致的效果来拉紧组织，而本发明的千屈菜提取物使得可以通过增加胶原表达来增加皮肤的紧致性。最后，专利申请RO126901公开了用于治疗红斑痤疮的千屈菜提取物的用途。同样，Tunalier等(2007)公开了千屈菜提取物在治疗静脉曲张中的用途。
然而，现有技术中没有描述千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素用于增加皮肤脂肪细胞的脂解，从而诱导对皮肤的减肥作用和/或减少赘肉的不美观表现(如橘皮样外观和/或马裤样大腿外观)的用途。此外，现有技术没有描述用于其皮肤病学用途的用于治疗赘肉根据本发明的提取物。
因此，本发明的第一个主题是千屈菜植物提取物用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜中的胶原表达的化妆美容用途。因此，本发明的还有一个主题是千屈菜的植物提取物用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜的、特别是人类的皮肤和/或粘膜的紧致性的化妆美容或营养/保健用途。
本发明的还有一个主题是千屈菜植物的提取物用于维持和/或增加皮肤脂肪细胞的脂解、和/或诱导对皮肤的减肥作用、和/或减少、预防和/或治疗赘肉的不美观表现、例如皮肤的橘皮样外观的化妆美容或营养/保健用途。
根据本发明的千屈菜提取物包含没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素。因此，本发明的一个主题涉及，有利地能够从千屈菜植物获得的、优选地从千屈菜植物获得的、特别是从该植物中通过提取来获得的，没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、优选栗木鞣花素用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜中的胶原表达、还有用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜的紧致性的化妆美容和/或营养/保健用途。
本发明的一个主题还是有利地能够从千屈菜植物获得的、优选地从千屈菜植物获得的、特别是从该植物中通过提取来获得的，没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、优选栗木鞣花素用于维持和/或增加皮肤脂肪细胞的脂解和/或诱导对皮肤的减肥作用和/或减少、预防和/或治疗赘肉不美观的表现、例如皮肤的橘皮样外观和/或马裤样大腿外观的化妆美容和/或营养/保健用途。
用于本发明的目的，术语“化妆美容用途”旨在表示非治疗性用途，即这样的用途，其使得可以将千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素施用于健康身体的全部或部分，特别是施用于皮肤和/或粘膜的健康区域。
用于本发明的目的，术语“皮肤和/或粘膜的健康区域”旨在表示由皮肤科医生描述为非病理性的皮肤和/或粘膜的区域，即不表现出任何皮肤感染、疾病或病痛如念珠菌病，脓疱病，牛皮癣，湿疹，痤疮或皮炎或任何伤口或损伤、或与脂肪组织中特别是脂肪细胞中脂解的功能障碍有关的疾病、例如肥胖症、或任何静脉曲张、红斑痤疮或毛细血管扩张的区域。
特别是，术语“皮肤和/或粘膜的健康区域”旨在表示由医生描述为“正常”的细胞(即非癌性细胞)组成的皮肤和/或粘膜区域。
用于本发明的目的，术语“粘膜”旨在表示眼粘膜、阴道粘膜、泌尿生殖系粘膜和/或颊粘膜、特别是唇颊粘膜和/或龈粘膜、优选眼粘膜和/或颊粘膜、更优选唇粘膜和/或眼粘膜。
用于本发明的目的，术语“皮肤”旨在表示包括头皮在内的面部皮肤和/或身体皮肤、且术语“头皮”旨在表示头皮的颞区、额区、顶区和头顶。有利的是身体的皮肤。
因此，有利地，特别是通过用循环运动按摩，将千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素施用于至少一个选自胃/腹部、手臂、前臂、膝、胸部、大腿、髋部、臀部、颈部、腰部和/或面部的、优选身体的皮肤和/或粘膜区域，特别是施用于包含赘肉和/或其不美观表现的皮肤区域，例如橘皮样外观或马裤样大腿外观，和/或施用于由于非病理性的生理性变化(如饮食改变，激素变化，特别是在青春期、怀孕或更年期期间的激素变化，还有饮食不佳或久坐的生活方式)导致的缺乏紧致性的皮肤区域，尤其是在女性中。
更有利的是，将千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素施用于不干燥的、和/或不具有特应性倾向的、表皮的屏障功能未被改变的、和/或皮肤松弛不是由于外在的或内在的(时间生物学或光诱导的)老化影响的皮肤区域。
可以将根据本发明的提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素以营养补充剂形式口服施用、或者以局部形式施用。优选地，将其局部施用。因此，根据本发明的提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素，是局部用和/或口服可接受的。用于本发明的目的，术语“局部用和/或口服可接受”旨在表示提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素对皮肤和/或粘膜无毒且无刺激性，不诱导炎症反应，特别是不诱导变应性反应并且是化学稳定的。
用于本发明的目的，术语“局部使用”、“局部用”或“局部”旨在表示通过直接局部应用、例如用循环运动进行按摩，和/或将成分喷雾至所涉及的皮肤区域和/或粘膜区域的表面上，来使用根据本发明的提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素。
用于本发明的目的，术语“胶原”旨在表示I型和/或III型和/或IV型和/或V型和/或VI型和/或VII型和/或XII型和/或XIII型和/或XIV型和/或XVI型和/或XVII型和/或XXIV型和/或XXIX型胶原，特别是存在于皮肤和/或粘膜中的那些。优选I型和/或III型和/或V型胶原，特别是存在于皮肤和/或粘膜中的那些，更优选I型胶原，特别是存在于皮肤和/或粘膜中的I型胶原，特别是人胶原。
根据本发明的没食子酸具有下式(分子量＝170.12g/mol；CAS号149-91-7)：
Figure GDA0002390349170000071
用于本发明的目的，术语“没食子酸衍生物”旨在表示没食子酸的可水解聚合物、六羟基联苯甲酸(hexahydroxydiphenic acid)、其可水解成六羟基联苯甲酸的聚合物、鞣花酸、其可水解成鞣花酸的聚合物、没食子鞣酸(gallotanins)和/或鞣花单宁酸(ellagitanins)。在没食子鞣酸中，可以提及单宁酸和1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-吡喃葡萄糖。在鞣花单宁酸中，可以提及栎木鞣花素(vescalagin)、栗木鞣花素(castalagin)、大麻黄鞣宁(casuarinin)、旌节花素(stachyurin)、salicarinin A(栎木鞣花素-旌节花素二聚体)、salicarinin B(栎木鞣花素-大麻黄鞣宁二聚体)和salicarininC(栗木鞣花素-大麻黄鞣宁二聚体)。优选栎木鞣花素和/或栗木鞣花素。
栎木鞣花素具有下式(分子量＝934.07g/mol；CAS号36001-47-5)：
Figure GDA0002390349170000081
栗木鞣花素具有下式(分子量＝934.63g/mol；CAS号24312-00-3):
Figure GDA0002390349170000082
因此，本发明的一个主题涉及没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、优选栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素(其更加特别是能够从根据本发明的千屈菜提取物获得，优选地从根据本发明的千屈菜提取物获得)，用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜中的胶原表达、用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜的紧致性、以及还用于维持和/或增加皮肤脂肪细胞的脂解和/或用于诱导对皮肤的减肥作用和/或用于减少、预防和/或治疗赘肉的不美观表现、例如皮肤的橘皮样外观和/或马裤样大腿外观的化妆美容用途。
在本发明的一个优选实施方案中，化妆美容用途是包含没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素的千屈菜提取物的化妆美容用途，其用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜中的胶原表达，用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜的紧致性，以及还用于维持和/或增加皮肤脂肪细胞中的脂解和/或用于诱导对皮肤的减肥作用和/或用于减少、预防和/或治疗赘肉的不美观表现、例如皮肤的橘皮样外观和/或马裤样大腿外观。
用于本发明的目的，术语“增加胶原表达”旨在表示增加基因表达，即mRNA的表达，和/或胶原的蛋白质表达，优选增加胶原的蛋白质表达、更优选增加I型胶原的蛋白质表达，特别是在皮肤和/或粘膜中，有利地增加人I型胶原的蛋白质表达。
用于本发明的目的，术语“维持胶原表达”旨在表示防止胶原表达降低。然而，用于本发明的目的，有利的是，维持胶原表达不是防止胶原蛋白降解，特别是由金属蛋白酶、特别是金属蛋白酶1和3(MMP1和MMP3)的作用诱导的胶原蛋白降解。
在本发明的一个实施方案中，提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素被认为具有如下量：在体外培养的成纤维细胞中有效增加胶原基因和/或蛋白质表达，这时与提取物不存在、没食子酸不存在和没食子酸衍生物不存在、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素不存在的情况下培养的成纤维细胞中所测定的胶原基因和/或蛋白质表达水平相比，基因和/或蛋白质的增加是至少20％、优选至少60％、更优选至少80％，甚至更优选至少90％。在本发明的一个优选的实施方案中，所述增加为根据实施例2中所述的方案，通过免疫化学技术，在根据实施例1a)制备的提取物的存在下所培养的人成纤维细胞中测定的I型胶原蛋白表达的增加。
在本发明的一个备选实施方案中，所述增加为通过免疫化学技术在根据实施例1g)制备的提取物的存在下所培养的人成纤维细胞中测定的I型胶原蛋白表达的增加。
有利地，根据实施例2中所述的方案，使用抗胶原I抗体，进行通过免疫化学技术的测定。
有利地，用于本发明的目的，置于培养物中的人成纤维细胞是正常的，也就是说非病理性和非癌性的，因此不需要任何治疗性处理。
用于本发明的目的，术语“增加紧致性”旨在表示用于丧失紧致性的皮肤和/或粘膜在紧致性方面处于美观目的的增加，所述皮肤和/或粘膜丧失紧致性特别是在非-病理性的生理变化的影响下，例如饮食变化，激素变化，特别是在青春期、怀孕、绝经期或男性更年期期间的激素变化，饮食不佳或久坐的生活方式，更有利地是在非-病理性的生理变化的影响下失去了紧致性，例如改变饮食习惯，激素变化，特别是在青春期、怀孕、绝经期或男性更年期期间的激素变化，饮食不佳或久坐的生活方式。这种紧致性的丧失也可以在外在因素的影响下发生，例如攻击性环境因素，例如紫外线辐射，污染，烟雾，烟草，毒素，气候袭击和/或机械攻击。
用于本发明的目的，术语“保持紧致性”旨在表示防止皮肤组织、皮肤和/或粘膜松弛。
有利地，根据本发明，皮肤和/或粘膜的紧致性的增加不伴随着皮肤和/或粘膜的弹性的增加。用于本发明的目的，实际上皮肤的紧致性(其特别是与胶原合成、更具体地说与I型胶原的合成密切相关的，其是赋予细胞外基质的机械强度的蛋白质)与皮肤弹性(其特别是依赖于功能弹性纤维的量)是有差异的。
因此，本发明排除了千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素用于增加皮肤和/或粘膜的弹性的用途，特别是抑制存在于皮肤和/或粘膜中的弹性蛋白酶的活性的用途。
此外，用于测定皮肤紧致性的常规方法在于测定其可能形变的深度，而用于测定皮肤弹性的那些方法在于测定其在扭曲和/或变形之后恢复到初始状态的能力。
紧致性的增加可以根据常规方法测定，特别是通过肤质测定仪(cutometer)、密度分数、扭矩计或与dynaskin结合dermatop进行体内测定。弹性的增加可以根据常规方法测定，特别是通过使用球形测微仪(ballistometer)或corneovacumeter进行体内测定。
根据本发明的提取物、没食子酸和没食子酸衍生物、特别是栎木鞣花素和栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素，对于使身体紧致是特别有利的。
用于本发明的目的，术语“增加皮肤脂肪细胞的脂解”旨在表示相对于在根据本发明的提取物不存在、没食子酸不存在和没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素不存在的情况下在体外培养的脂肪细胞中测定的脂解活性，在根据本发明的千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、优选栗木鞣花素的存在下，在体外培养的脂肪细胞中测定的脂解活性增加至少30％、优选至少35％、特别是至少40％、甚至更优选至少70％。
在一个优选的实施方案中，脂解活性的增加在从健康人(即不显示医师定义的肥胖症的征兆的人)的正常的(即非癌性)前成脂肪细胞的分化获得的脂肪细胞中测定，所述脂肪细胞在实施例3a)中描述的条件下体外培养。有利地，通过根据实施例3a)在340nm处测定光密度来定量甘油，来测定脂解活性。
在一个备选实施方案中，脂解活性的增加在从鼠科动物的正常的(即非癌性)前成脂肪细胞的分化获得的脂肪细胞中测定，所述前成脂肪细胞在根据实施例1g)制备的包含栎木鞣花素和栗木鞣花素的千屈菜提取物的存在下，在实施例3b)中描述的条件下在体外培养。
用于本发明的目的，术语“保持皮肤脂肪细胞的脂解”旨在表示防止皮肤脂肪细胞的脂解降低。
用于本发明的目的，术语“诱导对皮肤的减肥作用”旨在表示身材的体积、优选地腰围尺寸和/或髋部尺寸和/或大腿尺寸和/或臀部体积的视觉上可观察的、特别是可量化的减少。用于本发明的目的，其并不意味着重量损失，而是身材重塑。
术语“减少赘肉的不美观表现、例如橘皮样外观和/或马裤样大腿外观”旨在表示赘肉的不美观表现的视觉上和可测定的减少，例如通过成像，例如皮肤的表面的条纹投影(该测定优选在髋部和/或臀部和/或胃和/或大腿的水平进行、更优选在女性中)，和/或皮肤的橘皮外观的视觉上可观察和可量化的减少，即身体的脂肪的可见节点和/或表面脂肪团的减少，特别是长期减少同时防止其再次出现，以及更平滑、更均匀的皮肤表面外观、优选在大腿(尤其是大腿顶部)和/或髋部和/或胃/腹部和/或臀部的水平处。用于本发明的目的，术语“橘皮样外观”旨在表示皮肤的非光滑的、填充样外观，其由于皮肤的皮下组织(特别是真皮(hypodermis)的皮下组织)的变形(特别是由于脂肪细胞的大小的增加)通过存在缝隙和脂肪的节点而显现出来。
术语“预防赘肉的不美观表现，例如橘皮样外观和/或马裤样大腿外观”旨在表示防止所述现象的出现。
术语“治疗赘肉的不美观表现，例如橘皮样外观和/或马裤样大腿外观”意在使所述表现消失。
因此，用于本发明的目的，千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素用于维持和/或增加皮肤脂肪细胞的脂解，用于诱导对皮肤的减肥作用和/或减少、预防和/或治疗赘肉的不美观表现、例如皮肤的橘皮样外观和/或马裤样大腿外观的用途，是非治疗性化妆美容用途，其不意图用于治疗肥胖症或病理性皮肤病症。
根据本发明的提取物可以是选自整个植物、地上部分、根、种子、花、花瓣、萼片、叶柄、花梗、花头、叶、果、茎和/或其任何组合的植物的全部或一部分的提取物。优选地，根据本发明的提取物是植物的地上部分的提取物。用于本发明的目的，术语“地上部分”旨在表示叶、花、花梗和茎的混合物。
根据本发明的千屈菜提取物通过本领域技术人员已知的任何常规植物提取方法来获得。因此，在提取之前，将整个植物或所关注的植物的部分进行干燥和/或研磨。萃取可以通过浸渍、热煎煮、使用球磨机研磨、用研钵或超声波研磨、使用搅拌机研磨或者通过在亚临界或超临界条件(二氧化碳)下萃取来进行。优选地，提取通过浸渍进行。
在本发明的一个优选实施方案中，通过将千屈菜植物的至少一个部分、优选地上部分浸渍在溶剂或溶剂混合物、优选质子极性溶剂、有利地为水，醇、二醇、多元醇、水/醇、水/二醇或水/多元醇混合物(例如水与乙醇，甘油和/或丁二醇和/或其它二醇如木糖醇等的混合物)(任何比例、特别是从100/0至0/100(w/w))中，来得到千屈菜提取物。更优选地，所用溶剂仅由水组成。甚至更优选使用的溶剂是水/醇混合物，特别是水/乙醇，其为15/85至85/15(w/w)、特别是25/75至75/25(w/w)、更特别60/40至85/15(w/w)、特别是75/25(w/w)。
特别是，通过水性提取获得提取物。用于本发明的目的，术语“通过水性提取获得的提取物”旨在表示通过用含水溶液提取得到的任何提取物，所述水溶液含有相对于所述含水溶液的总重量大于60重量％、有利地至少70重量％、特别是至少80重量％、更特别是至少90重量％、特别是至少95重量％的水，甚至更优选不含二醇、特别是不含醇、更特别地仅含有水。
甚至更优选地，根据本发明的提取物是通过用含有乙醇的含水溶液提取而获得的千屈菜提取物，所述含水溶液含有相对于该含水溶液的总重量优选15重量％至40重量％(w/w)、更优选25重量％(w/w)的量的乙醇。
提取可以进行1小时至24小时、特别是1小时至20小时、优选2小时至24小时、特别是2小时至16小时的时间。更优选地，提取进行2小时。在本发明的一个特别有利的实施方案中，萃取进行24小时。
提取可以在0℃至85℃之间的温度下进行、优选在0℃至25℃、更优选在4℃至20℃进行。甚至更优选地，提取在环境温度下进行，即在20℃下进行。
通过提取，相对于溶剂/植物混合物的总重量(w/w)而言的，以千屈菜植物至少一部分的干物质的重量计0.1至10％的量，可以获得所述提取物。优选地，通过提取，相对于由溶剂(优选水)和植物组成的混合物的总重量(w/w)而言的，以千屈菜植物至少一部分的干物质的重量计1％至10％、特别是1％至5％、更优选5％或10％的量，可以获得所述提取物。
在本发明的一个优选实施方案中，如实施例1a)所述，通过在环境温度(即20℃)将相对于水和地上部分的总重量的5重量％的千屈菜植物的地上部分(即叶、花、它们的花梗和茎的混合物)在作为唯一溶剂的水中浸渍2小时，来得到提取物。
在本发明的另一个实施方案中，如实施例1b)所述，通过在80℃将相对于水和地上部分的总重量的5重量％的千屈菜植物的地上部分(即叶、花、它们的花梗和茎的混合物)在作为唯一溶剂的水中浸渍1小时，来得到提取物。
在本发明的另一个实施方案中，如实施例1c)所述，通过在4℃将相对于水和地上部分的总重量的5重量％的千屈菜植物的地上部分(即叶、花、它们的花梗和茎的混合物)在作为唯一溶剂的水中浸渍16小时，来得到提取物。
在本发明的另一个实施方案中，如实施例1d)所述，通过在4℃将相对于水和地上部分的总重量的1重量％的千屈菜植物的地上部分(即叶、茎、花的混合物)在作为唯一溶剂的水中浸渍16小时，来得到提取物。
在本发明的另一个实施方案中，如实施例1e)所述，通过在80℃将相对于水和叶的总重量的5重量％的千屈菜植物的叶在作为唯一溶剂的水中浸渍1小时，来得到提取物。
在本发明的另一个实施方案中，在根据实施例1g)描述的条件下，通过将相对于溶剂和植物的地上部分的总重量的10重量％的地上部分(即叶、花、它们的花梗和茎的混合物)在水/乙醇混合物(75/25w/w)中浸渍24小时，来得到根据本发明的提取物。
然后优选将根据本发明获得并使用的粗制提取物离心和/或过滤和/或蒸馏，以回收可溶性级分、优选水溶性级分。优选地，然后将所得上清液过滤，有利地在0.45μm的截止阈值进行。可以在提取的任何阶段并根据本领域技术人员已知的技术对提取物进行另外的脱色和/或除臭步骤。
然后可以通过本领域技术人员已知的各种纯化方法，例如通过色谱法纯化提取物。优选地，根据本发明的提取物在第一步中通过固相萃取(SPE)，特别是在C18接枝的二氧化硅固相上纯化。将提取物置于在含有例如20％甲醇和0.5％甲酸的含水醇溶液中。用相同的溶剂进行洗脱。然后将所得提取物通过蒸发浓缩，然后冻干。然后，可以在例如第二步中，通过半制备型高效液相色谱(HPLC)、优选在尺寸为250x10mm的Synergi Fusion(Phenomenex)柱上纯化得到的提取物。洗脱例如用0.5％甲酸和甲醇梯度进行。
根据本发明纯化的千屈菜提取物、特别是以这种方式获得的千屈菜提取物包含栎木鞣花素和/或栗木鞣花素，其分子总量相对于纯化的提取物的总重量为至少0.25％、优选至少0.5％、更优选至少1％重量。
可以进行添加麦芽糖糊精的另外的步骤，例如在提取物纯化后。有利地，随后将相对于提取物和麦芽糖糊精的总重量至少20重量％、优选至少50重量％、更优选至少70重量％的麦芽糖糊精加入到提取物中。然后可以通过蒸发溶剂来浓缩提取物，或通过例如冻干或通过喷雾干燥来干燥。优选地，通过喷雾干燥将提取物干燥。
在本发明的一个优选实施方案中，在向溶液中加入麦芽糖糊精后，通过喷雾干燥干燥提取物。有利地，在喷雾干燥步骤之前添加到提取物中的麦芽糖糊精的以重量计的量使得所述提取物包含相对于由此获得的粉末的总重量的1重量％的栎木鞣花素和/或栗木鞣花素。
在本发明的一个具体实施方案中，特别是对于其用于皮肤病学的用途，将所得到的千屈菜提取物灭菌。
根据本发明，千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素可以以活性成分形式单独使用，和/或在旨在用于口服施用的营养/保健组合物中使用，和/或在旨在用于局部施用的化妆美容和/或皮肤病学组合物中使用，优选用于皮肤和/或粘膜。
当其以活性成分的形式单独使用时，提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素，优选在溶剂中可溶和/或稀释于溶剂中，特别是极性溶剂，例如水、醇、多元醇、二醇如戊二醇和/或丁二醇和/或己二醇和/或辛甘醇(caprylyl glycol)或其混合物，优选含水-二醇混合物，更优选含有选自己二醇、辛甘醇及其混合物的二醇。
有利地，获得的提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素在含有己二醇的含水溶液中稀释和/或可溶解于其中，其特别是相对于该含水溶液的总重量包含0.1重量％至10重量％、优选0.5重量％至5重量％的己二醇的水溶液。
有利地，获得的提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一，尤其是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素在含有辛甘醇的含水溶液中稀释和/或可溶解于其中，其特别是相对于该含水溶液的总重量包含0.01重量％至5重量％、优选0.1重量％至1重量％的辛甘醇的水溶液。
特别是，其中溶解有根据本发明的千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素的含水溶液包含黄原胶，特别是相对于该含水溶液的总重量0.01重量％至5重量％的黄原胶，更特别相对于该含水溶液的总重量0.1重量％至1重量％的黄原胶。
特别有利的是，其中溶解有根据本发明的千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素的溶液包含己二醇、辛甘醇和黄原胶，特别是以实施例4所示的比例。
千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素还可以用于化妆美容和/或营养/保健和/或皮肤病学组合物中。因此，所述组合物包含至少一种化妆美容和/或皮肤病学上可接受的赋形剂。
本文所用术语“化妆美容和/或皮肤病学上可接受的赋形剂”是指组合物或其组分适合用于与人皮肤接触而没有不适当的毒性，不相容性，不稳定性或变应性反应或其等同情况。
在本发明的一个实施方案中，在化妆美容和/或营养/保健和/或皮肤病学组合物中千屈菜提取物以相对于组合物的总重量1x10-4％至10％、优选1x10-4％至5％、更优选1x10-3％至3％重量的浓度存在。
因此，所述化妆美容和/或营养/保健组合物可以包含没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素，其相对于组合物的总重量的分子总终浓度为以重量计2.5x10-7至0.1％、优选为5x10-7至0.05％、更优选为1x10-5％至0.03％。
有利地、所述赋形剂选自防腐剂、软化剂(emollients)、乳化剂、表面活性剂、保湿剂、增稠剂、结构改进剂(texturing agent)、成膜剂、颜料、稳定剂、增溶剂、染料和芳香剂中的至少一种。
同样有利的是，赋形剂选自氨基酸及其衍生物、聚甘油、酯、纤维素聚合物和衍生物、羊毛脂衍生物、磷脂、乳铁蛋白、乳过氧化物酶、基于糖的稳定剂、维生素E及其衍生物、黄原胶、天然和合成蜡、植物油、甘油三酯、不皂化的化合物、植物甾醇、植物酯、硅酮和硅酮衍生物、蛋白质水解物、西蒙得木油(jojoba oil)及其衍生物、脂溶性/水溶性酯、甜菜碱、氧化胺、植物提取物、蔗糖酯、二氧化钛、甘氨酸和尼泊金，更优选选自硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-21、二醇-15硬脂基醚、鲸蜡硬脂醇、苯氧基乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、丁二醇、辛甘醇、天然生育酚、甘油、二羟基鲸蜡基磷酸钠、异丙基羟基鲸蜡基醚、硬脂酸二醇酯、三异壬精(triisononanoin)、椰油酸辛酯、聚丙烯酰胺、异链烷烃、月桂醇聚醚-7、卡波姆、丙二醇、己二醇、甘油、没药醇、二甲硅油、氢氧化钠、PEG-30二聚羟基硬脂酸酯、癸酸/辛酸甘油三酯、鲸蜡硬脂醇辛酸酯(cetearyl octanoate)、己二酸二丁酯、葡萄籽油、西蒙得木油、硫酸镁、EDTA、环甲硅油、黄原胶、柠檬酸、月桂基硫酸钠、矿物蜡和油、异硬脂醇异硬脂酸酯、丙二醇二壬酸酯、丙二醇异硬脂酸酯、PEG 8、蜂蜡、氢化棕榈仁油甘油酯、羊毛脂油、芝麻油、乳酸鲸蜡酯、羊毛脂醇、蓖麻油、二氧化钛、乳糖、蔗糖、低密度聚乙烯和等渗盐水溶液。
本发明的化妆美容和/或皮肤病学组合物可以选自水性或油性溶液剂、霜剂或作为水性或油性凝胶的凝胶剂、特别是沐浴凝胶、洗发剂、奶状物、体乳、乳剂、微乳剂或纳米乳剂(特别是水包油或油包水或多重的(multiple)或基于硅酮的)、面膜、浆液(serum)、洗液/润肤液、液体皂、皮肤病学棒状物(dermatological bar)、软膏剂、泡沫和贴剂。
优选地，根据本发明的化妆美容组合物是霜剂或浆液(serum)。在本发明的一个备选实施方案中，组合物是体乳。
有利地、化妆美容和/或皮肤病学组合物旨在应用于选自：胃/腹部、手臂、前臂、膝、胸、大腿、髋部、臀部、颈部、腰部和/或面部以及优选身体的皮肤和/或粘膜的至少一个区域，特别是涉及包括赘肉和/或其不美观表现、例如橘皮样外观或马裤样大腿外观的皮肤区域，和/或应用于由于非病理性的生理变化、例如饮食变化、激素变化、特别是在青春期、怀孕或绝经期期间的激素变化、还有由于饮食不佳或久坐的生活方式而缺乏紧致性的皮肤区域，更特别是在女性中。
在本发明的一个替代实施方案中，将化妆美容和/或皮肤病学组合物特别是通过循环运动按摩应用到身体的特定部位，所述特定部位选自胃/腹部、手臂、大腿、髋部、臀部和/或腰部、优选大腿和髋部。
在本发明的另一个实施方案中，组合物是可以口服施用的营养/保健组合物。优选地，所述组合物是凝胶胶囊、胶囊、口服粉末、凝胶剂和/或口服液的形式。
此外，本发明的化妆美容和/或营养/保健组合物可以含有一种或多种其它化妆美容和/或营养/保健活性成分，从而对根据本发明的千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素产生补充作用和/或协同效应。
它们可以例如是用于与根据本发明的提取物协同作用的张力调整剂(tensioningagents)。有利地，它们是增加胶原基因和/或蛋白质表达和/或防止所述胶原降解的活性成分，例如视黄醇，维生素C，苦木木提取物(Quassia amara extract)或巴斯夫美容护理公司以CollguardTM名称出售的Davilla rugosa提取物，或刺激真皮大分子合成或防止其降解的活性剂，例如：
-用于保护细胞外基质成纤维细胞生长因子(FGF2)抵抗其降解和/或其变性的活性剂，尤其是黄葵(Hibiscus abelmoschus)提取物，如申请人署名的以编号FR 0654316提交的专利申请中所述；
-用于刺激成纤维细胞生长的活性剂，例如由申请人出售的称为PhytokineTM的含有肽的发酵大豆提取物，并且也在专利申请EP 1 119 344中描述；
-和/或用于刺激纤连蛋白合成的活性剂，特别是玉米提取物，该提取物特别是由申请人以DelinerTM为名称或由Sedesta公司以MatrixylTM(棕榈酰五肽)、Matrixyl 3000TM和RegestrilTM为名称出售的产品；
-刺激层粘连蛋白合成的活性剂，特别是生物技术改良的麦芽提取物，该提取物特别是由申请人以BasalineTM为名称出售的提取物；
-用于刺激透明质烷合酶2(HAS2)表达和/或活性的活性剂，如专利申请FR 2 893252中描述的植物提取物，特别是高良姜(Alpinia galanga)的水提取物；
-用于刺激赖氨酰氧化酶样(LOXL)合成的活性剂，例如Geophila cordifolia提取物和专利申请FR2855968中所述的那些，特别是莳萝提取物；
-刺激细胞内ATP合成的活性剂，特别是藻类掌状海带(Laminaria digitata)的提取物；
-用于刺激糖胺聚糖合成的活性剂，例如乳发酵产物；
-抑制金属蛋白酶(MMP)的活性剂，例如更特别是MMPs 1、2、3和9、如类视黄醇和衍生物、寡肽和脂肽、脂氨基酸、巴斯夫美容护理法国公司以商品名CollaliftTM出售的麦芽提取物、由巴斯夫美容护理法国公司以名称ExtracelliumTM出售的马铃薯水解提取物；番茄红素；异黄酮、五羟黄酮、山柰酚或芹菜素。
它们也可以是用于刺激角质形成细胞增殖的活性剂，特别是类视黄醇如视黄醇及其酯，包括棕榈酸视黄酯和间苯三酚，和/或用于刺激角质形成细胞分化的活性剂，其包括例如矿物质如钙和木脂素如开环异落叶松脂素(secoisolariciresinol)，还有由巴斯夫美容护理法国公司以NeurobioxTM的名称销售的欧蓍草(Achillea millefolium)提取物。
可用于本发明的张力调整剂还可以选自合成聚合物，例如聚氨酯胶乳或丙烯酸胶乳、天然来源的聚合物、特别是淀粉形式或角叉菜胶、藻酸盐、琼脂、结冷胶(gellans)、基于纤维素的聚合物和果胶形式的多糖(polyholosides)、大豆植物蛋白质和蛋白质水解物、混合硅酸盐、蜡微粒、无机填料的胶体粒子，其例如选自二氧化硅、二氧化硅-氧化铝复合材料；以及它们的混合物。最后，它们可以是化妆美容和/或皮肤病学成分，例如抗微生物剂、自由基清除剂、缓和剂、镇静剂或松弛剂、作用于微循环以增加肤色特别是面部的光泽度的活性剂、和愈合剂。
在本发明中可以与本发明的活性成分组合的抗微生物剂中，可以提及的是2,4,4'-三氯-2'-羟基二苯醚(或三氯生)、3,4,4'三氯碳酰苯胺(3,4,4'-trichlorocarbanilide)、苯氧基乙醇、苯氧基丙醇、苯氧基异丙醇、羟乙磺酸己氧苯脒、甲硝唑及其盐、咪康唑及其盐、伊曲康唑、特康唑、益康唑、酮康唑、沙康唑、氟康唑、克霉唑、布康唑、奥昔康唑、sulfaconazole、硫康唑、特比萘芬、十一碳烯酸及其盐、过氧化苯甲酰、3-羟基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、植酸、N-乙酰基-L-半胱氨酸、硫辛酸、壬二酸及其盐、花生四烯酸、间苯二酚、辛氧基甘油(octoxyglycerin)、辛酰甘氨酸(octanoylglycine)、辛甘醇、10-羟基-2-癸酸、法呢醇、植物鞘氨醇及其混合物。自由基清除剂可以是维生素C及其衍生物，包括抗坏血酸葡糖苷、酚和多酚，特别是单宁；表没食子儿茶素和含有其的天然提取物，特别是绿茶提取物、花青素、苯酚酸、二苯乙烯、清除单环或多环芳族化合物的活性剂、单宁和吲哚衍生物和/或清除重金属如EDTA的活性剂、游离基清除活性剂如维生素E及其衍生物、例如醋酸生育酚、生物类黄酮、辅酶Q10或泛醌。
本发明的化妆美容和/或营养/保健组合物还可以含有一种或多种自由基清除剂和/或抗氧化剂，例如申请人以名称RhodiomaxTM销售的大花红景天(Rhodiola crenulata)根提取物。
作为本发明组合物一部分的缓和剂，可以使用五环三萜、熊果酸及其盐、齐墩果酸及其盐、桦木酸及其盐、水杨酸盐、特别是水杨酸锌、红没药醇、尿囊素、不饱和ω3油、可的松、氢化可的松、吲哚美辛和倍他米松、抗炎活性剂、特别是申请FR2847267中描述的那些、特别是申请人以名称InhipaseTM出售的野葛(Pueraria lobata)根提取物、以及可可树(Theobroma cacao)提取物。作用于微循环的血管保护剂(vasoprotector)或血管扩张活性成分可以选自类黄酮、鲁斯可皂苷元、烟酸酯和精油。
最后，组合物还可以包含与根据本发明的提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素和/或上文提及的活性成分组合的以下成分：排泄和/或减肥成分和/或预防和/或治疗赘肉的不美观表现、例如橘皮样外观的成分，例如咖啡因和/或茶碱、Theobroma可可多酚、申请人以名称SlimExcessTM出售的红藻水解产物、毛喉鞘蕊花(Coleus forskohlii)根提取物、银杏(Ginkgo biloba)提取物、特别是银杏叶提取物、Cecropia obtusa树皮提取物、海莴苣(Ulva lactuca)提取物、波尔多树(Peumus boldus)叶提取物、雪莲果(Smallanthus sonchifolius)(也称为yacon)提取物、或者是芫荽果(Coriandrum sativum fruit)和甜橙果(Citrus aurantiumdulcis fruit)的水解提取物的组合、鸡冠花(Celosia cristata)和夏枯草(Prunellavulgaris)的水解提取物的组合，其任选地与以下成分组合：作用于微循环的血管保护剂(vasoprotector)或血管扩张剂活性成分，其选自七叶素、类黄酮、鲁斯可皂苷元、烟酸酯、精油，或特别是通过冷效应刺激皮肤微循环的化妆美容活性剂，例如薄荷提取物和薄荷醇。
此外，本发明的一个主题是化妆美容护理方法，其包括将根据本发明的千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素、或包含所述根据本发明的提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素的化妆美容组合物应用、优选局部应用于皮肤和/或粘膜的至少一个区域，用于维持和/或增加胶原表达用以维持和/或增加皮肤和/或粘膜、特别是人皮肤和/或粘膜的紧致性，和/或用于维持和/或增加皮肤脂肪细胞的脂解用以诱导对皮肤的减肥作用和/或减少、预防和/或治疗赘肉的不美观表现、例如皮肤的橘皮样外观和/或马裤样大腿外观。优选胶原是I型胶原。
有利地，化妆美容护理方法包括将千屈菜提取物应用、优选局部应用于皮肤和/或粘膜的至少一个区域，所述千屈菜提取物包含相对于千屈菜提取物的总重量至少0.25％、优选至少0.5％、更优选至少1％以重量计的栎木鞣花素和/或栗木鞣花素。在本发明的一个实施方案中，化妆美容护理方法包括局部应用、有利地通过循环运动按摩来局部应用本发明的化妆美容组合物的形式的根据本发明的千屈菜提取物和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素。
根据本发明的一个实施方案，将所述化妆美容护理方法被应用于皮肤和/或粘膜的至少一个区域，其选自胃/腹部、手臂、前臂、膝、胸部、大腿、髋部、臀部、颈部、腰部和/或面部以及优选身体，特别是包含赘肉和/或其不美观表现、例如橘皮样外观或马裤样大腿外观的皮肤区域，和/或由于非病理性生理变化、如饮食变化、激素变化、特别是在青春期、怀孕或绝经期期间的激素变化、还有由于饮食不佳或久坐的生活方式而缺乏紧致性的皮肤区域、更特别是在女性中。
本发明的还有一个主题是千屈菜植物提取物，其优选通过水性提取获得，更优选通过用仅含有水的含水溶液或含有相对于该含水溶液的总重量至少70重量％的水的含水溶液提取，有利地通过含有相对于该含水溶液的总重量25重量％的醇、特别是乙醇的含水溶液提取获得，和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、更优选栗木鞣花素，其单独或在包含其以及皮肤病学上可接受的赋形剂的皮肤病学组合物中，用于、有利地局部用于治疗和/或预防涉及胶原、优选I型胶原、更优选人I型胶原表达损失的皮肤和/或粘膜的病理状态，和/或紧致性的病理性丧失、例如毛细管扩张，和/或涉及脂肪组织中的脂解功能障碍，特别涉及疾病如肥胖症。有利地，千屈菜提取物是植物的地上部分的提取物，即千屈菜植物的叶、花、花梗和茎的混合物。更有利地，千屈菜提取物包含相对于提取物(特别是纯化的)总重量至少0.25重量％、优选至少0.5重量％、更优选至少1重量％的没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素。
发明的还有一个主题是千屈菜植物提取物，其优选通过水性提取获得，更优选通过用仅含有水的水溶液或含有相对于水溶液的总重量至少70重量％的水的水溶液提取，有利地通过含有25重量％的醇、特别是乙醇的水溶液提取获得，和/或没食子酸和/或没食子酸衍生物之一、特别是栎木鞣花素和/或栗木鞣花素，其单独或在包含其以及皮肤病学上可接受的赋形剂的皮肤病学组合物中，其有利地局部用于治疗和/或预防涉及脂解和/或赘肉减少的皮肤和/或粘膜的病理状态。
具体实施方式
参考本发明的描述的实施例在下文中呈现。这些实施例以说明的方式给出，且不能以任何方式限制本发明的范围。每个实施例都有一般范围。
这些实施例构成本发明的组成部分，并且基于作为整体的描述，包括实施例，在任何现有技术中看起来都是新颖的任何特征形成本发明的组成部分。
实施例1：用于获得根据本发明的千屈菜提取物的本发明的各种实施方案
a)获得根据本发明的千屈菜的地上部分的提取物
在环境温度下、即20℃，将相对于水和千屈菜植物的地上部分组成的混合物的总重量(w/w)以干物质重量计为5％的地上部分(即叶、花、花梗和茎的混合物)，在水中浸渍2小时，水在这种情况下为唯一溶剂。浸渍后，将得到的粗提取物离心10分钟(8000rpm)，然后回收上清液，并过滤(截止阈值为0.45μm)。然后在下文实施例2中提供的条件下，针对I型胶原蛋白表达的增加，测定5％(w/w)的该地上部分提取物。
b)获得根据本发明的千屈菜的地上部分的提取物
在80℃，将相对于水和千屈菜植物的地上部分组成的混合物的总重量(w/w)以干物质重量计为5％的地上部分(即叶、花、花梗和茎的混合物)，在水中浸渍1小时。然后将粗提物离心10分钟(8000rpm)，然后过滤上清液(0.45μm)。
c)获得根据本发明的千屈菜的地上部分的提取物
在4℃，将相对于水和千屈菜植物的地上部分组成的混合物的总重量(w/w)以干物质重量计为5％的地上部分(即叶、花、花梗和茎的混合物)，在水中浸渍16小时。然后将粗提物离心10分钟(8000rpm)，然后过滤上清液(0.45μm)。
d)获得根据本发明的千屈菜的地上部分的提取物
在4℃，将相对于水和千屈菜植物的地上部分组成的混合物的总重量(w/w)以干物质重量计为1％的地上部分，在水中浸渍16小时。然后将粗提物离心10分钟(8000rpm)，然后过滤上清液(0.45μm)。
e)获得根据本发明的千屈菜叶提取物
在80℃，将相对于溶剂和千屈菜植物的叶组成的混合物的总重量(w/w)以干物质重量计为5％的叶，在作为唯一溶剂的水中浸渍1小时。然后将粗提物离心10分钟(8000rpm)，然后过滤上清液(0.45μm)。
f)获得根据本发明的千屈菜叶的提取物
在环境温度(在该情况下为20℃)，将相对于水和千屈菜植物组成的混合物的总重量以干物质重量计为5％的千屈菜叶，在水/丁二醇混合物(75/25；w/w)中浸渍2小时。然后将粗提取物离心10分钟(8000rpm)，以除去不溶级分，然后过滤上清液(0.45μm)。
g)获得包含栎木鞣花素和/或栗木鞣花素的根据本发明的千屈菜提取物
在环境温度(在该情况下为20℃)，将相对于由溶剂和植物的地上部分组成的混合物的总重量以干物质重量计为10％的量的地上部分(即千屈菜的叶、花、花梗和茎的混合物)，在水/乙醇混合物(75/25；w/w)中搅拌着浸渍24小时。
然后第一步将提取物在C18接枝的硅胶固相上通过固相萃取(SPE)纯化。将提取物置于在含有例如20％甲醇和0.5％甲酸的含水醇溶液中。用相同的溶剂进行洗脱。然后将所得提取物通过蒸发浓缩，然后冻干。然后第二步，通过半制备型高效液相色谱(HPLC)、在尺寸为250x10mm的Synergi Fusion(Phenomenex)柱上纯化得到的提取物。用0.5％甲酸和甲醇梯度进行洗脱。
由此获得的纯化提取物包含栎木鞣花素和/或栗木鞣花素，其分子总量相对于纯化的提取物的总重量为1％重量。
将麦芽糖糊精加入到提取物中，然后通过蒸发浓缩提取物，然后冻干。
实施例2：证明根据本发明的千屈菜提取物对I型胶原蛋白表达的影响
方案：
证明I型胶原蛋白表达增加的实验条件是公布的国际申请WO 2012/175454的实施例1中列出的那些。
将从健康供体的腹部活组织检查获得的正常的、即非病理性的人成纤维细胞接种到96孔板中，并在确定的培养基(FGM)中培养直至100％融合，其在培养3天后获得的。
将根据本发明的实施例1a制备的根据本发明千屈菜提取物以1％(w/w)的终浓度加入到培养基中。使用不添加本发明提取物的相同培养基作为对照(未处理对照)。
在37℃在融合后培养48小时后，除去并清除培养基。进行细胞裂解步骤，然后除去裂解物并进行分析。对裂解物进行DNA测定，以便表示每个细胞的胶原蛋白表达。
通过双苯酰亚胺法(Invitrogen,Quant-iTTM
Figure GDA0002390349170000251
dsDNA)测定双链DNA。DNA浓度与活细胞的数量成比例，并且这使得可以使荧光读数与细胞数量建立联系。
I型胶原通过免疫化学技术如下测定：
将抗I型胶原抗体与细胞裂解物孵育30分钟。用PBS冲洗后，加入铕偶联的二级抗体(Perkin Elmer)。加入显示液，使用EnVision多层读数器(Perkin Elmer)测定荧光。
对于每个情况，在每个孔中测定时间分辨荧光(TRF)，并与在孔中测定的DNA的量建立联系。计算(荧光/DNA浓度)比。
对于每个情况，将结果表示为，相对于对照(未处理对照)中测定的蛋白质表达而言的，蛋白质表达平均值的百分比(n＝6)。
结果：
平均值 标准差
对照 100 1
1％(w/w)千屈菜提取物1a) 196.6 14.5
结论：
根据本发明的千屈菜提取物诱导体外培养的人成纤维细胞中I型胶原蛋白表达的增加。因此，根据本发明的提取物可用于增加皮肤和/或粘膜的紧致性。
实施例3：根据本发明的各种千屈菜提取物对皮肤脂肪细胞脂解的增加的影响
实施例3a)根据实施例1a)的千屈菜提取物
方案：
如下通过人前体脂肪细胞的分化来获得脂肪细胞：将正常的、即非病理性、非癌性的人类前脂肪细胞接种到富含生长因子(PAGS 7252 Cliniscience)和胎牛血清(FBS)的生长培养基中。培养3天后，用含有生长因子和FBS的分化培养基(PADM 7221Cliniscience)代替培养基。培养2天后，用含有1％FBS的标准培养基代替分化培养基。然后将形成的脂肪细胞在根据实施例1a)的千屈菜提取物的存在下培养16小时，所述千屈菜提取物的最终浓度，相对于最终培养基和提取物的总重量，为1重量％。
通过对释放到培养基中的甘油定量来评价脂解。通过酶法(Libios K-GCROL试剂盒)和340nm处的光密度的测定获得对甘油的定量。结果表示为相对于对照(不含千屈菜提取物的培养基)(基线100)的百分比。提供的结果是3次试验(n＝3)的平均值。
结果：
平均值 标准差
对照 100 20.2
1％(w/w)千屈菜提取物1a) 210.3 31.8
结论：
结果表明，在千屈菜提取物的存在下培养的脂肪细胞的脂解增加，显示提取物诱导减肥作用并减少赘肉的不美观表现、例如橘皮样外观和/或马裤样大腿外观的能力。
实施例3b)根据实施例1g)的包含栎木鞣花素和栗木鞣花素的千屈菜提取物
方案：
如下通过3T3-L1鼠前脂肪细胞的分化获得脂肪细胞：将鼠前脂肪细胞接种到富含新生小牛血清的生长培养基中。培养3天后，用含有分化因子异丁基-甲基-黄嘌呤(IBMX)和地塞米松以及胎牛血清(FCS)的分化培养基代替该培养基。培养2天后，用含有10％FCS的标准培养基代替分化培养基，并孵育8天。然后将形成的脂肪细胞在根据实施例1g)的千屈菜提取物的存在下培养16小时，所述千屈菜提取物的最终浓度，相对于最终培养基和提取物的总重量，为2.5x10-3重量％。
通过对释放到培养基中的甘油定量来评价脂解。通过酶法(Libios K-GCROL试剂盒)和在340nm处的光密度的测定获得对甘油的定量。
结果表示为相对于对照(不含千屈菜提取物的培养基)(基线100)的百分比。所示结果为以“一式四份”(n＝4)进行的试验的平均值。
结果：
平均值 标准差
对照 100 12
2.5x10-3％(w/w)千屈菜提取物1g) 151 4
结论：
结果显示，在含有栎木鞣花素和栗木鞣花素的千屈菜提取物的存在下培养的鼠脂肪细胞中，脂解增加至少35％，其显示了所述提取物诱导减肥作用和减少赘肉不美观的表现、例如橘皮样外观和/或马裤样大腿外观的能力。
实施例4：含有根据本发明的千屈菜提取物的化妆美容和/或皮肤病学成分的实例
进行本领域技术人员已知的方法以将根据本发明的各种成分混合在一起。所示的百分比是相对于组合物总重量的重量百分比。
a)根据本发明的千屈菜提取物是根据实施例1a获得的提取物
Figure GDA0002390349170000271
b)根据本发明的千屈菜提取物是根据实施例1b获得的提取物
Figure GDA0002390349170000281
c)根据本发明的千屈菜提取物是根据实施例1g)获得的提取物
千屈菜提取物(实施例1g)) 1-5％
麦芽糊精 80％
水 适量至100
实施例5：含有本发明的提取物的化妆美容组合物的实例
根据本领域技术人员已知的方法制备以下组合物，特别是就要混合在一起的各个相而言。
5a)含有根据本发明的含千屈菜提取物的化妆美容组合物
*根据上述实施例4a或4c制备化妆美容成分。所示的量为相对于组合物的总重量的重量百分比。
Figure GDA0002390349170000282
5b)包含根据本发明的含千屈菜提取物的化妆美容组合物
*在这种情况下，根据上述实施例4b或4c制备化妆美容成分。所示的量为相对于组合物的总重量的重量百分比。
Figure GDA0002390349170000291
实施例6：含有本发明提取物的软膏剂形式的皮肤病学组合物的实例
根据本领域技术人员已知的方法制备以下组合物，特别是就要混合在一起的各个相而言。
所示的量为相对于组合物总重量的重量百分比。
Figure GDA0002390349170000292
*根据上述实施例4b或4c制备各成分。在这种情况下，将根据本发明的成分灭菌，然后干燥，随后掺入软膏剂形式的组合物中。

Claims (40)

1.千屈菜提取物通过维持和/或增加皮肤和/或粘膜中的I型胶原表达用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜的紧致性的用于非治疗目的的化妆美容用途，所述千屈菜提取物是通过水性提取获得的植物地上部分的提取物，所述千屈菜提取物局部应用于皮肤和/或粘膜。
2.千屈菜提取物和/或栎木鞣花素和/或栗木鞣花素用于非治疗目的的化妆美容用途，其用于诱导对皮肤的减肥作用和/或减少赘肉的不美观表现，所述千屈菜提取物是通过水性提取获得的植物地上部分的提取物，所述千屈菜提取物局部应用于皮肤和/或粘膜。
3.根据权利要求2的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于所述赘肉的不美观表现是皮肤的橘皮样外观或马裤样大腿外观。
4.根据权利要求2或3中任一项的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于所述千屈菜提取物和/或栎木鞣花素和/或栗木鞣花素维持和/或增加皮肤脂肪细胞的脂解。
5.根据权利要求1或2任一项的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于，所述千屈菜提取物是通过用含有乙醇的含水溶液提取获得的提取物。
6.根据权利要求5的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于，所述含水溶液包含相对于该含水溶液总重量的15重量％至40重量％的乙醇。
7.根据权利要求1或2的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于通过提取，相对于溶剂/植物混合物的总重量，以千屈菜植物地上部分的干物质的重量计0.1％至10％的量，而获得千屈菜提取物。
8.根据权利要求7的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于通过提取，相对于溶剂/植物混合物的总重量，以千屈菜植物地上部分的干物质的重量计1％至10％的量，而获得千屈菜提取物。
9.根据权利要求8的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于通过提取，相对于溶剂/植物混合物的总重量，以千屈菜植物地上部分的干物质的重量计5％至10％的量，而获得千屈菜提取物。
10.根据权利要求1的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于将所述千屈菜提取物溶解在包含己二醇和辛甘醇或其混合物的含水溶液中。
11.根据权利要求2的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于将所述千屈菜提取物和/或栎木鞣花素和/或栗木鞣花素溶解在包含己二醇和辛甘醇或其混合物的含水溶液中。
12.根据权利要求1或2中任一项的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于所述千屈菜提取物包含相对于提取物总重量的至少0.25重量％的栎木鞣花素和/或栗木鞣花素。
13.根据权利要求12的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于所述千屈菜提取物包含相对于提取物总重量的至少0.5重量％的栎木鞣花素和/或栗木鞣花素。
14.根据权利要求13的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于所述千屈菜提取物包含相对于提取物总重量的至少1重量％的栎木鞣花素和/或栗木鞣花素。
15.根据权利要求1或2中任一项的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于麦芽糖糊精以相对于所述千屈菜提取物和麦芽糖糊精的总重量至少20重量％被添加至所述提取物中。
16.根据权利要求15的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于麦芽糖糊精以相对于所述千屈菜提取物和麦芽糖糊精的总重量至少50重量％被添加至所述提取物中。
17.根据权利要求16的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于麦芽糖糊精以相对于所述千屈菜提取物和麦芽糖糊精的总重量至少70重量％被添加至所述提取物中。
18.根据权利要求1的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于所述千屈菜提取物存在于包含至少一种化妆美容可接受的赋形剂的化妆美容组合物中。
19.根据权利要求2的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于所述千屈菜提取物和/或栎木鞣花素和/或栗木鞣花素存在于包含至少一种化妆美容可接受的赋形剂的化妆美容组合物中。
20.根据权利要求18或19的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于千屈菜提取物在组合物中存在的浓度相对于组合物的总重量为以重量计1×10-4％至10％。
21.根据权利要求20的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于千屈菜提取物在组合物中存在的浓度相对于组合物的总重量为以重量计1×10-4％至5％。
22.根据权利要求21的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于千屈菜提取物在组合物中存在的浓度相对于组合物的总重量为以重量计1×10-3％至3％。
23.根据权利要求18或19的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于组合物中存在的栎木鞣花素和/或栗木鞣花素相对于组合物的总重量的分子总终浓度为以重量计2.5×10-7％至0.1％。
24.根据权利要求23的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于组合物中存在的栎木鞣花素和/或栗木鞣花素相对于组合物的总重量的分子总终浓度为以重量计5×10-7％至0.05％。
25.根据权利要求24的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于组合物中存在的栎木鞣花素和/或栗木鞣花素相对于组合物的总重量的分子总终浓度为以重量计1×10-5％至0.03％。
26.根据权利要求18或19的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于所述化妆美容组合物选自水性或油性溶液剂、霜剂或作为水性或油性凝胶的凝胶剂、洗发剂、奶状物、乳剂、面膜、浆液、洗液/润肤液、液体皂、皮肤病学棒状物、软膏剂、泡沫和贴剂。
27.根据权利要求26的用于非治疗目的的化妆美容用途，其特征在于所述化妆美容组合物选自霜剂或浆液。
28.用于非治疗目的的化妆美容护理方法，其特征在于其包括将千屈菜提取物或者包含所述提取物的化妆美容组合物局部应用于皮肤和/或粘膜的至少一个区域，通过维持和/或增加皮肤和/或粘膜中的I型胶原表达用于维持和/或增加皮肤和/或粘膜的紧致性，所述千屈菜提取物是通过水性提取获得的植物地上部分的提取物。
29.用于非治疗目的的化妆美容护理方法，其特征在于其包括将千屈菜提取物和/或栎木鞣花素和/或栗木鞣花素、或者包含所述提取物和/或栎木鞣花素和/或栗木鞣花素的化妆美容组合物局部应用于皮肤的至少一个区域，其用于维持和/或增加皮肤脂肪细胞的脂解，用于诱导对皮肤的减肥作用和/或减少赘肉的不美观表现，所述千屈菜提取物是通过水性提取获得的植物地上部分的提取物。
30.权利要求29的用于非治疗目的的化妆美容护理方法，其特征在于所述赘肉的不美观表现是皮肤的橘皮样外观和/或马裤样大腿外观。
31.根据权利要求28或29中任一项的用于非治疗目的的化妆美容护理方法，其特征在于所述千屈菜提取物如权利要求5、6和7至25中任一项所定义。
32.根据权利要求28的用于非治疗目的的化妆美容护理方法，其特征在于皮肤和/或粘膜的区域选自：胃/腹部、手臂、前臂、膝、胸部、大腿、髋部、臀部、颈部、腰部和/或面部。
33.根据权利要求28的用于非治疗目的的化妆美容护理方法，其特征在于皮肤和/或粘膜的区域是身体。
34.根据权利要求28的用于非治疗目的的化妆美容护理方法，其特征在于皮肤和/或粘膜的区域是包含赘肉和/或其不美观表现的皮肤区域和/或由于非病理性生理变化而缺乏紧致性的皮肤区域。
35.根据权利要求34的用于非治疗目的的化妆美容护理方法，其特征在于赘肉的不美观表现是橘皮样外观或马裤样大腿外观。
36.根据权利要求34的用于非治疗目的的化妆美容护理方法，其特征在于非病理性生理变化是饮食变化、激素变化、饮食不佳或久坐的生活方式。
37.根据权利要求36的用于非治疗目的的化妆美容护理方法，其特征在于非病理性生理变化是在青春期、怀孕或绝经期期间的激素变化。
38.根据权利要求32的用于非治疗目的的化妆美容护理方法，其特征在于皮肤和/或粘膜的区域是在女性中的皮肤和/或粘膜的区域。
39.千屈菜提取物和/或栎木鞣花素和/或栗木鞣花素或包含其以及皮肤病学上可接受的赋形剂的皮肤病学组合物在制备药物中的用途，所述千屈菜提取物是通过水性提取获得的植物地上部分的提取物，所述药物用于预防和/或治疗赘肉和/或赘肉的不美观表现，其特征在于所述药物是局部施用的。
40.根据权利要求39的用途，其特征在于所述提取物如权利要求5、6和7至25中任一项所定义。
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