CN107318649A - 一种降低核桃外植体褐变率的培养基及培养方法 - Google Patents

一种降低核桃外植体褐变率的培养基及培养方法 Download PDF

Info

Publication number
CN107318649A
CN107318649A CN201710517709.2A CN201710517709A CN107318649A CN 107318649 A CN107318649 A CN 107318649A CN 201710517709 A CN201710517709 A CN 201710517709A CN 107318649 A CN107318649 A CN 107318649A
Authority
CN
China
Prior art keywords
walnut
explant
culture
nutrient solution
culture medium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201710517709.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107318649B (zh
Inventor
赵书岗
张志华
王红霞
赵悦平
高仪
王双
牛佳敏
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hebei Agricultural University
Original Assignee
Hebei Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hebei Agricultural University filed Critical Hebei Agricultural University
Priority to CN201710517709.2A priority Critical patent/CN107318649B/zh
Publication of CN107318649A publication Critical patent/CN107318649A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107318649B publication Critical patent/CN107318649B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种降低核桃外植体褐变率的培养基，包括蛭石和培养液；并且公开了一种降低核桃外植体褐变率的培养方法，于上述培养基中进行初代培养，并转接于培养液的琼脂培养基中进行继代培养。本发明培养基及培养方法防止核桃外植体褐化的效果显著，且适用于多种核桃品种，应用范围广，利于提高组培繁殖的成活率，加速良种及良砧无性苗的繁育。

Description

一种降低核桃外植体褐变率的培养基及培养方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养领域，具体地说，涉及一种降低核桃外植体褐变率的培养基及培养方法。
背景技术
核桃(Juglans regia L.)别名胡桃、羌桃，属于胡桃科核桃属植物，是一种优良的干果树种，具有极高的经济价值与营养价值。目前，核桃的无性繁殖普遍采用嫁接的方法，其繁殖系数低、速度慢，成活率不稳定且易受穗条数量限制，导致不少地区仍采用实生苗进行繁殖培育，严重限制了核桃的商业性生产；因此，利用组培快速繁殖技术，加速良种及良砧无性苗的繁育，具有很高的商业价值。
然而，核桃细胞中含有丰富的酚类物质，在组织培养过程中，酚类物质从外植体切口向外溢出，氧化产生棕褐色的醌类物质，使外植体组织变成褐色；醌类物质与外植体组织中的蛋白质发生聚合，引起酶系统的失活，从而导致外植体组织代谢活动紊乱，生长和分化停滞，最终衰老死亡；并且醌类物质扩散到培养基中也会进一步地促进外植体衰老死亡。因此，防止核桃组培外植体褐化是保证核桃组培成功关键所在，而核桃外植体的褐化程度与核桃选取的树龄，剪取枝段的部分、月份，培养基的成分，抗氧化剂的种类都有关系，所以亟待设计一种解决核桃外植体褐化问题的培养基及培养方法。
发明内容
基于现有技术的不足之处，本发明提供一种降低核桃外植体褐变率的培养基及培养方法。
本发明为了实现上述目的所采取的技术方案是：
一种降低核桃外植体褐变率的培养基，其特征在于：包括蛭石和培养液。
进一步地，所述蛭石与所述培养液的配比为：每10g蛭石中混合添加有15-25mL培养液。
进一步地，所述培养液包括以下成分：硝酸铵1.4-1.5g/L；硝酸钙1.8-2.0g/L；硝酸锌0.015-0.02g/L；硫酸钾1.5-1.7g/L；硫酸镁0.6-0.8g/L；硫酸锰0.03-0.04g/L；硫酸铜0.002-0.003g/L；氯化钙0.15-0.2g/L；磷酸二氢钾0.2-0.5g/L；硼酸0.004-0.007g/L；钼酸钠0.003-0.004g/L；乙二胺四乙酸二钠0.05-0.06g/L；硫酸亚铁0.03-0.05g/L；盐酸硫胺素0.001-0.003g/L；烟酸0.001-0.002g/L；甘氨酸0.001-0.003g/L；肌醇0.1-0.2g/L；蔗糖25-35g/L；6-苄氨基腺嘌呤0.0005-0.0015g/L；吲哚丁酸0.00001-0.00003g/L，pH5.5-6.0。
进一步地，所述培养液成分为：硝酸铵1.416g/L，硝酸钙1.968g/L，硝酸锌0.017g/L，硫酸钾1.5592g/L，硫酸镁0.74g/L，硫酸锰0.0335g/L，硫酸铜0.0025g/L，氯化钙0.18625g/L，磷酸二氢钾0.33125g/L，硼酸0.006g/L，钼酸钠0.0039g/L，乙二胺四乙酸二钠0.05675g/L，硫酸亚铁0.04225g/L，盐酸硫胺素0.0025g/L，烟酸0.00125g/L，甘氨酸0.0025g/L，肌醇0.125g/L，蔗糖30g/L，6-苄氨基腺嘌呤0.001g/L，吲哚丁酸0.00002g/L，pH5.5-6.0。
一种降低核桃外植体褐变率的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)外植体培养前处理：采集核桃未木质化新梢，选取带有饱满芽的枝段，剪至3-4厘米长，进行清洗和消毒；
(2)初代培养：将蛭石倒入培养瓶中，加入培养液，盖上瓶盖，灭菌，即配制成初代培养基；将消毒后的外植体接于初代培养基中，培养12-14天；
(3)继代培养：将初代培养得到的外植体转接到所述培养液的琼脂培养基中进行继代培养。
进一步地，所述步骤(1)中清洗和消毒的具体方法为：使用1％洗洁精清洗浸泡5min，流水清洗20min；后用75％酒精消毒30s，流水清洗5-8次；再用0.1％升汞浸泡6-8min，无菌水清洗5-8次。
进一步地，所述培养液的琼脂培养基为每升所述培养液中添加6.5-7.5g琼脂制得。
有益效果：本发明提供了一种降低核桃外植体褐变率的培养基，培养基以蛭石为固态基质，具有良好的吸附性和透气性，可将外植体伤口处的酚类物质选择性地吸附、疏散，防止酚类物质在外植体切口积累；培养基将营养丰富、流动性强的培养液与蛭石以一定比例混合，在保证核桃外植体生长分化所需营养、水分的同时，进一步减轻外植体褐化的程度。
此外，本发明提供了一种降低核桃外植体褐变率的培养方法，通过以蛭石为固态基质的培养基进行初代培养，降低切口褐化程度，保证外植体切口受损细胞的快速愈合；初代培养后利用培养液的琼脂培养基进行继代培养，进一步为外植体提供充足的水分和营养物质，保证外植体的快速生长分化。
综上所述，本发明培养基及培养方法防止核桃外植体褐化的效果显著，且适用于多种核桃品种，应用范围广，利于提高组培繁殖的成活率，加速良种及良砧无性苗的繁育。
附图说明
图1所示为本发明实施例1实验组培养的清香核桃外植体；
图2所示为本发明实施例1对照组培养的清香核桃外植体；
图3所示为本发明实施例1实验组与对照组褐变率统计图；
图4所示为本发明实施例1继代培养中的实验组外植体；
图5所示为本发明实施例1再次继代培养中的实验组外植体；
图6所示为本发明实施例2中不同品种核桃外植体的褐变率统计，其中，
A.清香；B.赞美；C.强特勒；D.清脆；E.辽宁1号；F.辽宁7号；G.辽宁10号；H.寒丰；I.珍珠香；J.HT1-QX；K.HT2-ZM；L.HT6-L7；M.易县西陵。
具体实施方式
下面结合附图及实施例对本发明进行进一步详述：
实施例1
一种降低核桃外植体褐变率的培养基，包括蛭石和培养液，每10g蛭石中混合添加有20mL培养液；培养液包括以下成分：硝酸铵1.416g/L，硝酸钙1.968g/L，硝酸锌0.017g/L，硫酸钾1.5592g/L，硫酸镁0.74g/L，硫酸锰0.0335g/L，硫酸铜0.0025g/L，氯化钙0.18625g/L，磷酸二氢钾0.33125g/L，硼酸0.006g/L，钼酸钠0.0039g/L，乙二胺四乙酸二钠0.05675g/L，硫酸亚铁0.04225g/L，盐酸硫胺素0.0025g/L，烟酸0.00125g/L，甘氨酸0.0025g/L，肌醇0.125g/L，蔗糖30g/L，6-苄氨基腺嘌呤0.001g/L，吲哚丁酸0.00002g/L，pH6.0。
常规的核桃外植体多数采用琼脂培养基进行培养，核桃外植体切口附近的细胞受到损伤，细胞内的酚类物质会在伤口处积累，氧化成醌类物质，进而逐步扩散，抑制外植体的生长和再生芽的分化；而本发明培养基采用蛭石作为培养基的固态基质，蛭石具有良好的吸附性和透气性，与流动性强的培养液混合后，可将外植体伤口处的酚类物质选择性地吸附、疏散，防止其在伤口处积累形成恶性循环。此外，培养液中无机盐、蔗糖、激素浓度以及培养液的pH均是综合了外植体正常生长分化需要和对外植体褐化的影响得到的，在保证提供充足的营养物质的同时，进一步减轻外植体褐化的程度。
一种降低核桃外植体褐变率的培养方法，包括以下步骤：
(1)外植体培养前处理
以7年生生长结果正常的清香核桃植株为实验材料，于4月初采集核桃未木质化新梢，剪至3-4厘米长；使用1％洗洁精清洗浸泡5min，流水清洗20min；后用75％酒精消毒30s，流水清洗5-8次；再用0.1％升汞浸泡6-8min，无菌水清洗5-8次。使用洗洁精、酒精、升汞对外植体茎段进行消毒，防止外植体培养过程中菌类感染。
(2)初代培养
将蛭石倒入培养瓶中，蛭石的用量以能够稳固插入外植体茎段为宜；配制培养液，用0.5M的NaOH调节pH至6.0，向蛭石中加入固定量的培养液，保证培养基足够的营养以及合适的湿度、透气性；蛭石与培养液混合均匀后盖上瓶盖，121℃灭菌20min，即配制成初代培养基。将消毒后的外植体接于初代培养基中，并以DKW琼脂培养基作为对照组，实验组与对照组分别设置10个平行，25℃，光照循环：弱光(100μmol·m-2·s-1)16h+黑暗8h，14天后统计褐变率。
图1所示为实验组培养的清香核桃外植体，图2所示为对照组培养的清香核桃外植体，通过对比可以看出，实验组清香核桃外植体切口并未出现褐化现象，而对照组清香核桃外植体褐化严重，且向培养基中扩散。
图3所示为实验组与对照组褐变率统计图，其中，对照组平均褐变率达75％，而实验组外植体均未发生褐变，可见，本发明培养基及培养方法有效地抑制了清香核桃外植体培养过程中的褐化现象。
(3)继代培养
初代培养过程中，外植体的切口逐渐愈合，酚类物质逐渐减少，因此，将初代培养得到的外植体转接到本发明培养液的琼脂培养基中进行继代培养，25℃，光照循环：弱光(100μmol·m-2·s-1)16h+黑暗8h，避免强光造成酚类物质的大量产生，并且保证外植体培养过程中充足的水分和营养。待外植体腋芽萌发后，切取腋芽，转接到本发明培养液的琼脂培养基中进行再次继代培养。
培养液的琼脂培养基为每升所述培养液中添加7g琼脂制得。
图4所示为继代培养中的实验组外植体，在继代培养的琼脂培养基中，外植体并未出现褐化现象，可见，经过初代培养，已经有效避免了酚类物质对清香核桃外植体培养的影响。
图5所示为再次继代培养中的实验组外植体，转接的外植体全部成活，生长良好，且分化出饱满的新芽。
实施例2
以7年生核桃植株为实验材料，分别包括清香、赞美、强特勒、清脆、辽宁1号、寒丰、珍珠香、辽宁10号、辽宁7号9个品种以及HT1-QX、HT2-ZM、HT6-L7、易县西陵4个优株。
通过实施例1中所述的培养基及培养方法对以上实验材料进行外植体培养，实验结果如图6所示。本发明培养基及培养方法对于不同品种的应用效果稍有差别，其中，应用于清香、清脆、辽宁1号、辽宁10号、HT1-QX、HT2-ZM的抗褐变效果十分显著；应用于赞美、强特勒、寒丰、珍珠香、易县西陵优株的抗褐变效果良好；应用于辽宁7号的抗褐变效果一般；应用于HT6-L7的褐变率较高；综上所述，本发明应用于大多数实验品种的抗褐变效果均较为明显，实验所用的所有品种褐变率均在50％以下，由此可见，本发明培养基及培养方法可有效降低核桃外植体培养的褐变率，并且所应用的核桃品种广泛。
实施例3
一种降低核桃外植体褐变率的培养基，包括蛭石和培养液，每10g蛭石中混合添加有15mL培养液；培养液包括以下成分：硝酸铵1.4g/L；硝酸钙1.8g/L；硝酸锌0.015g/L；硫酸钾1.5g/L；硫酸镁0.6g/L；硫酸锰0.03g/L；硫酸铜0.002g/L；氯化钙0.15g/L；磷酸二氢钾0.2g/L；硼酸0.004g/L；钼酸钠0.003g/L；乙二胺四乙酸二钠0.05g/L；硫酸亚铁0.03g/L；盐酸硫胺素0.001g/L；烟酸0.001g/L；甘氨酸0.001g/L；肌醇0.1g/L；蔗糖25g/L；6-苄氨基腺嘌呤0.0005g/L；吲哚丁酸0.00001g/L，pH5.5。
一种降低核桃外植体褐变率的培养方法，包括以下步骤：
(1)外植体培养前处理：采集核桃尚未木质化新梢，选取带有饱满芽的枝段，剪至3-4厘米长，进行清洗和消毒；
(2)初代培养：将蛭石倒入培养瓶中，加入培养液，盖上瓶盖，灭菌，即配制成初代培养基；将消毒后的外植体接于初代培养基中，25℃，光照循环：弱光(100μmol·m-2·s-1)16h+黑暗8h，培养12天；
(3)继代培养：将初代培养得到的外植体转接到所述培养液的琼脂培养基中，25℃，光照循环：弱光(100μmol·m-2·s-1)16h+黑暗8h，进行继代培养，待外植体腋芽萌发后，切取腋芽，转接到本发明培养液的琼脂培养基中进行再次继代培养。培养液的琼脂培养基为每升所述培养液中添加6.5g琼脂制得。
实施例4
一种降低核桃外植体褐变率的培养基，包括蛭石和培养液，每10g蛭石中混合添加有25mL培养液；培养液包括以下成分：硝酸铵1.5g/L；硝酸钙2.0g/L；硝酸锌0.02g/L；硫酸钾1.7g/L；硫酸镁0.8g/L；硫酸锰0.04g/L；硫酸铜0.003g/L；氯化钙0.2g/L；磷酸二氢钾0.5g/L；硼酸0.007g/L；钼酸钠0.004g/L；乙二胺四乙酸二钠0.06g/L；硫酸亚铁0.05g/L；盐酸硫胺素0.003g/L；烟酸0.002g/L；甘氨酸0.003g/L；肌醇0.2g/L；蔗糖35g/L；6-苄氨基腺嘌呤0.0015g/L；吲哚丁酸0.00003g/L，pH5.8。
一种降低核桃外植体褐变率的培养方法，包括以下步骤：
(1)外植体培养前处理：采集核桃尚未木质化新梢，选取带有饱满芽的枝段，剪至3-4厘米长，进行清洗和消毒；
(2)初代培养：将蛭石倒入培养瓶中，加入培养液，盖上瓶盖，灭菌，即配制成初代培养基；将消毒后的外植体接于初代培养基中，25℃，光照循环：弱光(100μmol·m-2·s-1)16h+黑暗8h，培养13天；
(3)继代培养：将初代培养得到的外植体转接到所述培养液的琼脂培养基中，25℃，光照循环：弱光(100μmol·m-2·s-1)16h+黑暗8h，进行继代培养，待外植体腋芽萌发后，切取腋芽，转接到本发明培养液的琼脂培养基中进行再次继代培养。培养液的琼脂培养基为每升所述培养液中添加7.5g琼脂制得。
以上仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅限制于本文所示的实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干修改和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种降低核桃外植体褐变率的培养基，其特征在于：包括蛭石和培养液。
2.根据权利要求1所述的一种降低核桃外植体褐变率的培养基，其特征在于：所述蛭石与所述培养液的配比为：每10g蛭石中混合添加有15-25mL培养液。
3.根据权利要求2所述的一种降低核桃外植体褐变率的培养基，其特征在于：所述培养液包括以下成分：硝酸铵1.4-1.5g/L；硝酸钙1.8-2.0g/L；硝酸锌0.015-0.02g/L；硫酸钾1.5-1.7g/L；硫酸镁0.6-0.8g/L；硫酸锰0.03-0.04g/L；硫酸铜0.002-0.003g/L；氯化钙0.15-0.2g/L；磷酸二氢钾0.2-0.5g/L；硼酸0.004-0.007g/L；钼酸钠0.003-0.004g/L；乙二胺四乙酸二钠0.05-0.06g/L；硫酸亚铁0.03-0.05g/L；盐酸硫胺素0.001-0.003g/L；烟酸0.001-0.002g/L；甘氨酸0.001-0.003g/L；肌醇0.1-0.2g/L；蔗糖25-35g/L；6-苄氨基腺嘌呤0.0005-0.0015g/L；吲哚丁酸0.00001-0.00003g/L，pH 5.5-6.0。
4.根据权利要求3所述的一种降低核桃外植体褐变率的培养基，其特征在于：所述培养液成分为：硝酸铵1.416g/L，硝酸钙1.968g/L，硝酸锌0.017g/L，硫酸钾1.5592g/L，硫酸镁0.74g/L，硫酸锰0.0335g/L，硫酸铜0.0025g/L，氯化钙0.18625g/L，磷酸二氢钾0.33125g/L，硼酸0.006g/L，钼酸钠0.0039g/L，乙二胺四乙酸二钠0.05675g/L，硫酸亚铁0.04225g/L，盐酸硫胺素0.0025g/L，烟酸0.00125g/L，甘氨酸0.0025g/L，肌醇0.125g/L，蔗糖30g/L，6-苄氨基腺嘌呤0.001g/L，吲哚丁酸0.00002g/L，pH 5.5-6.0。
5.一种利用权利要求1-4中任意一项所述的培养基降低核桃外植体褐变率的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)外植体培养前处理：采集核桃未木质化新梢，选取带有饱满芽的枝段，剪至3-4厘米长，进行清洗和消毒；
(2)初代培养：将蛭石倒入培养瓶中，加入所述培养液，盖上瓶盖，灭菌，即配制成初代培养基；将消毒后的外植体接于初代培养基中，培养12-14天；
(3)继代培养：将初代培养得到的外植体转接到所述培养液的琼脂培养基中，进行继代培养。
6.根据权利要求5所述的一种降低核桃外植体褐变率的培养方法，其特征在于：所述步骤(1)中清洗和消毒的具体方法为：使用1％洗洁精清洗浸泡5min，流水清洗20min；后用75％酒精消毒30s，流水清洗5-8次；再用0.1％升汞浸泡6-8min，无菌水清洗5-8次。
7.根据权利要求5所述的一种降低核桃外植体褐变率的培养方法，其特征在于：所述培养液的琼脂培养基为每升所述培养液中添加6.5-7.5g琼脂制得。
CN201710517709.2A 2017-06-29 2017-06-29 一种降低核桃外植体褐变率的培养基及培养方法 Active CN107318649B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710517709.2A CN107318649B (zh) 2017-06-29 2017-06-29 一种降低核桃外植体褐变率的培养基及培养方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710517709.2A CN107318649B (zh) 2017-06-29 2017-06-29 一种降低核桃外植体褐变率的培养基及培养方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107318649A true CN107318649A (zh) 2017-11-07
CN107318649B CN107318649B (zh) 2019-06-28

Family

ID=60199298

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710517709.2A Active CN107318649B (zh) 2017-06-29 2017-06-29 一种降低核桃外植体褐变率的培养基及培养方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107318649B (zh)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1907013A (zh) * 2005-08-01 2007-02-07 中国科学院过程工程研究所 雪莲愈伤组织诱导及组培苗快繁方法
CN102217538A (zh) * 2011-05-17 2011-10-19 山西省农业科学院果树研究所 一种核桃组织培养茎段试管内处理试管外生根的方法
CN104604678A (zh) * 2015-01-09 2015-05-13 陈平 一种野生竹节参无糖开放式组织培养快速育苗方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1907013A (zh) * 2005-08-01 2007-02-07 中国科学院过程工程研究所 雪莲愈伤组织诱导及组培苗快繁方法
CN102217538A (zh) * 2011-05-17 2011-10-19 山西省农业科学院果树研究所 一种核桃组织培养茎段试管内处理试管外生根的方法
CN104604678A (zh) * 2015-01-09 2015-05-13 陈平 一种野生竹节参无糖开放式组织培养快速育苗方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
于旭彪: ""蛭石基吸附材料的制备、改性及其对水中有机污染物的分离机理"", 《中国博士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》 *
余志伟等: "《矿物材料与工程》", 31 December 2012, 中南大学出版社 *
王洪习等: "《植物组织培养技术》", 31 January 2014, 机械工业出版社 *
田爱梅等: ""实生核桃茎段的组织培养及影响因子的研究"", 《三峡大学学报（自然科学版）》 *
袁巧平等: ""核桃体细胞胚诱导的初步研究"", 《林业科技通讯》 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN107318649B (zh) 2019-06-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103172438A (zh) 无土栽培营养液
CN107827627A (zh) 一种草莓专用复合生物肥及其制备方法和应用
CN103202127A (zh) 破除南方红豆杉种子休眠的方法
CN105418278A (zh) 可提高植物高温阴雨天适应性的肥料
CN103304317B (zh) 一种腐植酸液体肥料
CN105103714A (zh) 一种人工催芽方法及白芨育苗方法
CN109329302B (zh) 促进水稻种子萌发和幼苗生长的浸种剂
CN104628429A (zh) 一种光合菌肥的制备方法
Halim et al. Sterilization process for in vitro regeneration of Stevia (Stevia rebundiana Bertoni)
CN110810250B (zh) 一种椰枣的组织培养中快速繁殖的方法
CN104429948A (zh) 蓝靛果忍冬器官型再生培养方法
CN113796185B (zh) 一种耐盐碱植物南方碱蓬的栽培养护方法及其培养液
CN104788205A (zh) 一种无土栽培营养液的组配方法
CN102219607B (zh) 一种果蔬植物营养调节剂及其使用方法
CN113207349A (zh) 一种提高盐碱地土壤种子发芽率的方法
CN107318649B (zh) 一种降低核桃外植体褐变率的培养基及培养方法
CN103044130A (zh) 农用微生物菌剂配方及制作方法
CN107173230A (zh) 一种促进贺兰山丁香种子高效萌发的方法
CN107459582A (zh) 一种具有杀菌作用的多糖硒铜的制备方法
CN107182738A (zh) 罗汉果水培方法
CN109168414B (zh) 一种促使金钱松种子萌发方法
CN103238522B (zh) 东北红豆杉开放式简化培养基
CN102860319B (zh) 食用菌培养基脱落酸增水剂及其增水方法
CN109804749A (zh) 一种翅果油树种子促进发芽生根的方法
CN104542300A (zh) 紫萁离体培养各阶段的培养基

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant