CN1073857C - 冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法 - Google Patents

冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1073857C
CN1073857C CN98123771A CN98123771A CN1073857C CN 1073857 C CN1073857 C CN 1073857C CN 98123771 A CN98123771 A CN 98123771A CN 98123771 A CN98123771 A CN 98123771A CN 1073857 C CN1073857 C CN 1073857C
Authority
CN
China
Prior art keywords
vaccine
hepatitis
freeze
mem
gram
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
CN98123771A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1252308A (zh
Inventor
柴少爱
陈念良
毛江森
高丽美
钱汶
黄海鹰
张峰
陈卓
忻亚娟
毛子安
黄伟新
王平
陈军
袁建国
庄昉成
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ZHEJIANG PUKANJG BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Original Assignee
ZHEJIANG PUKANJG BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ZHEJIANG PUKANJG BIOTECHNOLOGY CO Ltd filed Critical ZHEJIANG PUKANJG BIOTECHNOLOGY CO Ltd
Priority to CN98123771A priority Critical patent/CN1073857C/zh
Publication of CN1252308A publication Critical patent/CN1252308A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1073857C publication Critical patent/CN1073857C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

一种冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法，其疫苗包含有明胶、乳糖、硫酸镁、氯化镁组成的甲型肝炎冷冻干燥保护剂和MEM氨基酸基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液溶液，将甲肝病毒液按一定比例加入到上述含有甲型肝炎病毒冷冻干燥剂的MEM氨基酸基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液溶液中，采用真空冷冻干燥，即制成冷冻干燥甲肝减毒活疫苗，工艺合理，安全性和稳定性好，有效期长达18个月，预防甲肝效果好，具有重大社会经济效益和实施价值。

Description

冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法
本发明属于甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法，尤其是冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法，适用于预防人体甲型肝炎的减毒活疫苗及制备的场合。
病毒性肝是我国最主要的传染病，而甲型肝炎占已知六种病毒性肝炎发病率的首位。自1992年以来，全国已有近一亿人接种液体剂型的甲型肝炎减毒活疫苗，获得了非常满意的流行病学保护效果。甲肝的年发病率平均每年以20％左右的速度下降。但是，由于我国处于发展中国家，许多边远地区交通仍然不便，而一般的液体剂型甲型肝炎减毒活疫苗在4-8℃条件保存有效期只有3个月。含有稳定剂的液体剂型甲型肝炎减毒活疫苗在4-8℃条件保存有效期也仅有6个月。到目前为止，国外尚未有大规模应用于人体的甲型肝炎减毒活疫苗以及冻干剂型的甲型肝炎减毒活疫苗。而国内含有疫苗保护剂的使用真空冷冻干燥方法制造而成的、4-8℃保存有效期达18个月的冻干甲型肝炎减毒活疫苗至今未有报告。
根据我国国情，为控制甲型肝炎的流行，接种甲型肝炎减毒活疫苗是一种行之有效的方法。因此，须使广大的人群，特别是农村人群都能接种到安全的、免疫原性强的、高效的甲型肝炎减毒活疫苗。
本发明的目的就在于提供一种安全、高效、稳定性好、有效期长的甲型肝炎减毒活疫苗新剂型-即含有冷冻干燥保护剂的冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法。
本发明的冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗，疫苗中包含有明胶、乳糖、硫酸镁、氯化镁组成的甲型肝炎病毒冷冻干燥保护剂和基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液。
甲型肝炎病毒冷冻干燥保护剂组成为：明胶，疫苗中终浓度为0.1-0.5克％，乳糖，疫苗中终浓度为3.0-6.5克％，硫酸镁，疫苗中终浓度为0.1-0.25克％，氯化镁，疫苗中终浓度为0.3-0.45克％。
基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液为可耐高温灭菌的基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液。
基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液的PH值为7.0-7.4。
冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗的制备方法，每100毫升去离子蒸馏水中加入基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液0.94克，待溶解后加入明胶0.1-0.5克，将该溶液温热，待明胶充分溶解后再加入乳糖3.0-6.5克，然后加入用去离子蒸馏水溶解好的硫酸镁0.1-0.25克和氯化镁0.3-0.45克，过滤，分装，蒸气高压灭菌。再将甲肝病毒浓缩液按每人份接种病毒量6.5-7.0log10TCID50比例加入到上述含有甲型肝炎减毒活疫苗冷冻干燥保护剂的基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液中进行灌装，采用真空冷冻干燥法，冷冻干燥箱预冷至-20℃-40℃疫苗进箱，冻干箱搁板温度为-35℃-50℃时，开真空、升华，二次干燥真空冷冻干燥箱搁板温度为15℃-30℃，即制成冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗。
本发明的冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法，与现有技术相比，工艺合理，安全性和稳定性好，有效期长，通常4-8℃保存有效期可达18个月，预防甲肝效果好，具有重大社会经济效益和实施价值。
本发明的冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法，其实施方案为：疫苗中包含有明胶、乳糖、硫酸镁、氯化镁组成的甲型肝炎病毒冷冻干燥保护剂和基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液溶液。
甲型肝炎病毒冷冻干燥保护剂组成为：明胶，疫苗中终浓度为0.1-0.5克％，乳糖，疫苗中终浓度为3.0-6.5克％，硫酸镁，疫苗中终浓度为0.1-0.25克％，氯化镁，疫苗中终浓度为0.3-0.45克％。
基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液为可耐高温灭菌的基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液。
基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液的PH值为7.0-7.4。
冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗的制备方法，每100毫升去离子蒸馏水中加入基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液0.94克，待溶解后加入明胶0.1-0.5克，将该溶液温热，待明胶充分溶解后再加入乳糖3.0-6.5克，然后加入用去离子蒸馏水溶解好的硫酸镁0.1-0.25克和氯化镁0.3-0.45克，达滤，分装，蒸气高压灭菌。再将甲肝病毒浓缩液按每人份接种病毒量6.5-7.0log10TCID50比例加入到上述含有甲型肝炎减毒活疫苗冷冻干燥剂的基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液中进行灌装，采用真空冷冻于燥法，冷冻干燥箱预冷至-20℃-40℃疫苗进箱，冻于箱搁板温度为-35℃-50℃时，开真空、升华，二次干燥真空冷冻干燥箱搁板温度为15℃-30℃，即制成冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗。
实施例1：
将含有疫苗冻干保护剂的甲型肝炎减毒活疫苗，按每人份分装量0.5-1.2ml、内含病毒量6.5-7.0log10TCID50，一部分加塞压盖4℃保存作为疫苗冻干前感染性滴度检测用，另一部分疫苗将丁基胶并塞加至1/3处，再进行冷冻干燥。五个不同批号含有疫苗冻干保护剂的甲肝减毒活疫苗经冷冻干燥后，感染性滴度检测证明：按本发明权利要求1的方法冷冻干燥制成的冻干甲型肝炎减毒活疫苗，疫苗冷冻干燥后感染性滴度比冷冻干燥前仅下降在0.26-0.41log10TCID50/ml之间。(附表1)
表1：甲肝减毒活疫苗冻干前后感染性滴度测定
疫苗批号                           logTCID50/ml
   冻干前    冻干后    前后差
 96A2     6.91     6.50     0.41
 96A3     7.00     7.17     -0.17
 97A11     6.76     6.45     0.31
 98A3     6.50     6.18     0.32
 98A4     6.66     6.40     0.26
实施例2：
同一批号的，含有明胶、乳糖、氯化镁、硫酸镁、基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液的甲肝减毒活疫苗冻干苗和未经冻干的液体对照苗，存放在同一个4-8℃冰箱内，定期随机取样测定疫苗感染性滴度，结果证明：按本发明权利要求1方法冷冻干燥制成的冻干甲型肝炎减毒活疫苗，具有良好的稳定性，在4-8℃条件下存放21个月，疫苗感染性滴度不变。而未经冷冻干燥的液体对照苗在4-8℃存放21个月感染性滴度明显下降，达到1.41log10TCID50/ml。本结果同时证明：未经冷冻干燥的液体对照苗在4-8℃条件下存放10个月的感染性滴度与冻干苗存放24个月的感染性滴度下降幅度相近。(附表2)
表2： 冻干甲肝减毒活疫苗4-8℃保存感染性滴度测定
疫苗批号                      疫苗logTCID50/ml
 0月 2月  6月  10月  13月  17月 21月 24月
液体苗 6.92 6.50  6.66  6.13  6.75  5.83 5.50 5.33
冻干苗 6.50 6.50  6.50  6.50  6.63  6.75 6.55 6.20
实施例3：
将含有明胶、乳糖、氯化镁、硫酸镁基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液冻干保护剂的甲肝减毒活疫苗和不含有明胶、乳糖、氯化镁、硫酸镁基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐保护剂，用PBS缓冲液稀释的甲肝减毒活疫苗，在同一真空冷冻干燥条件下进行冷冻干燥，然后随机取样测定疫苗感染性滴度。结果证明未加保护剂的疫苗经冷冻干燥后，病毒活力大部分丧失。(附表3)
表3： 冻干保护剂对甲肝减毒活疫苗感染性滴度的影响
疫苗批号 保护剂                     log10TCID50/ml
液体(对照)苗  冷冻干燥苗
9807-1 -     ＜3.50     6.29
    3.57     6.29
9807-1 +     6.57     6.50
    6.50     6.50
实施例4：
将含有冷冻干燥剂批号为96A2冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗，接种于79例甲型肝炎病毒抗体(抗HAV-lgG抗体)阴性的6-7岁小学一年级学生，接种方法为上臂皮下注射1.0ml，疫苗病毒含量为6.50log10TCID50/ml。冷冻干燥苗临用前用灭菌注射用水溶解。疫苗接种8周后抽上臂静脉血清抗甲型肝炎病毒抗体(抗HAV-lgG抗体)结果表明：79例冻干苗接种者中有72例甲肝病毒抗体(抗HAV-lgG抗体)检验呈阳性，抗体阳转率为91.14％。

Claims (5)

1、冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗，由甲肝病毒和冷冻干燥保护剂组成，其特征是疫苗中包含有明胶、乳糖、硫酸镁、氯化镁组成的甲型肝炎病毒冷冻干燥保护剂以及基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液。
2、如权利要求1所述的疫苗，其特征是甲型肝炎病毒冷冻干燥保护剂组成为：每100毫升疫苗溶液中含有0.1-0.5克的明胶、3.0-6.5克的乳糖、0.1-0.25克的硫酸镁和0.3-0.45克的氯化镁。
3、如权利要求1所述的疫苗，其特征是基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液为可耐高温灭菌的基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液。
4、如权利要求1或3或所述的基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液，其特征是该平衡盐溶液PH值为7.0-7.4。
5、如权利要求1所述的冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗的制备方法，其特征是100毫升去离子蒸馏水中加入基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐0.94克，待溶解后加入明胶0.1-0.5克，将该溶液水溶温热，待明胶充分溶解后再加入乳糖3.0-6.5克，然后加入用去离子蒸馏水溶解好的硫酸镁0.1-0.25克和氯化镁0.3-0.45克，再将甲肝病毒按每人份接种病毒量6.5-7.0log10TCID50比例加入到上述含有甲型肝炎减毒活疫苗冷冻干燥剂的基础氨基酸培养基(MEM)平衡盐溶液中进行灌装，采用真空低温冷冻干燥法，冷冻干燥箱预冷至-20℃至-40℃疫苗进箱，冻干箱搁板温度为-35℃至-50℃时，开真空、升华，二次干燥真空冷冻干燥箱搁板温度为15℃-30℃，即制成冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗。
CN98123771A 1998-10-28 1998-10-28 冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法 Expired - Lifetime CN1073857C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN98123771A CN1073857C (zh) 1998-10-28 1998-10-28 冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN98123771A CN1073857C (zh) 1998-10-28 1998-10-28 冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1252308A CN1252308A (zh) 2000-05-10
CN1073857C true CN1073857C (zh) 2001-10-31

Family

ID=5228342

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN98123771A Expired - Lifetime CN1073857C (zh) 1998-10-28 1998-10-28 冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN1073857C (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101406699B (zh) * 2008-11-19 2011-08-31 长春长生生物科技股份有限公司 一种利用细胞工厂制备冻干甲型肝炎减毒活疫苗的方法

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102228687B (zh) * 2011-06-24 2012-10-10 浙江普康生物技术股份有限公司 不含明胶、人血白蛋白保护剂的冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101406699B (zh) * 2008-11-19 2011-08-31 长春长生生物科技股份有限公司 一种利用细胞工厂制备冻干甲型肝炎减毒活疫苗的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN1252308A (zh) 2000-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1053590C (zh) 冻干甲型肝炎减毒活疫苗及其保护剂
EP1206189B1 (en) Rotavirus vaccine formulations
AU2008225501B2 (en) Lyophilized preparation comprising influenza vaccine, and method for preparation thereof
CN106061503A (zh) 液体稳定的猪病毒疫苗
CA2329000A1 (en) Stabilised virus preparation
WO2002011540A1 (en) Rotavirus vaccine formulations
CN101095950B (zh) 一种稳定的人用狂犬病疫苗冻干制剂及其制备
KR890004019B1 (ko) 요로 감염 치료용 백신의 제조방법
KR900007644B1 (ko) 백일해 균의 배양 방법, 백일해 톡소이드 및 백일해 백신
CN1073857C (zh) 冷冻干燥甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法
CA2391889A1 (en) An aqueous solution formulation of alpha-interferon
TWI548746B (zh) 防備豬胸膜肺炎之疫苗及製備該疫苗之方法
CN1883707A (zh) 重组腺病毒的冻干制剂及其制备方法
KR20170086274A (ko) 오리 간염 a 바이러스 1형과 3형의 생혼합 건조백신
CN1468091A (zh) 疫苗组合物和稳定化的方法
CN1321694C (zh) 冻干剂型艾滋病重组痘病毒安卡拉株载体疫苗及其制备方法
CN1318087C (zh) 去白蛋白神经生长因子制剂
CN1176827A (zh) 一种动物用冻干活疫苗的制造方法
US7579003B2 (en) HBsAg-BCG combined vaccine for intracutaneous injection and preparation method thereof
CN107550863B (zh) 一种禽鼻气管鸟疫杆菌a/b血清型二价灭活疫苗
IE881248L (en) Stable lyophilized live herpes virus vaccine
CN1127985C (zh) 鸡马立克氏病疫苗免疫增强剂及制备工艺
CN1073858C (zh) 含有稳定剂的甲型肝炎减毒活疫苗及制备方法
CN1640496A (zh) 重组腺病毒冻干制剂及制备方法
FI57534B (fi) Foerfarande foer foerbaettrandet av stabiliteten vid rumstemperatur hos ett oralt poliovirusvaccin av typen 1,2 eller 3

Legal Events

Date Code Title Description
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C06 Publication
PB01 Publication
C53 Correction of patent for invention or patent application
CB02 Change of applicant information

Applicant after: Zhejiang Pukanjg Biotechnology Co., Ltd.

Applicant before: Pukang Biological Technology Co., Zhejiang Prov. Academy of Medical Sciences

COR Change of bibliographic data

Free format text: CORRECT: APPLICANT; FROM: PUKANG BIOLOGICAL TECHNOLOGY CO., ZHEJIANG PROV. ACADEMY OF MEDICAL SCIENCES TO: ZHEJIANG PUKANG BIOLOGICAL TECHNOLOGY CO., LTD.

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CX01 Expiry of patent term
CX01 Expiry of patent term

Granted publication date: 20011031