CN107375498B - 抗妇炎制剂在制备治疗宫腔粘连药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及抗妇炎制剂在制备治疗宫腔粘连药物中的应用，所述抗妇炎制剂的原料为苦参、杠板归、黄柏、连翘、益母草、赤小豆、艾叶、当归和乌药，所述制剂为胶囊、片剂、颗粒剂、口服液等剂型。该药品应用于子宫内壁粘连所表现的子宫内膜粘连、腺体减少、纤维化程度加重、闭经、月经过少、反复流产及不孕等主要症状，具有良好效果。另外，本发明制剂通过动物试验证实了其在治疗宫腔粘连相关疾病的疗效，且具有调节身体机能的作用，为患者提供了又一选择。

Description

抗妇炎制剂在制备治疗宫腔粘连药物中的应用

技术领域

本发明涉及抗妇炎制剂在制备治疗宫腔粘连药物中的应用，属于药物应用领域。

背景技术

宫腔粘连(IUA)是由于各种因素所致宫腔子宫内膜基底层损伤后宫腔部分或全部粘连闭塞。创伤和感染是引起宫腔粘连的两个高危因素。子宫粘连症可引起闭经、子宫内膜异位症，发生继发性不孕和再次妊娠引起流产。正常宫腔在生理状态下前后壁接触合拢，即使在月经期子宫内膜剥脱时亦不会出现粘连，这皆因子宫内膜基底层的完整性和功能正常。如果一旦因手术或炎症等物理化学因素刺激损伤了子宫内膜，造成内膜基底层的破坏，改变了正常月经周期中子宫内膜有规律的生长脱落，则可导致子宫间质中的纤维蛋白原渗出、沉积，造成宫腔前后壁粘连。

宫腔粘连的病理学类型分为以下三种病理类型。①内膜性粘连：由子宫内膜形成，表面与子宫内膜相似，质脆色白，柔软，宫腔镜下呈竖琴状或布帘状。②肌纤维性粘连：由平滑肌及纤维组织构成，表面有薄层内膜覆盖，可见到内膜的腺体开口。粘连表面粉红色，形态较粗、质韧，粘连带组织内有较多微血管。③结缔组织性粘连：形成时间较长，粘连结缔组织化，表面无内膜覆盖，形态粗大而广泛，色苍白无出血，质地坚韧。宫腔粘连的发病机制至今尚不明确,但研究显示,与子宫内膜修复障碍密切相关。

西医对于治疗宫腔粘连多以手术与激素治疗为主，对于膜性粘连、纤维肌性粘连可在宫腔镜下分离或用手术剪除；而对于结缔组织样致密粘连则需在B超监护下行电切分离术，术后放置宫内节育器防再粘连，并给予雌孕激素续贯用药，促使内膜生长。使患者恢复月经来潮，有的患者可以再次怀孕，但其治愈率和妊娠率仍较低，相对而言中医中药在该方面治疗上有着巨大的优势。

目前报道治疗宫腔粘连等相关疾病的中医药研究也愈来愈多，如CN103446548A公开了一种防治宫腔粘连的宫腔注射中药制剂及其制备方法，该防治宫腔粘连的制剂是由丹参10-15份、当归10-15份、川芎10-15份、苦参8-10份、黄芩8-10份、黄连8-10份、黄柏8-10份、苍术8-10份、蒲公英8-10份、双花8-10份、连翘8-10份、赤芍8-10份、覆盆子8-10份、红藤8-10份、败酱8-10份、鱼腥草8-10份、三棱3-5份、莪术3-5份、炙甘草2-3份共计19种中药材制成，与普通宫腔镜下镜体尖端钝性分离术比较，6个月内无复发，1年后复发率为5％，另外针对40例患者的闭经、月经量减少、宫腔积血及腹痛的改善效果分别为40.48％、45.24％、50％和35.71％。又如CN106039239A公开了一种治疗女性不孕症的中药制剂、制备方法及其用途，该制剂是由三棱80～350份、莪术100～320份、路路通60～320份、王不留行90～340份、皂角刺50～350份、当归100～300份、赤芍80～300份、益母草100～350份、香附0～300份、肉桂0～300份和小茴香0～300份共计11种中药材制成，该发明侧重于多种原因造成女性不孕症的解决方案，临床观察显示其对输卵管阻塞和慢性子宫内膜炎治愈率分别为70％以上和86％，有效率均为90％以上，并明确直肠治疗方法较口服效果好，仅在典型病例中有写出一例采用直肠治疗方法对宫腔粘连有治疗效果。

本申请人在长期对本公司产品抗妇炎胶囊的上市后临床表现进行追踪和药学作用不断研究的过程中，意外地发现，该上市药品及其相关制剂在治疗宫腔粘连及相关疾病方面也具有明显的作用效果。

已上市的抗妇炎产品为抗妇炎胶囊，是贵州远程制药有限责任公司生产的独家品种，以苦参、杠板归、黄柏、连翘、益母草等9种药材为原料制成的纯中药制剂，具有活血化瘀、清热燥湿的功效，主要用于湿热下注型盆腔炎、阴道炎、慢性宫颈炎，症见赤白带下、阴痒、出血、痛经等。如上所述，抗妇炎胶囊对盆腔炎、阴道炎等作用效果良好，但目前尚未见将苦参、杠板归、黄柏、连翘、益母草等9种药材共同作用于治疗宫腔粘连及相关疾病的相关报道。因此研究抗妇炎胶囊及其相关制剂在治疗宫腔粘连所表现的子宫内膜粘连、腺体减少、纤维化程度加重、闭经、月经过少、痛经、反复流产及不孕等主要症状具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供抗妇炎制剂在制备治疗宫腔粘连药物中的应用。

本发明所述宫腔粘连主要症状为：子宫内膜粘连、子宫内膜腺体减少、内膜性纤维化。

本发明所述宫腔粘连临床表现为：闭经、月经过少、反复流产及不孕。

本发明所述抗妇炎制剂，按重量份计，制成该制剂有效组分的原料为：苦参200-300份、杠板归200-300份、黄柏100-200份、连翘30-70份、益母草20-40份、赤小豆20-40份、艾叶20-40份、当归20-40份、乌药20-40份

优选的原料重量配比为：苦参250份、杠板归250份、黄柏150份、连翘50份、益母草30份、赤小豆30份、艾叶30份、当归30份、乌药30份。

本发明所述的抗妇炎制剂，是将原料药按一定工艺制备成，其制备方法属于现有技术，可以从现有专利公开的文件中获得，或根据其他公开的文献技术及药品标准制备。如WS-10498(ZD-0498)-2002-2012Z、CN1418660A、CN1839981A、CN1698704A、CN1698766A等。

本发明的抗妇炎制剂可以根据需要加入一种或多种药学上可接受的载体，如稀释剂、赋形剂、填充剂、崩解剂、湿润剂、粘合剂、表面活性剂、吸收促进剂、润滑剂等，按照药学领域的常规方法，制备成所需要的剂型；

本发明所述制剂为普通片、分散片、丸剂、硬胶囊、软胶囊、颗粒、口服液、滴丸；优选为硬胶囊剂。

本发明的抗妇炎制剂在使用时根据病人的情况确定用法用量。例如已上市的由贵州远程制药有限责任公司生产的抗妇炎胶囊，每粒装0.35g，用法用量为口服，每日3次，每次4粒。

宫腔粘连目前临床研究有以下几点为主要研究点：1、西医主要症状--子宫内壁粘连；根据粘连的部位、程度及面积的不同，临床表现各种各样，如闭经、月经过少、痛经、反复流产及不孕等。2、中医辨证标准为瘀血阻络证。

为探究抗妇炎制剂在治疗宫腔粘连及其相关疾病的应用，本发明进行了药效学研究，从治疗效果、与现有技术/产品对比情况方面，比较给药后大鼠子宫病理变化、纤维化程度，血清中炎症因子及关生化指标变化。经动物实验验证，结果显示本发明所述的抗妇炎制剂具有治疗宫腔粘连及其相关疾病的作用，具体地说，本发明提供的制剂对子宫内膜粘连、子宫内膜腺体减少、内膜性纤维化、闭经、月经过少、反复流产及不孕等的疗效确切、安全性好，相比现有相似配方及常用产品，具有治疗效果更优、恢复程度快等优势，值得推广。

具体实施方式

为更好的理解本发明，采用以下实验例，说明其在制药领域中的新用途。下述实验旨在说明本发明而非对本发明的限制。

试验例、抗妇炎制剂抗宫腔粘连药效学评价及机制分析实验研究

1、材料：

1.1抗妇炎制剂：

组1：上市抗妇炎胶囊，贵州远程制药有限责任公司生产，规格：每粒装0.35g，用法用量：每日3次，每次4粒。

组2：抗妇炎片：以1000片计算，处方范围内药材份改为g，按照现有公开技术方案制成，规格：每片重0.5g，用法用量：每日3次，每次4片。

组3：抗妇炎颗粒：以2500g计算，处方范围内药材份改为g，按照现有公开技术方案制成，规格：每袋装10g，用法用量：每日3次，每次10g。

组4：抗妇炎软胶囊：以1000粒计算，处方范围内药材份改为g，按照现有公开技术方案制成，规格：每粒重0.5g，用法用量：每日3次，每次2粒。

组5：抗妇炎口服液：以2500ml计算，处方范围内药材份改为g，按照现有公开技术方案制成，规格：每瓶装10ml，用法用量：每日3次，每次10ml。

组6：抗妇炎滴丸：以5000粒计算，处方范围内药材份改为g，按照抗妇炎胶囊质量标准制成稠膏和细粉，然后采用常规技术制成，规格：每粒重25mg，用法用量：每日3次，每次10粒。

组7：抗妇炎分散片：以1000片计算，处方范围内药材份改为g，按照现有公开技术方案制成，规格：每粒重0.8g，用法用量：每日3次，每次2片。

1.2对照药品

对照药品1：上市妇科千金胶囊；规格：每粒装0.4g，用法用量：口服，一次2粒，一日3次。

对照药品2：参考CN103446548A实施例1的配方和提取方法获得提取物，然后采用常规方法制备成胶囊剂。用法用量：口服，每日3次，每次4粒。

1.3试验对象：SPF级SD雌性大鼠。

2、试验方法

2.1造模方法：取SPF级SD雌性大鼠132只，手术前一天晚上禁食不禁水12h，3％戊巴比妥钠30mg/kg麻醉后，下腹常规消毒后于正中切口，暴露Y型子宫，用1mL注射器，于子宫分盆处进针入子宫腔内，朝右侧卵巢方向缓慢推注25％苯酚胶浆0.06mL，左侧子宫不注射作为自身对照。造模完成后分层关腹，消毒手术区。保留12只注射生理盐水，作为假手术对照组。

2.2药物分组：

1)模型组：12只，予生理盐水灌胃，1ml/100g/天，每日1次，无特殊处理。

2)假手术(正常)组：12只，予生理盐水灌胃，1ml/100g/天，每日1次，无特殊处理。

3)抗妇炎制剂组：每组12只，共计84只。按照临床成人给药量(按照70kg成人，厂家推荐/前述使用剂量)折算为大鼠给药量的5倍，施用前加水配置成溶液(1ml/100g/天)，每日1次。于造模后第二天开始灌胃给药，连续给予18天。

4)对比组：每组12只，共计24只。同上按照临床成人给药量折算为大鼠给药量的5倍，施用前加水配置成溶液(1ml/100g/天)，每日1次。于造模后第二天开始灌胃给药，连续给予18天。

2.3测定：

取材前一晚禁食不禁水，第19天末次给药后在麻醉下腹主动脉取血，Elisa法测定血清中IL-2，IL-10的含量；血液流变仪测定血浆中纤维蛋白原的含量；HE染色观察大鼠子宫病理组织结构变化；Masson染色采用ImagePro Plus定量分析大鼠子宫纤维化变化；RT-qPCR检测子宫Notch1、RBP-JK、ADAM12、ADAM15、ADAM17、TGF-β、IκB等基因mRNA的表达以及蛋白印迹法检测Notch1、ADAM12、ADAM15、IκB、MMP-9蛋白的表达。

3、结果

3.1抗妇炎制剂对宫腔粘连大鼠子宫病理变化的影响：

结果显示假手术组无炎症细胞浸润，无成纤维细胞，腺体完整无变形；

造模后，模型组炎症细胞浸润严重，成纤维细胞明显增多，腺体明显减少，变形或消失；

给药后，抗妇炎制剂各组、以及对照(妇科千金胶囊、现有专利)组相比于模型组病理上有明显的改善，炎症细胞浸润改善明显，成纤维细胞明显减少，腺体数量明显高于模型组。

抗妇炎制剂各组间，对大鼠子宫病理变化的影响组间差异不大，表明与剂型关系不大(本次实验均为口服制剂)；与对照1、2组相比，本发明制剂各组对炎症细胞浸润度、成纤维细胞减少量均更优。

3.2抗妇炎制剂对苯酚胶浆诱导宫腔粘连模型大鼠子宫纤维化程度变化的影响，如表1所示：

表1宫腔粘连模型大鼠子宫纤维化程度对比表(n＝4-5)

注：试验组与模型组比较*P<0.05

结果：造模后，模型组子宫内膜及内膜下可见明显的纤维化组织，与假手术组相比纤维化明显加重；假手术组模型组纤维化组织不明显；给药后，抗妇炎制剂组与对比组均明显减轻了纤维化程度，纤维化组织显著减少。本发明制剂各组间差异不大，且好于对比组。

3.3对苯酚胶浆诱导宫腔粘连模型大鼠血清中炎症因子变化的影响，如表2所示：

表2宫腔粘连模型大鼠血清中炎症因子变化对比表(n＝9-12)

注：试验组与模型组比较**P<0.01或*P<0.05

结果：造模后，模型组血清中促炎因子IL-2含量明显增多，抑炎因子IL-10含量明显减少；给药后，抗妇炎制剂组与对比组相比于模型组，血清中促炎因子IL-2含量明显减少，抑炎因子含量明显增多，有显著统计学差异。本发明制剂各组间差异不大，且好于对比组。

3.4对苯酚胶浆诱导宫腔粘连模型大鼠相关基因的调节作用，如表3、4所示：

表3宫腔粘连模型大鼠相关基因mRNA表达情况表(n＝3-5)

注：试验组与模型组比较**P<0.01或*P<0.05

表4宫腔粘连模型大鼠相关蛋白调节情况表(n＝3-4)

注：试验组与模型组比较*P<0.05

结果：①造模后，模型组子宫组织中Notch1、ADAM12、ADAM15、RBP-JK等基因的mRNA水平明显上升，基因表达极显著高于假手术组、试验组及对照组；给药后，抗妇炎制剂组及对比组相比于模型组，Notch1、ADAM12、ADAM15、RBP-JK等基因的mRNA水平明显下调，其中RBP-JK基因表达显著低于对照1、2组；本发明制剂各组间差异不大，但总体上好于对比组，尤其是RBP-JK，明显低于对照组。

②造模后，模型组子宫组织中Notch1、ADAM12、ADAM15、MMP-9蛋白水平明显上升，IκB的蛋白水平明显下降；给药后，抗妇炎制剂组及对比组相比于模型组，Notch1、ADAM12、ADAM15、MMP-9蛋白水平相比于模型组有一定下调作用，IκB的蛋白水平相比于模型组有一定上调作用。本发明制剂各组间差异不大，与对比组相比较无显著差异。

4、结论

宫腔粘连前期阶段是一个炎症的过程，中期是一个纤维化过程。本实验通过苯酚胶浆诱导宫腔粘连大鼠模型，运用组织形态学检查及炎症因子检测，结果显示抗妇炎制剂能够升高血清中抑炎因子IL-10水平，改善子宫组织炎症浸润，减少成纤维细胞，改善纤维化程度，显著下调Notch1、RBP-JK、ADAM12、ADAM15的mRNA表达水平，以及下调Notch1、MMP-9、ADAM12、ADAM15和升高IκB蛋白水平，在同等用药剂量和治疗时间下，抗妇炎制剂作用效果好于对比药物组，提示抗妇炎制剂有较明显的治疗IUA模型大鼠的宫腔粘连作用，治愈率高、安全稳定、疾病改善程度好，为宫腔粘连患者提供了又一良好选择。

Claims (8)

1.抗妇炎制剂在制备治疗宫腔粘连药物中的应用，其特征在于：按重量份计，制成该制剂有效组分的原料为：苦参200-300份、杠板归200-300份、黄柏100-200份、连翘30-70份、益母草20-40份、赤小豆20-40份、艾叶20-40份、当归20-40份、乌药20-40份。

2.如权利要求1所述的抗妇炎制剂在制备治疗宫腔粘连药物中的应用，其特征在于：所述宫腔粘连主要症状为：子宫内膜粘连、子宫内膜腺体减少、内膜性纤维化。

3.如权利要求1所述的抗妇炎制剂在制备治疗宫腔粘连药物中的应用，其特征在于：所述宫腔粘连临床表现为：闭经、月经过少、反复流产及不孕。

4.如权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：按重量份计，制成该制剂有效组分的原料为：苦参250份、杠板归250份、黄柏150份、连翘50份、益母草30份、赤小豆30份、艾叶30份、当归30份、乌药30份。

5.如权利要求1-3任一项所述的应用，其特征在于：所述抗妇炎制剂是按照现有专利或非专利文献技术及药品标准制备而成。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于：所述抗妇炎制剂根据需要加入一种或多种药学上可接受稀释剂、赋形剂、填充剂、崩解剂、湿润剂、粘合剂、表面活性剂、吸收促进剂、润滑剂，按照药学领域的常规方法，制备成所需要的剂型。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于：所述药物制剂为普通片、分散片、丸剂、硬胶囊、软胶囊、颗粒、口服液、滴丸。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于：所述药物制剂为硬胶囊剂。