CN107308215A - 一种植物源性降糖降脂药物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种植物源性降糖降脂药物，按重量百分比包括以下组份：桑叶中提取的生物碱原料粉20‑60％、苦瓜中提取的多糖原料粉20‑60％、荷叶中提取的生物碱原料粉5‑15％、石榴皮中提取的多酚原料粉5‑25％。本发明的优点是：以桑叶、苦瓜、荷叶、石榴皮等廉价中药材为原料，以降糖、降脂、清除自由基为原理，将几种植物药材中的活性物质提取并合理配比后，使其协同发挥作用，降低糖尿病患者空腹血糖、餐后血糖以及血脂，并减小自由基对胰岛β细胞的氧化损伤，改善糖尿病的并发症状。本发明所用植物材料资源丰富、价格低廉，提取制作工艺简单，提取溶剂为乙醇和水，安全环保，适宜于工业化生产。

Description

一种植物源性降糖降脂药物
技术领域
本发明涉及一种植物源性降糖降脂药物。
背景技术
糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢性疾病，其主要原因是胰岛功能障碍导致的胰岛素分泌不足。糖尿病病人持续的高血糖，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍，引起一系列的并发症。糖尿病常常伴随着高血脂，且本身高血脂就增加患糖尿病的风险，高脂饮食常被用来构建糖尿病模型。现代医学研究显示，糖尿病的形成的内在机制与氧化应激有关，氧化应激产生过量的自由基(如活性氧、活性氮)会导致分泌胰岛素的胰岛β细胞功能损伤，从而引发糖尿病，且过量自由基还会导致其他组织器官损伤，诱发及加重糖尿病并发症(Selvaraju V,Joshi M,Suresh S,Sanchez JA,MaulikN,Maulik G.Diabetes,oxidative stress,molecular mechanism,and cardiovasculardisease--an overview.ToxicolMech Methods 2012；22(5):330-335.；黄晓菲，张琼.ROS与细胞自噬在Ⅱ型糖尿病中的生物学作用[J].中国组织化学与细胞化学杂志，2016,25(4)：366-370)。因此对于糖尿病的治疗，降血糖是首要任务，是对病症的直接治疗，清除体内过多自由基，修复受损胰岛β细胞，是对病因的干预，同时，降低血脂则对于病因的干预起协同辅助作用。
桑叶中的生物碱业被研究证实具有显著的降血糖作用，它可显著抑制小肠α-糖苷酶活性，降低麦芽糖、蔗糖转化为葡萄糖，从而降低餐后血糖水平(李有贵，储一宁，钟石，等.59份野生桑桑叶中的DNJ含量及粗提物对α-糖苷酶的抑制活性.蚕业科学,2010,36(5):0729-0737)。此外，桑叶生物碱还可以下调肠道葡萄糖吸收相关酶的表达、提高肝脏糖酵解酶的表达(You-Gui Li,Dong-FengJi,Shi Zhong,Tian-Bao Lin,Zhi-QiangLv,Gui-YanHu&Xin Wang.1-deoxynojirimycin inhibits glucose absorption and acceleratesglucose metabolism in streptozotocin-induced diabetic mice.Scientificreports,2013；3:1377)。苦瓜多糖也被报道能够显著降低糖尿病小鼠的血糖水平，提高胰岛素分泌水平(宋金平.苦瓜多糖对糖尿病小鼠的降血糖作用和胰岛素水平的影响[J].中国实用医药,2012,07(3):250-251.)荷叶在古代就被记载有减肥功效，现代研究表明荷叶中的生物碱具有降血脂作用，可以显著降低肥胖大鼠体重增长，降低血液中甘油三酯、总胆固醇含量，此外还被报道具有清除自由基、抗氧化功能(杨菲,徐新,唐良秋,等.荷叶生物碱的研究进展[J].现代医院,2012,12(6):93-94.)。石榴皮中多酚化合物已被证实具有很强的抗氧化能力，能够体外清除多种自由基，抑制脂质过氧化，在体内石榴皮多酚能够抑制多种因素导致的氧化损伤(Sun YQ,Tao X,Men XM,Li YM,Xu ZW,W T.In vitro and in vivoantioxidant activities of three major polyphenolic compounds in pomegranatepeel:ellagic acid，punicalin，and punicalagin.Journal of IntegrativeAgriculture，2017.；唐远谋,许丽佳,蒋卫东,等.石榴皮多酚对糖尿病小鼠肾脏抗氧化防御功能的影响[J].食品工业科技,2015,36(16):370-372.)。
发明内容
本发明的目的在于提供一种植物源性降糖降脂药物，通过这几种药用活性物质的协同作用，在降低糖尿病患者餐后血糖，改善糖耐量的同时，能够修复受损的胰岛β细胞，降低血脂，治疗糖尿病综合症。
为了解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：一种植物源性降糖降脂药物，按重量百分比包括以下组份：桑叶中提取的生物碱原料粉20-60％、苦瓜中提取的多糖原料粉20-60％、荷叶中提取的生物碱原料粉5-15％、石榴皮中提取的多酚原料粉5-25％。
优选的，所述苦瓜中提取多糖原料粉的提取工艺流程为：依次包括以下步骤：A1、新鲜苦瓜切片，烘箱中干燥，温度不大于50℃；将干燥的苦瓜片粉碎成粉，过30-80目筛；
A2、将苦瓜粉末按照1:30-1:50(w/v)加入水，90-100℃提取12-24小时；
A3、将得到的提取液旋转蒸发，得到浓缩提取液；
A4、将浓缩提取液加3倍体积乙醇沉淀，沉淀液8000-10000rpm离心，收集沉淀，沉淀烘干即为苦瓜多糖原料粉。
优选的，所述荷叶药用活性成分的提取工艺流程为：依次包括以下步骤：
B1、荷叶烘箱干燥或晒干，干燥温度不大于50℃；
B2、粉碎：粉碎粒度30目至80目；
B3、加入50-70％酒精，料液的重量比为1：30-50,超声波提取4-6小时，提取温度30-50℃，超声功率：1000-1300W，提取完成后过滤去除滤渣，得到提取液进行8000-10000rpm离心，得到上清液
B4、将上清液旋转蒸发去除酒精，8000-10000rpm离心，收集上清液，上清液冷冻或喷雾干燥，得到荷叶生物碱的原料粉。
优选的，所述石榴皮药用活性成分的提取工艺流程为：依次包括以下步骤：
C1、成熟石榴果实，将果皮剥下，干燥，干燥温度不大于50℃；
C2、将干燥石榴皮粉碎，过30目至80目筛；
C3、提取：石榴皮粉按1:30-1:50(w/v)加入40％-80％乙醇，超声功率：1000-1300W，60℃提取2-4小时，提取完成后细筛过滤去除滤渣，得到提取液进8000-10000rpm离心，得到上清液；
C4、将上述步骤中的上清液旋蒸去除酒精，离心收集上清液，上清液用弱极性大孔树脂吸附过液，蒸馏水冲洗去除糖类等杂质，树脂用80-95％乙醇洗脱，收集洗脱液旋转蒸发去掉酒精，浓缩至小体积后烘箱烘干，干燥固体粉碎后得到石榴皮多酚的原料粉。
优选的，桑叶生物碱原料粉的提取工艺为：
D1、采摘：采摘桑叶，每年5月至10月；
D2、干燥：将采摘的桑叶干燥，干燥温度不大于50℃；
D3、粉碎：粉碎粒度30目至80目；
D4、加入酒精，然后超声波提取：酒精浓度50-70％，料液的重量比为1：30-50，提取时间4-6小时，提取温度30-50℃，超声功率：1000-1300W，提取完成后细筛过滤去除滤渣，得到提取液进行8000-10000rpm离心，得到上清液；
D5、将D4步骤产生的上清液旋蒸去除酒精，离心收集上清液，上清液用酸型阳离子交换树脂吸附12-24小时，自来水冲洗去杂后，树脂用0.25-0.5mol/L的氨水洗脱，收集洗脱液旋蒸去除氨水，浓缩至小体积后离心得上清夜；
D6、重复步骤D5，将上清液用强酸型阳离子交换树脂吸附2-4小时，自来水冲洗去杂后，树脂用0.25-0.5mol/L的氨水洗脱，收集洗脱液旋蒸去除氨水，浓缩至小体积后冷冻或喷雾干燥，得到桑叶生物碱的原料粉。
与现有技术相比，本发明的优点是：以桑叶、苦瓜、荷叶、石榴皮等廉价中药材为原料，以降糖、降脂、清除自由基为原理，将几种植物药材中的活性物质提取并合理配比后，使其协同发挥作用，降低糖尿病患者空腹血糖、餐后血糖以及血脂，并减小自由基对胰岛β细胞的氧化损伤，改善糖尿病的并发症状。本发明所用植物材料资源丰富、价格低廉，提取制作工艺简单，提取溶剂为乙醇和水，安全环保，适宜于工业化生产。
附图说明
下面结合附图对本发明作进一步说明：
图1为采用本工艺生产的药剂对小鼠糖耐量的影响对比图；
图2为采用本工艺生产的药剂对小鼠血清总胆固醇的影响对比图；
图3为采用本工艺生产的药剂对小鼠血清甘油三酯的影响对比图；
图4为采用本工艺生产的药剂对STZ诱导损伤的胰岛β细胞保护作用对比图；
图5本工艺生产的药剂对STZ诱导损伤的胰岛β细胞保护作用显微镜图；
图6为工艺生产的药剂对超氧阴离子自由基的清除作用。
具体实施方式
一种植物源性降糖降脂药物，按重量百分比包括以下组份：桑叶中提取的生物碱原料粉40％、苦瓜中提取的多糖原料粉40％、荷叶中提取的生物碱原料粉10％、石榴皮中提取的多酚原料粉10％。
所述苦瓜中提取多糖原料粉的提取工艺流程为：依次包括以下步骤：
A1、新鲜苦瓜切片，烘箱中干燥，温度不大于50℃；将干燥的苦瓜片粉碎成粉，过30-80目筛；
A2、将苦瓜粉末按照1:30-1:50(w/v)加入水，90-100℃提取12-24小时；
A3、将得到的提取液旋转蒸发，得到浓缩提取液；
A4、将浓缩提取液加3倍体积乙醇沉淀，沉淀液8000-10000rpm离心，收集沉淀，沉淀烘干即为苦瓜多糖原料粉。
所述荷叶药用活性成分的提取工艺流程为：依次包括以下步骤：
B1、荷叶烘箱干燥或晒干，干燥温度不大于50℃；
B2、粉碎：粉碎粒度30目至80目；
B3、加入50-70％酒精，料液的重量比为1：30-50,超声波提取4-6小时，提取温度30-50℃，超声功率：1000-1300W，提取完成后过滤去除滤渣，得到提取液进行8000-10000rpm离心，得到上清液
B4、将上清液旋转蒸发去除酒精，8000-10000rpm离心，收集上清液，上清液冷冻或喷雾干燥，得到荷叶生物碱的原料粉。
所述石榴皮药用活性成分的提取工艺流程为：依次包括以下步骤：
C1、成熟石榴果实，将果皮剥下，干燥，干燥温度不大于50℃；
C2、将干燥石榴皮粉碎，过30目至80目筛；
C3、提取：石榴皮粉按1:30-1:50(w/v)加入40％-80％乙醇，超声功率：1000-1300W，60℃提取2-4小时，提取完成后细筛过滤去除滤渣，得到提取液进8000-10000rpm离心，得到上清液；
C4、将上述步骤中的上清液旋蒸去除酒精，离心收集上清液，上清液用弱极性大孔树脂吸附过液，蒸馏水冲洗去除糖类等杂质，树脂用80-95％乙醇洗脱，收集洗脱液旋转蒸发去掉酒精，浓缩至小体积后烘箱烘干，干燥固体粉碎后得到石榴皮多酚的原料粉。
桑叶生物碱原料粉的提取工艺为：
D1、采摘：采摘桑叶，每年5月至10月；
D2、干燥：将采摘的桑叶干燥，干燥温度不大于50℃；
D3、粉碎：粉碎粒度30目至80目；
D4、加入酒精，然后超声波提取：酒精浓度50-70％，料液的重量比为1：30-50，提取时间4-6小时，提取温度30-50℃，超声功率：1000-1300W，提取完成后细筛过滤去除滤渣，得到提取液进行8000-10000rpm离心，得到上清液；
D5、将D4步骤产生的上清液旋蒸去除酒精，离心收集上清液，上清液用酸型阳离子交换树脂吸附12-24小时，自来水冲洗去杂后，树脂用0.25-0.5mol/L的氨水洗脱，收集洗脱液旋蒸去除氨水，浓缩至小体积后离心得上清夜；
D6、重复步骤D5，将上清液用强酸型阳离子交换树脂吸附2-4小时，自来水冲洗去杂后，树脂用0.25-0.5mol/L的氨水洗脱，收集洗脱液旋蒸去除氨水，浓缩至小体积后冷冻或喷雾干燥，得到桑叶生物碱的原料粉。
除了上述重量百分比外，还可以采用桑叶中提取的生物碱原料粉20％、苦瓜中提取的多糖原料粉60％、荷叶中提取的生物碱原料粉5％、石榴皮中提取的多酚原料粉15％。
或者，桑叶中提取的生物碱原料粉35％、苦瓜中提取的多糖原料粉25％、荷叶中提取的生物碱原料粉15％、石榴皮中提取的多酚原料粉25％。
或者，桑叶中提取的生物碱原料粉60％、苦瓜中提取的多糖原料粉20％、荷叶中提取的生物碱原料粉10％、石榴皮中提取的多酚原料粉10％。
或者，桑叶中提取的生物碱原料粉45％、苦瓜中提取的多糖原料粉35％、荷叶中提取的生物碱原料粉15％、石榴皮中提取的多酚原料粉5％。
将上述四种原料粉按比例充分混匀后，制成不同剂型即可。
采用上述工艺生产的原料粉可以选自以下剂型：片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、口服液、混悬剂、溶液剂。以下是对采用本工艺生产的原料进行药理药效实验。
1.试验目的
观察本工艺生产的药剂对小鼠糖耐量的影响以及对STZ诱导损伤的胰岛β细胞保护作用，为本工艺生产的药剂降糖作用提供初步的实验依据。
2.受试药物
本工艺生产的药剂片原料，形状：棕黄色粉末，批号：170320，贮存方法：避光、干燥、常温(25℃以下)保存，配制方法：临用前用无菌0.9％生理盐水溶解至所需浓度。
3.试验动物
品种品系：C57/B6小鼠，级别：SPF级，性别：雌性，体重：18-20g，数量：60只，来源：中国科学院上海实验动物中心/上海斯莱克实验动物有限公司[生产许可证：SCXK(沪)2012-0005]。
4.实验条件
屏障系统实验饲养室，温度：22±1℃，湿度：50-70％，光照：150-200Lx，12小时明暗交替，噪音<50dB。饮水：自来水，置于饮水瓶中自由饮用。饲料：全价营养颗粒饲料。饲养方式：自由饮食，饲养笼中给予充足的饲料和水，每笼饲养8只小鼠。
5.试剂与仪器
5.1试剂
链脲佐菌素(STZ)，sigma公司产品；蔗糖，500g/瓶，中国医药(集团)上海化学试剂公司，配制方法：临用前用生理盐水配制成浓度为0.30g/ml的蔗糖溶液；氯化钠注射液，250ml/瓶，含量0.9％，由浙江平湖莎普爱思制药有限公司生产；血糖试剂条，由美国强生公司生产；胰岛β细胞株INS-1，中国科学院上海细胞库提供。胎牛血清(杭州民康生物技术有限公司)、RPMI 1640培养基(杭州昊天生物技术有限公司)；DMSO(中国医学科学院生物工程研究所)；台盼蓝染色液(北京索莱宝科技有限公司)；氮蓝四唑(NBT)、吩嗪硫酸甲酯(PMS)和辅酶Ⅰ(NADH)，购自美国Sigma公司；水溶性维生素E，购自日本东京化工有限公司；甘油三酯试剂盒、总胆固醇试剂盒均购自南京建成生物科技有限公司。
5.2仪器设备
OneTouchR Ultra血糖仪，强生(上海)医疗器材有限公司；SpectraMax M5多功能酶标仪，美国分子仪器公司；CountStar细胞计数仪，上海睿钰生物科技有限公司；CO2培养箱，美国Therom公司；超净工作台，新加坡Esco公司。
6.试验方法
6.1小鼠筛选
取体重为18-20g的雌性C57/B6小鼠，禁食不禁水12小时，筛选空腹血糖在4-6mmol/L的糖尿病小鼠20只。
6.2糖耐量实验
试验小鼠禁食不禁水12小时后尾静脉取血，用OneTouchR Ultra血糖仪测定小鼠的空腹血糖值。本工艺生产的药剂组口服给予药剂50mg/kg，对照组口服给予相等剂量的生理盐水溶液，30分钟过后各组口服给予0.3g/ml的蔗糖溶液0.1ml/10g，测定给糖后30min、60min、120min的血糖。
6.3降血脂试验
取体重为18-20g的雌性小鼠40只，分为4组，每组10只。4组小鼠分别饲喂正常日粮、正常日粮+1mg/mL受试药剂饮水、高脂日粮、高脂日粮+1mg/mL受试药剂饮水。试验第30天禁食不禁水12小时后屠宰取血，分离血清，试剂盒测量血清中甘油三酯和总胆固醇含量。
6.4胰岛β细胞保护作用
将胰岛β细胞INS-1以1*105个/ml的密度接种于24孔板中，每孔250μl。实验组加入不同剂量本工艺生产的药剂溶液，每孔250μl使本工艺生产的药剂终浓度分别为0.125、1.25μg/ml，空白对照组加入同体积RPMI 1640完全培养液，每组设6复孔。
另外，实验孔加入16mM STZ溶液125μL，同时加入0.125、1.25μg/mL本工艺生产的药剂溶液125μL，每个浓度设6个复孔，并设正常对照组(细胞，未加STZ)、STZ损伤模型组(细胞，加STZ，不加药物)。培养箱中培养48h后，每孔弃去培养液，加入PBS洗涤细胞，0.25％胰酶消化，收集细胞，离心弃去上清液，加入500μL PBS，吹打均匀，即为细胞悬液。20μL台盼蓝染料与20μL细胞悬液混匀，用CountStar细胞计数仪进行细胞计数。
6.5自由基清除试验
以DMSO为溶剂配制受试试剂和水溶性维生素E样品待测液，浓度梯度为80、40、20、10、5、0mg/L。以0.1M pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)为溶剂，配制60μM PMS、468μM NADH以及150μM NBT。向试管中依次加入0.5mL样品待测液、1mL PMS、1mL NADH和1mL NBT，震荡混匀后室温下反应6min，测定560nm吸光度值。以浓度为0mg/mL待测液为对照，每个样品设三个重复。按照下面公式计算超氧阴离子清除率：
超氧阴离子清除率＝(A对照－A样品)/A对照×100％
7.数据处理
用SPSS12软件进行统计分析，所有数据以均数±标准差表示，计量资料应用t检验评价试验结果。
8试验结果
8.1本工艺生产的药剂对小鼠糖耐量的影响
从图1结果可见，与对照组相比，本工艺生产的药剂量组小鼠在口服给予蔗糖后30min(P<0.01)和60min(P<0.05)后血糖显著下降，血糖曲下面积也明显降低(P<0.01)。
8.1本工艺生产的药剂对小鼠血脂的影响
由图2、图3可以看出，本工艺生产药剂对饲喂高脂日粮的小鼠具有显著的降脂作用，其血清总胆固醇和甘油三酯均有显著的降低(P<0.01)。
8.2本工艺生产的药剂对STZ损伤的胰岛β细胞的影响
由图4可知，注：与STZ模型组比较，**P<0.01，STZ处理的胰岛β细胞INS-1组活细胞数量显著减少(P<0.01)，表明STZ对胰岛β细胞有显著的损伤作用，本工艺生产的药剂处理组活细胞数量显著高于STZ损伤组(P<0.01)，表明本工艺生产药剂对STZ损伤的胰岛β细胞INS-1具有明显的保护作用，且有随着剂量增加而提高的趋势，发挥这一作用可能是因为本工艺生产的药剂具有显著的清除·OH、超氧阴离子的功能。显微观察与细胞计数测定结果基本一致，如图5所示，注：A为正常胰岛β细胞，B为STZ损伤细胞，C为本工艺生产药剂0.125μg/mL处理细胞，D为本工艺生产药剂1.25μg/mL处理细胞，正常对照组INS-1细胞贴壁生长、呈不规则多边形(A)；STZ致INS-1细胞数量减少，贴壁不牢，形状变圆，细胞萎缩脱落(B)；本工艺生产的药剂可减轻STZ对INS-1细胞的损伤，细胞数量增加，贴壁生长，细胞形态明显改善趋向正常(C)。
8.3本工艺生产的药剂对超氧阴离子的清除作用
由图6可以看出，本工艺生产药剂对超氧阴离子有很强的清除作用，明显优于常用的抗氧化剂水溶性维生素E。优越的清除自由基能力可能是本试剂能够保护胰岛β细胞的重要原因之一。
以上所述仅为本发明的具体实施例，但本发明的技术特征并不局限于此，任何本领域的技术人员在本发明的领域内，所作的变化或修饰皆涵盖在本发明的专利范围之中。

Claims (5)

1.一种植物源性降糖降脂药物，其特征在于：按重量百分比包括以下组份：桑叶中提取的生物碱原料粉20-60％、苦瓜中提取的多糖原料粉20-60％、荷叶中提取的生物碱原料粉5-15％、石榴皮中提取的多酚原料粉5-25％。
2.如权利要求1所述的一种植物源性降糖降脂药物，其特征在于：所述苦瓜中提取多糖原料粉的提取工艺流程为：
A1、新鲜苦瓜切片，烘箱中干燥，温度不大于50℃；将干燥的苦瓜片粉碎成粉，过30-80目筛；
A2、将苦瓜粉末按照1:30-1:50(w/v)加入水，90-100℃提取12-24小时；
A3、将得到的提取液旋转蒸发，得到浓缩提取液；
A4、将浓缩提取液加3倍体积乙醇沉淀，沉淀液8000-10000rpm离心，收集沉淀，沉淀烘干即为苦瓜多糖原料粉。
3.如权利要求1所述的一种植物源性降糖降脂药物，其特征在于：所述荷叶药用活性成分的提取工艺流程为：
B1、荷叶烘箱干燥或晒干，干燥温度不大于50℃；
B2、粉碎：粉碎粒度30目至80目；
B3、加入50-70％酒精，料液的重量比为1：30-50,超声波提取4-6小时，提取温度30-50℃，超声功率：1000-1300W，提取完成后过滤去除滤渣，得到提取液进行8000-10000rpm离心，得到上清液；
B4、将上清液旋转蒸发去除酒精，8000-10000rpm离心，收集上清液，上清液冷冻或喷雾干燥，得到荷叶生物碱的原料粉。
4.如权利要求1所述的一种植物源性降糖降脂药物，其特征在于：所述石榴皮药用活性成分的提取工艺流程为：
C1、成熟石榴果实，将果皮剥下，干燥，干燥温度不大于50℃；
C2、将干燥石榴皮粉碎，过30目至80目筛；
C3、提取：石榴皮粉按1:30-1:50(w/v)加入40％-80％乙醇，超声功率：1000-1300W，60℃提取2-4小时，提取完成后细筛过滤去除滤渣，得到提取液进8000-10000rpm离心，得到上清液；
C4、将上述步骤中的上清液旋蒸去除酒精，离心收集上清液，上清液用弱极性大孔树脂吸附过液，蒸馏水冲洗去除糖类等杂质，树脂用80-95％乙醇洗脱，收集洗脱液旋转蒸发去掉酒精，浓缩至小体积后烘箱烘干，干燥固体粉碎后得到石榴皮多酚的原料粉。
5.如权利要求1所述的一种植物源性降糖降脂药物，其特征在于：桑叶生物碱原料粉的提取工艺为：
D1、采摘：采摘桑叶，每年5月至10月；
D2、干燥：将采摘的桑叶干燥，干燥温度不大于50℃；
D3、粉碎：粉碎粒度30目至80目；
D4、加入酒精，然后超声波提取：酒精浓度50-70％，料液的重量比为1：30-50，提取时间4-6小时，提取温度30-50℃，超声功率：1000-1300W，提取完成后细筛过滤去除滤渣，得到提取液进行8000-10000rpm离心，得到上清液；
D5、将D4步骤产生的上清液旋蒸去除酒精，离心收集上清液，上清液用酸型阳离子交换树脂吸附12-24小时，自来水冲洗去杂后，树脂用0.25-0.5mol/L的氨水洗脱，收集洗脱液旋蒸去除氨水，浓缩至小体积后离心得上清夜；
D6、重复步骤D5，将上清液用强酸型阳离子交换树脂吸附2-4小时，自来水冲洗去杂后，树脂用0.25-0.5mol/L的氨水洗脱，收集洗脱液旋蒸去除氨水，浓缩至小体积后冷冻或喷雾干燥，得到桑叶生物碱的原料粉。
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