一种天麻种麻有性繁殖的方法
技术领域
本发明涉及中药材种植技术领域,具体涉及一种天麻种麻有性繁殖的方法。
背景技术
天麻(Gastrodia elata Bl.)为兰科天麻属多年生草本植物,是一味常用而名贵的中药,已有两千多年的入药和食用历史,具有息风止痉、平抑肝阳、祛风通络功效。天麻是一种极为简化的兰科植物,无根,无绿色叶片,天麻种子微小,无胚乳,必须依靠萌发菌提供营养才能发芽,种子萌发后的原球茎又必须与蜜环菌建立营养关系后才能正常生长发育。
蜜环菌主要依靠阔叶树树段为其提供营养。栽培天麻所用的培养蜜环菌的木材叫菌材。随着天麻种植面积的逐年扩大,对菌材的需求量也不断增加,对生态环境造成了严重的破坏,替代菌材栽培技术已是大势所趋。在专利CN 102138507A(公开日:2011-08-03)一种用于天麻栽培中的菌棒的专利中,公布了一种将阔叶树木的锯末、枝叶或边皮废料的任意一种或几种粉碎后经压制形成的用于天麻栽培中的菌棒,其菌棒不需要以砍伐森林资源为推广种植天麻为代价,避免了传统天麻种植地区,森林资源遭到破坏,有效资源日益匮乏状况的发生,但其生产制作的过程需要放入温度80°~300°下、压力10~30兆帕的环境下压制成成直径5~20cm的圆形木棒,但是其生产工艺的要求高,设备工艺复杂。
在天麻规模化生产中最好的种麻是通过有性繁殖1~2代白头麻,因为用有性繁殖1~2代白头麻做种麻,可减少病虫害发生、缩短种植周期、降低种植风险、提高土地利用率、提高产量和品质。原球茎阶段是有性繁殖生产白头麻中最为关键的环节,原球茎能否成活除受外界生长条件影响外,关键在于能否接上蜜环菌,原球茎早期接菌率越高,成活率越高,形成的白头麻长势越好,抗病性越强。专利CN 105613048A(公开日:2016-06-01)一种提高天麻原球茎接菌率的方法公布了当蜜环菌菌材中的蜜环菌菌索生长旺盛期能够与天麻种子发芽的时机一致,可降低原球茎死亡率,提高单位面积上天麻有性繁殖的产量。但在实际生产中,由于受自然条件影响,很难把控天麻种子发芽时机与蜜环菌菌材中蜜环菌索生长旺盛期很好的相遇。另外文献《中国天麻栽培学》还证明了蜜环菌不但不能提供天麻种子发芽所需的营养,反而对天麻种子发芽有显著的抑制作用。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明旨在提供一种天麻种麻有性繁殖的方法,操作简便、过程可控、成本低廉,可有效提高白头麻产量和品质,缩短天麻种植周期,保护生态环境,促进天麻产业健康发展。
为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种天麻种麻有性繁殖的方法,包括如下步骤:
S1培养基制作:将阔叶树树叶浸泡24h,沥干明水,加入麸皮、石膏粉、K2HPO4、MgSO4、白糖;混拌均匀后,加水,使培养基含水量55%~65%;将培养基放入大口组培瓶中灭菌后冷却至室温备用;其中麸皮、石膏粉、K2HPO4、MgSO4、白糖和阔叶树树叶的重量百分比以干重量计为:麸皮1%~5%、石膏粉1%、K2HPO4 0.5%~1%、MgSO4 0.5%~1%、白糖1%,余量为阔叶树树叶;
S2天麻种子处理:将天麻共生萌发菌栽培种撕成小碎块萌发菌菌叶,放入经消毒的拌种广口容器内,然后撇开天麻蒴果,抖出种子,均匀播撒在萌发菌菌叶上;
S3天麻种子萌发培养与管理:将步骤S2中拌好萌发菌菌叶的种子装入步骤S1中的大口组培瓶里,压实装满至瓶口,盖上盖,在23~28℃下培养30~40d;培养过程中,定期检查种子萌发情况及有无杂菌感染,将被染杂菌的组培瓶及时移除,最终培养得到原球茎;
S4原球茎的定植与管理:将步骤S3中培养得到的原球茎定植在蜜环菌菌棒上,在定植设定的时间后,进行白头麻采挖。
需要说明的是,步骤S1中,得到培养基后,将培养基装于大口组培瓶中,压实,装料高度为组培瓶高度的1/6~1/5,盖上盖;将装好料的大口组培瓶在121℃下高压灭菌1~2h或常压灭菌20~24h,然后冷却至室温,备用。
需要说明的是,步骤S2中,按5~8颗天麻蒴果拌1袋萌发菌。
需要说明的是,步骤S4中的蜜环菌菌棒通过如下方法制作:
1)在进行步骤S3的前1~2个月,以干重量计,将粗锯末、麸皮、棉籽壳拌混均匀后,加入石膏粉、KH2PO4、K2HPO4、MgSO4和白糖,再拌混均匀后,加水,使培养基含水量50%~65%;其中,按干重量计,各原料的重量百分比为:粗锯末75%~85%,麸皮5%~15%,棉籽壳5%~10%,石膏粉1%、KH2PO40.5%、K2HPO40.5%、MgSO40.5%~1%、白糖1%;
2)步骤1)得到的培养基建堆发酵1天;
3)建堆发酵好的产物装入塑料袋中扎紧袋口,灭菌并冷却至室温;
4)然后往塑料袋中接入蜜环菌二级菌种,将接种好的塑料袋运至培养室培养,得到长满蜜环菌菌索的蜜环菌菌棒。
进一步需要说明的是,步骤1)中,所述塑料袋采用长30~60cm,直径10~12cm的聚乙烯塑料袋,每袋填干料500~1000g。
进一步需要说明的是,步骤3)中,所述灭菌为在121℃下高压灭菌2~3h或常压灭菌20~24h。
进一步需要说明的是,步骤4)中,将接种好的塑料袋运至培养室在23~25℃下培养2~3个月。
需要说明的是,步骤S4具体如下:
S4.1将河沙与锯木屑按照干重7~9:3~1比例混拌均匀制成培养基质,加水使培养基质含水量在50%~65%;
S4.2摆放蜜环菌菌棒:选用长30~60cm,宽20~40cm,高20~25cm底部有小洞的塑料筐,在筐底平铺一层步骤S4.1得到的培养基质,顺着塑料筐的长度,每间隔5~7cm铺上蜜环菌菌棒,用步骤S4.1得到的培养基质将人工菌棒覆盖一半的高度,以防杂菌污染;
S4.3原球茎定植
定植时在蜜环菌菌棒两侧每隔5~7cm交错打上直径1~2cm的小孔,将步骤S3中培养的原球茎连同萌发菌树叶种定植在小孔内,定植好后,用用步骤S4.1得到的培养基质填满空隙,并覆土8~12cm,置于室内或大棚内,23~28℃下培养90~120d;
S4.4定植期管理
定植期内,定时浇水使培养基质含水量在50%~65%,保持室内或大棚内温度在23~28℃在室内外温差不大时多通风以防杂菌污染;
S4.5白头麻采挖
定植90~120d后进行白头麻采挖:掏开种植筐表层培养基质,分别取出白头麻和米麻。
本发明的有益效果在于:
首先,本发明将天麻种子与其共生萌发菌拌种后,放在本发明制作的能够快速为其提供营养的培养基上,在人为调控天麻种子最适萌发温度23~28℃下进行培养,既实现了快速提供天麻共生萌发菌所需的营养,保证了天麻种子从萌发到原球茎阶段所需的营养,又缩短了天麻种子从萌发到原球茎阶段所需的时间;还有效的避免了天麻共生蜜环菌对天麻种子萌发的抑制作用。
其次,本发明将天麻种子萌发后形成的原球茎接种到按本发明制备的长满蜜环菌菌索的人工菌棒上,不仅使原球茎在早期阶段能快速与蜜环菌建立良好的营养关系,保证了原球茎的接菌率从而提高了原球茎的成活率,还用蜜环菌人工菌棒替换了传统天麻种植中天然菌材的使用,保护了生态环境;另外,本发明通过人为的调控原球茎生长的适合温湿度,缩短了从原球茎到白头麻生长所需的时间。
相比较天麻传统种植方法,本发明操作简便、过程可控、成本低廉,可有效提高白头麻产量和品质,缩短天麻种植周期,保护生态环境,促进天麻产业健康发展。
具体实施方式
以下将对本发明作进一步的描述,需要说明的是,以下实施例以本技术方案为前提,给出了详细的实施方式和具体的操作过程,但本发明的保护范围并不限于本实施例。
一种天麻种麻有性繁殖的方法,包括如下步骤:
S1培养基制作:将阔叶树树叶浸泡24h,沥干明水,加入麸皮、石膏粉、K2HPO4、MgSO4、白糖;混拌均匀后,加水,使培养基含水量55%~65%;将培养基放入大口组培瓶中灭菌后冷却至室温备用;其中麸皮、石膏粉、K2HPO4、MgSO4、白糖和阔叶树树叶的重量百分比以干重量计为:麸皮1%~5%、石膏粉1%、K2HPO4 0.5%~1%、MgSO4 0.5%~1%、白糖1%,余量为阔叶树树叶;
S2天麻种子处理:将天麻共生萌发菌栽培种撕成小碎块萌发菌菌叶,放入经消毒的拌种广口容器内,然后撇开天麻蒴果,抖出种子,均匀播撒在萌发菌菌叶上;
S3天麻种子萌发培养与管理:将步骤S2中拌好萌发菌菌叶的种子装入步骤S1中的大口组培瓶里,压实装满至瓶口,盖上盖,在23~28℃下培养30~40d;培养过程中,定期检查种子萌发情况及有无杂菌感染,将被染杂菌的组培瓶及时移除,最终培养得到原球茎;
S4原球茎的定植与管理:将步骤S3中培养得到的原球茎定植在蜜环菌菌棒上,在定植设定的时间后,进行白头麻采挖。
需要说明的是,步骤S1中,得到培养基后,将培养基装于大口组培瓶中,压实,装料高度为组培瓶高度的1/6~1/5,盖上盖;将装好料的大口组培瓶在121℃下高压灭菌1~2h或常压灭菌20~24h,然后冷却至室温,备用。
需要说明的是,步骤S2中,按5~8颗天麻蒴果拌1袋萌发菌。
需要说明的是,步骤S4中的蜜环菌菌棒通过如下方法制作:
1)在进行步骤S3的前1~2个月,以干重量计,将粗锯末、麸皮、棉籽壳拌混均匀后,加入石膏粉、KH2PO4、K2HPO4、MgSO4和白糖,再拌混均匀后,加水,使培养基含水量50%~65%;其中,按干重量计,各原料的重量百分比为:粗锯末75%~85%,麸皮5%~15%,棉籽壳5%~10%,石膏粉1%、KH2PO40.5%、K2HPO40.5%、MgSO40.5%~1%、白糖1%;
2)步骤1)得到的培养基建堆发酵1天;
3)建堆发酵好的产物装入塑料袋中扎紧袋口,灭菌并冷却至室温;
4)然后往塑料袋中接入蜜环菌二级菌种,将接种好的塑料袋运至培养室培养,得到长满蜜环菌菌索的蜜环菌菌棒。
进一步需要说明的是,步骤1)中,所述塑料袋采用长30~60cm,直径10~12cm的聚乙烯塑料袋,每袋填干料500~1000g。
进一步需要说明的是,步骤3)中,所述灭菌为在121℃下高压灭菌2~3h或常压灭菌20~24h。
进一步需要说明的是,步骤4)中,将接种好的塑料袋运至培养室在23~25℃下培养2~3个月。
需要说明的是,步骤S4具体如下:
S4.1将河沙与锯木屑按照干重7~9:3~1比例混拌均匀制成培养基质,加水使培养基质含水量在50%~65%;
S4.2摆放蜜环菌菌棒:选用长30~60cm,宽20~40cm,高20~25cm底部有小洞的塑料筐,在筐底平铺一层步骤S4.1得到的培养基质,顺着塑料筐的长度,每间隔5~7cm铺上蜜环菌菌棒,用步骤S4.1得到的培养基质将人工菌棒覆盖一半的高度,以防杂菌污染;
S4.3原球茎定植
定植时在蜜环菌菌棒两侧每隔5~7cm交错打上直径1~2cm的小孔,将步骤S3中培养的原球茎连同萌发菌树叶种定植在小孔内,定植好后,用用步骤S4.1得到的培养基质填满空隙,并覆土8~12cm,置于室内或大棚内,23~28℃下培养90~120d;
S4.4定植期管理
定植期内,定时浇水使培养基质含水量在50%~65%,保持室内或大棚内温度在23~28℃在室内外温差不大时多通风以防杂菌污染;
S4.5白头麻采挖
定植90~120d后进行白头麻采挖:掏开种植筐表层培养基质,分别取出白头麻和米麻。
实施例1
一种天麻种麻有性繁殖的方法,包括如下步骤:
S1培养基制作:将阔叶树树叶浸泡24h,沥干明水,加入麸皮、石膏粉、K2HPO4、MgSO4、白糖;混拌均匀后,加水,使培养基含水量55%~65%;将培养基放入大口组培瓶中灭菌后冷却至室温备用;其中麸皮、石膏粉、K2HPO4、MgSO4、白糖和阔叶树树叶的重量百分比以干重量计为:麸皮1%、石膏粉1%、K2HPO4 1%、MgSO4 0.5%、白糖1%,阔叶树树叶95.5%;
S2天麻种子处理:将天麻共生萌发菌栽培种撕成小碎块萌发菌菌叶,放入经消毒的拌种广口容器内,然后撇开天麻蒴果,抖出种子,均匀播撒在萌发菌菌叶上;
S3天麻种子萌发培养与管理:将步骤S2中拌好萌发菌菌叶的种子装入步骤S1中的大口组培瓶里,压实装满至瓶口,盖上盖,在23~28℃下培养30~40d;培养过程中,定期检查种子萌发情况及有无杂菌感染,将被染杂菌的组培瓶及时移除,最终培养得到原球茎;
S4原球茎的定植与管理:将步骤S3中培养得到的原球茎定植在蜜环菌菌棒上,在定植设定的时间后,进行白头麻采挖。
需要说明的是,步骤S1中,得到培养基后,将培养基装于大口组培瓶中,压实,装料高度为组培瓶高度的1/6~1/5,盖上盖;将装好料的大口组培瓶在121℃下高压灭菌1~2h或常压灭菌20~24h,然后冷却至室温,备用。
需要说明的是,步骤S2中,按5~8颗天麻蒴果拌1袋萌发菌。
需要说明的是,步骤S4中的蜜环菌菌棒通过如下方法制作:
1)在进行步骤S3的前1~2个月,以干重量计,将粗锯末、麸皮、棉籽壳拌混均匀后,加入石膏粉、KH2PO4、K2HPO4、MgSO4和白糖,再拌混均匀后,加水,使培养基含水量50%~65%;其中,按干重量计,各原料的重量百分比为:粗锯末75%,麸皮15%,棉籽壳6%,石膏粉1%、KH2PO40.5%、K2HPO40.5%、MgSO41%、白糖1%;
2)步骤1)得到的培养基建堆发酵1天;
3)建堆发酵好的产物装入塑料袋中扎紧袋口,灭菌并冷却至室温;
4)然后往塑料袋中接入蜜环菌二级菌种,将接种好的塑料袋运至培养室培养,得到长满蜜环菌菌索的蜜环菌菌棒。
进一步需要说明的是,步骤1)中,所述塑料袋采用长30~60cm,直径10~12cm的聚乙烯塑料袋,每袋填干料500~1000g。
进一步需要说明的是,步骤3)中,所述灭菌为在121℃下高压灭菌2~3h或常压灭菌20~24h。
进一步需要说明的是,步骤4)中,将接种好的塑料袋运至培养室在23~25℃下培养2~3个月。
需要说明的是,步骤S4具体如下:
S4.1将河沙与锯木屑按照干重7~9:3~1比例混拌均匀制成培养基质,加水使培养基质含水量在50%~65%;
S4.2摆放蜜环菌菌棒:选用长30~60cm,宽20~40cm,高20~25cm底部有小洞的塑料筐,在筐底平铺一层步骤S4.1得到的培养基质,顺着塑料筐的长度,每间隔5~7cm铺上蜜环菌菌棒,用步骤S4.1得到的培养基质将人工菌棒覆盖一半的高度,以防杂菌污染;
S4.3原球茎定植
定植时在蜜环菌菌棒两侧每隔5~7cm交错打上直径1~2cm的小孔,将步骤S3中培养的原球茎连同萌发菌树叶种定植在小孔内,定植好后,用用步骤S4.1得到的培养基质填满空隙,并覆土8~12cm,置于室内或大棚内,23~28℃下培养90~120d;
S4.4定植期管理
定植期内,定时浇水使培养基质含水量在50%~65%,保持室内或大棚内温度在23~28℃在室内外温差不大时多通风以防杂菌污染;
S4.5白头麻采挖
定植90~120d后进行白头麻采挖:掏开种植筐表层培养基质,分别取出白头麻和米麻。
实施例2
一种天麻种麻有性繁殖的方法,包括如下步骤:
S1培养基制作:将阔叶树树叶浸泡24h,沥干明水,加入麸皮、石膏粉、K2HPO4、MgSO4、白糖;混拌均匀后,加水,使培养基含水量55%~65%;将培养基放入大口组培瓶中灭菌后冷却至室温备用;其中麸皮、石膏粉、K2HPO4、MgSO4、白糖和阔叶树树叶的重量百分比以干重量计为:麸皮5%、石膏粉1%、K2HPO4 0.5%、MgSO4 1%、白糖1%,阔叶树树叶91.5%;
S2天麻种子处理:将天麻共生萌发菌栽培种撕成小碎块萌发菌菌叶,放入经消毒的拌种广口容器内,然后撇开天麻蒴果,抖出种子,均匀播撒在萌发菌菌叶上;
S3天麻种子萌发培养与管理:将步骤S2中拌好萌发菌菌叶的种子装入步骤S1中的大口组培瓶里,压实装满至瓶口,盖上盖,在23~28℃下培养30~40d;培养过程中,定期检查种子萌发情况及有无杂菌感染,将被染杂菌的组培瓶及时移除,最终培养得到原球茎;
S4原球茎的定植与管理:将步骤S3中培养得到的原球茎定植在蜜环菌菌棒上,在定植设定的时间后,进行白头麻采挖。
需要说明的是,步骤S1中,得到培养基后,将培养基装于大口组培瓶中,压实,装料高度为组培瓶高度的1/6~1/5,盖上盖;将装好料的大口组培瓶在121℃下高压灭菌1~2h或常压灭菌20~24h,然后冷却至室温,备用。
需要说明的是,步骤S2中,按5~8颗天麻蒴果拌1袋萌发菌。
需要说明的是,步骤S4中的蜜环菌菌棒通过如下方法制作:
1)在进行步骤S3的前1~2个月,以干重量计,将粗锯末、麸皮、棉籽壳拌混均匀后,加入石膏粉、KH2PO4、K2HPO4、MgSO4和白糖,再拌混均匀后,加水,使培养基含水量50%~65%;其中,按干重量计,各原料的重量百分比为:粗锯末85%,麸皮5%,棉籽壳6.5%,石膏粉1%、KH2PO40.5%、K2HPO40.5%、MgSO40.5%、白糖1%;
2)步骤1)得到的培养基建堆发酵1天;
3)建堆发酵好的产物装入塑料袋中扎紧袋口,灭菌并冷却至室温;
4)然后往塑料袋中接入蜜环菌二级菌种,将接种好的塑料袋运至培养室培养,得到长满蜜环菌菌索的蜜环菌菌棒。
进一步需要说明的是,步骤1)中,所述塑料袋采用长30~60cm,直径10~12cm的聚乙烯塑料袋,每袋填干料500~1000g。
进一步需要说明的是,步骤3)中,所述灭菌为在121℃下高压灭菌2~3h或常压灭菌20~24h。
进一步需要说明的是,步骤4)中,将接种好的塑料袋运至培养室在23~25℃下培养2~3个月。
需要说明的是,步骤S4具体如下:
S4.1将河沙与锯木屑按照干重7~9:3~1比例混拌均匀制成培养基质,加水使培养基质含水量在50%~65%;
S4.2摆放蜜环菌菌棒:选用长30~60cm,宽20~40cm,高20~25cm底部有小洞的塑料筐,在筐底平铺一层步骤S4.1得到的培养基质,顺着塑料筐的长度,每间隔5~7cm铺上蜜环菌菌棒,用步骤S4.1得到的培养基质将人工菌棒覆盖一半的高度,以防杂菌污染;
S4.3原球茎定植
定植时在蜜环菌菌棒两侧每隔5~7cm交错打上直径1~2cm的小孔,将步骤S3中培养的原球茎连同萌发菌树叶种定植在小孔内,定植好后,用用步骤S4.1得到的培养基质填满空隙,并覆土8~12cm,置于室内或大棚内,23~28℃下培养90~120d;
S4.4定植期管理
定植期内,定时浇水使培养基质含水量在50%~65%,保持室内或大棚内温度在23~28℃在室内外温差不大时多通风以防杂菌污染;
S4.5白头麻采挖
定植90~120d后进行白头麻采挖:掏开种植筐表层培养基质,分别取出白头麻和米麻。
实施例3
一种天麻种麻有性繁殖的方法,包括如下步骤:
S1培养基制作:将阔叶树树叶浸泡24h,沥干明水,加入麸皮、石膏粉、K2HPO4、MgSO4、白糖;混拌均匀后,加水,使培养基含水量55%~65%;将培养基放入大口组培瓶中灭菌后冷却至室温备用;其中麸皮、石膏粉、K2HPO4、MgSO4、白糖和阔叶树树叶的重量百分比以干重量计为:麸皮3%、石膏粉1%、K2HPO4 1%、MgSO4 1%、白糖1%,阔叶树树叶93%;
S2天麻种子处理:将天麻共生萌发菌栽培种撕成小碎块萌发菌菌叶,放入经消毒的拌种广口容器内,然后撇开天麻蒴果,抖出种子,均匀播撒在萌发菌菌叶上;
S3天麻种子萌发培养与管理:将步骤S2中拌好萌发菌菌叶的种子装入步骤S1中的大口组培瓶里,压实装满至瓶口,盖上盖,在23~28℃下培养30~40d;培养过程中,定期检查种子萌发情况及有无杂菌感染,将被染杂菌的组培瓶及时移除,最终培养得到原球茎;
S4原球茎的定植与管理:将步骤S3中培养得到的原球茎定植在蜜环菌菌棒上,在定植设定的时间后,进行白头麻采挖。
需要说明的是,步骤S1中,得到培养基后,将培养基装于大口组培瓶中,压实,装料高度为组培瓶高度的1/6~1/5,盖上盖;将装好料的大口组培瓶在121℃下高压灭菌1~2h或常压灭菌20~24h,然后冷却至室温,备用。
需要说明的是,步骤S2中,按5~8颗天麻蒴果拌1袋萌发菌。
需要说明的是,步骤S4中的蜜环菌菌棒通过如下方法制作:
1)在进行步骤S3的前1~2个月,以干重量计,将粗锯末、麸皮、棉籽壳拌混均匀后,加入石膏粉、KH2PO4、K2HPO4、MgSO4和白糖,再拌混均匀后,加水,使培养基含水量50%~65%;其中,按干重量计,各原料的重量百分比为:粗锯末85%,麸皮6%,棉籽壳5%,石膏粉1%、KH2PO40.5%、K2HPO40.5%、MgSO41%、白糖1%;
2)步骤1)得到的培养基建堆发酵1天;
3)建堆发酵好的产物装入塑料袋中扎紧袋口,灭菌并冷却至室温;
4)然后往塑料袋中接入蜜环菌二级菌种,将接种好的塑料袋运至培养室培养,得到长满蜜环菌菌索的蜜环菌菌棒。
进一步需要说明的是,步骤1)中,所述塑料袋采用长30~60cm,直径10~12cm的聚乙烯塑料袋,每袋填干料500~1000g。
进一步需要说明的是,步骤3)中,所述灭菌为在121℃下高压灭菌2~3h或常压灭菌20~24h。
进一步需要说明的是,步骤4)中,将接种好的塑料袋运至培养室在23~25℃下培养2~3个月。
需要说明的是,步骤S4具体如下:
S4.1将河沙与锯木屑按照干重7~9:3~1比例混拌均匀制成培养基质,加水使培养基质含水量在50%~65%;
S4.2摆放蜜环菌菌棒:选用长30~60cm,宽20~40cm,高20~25cm底部有小洞的塑料筐,在筐底平铺一层步骤S4.1得到的培养基质,顺着塑料筐的长度,每间隔5~7cm铺上蜜环菌菌棒,用步骤S4.1得到的培养基质将人工菌棒覆盖一半的高度,以防杂菌污染;
S4.3原球茎定植
定植时在蜜环菌菌棒两侧每隔5~7cm交错打上直径1~2cm的小孔,将步骤S3中培养的原球茎连同萌发菌树叶种定植在小孔内,定植好后,用用步骤S4.1得到的培养基质填满空隙,并覆土8~12cm,置于室内或大棚内,23~28℃下培养90~120d;
S4.4定植期管理
定植期内,定时浇水使培养基质含水量在50%~65%,保持室内或大棚内温度在23~28℃在室内外温差不大时多通风以防杂菌污染;
S4.5白头麻采挖
定植90~120d后进行白头麻采挖:掏开种植筐表层培养基质,分别取出白头麻和米麻。
实施例4
一种天麻种麻有性繁殖的方法,包括如下步骤:
S1培养基制作:将阔叶树树叶浸泡24h,沥干明水,加入麸皮、石膏粉、K2HPO4、MgSO4、白糖;混拌均匀后,加水,使培养基含水量55%~65%;将培养基放入大口组培瓶中灭菌后冷却至室温备用;其中麸皮、石膏粉、K2HPO4、MgSO4、白糖和阔叶树树叶的重量百分比以干重量计为:麸皮5%、石膏粉1%、K2HPO4 1%、MgSO4 1%、白糖1%,阔叶树树叶91%;
S2天麻种子处理:将天麻共生萌发菌栽培种撕成小碎块萌发菌菌叶,放入经消毒的拌种广口容器内,然后撇开天麻蒴果,抖出种子,均匀播撒在萌发菌菌叶上;
S3天麻种子萌发培养与管理:将步骤S2中拌好萌发菌菌叶的种子装入步骤S1中的大口组培瓶里,压实装满至瓶口,盖上盖,在23~28℃下培养30~40d;培养过程中,定期检查种子萌发情况及有无杂菌感染,将被染杂菌的组培瓶及时移除,最终培养得到原球茎;
S4原球茎的定植与管理:将步骤S3中培养得到的原球茎定植在蜜环菌菌棒上,在定植设定的时间后,进行白头麻采挖。
需要说明的是,步骤S1中,得到培养基后,将培养基装于大口组培瓶中,压实,装料高度为组培瓶高度的1/6~1/5,盖上盖;将装好料的大口组培瓶在121℃下高压灭菌1~2h或常压灭菌20~24h,然后冷却至室温,备用。
需要说明的是,步骤S2中,按5~8颗天麻蒴果拌1袋萌发菌。
需要说明的是,步骤S4中的蜜环菌菌棒通过如下方法制作:
1)在进行步骤S3的前1~2个月,以干重量计,将粗锯末、麸皮、棉籽壳拌混均匀后,加入石膏粉、KH2PO4、K2HPO4、MgSO4和白糖,再拌混均匀后,加水,使培养基含水量50%~65%;其中,按干重量计,各原料的重量百分比为:粗锯末80%,麸皮10%,棉籽壳6%,石膏粉1%、KH2PO40.5%、K2HPO40.5%、MgSO41%、白糖1%;
2)步骤1)得到的培养基建堆发酵1天;
3)建堆发酵好的产物装入塑料袋中扎紧袋口,灭菌并冷却至室温;
4)然后往塑料袋中接入蜜环菌二级菌种,将接种好的塑料袋运至培养室培养,得到长满蜜环菌菌索的蜜环菌菌棒。
进一步需要说明的是,步骤1)中,所述塑料袋采用长30~60cm,直径10~12cm的聚乙烯塑料袋,每袋填干料500~1000g。
进一步需要说明的是,步骤3)中,所述灭菌为在121℃下高压灭菌2~3h或常压灭菌20~24h。
进一步需要说明的是,步骤4)中,将接种好的塑料袋运至培养室在23~25℃下培养2~3个月。
需要说明的是,步骤S4具体如下:
S4.1将河沙与锯木屑按照干重7~9:3~1比例混拌均匀制成培养基质,加水使培养基质含水量在50%~65%;
S4.2摆放蜜环菌菌棒:选用长30~60cm,宽20~40cm,高20~25cm底部有小洞的塑料筐,在筐底平铺一层步骤S4.1得到的培养基质,顺着塑料筐的长度,每间隔5~7cm铺上蜜环菌菌棒,用步骤S4.1得到的培养基质将人工菌棒覆盖一半的高度,以防杂菌污染;
S4.3原球茎定植
定植时在蜜环菌菌棒两侧每隔5~7cm交错打上直径1~2cm的小孔,将步骤S3中培养的原球茎连同萌发菌树叶种定植在小孔内,定植好后,用用步骤S4.1得到的培养基质填满空隙,并覆土8~12cm,置于室内或大棚内,23~28℃下培养90~120d;
S4.4定植期管理
定植期内,定时浇水使培养基质含水量在50%~65%,保持室内或大棚内温度在23~28℃在室内外温差不大时多通风以防杂菌污染;
S4.5白头麻采挖
定植90~120d后进行白头麻采挖:掏开种植筐表层培养基质,分别取出白头麻和米麻。
实施例5
本实例在云南农业科学院药用植物研究所天麻栽培室内实施。采用实施例1的方法制作密环菌菌棒,培养时间为2016年5月23日-7月29日;采用实施例1的方法制作培养基,制作时间为2016年6月15日;天麻种子萌发培养时间为2016年6月19日-7月29日;采用实施例1的方法制作培养基质,制作时间为2016年7月28日;原球茎定植培养时间为2016年8月1日-11月13日;白头麻采挖时间为2016年11月15日。每筐铺放2个蜜环菌人工菌棒,共种植了20筐。2016年11月15日随机采挖5筐进行观察和统计产量。从蜜环菌人工菌棒制作到采挖白头麻,整个白头麻有性繁殖周期为5个多月,原球茎成活率>80%,其白头麻个头均匀、大小适中、长势较好、无病虫害,占有率>90%,每筐白头麻产量在1~1.2kg。
对于本领域的技术人员来说,可以根据以上的技术方案和构思,给出各种相应的改变和变形,而所有的这些改变和变形,都应该包括在本发明权利要求的保护范围之内。