CN107349210A - 具有α‑淀粉酶协同抑制活性的组合物 - Google Patents

具有α‑淀粉酶协同抑制活性的组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN107349210A
CN107349210A CN201710466865.0A CN201710466865A CN107349210A CN 107349210 A CN107349210 A CN 107349210A CN 201710466865 A CN201710466865 A CN 201710466865A CN 107349210 A CN107349210 A CN 107349210A
Authority
CN
China
Prior art keywords
alpha
amylase
acarbose
acid
glucosidase inhibitor
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201710466865.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107349210B (zh
Inventor
董悦生
张博崴
文琛
孙文龙
余娜
修志龙
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Dalian University of Technology
Original Assignee
Dalian University of Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dalian University of Technology filed Critical Dalian University of Technology
Priority to CN201710466865.0A priority Critical patent/CN107349210B/zh
Publication of CN107349210A publication Critical patent/CN107349210A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107349210B publication Critical patent/CN107349210B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/7036—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin having at least one amino group directly attached to the carbocyclic ring, e.g. streptomycin, gentamycin, amikacin, validamycin, fortimicins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

一种具有α‐淀粉酶协同抑制活性的组合物，包括三萜类化合物和α‐糖苷酶抑制剂。本发明的药物组合物能更有效的降低餐后血糖，更少地使用α‐糖苷酶抑制剂，因此可以提高药效，有效降低α‐糖苷酶抑制剂的毒副作用。

Description

具有α-淀粉酶协同抑制活性的组合物
发明领域
本发明涉及一种具有协同作用的α-淀粉酶抑制剂的组合物，属医药生物领域。
发明背景
糖尿病是一种内分泌代谢紊乱疾病，是由胰岛素分泌及利用障碍引起的以高血糖为特征的慢性疾病，分为以胰岛素分泌量不足的I型糖尿病和以胰岛素敏感性受损的II型糖尿病。根据国际糖尿病联盟(IDF)统计，截至2015年中国糖尿病患者人数为1亿960万，居全球首位。全球糖尿病患者人数为4.15亿，每年有500万人死于糖尿病相关疾病。根据世界卫生组织(WHO)预测，2016年全球用于糖尿病的医疗开支将会达到530亿美元，仅次于肿瘤位列第二。此外随着生活水平的提高和饮食结构的改变，因此，糖尿病药物的研发不仅具有极高的商业价值，更对人类健康有着十分巨大的意义。
糖尿病的主要特征是患者血糖(葡萄糖)值高于正常值，而血糖主要的来源是中淀粉等多糖的水解。人们已经搞清多糖在体内的水解，是在一系列α-糖苷酶参与完成的。淀粉首先由唾液α-淀粉酶和胰腺α-淀粉酶水解，产生麦芽糖和麦芽三糖等麦芽寡糖；后续的消化步骤由附着在小肠粘膜上皮细胞上的α-葡萄糖苷酶完成，即由α-葡萄糖苷酶水解麦芽糖和麦芽寡糖生成葡萄糖(Protein Cell,2011,10,827–836)。因此，尽管α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶都参与到人体的糖代谢过程中，但它们的氨基酸序列和结构有很大差异，在消化碳水化合物过程中水解的底物不同，所参与的代谢的阶段也大相径庭。
α-糖苷酶的抑制剂可抑制淀粉等多糖水解，减少了葡萄糖进入血液，进而达到降低血糖值的作用。一些天然产物被证明具有α-葡萄糖苷酶的抑制活性，如CN1559539A公开了从蚕沙或桑叶中提取的生物碱和黄酮类提取物联用对α-葡萄糖苷酶的协同抑制作用。CN102258570A公开了卷柏活性提取物和夏枯草活性提取物联用对酵母α-葡萄糖苷酶的协同抑制作用。人们也从植物中发现了一些具有α-淀粉酶抑制活性的化合物，其中三萜类化合物齐墩果酸对α-淀粉酶具有抑制作用(Food Sci.Technol.Res,2003,9,35–39)。还有研究表明，三萜类化合物如齐墩果酸、科罗索酸等，具有降低餐后血糖和改善糖尿病的作用(Phytother.Res,2011,25,1031–1040；Diabetes Res Clin Pr,2006,73,174–177)。但这些天然产物单独使用时，对α-糖苷酶的抑制活性较低，降糖效果较差。
阿卡波糖是一种活性较强的α-糖苷酶抑制剂类药物，同时具有α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性，但对α-淀粉酶的抑制活性远强于对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。该药物是除胰岛素外，在中国占有最大销售额的糖尿病药物。临床应用中，阿卡波糖也存在一定问题。其一，阿卡波糖对α-淀粉酶的抑制作用仍偏弱，导致临床剂量偏大。其二，阿卡波糖具有一定副作用，主要表现为腹胀、胀气等不适，严重时可致胃肠道疾病，影响了其在临床上的应用。如何降低阿卡波糖的临床剂量和副作用是一个急需解决的问题。
具有协同作用的联用药物一方面可增强单独用药的药效，另外一方面可减轻药物大剂量单用所导致的副作用。对于具有协同作用的联用药物，可以利用Chou等人提出的协同指数法(CI,Combination index)来评价其协同作用的强弱，该方法可在酶抑制剂、抗菌、对细胞增殖抑制、体内活性评价等诸多领域应用。根据药物间的协同、叠加和拮抗作用，药物相互作用计算出的CI值可以分为三个区间。其中协同作用CI<0.9；叠加作用0.9<CI<1.1；拮抗作用CI>1.1(Pharmacological reviews 2006,58,621-681)。
在降低阿卡波糖剂量和副作用的研究中，已有利用药物联用取得实质性结果的研究报道：本发明团队的前期研究结果表明以麦芽糖、淀粉为底物时，木蝴蝶种子提取物与阿卡波糖联用对于大鼠小肠α-糖苷酶有抑制作用，并且表现出协同作用。不同浓度的木蝴蝶种子提取物和阿卡波糖联用时，CI值为0.24～0.98。本发明团队也公开了黄酮类化合物和糖苷酶抑制剂联用对α-糖苷酶的协同抑制作用(CN104984346A)。然而，在针对阿卡波糖临床优化的药物联用研究中同时发现，联合阿卡波糖的药用组合物一般具有苛刻的选择性。比如在上述报导中，木蝴蝶种子提取物与阿卡波糖的组合物对α-糖苷酶表现出协同抑制作用，但其对于酵母源α-葡萄糖苷酶表现出拮抗作用，对于猪胰腺α-淀粉酶，无协同抑制作用(张博崴大连理工大学硕士论文2014)。黄酮类化合物和糖苷酶抑制剂联用对α-糖苷酶表现出协同抑制作用，但对α-淀粉酶却未表现协同抑制。因此，协同用药的效果难以预测，这给相关研发带来许多困难及一定的随机性。即使如此，考虑到阿卡波糖最主要的活性针对α-淀粉酶的抑制作用，开发和α-淀粉酶具有协同抑制作用的药物组合物，具有十分重要的应用价值。
发明内容
本发明目的是提供一种具有α-淀粉酶协同抑制活性的组合物，该组合物包括三萜类化合物和α-糖苷酶抑制剂。
该组合物具有很强的协同抑制α-淀粉酶作用，能更有效的抑制α-淀粉酶活性，更少地使用以阿卡波糖为代表的α-糖苷酶抑制剂类药物的用量，因此事实上提高了药效，并效降低阿卡波糖为代表的α-糖苷酶抑制剂类药物的毒副作用，并且有效地解决了药物联用易引发低血糖等问题。
附图说明
本发明附图10幅。
图1是齐墩果酸、白桦脂酸、白桦脂醇、科罗索酸、甘草次酸与甘草酸的化学结构。
图2是齐墩果酸与阿卡波糖联用对α-淀粉酶活性抑制的试验结果。
图3是不同比例的齐墩果酸与阿卡波糖联用对α-淀粉酶活性抑制试验结果。
图4是白桦脂酸与阿卡波糖联用对α-淀粉酶活性抑制的试验结果。
图5是白桦脂醇与阿卡波糖联用对α-淀粉酶活性抑制的试验结果。
图6是科罗索酸与阿卡波糖联用对α-淀粉酶活性抑制的试验结果。
图7是甘草次酸与阿卡波糖联用对α-淀粉酶活性抑制的试验结果。
图8是甘草酸与阿卡波糖联用对α-淀粉酶活性抑制的试验结果。
图9是黄芩苷元与阿卡波糖联用对α-淀粉酶活性抑制的试验结果。
图10是木蝴蝶种子提取物与阿卡波糖联用对α-淀粉酶活性抑制试验结果。
具体实施方式
本发明基于对三萜类化合物和α-糖苷酶抑制剂的协同效应的发现。首先提供一类具有α-淀粉酶协同抑制活性的组合物，包括三萜类化合物和α-糖苷酶抑制剂。
其中所述的三萜类化合物包括三萜类化合物单体及其可药用衍生物，包括但不限于三萜类化合物单体、所述单体的可药用盐、所述单体的可药用酯。
更为具体地，三萜类化合物单体的可药用盐包括所述单体的有机盐类化合物以及所述单体的盐类化合物。可举例但不限于：钠盐、钾盐、镁盐、钙盐、铁盐、铝盐、铜盐、卤化物、哌嗪盐。三萜类化合物单体的可药用酯包括但不限于所述三萜类化合物单体的C1-4醇酯。列举为：甲酯、乙酯、丙酯、异丙酯、正丁酯、异丁酯、叔丁酯。
作为优选的实施方式，上述本发明组合物中所述的三萜类化合物包括齐墩果烷型三萜类化合物和羽扇豆烷型三萜类化合物。其中的齐墩果烷型三萜类化合物可优选举例但不限于齐墩果酸、科罗索酸、甘草酸、甘草次酸，以及这些单体的可药用衍生物；羽扇豆烷型三萜类化合物可优选举例但不限于白桦脂酸、白桦脂醇，以及这些单体的可药用衍生物。
更为具体的实施方式中，上述本发明组合物中所述的三萜类化合物选自下述化合物单体或其可药用衍生物：齐墩果酸、科罗索酸、甘草酸、甘草次酸、白桦脂酸、白桦脂醇。
另一具体的实施方式中，上述本发明组合物中所述的α-糖苷酶抑制剂是阿卡波糖。
在上述本发明所述的组合中，所述的三萜类化合物与α-糖苷酶抑制剂，尤其是阿卡波糖，的使用相对剂量并未表现出对协同效应的显著影响。
作为具体的实施方式，上述本发明的组合物中。所述的三萜类化合物和α-糖苷酶抑制剂的摩尔比是0.1～2000:1。在该比值范围内，两种组分的相对使用量根据三萜类化合物的不同略有差异。
具体实施方式之一，所述的组合物中，齐墩果酸或其可药用衍生物与α-糖苷酶抑制剂的摩尔比为0.5～200:1，优选1～180：1，更优选2～160:1。
具体实施方式之一，所述的组合物中，科罗索酸或其可药用衍生物与α-糖苷酶抑制剂的摩尔比为0.1～100:1，优选0.3～80:1,更优选0.5～60:1。
具体实施方式之一，所述的组合物中，白桦脂酸或其可药用衍生物与α-糖苷酶抑制剂的摩尔比为2～2000:1，优选5～1500：1，更优选10～1200:1。
具体实施方式之一，所述的组合物中，白桦脂醇或其可药用衍生物与α-糖苷酶抑制剂的摩尔比为2～1500:1，优选3～1200:1，更优选5～1000:1.
具体实施方式之一，所述的组合物中，甘草次酸或其可药用衍生物与α-糖苷酶抑制剂的摩尔比为2～1500:1，优选10～1200:1。
具体实施方式之一，所述的组合物中，甘草酸或其可药用衍生物与α-糖苷酶抑制剂的摩尔比为2～1500:1，优选5～1200:1，更优选10～1000:1。
本发明另一方面提供上述本发明所述的组合物在制备糖尿病治疗药物中的应用。其中所述的糖尿病包括I型糖尿病和II型糖尿病。
具体实施方式中，所述的糖尿病治疗药物除了含有有效剂量的所述组合物外，还可以根据制剂需求包括药学上可接受的载体和/或赋形剂。所述在药学上可接受的载体和/或赋形剂是一种或多种常用的填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂或矫味剂的载体。填充剂可选自淀粉、蔗糖、乳糖或微晶纤维素；粘合剂选自纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂选自羧甲基淀粉钠、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素、琼脂、碳酸钙或碳酸氢钠；表面活性剂可以是十六烷醇或十二烷基硫酸钠；润滑剂选自滑石粉、硬脂酸钙、镁、微粉硅胶或聚乙二醇等。
再一方面，所述的糖尿病治疗药物可以根据给药方式的需求，制备成不同的剂型，所述剂型包括但不限于片剂、胶囊剂、滴丸剂或颗粒剂。
更为具体地描述，本发明所述的组合物的各种制药剂型可以按照药学领域的常规生产方法制备所需要的制剂。作为举例但非限定的描述为:片剂包括普通片、薄膜片、肠溶片。制剂中可以选用本发明所述的组合物干粉，加入适量稀释剂，如淀粉、糊精、甘露醇、微晶纤维素；适量的粘合剂，如水、乙醇、纤维素、淀粉、明胶；适量的崩解剂，如羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素、海藻酸钠；以及适当的润滑剂，如硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇。还可以加入甜味剂，如D-木糖、木糖醇、麦芽糖醇、甜叶菊素、天冬甜母；然后按常规湿法制粒，干燥后整粒或者干法制粒后压片，如为包薄膜衣片，用成膜材料选自纤维素类、聚乙二醇类，按常规包衣，分装入密闭瓶或者铝塑板中。胶囊剂包括普通胶囊剂、肠溶胶囊剂等。制剂中可以选用本发明所述的组合物干粉，加入适当辅料，如碳酸钙、甘露醇、氧化镁、微粉硅胶等；适当润滑剂，如滑石粉、硬脂酸镁、乙二醇酯、聚硅酮类；以及适当的粘合剂，如矿物油、食油；还可以加入适当甜味剂，如D-木糖、木糖醇、麦芽糖醇、甜叶菊素、天冬甜母。混合成干粉或者制成颗粒，填充入胶囊，分装在密闭瓶或者铝塑板中。
如无特殊说明，本发明中所使用的阿卡波糖购于拜耳医药保健有限公司，50mg/片；齐墩果酸、科罗索酸、甘草酸、甘草次酸、白桦脂酸、白桦脂醇，购于成都曼思特生物科技有限公司，纯度HPLC≥98％；α-淀粉酶购于SIGMA公司；pNPG购于上海宝曼生物有限公司。
如无特殊说明，本说明书中所使用的检测方法是：
1、参测物对α-淀粉酶抑制活性测定方法：以猪胰腺α-淀粉酶为酶源，以淀粉为底物，DNS法测定生成还原糖浓度，反应体系中酶液、三萜类化合物(溶解于乙醇)、阿卡波糖、底物、缓冲液各100μL。酶的终浓度为0.07U/mL，底物淀粉的终浓度为10mg/mL，乙醇终浓度为20％(V/V)。将酶与抑制剂在37℃温育15min，加入淀粉后启动反应，反应在37℃持续10min，加入1mL DNS溶液，沸水浴5min终止反应并显色，取200μL样品加入96孔板，测定其540nm吸光值。
2、参测物对α-葡萄糖苷酶抑制活性测定方法是：SD大鼠(200～220g)禁食16h，乙醚麻醉处死后取小肠，剖开，用预冷的PBS缓冲液冲洗，后按照1:10(W/V)加入PBS缓冲液。将小肠剪成碎段后匀浆，4℃，10000r/min，离心15min，取上清液作为试验用α-葡萄糖苷酶母液。
酶反应体系总体积为500μL，包括酶液、三萜类化合物、阿卡波糖、麦芽糖、缓冲液各100μL。酶与三萜类化合物、阿卡波糖混匀，37℃温育30min，麦芽糖溶液启动反应。37℃温育，反应30min。葡萄糖氧化酶试剂盒测定生成葡萄糖浓度，酶标仪505nm下测定样品吸光值。
3、抑制率的测算方法
按照公式(I)计算抑制剂单用或联用对酶的抑制率，
公式(I)中：
样品组(A)：加入抑制剂后的吸光值；
对照组(A)：不加抑制剂，加入对照缓冲液和酶的吸光值。
4、协同指数(CI)计算方法
按Chou等人的方法，使用CompuSyn软件对联用药物在各个抑制率点上的协同指数(CI)进行计算。
公式(II)中：
(D)1：抑制剂1单用达到某特定药效所需剂量
(D)2：抑制剂2单用达到某特定药效所需剂量
(Dx)1：抑制剂联用达到某特定药效所需抑制剂1的剂量
(Dx)2：抑制剂联用达到某特定药效所需抑制剂2的剂量
如果CI小于0.9，则存在协同作用；CI大于0.9小于1.1，则存在叠加作用；CI大于1.1，则存在拮抗作用。在协同作用的范围内，CI值越小，协同作用越强。
下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明的内容，但不应当理解为对本发明任何形式的限限定。
实施例1：齐墩果酸和阿卡波糖联用对α-淀粉酶的抑制活性测试
检测结果如图2所示，显示：阿卡波糖单独使用，在1.3、2.6、5.3、10.5μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为23％～64％，抑制率较低。单独使用齐墩果酸，在23.5、47.1、94.1、188.2μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为13％～65％，抑制率也较低。将1.3、2.6、5.3、10.5μM阿卡波糖分别和23.5、47.1、94.1、188.2μM齐墩果酸联合使用，抑制活性明显提高，抑制率提升至30％～86％。且各联用剂量点的CI值均小于0.62，评价为协同作用。
实施例2：齐墩果酸和阿卡波糖联用对α-淀粉酶的抑制活性测试
如图3所示，将23.5、47.1、94.1、188.2μM齐墩果酸分别与1.3、2.6、5.3、10.5μM阿卡波糖联用，不同剂量齐墩果酸和不同剂量的与阿卡波糖联合使用时，抑制率均高于单用使用三萜类化合物或阿卡波糖，CI值均小于0.65(表1)。表现表明齐墩果酸与阿卡波糖按不同配比联用，在各个剂量点上均能够表现出协同作用。
表1齐墩果酸与阿卡波糖不同比例联用协同抑制α-淀粉酶的CI值
实施例3：科罗索酸和阿卡波糖联用对α-淀粉酶的抑制活性测试
如图4所示，阿卡波糖单独使用在1.3、2.6、5.3、10.5μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为23％～64％，抑制率较低。单独使用科罗索酸，在7.8、15.6、31.2、62.4μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为15％～66％，抑制率也较低。将1.3、2.6、5.3、10.5μM阿卡波糖分别和7.8、15.6、31.2、62.4μM科罗索酸联合使用，抑制活性明显提高，抑制率提升至36％～89％。且各联用剂量点的CI值均小于0.55，评价为协同作用。同样，使用7.8μM科罗索酸与10.5μM阿卡波糖，62.4μM科罗索酸与1.3μM阿卡波糖联用，CI值分别为0.41和0.45，也为协同作用。
实施例4：白桦脂酸和阿卡波糖联用对α-淀粉酶的抑制活性测试
如图5所示，阿卡波糖单独使用在1.3、2.6、5.3、10.5μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为23％～64％，抑制率较低。单独使用白桦脂酸，在176.1、352.1、704.2、1408.4μM，对α-淀粉酶的抑制率为16％～61％，抑制率也较低。将1.3、2.6、5.3、10.5μM阿卡波糖分别和176.1、352.1、704.2、1408.4白桦脂酸联合使用，抑制活性明显提高，抑制率提升至35％～88％。且各联用剂量点的CI值均小于0.61，评价为协同作用。同样，使用176.1μM白桦脂酸与10.5μM阿卡波糖，1408.4μM白桦脂酸与1.3μM阿卡波糖联用，CI值分别为0.52和0.57，也为协同作用。
实施例5：白桦脂醇和阿卡波糖联用对α-淀粉酶的抑制活性测试
如图6所示，阿卡波糖单独使用在1.3、2.6、5.3、10.5μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为23％～64％，抑制率较低。单独使用白桦脂醇，在120.9、241.8、483.5、967.0μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为14％～65％，抑制率也较低。将1.3、2.6、5.3、10.5μM阿卡波糖分别和120.9、241.8、483.5、967.0μM白桦脂醇联合使用，抑制活性明显提高，抑制率提升至32％～86％。且各联用剂量点的CI值均小于0.69，评价为协同作用。同样，使用120.9μM白桦脂醇与10.5μM阿卡波糖，976.0μM白桦脂醇与1.3μM阿卡波糖联用，CI值分别为0.53和0.64，为协同作用。
实施例6：甘草次酸和阿卡波糖联用对α-淀粉酶的抑制活性测试
如图7所示，阿卡波糖单独使用在1.3、2.6、5.3、10.5μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为23％～64％，抑制率较低。单独使用甘草次酸，在168.3、336.7、673.3、1346.6μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为9％～62％，抑制率较低。将1.3、2.6、5.3、10.5μM阿卡波糖分别和168.3、336.7、673.3、1346.6μM甘草次酸联合使用，抑制活性明显提高，抑制率提升至33％～84％。且各联用剂量点的CI值均小于0.71，评价为协同作用。同样，使用168.3μM甘草次酸与10.5μM阿卡波糖，1346.6μM甘草次酸与1.3μM阿卡波糖联用，CI值分别为0.55和0.67，为协同作用。
实施例7：甘草酸和阿卡波糖联用对α-淀粉酶的抑制活性测试
如图8所示，阿卡波糖单独使用在1.3、2.6、5.3、10.5μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为23％～64％，抑制率较低。单独使用甘草酸，在136.7、273.4、546.7、1093.4μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为12％～62％，抑制率较低。将1.3、2.6、5.3、10.5μM阿卡波糖和136.7、273.4、546.7、1093.4μM甘草酸联合使用，抑制活性明显提高，抑制率提升至36％～88％。且各联用剂量点的CI值均小于0.65，评价为协同作用。同样，使用136.7μM甘草酸与10.5μM阿卡波糖，1093.4μM甘草酸与1.3μM阿卡波糖联用，CI值分别为0.44和0.60，为协同作用。
实施例8：黄芩苷元和阿卡波糖联用对α-淀粉酶的抑制活性测试
如图9所示，阿卡波糖单独使用在0.9、1.9、2.8、3.7μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为5％～36％。单独使用黄芩苷元，在46.3、92.5、139、185.0μM浓度下，对α-淀粉酶的抑制率为15％～42％。将0.9、1.9、2.8、3.7μM阿卡波糖分别和46.3、92.5、139、185.0μM黄芩苷元联合使用，抑制率为22％～52％，抑制率提升较低，各联用剂量的CI值均大于0.9，评价为叠加作用，高剂量点CI值大于1.1，评价为拮抗作用。
实施例9：木蝴蝶种子提取物与阿卡波糖联用对α-淀粉酶的抑制活性测试
称取木蝴蝶种子100g，干燥后，粉碎，用1500mL、体积浓度为90％乙醇水溶液冷浸48h，过滤后，得抽提液。40℃减压蒸馏除去溶液，得到黄色粉末状的木蝴蝶种子提取物。
如图10所示，阿卡波糖单用在2～16μg/mL范围内均表现出抑制作用。木蝴蝶种子提取物单用在2～200μg/mL范围内对α-淀粉酶活性有促进作用，表现为产物浓度测定吸光值的升高。将2、20、200μg/mL木蝴蝶种子提取物与2、8、16μg/mL阿卡波糖联用，减弱了阿卡波糖抑制作用，木蝴蝶种子提取物与阿卡波糖联用表现为对α-淀粉酶有拮抗抑制作用，没有协同抑制作用。
实施例10：三萜类化合物和阿卡波糖联用对大鼠α-葡萄糖苷酶的抑制活性测试
如表2所示，阿卡波糖单用终浓度为0.03μM时抑制率为25％，各三萜类化合物终浓度为400μM时抑制率均低于20％，表明三萜类化合物对大鼠α-葡萄糖苷酶抑制作用较弱，各三萜类成分和阿卡波糖联用后，抑制率低于三萜类成分和阿卡波糖值之和，未能显著增加阿卡波糖的抑制作用，表明三萜成分不能和阿卡波糖协同抑制α-葡萄糖苷酶。
表2三萜类化合物单用对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

Claims (7)

1.具有α-淀粉酶协同抑制活性的组合物，包括三萜类化合物和α-糖苷酶抑制剂。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的三萜类化合物包括齐墩果烷型三萜类化合物和羽扇豆烷型三萜类化合物。
3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于，所述的三萜类化合物选自下述化合物单体或其可药用衍生物：齐墩果酸、科罗索酸、甘草酸、甘草次酸、白桦脂酸、白桦脂醇。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的α-糖苷酶抑制剂是阿卡波糖。
5.根据权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述的三萜类化合物和α-糖苷酶抑制剂的摩尔比是0.1～2000:1。
6.根据权利要求5所述的组合物，其特征在于，按照摩尔比，
所述的齐墩果酸或其可药用衍生物与α-糖苷酶抑制剂的比例为0.5～200:1；
所述的科罗索酸或其可药用衍生物与α-糖苷酶抑制剂的比例为0.1～100:1；
所述的白桦脂酸或其可药用衍生物与α-糖苷酶抑制剂的比例为2～2000:1；
所述的白桦脂醇或其可药用衍生物与α-糖苷酶抑制剂的比例为2～1500:1；
所述的甘草次酸或其可药用衍生物与α-糖苷酶抑制剂的比例为2～1500:1；
所述的甘草酸或其可药用衍生物与α-糖苷酶抑制剂的比例为2～1500:1。
7.权利要求1所述的组合物在制备糖尿病治疗药物中的应用。
CN201710466865.0A 2017-06-20 2017-06-20 具有α-淀粉酶协同抑制活性的组合物 Active CN107349210B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710466865.0A CN107349210B (zh) 2017-06-20 2017-06-20 具有α-淀粉酶协同抑制活性的组合物

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710466865.0A CN107349210B (zh) 2017-06-20 2017-06-20 具有α-淀粉酶协同抑制活性的组合物

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107349210A true CN107349210A (zh) 2017-11-17
CN107349210B CN107349210B (zh) 2021-05-18

Family

ID=60272343

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710466865.0A Active CN107349210B (zh) 2017-06-20 2017-06-20 具有α-淀粉酶协同抑制活性的组合物

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107349210B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113476438A (zh) * 2021-08-20 2021-10-08 中国农业科学院郑州果树研究所 含二氢桑色素的降血糖组合物及其应用
CN115381813A (zh) * 2021-05-07 2022-11-25 海南师范大学 一类黄酮类化合物在制备糖尿病防治药物中的应用

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030165581A1 (en) * 2002-03-04 2003-09-04 Peng Wang Compositions for treating diabetes mellitus, methods of use and manufacturing process of the same
CN1853637A (zh) * 2005-03-11 2006-11-01 中国药科大学 五环三萜类化合物作为糖原磷酸化酶抑制剂的用途
WO2007029263A1 (en) * 2005-09-05 2007-03-15 Ganga Raju Gokaraju Pharmaceutically active extracts of vitex leucoxylon, a process of extracting the same and a method of treating diabetes and inflammatory diseases therewith
WO2009089545A1 (en) * 2008-01-11 2009-07-16 Reata Pharmaceuticals, Inc. Synthetic triterpenoids and methods of use in the treatment of disease
CN106265681A (zh) * 2016-07-20 2017-01-04 中国科学院华南植物园 化合物2α,3β‑二羟基‑23‑醛基‑齐墩果‑12‑烯‑28‑酸在制备糖苷酶抑制剂药物中的应用

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030165581A1 (en) * 2002-03-04 2003-09-04 Peng Wang Compositions for treating diabetes mellitus, methods of use and manufacturing process of the same
CN1853637A (zh) * 2005-03-11 2006-11-01 中国药科大学 五环三萜类化合物作为糖原磷酸化酶抑制剂的用途
WO2007029263A1 (en) * 2005-09-05 2007-03-15 Ganga Raju Gokaraju Pharmaceutically active extracts of vitex leucoxylon, a process of extracting the same and a method of treating diabetes and inflammatory diseases therewith
WO2009089545A1 (en) * 2008-01-11 2009-07-16 Reata Pharmaceuticals, Inc. Synthetic triterpenoids and methods of use in the treatment of disease
CN106265681A (zh) * 2016-07-20 2017-01-04 中国科学院华南植物园 化合物2α,3β‑二羟基‑23‑醛基‑齐墩果‑12‑烯‑28‑酸在制备糖苷酶抑制剂药物中的应用

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115381813A (zh) * 2021-05-07 2022-11-25 海南师范大学 一类黄酮类化合物在制备糖尿病防治药物中的应用
CN113476438A (zh) * 2021-08-20 2021-10-08 中国农业科学院郑州果树研究所 含二氢桑色素的降血糖组合物及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN107349210B (zh) 2021-05-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Zhang et al. α-Glucosidase inhibitory effect of resveratrol and piceatannol
Teng et al. Rb2 inhibits α-glucosidase and regulates glucose metabolism by activating AMPK pathways in HepG2 cells
Li et al. Inhibition of intestinal and renal Na+-glucose cotransporter by naringenin
CN104984346B (zh) 一种具有α-糖苷酶抑制活性的药物组合物及其应用
CN101590007A (zh) 一种盐酸二甲双胍/伏格列波糖降糖口服制剂组合物及其制备
Zhang et al. Combination of flavonoids from Oroxylum indicum seed extracts and acarbose improves the inhibition of postprandial blood glucose: In vivo and in vitro study
CN101181446B (zh) 西藏绿萝花及其提取物在制备糖尿病药物中的应用
CN102573885B (zh) 具有脂肪分解促进作用的组合物
Shimoda et al. Purple rice extract exhibits preventive activities on experimental diabetes models and human subjects
CN107349210A (zh) 具有α‑淀粉酶协同抑制活性的组合物
CN109400750B (zh) 一种具有降尿酸作用的药物组合物
Kamble et al. Identification of α-amylase inhibitory compounds from leaves of Careya arborea Roxb. and in silico docking studies
CN101991670A (zh) 一种α-葡萄糖甙酶活性抑制剂及在制备糖尿病药物中的应用
CN101612142A (zh) 肌醇衍生物或其盐在制药中的用途
CN101879221B (zh) 夜交藤的医药应用
CN105147696A (zh) 联合使用盐酸二甲双胍和gdc0941的抗乳腺癌颗粒剂及制备方法
CN104161763B (zh) 一种药物组合物作为制备治疗皮炎湿疹中的应用
CN101411781A (zh) 普洱茶在制备治疗或预防糖尿病的药中的应用
CN103239462A (zh) 栀子有效成分在α-葡萄糖苷酶抑制剂中的应用
AU2018101586A4 (en) Uses of polydatin
CN102716128A (zh) 一种治疗哮喘的药用组合物
CN102008466A (zh) 一种非布司他药物组合物及其制备方法
CN110279732A (zh) 诃子提取物在制备抑制淀粉酶和葡萄糖苷酶活性的食品、药品或保健品中的应用
CN101433534B (zh) 白藜芦醇二聚体用于制备降血糖药物的用途
CN105012294A (zh) 鞣花酸化合物在制备治疗高尿酸血症药物中的新用途

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant