CN107261111A - 免疫诱导剂 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种免疫诱导剂，其中，作为有效成分，含有选自以下(a)～(c)的任一多肽类、并且具有免疫诱导活性的至少1种多肽，或者含有包含编码该多肽的多核苷酸、并能够在生物体内表达该多肽的重组载体，(a)由序列表的序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列中的连续7个以上氨基酸组成的多肽，(b)与所述(a)的多肽具有90％以上的序列同一性、并且由7个以上氨基酸组成的多肽，以及(c)包含所述(a)或(b)的多肽作为部分序列的多肽。所述免疫诱导剂作为癌的治疗剂和/或预防剂等是有用的。

Description

免疫诱导剂
本申请是申请日为2010年9月2日、申请号为201080039032.2、发明名称为“免疫诱导剂”的专利申请的分案申请。
技术领域
本发明涉及作为癌的治疗剂和/或预防剂等有用的新的免疫诱导剂。
背景技术
癌是占全部死亡原因的第一位的疾病，现在进行的治疗以手术疗法为主体组合了放射线疗法和化学疗法。尽管近年来开发了新的手术法、发现了新的抗癌剂，但是现状是除了一部分癌以外，癌的治疗成绩没有太大提高。近年来，由于分子生物学、癌免疫学的进步，鉴定出了由与癌反应的细胞毒性T细胞识别的癌抗原、编码癌抗原的基因，对抗原特异性免疫疗法的期待逐步提高。
在免疫疗法中，为了减少副作用，需要被识别为其抗原的肽或蛋白在正常细胞中几乎不存在，而在癌细胞中特异性地存在。1991年，ベルギーLudwig研究所的Boon等人通过使用了自体癌细胞株和癌反应性T细胞的cDNA表达克隆法而分离出了由CD8阳性T细胞识别的人黑素瘤抗原MAGE1(非专利文献1)。然后，报告了采用基因的表达克隆化的方法来鉴定由在癌患者的生物体内与自体癌反应而产生的抗体识别的肿瘤抗原的SEREX(重组体表达克隆抗原的血清学鉴定，serological identifications of antigens by recombinantexpression cloning)法(专利文献1、非专利文献2)，通过该方法，若干癌抗原被分离。进而以其一部分为靶标开始了癌免疫疗法的临床试验。
另一方面，与人同样地，在狗、猫中也已知乳腺肿瘤、扁平上皮癌等多种肿瘤，在狗、猫的疾病统计中也被列为上位。然而，对狗、猫的癌有效的治疗药、预防药和诊断药现在还不存在。基本上大部分的狗、猫的肿瘤是在发展而肿瘤变大之后饲养者才觉察到，大多即使入院通过外科手术切除、施用人体药(抗癌剂等)也已经错过时间而处置后不久就死亡。在这样的现状中，如果能够获得对狗、猫有效的癌的治疗药和预防药，则可期待开辟对狗的癌的用途。
报告了PDS5A(PDS5,regulator of cohesion maintenance,homolog A)是也被称为别名SSC-112的蛋白质，被鉴定为参与染色体的分配时的细胞周期控制因子，与正常组织相比，在鼻咽癌、肾癌、肝癌、乳癌细胞的1种中表达高(专利文献2、非专利文献3～5)。而且报告了，通过使用与针对PDS5A基因的反义核酸、核酶、siRNA或PDS5A蛋白质特异性结合的抗体来抑制癌细胞中的PDS5A的表达，可以抑制癌细胞的增殖，此外，通过施用PDS5A全长蛋白质或PDS5A蛋白质的部分肽，可以诱导癌细胞凋亡(专利文献3)。此外，专利文献3确认了癌细胞中PDS5A蛋白质的mRNA量的增加。然而还没有报告PDS5A蛋白质和该蛋白质的部分肽具有对癌细胞的免疫诱导活性，从而该蛋白质和该蛋白质的部分肽在癌的治疗、预防中是有用的，对PDS5A蛋白质是否具有作为能够用于癌的诊断的标志物的功能还未被确认。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:美国专利第5698396号
专利文献2:WO2006/109943
专利文献3:WO2002/081641
非专利文献
非专利文献1:Science，254：1643-1647(1991)
非专利文献2:Proc.Natl.Acad.Sci.USA，92：11810-11813(1995)
非专利文献3:Gene.17；328：187-96(2004)
非专利文献4:J.Cell.Sci.15；118(Pt 10)：2133-41(2005)
非专利文献5:J.Cancer Res.Clin.Oncol.：134(4)：453-62(2008)
发明内容
发明所要解决的课题
本发明的目的是，发现癌的治疗剂和/或预防剂、或对癌的检测有用的新的多肽，提供该多肽的免疫诱导剂或对癌的检测的应用。
用于解决课题的手段
本申请发明者们深入研究的结果是，通过使用了来源于狗乳癌的cDNA文库和荷瘤狗的血清的SEREX法，取得编码与来源于荷瘤生物体的血清中存在的抗体结合的蛋白质的cDNA，以该cDNA为基础，制作具有序列号2所示的氨基酸序列的狗PDS5,regulator ofcohesion maintenance,homolog A(以下，记为PDS5A)蛋白。此外，以取得的基因的人和小鼠同源基因为基础，制作具有序列号4或44所示的氨基酸的人PDS5A(另外，序列号4相当于序列号44的部分序列。)和具有序列号6所示的氨基酸序列的小鼠PDS5A。然后发现这些PDS5A在乳癌、脑肿瘤、食道癌、肺癌、肾癌、大肠癌、肛周腺癌、神经母细胞瘤和白血病的组织或细胞中特异性表达。此外还发现，通过对生物体施用这些PDS5A，可以在生物体内诱导针对PDS5A的免疫细胞，以及可以使表达PDS5A的生物体内的肿瘤萎缩。此外还发现，能够表达编码PDS5A的全长蛋白质或其片段的多核苷酸的重组载体对表达PDS5A的癌在生物体内诱导抗肿瘤效果。
此外还发现，PDS5A的部分肽通过抗原呈递细胞被呈递，具有使对该肽特异性的细胞毒性T细胞活化和增殖的能力(免疫诱导活性)，因此，该肽对癌的治疗和/或预防是有用的，而且，与该肽接触的抗原呈递细胞、与该抗原呈递细胞接触的T细胞对癌的治疗和/或预防是有用的，从而完成了本发明。
因此，本发明具有以下的特征。
(1).一种免疫诱导剂，其中，作为有效成分，含有选自以下(a)～(c)的任一多肽类、并且具有免疫诱导活性的至少1种多肽，或者含有包含编码该多肽的多核苷酸、并能够在生物体内表达该多肽的重组载体，
(a)由序列表的序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列中的连续7个以上氨基酸组成的多肽，
(b)与所述(a)的多肽具有90％以上的序列同一性、并且由7个以上氨基酸组成的多肽，
(c)包含所述(a)或(b)的多肽作为部分序列的多肽。
(2).根据(1)所述的免疫诱导剂，所述(b)的多肽是与所述(a)的多肽具有95％以上的序列同一性的多肽。
(3).根据(1)所述的免疫诱导剂，所述具有免疫诱导活性的多肽是：由序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列中的连续7个以上氨基酸组成的多肽、或包含该多肽作为部分序列的多肽；或者在由序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列中的连续7个以上氨基酸组成的多肽中缺失、取代或添加了1个～数个氨基酸的多肽、或包含该多肽作为部分序列的多肽。
(4).根据(3)所述的免疫诱导剂，所述具有免疫诱导活性的多肽是具有序列表的序列号2、4、6、8、10、12或44的氨基酸序列的多肽。
(5).根据(3)所述的免疫诱导剂，所述具有免疫诱导活性的多肽是：由序列表的序列号2、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列中的aa111～140、aa211～240、aa248～278、aa327～357、aa459～522、aa909～972、aa959～1022、aa994～1057或aa1018～1080的区域内的连续7个以上氨基酸组成的多肽、或包含该多肽作为部分序列的多肽；或者在由序列表的序列号2、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列中的aa111～140、aa211～240、aa248～278、aa327～357、aa459～522、aa909～972、aa959～1022、aa994～1057或aa1018～1080的区域内的连续7个以上氨基酸组成的多肽中缺失、取代或添加了1个～数个氨基酸的多肽、或包含该多肽作为部分序列的多肽。
(6).根据(5)所述的免疫诱导剂，所述具有免疫诱导活性的多肽是：由序列表的序列号27～35所示的氨基酸序列组成的多肽、或包含该多肽作为部分序列并且氨基酸残基数为10～12的多肽；或者在由序列表的序列号27～35所示的氨基酸序列组成的多肽中缺失、取代或添加了1个～数个氨基酸的多肽、或包含该多肽作为部分序列并且氨基酸残基数为10～12的多肽。
(7).根据(1)～(6)的任一项所述的免疫诱导剂，其用于预防动物的癌。
(8).根据(5)或(6)所述的免疫诱导剂，其用于治疗动物的癌。
(9).根据(7)或(8)所述的免疫诱导剂，所述癌是表达PDS5A的癌。
(10).根据(7)～(9)的任一项所述的免疫诱导剂，所述癌是乳癌、脑肿瘤、食道癌、肺癌、肾癌、大肠癌、肛周腺癌、神经母细胞瘤或白血病。
(11).根据(1)～(10)的任一项所述的免疫诱导剂，其还包含免疫增强剂。
(12).一种分离的抗原呈递细胞，其包含所述具有免疫诱导活性的多肽与MHC分子的复合体。
(13).一种分离的T细胞，其选择性结合所述具有免疫诱导活性的多肽与MHC分子的复合体。
(14).一种具有免疫诱导活性的多肽，该多肽是：由序列表的序列号27～35所示的氨基酸序列组成的多肽、或包含该多肽作为部分序列并且氨基酸残基数为10～12的多肽；或者在由序列表的序列号27～35所示的氨基酸序列组成的多肽中缺失、取代或添加了1个～数个氨基酸的多肽、或包含该多肽作为部分序列并且氨基酸残基数为10～12的多肽。
(15).一种癌的检测方法，其包括下述步骤：针对从生物体分离出的试样，测定由序列表的序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列组成的多肽、或与该多肽具有90％以上的序列同一性的多肽的表达。
(16).一种免疫诱导方法，其包括下述步骤：向个体施用选自以下(a)～(c)的多肽类、并且具有免疫诱导活性的至少1种多肽，或者施用包含编码该多肽的多核苷酸、并能够在生物体内表达该多肽的重组载体，
(a)由序列表的序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列中的连续7个以上氨基酸组成的多肽，
(b)与所述(a)的多肽具有90％以上的序列同一性、并且由7个以上氨基酸组成的多肽，
(c)包含所述(a)或(b)的多肽作为部分序列的多肽。
发明的效果
根据本发明，提供对癌的治疗和/或预防等有用的新的免疫诱导剂。如后述的实施例中具体所示，如果对生物体施用本发明中使用的多肽，则可以在生物体内诱导免疫细胞，而且可以使已经产生的癌缩小或萎缩。因此，该多肽对癌的治疗、预防是有用的。
附图说明
图1是显示鉴定出的PDS5A基因的、在狗正常组织和肿瘤组织或癌细胞株中的表达模式的图。参照编号1：狗PDS5A基因在狗的各组织和细胞株中的表达模式，参照编号2：狗GAPDH基因在狗的各组织和细胞株中的表达模式。
图2是显示鉴定出的PDS5A基因的、在人正常组织和肿瘤组织或癌细胞株中的表达模式的图。参照编号3：人PDS5A基因在人的各组织和细胞株中的表达模式，参照编号4：人GAPDH基因在人的各组织和细胞株中的表达模式。
图3是显示鉴定出的PDS5A基因的、在小鼠正常组织和肿瘤组织或癌细胞株中的表达模式的图。参照编号5：表示小鼠PDS5A基因在小鼠的各组织和细胞株中的表达模式，参照编号6：表示小鼠GAPDH基因在小鼠的各组织和细胞株中的表达模式。
图4是显示通过PDS5A施用而确认了抗肿瘤效果(治疗模型-神经母细胞瘤细胞株)的图。使用基因枪免疫仅载体、或编码PDS5A的质粒，以癌部的面积、生存小鼠的比例来评价。此外，各组使用了10只小鼠。对小鼠1周进行2次观察。数据以平均值±SD表示。参照编号7：表示载体的质粒的施用组，参照编号8：表示编码PDS5A的质粒的施用组。
图5是显示通过PDS5A施用而确认了抗肿瘤效果(预防模型-神经母细胞瘤细胞株)的图。使用基因枪免疫仅载体、或编码PDS5A的质粒，以癌部的面积、生存小鼠的比例来评价。此外，各组使用了10只小鼠。对小鼠1周进行2次观察。数据以平均值±SD表示。参照编号9：表示载体的质粒的施用组，参照编号10：表示编码PDS5A的质粒的施用组。
图6显示图4的实验中的小鼠的生存的比例。参照编号11：表示载体的质粒的施用组，参照编号12：表示编码PDS5A的质粒的施用组。
图7显示图5的实验中的小鼠的生存的比例。参照编号13：表示载体的质粒的施用组，参照编号14：表示编码PDS5A的质粒的施用组。
图8是显示通过PDS5A施用而确认了抗肿瘤效果(治疗模型-大肠癌细胞株)的图。使用基因枪免疫仅载体、或编码PDS5A的质粒，以癌部的面积、生存小鼠的比例来评价。此外，各组使用了10只小鼠。对小鼠1周进行2次观察。数据以平均值±SD表示。参照编号15：表示载体的质粒的施用组，参照编号16：表示编码PDS5A的质粒的施用组。
图9是显示通过PDS5A施用而确认了抗肿瘤效果(预防模型-大肠癌细胞株)的图。使用基因枪免疫仅载体、或编码PDS5A的质粒，以癌部的面积、生存小鼠的比例来评价。此外，各组使用了10只小鼠。对小鼠1周进行2次观察。数据以平均值±SD表示。参照编号17：表示载体的质粒的施用组，参照编号18：表示编码PDS5A的质粒的施用组。
图10显示图8的实验中的小鼠的生存的比例。参照编号19：表示载体的质粒的施用组，参照编号20：表示编码PDS5A的质粒的施用组。
图11显示图9的实验中的小鼠的生存的比例。参照编号21：表示载体的质粒的施用组，参照编号22：表示编码PDS5A的质粒的施用组。
图12是显示对具有序列表的序列号27～35所示的氨基酸序列的各多肽特异性的CD8阳性T细胞识别该多肽与HLA-A0201的复合体而产生IFN-γ的图。图12中，横轴的参照编号25～33分别表示使用序列号27～35的肽刺激T2细胞而得的HLA-A0201阳性的CD8阳性T细胞的IFN-γ产生能力。参照编号23显示未添加多肽而进行上述处理的情况的结果，参照编号24显示添加序列号36所示的本发明的范围外的多肽进行上述处理的结果。
图13是显示对具有序列表的序列号27～35所示的氨基酸序列的各肽特异性的CD8阳性T细胞的、对癌细胞的细胞毒活性的图。图13中，横轴的参照编号36～44分别显示使用序列号27～35的肽进行刺激而得的HLA-A0201阳性的CD8阳性T细胞对T98G细胞的细胞毒活性。参照编号34显示未添加多肽而进行了诱导的CD8阳性T细胞的细胞毒活性，参照编号35显示使用阴性对照的肽(序列号36)进行了诱导的CD8阳性T细胞的细胞毒活性。
具体实施方式
作为在本发明的免疫诱导剂中作为有效成分而被包含的多肽，可列举以下多肽。另外，在本发明中，“多肽”是指多个氨基酸通过肽键而形成的分子，不仅包含构成的氨基酸数多的多肽分子，而且包含氨基酸数少的低分子量的分子(寡肽)、全长蛋白质，本发明中也包含具有序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列的PDS5A的全长蛋白质。
(a)：由具有序列表的序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列的多肽中的连续7个以上氨基酸组成，并具有免疫诱导活性的多肽，
(b)：与(a)的多肽具有90％以上的序列同一性，由7个以上氨基酸组成，并具有免疫诱导活性的多肽，
(c)：包含(a)或(b)的多肽作为部分序列，并具有免疫诱导活性的多肽。
另外，在本发明中，“具有氨基酸序列”是指氨基酸残基以这样的顺序排列。因此，例如，“具有序列号2所示的氨基酸序列的多肽”意味着，具有序列号2所示的Met Asp PheThr……(中间省略)……Asp Leu Gln Arg的氨基酸序列的、大小为1337氨基酸残基的多肽。此外，例如，有时将“具有序列号2所示的氨基酸序列的多肽”简写为“序列号2的多肽”。关于“具有碱基序列”这样的表达也是同样的。该情况下，“具有”这样的用语可以以“由……组成”这样的表达替换。
这里，“免疫诱导活性”意味着在生物体内诱导能分泌干扰素等细胞因子的免疫细胞的能力。
上述多肽是否具有免疫诱导活性可以使用例如公知的酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法等来确认。具体而言，例如后述的实施例中记载的那样，从施用了要评价免疫诱导活性的多肽的生物体获得外周血单核细胞等细胞，将该细胞与该多肽共培养，使用特异性抗体测定由该细胞产生的细胞因子产生量，从而可以测定该细胞中的免疫细胞数，由此可以评价免疫诱导活性。
此外，如后述的实施例中所记载的那样，如果对荷瘤生物体施用上述(a)～(c)的重组多肽，则也可以通过其免疫诱导活性使肿瘤萎缩。因此，上述免疫诱导活性也可以作为抑制癌细胞增殖或使癌组织(肿瘤)缩小或消失的能力(以下，称为“抗肿瘤活性”)来评价。多肽的抗肿瘤活性例如后述的实施例中具体记载的那样，可以通过实际上对荷瘤生物体施用该多肽来研究肿瘤是否缩小等从而确认。
或者，通过研究用该多肽刺激的T细胞(即，与呈递该多肽的抗原呈递细胞接触的T细胞)是否在生物体外对肿瘤细胞显示细胞毒活性，也可以评价多肽的抗肿瘤活性。T细胞与抗原呈递细胞的接触如后述那样，可以通过将两者在液体培养基中共培养来进行。细胞毒活性的测定可以通过例如Int.J.Cancer,58:p317,1994中记载的被称为51Cr释放测定法的公知方法来进行。在将上述多肽用于癌的治疗和/或预防用途的情况下，没有特别的限制，但优选以抗肿瘤活性作为指标来评价免疫诱导活性。
本发明公开的序列表的序列号2、4、6、8、10、12或44中分别显示的氨基酸序列是通过使用了来源于狗精巢的cDNA文库和荷瘤狗的血清的SEREX法，作为来源于荷瘤狗的血清中特异性存在的抗体结合的多肽和该多肽的人(序列号4和44)、小鼠(序列号6)、牛(序列号8)、马(序列号10)和鸡(序列号12)同源因子而被分离出的PDS5A蛋白质的氨基酸序列(参照实施例1)。另外，对于作为狗PDS5A的人同源因子的人PDS5A，序列同一性为碱基序列94％、氨基酸序列99％，对于作为小鼠同源因子的小鼠PDS5A，序列同一性为碱基序列91％、氨基酸序列99％，对于作为牛同源因子的牛PDS5A，序列同一性为碱基序列95％、氨基酸序列99％，对于作为马同源因子的马PDS5A，序列同一性为碱基序列96％、氨基酸序列99％，对于作为鸡同源因子的鸡PDS5A，序列同一性为碱基序列83％、氨基酸序列98％。
上述(a)的多肽为由具有序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列的多肽中的连续7个以上、优选为连续8、9或10个以上氨基酸组成的多肽，其具有免疫诱导活性。特别优选该多肽具有序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列。另外，如本领域中公知的那样，只要是约7个氨基酸残基以上的多肽就能够发挥抗原性和免疫原性。因此，只要是序列号2、4、6、8、10、12或44的氨基酸序列中的连续7个氨基酸残基以上的多肽，就能够具有免疫诱导活性，因此可以用于本发明的免疫诱导剂的调制。
此外，作为通过施用癌抗原多肽进行的免疫诱导的原理，已知多肽被抗原呈递细胞摄取，然后在该细胞内受到通过被肽酶分解而变成更小的片段，被呈递至该细胞的表面上，细胞毒性T细胞等识别该片段，选择性杀死呈递该抗原的细胞。被呈递至抗原呈递细胞的表面上的多肽的尺寸比较小，以氨基酸数计为7～30左右。因此，从呈递至抗原呈递细胞上这样的观点出发，作为上述(a)的多肽，优选形态之一为序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列中的连续7～30左右，更优选只要是由8～30或9～30左右的氨基酸组成的多肽即是充分的。这些比较小的尺寸的多肽也有时不摄取至抗原呈递细胞内，而直接被呈递至抗原呈递细胞上的细胞表面。
此外，被摄取到抗原呈递细胞的多肽通过该细胞内的肽酶而在任意位置被切割，产生各种多肽片段，这些多肽片段被呈递至抗原呈递细胞表面上，因此如果施用序列号2、4、6、8、10、12或44的全长区域那样的大尺寸的多肽，则由于在抗原呈递细胞内的分解而在介由抗原呈递细胞的免疫诱导中必然产生有效的多肽片段。因此，对于介由抗原呈递细胞的免疫诱导而言，可以优选使用尺寸大的多肽，氨基酸数可以为30以上，更优选为100以上，进一步优选为200以上，进一步优选为250以上，进一步优选为序列号2、4、6、8、10、12或44的全长区域的多肽。
此外，本发明的多肽可以通过能够检索由具有HLA的各型结合基序的8～12个、优选为9～10个氨基酸组成的表位肽的比对媒介例如Bioinformatics&molecular AnalysisSelection(BIMAS)的HLA Peptide Binding Predictions(http://bimas.dcrt.nih.gov/molbio/hla_bind/index.html)来比对，从而筛选能够成为表位肽的肽。具体而言，优选由序列号2、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列中的氨基酸残基编号aa111～140、aa211～240、aa248～278、aa327～357、aa459～522、aa909～972、aa959～1022、aa994～1057或aa1018～1080的区域内的连续7个以上氨基酸组成的多肽，此外更优选在序列号4或44的多肽中序列号27～35所示的多肽，或者包含由序列号27～35所示的氨基酸序列组成的多肽作为部分序列、且氨基酸残基数为10～12的多肽。
上述(b)的多肽是在上述(a)的多肽中取代、缺失和/或插入了少数(优选为1个或数个)氨基酸残基，与原序列具有90％以上、优选为95％以上、更优选为98％以上、进一步优选为99％以上或99.5％以上的序列同一性，并且具有免疫诱导活性的多肽。一般而言，本领域技术人员公知，在蛋白质抗原中，有时即使在该蛋白质的氨基酸序列中取代、缺失或插入了少数氨基酸残基，也与原蛋白质具有几乎相同的抗原性。因此，上述(b)的多肽也能够发挥免疫诱导活性，因此可以用于本发明的免疫诱导剂的调制。此外，上述(b)的多肽也优选为在序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列中取代、缺失和/或插入了1个～数个氨基酸残基的多肽。本说明书中的“数个”表示2～10的整数，优选为2～6的整数，更优选为2～4的整数。
这里，氨基酸序列或碱基序列的“序列同一性”是指，以要比较的2个氨基酸序列(或碱基序列)的氨基酸残基(或碱基)尽量多地一致的方式使两氨基酸序列(或碱基序列)排列，将一致的氨基酸残基数(或一致的碱基数)除以全部氨基酸残基数(或全部碱基数)而得的结果以百比率表示的数值。在上述排列时，根据需要，在进行比较的2个序列的一者或双者中插入适当缺口。这样的序列的排列化可以使用例如BLAST、FASTA、CLUSTALW等公知的程序来进行。在插入了缺口的情况下，上述全部氨基酸残基数为将1个缺口算作1个氨基酸残基后的残基数。这样算出的全部氨基酸残基数在进行比较的2个序列之间不同的情况下，序列同一性(％)是将一致的氨基酸残基数除以较长序列的全氨基酸残基数而算出的。
另外已知，构成天然的蛋白质的20种氨基酸可以如下分组成具有类似性质的氨基酸：具有低极性侧链的中性氨基酸(Gly、Ile、Val、Leu、Ala、Met、Pro)、具有亲水性侧链的中性氨基酸(Asn、Gln、Thr、Ser、Tyr、Cys)、酸性氨基酸(Asp、Glu)、碱性氨基酸(Arg、Lys、His)、芳香族氨基酸(Phe、Tyr、Trp)，如果在它们之间进行取代，则一般多肽的性质无变化。因此，在取代本发明的上述(a)的多肽中的氨基酸残基的情况下，通过在这些各组之间取代，可以维持免疫诱导活性的可能性较高，因此是优选的。
另外，作为成为上述的表位肽的上述(b)的多肽，优选为在由序列号2、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列中的aa111～140、aa211～240、aa248～278、aa327～357、aa459～522、aa909～972、aa959～1022、aa994～1057或aa1018～1080的区域内的连续7个以上氨基酸组成的多肽中缺失、取代或添加了1个～数个氨基酸、并且具有免疫诱导活性的多肽，或者包含该多肽作为部分序列、并且具有免疫诱导活性的多肽，更优选为在序列号4或44的多肽中或者由序列号27～35所示的氨基酸序列组成的多肽中缺失、取代或添加了1个～数个氨基酸、并且具有免疫诱导活性的多肽，或者包含该多肽作为部分序列、并且氨基酸残基数为10～12的多肽。
上述(c)的多肽是包含上述(a)或(b)的多肽作为部分序列，并具有免疫诱导活性的多肽。即，是在(a)或(b)的多肽的一端或两端添加了其它氨基酸或多肽，并具有免疫诱导活性的多肽。这样的多肽也可以用于本发明的免疫诱导剂的调制。
另外，作为成为上述的表位肽的上述(c)的多肽，优选为包含由序列号2、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列中的aa111～140、aa211～240、aa248～278、aa327～357、aa459～522、aa909～972、aa959～1022、aa994～1057或aa1018～1080的区域内的连续7个以上氨基酸组成的多肽作为部分序列的多肽，更优选为在序列号4或44的多肽中由序列号27～35所示的氨基酸序列组成的多肽中缺失、取代或添加了1个～数个氨基酸的多肽，或者包含该多肽作为部分序列、并包含氨基酸残基数为10～12的多肽作为部分序列的多肽。
上述的多肽可以按照例如Fmoc法(芴基甲氧羰基法)、tBoc法(叔丁氧羰基法)等化学合成法来合成。此外，也可以利用各种市售的肽合成仪通过常规方法来合成。此外，可以通过使用公知的基因工程方法，制备编码上述多肽的多核苷酸，将该多核苷酸整合到表达载体中并导入宿主细胞中，通过在该宿主细胞中生产多肽，从而获得作为目标的多肽。
编码上述多肽的多核苷酸可以通过公知的基因工程方法和/或使用市售的核酸合成仪的常规方法来容易地制备。例如，通过使用狗染色体DNA或cDNA文库作为模板，使用以可以扩增序列号1中记载的碱基序列的方式设计的一对引物进行PCR，从而可以制备具有序列号1的碱基序列的DNA。如果是具有序列号3或43的碱基序列的DNA，可以通过使用人染色体DNA或cDNA文库作为上述模板来同样地制备。PCR的反应条件可以适当设定，可以列举例如，将由在94℃经30秒(变性)、在55℃经30秒～1分钟(退火)、在72℃经2分钟(伸长)构成的反应历程作为1循环，进行例如30循环后，在72℃反应7分钟的条件等，但不限于此。此外，基于本说明书中的序列表的序列号1、3、5、7、9、11或43所示的碱基序列和氨基酸序列的信息，来制备适当的探针、引物，使用它们来筛选狗、人等的cDNA文库，从而可以分离所需的DNA。cDNA文库优选由表达序列号2、4、6、8、10、12或44的蛋白质的细胞、器官或组织来制作。上述的探针或引物的制备、cDNA文库的构建、cDNA文库的筛选以及目标基因的克隆化等操作对本领域技术人员而言是已知的，例如，可以按照例如モレキュラークロニング(分子克隆实验指南)第2版，カレント·プロトコールズ·イン·モレキュラバイオロジー等中记载的方法来进行。可以由这样获得的DNA来获得编码上述(a)的多肽的DNA。此外，编码各氨基酸的密码子是公知的，因此可以容易地特定编码特定氨基酸序列的多核苷酸的碱基序列。因此，也可以容易地特定编码上述(b)或(c)的多肽的多核苷酸的碱基序列，因此这样的多核苷酸也可以使用市售的核酸合成仪通过常规方法来容易地合成。
作为上述宿主细胞，只要是能够表达上述多肽的细胞即可，作为原核细胞的例子，可列举大肠杆菌等，作为真核细胞的例子，可列举猴肾细胞COS1、中国仓鼠卵巢细胞CHO等哺乳动物培养细胞、芽殖酵母、裂殖酵母、蚕细胞、爪蟾卵细胞等，但不限于此。
在使用原核细胞作为宿主细胞的情况下，作为表达载体，使用具有能够在原核细胞中复制的复制起点、启动子、核糖体结合部位、DNA克隆化部位、终止子等的表达载体。作为大肠杆菌用表达载体，可以例示pUC系、pBluescriptII、pET表达系统、pGEX表达系统等。如果将编码上述多肽的DNA整合到这样的表达载体中，用该载体转化原核宿主细胞，然后培养所得的转化体，则可以使由上述DNA所编码的多肽在原核宿主细胞中表达。此时，也可以使该多肽以与其它蛋白质的融合蛋白质的形式表达。
在使用真核细胞作为宿主细胞的情况下，作为表达载体，使用具有启动子、剪接区域、多(A)添加部位等的真核细胞用表达载体。作为那样的表达载体，可以例示pKA1、pCDM8、pSVK3、pMSG、pSVL、pBK-CMV、pBK-RSV、EBV载体、pRS、pcDNA3、pMSG、pYES2等。与上述同样地，如果将编码上述多肽的DNA整合到这样的表达载体中，用该载体转化真核宿主细胞，然后培养所得的转化体，则可以使由上述DNA所编码的多肽在真核宿主细胞中表达。在使用pIND/V5-His、pFLAG-CMV-2、pEGFP-N1、pEGFP-C1等作为表达载体的情况下，可以作为添加了His标签、FLAG标签、myc标签、HA标签、GFP等各种标签的融合蛋白质来表达上述多肽。
表达载体向宿主细胞的导入可以使用电穿孔法、磷酸钙法、脂质体法、DEAE葡聚糖法等公知的方法。
为了从宿主细胞中分离纯化目的多肽，可以组合公知的分离操作来进行。可列举例如通过尿素等变性剂和/或表面活性剂进行的处理、超声波处理、酶消化、盐析和/或溶剂分级沉淀法、透析、离心分离、超滤、凝胶过滤、SDS-PAGE、等电点电泳、离子交换色谱法、疏水色谱法、亲和色谱法、反相色谱法等，但不限于此。
通过以上的方法而获得的多肽中如上所述也包含处于与其它任意的蛋白质的融合蛋白质的形态的多肽。例如，可以例示与谷胱甘肽-S-转移酶(GST)和/或His标签的融合蛋白质等。这样的融合蛋白质形态的多肽也作为上述(c)的多肽而包含在本发明的范围内。此外，有时在转化细胞中被表达的多肽在被翻译之后在细胞内受到各种修饰。这样的经翻译后修饰的多肽只要具有免疫诱导活性也包含在本发明的范围内。作为这样的翻译后修饰，可以例示N末端蛋氨酸的脱离、N末端乙酰化、附加糖链、通过细胞内蛋白酶进行的限制性分解、肉豆蔻酰化、异戊二烯基化、磷酸化等。
如后述的实施例中具体记载的那样，如果对荷瘤生物体施用包含上述具有免疫诱导活性的多肽或编码该多肽的基因的表达载体，则可以使已经产生的肿瘤萎缩。此外，通过对癌发作前的生物体施用上述的具有免疫诱导活性的多肽或编码多肽的基因，可以预防肿瘤的发生。因此，本发明的免疫诱导剂可以作为癌的治疗剂和/或预防剂使用。此外，上述的具有免疫诱导活性的多肽可以用于通过免疫诱导进行的癌的治疗和/或预防方法。
这里，“肿瘤”和“癌”这样的用语意味着恶性赘生物，可互换使用。
在该情况下，作为对象的癌只要是表达PDS5A的癌即可，则没有特别的限制，但优选为乳癌、脑肿瘤、食道癌、肺癌、肾癌、大肠癌、肛周腺癌、神经母细胞瘤或白血病。
此外，作为对象的动物优选为哺乳动物，更优选为包含灵长类、宠物、家畜类、竞技用动物等的哺乳动物，特别优选为人、狗或猫。
本发明的免疫诱导剂对生物体的施用途径可以为经口施用也可以为非经口施用，但优选为肌肉内施用、皮下施用、静脉内施用、动脉内施用等非经口施用。在为了癌的治疗而使用该免疫诱导剂的情况下，为了提高抗癌作用，如后述的实施例中记载的那样，也可以施用于作为治疗对象的肿瘤的附近的所属淋巴结。施用量只要是对免疫诱导有效的量即可，例如如果是用于癌的治疗和/或预防，则只要是对癌的治疗和/或预防有效的量即可。对癌的治疗和/或预防有效的量根据肿瘤的大小和/或症状等来适当选择，通常作为相对于对象动物每1天的有效量为0.0001～1000μg，优选为0.001～1000μg，可以1次施用或分成数次施用。优选分成数次，每隔数日～数月地施用。如后述的实施例中具体所示那样，本发明的免疫诱导剂可以使已经形成的肿瘤萎缩。因此，对发生初期的少数癌细胞也能够发挥抗癌作用，因而如果在癌的发作前、癌的治疗后使用，则可以防止癌的发作、复发。即，本发明的免疫诱导剂对癌的治疗和预防两者均有用。
本发明的免疫诱导剂可以仅由多肽构成，也可以适当混合适合各施用方式的药理学上容许的载体、稀释剂、赋形剂等添加剂来制剂。制剂方法和能够使用的添加剂在药物制剂的领域是公知的，可以使用任一方法和添加剂。作为添加剂的具体例，可列举生理缓冲液那样的稀释剂；砂糖、乳糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨糖醇、甘氨酸等那样的赋形剂；糖浆、明胶、阿拉伯树胶、山梨糖醇、聚氯乙烯、黄蓍胶等那样的粘合剂；硬脂酸镁、聚乙二醇、滑石、二氧化硅等润滑剂等，但不限于这些。作为制剂形态，可以列举片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、糖浆剂等经口施用剂、吸入剂、注射剂、栓剂、可溶液体制剂等非经口施用剂等。这些制剂可以通过一般已知的制法来制作。
本发明的免疫诱导剂可以与能够强化生物体内的免疫应答的免疫增强剂组合使用。免疫增强剂可以包含在本发明的免疫诱导剂中，也可以作为另一个组合物而与本发明的免疫诱导剂合并对患者施用。
作为上述免疫增强剂，可以列举例如佐剂。佐剂通过提供抗原的储存所(细胞外或巨噬细胞内)，活化巨噬细胞，并且刺激特定组的淋巴细胞，从而能够强化免疫应答，因此可以提高抗癌作用。因此，特别是在将本发明的免疫诱导剂用于癌的治疗和/或预防的情况下，免疫诱导剂优选除了作为有效成分的上述多肽以外还包含佐剂。多种佐剂在本领域中是公知的，可以使用任一佐剂。作为佐剂的具体例，可列举MPL(SmithKline Beecham)、沙门氏菌属的明尼苏达沙门氏菌(Salmonella minnesota)Re 595脂多糖类的纯化和酸水解后得到的同类物；从QS21(SmithKline Beecham)、皂树(Quillja saponaria)提取物中纯化的纯QA-21皂苷；PCT申请WO96/33739(SmithKline Beecham)中记载的DQS21；QS-7、QS-17、QS-18和QS-L1(So及其其他10人，“molecules and cells”，1997年，第7卷，第178-186页)；弗氏不完全佐剂；弗氏完全佐剂；维生素E；Montanide；明矾；CpG寡核苷酸(例如参照Kreig以及其他7人，“Nature”，第374卷，第546-549页)；由多聚IC及其衍生物(多聚ICLC等)以及鲨烯和/或生育酚那样的生物降解性油调制的各种油包水乳液。其中，优选弗氏不完全佐剂、Montanide、多聚IC及其衍生物以及CpG寡核苷酸。上述佐剂与多肽的混合比典型地为约1:10～10:1，优选为约1:5～5:1，更优选为约1:1。然而，佐剂不限于上述例示，本领域公知的除了上述佐剂以外的佐剂也能够在施用本发明的免疫诱导剂时使用(例如，参照Goding著,“Monoclonal Antibodies：Principles and Practice”，第2版，1986年)。多肽和佐剂的混合物或乳液的调制方法对于预防接种领域技术人员而言是公知的。
此外，作为上述免疫增强剂，除了上述佐剂以外，也可以使用刺激对象的免疫应答的因子。例如，可以将具有刺激淋巴细胞、抗原呈递细胞的特性的各种细胞因子作为免疫增强剂与本发明的免疫诱导剂组合使用。这样的能够增强免疫应答的多数细胞因子是本领域技术人员公知的，作为其例子，可列举显示强化疫苗的防御作用的白介素-12(IL-12)、GM-CSF、IL-18、干扰素α、干扰素β、干扰素ω、干扰素γ和Flt3配体，但不限于这些。这样的因子也可以作为上述免疫增强剂使用，可以包含在本发明的免疫诱导剂中或作为另一个组合物与本发明的免疫诱导剂合并对患者施用。
此外，通过使上述多肽与抗原呈递细胞在体外接触，可以将该多肽呈递至抗原呈递细胞。即，上述(a)～(c)的多肽可以作为抗原呈递细胞的处理剂来利用。这里，作为抗原呈递细胞，可以优选使用带有MHC类I分子的树突细胞或B细胞。已鉴定出各种MHC I类分子，是公知的。人中的MHC分子称为HLA。作为HLA I类分子，可以列举HLA-A、HLA-B、HLA-C，更具体而言，可以列举HLA-A1、HLA-A0201、HLA-A0204、HLA-A0205、HLA-A0206、HLA-A0207、HLA-A11、HLA-A24、HLA-A31、HLA-A6801、HLA-B7、HLA-B8、HLA-B2705、HLA-B37、HLA-Cw0401、HLA-Cw0602等。
带有MHC I类分子的树突细胞或B细胞可以通过公知的方法从外周血调制。例如，可以从骨髓、脐带血或患者外周血，使用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和IL-3(或IL-4)来诱导树突细胞，在其培养体系中加入肿瘤相关肽，可以诱导肿瘤特异性树突细胞。
通过施用有效量的该树突细胞，可以诱导癌的治疗所期望的应答。所使用的细胞可以使用由健常人提供的骨髓和/或脐带血、患者本人的骨髓和/或外周血等，但在使用患者本来的自体细胞的情况下，还可以期待安全性高、避免严重的副作用。外周血或骨髓可以为新鲜试样、低温保存试样和冷冻保存试样的任一种。关于外周血，可以培养全血，也可以仅分离出白血球成分来培养，但后者在效率方面是优选的。此外在白血球成分中也可以分离出单核细胞。此外，在以骨髓、脐带血为起源的情况下，可以培养构成骨髓的整个细胞，也可以从其中分离出单核细胞来培养。外周血和/或其白血球成分、骨髓细胞中包含作为树突细胞的起源的单核细胞、造血干细胞或未成熟树突细胞、CD4阳性细胞等。所使用的细胞因子只要是确认了安全性和生理活性的特性细胞因子即可，可以为天然型或基因重组型等，与其生产方法无关，优选以必要最低量使用确保了医疗用品质的标品。添加的细胞因子的浓度只要是可诱导树突细胞的浓度即可，没有特别限定，通常以细胞因子的合计浓度计优选为10～1000ng/mL左右，更优选为20～500ng/mL左右。培养可以使用白血球的培养中通常使用的公知的培养基来进行。培养温度只要能够实现白血球的增殖即可，没有特别的限制，但最优选为人的体温37℃左右。此外，培养中的气体环境只要能够实现白血球的增殖即可，没有特别的限制，优选通气5％CO2。此外，培养时间只要是诱导必要数目的细胞的时间即可，没有特别的限制，通常进行3天～2周时间。供于细胞的分离、培养的设备可以使用适当的设备，但优选确认了医疗用安全性并且操作稳定且简便的设备。特别是关于细胞培养装置，不限于培养皿、烧瓶、瓶等一般容器，也可以使用叠层型容器、多级式容器、滚瓶、转瓶、袋式培养器、中空丝柱等。
使上述多肽与抗原呈递细胞在体外接触的方法本身可以通过公知的方法来进行。例如，可以通过将抗原呈递细胞在包含上述多肽的培养液中培养来进行。对培养基中的肽浓度没有特别的限制，但通常为1～100μg/ml左右，优选为5～20μg/ml左右。对培养时的细胞密度没有特别的限制，通常为103～107个细胞/ml左右，优选为5×104～5×106个细胞/ml左右。培养优选按照常规方法，在37℃、5％CO2气氛中进行。另外，抗原呈递细胞可以呈递至表面上的肽的长度通常最大为30氨基酸残基左右。因此，虽然没有特别的限制，但使抗原呈递细胞与多肽在体外接触的情况下，可以将该多肽调制成约30氨基酸残基以下的长度。
通过在上述的多肽共存下培养抗原呈递细胞，肽被抗原呈递细胞的MHC分子摄取，呈递至抗原呈递细胞的表面。因此，可以使用上述多肽来调制包含该多肽与MHC分子的复合体的分离的抗原呈递细胞。这样的抗原呈递细胞可以在生物体内或体外对T细胞呈递该多肽，诱导对该多肽特异性细胞毒性T细胞，使其增殖。
通过使以上述方式调制的包含上述多肽与MHC分子的复合体的抗原呈递细胞与T细胞在体外接触，可以诱导对该多肽特异性的细胞毒性T细胞，使其增殖。这可以通过将上述抗原呈递细胞与T细胞在液体培养基中共培养来进行。例如，可以如下进行：将抗原呈递细胞悬浮在液体培养基中，放入微孔板的孔等容器中，在其中添加T细胞进行培养。对共培养时的抗原呈递细胞与T细胞的混合比率没有特别的限制，但通常以细胞数的比率计为1:1～1:100左右，优选为1:5～1:20左右。此外，对悬浮在液体培养基中的抗原呈递细胞的密度没有特别的限制，但通常为100～1000万个细胞/ml左右，优选为10000～100万个细胞/ml左右。共培养优选按照常规方法在37℃、5％CO2气氛中进行。对培养时间没有特别的限制，但通常为2天～3周，优选为4天～2周左右。此外，共培养优选在IL-2、IL-6、IL-7和IL-12那样的白介素1种或多种的存在下进行。在该情况下，IL-2和IL-7的浓度通常为5～20U/ml左右，IL-6的浓度通常为500～2000U/ml左右，IL-12的浓度通常为5～20ng/ml左右，但不限于此。上述的共培养可以补加新鲜的抗原呈递细胞重复进行1次～数次。例如，可以将舍弃共培养后的培养上清液，添加新鲜的抗原呈递细胞的悬浮液再进行共培养这样的操作重复1次～数次。各共培养的条件与上述同样即可。
通过上述的共培养，可诱导并增殖对该多肽特异性的细胞毒性T细胞。因此，可以使用上述多肽来调制选择性结合该多肽与MHC分子的复合体的分离的T细胞。
如后述的实施例中记载的那样，编码PDS5A的基因分别在乳癌细胞、乳癌组织、脑肿瘤细胞、脑肿瘤组织、食道癌细胞、食道癌组织、肺癌细胞、肺癌组织、肾癌细胞、肾癌组织、大肠癌细胞、大肠癌组织、肛周腺癌组织、肛周腺癌细胞、神经母细胞瘤细胞和白血病细胞中特异性表达。因此认为，在这些癌种类中，与正常细胞相比，PDS5A显著多地存在。癌细胞内存在的PDS5A的一部分被呈递至癌细胞表面上的MHC分子，如果在生物体内施用以上述方式调制的细胞毒性T细胞，则细胞毒性T细胞可以将该呈递有PDS5A的一部分的MHC分子作为标记来抑制癌细胞。此外，呈递上述多肽的抗原呈递细胞也可以在生物体内诱导对该多肽特异性的细胞毒性T细胞，使其增殖，因此也可以通过将该抗原呈递细胞施用于生物体内来抑制癌细胞。即，使用上述多肽而调制的上述细胞毒性T细胞、上述抗原呈递细胞也与本发明的免疫诱导剂同样地作为癌的治疗剂和/或预防剂是有用的。
在将上述的分离的抗原呈递细胞、分离的T细胞施用于生物体的情况下，为了避免将这些细胞作为异物而攻击的生物体内的免疫应答，优选如上所述使用上述(a)～(c)的多肽调制从接受治疗的患者采集的抗原呈递细胞或T细胞。
包含抗原呈递细胞或分离的T细胞作为有效成分的癌的治疗剂和/或预防剂的施用途径优选为静脉内施用、动脉内施用那样的非经口施用。此外，施用量可根据症状、施用目的等来适当选择，但通常为1个～10兆个，优选为100万个～10亿个，优选数天～数月施用1次。制剂可以为例如将细胞悬浮于生理缓冲盐水中而得的制剂等，也可以与其它抗癌剂、细胞因子等合并使用。此外，也可以添加制剂领域中公知的1种或2种以上添加剂。
此外，也可以通过使编码上述(a)～(c)的多肽的多核苷酸在对象动物的体内表达，来在该生物体内进行抗体生产、诱导细胞毒性T细胞，获得与施用多肽同等的效果。即，本发明的免疫诱导剂可以是包含编码上述的(a)～(c)的多肽的多核苷酸、并包含能够在生物体内表达该多肽的重组载体作为有效成分的免疫诱导剂。如后述的实施例所示那样，能够表达这样的抗原多肽的重组载体被称为基因疫苗。
用于制造基因疫苗的载体只要是能够在对象动物细胞内(优选为哺乳动物细胞内)表达的载体即可，没有特别的限定，可以是质粒载体也可以是病毒载体，可以使用在基因疫苗领域公知的任何载体。另外，编码上述多肽的DNA、RNA等多核苷酸，如上所述，可以通过常规方法容易地调制。此外，该多核苷酸向载体的整合可以通过本领域技术人员公知的方法来进行。
基因疫苗的施用途径优选为肌肉内施用、皮下施用、静脉内施用、动脉内施用等非经口施用途径，施用量可以根据抗原的种类等来适当选择，但通常为每1kg体重，以基因疫苗的重量计为0.1μg～100mg左右，优选为1μg～10mg左右。
作为利用病毒载体的方法，可列举例如在反转录病毒、腺病毒、腺伴随病毒、疱疹病毒、牛痘病毒、痘病毒、脊髓灰质炎病毒、辛德毕斯病毒等RNA病毒或DNA病毒中整合编码上述多肽的多核苷酸，使对象动物感染该病毒的方法。其中，特别优选使用反转录病毒、腺病毒、腺伴随病毒、牛痘病毒等的方法。
作为其它方法，可列举直接在肌肉内施用表达质粒的方法(DNA疫苗法)、脂质体法、lipofectin法、显微注射法、磷酸钙法、电穿孔法等，特别优选DNA疫苗法、脂质体法。
使编码本发明中使用的上述多肽的基因实际上作为药物起作用时，有将基因直接导入体内的体内(in vivo)方法和从对象动物采集某种细胞在体外将基因导入该细胞并将该细胞送回体内的体外(ex vivo)方法(日経サイエンス，1994年4月，20-45页，月刊药事，1994年，第36卷，第1号，23-48页，实验医学增刊，1994年，第12卷，第15号，及其引用文献等)。更优选in vivo方法。
在通过in vivo方法来施用的情况下，可根据治疗目标的疾病、症状等通过适当施用途径来施用。例如，可以施用于静脉、动脉、皮下、肌肉内等。在通过in vivo方法来施用的情况下，例如可采用可溶液体制剂等制剂形态，一般而言，采用含有编码作为有效成分的本发明的上述肽的DNA的注射剂等，根据需要可以加入惯用的载体。此外，在含有该DNA的脂质体或膜融合脂质体(仙台病毒(HVJ)-脂质体等)中，可以为悬浮剂、冷冻剂、离心分离浓缩冷冻剂等脂质体制剂的形态。
另外，在本发明中，所说的“序列号1所示的碱基序列”，除了序列号1中实际所示的碱基序列以外，也包含与其互补的序列。因此，所说的“具有序列号1所示的碱基序列的多核苷酸”，包含具有序列号1实际所示的碱基序列的单链多核苷酸、具有其互补的碱基序列的单链多核苷酸和由它们构成的双链多核苷酸。在调制编码本发明中使用的多肽的多核苷酸的情况下，适当选择任一碱基序列，只要是本领域技术人员，就可以容易地进行该选择。
此外，本发明中使用的多肽为癌特异性表达，因此仅与荷瘤生物体中的血清特异性反应，因而本发明的多肽也可用于癌的检测。
作为检测上述癌的方法，使用从生物体分离出的试样，测定由序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列组成的多肽的表达，或者作为其同源因子的与该多肽具有90％以上、优选为95％以上、更优选为98％以上、进一步优选为99％以上或99.5％以上的序列同一性的多肽的表达。作为使用上述试样测定多肽的表达的方法，可列举对试样中所含的针对该多肽的抗体进行免疫测定的方法(第1方法)、对试样中所含的该多肽本身进行免疫测定的方法(第2方法)和对试样中所含的编码该多肽的mRNA进行测定的方法(第3方法)。本发明的方法可以以这些方法中的任一方法来测定多肽的表达。另外，在本发明中，“测定”这样的用语包含检测、定量和半定量的任一种。
这里，PDS5A是通过使用来源于狗乳癌的cDNA文库和同一患狗的血清的SEREX法，作为与来源于荷瘤狗的血清中特异性存在的抗体(癌特异性抗体)结合的多肽而被鉴定出的(参照实施例1)。即，荷瘤狗生物体中，针对PDS5A的抗体被特异性诱导出来。因此，通过测定荷瘤生物体内的针对PDS5A的抗体，也可以检测表达PDS5A的癌。此外，也可以通过上述第2方法来测定作为抗原的PDS5A，从而检测狗的癌。此外，如后述的实施例中记载的那样，编码该抗原多肽的mRNA在癌细胞或癌组织、特别是乳癌细胞、乳癌组织、脑肿瘤细胞、脑肿瘤组织、食道癌细胞、食道癌组织、肺癌细胞、肺癌组织、肾癌细胞、肾癌组织、大肠癌细胞、大肠癌组织、肛周腺癌细胞、肛周腺癌组织、神经母细胞瘤细胞和白血病细胞中与正常组织相比显著地高表达(参照实施例1)，因此也可以通过测定该mRNA来检测狗的癌。
在上述第1方法中，能够在试样中存在的上述癌特异性抗体的测定可以通过使用与该抗体进行抗原抗体反应的抗原物质的免疫测定来容易地进行。免疫测定法本身如下文所详述的那样为公知的常规方法。作为免疫测定的抗原物质，可以使用上述(a)～(c)的多肽。此外，抗体存在交叉反应性，即使是实际上成为免疫原的抗原物质以外的分子，如果分子上存在与免疫原的表位类似的结构，则该分子也能够通过抗原抗体反应而与被免疫原诱导的抗体结合。例如，氨基酸序列的序列同一性高的多肽彼此之间表位的结构也多类似，在该情况下，两者能够显示同一抗原性。如后述的实施例中具体记载的那样，序列号4或44的来源于人的多肽与在荷瘤狗体内诱导的上述抗体进行抗原抗体反应。因此，在本发明的第1方法中，作为免疫测定的抗原，也可以使用来源于任一哺乳动物的同源因子。
通常，在蛋白质等那样的具有复杂结构的分子量大的抗原物质的情况下，分子上存在结构不同的多个部位。因此，在生物体内，针对这样的抗原物质产生分别识别多个部位而结合的多种抗体。即，在生物体内针对蛋白质等抗原物质而产生的抗体是作为多种抗体的混合物的多克隆抗体。另外，在本发明中所谓的“多克隆抗体”，是指来源于体内包含抗原物质的生物体的血清中存在的抗体，是针对该抗原物质在该生物体内诱导出的抗体。
试样中的抗体的测定可以通过使用了上述多肽作为抗原的免疫测定来容易地进行。免疫测定本身在本领域中是公知的，如果以反应方式分类，则有夹心法、竞争法、凝集法、蛋白质印迹法等。此外，如果以标记分类，则有放射免疫测定、荧光免疫测定、酶免疫测定、生物素免疫测定等，使用任一方法都可以进行上述抗体的免疫测定。没有特别的限制，但夹层ELISA、凝集法由于操作简便且不需要大规模的装置等，因此可以优选用作本发明的方法中的上述抗体的免疫测定方法。在使用酶作为抗体的标记的情况下，作为酶，只要是满足周转数大、即使与抗体结合也稳定、使底物特异性着色等条件的酶即可，没有特别的制限，也可以使用通常的用于酶免疫测定法酶，例如，过氧化物酶、β-半乳糖苷酶、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶、乙酰胆碱酯酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶等。此外，也可以使用酶抑制物质、辅酶等。这些酶与抗体的结合可以通过使用马来酰亚胺化合物等交联剂的公知的方法来进行。作为底物，可以根据所使用的酶的种类来使用公知的物质。在例如使用过氧化物酶作为酶的情况下，可以使用3,3’,5,5’-四甲基联苯胺，此外在使用碱性磷酸酶作为酶的情况下，可以使用对硝基苯酚等。作为放射性同位素，可以使用125I、3H等通常在放射免疫测定法中使用的物质。作为荧光色素，可以使用异硫氰酸荧光素(FITC)、四甲基若丹明异硫氰酸酯(TRITC)等通常在荧光抗体法中使用的物质。
另外，这些免疫测定法本身是公知的，没必要在本说明书中说明，但进行简单地记载，例如，在夹心法中，将作为抗原使用的上述多肽固定化于固相，使其与血清等试样反应，洗涤后，与适当的二抗反应，洗涤后，测定与固相结合的二抗。通过将抗原多肽固定化于固相，可以容易地除去未结合的二抗，因此优选作为本发明的癌的检测方法的方式。作为二抗，例如试样如果是来源于狗，则可以使用抗狗IgG抗体。通过预先将二抗用上述例示的标记物质标记，可以测定与固相结合的二抗。这样测定的二抗量相当于血清试样中的上述抗体量。在使用酶作为标记物质情况下，加入通过酶作用而分解显色的底物，在光学上测定底物的分解量，从而可以测定抗体量。在使用放射性同位素作为标记物质的情况下，可以通过闪烁计数器来测定由放射性同位素所放射的放射线量。
在本发明的第2方法中，测定能够在由生物体获得的试样中包含的、序列号2、4、6、8、10、12或44的多肽或其同源因子。如上所述，在癌患者中，与序列号2、4、6、8、10、12或44的多肽或其同源因子进行抗原抗体反应的癌特异性抗体的量显著多，这显示在癌患者体内，作为该癌特异性抗体的抗原的这些多肽或其同源因子的产生量显著多。因此，也可以通过测定序列号2、4、6、8、10、12或44的多肽或其同源因子，与上述第1方法同样地，检测生物体内的癌。
试样中的多肽的测定可以通过公知的免疫测定法来容易地进行。具体而言，例如，制作与序列号2、4、6、8、10、12或44所示的多肽或其同源因子进行抗原抗体反应的抗体或其抗原结合性片段，使用其进行免疫测定，从而可以测定能够在试样中存在的由序列号2、4、6、8、10、12或44所示的序列组成的多肽或其同源因子。免疫测定方法本身是如上所述的公知的常规方法。
这里，“抗原结合性片段”意味着抗体分子中所含的Fab片段、F(ab’)2片段那样的、具有与抗原的结合能力的抗体片段。抗体可以是多克隆抗体也可以是单克隆抗体，但为了免疫测定等，优选再现性高的单克隆抗体。以多肽为免疫原的多克隆抗体和单克隆抗体的制备方法是公知的，可以通过常规方法来容易地进行。例如，通过将使多肽与钥孔血蓝蛋白(KLH)、酪蛋白等载体蛋白质结合成的物质作为免疫原，与佐剂一起对动物免疫，从而可以诱导针对该多肽的抗体。可以使从免疫后的动物采集的脾细胞、淋巴细胞那样的抗体产生细胞与骨髓瘤细胞融合来制作杂交瘤细胞，选择产生与序列号2、4、6、8、10、12或44所示的多肽或其同源因子结合的抗体的杂交瘤细胞，使其增殖，从培养上清液得到以上述蛋白质为对应抗原的单克隆抗体。另外，上述的方法是公知的常规方法。
本发明的第3方法测定能够在从生物体获得的试样中包含的、编码PDS5A的mRNA。如后述的实施例中具体所示那样，编码PDS5A的mRNA在癌、乳癌、脑肿瘤、食道癌、肺癌、肾癌、大肠癌、肛周腺癌、神经母细胞瘤和白血病的组织或细胞中显著高表达。因此，也可以通过测定试样中的该mRNA来检测生物体内的癌。
本发明的检测方法基于如上所述测定的多肽的表达量来判断对象生物体是否为癌等。癌的检测也能够仅测定对象生物体中的多肽的表达，但是从提高检测精度的观点出发，优选研究1～多名健常人试样中的多肽的表达量(抗体量、多肽量或mRNA量)来取得健常人基准值，将对象生物体的测定值与该健常人基准值进行比较。此外在想要提高检测精度的情况下，也可以对从已知罹患癌的多名患者得到的试样研究多肽表达量来取得癌患者基准值，将对象生物体的测定值与健常人基准值和癌患者基准值两者进行比较。上述基准值可以通过例如将各试样中的多肽表达量数值化，算出其平均值来确定。另外，健常人基准值与癌患者基准值可以预先对多名健常人和癌患者研究多肽表达量来确定好。因此，在采用本发明的方法进行与基准值的比较的情况下，可以使用预先确定的基准值。
本发明的检测方法中可以组合使用通过其它癌抗原、癌标记进行的检测。由此，可以进一步提高癌的检测精度。
根据本发明的检测方法，可以检测生物体内的癌。根据本发明的方法，连眼睛看不见的小尺寸的肿瘤、体内深部的肿瘤也可以检测，因此对癌的早期发现是有用的。此外，如果对癌的治疗后随访中的患者应用本发明的检测方法，则可以在有癌的复发的情况下早期检测到该癌。
此外，在荷瘤生物体中，如果表达本发明中作为测定对象的上述规定的多肽的癌细胞的数目增加，则相应地该生物体内的该多肽及其mRNA的蓄积量增大，血清中大量产生针对上述多肽的抗体。另一方面，如果癌细胞的数目减少，则相应地生物体内的该多肽及其mRNA的蓄积量减少，血清中的针对上述多肽的抗体减少。因此，在上述规定的多肽的表达量多的情况下，可以判断为发生肿瘤的增大、癌的转移，即癌的进行度进展。
此外，如后述的实施例所示那样，在同一种类的肿瘤中，恶性型与良性型相比上述抗体量显著多。因此，在上述规定的多肽的表达量多的情况下，可以判断为癌的恶性度更高。即，根据本发明的方法，也可以检测癌的恶性度。
此外，也可以将上述规定的多肽的表达量的增减作为指标来监测癌的治疗效果。因此，关于癌的治疗中、治疗后的个体，通过观察上述多肽的表达量，可获得抗癌剂的治疗效果、肿瘤摘出后的残存肿瘤有无、进而即使在随访中也可迅速获知转移、复发的线索。在进行了适当治疗的情况下，多肽的表达量与治疗前的荷瘤状态相比降低，因此可以判断为对该生物体进行的(正进行的)治疗的效果良好。在多肽表达量上升或维持的情况下，或在观察到暂时降低后再上升的情况下，可以判断为治疗效果不充分，成为向其它治疗方法变更、抗癌剂施用量变更等治疗方法选择的有用判断材料。
作为本发明的癌的检测方法的对象的癌，是表达PDS5A的癌，可列举乳癌、脑肿瘤、食道癌、肺癌、肾癌、大肠癌、肛周腺癌、神经母细胞瘤或白血病作为优选例。此外，作为本发明的方法的对象的生物体优选为哺乳动物，更优选为人、狗、猫。
作为供于本发明的方法的试样，可列举血液、血清、血浆、腹水、胸水等体液、组织、细胞。特别是在上述第1方法和第2方法中，可以优选使用血清、血浆、腹水和胸水，此外，在测定mRNA的上述第3方法中，优选组织试样和细胞试样。
第1方法中作为免疫测定的抗原使用的上述多肽可以作为癌检测试剂提供。该试剂可以仅由上述多肽构成，此外也可以包含对该多肽的稳定化等有用的各种添加剂等。此外，该试剂也可以以固定化于板、膜等固相的状态提供。
第2方法中对序列号2、4、6、8、10、12或44所示的多肽或其同源因子进行免疫测定时使用的、与该多肽或其同源因子进行抗原抗体反应的抗体或其抗原结合性片段也可以作为癌检测试剂提供。该情况下的癌检测试剂也可以仅由上述抗体或抗原结合性片段构成，此外也可以包含对该抗体或抗原结合性片段的稳定化等有用的各种添加剂等。此外，该抗体或抗原结合性片段可以结合有锰、铁等金属。如果将那样的金属结合抗体或抗原结合性片段施用于体内，则在抗原蛋白质更多存在的部位更多地集聚该抗体或抗原结合性片段，因此如果通过MRI等来测定金属，则可以检测产生抗原蛋白质的癌细胞的存在。
此外，第3方法中用于mRNA的测定的上述癌检测用多核苷酸也可以作为癌检测试剂来提供。在该情况下，癌检测用试剂也可以仅由该多核苷酸构成，此外也可以包含对该多核苷酸的稳定化等有用的各种添加剂等。该试剂中所含的该癌检测用多核苷酸优选为引物或探针。
实施例
以下，基于实施例更具体地说明本发明。
实施例1：通过SEREX法获得新的癌抗原蛋白
(1)cDNA文库的制作
从荷瘤狗的乳癌组织通过酸-胍盐-酚-氯仿法(Acid guanidium-Phenol-Chloroform法)提取总RNA，使用Oligotex-dT30 mRNA purification Kit(宝酒造社制)按照试剂盒所附的实验方法纯化多聚A RNA。
使用该获得的mRNA(5μg)来合成cDNA噬菌体文库。cDNA噬菌体文库的制作中使用cDNA Synthesis kit、Zap-cDNA Synthesis Kit、ZAP-cDNA GigapackIII Gold CloningKit(STRATAGENE社制)，按照试剂盒所附的实验方法来制作文库。制作的cDNA噬菌体文库的大小为1×106pfu/ml。
(2)利用血清来筛选cDNA文库
使用上述制作的cDNA噬菌体文库进行免疫筛选。具体而言，使其以在Φ90×15mm的NZY琼脂糖板上为2340克隆的方式感染宿主大肠杆菌(XL1-Blue MRF’)，在42℃培养3～4小时，制作噬斑(plaque)，用浸透了IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)的硝基纤维素膜(Hybond C Extra:GE Healthecare Bio-Sciece社制)在37℃覆盖板4小时，从而使蛋白质诱导、表达，在膜上转印蛋白质。然后回收膜并浸泡在包含0.5％脱脂奶粉的TBS(10mMTris-HCl，150mM NaCl(pH值7.5))中在4℃振荡一晚，从而抑制非特异性反应。使该膜与500倍稀释后的患狗血清在室温反应2～3小时。
作为上述患狗血清，使用了从肛门附近肿瘤的患狗采集的血清。这些血清在-80℃保存，在即将使用前进行了前处理。血清的前处理方法采用以下的方法。即，使宿主大肠杆菌(XL1-BLue MRF’)感染未插入外源基因的λZAP Express噬菌体后，在NZY板培养基上在37℃培养一晚。然后在板上加入包含0.5M NaCl的0.2M NaHCO3(pH值8.3)的缓冲液，在4℃静置15小时后，回收上清液作为大肠杆菌/噬菌体提取液。接下来，将回收的大肠杆菌/噬菌体提取液通入NHS-柱(GE Healthecare Bio-Science社制)，将来源于大肠杆菌、噬菌体的蛋白质固定化。使患狗血清通入该蛋白固定化柱并反应，从血清中除去吸附于大肠杆菌和噬菌体的抗体。经过了柱的血清组分用包含0.5％脱脂奶粉的TBS进行500倍稀释，将其作为免疫筛选材料。
将印迹有上述处理血清和上述融合蛋白质的膜用TBS-T(0.05％Tween20/TBS)进行洗涤4次后，使作为二抗的用包含0.5％脱脂奶粉的TBS进行了5000倍稀释的山羊抗狗IgG(Goat anti Dog IgG-h+I HRP conjugated：BETHYL Laboratories社制)在室温反应1小时，通过使用了NBT/BCIP反应液(Roche社制)的酶显色反应进行检测，从Φ90×15mm的NZY琼脂糖板上采集与显色反应阳性部位一致的菌落，使其溶解在SM缓冲液(100mM NaCl，10mMMgClSO4，50mM Tris-HCl，0.01％明胶(pH值7.5))500μl中。采用与上述同样的方法重复进行二次、三次筛选直到显色反应阳性菌落单一化，对与血清中的IgG进行反应的30940个噬菌体克隆进行筛选，分离出1个阳性克隆。
(3)分离的抗原基因的序列同一性检索
为了将通过上述方法分离出的1个阳性克隆供于碱基序列分析，进行从噬菌体载体转换成质粒载体的操作。具体而言，将以使吸光度OD600为1.0的方式调制宿主大肠杆菌(XL1-Blue MRF’)而得的溶液200μl与纯化后的噬菌体溶液100μl以及ExAssist helperphage(STRATAGENE社制)1μl混合后，在37℃反应15分钟后，添加3ml LB培养基并在37℃进行培养2.5～3小时，立即在70℃的水浴中保温20分钟后，在4℃以1000×g离心15分钟，回收上清液作为噬粒(phagemid)溶液。接着将以使吸光度OD600为1.0的方式调制噬粒宿主大肠杆菌(SOLR)而得的溶液200μl与纯化后的噬菌体溶液10μl混合，然后在37℃反应15分钟，接种在50μl的含有氨苄青霉素(终浓度50μg/ml)的LB琼脂培养基中在37℃培养一晚。采集转化后的SOLR的单菌落，在含有氨苄青霉素(终浓度50μg/ml)的LB培养基中在37℃培养后，使用QIAGEN plasmid Miniprep Kit(キアゲン社制)纯化具有目标插入片段的质粒DNA。
纯化后的质粒使用序列号13中记载的T3引物和序列号14中记载的T7引物，通过引物步移法进行插入片段全长序列的分析。通过该序列分析来获得序列号1中记载的基因序列。使用该基因的碱基序列和氨基酸序列，进行序列同一性检索程序BLAST搜索(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)并进行与已知基因的序列同一性检索，结果表明，所得的基因为PDS5A基因。在作为狗PDS5A的人同源因子的人PDS5A中，序列同一性为碱基序列94％、氨基酸序列99％，在作为小鼠同源因子的小鼠PDS5A中，序列同一性为碱基序列91％、氨基酸序列99％，在作为牛同源因子的牛PDS5A中，序列同一性为碱基序列95％、氨基酸序列99％，在作为马同源因子的马PDS5A中，序列同一性为碱基序列96％、氨基酸序列99％，在作为鸡同源因子的鸡PDS5A中，序列同一性为碱基序列83％、氨基酸序列98％。将人PDS5A的碱基序列示于序列号3和43，氨基酸序列示于序列号4和44，将小鼠PDS5A的碱基序列示于序列号5，氨基酸序列示于序列号6，将牛PDS5A的碱基序列示于序列号7，氨基酸序列示于序列号8，将马PDS5A的碱基序列示于序列号9，氨基酸序列示于序列号10，将鸡PDS5A的碱基序列示于序列号11，氨基酸序列示于序列号12。
(4)各组织中的表达分析
通过RT-PCR(Reverse Transcription-PCR)法来研究通过上述方法而获得的基因在狗、人和小鼠的正常组织和各种细胞株中的表达。反转录反应如下进行。即，使用TRIZOL试剂(invitrogen社制)按照所附的实验方法从各组织50～100mg和各细胞株5～10×106个细胞中提取总RNA。使用该总RNA通过Superscript First-Strand Synthesis System forRT-PCR(invitrogen社制)按照所附的实验方法合成cDNA。人正常组织(脑、海马、精巢、结肠、胎盘)的cDNA使用了基因库cDNA(invitrogen社制)、QUICK-Clone cDNA(クロンテック社制)和Large-Insert cDNA Library(クロンテク社制)。PCR反应使用所取得的基因特异性的引物(狗引物在序列号15和16记载，人引物在序列号17和18记载，小鼠引物在序列号19和20记载)如下进行。即，按照通过反转录反应而调制的样品0.25μl、上述引物各2μM、0.2mM的各dNTP、0.65U的ExTaq聚合酶(宝酒造社制)的方式加入各试剂和所附缓冲液，使总量为25μl，使用Thermal Cycler(BIO RAD社制)，将94℃-30秒，55℃-30秒，72℃-1分钟的循环重复进行30次。为了进行比较对照，也同时使用了GAPDH特异性的引物(狗和人GAPDH引物在序列号21和22记载，小鼠GAPDH引物在序列号23和24记载)。其结果是，如图1所示，狗PDS5A基因在健常的狗组织中在大部分组织中未观察到表达，另一方面，在狗肿瘤组织中观察到强的表达。人和小鼠PDS5A基因的表达也与狗PDS5A基因同样，在人和小鼠正常组织中几乎不能发现表达，在癌细胞中在大部分的细胞株中检测到表达(图2，3)。
实施例2：PDS5A在生物体内的癌抗原性的分析和药效评价
(1)在生物体内表达PDS5A的重组载体的制作
以序列号5的碱基序列为基础，采用以下的方法制作在生物体内表达PDS5A的重组载体。PCR通过在实施例1中观察到表达的小鼠癌细胞株N2a(从ATCC购入)来调制。如下进行：按照cDNA 1μl、包含NotI和XhoI限制性酶切序列的2种引物(在序列号25和26记载)各0.4μM、0.2mM dNTP、1.25U的PrimeSTAR HS聚合酶(宝酒造社制)的方式加入各试剂和所附缓冲液，使总量为50μl，使用Thermal Cycler(BIO RAD社制)，将98℃-10秒，55℃-15秒，72℃-4分钟的循环重复进行30次。另外，上述2种引物是扩增编码序列号5的氨基酸序列全长的区域的引物。PCR后，将扩增的DNA用1％琼脂糖凝胶进行电泳，使用QIAquick GelExtraction Kit(QIAGEN社制)纯化约4000bp的DNA片段。
将纯化的DNA片段与克隆载体pCR-Blunt(invitrogen社制)连接。将其转化至大肠杆菌后回收质粒，由测序确认了扩增后的基因片段与目标序列一致。将与目标序列一致的质粒用NotI和XhoI限制性酶处理，用QIAquick Gel Extraction Kit纯化后，将目标基因序列插入到用NotI、XhoI限制性酶进行了处理的哺乳类表达载体PCDNA3.1(Invitrogen社制)中。通过使用该载体在哺乳类的细胞内产生PDS5A蛋白。
在由上述制作的质粒DNA 100μg中添加50μg的金粒子(Bio Rad社制)、亚精胺100μl(SIGMA社制)、1M CaCl2 100μl(SIGMA社制)，通过涡旋混合器进行搅拌，在室温静置10分钟(以后记载为金-DNA粒子)。以3000转/分钟离心1分钟后，舍弃上清液，用100％乙醇(WAKO社制)洗涤3次。在金-DNA粒子中加入100％乙醇6ml，通过涡旋混合器充分地搅拌后，将金-DNA粒子注入Tefzel Tubing(Bio Rad社制)中，使其在壁面沉淀。将附着有金-DNA粒子的Tefzel Tubing的乙醇风干，切割成适合基因枪的长度。
(2)通过DNA疫苗法制成的PDS5A的抗肿瘤效果
在10只A/J小鼠(7周龄，雄，从日本SLC社购入)和Balb/c小鼠(7周龄，雄，从日本SLC社购入)的皮下分别移植1×106个小鼠神经母细胞瘤细胞株N2a、大肠癌细胞株CT26后，将由上述制作的管固定于基因枪，使用纯氦气以400psi的压力对剃毛后的小鼠的腹腔每隔7天透皮施用DNA疫苗共计3次(质粒DNA接种量为2μg/只)，评价抗肿瘤效果(治疗模型)。此外，同样地操作，每隔7天对10只A/J小鼠和Balb/c小鼠透皮施用DNA疫苗共计3次后，移植N2a细胞、CT26细胞来评价抗肿瘤效果(预防模型)。另外，作为对照，将未插入PDS5A基因的质粒DNA在各模型各施用10只。
抗肿瘤效果以肿瘤的大小(长径×短径2/2)和生存小鼠的比例来评价。将结果示于图4～11中。本研究的结果是，在使用了神经母细胞瘤细胞株的治疗模型中，41天后，对照组和PDS5A质粒施用组中分别为569mm3、109mm3，PDS5A质粒施用组中观察到了显著的肿瘤的缩小(图4)。同样地在使用了神经母细胞瘤细胞株的预防模型中，43日后，也在对照组和PDS5A质粒施用组中分别为476mm3、0mm3，PDS5A质粒施用组中观察到了肿瘤的完全萎缩(图5)。此外，在使用了大肠癌细胞株的治疗模型中，41日后，对照组和PDS5A质粒施用组中分别为589mm3、189mm3，PDS5A质粒施用组中观察到了显著的肿瘤缩小(图8)。同样地在使用了大肠癌细胞株的预防模型中，43日后，也在对照组和PDS5A质粒施用组中分别为397mm3、43mm3，PDS5A质粒施用组中观察到了显著的肿瘤的缩小(图9)。此外，观察了使用了神经母细胞瘤细胞株的两模型中的生存的经过，结果是，在治疗模型中，对照组中施用后在84天全例死亡，与此相对，PDS5A质粒施用组中，60％的小鼠生存(图6)。此外，在预防模型中，对照组中施用后在90天全例死亡，与此相对，施用了PDS5A质粒的组中，全部的小鼠生存(图7)。此外，观察了使用了大肠癌细胞株的两模型中的生存的经过，结果是，在治疗模型中，对照组中在施用后84天全例死亡，与此相对，PDS5A质粒施用组中，40％的小鼠生存(图10)。此外，在预防模型中，对照组中在施用后90天全例死亡，与此相对，施用了PDS5A质粒的组中，80％的小鼠生存(图11)。
由以上的结果可知，PDS5A质粒施用组与对照组相比确认了显著的抗肿瘤效果，因此表明了，PDS5A为具有强的癌抗原性的癌抗原，对癌的治疗和预防是有效的。
实施例3：肽表位反应性CD8阳性T细胞的诱导
为了预测人PDS5A蛋白质的氨基酸序列中的HLA-A0201结合基序，使用了公知的BIMAS软件(可在(http://bimas.dcrt.nih.gov/molbio/hla_bind/)利用)的计算机预测程序来分析序列号4和44的氨基酸序列，选择预想能够与HLA I类分子结合的、序列号27～35的多肽。
从HLA-A0201阳性的健常人分离出外周血，叠层在Lymphocyte separationmedium(OrganonpTeknika，Durham，NC)上以1,500转/分钟在室温离心分离20分钟。回收含有外周血单核细胞(PBMC)的组分，在冷磷酸盐缓冲液中洗涤3次(或3次以上)，得到了PBMC。将所得的PBMC悬浮在AIM-V培养基(Life Technololgies，Inc.，美国纽约州Grand Island)20ml中，在培养瓶(Falcon)中在37℃、5％CO2的条件下使其附着2小时。非附着细胞用于调制T细胞，附着细胞用于调制树突细胞。
另一方面，将附着细胞在AIM-V培养基中在IL-4(1000U/ml)和GM-CSF(1000U/ml)的存在下培养。6天后更换成添加了IL-4(1000U/ml)、GM-CSF(1000U/ml)、IL-6(1000U/ml，Genzyme，Cambridge，MA)、IL-1β(10ng/ml，Genzyme，Cambridge，MA)和TNF-α(10ng/ml，Genzyme，Cambridge，MA)的AIM-V培养基，再培养2天后，使用所得的非附着细胞群作为树突细胞。
将调制的树突细胞在AIM-V培养基中以1×106个细胞/ml的细胞密度悬浮，分别以10μg/ml的浓度添加所选择的多肽，使用96孔板在37℃、5％CO2的条件下培养4小时。培养后，进行X射线照射(3000rad)，用AIM-V培养基洗涤，在含有10％人AB血清(Nabi，Miami，FL)、IL-6(1000U/ml)和IL-12(10ng/ml，Genzyme，Cambridge，MA)的AIM-V培养基中悬浮，在24孔板每1孔中分别添加1×105个细胞。然后，分别以每1孔为1×106个细胞添加调制的T细胞群，在37℃、5％CO2的条件下培养。7天后，舍弃各培养上清液，与上述同样地操作，将用所得的各多肽处理后进行了X射线照射的树突细胞在含有10％人AB血清(Nabi，Miami,FL)、IL-7(10U/ml，Genzyme，Cambridge，MA)和IL-2(10U/ml，Genzyme，Cambridge，MA)的AIM-V培养基中悬浮(细胞密度：1×105个细胞/ml)，在24孔板每1孔中分别添加1×105个细胞，再进行培养。每隔7天将同样的操作重复4～6次后，回收被刺激的T细胞，通过流式细胞仪确认诱导了CD8阳性T细胞的诱导。
实施例4：刺激HLA-A0201阳性CD8阳性T细胞的PDS5A中的细胞毒性T细胞抗原表位的确定
通过显微镜下的细胞数计测确认了在上述诱导后的各孔的T细胞内，被序列号27～35的各多肽刺激了的T细胞增殖了。对于观察到了增殖的各T细胞，为了研究针对用于刺激的各多肽的特异性，对5×104个被多肽刺激后的、表达HLA-A0201分子的T2细胞(SalterRD et al.，Immunogenetics，21：235-246(1985)，从ATCC购入)(以10μg/ml的浓度在AIM-V培养基中添加各多肽，在37℃、5％CO2的条件下培养4小时)添加5×103个T细胞，采用96孔板在包含10％人AB血清的AIM-V培养基中培养24小时。取培养后的上清液，通过ELISA法测定IFN-γ的产生量。其结果是，与使用了未进行多肽刺激的T2细胞的孔的培养上清液相比，在使用进行了序列号27～35的各多肽刺激的T2细胞的孔的培养上清液中，确认了IFN-γ产生(图12)。因此表明了，序列号27～35的各多肽是具有特异性地刺激HLA-A0201阳性CD8阳性T细胞增殖、诱导IFN-γ产生的能力的T细胞表位肽。另一方面，在添加具有序列号36所示的氨基酸序列的本发明的范围外的多肽来进行上述处理的情况下，未发现IFN-γ产生(图12)。
接下来研究了，作为本发明中使用的多肽的序列号27～35的各多肽是否是被呈递至HLA-A0201阳性且表达PDS5A的肿瘤细胞上的HLA-A0201分子上的多肽，以及被本多肽刺激了的CD8阳性T细胞是否能够抑制HLA-A0201阳性且表达PDS5A的肿瘤细胞。
在105个50ml容量的离心管中收集确认了PDS5A的表达的恶性脑肿瘤细胞株、T98G(Stein GH et al.，J.Cell Physiol.，99：43-54(1979)，从ATCC购入)，加入100μCi的铬51，在37℃温育2小时。然后用包含10％人AB血清的AIM-V培养基洗涤3次，在96孔V底板每1孔中各添加103个，然后在其中分别添加被悬浮在包含10％人AB血清的AIM-V培养基中的105、5×104、2.5×104和1.25×104个被序列号27～35的各多肽刺激后的HLA-A0201阳性的CD8阳性T细胞，在37℃、5％CO2的条件下培养4小时。培养后，测定从受到抑制的肿瘤细胞释放的培养上清液中的铬51的量，从而算出被序列号27～35的各多肽刺激后的CD8阳性T细胞的细胞毒活性。
其结果表明了，被序列号27～35的各多肽刺激了的HLA-A0201阳性的CD8阳性T细胞具有对T98G的细胞毒活性(图13)。因此明确了，作为本发明中使用的多肽的序列号27～35的各多肽被呈递至HLA-A0201阳性且表达PDS5A的肿瘤细胞上的HLA-A0201分子上，而且这些多肽具有诱导能够抑制这样的肿瘤细胞的CD8阳性细胞毒性T细胞的能力。另一方面，在添加具有序列号36所示的氨基酸序列的本发明的范围外的多肽来进行上述处理的情况下，未见细胞毒活性(图13)。
另外，关于细胞毒活性，是显示将上述那样地用本发明中使用的各多肽刺激诱导后的CD8阳性T细胞105个和摄取了铬51的103个恶性脑肿瘤细胞株T98G混合并培养4小时，培养后测定在培养基中释放的铬51的量，通过以下计算式＊算出的CD8阳性T细胞对T98G的细胞毒活性的结果。
＊式：细胞毒活性(％)＝加入了CD8阳性T细胞时从T98G游离的铬51游离量÷从加入了1N盐酸的靶细胞游离的铬51游离量×100。
实施例5：重组PDS5A蛋白质的制作、药效评价和癌的检测和癌诊断
(1)重组PDS5A蛋白质的制作
以实施例1中取得的序列号1的基因为基础，采用以下方法制作重组蛋白质。PCR如下进行：按照由实施例1中获得的噬粒溶液调制并供于序列分析的载体1μl、包含NotI和XhoI限制性酶切序列的2种引物(在序列号37和38中记载)各0.4μM、0.2mM dNTP、1.25U的PrimeSTAR HS聚合酶(宝酒造社制)的方式加入各试剂和所附缓冲液，使总量为50μl，使用Thermal Cycler(BIO RAD社制)，将98℃-10秒，55℃-15秒，72℃-4分钟的循环重复进行30次。另外，上述2种引物是扩增编码序列号2的氨基酸序列全长的区域的引物。PCR后，将被扩增的DNA用1％琼脂糖凝胶进行电泳，使用QIAquick Gel Extraction Kit(QIAGEN社制)纯化约4000bp的DNA片段。
将纯化后的DNA片段与克隆载体pCR-Blunt(invitrogen社制)连接。将其转化至大肠杆菌后回收质粒，由测序确认了被扩增的基因片段与目标序列一致。将与目标序列一致的质粒用NotI和XhoI限制性酶处理，用QIAquick Gel Extraction Kit纯化后，将目标基因序列插入到用NotI、XhoI限制性酶处理后的大肠杆菌用表达载体pET30a(Novagen社制)中。通过该载体的使用可以产生His标签融合型的重组蛋白质。将该质粒转化至表达用大肠杆菌BL21(DE3)，通过1mM IPTG进行表达诱导来使目标蛋白质在大肠杆菌内表达。
此外，以序列号43的基因为基础，采用以下的方法制作人PDS5A的重组蛋白质。PCR如下进行：按照由实施例1制作的各种组织和/或细胞cDNA通过RT-PCR法确认了表达的cDNA1μl、包含NotI和XhoI限制性酶切序列的2种引物(在序列号39和40记载)各0.4μM、0.2mMdNTP、1.25U的PrimeSTAR HS聚合酶(宝酒造社制)的方式加入各试剂和所附缓冲液，使总量为50μl，使用Thermal Cycler(BIO RAD社制)，将98℃-10秒，55℃-15秒，72℃-4分钟的循环重复进行30次。另外，上述2种引物是扩增编码序列号44的氨基酸序列全长的区域的引物。PCR后，将扩增的DNA用1％琼脂糖凝胶进行电泳，使用QIAquick Gel Extraction Kit(QIAGEN社制)纯化约4000bp的DNA片段。
将纯化后的DNA片段与克隆载体pCR-Blunt(invitrogen社制)连接。将其转化至大肠杆菌后回收质粒，由测序确认了扩增的基因片段与目标序列一致。将与目标序列一致的质粒用NotI和XhoI限制性酶处理，用QIAquick Gel Extraction Kit纯化后，将目标基因序列插入到用NotI、XhoI限制性酶处理后的大肠杆菌用表达载体pET30a(Novagen社制)中。通过使用该载体可以产生His标签融合型的重组蛋白质。将该质粒转化至表达用大肠杆菌BL21(DE3)，通过1mM IPTG进行表达诱导来使目标蛋白质在大肠杆菌内表达。
此外，以序列号5的基因为基础，用以下的方法制作小鼠PDS5A的重组蛋白质。PCR如下进行，按照由实施例1制作的各种组织和/或细胞cDNA通过RT-PCR法确认了表达的cDNA1μl、包含NotI和XhoI限制性酶切序列的2种引物(在序列号41和42记载)各0.4μM、0.2mMdNTP、1.25U的PrimeSTAR HS聚合酶(宝酒造社制)的方式加入各试剂和所附缓冲液，使总量为50μl，使用Thermal Cycler(BIO RAD社制)，将98℃-10秒，55℃-15秒，72℃-4分钟的循环重复30次。另外，上述2种引物是扩增编码序列号6的氨基酸序列全长的区域的引物。PCR后，将扩增的DNA用1％琼脂糖凝胶进行电泳，使用QIAquick Gel Extraction Kit(QIAGEN社制)纯化约4000bp的DNA片段。
将纯化后的DNA片段与克隆载体pCR-Blunt(invitrogen社制)连接。将其转化至大肠杆菌后回收质粒，由测序确认了被扩增了的基因片段与目标序列一致。将与目标序列一致的质粒用NotI和XhoI限制性酶处理，用QIAquick Gel Extraction Kit纯化后，将目标基因序列插入到用NotI、XhoI限制性酶处理后的大肠杆菌用表达载体pET30a(Novagen社制)中。通过使用该载体可以产生His标签融合型的重组蛋白质。将该质粒转化至表达用大肠杆菌BL21(DE3)，通过1mM IPTG进行表达诱导来使目标蛋白质在大肠杆菌内表达。
(2)重组PDS5A蛋白质的纯化
将由上述获得的表达序列号2、序列号44或序列号6的各个重组大肠杆菌在含有100μg/ml氨苄青霉素的LB培养基中在37℃培养直到600nm的吸光度为0.7左右，然后添加异丙基-β-D-1-硫代半乳糖苷使终浓度为1mM，再在37℃培养4小时。然后以4800转/分钟离心10分钟并收集菌体。将该菌体颗粒悬浮在磷酸缓冲化生理盐水中，再以4800转/分钟离心10分钟并进行菌体的洗涤。
将该菌体悬浮在50mM Tris-盐酸缓冲液(pH值8.0)中，在冰上进行超声波破碎。将大肠杆菌超声波破碎液以6000转/分钟离心分离20分钟，将所得的上清液作为可溶性级分，将沉淀物作为不溶性级分。
将不溶性级分在50mM Tris-盐酸缓冲液(pH8.0)中悬浮，以6000转/分钟离心15分钟。将本操作重复2次，进行脱蛋白酶操作。
将该残渣悬浮在含有6M盐酸胍、0.15M氯化钠的50mM Tris-盐酸缓冲液(pH值8.0)中，在4℃静置20小时使蛋白质变性。该变性操作后，将以6000转/分钟离心30分钟而得的可溶性级分添加至按照常规方法调制的镍螯合柱(载体：Chelateing Sepharose(商标)FastFlow(GE Health Care社)，柱容量5mL，平衡化缓冲液：含有6M盐酸胍、0.15M氯化钠50mMTris-盐酸缓冲液(pH值8.0))中，再在4℃静置一晚并进行对镍螯合化后的载体的吸附。将该柱载体以1500转/分钟离心5分钟来回收上清液，对于柱载体，在磷酸缓冲化生理盐水中悬浮后，再填充于柱中。
将柱未吸附级分用柱容量的10倍量的含有0.5M氯化钠的0.1M乙酸缓冲液(pH值4.0)进行洗涤操作后，立即用含有0.5M氯化钠的0.1M乙酸缓冲液(pH值3.0)进行溶出而作为纯化级分，以后将该纯化级分作为施用试验用的材料。另外，各溶出组分中的目标蛋白质通过按照常规方法进行的考马斯染色确认。
将通过上述方法而获得的纯化标品置换到反应用缓冲液(50mM Tris-HCl，100mMNaCl，5mM CaCl2(pH值8.0))中后，使用FactorXa Cleavage Capture Kit(Novagen社制)按照所附实验方法通过FactorXa蛋白酶进行His标签的切割和目标蛋白质的纯化。接下来，将通过上述方法而获得的纯化标品12ml使用超滤NANOSEP 10K OMEGA(PALL社制)进行生理用磷酸缓冲液(日水制药社制)置换后，用HTタフリンアクロディスク0.22μm(PALL社制)进行无菌过滤，将其用于实验。
(3)重组小鼠PDS5A蛋白质对荷瘤小鼠的抗肿瘤效果
在A/J小鼠(7周龄，雄，从日本SLC社购入)的皮下移植1×106个小鼠神经母细胞瘤细胞株N2a，在肿瘤达到平均50～100mm3的时刻(典型地为肿瘤接种后7天)，将小鼠以1组10只的方式随机分组，进行重组小鼠PDS5A蛋白质的抗肿瘤效果的评价(治疗模型)。在如上所述纯化后的重组小鼠PDS5A蛋白质100μg(0.5ml)中混合50μg的多聚IC来调制癌治疗剂，将其对荷瘤小鼠每一周向皮下施用共计3次。其结果是，从癌治疗剂施用起31天后，肿瘤完全萎缩。另一方面，PBS(-)施用阴性对照组和多聚IC单独施用组(50μg)中，施用后31天后，肿瘤分别为平均1657mm3、平均932mm3。
此外，调制混合有重组小鼠PDS5A蛋白质100μg(0.5ml)和50μg的多聚IC的癌治疗剂，将其对A/J小鼠每一周向皮下施用共计3次后，移植1×106个N2a细胞来评价抗肿瘤效果(预防模型)。另外，1组为10只，作为比较对照，分成PBS(-)施用阴性对照组和多聚IC单独施用组(50μg)。其结果是，施用了癌治疗剂的组中，施用癌治疗剂在40天后也观察不到肿瘤发生。另一方面，PBS(-)施用阴性对照组和多聚IC单独施用组(50μg)中，施用后40天后分别为平均1989mm3、平均1843mm3。
用大肠癌模型进行同样的实验。对Balb/c小鼠(7周龄，雄，从日本SLC社购入)的皮下移植1×106个大肠癌细胞株CT26，在肿瘤达到平均50～100mm3的时刻(典型地为肿瘤接种后7天)，将小鼠以1组10只的方式随机分组，进行重组小鼠PDS5A蛋白质的抗肿瘤效果的评价(治疗模型)。在如上所述纯化后的重组小鼠PDS5A蛋白质100μg(0.5ml)中混合50μg的多聚IC来调制癌治疗剂，将其对荷瘤小鼠每一周向皮下施用共计3次。其结果是，从癌治疗剂施用起24天后，肿瘤完全萎缩。另一方面，PBS(-)施用阴性对照组和多聚IC单独施用组(50μg)中，施用后24天后，肿瘤分别为平均1449mm3、平均835mm3。
此外，调制混合有重组小鼠PDS5A蛋白质100μg(0.5ml)和50μg的多聚IC的癌治疗剂，将其对Balb/c小鼠每一周向皮下施用共计3次后，移植1×106个CT26细胞来评价抗肿瘤效果(预防模型)。另外，1组为10只，作为比较对照，分成PBS(-)施用阴性对照组和多聚IC单独施用组(50μg)。其结果是，施用了癌治疗剂的组中，施用癌治疗剂31天后也观察不到肿瘤发生。另一方面，PBS(-)施用阴性对照组和多聚IC单独施用组(50μg)中，施用后31天后分别为平均1781mm3、平均1675mm3。
由以上的结果明确了重组PDS5A蛋白质对癌的治疗和预防是有效的。
(4)重组PDS5A蛋白质对荷瘤患狗的抗肿瘤效果
对表皮具有肿瘤的荷瘤患狗3只(乳腺肿瘤3只)，进行后述的实施例5中记载的重组蛋白质的抗肿瘤效果的评价。进行施用前，首先，通过后述的实施例5(3)中记载的方法，测定针对各患狗的血清中的重组蛋白质的抗体效价，结果是检测到了高于健常狗的抗体效价。因此暗示出，这些荷瘤患狗的生物体中的肿瘤组织中，具有序列号2所示的氨基酸序列的蛋白质作为癌抗原表达。
在如上所述纯化后的重组PDS5A蛋白质(来源于狗和来源于人)各500μg(2.5ml)中混合等量的不完全弗氏佐剂(和光纯药社制)来调制2种癌治疗剂，将其每一周向肿瘤附近的所属淋巴结施用共计3次。其结果是，在癌治疗剂施用时大小分别为约500mm3和1000mm3的肿瘤，在从癌治疗剂施用起分别13天后和21天后完全萎缩。另一方面，PBS(-)施用阴性对照组中，在PBS施用时刻为约800mm3的肿瘤在施用后21天后变为1625mm3。
此外，对肛门周围发生的腺癌和表皮处发生的扁平上皮癌的患狗各1只，在如后述的实施例5那样在纯化后的重组狗PDS5A蛋白质500μg(2.5ml)中混合等量的不完全弗氏佐剂(和光纯药社制)而作为癌治疗剂，将其每一周向肿瘤附近的皮下施用共计4次。其结果是，在癌治疗剂施用时刻癌的大小分别为约370mm3和280mm3的肿瘤，在从癌治疗剂施用起分别35天后和42天后完全萎缩。
(5)使用了重组PDS5A蛋白质的癌的检测
采集被确认了恶性肿瘤的患狗112只和健常狗30只的血液，分离出血清。使用由上述(2)制作的狗PDS5A蛋白质(序列号2)采用ELISA法测定与该蛋白质特异性反应的血清中的抗体效价。制作的蛋白质的固相化如下进行：将用磷酸缓冲化生理盐水稀释成5μg/mL的重组蛋白质溶液以100μl/孔添加至96孔イモビライザー氨基酶标板(ヌンク社制)，在4℃进行静置一晚。封闭如下进行：以100μl/孔加入含有3％BSA(bovine serum albumin(牛血清白蛋白)，シグマアルドリッチジャパン社制)的50mM碳酸氢钠缓冲溶液(pH值8.4)(以下称为封闭溶液)，在室温振荡1小时。以100μl/孔添加使用封闭溶液进行了稀释的1000倍稀释血清，在室温振荡3小时使其反应。用含有0.05％Tween20(和光纯药工业社制)的磷酸缓冲化生理盐水(以下称为PBS-T)洗涤3次，以100μl/孔加入采用封闭溶液稀释至3000倍的HRP修饰抗狗IgG抗体(Goat anti Dog IgG-h+I HRP conjugated：BETHYL Laboratories社制)，在室温振荡1小时使其反应。用PBS-T洗涤3次，以100μl/孔添加HRP底物TMB(1-StepTurbo TMB(四甲基联苯胺)，PIERCE社)，在室温使酶底物反应30分钟。然后，以100μl/孔加入0.5M硫酸溶液(シグマアルドリッチジャパン社制)来停止反应后，采用酶标仪测定450nm的吸光度。作为对照，将未对制作的重组蛋白质固相化的物质、未使荷瘤狗血清反应的物质与上述同样地进行并比较。
对于用于上述癌诊断的共112个样本，使用摘出的肿瘤组织的病理诊断的结果全部确诊为恶性。
具体为受到了下述癌诊断的样本，所述癌是恶性黑素瘤、恶性混合肿瘤、肝细胞癌、基底细胞癌、口腔内肿瘤、肛周腺癌、肛门囊肿瘤、肛门囊顶质分泌腺癌、睾丸支持细胞瘤、阴道前庭癌、皮脂腺癌、皮脂腺上皮瘤、皮脂腺腺瘤、汗腺癌、鼻腔内腺癌、鼻腺癌、甲状腺癌、大肠癌、支气管腺癌、腺癌、腺管癌、乳腺癌、复合型乳腺癌、乳腺恶性混合肿瘤、乳管内乳头状腺癌、纤维肉瘤、血管周皮瘤、骨肉瘤、软骨肉瘤、软组织肉瘤、组织细胞肉瘤、粘液肉瘤、未分化肉瘤、肺癌、肥大细胞瘤、皮肤平滑肌瘤、腹腔内平滑肌瘤、平滑肌瘤、扁平上皮癌、慢性型淋巴细胞性白血病、淋巴瘤、消化道型淋巴瘤、消化器型淋巴瘤、小～中细胞型淋巴瘤、肾上腺髓质肿瘤、颗粒细胞瘤、嗜铬细胞瘤等。
来源于这些荷瘤狗生物体的血清与来源于健常狗的血清相比显示对重组蛋白质的高抗体效价。已知由本诊断法得到的恶性判断为健常狗平均值的2倍以上的情况为94个样本，可以以83.9％诊断恶性癌。该94个样本的癌的种类如下。另外，根据样本不同也有罹患多种癌的样本，以下所示的数值是每种癌的累计值。
恶性黑素瘤5例，淋巴瘤10例，颗粒细胞瘤1例，肝细胞癌3例，恶性精巢肿瘤3例，口腔内肿瘤3例，肛周腺癌5例，肉瘤9例，乳腺癌35例，肺癌1例，腺管癌4例，皮脂腺癌2例，肥大细胞瘤5例，平滑肌肉瘤1例，扁平上皮癌4例，恶性混合肿瘤2例，血管周皮瘤1例。
此外，使用由上述(2)制作的人PDS5A蛋白质(序列号44)与上述同样地操作进行癌诊断，结果得到了同样的结果。
由此表明了，通过使用PDS5A蛋白质测定与该蛋白质特异性反应的血清中的抗体效价，可以进行癌的检测和诊断。
产业可利用性
本发明的包含对各种癌发挥抗肿瘤活性的多肽的免疫诱导剂对癌的治疗和/或预防或癌的检测是有用的。
序列表
<110> 东丽株式会社
<120> 免疫诱导剂
<130> 10057
<160> 44
<170> PatentIn 版本 3.1
<210> 1
<211> 4396
<212> DNA
<213> 狗（Canis familiaris）
<220>
<221> CDS
<222> (116)..(4129)
<223>
<400> 1
ccgacgaggg gcggcggcac aaccaccaga caaaggcccg ggcgctcgat gcaccttccg 60
ccccatgagg aggaggagcc ggtagaggac tgtgaaagaa aagttgtccc ccagg atg 118
Met
1
gac ttc acc gcg cag ccc aag cct gcc act gcc ctc tgt ggc gtc gtg 166
Asp Phe Thr Ala Gln Pro Lys Pro Ala Thr Ala Leu Cys Gly Val Val
5 10 15
agt gca gac ggg aag atc gct tac cct ccg ggg gta aag gag atc acc 214
Ser Ala Asp Gly Lys Ile Ala Tyr Pro Pro Gly Val Lys Glu Ile Thr
20 25 30
gac aag atc acc acc gat gaa atg atc aag cga ctg aag atg gta gta 262
Asp Lys Ile Thr Thr Asp Glu Met Ile Lys Arg Leu Lys Met Val Val
35 40 45
aaa act ttt atg gat atg gat cag gac tca gaa gat gaa aaa cag cag 310
Lys Thr Phe Met Asp Met Asp Gln Asp Ser Glu Asp Glu Lys Gln Gln
50 55 60 65
tat ctc cca cta gcc ttg cat ctt gca tct gaa ttt ttc ctc agg aat 358
Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His Leu Ala Ser Glu Phe Phe Leu Arg Asn
70 75 80
ccc aat aaa gat gtg cgt ctc ctt gta gca tgt tgt ttg gcc gac att 406
Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu Leu Val Ala Cys Cys Leu Ala Asp Ile
85 90 95
ttt cga atc tat gcc cca gaa gct cca tat act tcc cat gat aaa ctt 454
Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu Ala Pro Tyr Thr Ser His Asp Lys Leu
100 105 110
aag gac ata ttt ttg ttt att acc aga caa tta aaa ggt ttg gag gat 502
Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile Thr Arg Gln Leu Lys Gly Leu Glu Asp
115 120 125
aca aag agt cca cag ttt aat aga tac ttt tat tta tta gag aac tta 550
Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn Arg Tyr Phe Tyr Leu Leu Glu Asn Leu
130 135 140 145
gct tgg gtt aaa tcc tat aac atc tgc ttc gaa ttg gaa gat tgc aat 598
Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn Ile Cys Phe Glu Leu Glu Asp Cys Asn
150 155 160
gaa att ttt att cag ctt ttt agg act ctc ttc tca gtg atc aac aat 646
Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe Arg Thr Leu Phe Ser Val Ile Asn Asn
165 170 175
agc cac aat aag aag gta caa atg cac atg tta gac ttg atg agt tct 694
Ser His Asn Lys Lys Val Gln Met His Met Leu Asp Leu Met Ser Ser
180 185 190
atc atc atg gaa ggt gat gga gtt act caa gaa tta ctg gac tcc att 742
Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly Val Thr Gln Glu Leu Leu Asp Ser Ile
195 200 205
ctt att aac ctc att cct gca cat aag aac tta aat aaa cag tcc ttt 790
Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu Asn Lys Gln Ser Phe
210 215 220 225
gac ctt gca aaa gtc tta ttg aaa agg aca gtc cag acc att gag gca 838
Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu Lys Arg Thr Val Gln Thr Ile Glu Ala
230 235 240
tgc att gcc aat ttt ttc aat caa gtc ctg gtg ctg gga aga tcg tcc 886
Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn Gln Val Leu Val Leu Gly Arg Ser Ser
245 250 255
gta agt gat ttg tca gaa cat gta ttt gat ctg att cag gaa ctt ttt 934
Val Ser Asp Leu Ser Glu His Val Phe Asp Leu Ile Gln Glu Leu Phe
260 265 270
gca ata gat cct cat tta tta ttg tct gtc atg ccg cag ctt gaa ttc 982
Ala Ile Asp Pro His Leu Leu Leu Ser Val Met Pro Gln Leu Glu Phe
275 280 285
aaa cta aag agc aat gat gga gaa gag cga tta gct gtt gtt cga ctt 1030
Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly Glu Glu Arg Leu Ala Val Val Arg Leu
290 295 300 305
tta gct aaa ttg ttt ggt tct aaa gat tct gat ttg gca aca cag aat 1078
Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser Lys Asp Ser Asp Leu Ala Thr Gln Asn
310 315 320
cgt cct ctt tgg cag tgt ttt ctt gga cga ttt aat gac att cat gtt 1126
Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe Leu Gly Arg Phe Asn Asp Ile His Val
325 330 335
cct gtg aga tta gaa agt gtg aaa ttt gcc agt cac tgt tta atg aat 1174
Pro Val Arg Leu Glu Ser Val Lys Phe Ala Ser His Cys Leu Met Asn
340 345 350
cac cca gat tta gca aag gat ctc aca gaa tat ttg aaa gtt aga tcc 1222
His Pro Asp Leu Ala Lys Asp Leu Thr Glu Tyr Leu Lys Val Arg Ser
355 360 365
cat gat ccc gaa gag gct att cgt cat gat gtc att gtt act ata ata 1270
His Asp Pro Glu Glu Ala Ile Arg His Asp Val Ile Val Thr Ile Ile
370 375 380 385
aca gct gcc aaa aga gac ctt gcc tta gta aat gat caa cta ctt ggc 1318
Thr Ala Ala Lys Arg Asp Leu Ala Leu Val Asn Asp Gln Leu Leu Gly
390 395 400
ttt gta aga gaa aga aca ctg gat aaa cgg tgg cga gta aga aaa gaa 1366
Phe Val Arg Glu Arg Thr Leu Asp Lys Arg Trp Arg Val Arg Lys Glu
405 410 415
gct atg atg ggt ctg gct cag ctc tat aag aaa tac tgt ctt cat ggt 1414
Ala Met Met Gly Leu Ala Gln Leu Tyr Lys Lys Tyr Cys Leu His Gly
420 425 430
gaa gca gga aag gaa gct gca gag aaa gtc agc tgg ata aag gac aaa 1462
Glu Ala Gly Lys Glu Ala Ala Glu Lys Val Ser Trp Ile Lys Asp Lys
435 440 445
ctt ttg cat att tat tat caa aat agc atc gat gac aaa ctg ttg gta 1510
Leu Leu His Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser Ile Asp Asp Lys Leu Leu Val
450 455 460 465
gag aaa atc ttt gct cag tat ctt gtc ccc cac aac ctg gaa aca gaa 1558
Glu Lys Ile Phe Ala Gln Tyr Leu Val Pro His Asn Leu Glu Thr Glu
470 475 480
gag aga atg aaa tgc ttg tat tat tta tac gct agt ttg gat cca aat 1606
Glu Arg Met Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu Tyr Ala Ser Leu Asp Pro Asn
485 490 495
gct gtc aaa gct ctc aat gaa atg tgg aaa tgt cag aac atg ctt cga 1654
Ala Val Lys Ala Leu Asn Glu Met Trp Lys Cys Gln Asn Met Leu Arg
500 505 510
agt cat gta cga gaa ctc ttg gat ttg cac aag caa cct aca tca gag 1702
Ser His Val Arg Glu Leu Leu Asp Leu His Lys Gln Pro Thr Ser Glu
515 520 525
gct aac tgt tct gcc atg ttt gga aaa ctg atg acc ata gca aag aat 1750
Ala Asn Cys Ser Ala Met Phe Gly Lys Leu Met Thr Ile Ala Lys Asn
530 535 540 545
ttg cct gac cct ggg aaa gca caa gat ttt gtg aag aaa ttt aac cag 1798
Leu Pro Asp Pro Gly Lys Ala Gln Asp Phe Val Lys Lys Phe Asn Gln
550 555 560
gtc ctt ggt gat gat gag aaa ttg cgg tct cag ctg gag tta cta atc 1846
Val Leu Gly Asp Asp Glu Lys Leu Arg Ser Gln Leu Glu Leu Leu Ile
565 570 575
agc cca acc tgt tca tgc aaa caa gca gat gtt tgt gtg aga gaa ata 1894
Ser Pro Thr Cys Ser Cys Lys Gln Ala Asp Val Cys Val Arg Glu Ile
580 585 590
gct cga aaa ctt gca aat cct aag cag cca aca aat cct ttt cta gag 1942
Ala Arg Lys Leu Ala Asn Pro Lys Gln Pro Thr Asn Pro Phe Leu Glu
595 600 605
atg gtc aaa ttt ctg ttg gaa aga att gca cct gtg cac att gat tca 1990
Met Val Lys Phe Leu Leu Glu Arg Ile Ala Pro Val His Ile Asp Ser
610 615 620 625
gaa gcc ata agt gca ctg gta aaa ctg atg aat aaa tca ata gaa ggg 2038
Glu Ala Ile Ser Ala Leu Val Lys Leu Met Asn Lys Ser Ile Glu Gly
630 635 640
aca gca gat gat gaa gag gag ggt gta agt cca gat aca gct att cgt 2086
Thr Ala Asp Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Pro Asp Thr Ala Ile Arg
645 650 655
tcg gga ctt gaa ctt ctt aag gtt ctg tct ttc aca cat cct acc tcg 2134
Ser Gly Leu Glu Leu Leu Lys Val Leu Ser Phe Thr His Pro Thr Ser
660 665 670
ttc cac tct gca gag aca tat gag tcc ctg tta cag tgc ctc aga atg 2182
Phe His Ser Ala Glu Thr Tyr Glu Ser Leu Leu Gln Cys Leu Arg Met
675 680 685
gaa gat gac aag gta gca gaa gct gct ata caa att ttt aga aat aca 2230
Glu Asp Asp Lys Val Ala Glu Ala Ala Ile Gln Ile Phe Arg Asn Thr
690 695 700 705
ggc cac aaa ata gaa aca gac cta ccc cag ata cga tcg acc tta att 2278
Gly His Lys Ile Glu Thr Asp Leu Pro Gln Ile Arg Ser Thr Leu Ile
710 715 720
ccc att tta cat cag aaa gca aag aga ggt act cca cat caa gca aaa 2326
Pro Ile Leu His Gln Lys Ala Lys Arg Gly Thr Pro His Gln Ala Lys
725 730 735
cag gct gtt cac tgt ata cat gcc ata ttc aca aat aaa gaa gtc cag 2374
Gln Ala Val His Cys Ile His Ala Ile Phe Thr Asn Lys Glu Val Gln
740 745 750
ctt gca cag att ttt gag cca ctc agt agg agt ctg aat gct gat gta 2422
Leu Ala Gln Ile Phe Glu Pro Leu Ser Arg Ser Leu Asn Ala Asp Val
755 760 765
cca gaa caa ctt att act ccg tta gtt tca ttg ggc cac att tct atg 2470
Pro Glu Gln Leu Ile Thr Pro Leu Val Ser Leu Gly His Ile Ser Met
770 775 780 785
tta gcc cca gat caa ttt gct tcc cca atg aaa tcc gta gta gca aat 2518
Leu Ala Pro Asp Gln Phe Ala Ser Pro Met Lys Ser Val Val Ala Asn
790 795 800
ttt att gtg aaa gat ctg cta atg aat gac agg tca aca ggt gag aag 2566
Phe Ile Val Lys Asp Leu Leu Met Asn Asp Arg Ser Thr Gly Glu Lys
805 810 815
aat gga aaa tta tgg tct cca gat gaa gag gtt tcc ccc gaa gta cta 2614
Asn Gly Lys Leu Trp Ser Pro Asp Glu Glu Val Ser Pro Glu Val Leu
820 825 830
gca aag gta cag gca att aaa ctt ctg gta agg tgg ctg ttg ggt atg 2662
Ala Lys Val Gln Ala Ile Lys Leu Leu Val Arg Trp Leu Leu Gly Met
835 840 845
aaa aac aac cag tct aaa tct gcc aat tca act ctt cga tta tta tca 2710
Lys Asn Asn Gln Ser Lys Ser Ala Asn Ser Thr Leu Arg Leu Leu Ser
850 855 860 865
gcg atg ttg gtt agt gag ggt gac ctg aca gag caa aag agg atc agt 2758
Ala Met Leu Val Ser Glu Gly Asp Leu Thr Glu Gln Lys Arg Ile Ser
870 875 880
aaa tct gat atg tct cgc ttg cga tta gct gct ggt agt gcc ata atg 2806
Lys Ser Asp Met Ser Arg Leu Arg Leu Ala Ala Gly Ser Ala Ile Met
885 890 895
aag ctt gct cag gaa cct tgt tac cat gaa att ata act cca gaa cag 2854
Lys Leu Ala Gln Glu Pro Cys Tyr His Glu Ile Ile Thr Pro Glu Gln
900 905 910
ttt cag ctc tgt gca ctt gtt att aac gat gag tgc tac caa gta agg 2902
Phe Gln Leu Cys Ala Leu Val Ile Asn Asp Glu Cys Tyr Gln Val Arg
915 920 925
cag ata ttt gcc cag aag ttg cat aaa gct ctc gtg aag tta ctg ctg 2950
Gln Ile Phe Ala Gln Lys Leu His Lys Ala Leu Val Lys Leu Leu Leu
930 935 940 945
cca ttg gaa tat atg gcg atc ttt gcc ttg tgt gcc aaa gat cct gtg 2998
Pro Leu Glu Tyr Met Ala Ile Phe Ala Leu Cys Ala Lys Asp Pro Val
950 955 960
aag gag aga aga gca cat gca cga cag tgt tta cta aaa aat atc agt 3046
Lys Glu Arg Arg Ala His Ala Arg Gln Cys Leu Leu Lys Asn Ile Ser
965 970 975
ata cgc agg gag tac att aaa cag aac ccc atg gct act gag aaa tta 3094
Ile Arg Arg Glu Tyr Ile Lys Gln Asn Pro Met Ala Thr Glu Lys Leu
980 985 990
cta tca ctg ttg cct gaa tat gta gtt cca tac atg att cac ctg cta 3142
Leu Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val Pro Tyr Met Ile His Leu Leu
995 1000 1005
gcc cat gat cca gat ttt aca aga tca caa gat gtt gat cag ctt 3187
Ala His Asp Pro Asp Phe Thr Arg Ser Gln Asp Val Asp Gln Leu
1010 1015 1020
cgt gat att aaa gag tgc cta tgg ttc atg ctt gaa gtt tta atg 3232
Arg Asp Ile Lys Glu Cys Leu Trp Phe Met Leu Glu Val Leu Met
1025 1030 1035
aca aag aat gaa aac aat agc cat gca ttt atg aag aag atg gca 3277
Thr Lys Asn Glu Asn Asn Ser His Ala Phe Met Lys Lys Met Ala
1040 1045 1050
gag aac atc aag tta aca aaa gat gcc cag tct cca gat gaa tcc 3322
Glu Asn Ile Lys Leu Thr Lys Asp Ala Gln Ser Pro Asp Glu Ser
1055 1060 1065
aag atg aat gaa aaa ctt tat aca gta tgt gat gtg gct ctg tgt 3367
Lys Met Asn Glu Lys Leu Tyr Thr Val Cys Asp Val Ala Leu Cys
1070 1075 1080
gtt ata aat agt aaa agt gct ttg tgc aat gca gat tca cca aag 3412
Val Ile Asn Ser Lys Ser Ala Leu Cys Asn Ala Asp Ser Pro Lys
1085 1090 1095
gat cca gtc ctt cca atg aaa ttt ttt aca caa cct gaa aag gat 3457
Asp Pro Val Leu Pro Met Lys Phe Phe Thr Gln Pro Glu Lys Asp
1100 1105 1110
ttc tgt aat gac aag agt tat att tca gaa gag acc aga gta ctt 3502
Phe Cys Asn Asp Lys Ser Tyr Ile Ser Glu Glu Thr Arg Val Leu
1115 1120 1125
ctg tta aca gga aag cca aaa cct gct gga gta cta ggt gca gta 3547
Leu Leu Thr Gly Lys Pro Lys Pro Ala Gly Val Leu Gly Ala Val
1130 1135 1140
aac aag cct tta tca gca aca gga aga aaa cca tat gta aga agc 3592
Asn Lys Pro Leu Ser Ala Thr Gly Arg Lys Pro Tyr Val Arg Ser
1145 1150 1155
act gga gct gag act gga agc aat att aat gta aat tca gag ctg 3637
Thr Gly Ala Glu Thr Gly Ser Asn Ile Asn Val Asn Ser Glu Leu
1160 1165 1170
aac cct tca acc gga aat cga tca agg gaa caa agt tca gag gca 3682
Asn Pro Ser Thr Gly Asn Arg Ser Arg Glu Gln Ser Ser Glu Ala
1175 1180 1185
gta gaa act gga gtt agt gaa aat gaa gag aac cct gtg aga att 3727
Val Glu Thr Gly Val Ser Glu Asn Glu Glu Asn Pro Val Arg Ile
1190 1195 1200
att tct gtc aca cct gta aaa aat att gac cca gta aag aat aag 3772
Ile Ser Val Thr Pro Val Lys Asn Ile Asp Pro Val Lys Asn Lys
1205 1210 1215
gag att aat tct gat cag act acc cag ggc aac atc agc agt gac 3817
Glu Ile Asn Ser Asp Gln Thr Thr Gln Gly Asn Ile Ser Ser Asp
1220 1225 1230
cga gga aag aag aga agt gta gca gca gct ggt aca gag aac atc 3862
Arg Gly Lys Lys Arg Ser Val Ala Ala Ala Gly Thr Glu Asn Ile
1235 1240 1245
caa caa aaa aca gat gag aaa gta gac gaa tca gga cca cct gcc 3907
Gln Gln Lys Thr Asp Glu Lys Val Asp Glu Ser Gly Pro Pro Ala
1250 1255 1260
cct tca aaa ccc agg aga gga cgc cga ccc aag tct gaa tct cag 3952
Pro Ser Lys Pro Arg Arg Gly Arg Arg Pro Lys Ser Glu Ser Gln
1265 1270 1275
ggc aat gca acc aaa aat gat gac ata aac aaa cct ctt ggc aag 3997
Gly Asn Ala Thr Lys Asn Asp Asp Ile Asn Lys Pro Leu Gly Lys
1280 1285 1290
gga aga aag aga gct gcg gtc agt cag gaa agc cct ggg ggt ctg 4042
Gly Arg Lys Arg Ala Ala Val Ser Gln Glu Ser Pro Gly Gly Leu
1295 1300 1305
gaa gca ggt aat gcc aaa gca ccc aaa ctg caa gat gta gcc aaa 4087
Glu Ala Gly Asn Ala Lys Ala Pro Lys Leu Gln Asp Val Ala Lys
1310 1315 1320
aag gca gta cca gca gag aga cag att gac tta caa agg taa 4129
Lys Ala Val Pro Ala Glu Arg Gln Ile Asp Leu Gln Arg
1325 1330 1335
aaagaaaact catttgcaaa gggaaaaaat gaaggccaaa cagaagcaca gactccagct 4189
tctgcaaaaa cttggattca caatgtccct gaacagaaaa tgaagttaac ttcagaacac 4249
actttctgcc ttgaaaactg aaagaaacta ttacttcctt ttcacatgac cacaagtcct 4309
ttgatggaaa tgtacagaga aactcttgag agagagagag agagagagag agagagagag 4369
agaggctaaa agcaactcta ttctatc 4396
<210> 2
<211> 1337
<212> PRT
<213> 狗（Canis familiaris）
<400> 2
Met Asp Phe Thr Ala Gln Pro Lys Pro Ala Thr Ala Leu Cys Gly Val
1 5 10 15
Val Ser Ala Asp Gly Lys Ile Ala Tyr Pro Pro Gly Val Lys Glu Ile
20 25 30
Thr Asp Lys Ile Thr Thr Asp Glu Met Ile Lys Arg Leu Lys Met Val
35 40 45
Val Lys Thr Phe Met Asp Met Asp Gln Asp Ser Glu Asp Glu Lys Gln
50 55 60
Gln Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His Leu Ala Ser Glu Phe Phe Leu Arg
65 70 75 80
Asn Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu Leu Val Ala Cys Cys Leu Ala Asp
85 90 95
Ile Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu Ala Pro Tyr Thr Ser His Asp Lys
100 105 110
Leu Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile Thr Arg Gln Leu Lys Gly Leu Glu
115 120 125
Asp Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn Arg Tyr Phe Tyr Leu Leu Glu Asn
130 135 140
Leu Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn Ile Cys Phe Glu Leu Glu Asp Cys
145 150 155 160
Asn Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe Arg Thr Leu Phe Ser Val Ile Asn
165 170 175
Asn Ser His Asn Lys Lys Val Gln Met His Met Leu Asp Leu Met Ser
180 185 190
Ser Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly Val Thr Gln Glu Leu Leu Asp Ser
195 200 205
Ile Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu Asn Lys Gln Ser
210 215 220
Phe Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu Lys Arg Thr Val Gln Thr Ile Glu
225 230 235 240
Ala Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn Gln Val Leu Val Leu Gly Arg Ser
245 250 255
Ser Val Ser Asp Leu Ser Glu His Val Phe Asp Leu Ile Gln Glu Leu
260 265 270
Phe Ala Ile Asp Pro His Leu Leu Leu Ser Val Met Pro Gln Leu Glu
275 280 285
Phe Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly Glu Glu Arg Leu Ala Val Val Arg
290 295 300
Leu Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser Lys Asp Ser Asp Leu Ala Thr Gln
305 310 315 320
Asn Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe Leu Gly Arg Phe Asn Asp Ile His
325 330 335
Val Pro Val Arg Leu Glu Ser Val Lys Phe Ala Ser His Cys Leu Met
340 345 350
Asn His Pro Asp Leu Ala Lys Asp Leu Thr Glu Tyr Leu Lys Val Arg
355 360 365
Ser His Asp Pro Glu Glu Ala Ile Arg His Asp Val Ile Val Thr Ile
370 375 380
Ile Thr Ala Ala Lys Arg Asp Leu Ala Leu Val Asn Asp Gln Leu Leu
385 390 395 400
Gly Phe Val Arg Glu Arg Thr Leu Asp Lys Arg Trp Arg Val Arg Lys
405 410 415
Glu Ala Met Met Gly Leu Ala Gln Leu Tyr Lys Lys Tyr Cys Leu His
420 425 430
Gly Glu Ala Gly Lys Glu Ala Ala Glu Lys Val Ser Trp Ile Lys Asp
435 440 445
Lys Leu Leu His Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser Ile Asp Asp Lys Leu Leu
450 455 460
Val Glu Lys Ile Phe Ala Gln Tyr Leu Val Pro His Asn Leu Glu Thr
465 470 475 480
Glu Glu Arg Met Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu Tyr Ala Ser Leu Asp Pro
485 490 495
Asn Ala Val Lys Ala Leu Asn Glu Met Trp Lys Cys Gln Asn Met Leu
500 505 510
Arg Ser His Val Arg Glu Leu Leu Asp Leu His Lys Gln Pro Thr Ser
515 520 525
Glu Ala Asn Cys Ser Ala Met Phe Gly Lys Leu Met Thr Ile Ala Lys
530 535 540
Asn Leu Pro Asp Pro Gly Lys Ala Gln Asp Phe Val Lys Lys Phe Asn
545 550 555 560
Gln Val Leu Gly Asp Asp Glu Lys Leu Arg Ser Gln Leu Glu Leu Leu
565 570 575
Ile Ser Pro Thr Cys Ser Cys Lys Gln Ala Asp Val Cys Val Arg Glu
580 585 590
Ile Ala Arg Lys Leu Ala Asn Pro Lys Gln Pro Thr Asn Pro Phe Leu
595 600 605
Glu Met Val Lys Phe Leu Leu Glu Arg Ile Ala Pro Val His Ile Asp
610 615 620
Ser Glu Ala Ile Ser Ala Leu Val Lys Leu Met Asn Lys Ser Ile Glu
625 630 635 640
Gly Thr Ala Asp Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Pro Asp Thr Ala Ile
645 650 655
Arg Ser Gly Leu Glu Leu Leu Lys Val Leu Ser Phe Thr His Pro Thr
660 665 670
Ser Phe His Ser Ala Glu Thr Tyr Glu Ser Leu Leu Gln Cys Leu Arg
675 680 685
Met Glu Asp Asp Lys Val Ala Glu Ala Ala Ile Gln Ile Phe Arg Asn
690 695 700
Thr Gly His Lys Ile Glu Thr Asp Leu Pro Gln Ile Arg Ser Thr Leu
705 710 715 720
Ile Pro Ile Leu His Gln Lys Ala Lys Arg Gly Thr Pro His Gln Ala
725 730 735
Lys Gln Ala Val His Cys Ile His Ala Ile Phe Thr Asn Lys Glu Val
740 745 750
Gln Leu Ala Gln Ile Phe Glu Pro Leu Ser Arg Ser Leu Asn Ala Asp
755 760 765
Val Pro Glu Gln Leu Ile Thr Pro Leu Val Ser Leu Gly His Ile Ser
770 775 780
Met Leu Ala Pro Asp Gln Phe Ala Ser Pro Met Lys Ser Val Val Ala
785 790 795 800
Asn Phe Ile Val Lys Asp Leu Leu Met Asn Asp Arg Ser Thr Gly Glu
805 810 815
Lys Asn Gly Lys Leu Trp Ser Pro Asp Glu Glu Val Ser Pro Glu Val
820 825 830
Leu Ala Lys Val Gln Ala Ile Lys Leu Leu Val Arg Trp Leu Leu Gly
835 840 845
Met Lys Asn Asn Gln Ser Lys Ser Ala Asn Ser Thr Leu Arg Leu Leu
850 855 860
Ser Ala Met Leu Val Ser Glu Gly Asp Leu Thr Glu Gln Lys Arg Ile
865 870 875 880
Ser Lys Ser Asp Met Ser Arg Leu Arg Leu Ala Ala Gly Ser Ala Ile
885 890 895
Met Lys Leu Ala Gln Glu Pro Cys Tyr His Glu Ile Ile Thr Pro Glu
900 905 910
Gln Phe Gln Leu Cys Ala Leu Val Ile Asn Asp Glu Cys Tyr Gln Val
915 920 925
Arg Gln Ile Phe Ala Gln Lys Leu His Lys Ala Leu Val Lys Leu Leu
930 935 940
Leu Pro Leu Glu Tyr Met Ala Ile Phe Ala Leu Cys Ala Lys Asp Pro
945 950 955 960
Val Lys Glu Arg Arg Ala His Ala Arg Gln Cys Leu Leu Lys Asn Ile
965 970 975
Ser Ile Arg Arg Glu Tyr Ile Lys Gln Asn Pro Met Ala Thr Glu Lys
980 985 990
Leu Leu Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val Pro Tyr Met Ile His Leu
995 1000 1005
Leu Ala His Asp Pro Asp Phe Thr Arg Ser Gln Asp Val Asp Gln
1010 1015 1020
Leu Arg Asp Ile Lys Glu Cys Leu Trp Phe Met Leu Glu Val Leu
1025 1030 1035
Met Thr Lys Asn Glu Asn Asn Ser His Ala Phe Met Lys Lys Met
1040 1045 1050
Ala Glu Asn Ile Lys Leu Thr Lys Asp Ala Gln Ser Pro Asp Glu
1055 1060 1065
Ser Lys Met Asn Glu Lys Leu Tyr Thr Val Cys Asp Val Ala Leu
1070 1075 1080
Cys Val Ile Asn Ser Lys Ser Ala Leu Cys Asn Ala Asp Ser Pro
1085 1090 1095
Lys Asp Pro Val Leu Pro Met Lys Phe Phe Thr Gln Pro Glu Lys
1100 1105 1110
Asp Phe Cys Asn Asp Lys Ser Tyr Ile Ser Glu Glu Thr Arg Val
1115 1120 1125
Leu Leu Leu Thr Gly Lys Pro Lys Pro Ala Gly Val Leu Gly Ala
1130 1135 1140
Val Asn Lys Pro Leu Ser Ala Thr Gly Arg Lys Pro Tyr Val Arg
1145 1150 1155
Ser Thr Gly Ala Glu Thr Gly Ser Asn Ile Asn Val Asn Ser Glu
1160 1165 1170
Leu Asn Pro Ser Thr Gly Asn Arg Ser Arg Glu Gln Ser Ser Glu
1175 1180 1185
Ala Val Glu Thr Gly Val Ser Glu Asn Glu Glu Asn Pro Val Arg
1190 1195 1200
Ile Ile Ser Val Thr Pro Val Lys Asn Ile Asp Pro Val Lys Asn
1205 1210 1215
Lys Glu Ile Asn Ser Asp Gln Thr Thr Gln Gly Asn Ile Ser Ser
1220 1225 1230
Asp Arg Gly Lys Lys Arg Ser Val Ala Ala Ala Gly Thr Glu Asn
1235 1240 1245
Ile Gln Gln Lys Thr Asp Glu Lys Val Asp Glu Ser Gly Pro Pro
1250 1255 1260
Ala Pro Ser Lys Pro Arg Arg Gly Arg Arg Pro Lys Ser Glu Ser
1265 1270 1275
Gln Gly Asn Ala Thr Lys Asn Asp Asp Ile Asn Lys Pro Leu Gly
1280 1285 1290
Lys Gly Arg Lys Arg Ala Ala Val Ser Gln Glu Ser Pro Gly Gly
1295 1300 1305
Leu Glu Ala Gly Asn Ala Lys Ala Pro Lys Leu Gln Asp Val Ala
1310 1315 1320
Lys Lys Ala Val Pro Ala Glu Arg Gln Ile Asp Leu Gln Arg
1325 1330 1335
<210> 3
<211> 6726
<212> DNA
<213> 人（Homo sapiens）
<220>
<221> CDS
<222> (197)..(4090)
<223>
<400> 3
ccggctcccg gggcacggac ggccgggcgc gcgcctctgc gaggggcgtc cgggtccgag 60
tcggcggtcc gggccggcgc gaggtgcgtg cgggcgggcc gcgggggtcc cggacggaca 120
caagcgcaca cactcccgga agatcgctta ccctccgggg gtaaaagaga tcaccgacaa 180
gatcaccacg gacgag atg atc aaa cgc ctg aag atg gta gtg aaa acc ttt 232
Met Ile Lys Arg Leu Lys Met Val Val Lys Thr Phe
1 5 10
atg gat atg gat cag gac tca gaa gat gaa aaa cag cag tat ctc cca 280
Met Asp Met Asp Gln Asp Ser Glu Asp Glu Lys Gln Gln Tyr Leu Pro
15 20 25
cta gcc ttg cat ctt gca tct gaa ttc ttc ctc agg aac ccc aat aaa 328
Leu Ala Leu His Leu Ala Ser Glu Phe Phe Leu Arg Asn Pro Asn Lys
30 35 40
gat gtg cgt ctc ctt gta gca tgt tgt ttg gct gat atc ttt cgt atc 376
Asp Val Arg Leu Leu Val Ala Cys Cys Leu Ala Asp Ile Phe Arg Ile
45 50 55 60
tat gcc cca gaa gct cca tat act tcc cat gat aaa ctt aag gac ata 424
Tyr Ala Pro Glu Ala Pro Tyr Thr Ser His Asp Lys Leu Lys Asp Ile
65 70 75
ttt ttg ttt att acc aga caa tta aaa ggt ttg gag gat aca aag agt 472
Phe Leu Phe Ile Thr Arg Gln Leu Lys Gly Leu Glu Asp Thr Lys Ser
80 85 90
cca cag ttt aat aga tac ttt tat tta tta gag aat tta gct tgg gtt 520
Pro Gln Phe Asn Arg Tyr Phe Tyr Leu Leu Glu Asn Leu Ala Trp Val
95 100 105
aaa tca tat aac atc tgc ttt gaa ttg gaa gat tgc aat gaa att ttt 568
Lys Ser Tyr Asn Ile Cys Phe Glu Leu Glu Asp Cys Asn Glu Ile Phe
110 115 120
att cag ctt ttt aga act ctc ttc tca gtg atc aac aat agc cac aat 616
Ile Gln Leu Phe Arg Thr Leu Phe Ser Val Ile Asn Asn Ser His Asn
125 130 135 140
aag aag gta caa atg cac atg cta gat ttg atg agt tct atc atc atg 664
Lys Lys Val Gln Met His Met Leu Asp Leu Met Ser Ser Ile Ile Met
145 150 155
gaa ggt gat gga gtt act caa gaa tta ttg gac tcc att ctt att aac 712
Glu Gly Asp Gly Val Thr Gln Glu Leu Leu Asp Ser Ile Leu Ile Asn
160 165 170
ctc att cct gca cat aag aac tta aat aaa cag tcc ttt gac ctt gca 760
Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu Asn Lys Gln Ser Phe Asp Leu Ala
175 180 185
aaa gtg cta ttg aaa aga aca gtc cag act att gag gca tgc att gct 808
Lys Val Leu Leu Lys Arg Thr Val Gln Thr Ile Glu Ala Cys Ile Ala
190 195 200
aat ttt ttc aat caa gtc ctg gtg ctg gga aga tca tca gta agt gat 856
Asn Phe Phe Asn Gln Val Leu Val Leu Gly Arg Ser Ser Val Ser Asp
205 210 215 220
ttg tca gaa cat gta ttt gat ctg att cag gaa ctt ttt gct ata gat 904
Leu Ser Glu His Val Phe Asp Leu Ile Gln Glu Leu Phe Ala Ile Asp
225 230 235
cct cat tta tta tta tcc gtc atg cca cag ctt gaa ttc aaa cta aag 952
Pro His Leu Leu Leu Ser Val Met Pro Gln Leu Glu Phe Lys Leu Lys
240 245 250
agc aat gat gga gaa gag cga tta gct gtt gtt cga ctt cta gct aaa 1000
Ser Asn Asp Gly Glu Glu Arg Leu Ala Val Val Arg Leu Leu Ala Lys
255 260 265
ttg ttt ggc tcc aaa gat tct gat ttg gca aca cag aat cgt cct ctt 1048
Leu Phe Gly Ser Lys Asp Ser Asp Leu Ala Thr Gln Asn Arg Pro Leu
270 275 280
tgg caa tgt ttt ctt gga cga ttt aat gat att cat gtt cct gtg aga 1096
Trp Gln Cys Phe Leu Gly Arg Phe Asn Asp Ile His Val Pro Val Arg
285 290 295 300
tta gaa agt gtg aaa ttt gcc agt cat tgt tta atg aat cac cca gat 1144
Leu Glu Ser Val Lys Phe Ala Ser His Cys Leu Met Asn His Pro Asp
305 310 315
tta gcg aag gat ctc aca gaa tat tta aag gtt aga tca cat gat cca 1192
Leu Ala Lys Asp Leu Thr Glu Tyr Leu Lys Val Arg Ser His Asp Pro
320 325 330
gaa gaa gct att cgt cat gat gtc att gtt act ata ata aca gct gcc 1240
Glu Glu Ala Ile Arg His Asp Val Ile Val Thr Ile Ile Thr Ala Ala
335 340 345
aag agg gac ctg gcc tta gta aat gat cag ctg ctt ggc ttt gta agg 1288
Lys Arg Asp Leu Ala Leu Val Asn Asp Gln Leu Leu Gly Phe Val Arg
350 355 360
gaa aga aca ctg gat aaa cgg tgg cga gta aga aaa gaa gct atg atg 1336
Glu Arg Thr Leu Asp Lys Arg Trp Arg Val Arg Lys Glu Ala Met Met
365 370 375 380
ggt ctg gct cag ctt tat aag aaa tac tgt ctt cat ggt gaa gca gga 1384
Gly Leu Ala Gln Leu Tyr Lys Lys Tyr Cys Leu His Gly Glu Ala Gly
385 390 395
aag gaa gct gca gag aaa gtc agc tgg ata aag gac aaa ctt ctg cat 1432
Lys Glu Ala Ala Glu Lys Val Ser Trp Ile Lys Asp Lys Leu Leu His
400 405 410
att tat tat cag aac agc att gac gac aaa ctg ttg gta gag aaa atc 1480
Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser Ile Asp Asp Lys Leu Leu Val Glu Lys Ile
415 420 425
ttt gct cag tat ctt gtc ccc cac aac ctg gaa aca gaa gag aga atg 1528
Phe Ala Gln Tyr Leu Val Pro His Asn Leu Glu Thr Glu Glu Arg Met
430 435 440
aaa tgc tta tat tac tta tat gct agt ttg gat cca aat gct gta aaa 1576
Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu Tyr Ala Ser Leu Asp Pro Asn Ala Val Lys
445 450 455 460
gct ctc aac gaa atg tgg aag tgt cag aac atg ctt cgg agc cat gta 1624
Ala Leu Asn Glu Met Trp Lys Cys Gln Asn Met Leu Arg Ser His Val
465 470 475
cgc gaa cta ttg gat ttg cac aag cag cct aca tca gag gct aac tgt 1672
Arg Glu Leu Leu Asp Leu His Lys Gln Pro Thr Ser Glu Ala Asn Cys
480 485 490
tct gcc atg ttt gga aaa ctg atg acc ata gca aag aat ttg cct gac 1720
Ser Ala Met Phe Gly Lys Leu Met Thr Ile Ala Lys Asn Leu Pro Asp
495 500 505
ccc ggg aaa gca caa gat ttt gtg aag aaa ttt aac cag gtt ctc ggc 1768
Pro Gly Lys Ala Gln Asp Phe Val Lys Lys Phe Asn Gln Val Leu Gly
510 515 520
gat gat gag aaa ctt cgg tct cag ttg gag tta tta att agc cca acc 1816
Asp Asp Glu Lys Leu Arg Ser Gln Leu Glu Leu Leu Ile Ser Pro Thr
525 530 535 540
tgt tct tgc aaa caa gca gat att tgt gtg aga gaa ata gcc cgg aaa 1864
Cys Ser Cys Lys Gln Ala Asp Ile Cys Val Arg Glu Ile Ala Arg Lys
545 550 555
ctt gca aat cct aag caa cca aca aat cct ttt cta gag atg gtc aaa 1912
Leu Ala Asn Pro Lys Gln Pro Thr Asn Pro Phe Leu Glu Met Val Lys
560 565 570
ttt ctg ttg gaa aga atc gca cct gtg cac att gat tca gaa gcc ata 1960
Phe Leu Leu Glu Arg Ile Ala Pro Val His Ile Asp Ser Glu Ala Ile
575 580 585
agt gca cta gtg aaa ttg atg aat aag tca ata gag ggg aca gca gat 2008
Ser Ala Leu Val Lys Leu Met Asn Lys Ser Ile Glu Gly Thr Ala Asp
590 595 600
gat gaa gag gag ggt gta agt cca gat aca gct atc cgt tca gga ctt 2056
Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Pro Asp Thr Ala Ile Arg Ser Gly Leu
605 610 615 620
gaa ctt ctt aag gtt ctg tct ttt aca cat cct acc tcg ttc cac tct 2104
Glu Leu Leu Lys Val Leu Ser Phe Thr His Pro Thr Ser Phe His Ser
625 630 635
gca gag aca tat gag tcc ttg tta cag tgc cta aga atg gag gat gac 2152
Ala Glu Thr Tyr Glu Ser Leu Leu Gln Cys Leu Arg Met Glu Asp Asp
640 645 650
aag gta gca gaa gct gct att caa att ttt aga aat aca ggt cac aaa 2200
Lys Val Ala Glu Ala Ala Ile Gln Ile Phe Arg Asn Thr Gly His Lys
655 660 665
ata gaa aca gac ctt ccc cag ata cga tcg acc tta att ccc att tta 2248
Ile Glu Thr Asp Leu Pro Gln Ile Arg Ser Thr Leu Ile Pro Ile Leu
670 675 680
cat caa aaa gca aag agg ggt act cca cac caa gca aaa cag gct gtg 2296
His Gln Lys Ala Lys Arg Gly Thr Pro His Gln Ala Lys Gln Ala Val
685 690 695 700
cac tgt ata cac gcc ata ttc aca aat aaa gaa gtc cag ctt gca cag 2344
His Cys Ile His Ala Ile Phe Thr Asn Lys Glu Val Gln Leu Ala Gln
705 710 715
att ttt gag cca ctc agt agg agt ctg aat gct gat gtg cca gaa caa 2392
Ile Phe Glu Pro Leu Ser Arg Ser Leu Asn Ala Asp Val Pro Glu Gln
720 725 730
ctt ata act cca tta gtt tca ttg ggc cac att tct atg tta gca cca 2440
Leu Ile Thr Pro Leu Val Ser Leu Gly His Ile Ser Met Leu Ala Pro
735 740 745
gat cag ttt gct tcc cca atg aaa tct gta gta gca aat ttt att gtg 2488
Asp Gln Phe Ala Ser Pro Met Lys Ser Val Val Ala Asn Phe Ile Val
750 755 760
aaa gat ctg cta atg aat gac agg tca aca ggt gaa aag aat gga aaa 2536
Lys Asp Leu Leu Met Asn Asp Arg Ser Thr Gly Glu Lys Asn Gly Lys
765 770 775 780
ctg tgg tct cca gat gaa gag gtt tcc cct gaa gta cta gca aag gta 2584
Leu Trp Ser Pro Asp Glu Glu Val Ser Pro Glu Val Leu Ala Lys Val
785 790 795
cag gca att aaa ctt ctg gta agg tgg ctg ttg ggt atg aaa aac aac 2632
Gln Ala Ile Lys Leu Leu Val Arg Trp Leu Leu Gly Met Lys Asn Asn
800 805 810
cag tct aaa tct gcc aat tca acc ctt cgg tta tta tca gcg atg ttg 2680
Gln Ser Lys Ser Ala Asn Ser Thr Leu Arg Leu Leu Ser Ala Met Leu
815 820 825
gtt agt gag ggt gac ctg aca gag caa aag agg atc agt aaa tct gat 2728
Val Ser Glu Gly Asp Leu Thr Glu Gln Lys Arg Ile Ser Lys Ser Asp
830 835 840
atg tct cgc ttg cga tta gct gct ggt agt gcc ata atg aag ctt gct 2776
Met Ser Arg Leu Arg Leu Ala Ala Gly Ser Ala Ile Met Lys Leu Ala
845 850 855 860
cag gaa cct tgt tac cat gaa att att acc cca gaa cag ttt cag ctc 2824
Gln Glu Pro Cys Tyr His Glu Ile Ile Thr Pro Glu Gln Phe Gln Leu
865 870 875
tgt gca ctt gtt att aat gat gag tgt tac caa gta agg cag ata ttt 2872
Cys Ala Leu Val Ile Asn Asp Glu Cys Tyr Gln Val Arg Gln Ile Phe
880 885 890
gct cag aag ctg cat aag gca ctt gtg aag tta ctg ctc cca ttg gag 2920
Ala Gln Lys Leu His Lys Ala Leu Val Lys Leu Leu Leu Pro Leu Glu
895 900 905
tat atg gcg atc ttt gcc ttg tgt gcc aaa gat cct gtg aag gag aga 2968
Tyr Met Ala Ile Phe Ala Leu Cys Ala Lys Asp Pro Val Lys Glu Arg
910 915 920
aga gca cac gca cga caa tgt tta ctg aaa aat atc agt ata cgc agg 3016
Arg Ala His Ala Arg Gln Cys Leu Leu Lys Asn Ile Ser Ile Arg Arg
925 930 935 940
gaa tac att aag cag aat cct atg gct act gag aaa tta tta tca ctg 3064
Glu Tyr Ile Lys Gln Asn Pro Met Ala Thr Glu Lys Leu Leu Ser Leu
945 950 955
ttg cct gaa tat gta gtt cca tac atg att cac ctg cta gcc cat gat 3112
Leu Pro Glu Tyr Val Val Pro Tyr Met Ile His Leu Leu Ala His Asp
960 965 970
cca gat ttt aca aga tca caa gat gtt gat cag ctt cgt gat atc aaa 3160
Pro Asp Phe Thr Arg Ser Gln Asp Val Asp Gln Leu Arg Asp Ile Lys
975 980 985
gag tgc cta tgg ttc atg ctt gaa gtt tta atg aca aag aat gaa aac 3208
Glu Cys Leu Trp Phe Met Leu Glu Val Leu Met Thr Lys Asn Glu Asn
990 995 1000
aat agc cat gcc ttt atg aag aag atg gca gag aac atc aag tta 3253
Asn Ser His Ala Phe Met Lys Lys Met Ala Glu Asn Ile Lys Leu
1005 1010 1015
acc aga gat gcc cag tct cca gat gaa tcc aag aca aat gaa aaa 3298
Thr Arg Asp Ala Gln Ser Pro Asp Glu Ser Lys Thr Asn Glu Lys
1020 1025 1030
ctg tat aca gta tgt gat gtg gct ctc tgt gtt ata aat agt aaa 3343
Leu Tyr Thr Val Cys Asp Val Ala Leu Cys Val Ile Asn Ser Lys
1035 1040 1045
agt gct ttg tgc aat gca gat tca cca aag gac cca gtc ctc cca 3388
Ser Ala Leu Cys Asn Ala Asp Ser Pro Lys Asp Pro Val Leu Pro
1050 1055 1060
atg aaa ttt ttt aca caa cct gaa aag gac ttc tgt aac gat aag 3433
Met Lys Phe Phe Thr Gln Pro Glu Lys Asp Phe Cys Asn Asp Lys
1065 1070 1075
agt tat att tca gaa gag aca aga gta ctt ctg tta aca gga aag 3478
Ser Tyr Ile Ser Glu Glu Thr Arg Val Leu Leu Leu Thr Gly Lys
1080 1085 1090
cca aag cct gct gga gta cta ggt gca gta aat aag cct tta tca 3523
Pro Lys Pro Ala Gly Val Leu Gly Ala Val Asn Lys Pro Leu Ser
1095 1100 1105
gca acg gga agg aaa ccc tat gtt aga agc act ggc act gag act 3568
Ala Thr Gly Arg Lys Pro Tyr Val Arg Ser Thr Gly Thr Glu Thr
1110 1115 1120
gga agc aat att aat gta aat tca gag ctg aac cct tca acc gga 3613
Gly Ser Asn Ile Asn Val Asn Ser Glu Leu Asn Pro Ser Thr Gly
1125 1130 1135
aat cga tca agg gaa cag agt tca gag gca gca gaa act gga gtt 3658
Asn Arg Ser Arg Glu Gln Ser Ser Glu Ala Ala Glu Thr Gly Val
1140 1145 1150
agt gaa aat gaa gag aac cct gtg agg att att tca gtc aca cct 3703
Ser Glu Asn Glu Glu Asn Pro Val Arg Ile Ile Ser Val Thr Pro
1155 1160 1165
gta aag aat att gac cca gta aag aat aag gaa att aat tct gat 3748
Val Lys Asn Ile Asp Pro Val Lys Asn Lys Glu Ile Asn Ser Asp
1170 1175 1180
cag gct acc cag ggc aac atc agc agt gac cga gga aag aaa aga 3793
Gln Ala Thr Gln Gly Asn Ile Ser Ser Asp Arg Gly Lys Lys Arg
1185 1190 1195
aca gta aca gca gct ggt gca gag aat atc caa caa aaa aca gat 3838
Thr Val Thr Ala Ala Gly Ala Glu Asn Ile Gln Gln Lys Thr Asp
1200 1205 1210
gag aaa gta gat gaa tcg gga cct ccc gcc cct tcc aaa ccc agg 3883
Glu Lys Val Asp Glu Ser Gly Pro Pro Ala Pro Ser Lys Pro Arg
1215 1220 1225
aga gga cgt cga ccc aag tct gaa tct cag ggc aat gct acc aaa 3928
Arg Gly Arg Arg Pro Lys Ser Glu Ser Gln Gly Asn Ala Thr Lys
1230 1235 1240
aat gat gat cta aat aaa cct att aac aag gga agg aag aga gct 3973
Asn Asp Asp Leu Asn Lys Pro Ile Asn Lys Gly Arg Lys Arg Ala
1245 1250 1255
gca gtg ggt cag gag agc cct ggg ggt ttg gaa gca ggt aat gcc 4018
Ala Val Gly Gln Glu Ser Pro Gly Gly Leu Glu Ala Gly Asn Ala
1260 1265 1270
aaa gca ccc aaa ctg caa gat tta gcc aaa aag gca gca cca gca 4063
Lys Ala Pro Lys Leu Gln Asp Leu Ala Lys Lys Ala Ala Pro Ala
1275 1280 1285
gaa aga caa att gac tta caa agg taa aaatgcattt gcaaagggag 4110
Glu Arg Gln Ile Asp Leu Gln Arg
1290 1295
aaaatgaagg ccaaacagaa gcaggctcca gcttctgcaa aaacttggat tcacaaatgt 4170
ccctgaacag aaaatgaagc tcacttcaga acacacactc tctgccttga aaactaaaga 4230
gactattact tccttttcac atgaccacaa gtcctctgat ggaaatgtac agcagaaact 4290
cttgagagag aggctaaaag caactctgtt ctcccccttc ccctagactt ttcttacgaa 4350
aagtcaataa ttaagcaaat tgcttaacac ttggttccag ttcctgccta tctggagttt 4410
aaatgcgtaa tacaccatta atttccacgc tgcagttttt attttaaaga aagtaacaag 4470
atgtctttac actgacactg aaaattcatc cattttagag ccaggaattc ccatgttaca 4530
caggaaaaaa tagaagtcta ctgaattaat tttttaaaag aaaagagatc agattaaata 4590
tttctttgtt tttccttttg gaaactttta tgtataattc tttctgcctg cctacttttc 4650
tgcaaaaatg agatgtacag atttcggttc cctgctatga aaagtgatgt ggtagcaatt 4710
ttataaatgt tgctttctga tttttatcag agtgagaaaa ttaaaattat tgatttgcaa 4770
gtagtaaaca gttcatattt tgatttcccc tcattttagt ttaatataat ttgcaataaa 4830
tgtacatatt gttgtttgtt tcataaagca tatcacttta aaatggtttt tactcctgtg 4890
attatgttgg aatatttgga attttaaagg agtaaagact gtccagcatt tggttttata 4950
atgtttgtca ccagattttt attaatgtaa aaaaaatcaa tttttaaaaa atagttggac 5010
tttggcagct tttaaggaaa gttggaggtg ttttaggatt gctatcaatt ttcagcattg 5070
tgctatttgg aaataagtgt tttgcttttg tctgatggtc tgggctcatt tttatgttta 5130
ttttagaaaa ctgttgcatc aatatattat gtttcttggc attgttcagc ataggtaatg 5190
tgtgcacttt atgtgtacac ataatcatat ttaagttttt tgcataaaat aaatgcttct 5250
agatgtcatg gcagtctttt taatcttttt atcatatgct ttcttgtgaa ttttttcatg 5310
ttaaagagct aaagtcataa catgattaca gtcaactctc cattatctat ataaaatagt 5370
gactaagcct caggttttta attttgtgat aacaaaataa cgaaggcatg taagacctga 5430
ttctggagga acatgaaatt tgtcttttct catgtccaga gttctatcct gcccccactg 5490
tccactgtag ggtcatccgc aaagccctag cagaatgtgc tcactccatt tccttacacg 5550
tttctagcat gggtcagagg aaacaacatt tgtgttataa cttcgtcttg ataggctgta 5610
gtgtacatgg gatgtaaaac aaacaagtgt atcaaaggtg gatgattctg ttagagtgaa 5670
gtttgagagt aaatgtcact tacgtttctc atagataatc aagagttggc tgtgtattga 5730
ctgaaagatg ggtaattatt ttaaatatgc atttacacac atttaggtat cagaagatgc 5790
ttagggaaca atggatacca atgatagaaa atgatacctt tacaggggca gaaaaatccc 5850
cactcttcct tattgcctct tcagaaccct ttagaaagta taaaatattg cctccaacat 5910
gctgaaaaag agtatctatg cataagtatc agagaagtcc ctcaagcaat cagtaggtgt 5970
gttctattta gagagagttt aaagttctct tagcatcaga caacttgatt cctaaggttt 6030
ccagtgtgtc accaacaaaa agtgcattga tagggacctt tgtctcttcc tccctttgat 6090
taattgcccg gcatcacagt ttactagatt accaagtgtt acatcatatt aaataaaatg 6150
tagcagaacc atctgcatca atatattcct gtttagattt ttgcaggaga gaagttaaaa 6210
ggatttgctc cttgtatgat gtaagtggcc caccccaatt ttgtaacatg atgcaagtgt 6270
ctggcactaa gggaagcaag agtagggttg tggaaagacc aagctgatgg ggagggactt 6330
gtttacggga atttttttag ttttcctttt caaaggaaaa cattaaaatc ccttaggaat 6390
ttggtattca catctcagag aactacaaca caaaagtgca gacttatatt tgagaattaa 6450
tgttaaccct ttgtgtctag tttgaagctt cttgtatttg tctaaaacaa caagccagaa 6510
ttttgtatct cctttgataa aaagtgtgta taatgtaaag tagttttgca tattcttgtg 6570
ctgcacatgg gctgaatttt taaatttttt ttaaaaactt gaagcagaac cttgtaattt 6630
gtgtaaatga caagtgtaaa atcctaccat aaaatgctaa aaatatgcac tgtttcaaat 6690
aaaaccaaga aatgcagcat taaaaaaaaa aaaaaa 6726
<210> 4
<211> 1297
<212> PRT
<213> 人（Homo sapiens）
<400> 4
Met Ile Lys Arg Leu Lys Met Val Val Lys Thr Phe Met Asp Met Asp
1 5 10 15
Gln Asp Ser Glu Asp Glu Lys Gln Gln Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His
20 25 30
Leu Ala Ser Glu Phe Phe Leu Arg Asn Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu
35 40 45
Leu Val Ala Cys Cys Leu Ala Asp Ile Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu
50 55 60
Ala Pro Tyr Thr Ser His Asp Lys Leu Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile
65 70 75 80
Thr Arg Gln Leu Lys Gly Leu Glu Asp Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn
85 90 95
Arg Tyr Phe Tyr Leu Leu Glu Asn Leu Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn
100 105 110
Ile Cys Phe Glu Leu Glu Asp Cys Asn Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe
115 120 125
Arg Thr Leu Phe Ser Val Ile Asn Asn Ser His Asn Lys Lys Val Gln
130 135 140
Met His Met Leu Asp Leu Met Ser Ser Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly
145 150 155 160
Val Thr Gln Glu Leu Leu Asp Ser Ile Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala
165 170 175
His Lys Asn Leu Asn Lys Gln Ser Phe Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu
180 185 190
Lys Arg Thr Val Gln Thr Ile Glu Ala Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn
195 200 205
Gln Val Leu Val Leu Gly Arg Ser Ser Val Ser Asp Leu Ser Glu His
210 215 220
Val Phe Asp Leu Ile Gln Glu Leu Phe Ala Ile Asp Pro His Leu Leu
225 230 235 240
Leu Ser Val Met Pro Gln Leu Glu Phe Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly
245 250 255
Glu Glu Arg Leu Ala Val Val Arg Leu Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser
260 265 270
Lys Asp Ser Asp Leu Ala Thr Gln Asn Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe
275 280 285
Leu Gly Arg Phe Asn Asp Ile His Val Pro Val Arg Leu Glu Ser Val
290 295 300
Lys Phe Ala Ser His Cys Leu Met Asn His Pro Asp Leu Ala Lys Asp
305 310 315 320
Leu Thr Glu Tyr Leu Lys Val Arg Ser His Asp Pro Glu Glu Ala Ile
325 330 335
Arg His Asp Val Ile Val Thr Ile Ile Thr Ala Ala Lys Arg Asp Leu
340 345 350
Ala Leu Val Asn Asp Gln Leu Leu Gly Phe Val Arg Glu Arg Thr Leu
355 360 365
Asp Lys Arg Trp Arg Val Arg Lys Glu Ala Met Met Gly Leu Ala Gln
370 375 380
Leu Tyr Lys Lys Tyr Cys Leu His Gly Glu Ala Gly Lys Glu Ala Ala
385 390 395 400
Glu Lys Val Ser Trp Ile Lys Asp Lys Leu Leu His Ile Tyr Tyr Gln
405 410 415
Asn Ser Ile Asp Asp Lys Leu Leu Val Glu Lys Ile Phe Ala Gln Tyr
420 425 430
Leu Val Pro His Asn Leu Glu Thr Glu Glu Arg Met Lys Cys Leu Tyr
435 440 445
Tyr Leu Tyr Ala Ser Leu Asp Pro Asn Ala Val Lys Ala Leu Asn Glu
450 455 460
Met Trp Lys Cys Gln Asn Met Leu Arg Ser His Val Arg Glu Leu Leu
465 470 475 480
Asp Leu His Lys Gln Pro Thr Ser Glu Ala Asn Cys Ser Ala Met Phe
485 490 495
Gly Lys Leu Met Thr Ile Ala Lys Asn Leu Pro Asp Pro Gly Lys Ala
500 505 510
Gln Asp Phe Val Lys Lys Phe Asn Gln Val Leu Gly Asp Asp Glu Lys
515 520 525
Leu Arg Ser Gln Leu Glu Leu Leu Ile Ser Pro Thr Cys Ser Cys Lys
530 535 540
Gln Ala Asp Ile Cys Val Arg Glu Ile Ala Arg Lys Leu Ala Asn Pro
545 550 555 560
Lys Gln Pro Thr Asn Pro Phe Leu Glu Met Val Lys Phe Leu Leu Glu
565 570 575
Arg Ile Ala Pro Val His Ile Asp Ser Glu Ala Ile Ser Ala Leu Val
580 585 590
Lys Leu Met Asn Lys Ser Ile Glu Gly Thr Ala Asp Asp Glu Glu Glu
595 600 605
Gly Val Ser Pro Asp Thr Ala Ile Arg Ser Gly Leu Glu Leu Leu Lys
610 615 620
Val Leu Ser Phe Thr His Pro Thr Ser Phe His Ser Ala Glu Thr Tyr
625 630 635 640
Glu Ser Leu Leu Gln Cys Leu Arg Met Glu Asp Asp Lys Val Ala Glu
645 650 655
Ala Ala Ile Gln Ile Phe Arg Asn Thr Gly His Lys Ile Glu Thr Asp
660 665 670
Leu Pro Gln Ile Arg Ser Thr Leu Ile Pro Ile Leu His Gln Lys Ala
675 680 685
Lys Arg Gly Thr Pro His Gln Ala Lys Gln Ala Val His Cys Ile His
690 695 700
Ala Ile Phe Thr Asn Lys Glu Val Gln Leu Ala Gln Ile Phe Glu Pro
705 710 715 720
Leu Ser Arg Ser Leu Asn Ala Asp Val Pro Glu Gln Leu Ile Thr Pro
725 730 735
Leu Val Ser Leu Gly His Ile Ser Met Leu Ala Pro Asp Gln Phe Ala
740 745 750
Ser Pro Met Lys Ser Val Val Ala Asn Phe Ile Val Lys Asp Leu Leu
755 760 765
Met Asn Asp Arg Ser Thr Gly Glu Lys Asn Gly Lys Leu Trp Ser Pro
770 775 780
Asp Glu Glu Val Ser Pro Glu Val Leu Ala Lys Val Gln Ala Ile Lys
785 790 795 800
Leu Leu Val Arg Trp Leu Leu Gly Met Lys Asn Asn Gln Ser Lys Ser
805 810 815
Ala Asn Ser Thr Leu Arg Leu Leu Ser Ala Met Leu Val Ser Glu Gly
820 825 830
Asp Leu Thr Glu Gln Lys Arg Ile Ser Lys Ser Asp Met Ser Arg Leu
835 840 845
Arg Leu Ala Ala Gly Ser Ala Ile Met Lys Leu Ala Gln Glu Pro Cys
850 855 860
Tyr His Glu Ile Ile Thr Pro Glu Gln Phe Gln Leu Cys Ala Leu Val
865 870 875 880
Ile Asn Asp Glu Cys Tyr Gln Val Arg Gln Ile Phe Ala Gln Lys Leu
885 890 895
His Lys Ala Leu Val Lys Leu Leu Leu Pro Leu Glu Tyr Met Ala Ile
900 905 910
Phe Ala Leu Cys Ala Lys Asp Pro Val Lys Glu Arg Arg Ala His Ala
915 920 925
Arg Gln Cys Leu Leu Lys Asn Ile Ser Ile Arg Arg Glu Tyr Ile Lys
930 935 940
Gln Asn Pro Met Ala Thr Glu Lys Leu Leu Ser Leu Leu Pro Glu Tyr
945 950 955 960
Val Val Pro Tyr Met Ile His Leu Leu Ala His Asp Pro Asp Phe Thr
965 970 975
Arg Ser Gln Asp Val Asp Gln Leu Arg Asp Ile Lys Glu Cys Leu Trp
980 985 990
Phe Met Leu Glu Val Leu Met Thr Lys Asn Glu Asn Asn Ser His Ala
995 1000 1005
Phe Met Lys Lys Met Ala Glu Asn Ile Lys Leu Thr Arg Asp Ala
1010 1015 1020
Gln Ser Pro Asp Glu Ser Lys Thr Asn Glu Lys Leu Tyr Thr Val
1025 1030 1035
Cys Asp Val Ala Leu Cys Val Ile Asn Ser Lys Ser Ala Leu Cys
1040 1045 1050
Asn Ala Asp Ser Pro Lys Asp Pro Val Leu Pro Met Lys Phe Phe
1055 1060 1065
Thr Gln Pro Glu Lys Asp Phe Cys Asn Asp Lys Ser Tyr Ile Ser
1070 1075 1080
Glu Glu Thr Arg Val Leu Leu Leu Thr Gly Lys Pro Lys Pro Ala
1085 1090 1095
Gly Val Leu Gly Ala Val Asn Lys Pro Leu Ser Ala Thr Gly Arg
1100 1105 1110
Lys Pro Tyr Val Arg Ser Thr Gly Thr Glu Thr Gly Ser Asn Ile
1115 1120 1125
Asn Val Asn Ser Glu Leu Asn Pro Ser Thr Gly Asn Arg Ser Arg
1130 1135 1140
Glu Gln Ser Ser Glu Ala Ala Glu Thr Gly Val Ser Glu Asn Glu
1145 1150 1155
Glu Asn Pro Val Arg Ile Ile Ser Val Thr Pro Val Lys Asn Ile
1160 1165 1170
Asp Pro Val Lys Asn Lys Glu Ile Asn Ser Asp Gln Ala Thr Gln
1175 1180 1185
Gly Asn Ile Ser Ser Asp Arg Gly Lys Lys Arg Thr Val Thr Ala
1190 1195 1200
Ala Gly Ala Glu Asn Ile Gln Gln Lys Thr Asp Glu Lys Val Asp
1205 1210 1215
Glu Ser Gly Pro Pro Ala Pro Ser Lys Pro Arg Arg Gly Arg Arg
1220 1225 1230
Pro Lys Ser Glu Ser Gln Gly Asn Ala Thr Lys Asn Asp Asp Leu
1235 1240 1245
Asn Lys Pro Ile Asn Lys Gly Arg Lys Arg Ala Ala Val Gly Gln
1250 1255 1260
Glu Ser Pro Gly Gly Leu Glu Ala Gly Asn Ala Lys Ala Pro Lys
1265 1270 1275
Leu Gln Asp Leu Ala Lys Lys Ala Ala Pro Ala Glu Arg Gln Ile
1280 1285 1290
Asp Leu Gln Arg
1295
<210> 5
<211> 4452
<212> DNA
<213> 小鼠（Mus musculus）
<220>
<221> CDS
<222> (148)..(4146)
<223>
<400> 5
acggacggag ccgctttgtg tgcagcccga cgaggggcgg cggcggcggc gcaaccacct 60
gacagaggcc cggcgctcgc tgcaccgtcc gcccgcatga ggaggagagg ccggtagagg 120
actgtgagag aaaagttatt ccccagg atg gac ttc acg cag ccg aag cct gcc 174
Met Asp Phe Thr Gln Pro Lys Pro Ala
1 5
act gcc ctc tgt ggc gtc gtg agt gcg gac ggg aag atc gct tac cct 222
Thr Ala Leu Cys Gly Val Val Ser Ala Asp Gly Lys Ile Ala Tyr Pro
10 15 20 25
ccg gga gta aaa gag atc acc gac aag atc acc acc gat gaa atg atc 270
Pro Gly Val Lys Glu Ile Thr Asp Lys Ile Thr Thr Asp Glu Met Ile
30 35 40
aaa cgt ctg aag atg gta gtg aaa act ttt atg gat atg gat cag gat 318
Lys Arg Leu Lys Met Val Val Lys Thr Phe Met Asp Met Asp Gln Asp
45 50 55
tca gaa gat gaa aag caa cag tat ctc cca cta gcc ttg cat ctc gca 366
Ser Glu Asp Glu Lys Gln Gln Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His Leu Ala
60 65 70
tct gaa ttc ttt ctc agg aac cct aat aaa gat gtg cgc ctt ctc gta 414
Ser Glu Phe Phe Leu Arg Asn Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu Leu Val
75 80 85
gca tgt tgt ttg gct gat ata ttt cga atc tat gcc cca gaa gct cca 462
Ala Cys Cys Leu Ala Asp Ile Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu Ala Pro
90 95 100 105
tat act tcc cat gat aaa ctt aag gac ata ttt ctc ttt att acc aga 510
Tyr Thr Ser His Asp Lys Leu Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile Thr Arg
110 115 120
cag tta aaa ggt ttg gag gat aca aag agt cca cag ttt aat aga tat 558
Gln Leu Lys Gly Leu Glu Asp Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn Arg Tyr
125 130 135
ttt tat tta tta gag aat tta gct tgg gtt aaa tca tat aac atc tgc 606
Phe Tyr Leu Leu Glu Asn Leu Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn Ile Cys
140 145 150
ttt gag ttg gaa gat tgc aat gaa att ttt att cag ctt ttt aga act 654
Phe Glu Leu Glu Asp Cys Asn Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe Arg Thr
155 160 165
ctc ttc tcg gta atc aac aat agc cac aat acg aaa gta caa atg cac 702
Leu Phe Ser Val Ile Asn Asn Ser His Asn Thr Lys Val Gln Met His
170 175 180 185
atg tta gac ttg atg agt tct atc atc atg gaa ggt gat gga gtt act 750
Met Leu Asp Leu Met Ser Ser Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly Val Thr
190 195 200
caa gaa tta ttg gat tcc att ctt atc aac ctc atc cct gca cac aag 798
Gln Glu Leu Leu Asp Ser Ile Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala His Lys
205 210 215
aac tta aat aaa cag tcc ttc gac ctt gca aaa gtc cta ctg aaa agg 846
Asn Leu Asn Lys Gln Ser Phe Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu Lys Arg
220 225 230
aca gtc cag act att gaa gca tgt att gcc aat ttt ttc aat caa gtc 894
Thr Val Gln Thr Ile Glu Ala Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn Gln Val
235 240 245
ctg gtg ctg ggc aga tca tca gtc agc gac ctg tct gaa cac gta ttt 942
Leu Val Leu Gly Arg Ser Ser Val Ser Asp Leu Ser Glu His Val Phe
250 255 260 265
gat ctg att cag gaa ctt ttt gct atc gat cct cag tta ctg tta tct 990
Asp Leu Ile Gln Glu Leu Phe Ala Ile Asp Pro Gln Leu Leu Leu Ser
270 275 280
gtc atg cca cag ctt gaa ttc aaa ctg aag agc aac gat ggt gaa gaa 1038
Val Met Pro Gln Leu Glu Phe Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly Glu Glu
285 290 295
cgc cta gct gtg gtt cga ctc ctc gca aaa ttg ttc ggc tct aaa gat 1086
Arg Leu Ala Val Val Arg Leu Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser Lys Asp
300 305 310
tca gat tta gca aca cag aat cgg cct ctc tgg cag tgc ttt ctt ggg 1134
Ser Asp Leu Ala Thr Gln Asn Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe Leu Gly
315 320 325
cga ttt aat gac att cat gtt cct gtg agg tta gaa agt gtg aag ttt 1182
Arg Phe Asn Asp Ile His Val Pro Val Arg Leu Glu Ser Val Lys Phe
330 335 340 345
gcc agc cac tgt ttg atg aat cac cca gac tta gcg aag gat ctg aca 1230
Ala Ser His Cys Leu Met Asn His Pro Asp Leu Ala Lys Asp Leu Thr
350 355 360
gaa tat ttg aaa gtt agg tca cat gat cca gaa gaa gcc att cgt cat 1278
Glu Tyr Leu Lys Val Arg Ser His Asp Pro Glu Glu Ala Ile Arg His
365 370 375
gat gtt att gtt act ata ata aca gct gcc aaa aga gac ctt gcc tta 1326
Asp Val Ile Val Thr Ile Ile Thr Ala Ala Lys Arg Asp Leu Ala Leu
380 385 390
gta aat gat cag ttg ctt ggc ttt gtc agg gaa agg aca ctg gat aaa 1374
Val Asn Asp Gln Leu Leu Gly Phe Val Arg Glu Arg Thr Leu Asp Lys
395 400 405
cgg tgg cga gta aga aaa gaa gcc atg atg ggt ctg gct cag ctc tat 1422
Arg Trp Arg Val Arg Lys Glu Ala Met Met Gly Leu Ala Gln Leu Tyr
410 415 420 425
aag aaa tac tgt ctt cat ggg gaa gca gga aag gaa gcc gcg gag aaa 1470
Lys Lys Tyr Cys Leu His Gly Glu Ala Gly Lys Glu Ala Ala Glu Lys
430 435 440
gtc agc tgg ata aag gac aag ctg ctg cat atc tac tat cag aac agc 1518
Val Ser Trp Ile Lys Asp Lys Leu Leu His Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser
445 450 455
att gat gac aaa cta ttg gta gag aaa atc ttt gct cag tat ctt gtt 1566
Ile Asp Asp Lys Leu Leu Val Glu Lys Ile Phe Ala Gln Tyr Leu Val
460 465 470
ccc cac aac ctg gaa aca gaa gag aga atg aaa tgc tta tat tat tta 1614
Pro His Asn Leu Glu Thr Glu Glu Arg Met Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu
475 480 485
tat gct agc ttg gat cca aat gct gta aaa gct ctc aat gaa atg tgg 1662
Tyr Ala Ser Leu Asp Pro Asn Ala Val Lys Ala Leu Asn Glu Met Trp
490 495 500 505
aaa tgt cag aac atg ctt cga agt cat gtg cgt gaa cta ttg gac tta 1710
Lys Cys Gln Asn Met Leu Arg Ser His Val Arg Glu Leu Leu Asp Leu
510 515 520
cac aag cag cct aca tca gaa gcg aac tgt tct gcc atg ttt ggg aaa 1758
His Lys Gln Pro Thr Ser Glu Ala Asn Cys Ser Ala Met Phe Gly Lys
525 530 535
ctg atg acc ata gca aag aat ttg cct gac cct gga aaa gca caa gat 1806
Leu Met Thr Ile Ala Lys Asn Leu Pro Asp Pro Gly Lys Ala Gln Asp
540 545 550
ttt gta aag aaa ttt aac cag gtt ctt ggt gat gat gag aaa ctg agg 1854
Phe Val Lys Lys Phe Asn Gln Val Leu Gly Asp Asp Glu Lys Leu Arg
555 560 565
tct cag ttg gaa tta tta atc agc cca acc tgt tca tgc aag cag gct 1902
Ser Gln Leu Glu Leu Leu Ile Ser Pro Thr Cys Ser Cys Lys Gln Ala
570 575 580 585
gac gtt tgt gtg agg gaa ata gct cgg aaa ctt gca aat cct aag cag 1950
Asp Val Cys Val Arg Glu Ile Ala Arg Lys Leu Ala Asn Pro Lys Gln
590 595 600
cca acc aac cct ttt cta gag atg gtc aaa ttt ctt ttg gaa aga att 1998
Pro Thr Asn Pro Phe Leu Glu Met Val Lys Phe Leu Leu Glu Arg Ile
605 610 615
gct cct gtg cac atc gat tca gaa gcc ata agt gca ctg gta aaa ctg 2046
Ala Pro Val His Ile Asp Ser Glu Ala Ile Ser Ala Leu Val Lys Leu
620 625 630
atg aat aag tca atc gaa ggg acg gcc gat gat gaa gag gag ggt gtc 2094
Met Asn Lys Ser Ile Glu Gly Thr Ala Asp Asp Glu Glu Glu Gly Val
635 640 645
agt cca gac tca gcc atc cgc tca gga ctt gag ctt ctt aag gtt ctg 2142
Ser Pro Asp Ser Ala Ile Arg Ser Gly Leu Glu Leu Leu Lys Val Leu
650 655 660 665
tct ttc aca cat cct acc tcg ttc cac tct gca gag aca tat gag tcc 2190
Ser Phe Thr His Pro Thr Ser Phe His Ser Ala Glu Thr Tyr Glu Ser
670 675 680
ttg tta cag tgc cta aga atg gag gat gac aag gta gca gaa gct gca 2238
Leu Leu Gln Cys Leu Arg Met Glu Asp Asp Lys Val Ala Glu Ala Ala
685 690 695
ata caa att ttt aga aac aca ggc cac aaa ata gaa act gac ctt ccc 2286
Ile Gln Ile Phe Arg Asn Thr Gly His Lys Ile Glu Thr Asp Leu Pro
700 705 710
cag ata cgg tca acc ttg atc ccc att tta cat cag aaa gcc aag cgg 2334
Gln Ile Arg Ser Thr Leu Ile Pro Ile Leu His Gln Lys Ala Lys Arg
715 720 725
ggc act cca cac caa gca aag cag gct gtt cac tgc atc cat gcc atc 2382
Gly Thr Pro His Gln Ala Lys Gln Ala Val His Cys Ile His Ala Ile
730 735 740 745
ttc tca aac aag gag gtc cag ctg gca cag att ttt gag cca ctc agt 2430
Phe Ser Asn Lys Glu Val Gln Leu Ala Gln Ile Phe Glu Pro Leu Ser
750 755 760
agg agt ctg aat gct gat gta cca gag caa ctt ata act cca tta gtt 2478
Arg Ser Leu Asn Ala Asp Val Pro Glu Gln Leu Ile Thr Pro Leu Val
765 770 775
tca ctg ggc cac att tcc atg tta gca cca gat cag ttt gcc tcc ccg 2526
Ser Leu Gly His Ile Ser Met Leu Ala Pro Asp Gln Phe Ala Ser Pro
780 785 790
atg aaa tct gta gtg gca aac ttt att gtt aaa gac ctt cta atg aac 2574
Met Lys Ser Val Val Ala Asn Phe Ile Val Lys Asp Leu Leu Met Asn
795 800 805
gac agg tca aca ggt gag aag aat gga aaa tta tgg tct cca gat gag 2622
Asp Arg Ser Thr Gly Glu Lys Asn Gly Lys Leu Trp Ser Pro Asp Glu
810 815 820 825
gaa gtt tct cct gaa gtt cta gca aag gta cag gca att aaa ctt ctg 2670
Glu Val Ser Pro Glu Val Leu Ala Lys Val Gln Ala Ile Lys Leu Leu
830 835 840
gta agg tgg ctg ttg ggt atg aaa aac aac cag tct aaa tct gcc aac 2718
Val Arg Trp Leu Leu Gly Met Lys Asn Asn Gln Ser Lys Ser Ala Asn
845 850 855
tca act ctt cgg tta tta tca gcc atg ctg gtt agt gag ggc gac ctg 2766
Ser Thr Leu Arg Leu Leu Ser Ala Met Leu Val Ser Glu Gly Asp Leu
860 865 870
aca gag caa aag agg atc agt aaa tct gat atg tct cgc ttg cga tta 2814
Thr Glu Gln Lys Arg Ile Ser Lys Ser Asp Met Ser Arg Leu Arg Leu
875 880 885
gct gct ggt agt gcc ata atg aag ctt gct cag gaa cct tgc tac cat 2862
Ala Ala Gly Ser Ala Ile Met Lys Leu Ala Gln Glu Pro Cys Tyr His
890 895 900 905
gaa att att acc cca gaa cag ttt cag ctc tgt gca ctg gtt att aat 2910
Glu Ile Ile Thr Pro Glu Gln Phe Gln Leu Cys Ala Leu Val Ile Asn
910 915 920
gat gag tgc tac caa gta agg cag ata ttt gcc cag aag ctt cat aag 2958
Asp Glu Cys Tyr Gln Val Arg Gln Ile Phe Ala Gln Lys Leu His Lys
925 930 935
gca ctt gtg aag ttg ctt ctc cca ctg gag tat atg gcc atc ttt gct 3006
Ala Leu Val Lys Leu Leu Leu Pro Leu Glu Tyr Met Ala Ile Phe Ala
940 945 950
ttg tgt gcc aaa gac cct gtg aaa gaa agg aga gca cac gct cgg cag 3054
Leu Cys Ala Lys Asp Pro Val Lys Glu Arg Arg Ala His Ala Arg Gln
955 960 965
tgt ttg tta aag aac atc agc atc cgc agg gag tac atc aaa cag aac 3102
Cys Leu Leu Lys Asn Ile Ser Ile Arg Arg Glu Tyr Ile Lys Gln Asn
970 975 980 985
ccc atg gcc act gag aaa tta ttg tca ctg ctg cct gaa tat gtg gtt 3150
Pro Met Ala Thr Glu Lys Leu Leu Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val
990 995 1000
cca tac atg att cac ctc cta gcc cat gat cct gat ttc aca cgg 3195
Pro Tyr Met Ile His Leu Leu Ala His Asp Pro Asp Phe Thr Arg
1005 1010 1015
tca caa gat gtt gat caa ctt cgt gat ata aaa gag tgc ctg tgg 3240
Ser Gln Asp Val Asp Gln Leu Arg Asp Ile Lys Glu Cys Leu Trp
1020 1025 1030
ttt atg ctt gaa gtc tta atg aca aag aat gaa aac aac agc cat 3285
Phe Met Leu Glu Val Leu Met Thr Lys Asn Glu Asn Asn Ser His
1035 1040 1045
gca ttc atg aaa aag atg gca gag aat atc aag cta acc aga gac 3330
Ala Phe Met Lys Lys Met Ala Glu Asn Ile Lys Leu Thr Arg Asp
1050 1055 1060
gcc cag tct ccc gat gaa tcc aag aca aat gaa aaa ctt tat acg 3375
Ala Gln Ser Pro Asp Glu Ser Lys Thr Asn Glu Lys Leu Tyr Thr
1065 1070 1075
gtt tgt gac gtg gct ctg tgt gtt ata aat agt aaa agt gct ttg 3420
Val Cys Asp Val Ala Leu Cys Val Ile Asn Ser Lys Ser Ala Leu
1080 1085 1090
tgc aat gca gac tca cca aag gac cca gtc ctc cca atg aag ttc 3465
Cys Asn Ala Asp Ser Pro Lys Asp Pro Val Leu Pro Met Lys Phe
1095 1100 1105
ttt aca cag cct gaa aag gac ttc tgt aat gac aaa agc tat att 3510
Phe Thr Gln Pro Glu Lys Asp Phe Cys Asn Asp Lys Ser Tyr Ile
1110 1115 1120
tca gaa gag aca aga gtt ctt ctg tta aca gga aag cca aag cct 3555
Ser Glu Glu Thr Arg Val Leu Leu Leu Thr Gly Lys Pro Lys Pro
1125 1130 1135
act gga gta tta ggt aca gtg aac aag cct tta tca gca acg gga 3600
Thr Gly Val Leu Gly Thr Val Asn Lys Pro Leu Ser Ala Thr Gly
1140 1145 1150
agg aag cct tat gtt aga agc gcc ggc aca gag act gga agc aat 3645
Arg Lys Pro Tyr Val Arg Ser Ala Gly Thr Glu Thr Gly Ser Asn
1155 1160 1165
att aac gcc aat tca gag ctg agt cct tca gcc gga agt cgt tca 3690
Ile Asn Ala Asn Ser Glu Leu Ser Pro Ser Ala Gly Ser Arg Ser
1170 1175 1180
agg gaa cag agt tca gag gca tca gaa act gga gtt agt gaa aat 3735
Arg Glu Gln Ser Ser Glu Ala Ser Glu Thr Gly Val Ser Glu Asn
1185 1190 1195
gag gag aat cct gtg aga ata att tct gtc aca cct gta aag aat 3780
Glu Glu Asn Pro Val Arg Ile Ile Ser Val Thr Pro Val Lys Asn
1200 1205 1210
att gat act gta aag aat aag gaa att aat tct gat cag tct acc 3825
Ile Asp Thr Val Lys Asn Lys Glu Ile Asn Ser Asp Gln Ser Thr
1215 1220 1225
caa ggc aac atc agc agt gac aga gga aag aaa aga att gta aca 3870
Gln Gly Asn Ile Ser Ser Asp Arg Gly Lys Lys Arg Ile Val Thr
1230 1235 1240
gca gct ggt gca gag aat atc caa aag cca gac gag aaa gta gat 3915
Ala Ala Gly Ala Glu Asn Ile Gln Lys Pro Asp Glu Lys Val Asp
1245 1250 1255
gag tca gga ccg cct gcc cct tcc aaa ccc cgg aga gga cgt cgc 3960
Glu Ser Gly Pro Pro Ala Pro Ser Lys Pro Arg Arg Gly Arg Arg
1260 1265 1270
ccc aaa tct gaa tct cag ggc aat gca acc aaa aac gat gat cta 4005
Pro Lys Ser Glu Ser Gln Gly Asn Ala Thr Lys Asn Asp Asp Leu
1275 1280 1285
aat aaa cct gtt agc aag gga agg aaa aga gct gca ggc agc cag 4050
Asn Lys Pro Val Ser Lys Gly Arg Lys Arg Ala Ala Gly Ser Gln
1290 1295 1300
gag agt ctg gag gca ggg aat gcc aaa gcg ccc aag cta caa gat 4095
Glu Ser Leu Glu Ala Gly Asn Ala Lys Ala Pro Lys Leu Gln Asp
1305 1310 1315
gga gcc aaa aag gca gtt cca gca gag aga caa att gat tta caa 4140
Gly Ala Lys Lys Ala Val Pro Ala Glu Arg Gln Ile Asp Leu Gln
1320 1325 1330
agg taa tgtgacccca ctcatcctca ccttgtcagc agtgggaatg gctggcaata 4196
Arg
gcagatactc agtgtaggat ggactctggc tctgacggag cgggcttccc cacattaccc 4256
attgtatggg aaatagaaag catcttcatt atgtgtactg ctatatatag taaatgtaaa 4316
aaatgagtgt gatggtgcac acgtgtaatc ccagcccttg gaggcagaaa gggggttatg 4376
agtttaaaac cacgctgggc tgtgtagtaa gactttgtct ttaaaaagtg gggagggagg 4436
gcaaggaggg tagaga 4452
<210> 6
<211> 1332
<212> PRT
<213> 小鼠（Mus musculus）
<400> 6
Met Asp Phe Thr Gln Pro Lys Pro Ala Thr Ala Leu Cys Gly Val Val
1 5 10 15
Ser Ala Asp Gly Lys Ile Ala Tyr Pro Pro Gly Val Lys Glu Ile Thr
20 25 30
Asp Lys Ile Thr Thr Asp Glu Met Ile Lys Arg Leu Lys Met Val Val
35 40 45
Lys Thr Phe Met Asp Met Asp Gln Asp Ser Glu Asp Glu Lys Gln Gln
50 55 60
Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His Leu Ala Ser Glu Phe Phe Leu Arg Asn
65 70 75 80
Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu Leu Val Ala Cys Cys Leu Ala Asp Ile
85 90 95
Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu Ala Pro Tyr Thr Ser His Asp Lys Leu
100 105 110
Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile Thr Arg Gln Leu Lys Gly Leu Glu Asp
115 120 125
Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn Arg Tyr Phe Tyr Leu Leu Glu Asn Leu
130 135 140
Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn Ile Cys Phe Glu Leu Glu Asp Cys Asn
145 150 155 160
Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe Arg Thr Leu Phe Ser Val Ile Asn Asn
165 170 175
Ser His Asn Thr Lys Val Gln Met His Met Leu Asp Leu Met Ser Ser
180 185 190
Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly Val Thr Gln Glu Leu Leu Asp Ser Ile
195 200 205
Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu Asn Lys Gln Ser Phe
210 215 220
Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu Lys Arg Thr Val Gln Thr Ile Glu Ala
225 230 235 240
Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn Gln Val Leu Val Leu Gly Arg Ser Ser
245 250 255
Val Ser Asp Leu Ser Glu His Val Phe Asp Leu Ile Gln Glu Leu Phe
260 265 270
Ala Ile Asp Pro Gln Leu Leu Leu Ser Val Met Pro Gln Leu Glu Phe
275 280 285
Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly Glu Glu Arg Leu Ala Val Val Arg Leu
290 295 300
Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser Lys Asp Ser Asp Leu Ala Thr Gln Asn
305 310 315 320
Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe Leu Gly Arg Phe Asn Asp Ile His Val
325 330 335
Pro Val Arg Leu Glu Ser Val Lys Phe Ala Ser His Cys Leu Met Asn
340 345 350
His Pro Asp Leu Ala Lys Asp Leu Thr Glu Tyr Leu Lys Val Arg Ser
355 360 365
His Asp Pro Glu Glu Ala Ile Arg His Asp Val Ile Val Thr Ile Ile
370 375 380
Thr Ala Ala Lys Arg Asp Leu Ala Leu Val Asn Asp Gln Leu Leu Gly
385 390 395 400
Phe Val Arg Glu Arg Thr Leu Asp Lys Arg Trp Arg Val Arg Lys Glu
405 410 415
Ala Met Met Gly Leu Ala Gln Leu Tyr Lys Lys Tyr Cys Leu His Gly
420 425 430
Glu Ala Gly Lys Glu Ala Ala Glu Lys Val Ser Trp Ile Lys Asp Lys
435 440 445
Leu Leu His Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser Ile Asp Asp Lys Leu Leu Val
450 455 460
Glu Lys Ile Phe Ala Gln Tyr Leu Val Pro His Asn Leu Glu Thr Glu
465 470 475 480
Glu Arg Met Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu Tyr Ala Ser Leu Asp Pro Asn
485 490 495
Ala Val Lys Ala Leu Asn Glu Met Trp Lys Cys Gln Asn Met Leu Arg
500 505 510
Ser His Val Arg Glu Leu Leu Asp Leu His Lys Gln Pro Thr Ser Glu
515 520 525
Ala Asn Cys Ser Ala Met Phe Gly Lys Leu Met Thr Ile Ala Lys Asn
530 535 540
Leu Pro Asp Pro Gly Lys Ala Gln Asp Phe Val Lys Lys Phe Asn Gln
545 550 555 560
Val Leu Gly Asp Asp Glu Lys Leu Arg Ser Gln Leu Glu Leu Leu Ile
565 570 575
Ser Pro Thr Cys Ser Cys Lys Gln Ala Asp Val Cys Val Arg Glu Ile
580 585 590
Ala Arg Lys Leu Ala Asn Pro Lys Gln Pro Thr Asn Pro Phe Leu Glu
595 600 605
Met Val Lys Phe Leu Leu Glu Arg Ile Ala Pro Val His Ile Asp Ser
610 615 620
Glu Ala Ile Ser Ala Leu Val Lys Leu Met Asn Lys Ser Ile Glu Gly
625 630 635 640
Thr Ala Asp Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Pro Asp Ser Ala Ile Arg
645 650 655
Ser Gly Leu Glu Leu Leu Lys Val Leu Ser Phe Thr His Pro Thr Ser
660 665 670
Phe His Ser Ala Glu Thr Tyr Glu Ser Leu Leu Gln Cys Leu Arg Met
675 680 685
Glu Asp Asp Lys Val Ala Glu Ala Ala Ile Gln Ile Phe Arg Asn Thr
690 695 700
Gly His Lys Ile Glu Thr Asp Leu Pro Gln Ile Arg Ser Thr Leu Ile
705 710 715 720
Pro Ile Leu His Gln Lys Ala Lys Arg Gly Thr Pro His Gln Ala Lys
725 730 735
Gln Ala Val His Cys Ile His Ala Ile Phe Ser Asn Lys Glu Val Gln
740 745 750
Leu Ala Gln Ile Phe Glu Pro Leu Ser Arg Ser Leu Asn Ala Asp Val
755 760 765
Pro Glu Gln Leu Ile Thr Pro Leu Val Ser Leu Gly His Ile Ser Met
770 775 780
Leu Ala Pro Asp Gln Phe Ala Ser Pro Met Lys Ser Val Val Ala Asn
785 790 795 800
Phe Ile Val Lys Asp Leu Leu Met Asn Asp Arg Ser Thr Gly Glu Lys
805 810 815
Asn Gly Lys Leu Trp Ser Pro Asp Glu Glu Val Ser Pro Glu Val Leu
820 825 830
Ala Lys Val Gln Ala Ile Lys Leu Leu Val Arg Trp Leu Leu Gly Met
835 840 845
Lys Asn Asn Gln Ser Lys Ser Ala Asn Ser Thr Leu Arg Leu Leu Ser
850 855 860
Ala Met Leu Val Ser Glu Gly Asp Leu Thr Glu Gln Lys Arg Ile Ser
865 870 875 880
Lys Ser Asp Met Ser Arg Leu Arg Leu Ala Ala Gly Ser Ala Ile Met
885 890 895
Lys Leu Ala Gln Glu Pro Cys Tyr His Glu Ile Ile Thr Pro Glu Gln
900 905 910
Phe Gln Leu Cys Ala Leu Val Ile Asn Asp Glu Cys Tyr Gln Val Arg
915 920 925
Gln Ile Phe Ala Gln Lys Leu His Lys Ala Leu Val Lys Leu Leu Leu
930 935 940
Pro Leu Glu Tyr Met Ala Ile Phe Ala Leu Cys Ala Lys Asp Pro Val
945 950 955 960
Lys Glu Arg Arg Ala His Ala Arg Gln Cys Leu Leu Lys Asn Ile Ser
965 970 975
Ile Arg Arg Glu Tyr Ile Lys Gln Asn Pro Met Ala Thr Glu Lys Leu
980 985 990
Leu Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val Pro Tyr Met Ile His Leu Leu
995 1000 1005
Ala His Asp Pro Asp Phe Thr Arg Ser Gln Asp Val Asp Gln Leu
1010 1015 1020
Arg Asp Ile Lys Glu Cys Leu Trp Phe Met Leu Glu Val Leu Met
1025 1030 1035
Thr Lys Asn Glu Asn Asn Ser His Ala Phe Met Lys Lys Met Ala
1040 1045 1050
Glu Asn Ile Lys Leu Thr Arg Asp Ala Gln Ser Pro Asp Glu Ser
1055 1060 1065
Lys Thr Asn Glu Lys Leu Tyr Thr Val Cys Asp Val Ala Leu Cys
1070 1075 1080
Val Ile Asn Ser Lys Ser Ala Leu Cys Asn Ala Asp Ser Pro Lys
1085 1090 1095
Asp Pro Val Leu Pro Met Lys Phe Phe Thr Gln Pro Glu Lys Asp
1100 1105 1110
Phe Cys Asn Asp Lys Ser Tyr Ile Ser Glu Glu Thr Arg Val Leu
1115 1120 1125
Leu Leu Thr Gly Lys Pro Lys Pro Thr Gly Val Leu Gly Thr Val
1130 1135 1140
Asn Lys Pro Leu Ser Ala Thr Gly Arg Lys Pro Tyr Val Arg Ser
1145 1150 1155
Ala Gly Thr Glu Thr Gly Ser Asn Ile Asn Ala Asn Ser Glu Leu
1160 1165 1170
Ser Pro Ser Ala Gly Ser Arg Ser Arg Glu Gln Ser Ser Glu Ala
1175 1180 1185
Ser Glu Thr Gly Val Ser Glu Asn Glu Glu Asn Pro Val Arg Ile
1190 1195 1200
Ile Ser Val Thr Pro Val Lys Asn Ile Asp Thr Val Lys Asn Lys
1205 1210 1215
Glu Ile Asn Ser Asp Gln Ser Thr Gln Gly Asn Ile Ser Ser Asp
1220 1225 1230
Arg Gly Lys Lys Arg Ile Val Thr Ala Ala Gly Ala Glu Asn Ile
1235 1240 1245
Gln Lys Pro Asp Glu Lys Val Asp Glu Ser Gly Pro Pro Ala Pro
1250 1255 1260
Ser Lys Pro Arg Arg Gly Arg Arg Pro Lys Ser Glu Ser Gln Gly
1265 1270 1275
Asn Ala Thr Lys Asn Asp Asp Leu Asn Lys Pro Val Ser Lys Gly
1280 1285 1290
Arg Lys Arg Ala Ala Gly Ser Gln Glu Ser Leu Glu Ala Gly Asn
1295 1300 1305
Ala Lys Ala Pro Lys Leu Gln Asp Gly Ala Lys Lys Ala Val Pro
1310 1315 1320
Ala Glu Arg Gln Ile Asp Leu Gln Arg
1325 1330
<210> 7
<211> 6553
<212> DNA
<213> 牛（Bos taurus）
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(3912)
<223>
<400> 7
atg gac ttc acc gcg cag ccc aag cct gcc act gcc ctc tgt ggc gtc 48
Met Asp Phe Thr Ala Gln Pro Lys Pro Ala Thr Ala Leu Cys Gly Val
1 5 10 15
gtg agt gcc gac ggg aag atc gct tac cct ccg ggg gta aag gag atc 96
Val Ser Ala Asp Gly Lys Ile Ala Tyr Pro Pro Gly Val Lys Glu Ile
20 25 30
acc gac aag atc acc acg gac gaa atg atc aaa cga ctg aag atg gta 144
Thr Asp Lys Ile Thr Thr Asp Glu Met Ile Lys Arg Leu Lys Met Val
35 40 45
gta aag act ttt atg gat atg gat cag gac tca gaa gat gaa aaa cag 192
Val Lys Thr Phe Met Asp Met Asp Gln Asp Ser Glu Asp Glu Lys Gln
50 55 60
cag tat ctc cca cta gcc ttg cat cta gca tct gaa ttt ttt ctc agg 240
Gln Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His Leu Ala Ser Glu Phe Phe Leu Arg
65 70 75 80
aat ccc aat aaa gat gtg cgt ctc ctt gta gca tgt tgt ttg gct gac 288
Asn Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu Leu Val Ala Cys Cys Leu Ala Asp
85 90 95
atc ttt cga atc tat gcc cca gaa gct cca tat act tcc cat gat aaa 336
Ile Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu Ala Pro Tyr Thr Ser His Asp Lys
100 105 110
ctt aag gac ata ttt ttg ttt att acc aga cag tta aaa ggt ttg gag 384
Leu Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile Thr Arg Gln Leu Lys Gly Leu Glu
115 120 125
gat aca aag agc ccg cag ttt aat aga tac ttt tat tta tta gag aat 432
Asp Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn Arg Tyr Phe Tyr Leu Leu Glu Asn
130 135 140
tta gca tgg gtt aaa tcg tat aac atc tgc ttt gaa ttg gaa gat tgc 480
Leu Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn Ile Cys Phe Glu Leu Glu Asp Cys
145 150 155 160
aat gaa att ttt att cag ctt ttt agg act ctc ttc tca gtg atc aac 528
Asn Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe Arg Thr Leu Phe Ser Val Ile Asn
165 170 175
aat agc cac aat aag aag gta caa atg cac atg tta gac ttg atg agt 576
Asn Ser His Asn Lys Lys Val Gln Met His Met Leu Asp Leu Met Ser
180 185 190
tct atc atc atg gaa ggt gat gga gtt act caa gaa tta ttg gac tcc 624
Ser Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly Val Thr Gln Glu Leu Leu Asp Ser
195 200 205
att ctt att aac ctc att cct gca cat aag aac tta aat aaa cag tcg 672
Ile Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu Asn Lys Gln Ser
210 215 220
ttt gac ctc gca aaa gtc cta ttg aaa agg aca gtc cag act att gaa 720
Phe Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu Lys Arg Thr Val Gln Thr Ile Glu
225 230 235 240
gca tgc att gcc aat ttt ttc aat caa gta ctg gtg ctg gga aga tca 768
Ala Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn Gln Val Leu Val Leu Gly Arg Ser
245 250 255
tca gta agt gat ttg tca gaa cat gta ttt gat ctg att cag gaa ctt 816
Ser Val Ser Asp Leu Ser Glu His Val Phe Asp Leu Ile Gln Glu Leu
260 265 270
ttt gct ata gat ccc cat tta tta tta tct gtt atg ccg cag ctt gaa 864
Phe Ala Ile Asp Pro His Leu Leu Leu Ser Val Met Pro Gln Leu Glu
275 280 285
ttc aaa ctg aag agc aat gat gga gaa gaa cga tta gct gtt gtt cga 912
Phe Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly Glu Glu Arg Leu Ala Val Val Arg
290 295 300
ctt tta gct aaa ttg ttt ggc tct aaa gat tcc gat tta gca aca cag 960
Leu Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser Lys Asp Ser Asp Leu Ala Thr Gln
305 310 315 320
aat cgt cct ctg tgg cag tgt ttt ctt gga cga ttt aat gac att cat 1008
Asn Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe Leu Gly Arg Phe Asn Asp Ile His
325 330 335
gtt cct gtg aga tta gaa agt gtg aaa ttt gcc agt cac tgt tta atg 1056
Val Pro Val Arg Leu Glu Ser Val Lys Phe Ala Ser His Cys Leu Met
340 345 350
aat cac cca gat tta gca aag gat ctc aca ggt ttc act ctg gca ctg 1104
Asn His Pro Asp Leu Ala Lys Asp Leu Thr Gly Phe Thr Leu Ala Leu
355 360 365
ttt cag gtc tct aac agt cat gga cta tgg cga gta aga aaa gaa gct 1152
Phe Gln Val Ser Asn Ser His Gly Leu Trp Arg Val Arg Lys Glu Ala
370 375 380
atg atg ggt ctg gct cag ctt tat aag aaa tac tgt ctt cat ggt gaa 1200
Met Met Gly Leu Ala Gln Leu Tyr Lys Lys Tyr Cys Leu His Gly Glu
385 390 395 400
gca gga aag gaa gct gca gag aaa gtc agc tgg ata aag gac aaa ctt 1248
Ala Gly Lys Glu Ala Ala Glu Lys Val Ser Trp Ile Lys Asp Lys Leu
405 410 415
ttg cat ata tat tat caa aat agc atc gat gac aaa cta ttg gta gag 1296
Leu His Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser Ile Asp Asp Lys Leu Leu Val Glu
420 425 430
aaa atc ttt gct caa tat ctt gtc ccc cac aac ctg gaa aca gaa gag 1344
Lys Ile Phe Ala Gln Tyr Leu Val Pro His Asn Leu Glu Thr Glu Glu
435 440 445
aga atg aaa tgc ttg tat tat tta tat gct agt ttg gat cca aat gct 1392
Arg Met Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu Tyr Ala Ser Leu Asp Pro Asn Ala
450 455 460
gtc aaa gct ctc aat gaa atg tgg aag tgt cag aac atg ctt aga agt 1440
Val Lys Ala Leu Asn Glu Met Trp Lys Cys Gln Asn Met Leu Arg Ser
465 470 475 480
cat gta cga gaa ctg ttg gat ttg cac aag cag cct aca tca gaa gct 1488
His Val Arg Glu Leu Leu Asp Leu His Lys Gln Pro Thr Ser Glu Ala
485 490 495
aac tgt tct gct atg ttt gga aaa ctg atg acc ata gca aag aat ttg 1536
Asn Cys Ser Ala Met Phe Gly Lys Leu Met Thr Ile Ala Lys Asn Leu
500 505 510
cct gat cct ggg aaa gca caa gat ttt gtg aag aaa ttt aac caa gtt 1584
Pro Asp Pro Gly Lys Ala Gln Asp Phe Val Lys Lys Phe Asn Gln Val
515 520 525
ctt ggt gat gat gag aaa ctg cga tct cag ttg gag ttg tta atc agt 1632
Leu Gly Asp Asp Glu Lys Leu Arg Ser Gln Leu Glu Leu Leu Ile Ser
530 535 540
cca acc tgt tcg tgc aaa cag gca gat gtt tgt gtg aga gaa ata gcc 1680
Pro Thr Cys Ser Cys Lys Gln Ala Asp Val Cys Val Arg Glu Ile Ala
545 550 555 560
cgg aaa ctt gcc aat cct aag cag cca aca aat cct ttt cta gag atg 1728
Arg Lys Leu Ala Asn Pro Lys Gln Pro Thr Asn Pro Phe Leu Glu Met
565 570 575
gtc aaa ttt ctg ttg gaa aga att gca cct gtg cac att gat tca gaa 1776
Val Lys Phe Leu Leu Glu Arg Ile Ala Pro Val His Ile Asp Ser Glu
580 585 590
gcc atc agt gca ctg gta aaa ctg atg aat aaa tca ata gaa ggg aca 1824
Ala Ile Ser Ala Leu Val Lys Leu Met Asn Lys Ser Ile Glu Gly Thr
595 600 605
gca gat gac gaa gag gag ggt gta agt cca gat aca gct att cgt tca 1872
Ala Asp Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Pro Asp Thr Ala Ile Arg Ser
610 615 620
gga ctt gaa ctt ctt aag gtt ctg tct ttc aca cat cct acc tcg ttc 1920
Gly Leu Glu Leu Leu Lys Val Leu Ser Phe Thr His Pro Thr Ser Phe
625 630 635 640
cac tct gca gag aca tat gag tcc ctg ttg cag tgc ctc aga atg gaa 1968
His Ser Ala Glu Thr Tyr Glu Ser Leu Leu Gln Cys Leu Arg Met Glu
645 650 655
gat gac aag gta gca gaa gcc gcc ata cag att ttt aga aac aca ggc 2016
Asp Asp Lys Val Ala Glu Ala Ala Ile Gln Ile Phe Arg Asn Thr Gly
660 665 670
cac aaa ata gaa aca gac cta ccc cag ata cgg tcg acc tta att ccc 2064
His Lys Ile Glu Thr Asp Leu Pro Gln Ile Arg Ser Thr Leu Ile Pro
675 680 685
att tta cat cag aaa gca aag aga gga act cca cac caa gca aaa cag 2112
Ile Leu His Gln Lys Ala Lys Arg Gly Thr Pro His Gln Ala Lys Gln
690 695 700
gct gtt cac tgt ata cat gcc ata ttc aca aat aaa gaa gtc cag ctt 2160
Ala Val His Cys Ile His Ala Ile Phe Thr Asn Lys Glu Val Gln Leu
705 710 715 720
gca cag att ttt gag cca ctc agt agg agt ctg aat gct gac gta cca 2208
Ala Gln Ile Phe Glu Pro Leu Ser Arg Ser Leu Asn Ala Asp Val Pro
725 730 735
gaa caa ctt ata act ccg tta gtt tca ttg ggc cac att tct atg tta 2256
Glu Gln Leu Ile Thr Pro Leu Val Ser Leu Gly His Ile Ser Met Leu
740 745 750
gca cca gat cag ttt gct tcc cca atg aaa tct gta gta gca aat ttt 2304
Ala Pro Asp Gln Phe Ala Ser Pro Met Lys Ser Val Val Ala Asn Phe
755 760 765
att gtt aaa gat cta cta atg aat gac agg tca aca ggt gag aag aat 2352
Ile Val Lys Asp Leu Leu Met Asn Asp Arg Ser Thr Gly Glu Lys Asn
770 775 780
gga aaa tta tgg tct cca gat gaa gag gtt tcc cct gaa gta cta gca 2400
Gly Lys Leu Trp Ser Pro Asp Glu Glu Val Ser Pro Glu Val Leu Ala
785 790 795 800
aag gta cag gca att aaa ctt ctg gta aga tgg ctg ttg ggt atg aaa 2448
Lys Val Gln Ala Ile Lys Leu Leu Val Arg Trp Leu Leu Gly Met Lys
805 810 815
aac aac cag tct aaa tct gcc aat tca act ctt cgg tta tta tca gca 2496
Asn Asn Gln Ser Lys Ser Ala Asn Ser Thr Leu Arg Leu Leu Ser Ala
820 825 830
atg ttg gtt agt gag ggt gac ctg aca gag cag aag agg atc agt aaa 2544
Met Leu Val Ser Glu Gly Asp Leu Thr Glu Gln Lys Arg Ile Ser Lys
835 840 845
tct gat atg tct cgc ttg cga tta gct gct ggt agt gcc ata atg aag 2592
Ser Asp Met Ser Arg Leu Arg Leu Ala Ala Gly Ser Ala Ile Met Lys
850 855 860
ctt gct cag gaa cct tgt tac cat gaa att ata acc cca gaa cag ttt 2640
Leu Ala Gln Glu Pro Cys Tyr His Glu Ile Ile Thr Pro Glu Gln Phe
865 870 875 880
cag ctc tgt gca ctt gtt att aat gat gag tgc tat caa gta agg cag 2688
Gln Leu Cys Ala Leu Val Ile Asn Asp Glu Cys Tyr Gln Val Arg Gln
885 890 895
ata ttt gct cag aag cta cac aag gca ctt gtg aag tta ctg ctc cca 2736
Ile Phe Ala Gln Lys Leu His Lys Ala Leu Val Lys Leu Leu Leu Pro
900 905 910
ttg gag tat atg gcc atc ttt gcc ttg tgt gcc aaa gat cct gtg aag 2784
Leu Glu Tyr Met Ala Ile Phe Ala Leu Cys Ala Lys Asp Pro Val Lys
915 920 925
gag aga aga gca cat gca cga cag tgt tta cta aaa aac atc agt ata 2832
Glu Arg Arg Ala His Ala Arg Gln Cys Leu Leu Lys Asn Ile Ser Ile
930 935 940
cgc agg gag tac att aaa cag aac ccc atg gct act gag aaa cta tta 2880
Arg Arg Glu Tyr Ile Lys Gln Asn Pro Met Ala Thr Glu Lys Leu Leu
945 950 955 960
tca ctg ttg cct gag tat gta gtt ccg tat atg att cac ctg cta gct 2928
Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val Pro Tyr Met Ile His Leu Leu Ala
965 970 975
cat gat cca gat ttt aca aga tca caa gat gtt gat cag ctt cgt gat 2976
His Asp Pro Asp Phe Thr Arg Ser Gln Asp Val Asp Gln Leu Arg Asp
980 985 990
att aaa gag tgc ctc tgg ttc atg ctt gaa gtt tta atg aca aaa aat 3024
Ile Lys Glu Cys Leu Trp Phe Met Leu Glu Val Leu Met Thr Lys Asn
995 1000 1005
gaa aat aat agc cat gcc ttt atg aaa aag atg gca gag aat atc 3069
Glu Asn Asn Ser His Ala Phe Met Lys Lys Met Ala Glu Asn Ile
1010 1015 1020
aag cta aca aaa gat gcc cag tct cca gat gaa tcc aag aca aat 3114
Lys Leu Thr Lys Asp Ala Gln Ser Pro Asp Glu Ser Lys Thr Asn
1025 1030 1035
gaa aaa ctt tat aca gtg tgt gat gtg gcc ctg tgc gtg ata aat 3159
Glu Lys Leu Tyr Thr Val Cys Asp Val Ala Leu Cys Val Ile Asn
1040 1045 1050
agt aaa agt gct ttg tgc aat gca gag tca cca aag gat cca gtc 3204
Ser Lys Ser Ala Leu Cys Asn Ala Glu Ser Pro Lys Asp Pro Val
1055 1060 1065
ctg cca gtg aaa ttt ttt aca caa cct gaa aag gac ttc tgt aat 3249
Leu Pro Val Lys Phe Phe Thr Gln Pro Glu Lys Asp Phe Cys Asn
1070 1075 1080
gac aag agt tat att tca gaa gag aca aga gta ctt ctg tta aca 3294
Asp Lys Ser Tyr Ile Ser Glu Glu Thr Arg Val Leu Leu Leu Thr
1085 1090 1095
gga aag cca aaa cct gct gga gta cta ggt gct gta aac aag cct 3339
Gly Lys Pro Lys Pro Ala Gly Val Leu Gly Ala Val Asn Lys Pro
1100 1105 1110
ttg tca gca acg gga agg aaa cca tat gtt aga agc act gga gct 3384
Leu Ser Ala Thr Gly Arg Lys Pro Tyr Val Arg Ser Thr Gly Ala
1115 1120 1125
gag acc gga agc aat att aat gta aat tca gag ctg aac cct tcc 3429
Glu Thr Gly Ser Asn Ile Asn Val Asn Ser Glu Leu Asn Pro Ser
1130 1135 1140
acc gga aat cga cca agg gaa cag agt tca gag gca gca gaa act 3474
Thr Gly Asn Arg Pro Arg Glu Gln Ser Ser Glu Ala Ala Glu Thr
1145 1150 1155
ggt gtt agt gaa aat gag gag aac cct gta aga att att tct gtc 3519
Gly Val Ser Glu Asn Glu Glu Asn Pro Val Arg Ile Ile Ser Val
1160 1165 1170
aca cca gta aag aat att gac cca gta aag aat aag gaa att aat 3564
Thr Pro Val Lys Asn Ile Asp Pro Val Lys Asn Lys Glu Ile Asn
1175 1180 1185
tct gat cag tct gcc cag ggc aac atc agc agt gac cga gga aag 3609
Ser Asp Gln Ser Ala Gln Gly Asn Ile Ser Ser Asp Arg Gly Lys
1190 1195 1200
aaa aga aca gta aca gca gct ggt gca gag aat atc caa caa aaa 3654
Lys Arg Thr Val Thr Ala Ala Gly Ala Glu Asn Ile Gln Gln Lys
1205 1210 1215
aca gat gag aaa gca gat gaa tca gga cca cct gcc cct tca aaa 3699
Thr Asp Glu Lys Ala Asp Glu Ser Gly Pro Pro Ala Pro Ser Lys
1220 1225 1230
ccc agg aga gga cgt cga ccc aaa tct gaa tct cag ggc aat gca 3744
Pro Arg Arg Gly Arg Arg Pro Lys Ser Glu Ser Gln Gly Asn Ala
1235 1240 1245
acc aaa aat gat gat ata aat aaa cct ctt agt aag gga aga aag 3789
Thr Lys Asn Asp Asp Ile Asn Lys Pro Leu Ser Lys Gly Arg Lys
1250 1255 1260
aga gct gca gtc agt cag gag agc cct gga ggt ctg gaa gca ggt 3834
Arg Ala Ala Val Ser Gln Glu Ser Pro Gly Gly Leu Glu Ala Gly
1265 1270 1275
aat gcc aaa gca ccc aaa ctg caa gac aca gcc aaa aag gca gca 3879
Asn Ala Lys Ala Pro Lys Leu Gln Asp Thr Ala Lys Lys Ala Ala
1280 1285 1290
ccg aca gag aga cag att gac ttg caa agg taa taaatttatt 3922
Pro Thr Glu Arg Gln Ile Asp Leu Gln Arg
1295 1300
tgcaaaggga gaaaatgaag gccaaacaga agcaggctct agcttctgca aaaacttgga 3982
ttcagaatga tgttgaacag acaatgaagc taacttcaga acacactttc tgccttgaaa 4042
actgaaaaaa gctattactt ccttttttca catgaccaca actcctttga tggaaatgta 4102
cagcagaaac tcttgagaga gaggctaaaa gcaactcttt tccaccctcc ccccagactt 4162
ttcttatgaa aagtcaataa ttaagcaaat tgcttaacac ttggttccag ttcctgcata 4222
tctggagttt aacggcataa tacaccatta atttccatgc tgcagtcttt attttaaaga 4282
aagtaacagg atgtccttac actgacaatg aaaattcatc aattttagag ccaggaattt 4342
cccgtgttac acaagaaaaa atagaagtct actgaattaa ttttttagaa gaagagaaat 4402
cagattaaat gtcttttttt tttccttttg gaaactttta tgtataattc tttctgcctg 4462
cctacttttc tgcaaaatga gatgtacaga tttcagttcc ctgctatgaa aagtgatgtg 4522
gtggcaattt tataaatgtt gctttctgat ttttatcaga gtgagaaaat aattaaaatt 4582
attattgatt tcatatcact tcatattttg atttcccctc cattttagtt taatataatt 4642
tgcaataaat gtacatattg ttgtctgttt cataaagcat atcactttaa agtggttttt 4702
actcctgtga ttatgttgga atatttgaaa ttttaaagga gtaaaaactg tccagcattt 4762
ggttttataa tgtttgtcac cagattttta ttattgatgt aaaaaaaagt caattctttt 4822
taaatagttg gactttggca gctttgtaag gaaagtggga ggtgcttagg attgctatca 4882
atttcagcat tgtgctgttg ggaataagtg ttttgctttt gtctgccagt ctgggctccg 4942
tttttatgtt ttttttgaag acaactattg catcaatata ttgtttcttg gcattgttca 5002
gcataggtaa tgtgtgcact tttcgtgtac acatattcat atttaagttt tttgcataaa 5062
ataaatgctt ctagatgtca tatggtagtc ttttttaatc tttttatcac attatgtttt 5122
cctgtgcagt ttttatgtga aagggctaaa gttataaaga aacaacatga ttacagtcaa 5182
ctctccatta tctatacaaa acagtgacta tgcctcaggt tttggatttt gcataaaatc 5242
acgtaattaa tcataaaatt aaagtaacaa agcataccgt aagagctaat tcaggaggaa 5302
ctcgagattg gtcctttctc acctgccccc actctccact taagcccttt ccccaaagcc 5362
ccatctgaat gtgctcagtg tccttgcgca cacctggcgt gggtttgagg acataaatgt 5422
ttgtgtgata acttggtctt gacaggctgt aagtctacgt gagatgtaaa gagtgaacat 5482
gacctgtgtc caaaaaggat gataatgtta aatgtaaaat ttgttggtag taaatgtcac 5542
ttaatgttct cataggtaat caagagttgg ctgtatactg actgactgaa agatggataa 5602
ttctcttaaa tatgcatata cacacattta ggtattggat gatggctagg gaacaatgga 5662
taccagatat taccttttaa aagggcagaa aaagttctac tcttccttat tgcctcttca 5722
taatccttta gaaagataag atattgcctc caacatgctg aaaaagaata tctatgcata 5782
agcatcagag aagtccctca agccatcagt gggcatgttc tgtttagatg ttgaagttct 5842
cttagcatca gacagcttga ttcttaaggc caccaatttg ccaccaataa aaagcacact 5902
ggtagaggcc gcctctctct cgtctccttt taactgacca ttcagcatca tagctgacta 5962
gattacctag cgtgaagtca tagctaacgt agtgtagcag ccattcccat cagttatggc 6022
tgcttagatt tttgcaagag agaagttagc tcaaaggatc tggtccatat acaaaatgta 6082
aatggcccac cttggatttt ttttaatacg aagcaagtgt ctggcactaa gggatgggag 6142
agtaggactg agctgatggg gagggactta agggaaattt gtcatttttc ctttgaaaaa 6202
ggaaaaagta aaatctctta ggaatttggt attcacatct cagagaaata caacacaaag 6262
tgcagactta tatttgagaa ttaatgttaa ccctttgtgt ctagtttgaa gcttcttgta 6322
tttgtctaaa actacaagcc agaattttgt atctcctttg ataaaaagtg tgtataatgt 6382
aaagtagttt tgcatattct tgtgctgcac atgggctgaa tttttaaaaa attttttaaa 6442
agacttgaag agaaccttgt aatttgtgta aatgacaagt gtaaaatcct accataaaat 6502
gctaaaaata tgcattgttt caaataaaac caagaaatgc agcattatat a 6553
<210> 8
<211> 1303
<212> PRT
<213> 牛（Bos taurus）
<400> 8
Met Asp Phe Thr Ala Gln Pro Lys Pro Ala Thr Ala Leu Cys Gly Val
1 5 10 15
Val Ser Ala Asp Gly Lys Ile Ala Tyr Pro Pro Gly Val Lys Glu Ile
20 25 30
Thr Asp Lys Ile Thr Thr Asp Glu Met Ile Lys Arg Leu Lys Met Val
35 40 45
Val Lys Thr Phe Met Asp Met Asp Gln Asp Ser Glu Asp Glu Lys Gln
50 55 60
Gln Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His Leu Ala Ser Glu Phe Phe Leu Arg
65 70 75 80
Asn Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu Leu Val Ala Cys Cys Leu Ala Asp
85 90 95
Ile Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu Ala Pro Tyr Thr Ser His Asp Lys
100 105 110
Leu Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile Thr Arg Gln Leu Lys Gly Leu Glu
115 120 125
Asp Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn Arg Tyr Phe Tyr Leu Leu Glu Asn
130 135 140
Leu Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn Ile Cys Phe Glu Leu Glu Asp Cys
145 150 155 160
Asn Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe Arg Thr Leu Phe Ser Val Ile Asn
165 170 175
Asn Ser His Asn Lys Lys Val Gln Met His Met Leu Asp Leu Met Ser
180 185 190
Ser Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly Val Thr Gln Glu Leu Leu Asp Ser
195 200 205
Ile Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu Asn Lys Gln Ser
210 215 220
Phe Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu Lys Arg Thr Val Gln Thr Ile Glu
225 230 235 240
Ala Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn Gln Val Leu Val Leu Gly Arg Ser
245 250 255
Ser Val Ser Asp Leu Ser Glu His Val Phe Asp Leu Ile Gln Glu Leu
260 265 270
Phe Ala Ile Asp Pro His Leu Leu Leu Ser Val Met Pro Gln Leu Glu
275 280 285
Phe Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly Glu Glu Arg Leu Ala Val Val Arg
290 295 300
Leu Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser Lys Asp Ser Asp Leu Ala Thr Gln
305 310 315 320
Asn Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe Leu Gly Arg Phe Asn Asp Ile His
325 330 335
Val Pro Val Arg Leu Glu Ser Val Lys Phe Ala Ser His Cys Leu Met
340 345 350
Asn His Pro Asp Leu Ala Lys Asp Leu Thr Gly Phe Thr Leu Ala Leu
355 360 365
Phe Gln Val Ser Asn Ser His Gly Leu Trp Arg Val Arg Lys Glu Ala
370 375 380
Met Met Gly Leu Ala Gln Leu Tyr Lys Lys Tyr Cys Leu His Gly Glu
385 390 395 400
Ala Gly Lys Glu Ala Ala Glu Lys Val Ser Trp Ile Lys Asp Lys Leu
405 410 415
Leu His Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser Ile Asp Asp Lys Leu Leu Val Glu
420 425 430
Lys Ile Phe Ala Gln Tyr Leu Val Pro His Asn Leu Glu Thr Glu Glu
435 440 445
Arg Met Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu Tyr Ala Ser Leu Asp Pro Asn Ala
450 455 460
Val Lys Ala Leu Asn Glu Met Trp Lys Cys Gln Asn Met Leu Arg Ser
465 470 475 480
His Val Arg Glu Leu Leu Asp Leu His Lys Gln Pro Thr Ser Glu Ala
485 490 495
Asn Cys Ser Ala Met Phe Gly Lys Leu Met Thr Ile Ala Lys Asn Leu
500 505 510
Pro Asp Pro Gly Lys Ala Gln Asp Phe Val Lys Lys Phe Asn Gln Val
515 520 525
Leu Gly Asp Asp Glu Lys Leu Arg Ser Gln Leu Glu Leu Leu Ile Ser
530 535 540
Pro Thr Cys Ser Cys Lys Gln Ala Asp Val Cys Val Arg Glu Ile Ala
545 550 555 560
Arg Lys Leu Ala Asn Pro Lys Gln Pro Thr Asn Pro Phe Leu Glu Met
565 570 575
Val Lys Phe Leu Leu Glu Arg Ile Ala Pro Val His Ile Asp Ser Glu
580 585 590
Ala Ile Ser Ala Leu Val Lys Leu Met Asn Lys Ser Ile Glu Gly Thr
595 600 605
Ala Asp Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Pro Asp Thr Ala Ile Arg Ser
610 615 620
Gly Leu Glu Leu Leu Lys Val Leu Ser Phe Thr His Pro Thr Ser Phe
625 630 635 640
His Ser Ala Glu Thr Tyr Glu Ser Leu Leu Gln Cys Leu Arg Met Glu
645 650 655
Asp Asp Lys Val Ala Glu Ala Ala Ile Gln Ile Phe Arg Asn Thr Gly
660 665 670
His Lys Ile Glu Thr Asp Leu Pro Gln Ile Arg Ser Thr Leu Ile Pro
675 680 685
Ile Leu His Gln Lys Ala Lys Arg Gly Thr Pro His Gln Ala Lys Gln
690 695 700
Ala Val His Cys Ile His Ala Ile Phe Thr Asn Lys Glu Val Gln Leu
705 710 715 720
Ala Gln Ile Phe Glu Pro Leu Ser Arg Ser Leu Asn Ala Asp Val Pro
725 730 735
Glu Gln Leu Ile Thr Pro Leu Val Ser Leu Gly His Ile Ser Met Leu
740 745 750
Ala Pro Asp Gln Phe Ala Ser Pro Met Lys Ser Val Val Ala Asn Phe
755 760 765
Ile Val Lys Asp Leu Leu Met Asn Asp Arg Ser Thr Gly Glu Lys Asn
770 775 780
Gly Lys Leu Trp Ser Pro Asp Glu Glu Val Ser Pro Glu Val Leu Ala
785 790 795 800
Lys Val Gln Ala Ile Lys Leu Leu Val Arg Trp Leu Leu Gly Met Lys
805 810 815
Asn Asn Gln Ser Lys Ser Ala Asn Ser Thr Leu Arg Leu Leu Ser Ala
820 825 830
Met Leu Val Ser Glu Gly Asp Leu Thr Glu Gln Lys Arg Ile Ser Lys
835 840 845
Ser Asp Met Ser Arg Leu Arg Leu Ala Ala Gly Ser Ala Ile Met Lys
850 855 860
Leu Ala Gln Glu Pro Cys Tyr His Glu Ile Ile Thr Pro Glu Gln Phe
865 870 875 880
Gln Leu Cys Ala Leu Val Ile Asn Asp Glu Cys Tyr Gln Val Arg Gln
885 890 895
Ile Phe Ala Gln Lys Leu His Lys Ala Leu Val Lys Leu Leu Leu Pro
900 905 910
Leu Glu Tyr Met Ala Ile Phe Ala Leu Cys Ala Lys Asp Pro Val Lys
915 920 925
Glu Arg Arg Ala His Ala Arg Gln Cys Leu Leu Lys Asn Ile Ser Ile
930 935 940
Arg Arg Glu Tyr Ile Lys Gln Asn Pro Met Ala Thr Glu Lys Leu Leu
945 950 955 960
Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val Pro Tyr Met Ile His Leu Leu Ala
965 970 975
His Asp Pro Asp Phe Thr Arg Ser Gln Asp Val Asp Gln Leu Arg Asp
980 985 990
Ile Lys Glu Cys Leu Trp Phe Met Leu Glu Val Leu Met Thr Lys Asn
995 1000 1005
Glu Asn Asn Ser His Ala Phe Met Lys Lys Met Ala Glu Asn Ile
1010 1015 1020
Lys Leu Thr Lys Asp Ala Gln Ser Pro Asp Glu Ser Lys Thr Asn
1025 1030 1035
Glu Lys Leu Tyr Thr Val Cys Asp Val Ala Leu Cys Val Ile Asn
1040 1045 1050
Ser Lys Ser Ala Leu Cys Asn Ala Glu Ser Pro Lys Asp Pro Val
1055 1060 1065
Leu Pro Val Lys Phe Phe Thr Gln Pro Glu Lys Asp Phe Cys Asn
1070 1075 1080
Asp Lys Ser Tyr Ile Ser Glu Glu Thr Arg Val Leu Leu Leu Thr
1085 1090 1095
Gly Lys Pro Lys Pro Ala Gly Val Leu Gly Ala Val Asn Lys Pro
1100 1105 1110
Leu Ser Ala Thr Gly Arg Lys Pro Tyr Val Arg Ser Thr Gly Ala
1115 1120 1125
Glu Thr Gly Ser Asn Ile Asn Val Asn Ser Glu Leu Asn Pro Ser
1130 1135 1140
Thr Gly Asn Arg Pro Arg Glu Gln Ser Ser Glu Ala Ala Glu Thr
1145 1150 1155
Gly Val Ser Glu Asn Glu Glu Asn Pro Val Arg Ile Ile Ser Val
1160 1165 1170
Thr Pro Val Lys Asn Ile Asp Pro Val Lys Asn Lys Glu Ile Asn
1175 1180 1185
Ser Asp Gln Ser Ala Gln Gly Asn Ile Ser Ser Asp Arg Gly Lys
1190 1195 1200
Lys Arg Thr Val Thr Ala Ala Gly Ala Glu Asn Ile Gln Gln Lys
1205 1210 1215
Thr Asp Glu Lys Ala Asp Glu Ser Gly Pro Pro Ala Pro Ser Lys
1220 1225 1230
Pro Arg Arg Gly Arg Arg Pro Lys Ser Glu Ser Gln Gly Asn Ala
1235 1240 1245
Thr Lys Asn Asp Asp Ile Asn Lys Pro Leu Ser Lys Gly Arg Lys
1250 1255 1260
Arg Ala Ala Val Ser Gln Glu Ser Pro Gly Gly Leu Glu Ala Gly
1265 1270 1275
Asn Ala Lys Ala Pro Lys Leu Gln Asp Thr Ala Lys Lys Ala Ala
1280 1285 1290
Pro Thr Glu Arg Gln Ile Asp Leu Gln Arg
1295 1300
<210> 9
<211> 6680
<212> DNA
<213> 马（Equus caballus）
<220>
<221> CDS
<222> (1)..(4014)
<223>
<400> 9
atg gac ttc acc gcg cag ccc aag cct gcc act gcc ctc tgt ggc gtc 48
Met Asp Phe Thr Ala Gln Pro Lys Pro Ala Thr Ala Leu Cys Gly Val
1 5 10 15
gtg agt gcg gac ggg aag atc gct tac cct ccg ggg gta aag gag atc 96
Val Ser Ala Asp Gly Lys Ile Ala Tyr Pro Pro Gly Val Lys Glu Ile
20 25 30
acc gac aag atc acc act gac gaa atg atc aaa cga ctg aag atg gta 144
Thr Asp Lys Ile Thr Thr Asp Glu Met Ile Lys Arg Leu Lys Met Val
35 40 45
gta aaa act ttt atg gat atg gac cag gac tca gaa gat gaa aaa cag 192
Val Lys Thr Phe Met Asp Met Asp Gln Asp Ser Glu Asp Glu Lys Gln
50 55 60
cag tat ctc cca ctc gcc ttg cat ctt gca tct gaa ttt ttc ctc agg 240
Gln Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His Leu Ala Ser Glu Phe Phe Leu Arg
65 70 75 80
aat ccc aat aaa gat gtg cgt ctc ctt gta gca tgt tgt ttg gct gac 288
Asn Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu Leu Val Ala Cys Cys Leu Ala Asp
85 90 95
atc ttt cga atc tat gcc cca gaa gct cca tat act tcc cat gat aaa 336
Ile Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu Ala Pro Tyr Thr Ser His Asp Lys
100 105 110
ctt aag gac ata ttt ttg ttt att acc aga caa tta aaa ggt ttg gag 384
Leu Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile Thr Arg Gln Leu Lys Gly Leu Glu
115 120 125
gat aca aag agt ccg cag ttt aat aga tac ttt tat tta tta gag aat 432
Asp Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn Arg Tyr Phe Tyr Leu Leu Glu Asn
130 135 140
tta gct tgg gtt aaa tca tat aac atc tgc ttt gaa ttg gaa gat tgc 480
Leu Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn Ile Cys Phe Glu Leu Glu Asp Cys
145 150 155 160
aat gaa att ttt att cag ctt ttt agg act ctc ttc tca gtg atc aac 528
Asn Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe Arg Thr Leu Phe Ser Val Ile Asn
165 170 175
aat agc cac aat aag aag gta caa atg cac atg cta gac ttg atg agt 576
Asn Ser His Asn Lys Lys Val Gln Met His Met Leu Asp Leu Met Ser
180 185 190
tct atc atc atg gaa ggt gat gga gtt act caa gaa tta ttg gac tcc 624
Ser Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly Val Thr Gln Glu Leu Leu Asp Ser
195 200 205
att ctt att aac ctc att cct gca cat aag aac tta aac aaa cag tcc 672
Ile Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu Asn Lys Gln Ser
210 215 220
ttt gac ctc gct aaa gtg ctg ttg aaa agg aca gtc cag act att gag 720
Phe Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu Lys Arg Thr Val Gln Thr Ile Glu
225 230 235 240
gca tgc att gct aat ttt ttc aat caa gtc ctg gtg ctg gga aga tca 768
Ala Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn Gln Val Leu Val Leu Gly Arg Ser
245 250 255
tca gta agt gat tta tca gaa cat gta ttt gat ctg att cag gaa ctt 816
Ser Val Ser Asp Leu Ser Glu His Val Phe Asp Leu Ile Gln Glu Leu
260 265 270
ttt gct ata gat cct cat ttg tta tta tct gtc atg cca cag ctt gaa 864
Phe Ala Ile Asp Pro His Leu Leu Leu Ser Val Met Pro Gln Leu Glu
275 280 285
ttc aaa ctg aag agc aat gat gga gaa gag cga cta gct gtt gtt cga 912
Phe Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly Glu Glu Arg Leu Ala Val Val Arg
290 295 300
ctt tta gct aaa ttg ttt ggt tct aaa gat tcc gat ttg gca aca cag 960
Leu Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser Lys Asp Ser Asp Leu Ala Thr Gln
305 310 315 320
aat cgt cct ctt tgg cag tgt ttt ctc gga cga ttt aat gac att cac 1008
Asn Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe Leu Gly Arg Phe Asn Asp Ile His
325 330 335
gtt cct gtg aga tta gaa agt gtg aaa ttt gcc agt cac tgt tta atg 1056
Val Pro Val Arg Leu Glu Ser Val Lys Phe Ala Ser His Cys Leu Met
340 345 350
aac cac cca gat tta gca aag gac ctc aca gaa tat ttg aaa gtt aga 1104
Asn His Pro Asp Leu Ala Lys Asp Leu Thr Glu Tyr Leu Lys Val Arg
355 360 365
tca cat gat cca gaa gaa gcc att cgt cat gat gtc att gtt act ata 1152
Ser His Asp Pro Glu Glu Ala Ile Arg His Asp Val Ile Val Thr Ile
370 375 380
ata aca gct gcc aaa aga gac ctt gcc tta gta aat gat cag ctg ctt 1200
Ile Thr Ala Ala Lys Arg Asp Leu Ala Leu Val Asn Asp Gln Leu Leu
385 390 395 400
ggc ttt gta agg gaa aga aca ctg gat aaa cgg tgg cga gta aga aaa 1248
Gly Phe Val Arg Glu Arg Thr Leu Asp Lys Arg Trp Arg Val Arg Lys
405 410 415
gaa gct atg atg ggt ctg gct cag ctt tat aag aaa tac tgt ctt cat 1296
Glu Ala Met Met Gly Leu Ala Gln Leu Tyr Lys Lys Tyr Cys Leu His
420 425 430
ggt gaa gca gga aag gaa gct gca gag aaa gtc agt tgg ata aag gac 1344
Gly Glu Ala Gly Lys Glu Ala Ala Glu Lys Val Ser Trp Ile Lys Asp
435 440 445
aaa ctt ttg cat att tat tat cag aat agc atc gat gac aaa ctg ttg 1392
Lys Leu Leu His Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser Ile Asp Asp Lys Leu Leu
450 455 460
gta gag aaa atc ttt gct cag tat ctt gtt ccc cac aac ctg gaa aca 1440
Val Glu Lys Ile Phe Ala Gln Tyr Leu Val Pro His Asn Leu Glu Thr
465 470 475 480
gaa gag aga atg aaa tgc tta tat tat tta tat gct agt ttg gat cca 1488
Glu Glu Arg Met Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu Tyr Ala Ser Leu Asp Pro
485 490 495
aat gct gtc aaa gct ctc aat gaa atg tgg aag tgt cag aac atg ctt 1536
Asn Ala Val Lys Ala Leu Asn Glu Met Trp Lys Cys Gln Asn Met Leu
500 505 510
aga agt cat gta cga gaa tta ctg gat ttg cat aag cag cct aca tca 1584
Arg Ser His Val Arg Glu Leu Leu Asp Leu His Lys Gln Pro Thr Ser
515 520 525
gag gct aac tgt tct gct atg ttt gga aaa ctg atg acc ata gca aag 1632
Glu Ala Asn Cys Ser Ala Met Phe Gly Lys Leu Met Thr Ile Ala Lys
530 535 540
aat ttg cct gac cct ggg aaa gca caa gat ttt gtg aag aaa ttt aac 1680
Asn Leu Pro Asp Pro Gly Lys Ala Gln Asp Phe Val Lys Lys Phe Asn
545 550 555 560
cag gtt ctc ggt gat gat gag aaa cta cgg tct cag ttg gag tta tta 1728
Gln Val Leu Gly Asp Asp Glu Lys Leu Arg Ser Gln Leu Glu Leu Leu
565 570 575
atc agc cca acc tgt tca tgc aaa cag gca gat gtt tgt gtg aga gaa 1776
Ile Ser Pro Thr Cys Ser Cys Lys Gln Ala Asp Val Cys Val Arg Glu
580 585 590
ata gct cgg aaa ctt gca aat cct aag caa cca aca aat cct ttt cta 1824
Ile Ala Arg Lys Leu Ala Asn Pro Lys Gln Pro Thr Asn Pro Phe Leu
595 600 605
gag atg gtc aaa ttt ctg ttg gaa aga att gca cct gtg cac att gat 1872
Glu Met Val Lys Phe Leu Leu Glu Arg Ile Ala Pro Val His Ile Asp
610 615 620
tcg gaa gcc ata agt gca ctg gta aaa ttg atg aat aaa tcc ata gag 1920
Ser Glu Ala Ile Ser Ala Leu Val Lys Leu Met Asn Lys Ser Ile Glu
625 630 635 640
ggg aca gca gat gat gaa gag gag ggt gta agt cca gat aca gcg att 1968
Gly Thr Ala Asp Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Pro Asp Thr Ala Ile
645 650 655
cgt tca gga ctt gaa ctt ctt aag gtt ctg tct ttc aca cat cct acc 2016
Arg Ser Gly Leu Glu Leu Leu Lys Val Leu Ser Phe Thr His Pro Thr
660 665 670
tcg ttc cac tct gca gag acg tat gag tcc ctg tta cag tgc ctc aga 2064
Ser Phe His Ser Ala Glu Thr Tyr Glu Ser Leu Leu Gln Cys Leu Arg
675 680 685
atg gaa gat gac aag gta gca gaa gct gct ata caa att ttt aga aat 2112
Met Glu Asp Asp Lys Val Ala Glu Ala Ala Ile Gln Ile Phe Arg Asn
690 695 700
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Thr Gly His Lys Ile Glu Thr Asp Leu Pro Gln Ile Arg Ser Thr Leu
705 710 715 720
att ccc att tta cat cag aaa gca aag aga ggt act cca cac caa gca 2208
Ile Pro Ile Leu His Gln Lys Ala Lys Arg Gly Thr Pro His Gln Ala
725 730 735
aaa cag gct gtt cac tgt ata cat gcc ata ttc aca aat aaa gaa gtc 2256
Lys Gln Ala Val His Cys Ile His Ala Ile Phe Thr Asn Lys Glu Val
740 745 750
cag ctt gca cag att ttt gag cca ctc agt agg agt ctg aat gct gat 2304
Gln Leu Ala Gln Ile Phe Glu Pro Leu Ser Arg Ser Leu Asn Ala Asp
755 760 765
gta cca gaa caa ctt ata act cca tta gtt tca ttg ggc cac ata tct 2352
Val Pro Glu Gln Leu Ile Thr Pro Leu Val Ser Leu Gly His Ile Ser
770 775 780
atg tta gca cca gat cag ttt gct tct cca atg aaa tct gta gta gca 2400
Met Leu Ala Pro Asp Gln Phe Ala Ser Pro Met Lys Ser Val Val Ala
785 790 795 800
aat ttt att gtg aaa gat ctc cta atg aat gac agg tca aca ggt gag 2448
Asn Phe Ile Val Lys Asp Leu Leu Met Asn Asp Arg Ser Thr Gly Glu
805 810 815
aag aat gga aaa tta tgg tct cca gat gaa gaa gtt tct cct gaa gta 2496
Lys Asn Gly Lys Leu Trp Ser Pro Asp Glu Glu Val Ser Pro Glu Val
820 825 830
tta gca aag gta cag gca att aaa ctt ctg gta agg tgg ctg ttg ggt 2544
Leu Ala Lys Val Gln Ala Ile Lys Leu Leu Val Arg Trp Leu Leu Gly
835 840 845
atg aaa aac aac cag tct aaa tct gcc aat tca act ctt cgg tta tta 2592
Met Lys Asn Asn Gln Ser Lys Ser Ala Asn Ser Thr Leu Arg Leu Leu
850 855 860
tca gcg atg ttg gtt agt gag ggt gac ctg aca gag caa aag agg atc 2640
Ser Ala Met Leu Val Ser Glu Gly Asp Leu Thr Glu Gln Lys Arg Ile
865 870 875 880
agt aaa tct gat atg tct cgc ttg cga tta gct gct ggt agt gcc ata 2688
Ser Lys Ser Asp Met Ser Arg Leu Arg Leu Ala Ala Gly Ser Ala Ile
885 890 895
atg aag ctt gct cag gaa cct tgt tac cat gaa att ata acc cca gaa 2736
Met Lys Leu Ala Gln Glu Pro Cys Tyr His Glu Ile Ile Thr Pro Glu
900 905 910
cag ttt cag ctc tgt gca ctt gtt att aat gat gag tgc tac caa gta 2784
Gln Phe Gln Leu Cys Ala Leu Val Ile Asn Asp Glu Cys Tyr Gln Val
915 920 925
agg cag ata ttt gct cag aag ctg cat aag gcg ctt gta aag ttg ctg 2832
Arg Gln Ile Phe Ala Gln Lys Leu His Lys Ala Leu Val Lys Leu Leu
930 935 940
ctc ccg ttg gag tat atg gcg atc ttt gcc ttg tgt gcc aaa gat cct 2880
Leu Pro Leu Glu Tyr Met Ala Ile Phe Ala Leu Cys Ala Lys Asp Pro
945 950 955 960
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Val Lys Glu Arg Arg Ala His Ala Arg Gln Cys Leu Leu Lys Asn Ile
965 970 975
agt ata cgc agg gag tac att aaa cag aac ccc atg gct act gag aaa 2976
Ser Ile Arg Arg Glu Tyr Ile Lys Gln Asn Pro Met Ala Thr Glu Lys
980 985 990
tta tta tca ctg ttg cct gaa tat gta gtt cca tat atg att cac cta 3024
Leu Leu Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val Pro Tyr Met Ile His Leu
995 1000 1005
tta gcc cat gat cca gat ttt aca aga tca caa gat gtt gat caa 3069
Leu Ala His Asp Pro Asp Phe Thr Arg Ser Gln Asp Val Asp Gln
1010 1015 1020
ctt cgt gat att aaa gag tgc cta tgg ttc atg ctt gaa gtt tta 3114
Leu Arg Asp Ile Lys Glu Cys Leu Trp Phe Met Leu Glu Val Leu
1025 1030 1035
atg aca aag aat gaa aac aat agc cat gcc ttt atg aag aag atg 3159
Met Thr Lys Asn Glu Asn Asn Ser His Ala Phe Met Lys Lys Met
1040 1045 1050
gca gaa aac atc aag tta aca aaa gat gcc cag tct cca gat gaa 3204
Ala Glu Asn Ile Lys Leu Thr Lys Asp Ala Gln Ser Pro Asp Glu
1055 1060 1065
tcc aag aca aat gaa aaa ctt tat aca gtg tgt gat gtg gct ctg 3249
Ser Lys Thr Asn Glu Lys Leu Tyr Thr Val Cys Asp Val Ala Leu
1070 1075 1080
tgt gtt ata aac agt aaa agt gct ttg tgc aat gca gat tca cca 3294
Cys Val Ile Asn Ser Lys Ser Ala Leu Cys Asn Ala Asp Ser Pro
1085 1090 1095
aag gat cca gtc ctt cca atg aaa ttt ttt aca caa cct gaa aag 3339
Lys Asp Pro Val Leu Pro Met Lys Phe Phe Thr Gln Pro Glu Lys
1100 1105 1110
gac ttc tgt aat gac aag agt tat att tca gaa gag aca aga gta 3384
Asp Phe Cys Asn Asp Lys Ser Tyr Ile Ser Glu Glu Thr Arg Val
1115 1120 1125
ctt ctg tta aca gga aag cca aaa cct gct gga gta ctt ggt gca 3429
Leu Leu Leu Thr Gly Lys Pro Lys Pro Ala Gly Val Leu Gly Ala
1130 1135 1140
gta aac aag cct tta tcg gca acg gga agg aaa cca tat gtt aga 3474
Val Asn Lys Pro Leu Ser Ala Thr Gly Arg Lys Pro Tyr Val Arg
1145 1150 1155
agc act gga act gag act gga agc act att aat gtc aat tca gag 3519
Ser Thr Gly Thr Glu Thr Gly Ser Thr Ile Asn Val Asn Ser Glu
1160 1165 1170
ctg aac cct tca act gga agt cga tca aga gaa cag agt tca gag 3564
Leu Asn Pro Ser Thr Gly Ser Arg Ser Arg Glu Gln Ser Ser Glu
1175 1180 1185
gca gca gaa act gga gtt agt gaa aat gaa gag aac cct gtg aga 3609
Ala Ala Glu Thr Gly Val Ser Glu Asn Glu Glu Asn Pro Val Arg
1190 1195 1200
att att tct gtc acg cct gta aag aat att gac ccg gta aag aat 3654
Ile Ile Ser Val Thr Pro Val Lys Asn Ile Asp Pro Val Lys Asn
1205 1210 1215
aag gag att aat tct gat cag gct acc cag ggc aac atc agc agt 3699
Lys Glu Ile Asn Ser Asp Gln Ala Thr Gln Gly Asn Ile Ser Ser
1220 1225 1230
gac cga gga aag aaa aga aca gta aca gca gct ggt aca gag aat 3744
Asp Arg Gly Lys Lys Arg Thr Val Thr Ala Ala Gly Thr Glu Asn
1235 1240 1245
atc caa caa aaa aca gat gag aaa gtg gat gaa tca gga cca cct 3789
Ile Gln Gln Lys Thr Asp Glu Lys Val Asp Glu Ser Gly Pro Pro
1250 1255 1260
gcc cct tca aaa ccc agg aga gga cgt cga ccc aag tct gaa tct 3834
Ala Pro Ser Lys Pro Arg Arg Gly Arg Arg Pro Lys Ser Glu Ser
1265 1270 1275
cag ggc aat gca acc aaa aat gat gat ata aat aaa cct ctt agc 3879
Gln Gly Asn Ala Thr Lys Asn Asp Asp Ile Asn Lys Pro Leu Ser
1280 1285 1290
aag gga aga aag aga gcc gcg gtc agt cag gaa agc cct ggg ggt 3924
Lys Gly Arg Lys Arg Ala Ala Val Ser Gln Glu Ser Pro Gly Gly
1295 1300 1305
ttg gaa gca ggt aat gcc aaa gca ccc aaa ctg caa gac ata gcc 3969
Leu Glu Ala Gly Asn Ala Lys Ala Pro Lys Leu Gln Asp Ile Ala
1310 1315 1320
aaa aag gca gca cca gca gag aga cag att gac cta caa agg taa 4014
Lys Lys Ala Ala Pro Ala Glu Arg Gln Ile Asp Leu Gln Arg
1325 1330 1335
taaaactcgt ttgcaaaggg agaaaatgaa ggccaaacag aagcaggctc cagcttctgt 4074
aaaacttgga ttcaaaatgt ccctgaagag aaatgaagtt aagttcagaa cacacacttt 4134
ctgccttgaa aactgaaaga aaccattact ttcttttcac atgaccacaa gtctttgatg 4194
gaaatgtaca gcagaaactc ttgagagagg ctaaaagcaa ctctattcta cccttccccc 4254
cagacttttc ttatgaaaag tcaataatta agcaaattgc ttaacacttg gttccagttc 4314
ctgcatatct ggagtttaaa ggcatagtac accattaatt tccatgctgc agtttttatt 4374
ttaaagaaag taacaggatg tccttacact gacactgaaa attcatcaat tttagagcca 4434
ggaattcccg ttgttacaca agaaaaaaat agaagtctac tgaattaatt ttttagaaga 4494
aaaaagatca gattaaatat ttctttgttt ttccttttgg aaacttttat gtataattct 4554
ttctgcctgc ctacttttct gcaaaaatga gatgtacaga tttcagttcc ctgctatgaa 4614
aagtgatgtg gtggcaattt tataaatgtt gctttctgat ttttatcaga gtgagaaaat 4674
aattaaaatt attattgatt tcatatcact tcatattttg atttcccctc cattttagtt 4734
taatataatt tgcaataaat gtacatattg ttgtttgttt cataaagcat atcactttaa 4794
agtggttttt actcctgtga ttatgttggg atatttggaa ttttaaagga gtaaagactg 4854
tccagcattt ggttttataa tgtttgtcac cagattttta ttattgatgt aaaaaaacaa 4914
agtcaatttt ttaaaatagt tggactttgg cagctttgta aggaaagttg gaagtgttta 4974
ggattgctat caatttcagc attgtgctat tgggaaataa gtgttttgct tttgtctgcc 5034
gatctgggct cagtttttat gtttatttta gaagacaact gttgcatcaa tatattgctt 5094
cttggcattg ttcagcatag gtaatgtgtg cacttttgtg tacacatgct catatttaag 5154
ttttcgcata aaataaatgc ttctagatgt catatggtag tcttttttaa tctttttatc 5214
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cagtcaactc tccattatct atataaaata gtgactgtgc ctcaggtttt gaattttgca 5334
gtaatcataa acttaaaata atgaaggcat actgcaggag ctaattcagg aggaacttga 5394
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tcccaaagcc ctagctgggt gttcttactc cattcccaca cacatgccta gcctgggtta 5514
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ctactcttcc ttattgcctc ttcctaaccc tttagaagga aagtataaaa aaaacattgc 5874
ctccaacatg ctgaagaaga atatctatgc ataagcatct gagaagtccc tcaagcaatc 5934
agtgggcacg ttctatttag aaagatttta aagttccctt agcatcagac agcttggttc 5994
ttaaggccac caattggtca ccaataagaa gcacacctgt agggaacttc tttctctctt 6054
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tcaacataat gtagcagaac catttgcatc agtttatggc tgctgagatt attgcaggag 6174
aggagttagc tgaaaggatc tggtccgcat acacatgtaa ctggcccact catgatttta 6234
taacatgtct ggcactaagg gaagggagaa taggatgata ggaaagattg agctgatgtg 6294
gagggacttg tttaagggaa atttgtcatt tttcctttga aaaaggaaaa agtaaaatcc 6354
cttaggaatt tggtattcgt atctcagaga aatacaacac aaagtgcaga cttatatttg 6414
agaattaatg ttaacccttt gtgtctagtt tgaagcttct tgtatttgtc taaaactaca 6474
agccagaatt ttgtatctcc tttgataaaa agtgtgtata atgtaaagta gttttgcata 6534
ttgtgctgca catgggctga atttttaaaa tttttttaaa gacttgaagc agaaccttgt 6594
aatttgtgta aatgacaagt gtaaaatcct accataaaat gctaaaaata tgcattgttt 6654
caaataaaac caagaaatgc agcatt 6680
<210> 10
<211> 1337
<212> PRT
<213> 马（Equus caballus）
<400> 10
Met Asp Phe Thr Ala Gln Pro Lys Pro Ala Thr Ala Leu Cys Gly Val
1 5 10 15
Val Ser Ala Asp Gly Lys Ile Ala Tyr Pro Pro Gly Val Lys Glu Ile
20 25 30
Thr Asp Lys Ile Thr Thr Asp Glu Met Ile Lys Arg Leu Lys Met Val
35 40 45
Val Lys Thr Phe Met Asp Met Asp Gln Asp Ser Glu Asp Glu Lys Gln
50 55 60
Gln Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His Leu Ala Ser Glu Phe Phe Leu Arg
65 70 75 80
Asn Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu Leu Val Ala Cys Cys Leu Ala Asp
85 90 95
Ile Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu Ala Pro Tyr Thr Ser His Asp Lys
100 105 110
Leu Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile Thr Arg Gln Leu Lys Gly Leu Glu
115 120 125
Asp Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn Arg Tyr Phe Tyr Leu Leu Glu Asn
130 135 140
Leu Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn Ile Cys Phe Glu Leu Glu Asp Cys
145 150 155 160
Asn Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe Arg Thr Leu Phe Ser Val Ile Asn
165 170 175
Asn Ser His Asn Lys Lys Val Gln Met His Met Leu Asp Leu Met Ser
180 185 190
Ser Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly Val Thr Gln Glu Leu Leu Asp Ser
195 200 205
Ile Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu Asn Lys Gln Ser
210 215 220
Phe Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu Lys Arg Thr Val Gln Thr Ile Glu
225 230 235 240
Ala Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn Gln Val Leu Val Leu Gly Arg Ser
245 250 255
Ser Val Ser Asp Leu Ser Glu His Val Phe Asp Leu Ile Gln Glu Leu
260 265 270
Phe Ala Ile Asp Pro His Leu Leu Leu Ser Val Met Pro Gln Leu Glu
275 280 285
Phe Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly Glu Glu Arg Leu Ala Val Val Arg
290 295 300
Leu Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser Lys Asp Ser Asp Leu Ala Thr Gln
305 310 315 320
Asn Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe Leu Gly Arg Phe Asn Asp Ile His
325 330 335
Val Pro Val Arg Leu Glu Ser Val Lys Phe Ala Ser His Cys Leu Met
340 345 350
Asn His Pro Asp Leu Ala Lys Asp Leu Thr Glu Tyr Leu Lys Val Arg
355 360 365
Ser His Asp Pro Glu Glu Ala Ile Arg His Asp Val Ile Val Thr Ile
370 375 380
Ile Thr Ala Ala Lys Arg Asp Leu Ala Leu Val Asn Asp Gln Leu Leu
385 390 395 400
Gly Phe Val Arg Glu Arg Thr Leu Asp Lys Arg Trp Arg Val Arg Lys
405 410 415
Glu Ala Met Met Gly Leu Ala Gln Leu Tyr Lys Lys Tyr Cys Leu His
420 425 430
Gly Glu Ala Gly Lys Glu Ala Ala Glu Lys Val Ser Trp Ile Lys Asp
435 440 445
Lys Leu Leu His Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser Ile Asp Asp Lys Leu Leu
450 455 460
Val Glu Lys Ile Phe Ala Gln Tyr Leu Val Pro His Asn Leu Glu Thr
465 470 475 480
Glu Glu Arg Met Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu Tyr Ala Ser Leu Asp Pro
485 490 495
Asn Ala Val Lys Ala Leu Asn Glu Met Trp Lys Cys Gln Asn Met Leu
500 505 510
Arg Ser His Val Arg Glu Leu Leu Asp Leu His Lys Gln Pro Thr Ser
515 520 525
Glu Ala Asn Cys Ser Ala Met Phe Gly Lys Leu Met Thr Ile Ala Lys
530 535 540
Asn Leu Pro Asp Pro Gly Lys Ala Gln Asp Phe Val Lys Lys Phe Asn
545 550 555 560
Gln Val Leu Gly Asp Asp Glu Lys Leu Arg Ser Gln Leu Glu Leu Leu
565 570 575
Ile Ser Pro Thr Cys Ser Cys Lys Gln Ala Asp Val Cys Val Arg Glu
580 585 590
Ile Ala Arg Lys Leu Ala Asn Pro Lys Gln Pro Thr Asn Pro Phe Leu
595 600 605
Glu Met Val Lys Phe Leu Leu Glu Arg Ile Ala Pro Val His Ile Asp
610 615 620
Ser Glu Ala Ile Ser Ala Leu Val Lys Leu Met Asn Lys Ser Ile Glu
625 630 635 640
Gly Thr Ala Asp Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Pro Asp Thr Ala Ile
645 650 655
Arg Ser Gly Leu Glu Leu Leu Lys Val Leu Ser Phe Thr His Pro Thr
660 665 670
Ser Phe His Ser Ala Glu Thr Tyr Glu Ser Leu Leu Gln Cys Leu Arg
675 680 685
Met Glu Asp Asp Lys Val Ala Glu Ala Ala Ile Gln Ile Phe Arg Asn
690 695 700
Thr Gly His Lys Ile Glu Thr Asp Leu Pro Gln Ile Arg Ser Thr Leu
705 710 715 720
Ile Pro Ile Leu His Gln Lys Ala Lys Arg Gly Thr Pro His Gln Ala
725 730 735
Lys Gln Ala Val His Cys Ile His Ala Ile Phe Thr Asn Lys Glu Val
740 745 750
Gln Leu Ala Gln Ile Phe Glu Pro Leu Ser Arg Ser Leu Asn Ala Asp
755 760 765
Val Pro Glu Gln Leu Ile Thr Pro Leu Val Ser Leu Gly His Ile Ser
770 775 780
Met Leu Ala Pro Asp Gln Phe Ala Ser Pro Met Lys Ser Val Val Ala
785 790 795 800
Asn Phe Ile Val Lys Asp Leu Leu Met Asn Asp Arg Ser Thr Gly Glu
805 810 815
Lys Asn Gly Lys Leu Trp Ser Pro Asp Glu Glu Val Ser Pro Glu Val
820 825 830
Leu Ala Lys Val Gln Ala Ile Lys Leu Leu Val Arg Trp Leu Leu Gly
835 840 845
Met Lys Asn Asn Gln Ser Lys Ser Ala Asn Ser Thr Leu Arg Leu Leu
850 855 860
Ser Ala Met Leu Val Ser Glu Gly Asp Leu Thr Glu Gln Lys Arg Ile
865 870 875 880
Ser Lys Ser Asp Met Ser Arg Leu Arg Leu Ala Ala Gly Ser Ala Ile
885 890 895
Met Lys Leu Ala Gln Glu Pro Cys Tyr His Glu Ile Ile Thr Pro Glu
900 905 910
Gln Phe Gln Leu Cys Ala Leu Val Ile Asn Asp Glu Cys Tyr Gln Val
915 920 925
Arg Gln Ile Phe Ala Gln Lys Leu His Lys Ala Leu Val Lys Leu Leu
930 935 940
Leu Pro Leu Glu Tyr Met Ala Ile Phe Ala Leu Cys Ala Lys Asp Pro
945 950 955 960
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965 970 975
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980 985 990
Leu Leu Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val Pro Tyr Met Ile His Leu
995 1000 1005
Leu Ala His Asp Pro Asp Phe Thr Arg Ser Gln Asp Val Asp Gln
1010 1015 1020
Leu Arg Asp Ile Lys Glu Cys Leu Trp Phe Met Leu Glu Val Leu
1025 1030 1035
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1040 1045 1050
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1055 1060 1065
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1070 1075 1080
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1085 1090 1095
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1100 1105 1110
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Leu Leu Leu Thr Gly Lys Pro Lys Pro Ala Gly Val Leu Gly Ala
1130 1135 1140
Val Asn Lys Pro Leu Ser Ala Thr Gly Arg Lys Pro Tyr Val Arg
1145 1150 1155
Ser Thr Gly Thr Glu Thr Gly Ser Thr Ile Asn Val Asn Ser Glu
1160 1165 1170
Leu Asn Pro Ser Thr Gly Ser Arg Ser Arg Glu Gln Ser Ser Glu
1175 1180 1185
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1205 1210 1215
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1220 1225 1230
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1235 1240 1245
Ile Gln Gln Lys Thr Asp Glu Lys Val Asp Glu Ser Gly Pro Pro
1250 1255 1260
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1265 1270 1275
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1280 1285 1290
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1295 1300 1305
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1310 1315 1320
Lys Lys Ala Ala Pro Ala Glu Arg Gln Ile Asp Leu Gln Arg
1325 1330 1335
<210> 11
<211> 4809
<212> DNA
<213> 鸡（Gallus gallus）
<220>
<221> CDS
<222> (231)..(4301)
<223>
<400> 11
ggctgttctt ccccggccgg acggagagcg gcactgtgtc cccgcggcgc gcgctcggcg 60
gagcctcccc ctctccgctg ctgccgccgc cgccaccgag cagctccccc tcccccttcc 120
gagcagagcc gccgcaccgc cgcgcaggga ggaggcggcg ggagcgggcg ggcagcggcc 180
ggcggggcgg cggcggagcg gcgaggagcg gccggcgcgg aggccgctcc atg ctg 236
Met Leu
1
cac ctt ccg gag ctg cgt gag agg ccg gta gag gac tgt gca gaa gga 284
His Leu Pro Glu Leu Arg Glu Arg Pro Val Glu Asp Cys Ala Glu Gly
5 10 15
aag ttt ctg agc agc ggc acc agg atg gac ttc ccg gct gcc caa cca 332
Lys Phe Leu Ser Ser Gly Thr Arg Met Asp Phe Pro Ala Ala Gln Pro
20 25 30
aaa ccc gcc gcc gat ggt aaa atc atc tac tac ccg ccc gga gtg aag 380
Lys Pro Ala Ala Asp Gly Lys Ile Ile Tyr Tyr Pro Pro Gly Val Lys
35 40 45 50
gag acc acc gac aaa att acc aac gat gag gtg gtg aaa cgg tta aag 428
Glu Thr Thr Asp Lys Ile Thr Asn Asp Glu Val Val Lys Arg Leu Lys
55 60 65
atg gtg gta aaa acg ttc atg gat atg gac cag gac tca gaa gac gag 476
Met Val Val Lys Thr Phe Met Asp Met Asp Gln Asp Ser Glu Asp Glu
70 75 80
aaa cag cag tat ctc cca tta gcc ttg cac ctt gca tct gaa ttc ttc 524
Lys Gln Gln Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His Leu Ala Ser Glu Phe Phe
85 90 95
ctc agg aat ccc aat aaa gat gtg cgc ctc ctt gta gca tgt tgc ttg 572
Leu Arg Asn Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu Leu Val Ala Cys Cys Leu
100 105 110
gct gat atc ttt cgt atc tat gct cct gaa gct cca tat act tcc cat 620
Ala Asp Ile Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu Ala Pro Tyr Thr Ser His
115 120 125 130
gac aaa ctt aag gac ata ttc ttg ttt att aca aga caa tta aaa ggc 668
Asp Lys Leu Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile Thr Arg Gln Leu Lys Gly
135 140 145
ttg gag gac aca aag agc cct cag ttt aac aga tac ttt tac ttg tta 716
Leu Glu Asp Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn Arg Tyr Phe Tyr Leu Leu
150 155 160
gag aat tta gct tgg gtt aaa tct tac aac atc tgc ttt gag ttg gaa 764
Glu Asn Leu Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn Ile Cys Phe Glu Leu Glu
165 170 175
gat tgc aat gaa att ttt att cag ctt ttt agg act ctt ttt tca gtt 812
Asp Cys Asn Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe Arg Thr Leu Phe Ser Val
180 185 190
atc aat aat agc cac aac cag aag gta caa atg cat atg ctg gat ttg 860
Ile Asn Asn Ser His Asn Gln Lys Val Gln Met His Met Leu Asp Leu
195 200 205 210
atg agt tct atc atc atg gaa ggc gat gga gta act cag gag ctg ctg 908
Met Ser Ser Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly Val Thr Gln Glu Leu Leu
215 220 225
gac tcc att ttg att aac ctc att cct gca cac aag aac ctt aat aag 956
Asp Ser Ile Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu Asn Lys
230 235 240
caa gca ttt gat ctt gca aaa gtc ctg ctg aaa agg act gtc cag acc 1004
Gln Ala Phe Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu Lys Arg Thr Val Gln Thr
245 250 255
att gaa ccg tgc att gcc aat ttt ttt aac cag gtt ctg gta ctg gga 1052
Ile Glu Pro Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn Gln Val Leu Val Leu Gly
260 265 270
aag tct tca gta agt gac tta tca gaa cat gta ttt gac ttg ata cta 1100
Lys Ser Ser Val Ser Asp Leu Ser Glu His Val Phe Asp Leu Ile Leu
275 280 285 290
gag ctt ttt gcc ata gat cct cac tta ctg ctg tct gtc atg ccc cag 1148
Glu Leu Phe Ala Ile Asp Pro His Leu Leu Leu Ser Val Met Pro Gln
295 300 305
ctt gaa ttc aaa ctg aag agc aat gat gga gaa gaa cgt ttg gct gtt 1196
Leu Glu Phe Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly Glu Glu Arg Leu Ala Val
310 315 320
gtt cga ctt ttg gct aaa ctc ttt ggc tct aaa gat tct gat ctg gcc 1244
Val Arg Leu Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser Lys Asp Ser Asp Leu Ala
325 330 335
aca caa aat cgt cct ctt tgg cag tgc ttt ctt ggg cgg ttc aat gat 1292
Thr Gln Asn Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe Leu Gly Arg Phe Asn Asp
340 345 350
atc cat gtc cct gtg aga tta gag agt gtg aaa ttc gcc agt cat tgt 1340
Ile His Val Pro Val Arg Leu Glu Ser Val Lys Phe Ala Ser His Cys
355 360 365 370
tta atg aac cat cca gac tta gcg aaa gac ctc act gaa tat ttg aag 1388
Leu Met Asn His Pro Asp Leu Ala Lys Asp Leu Thr Glu Tyr Leu Lys
375 380 385
gtt agg tca cat gac cca gag gaa gct att cga cac gat gtt att gtt 1436
Val Arg Ser His Asp Pro Glu Glu Ala Ile Arg His Asp Val Ile Val
390 395 400
aca att att act gcg ggc aag aga gat ctt tcc tta gtc aat gat cag 1484
Thr Ile Ile Thr Ala Gly Lys Arg Asp Leu Ser Leu Val Asn Asp Gln
405 410 415
ctg ctg ggc ttc gta agg gaa aga aca cta gac aaa cga tgg cga gta 1532
Leu Leu Gly Phe Val Arg Glu Arg Thr Leu Asp Lys Arg Trp Arg Val
420 425 430
aga aaa gaa gct atg atg ggt ctt gcc cag cta tac aag aaa tac tgt 1580
Arg Lys Glu Ala Met Met Gly Leu Ala Gln Leu Tyr Lys Lys Tyr Cys
435 440 445 450
ctt cat gcc gag gct gga aaa gat gct gca gag aaa gtg agc tgg ata 1628
Leu His Ala Glu Ala Gly Lys Asp Ala Ala Glu Lys Val Ser Trp Ile
455 460 465
aag gat aaa ctt ttg cac ata tat tat caa aat agc att gat gac aaa 1676
Lys Asp Lys Leu Leu His Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser Ile Asp Asp Lys
470 475 480
tta cta gta gag aaa atc ttt gct cag tat ctt gtt cca cac aat ttg 1724
Leu Leu Val Glu Lys Ile Phe Ala Gln Tyr Leu Val Pro His Asn Leu
485 490 495
gaa aca gaa gag cga atg aag tgc ttg tat tat ttg tat gcc agc ttg 1772
Glu Thr Glu Glu Arg Met Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu Tyr Ala Ser Leu
500 505 510
gat cca aat gct gtc aaa gca ctg aat gag atg tgg aag tgc cag aac 1820
Asp Pro Asn Ala Val Lys Ala Leu Asn Glu Met Trp Lys Cys Gln Asn
515 520 525 530
atg ctg agg agt cac gta cga gaa tta cta gac ttg cat aag cag ccc 1868
Met Leu Arg Ser His Val Arg Glu Leu Leu Asp Leu His Lys Gln Pro
535 540 545
aca tca gaa gca aac agt gct gcc atg ttt ggg aag ctg atg acc ata 1916
Thr Ser Glu Ala Asn Ser Ala Ala Met Phe Gly Lys Leu Met Thr Ile
550 555 560
gca aaa aac ctt cca gat cct gga aaa gca caa gat ttt gtg aag aaa 1964
Ala Lys Asn Leu Pro Asp Pro Gly Lys Ala Gln Asp Phe Val Lys Lys
565 570 575
ttc aat cag gtt cta ggc gat gat gaa aag ctt cgg tcc cag ctt gaa 2012
Phe Asn Gln Val Leu Gly Asp Asp Glu Lys Leu Arg Ser Gln Leu Glu
580 585 590
ctg tta att agc cct acg tgt tct tgt aaa cag gca gat gtc tgt gtg 2060
Leu Leu Ile Ser Pro Thr Cys Ser Cys Lys Gln Ala Asp Val Cys Val
595 600 605 610
aga gag ata gcc cgg aaa ctt gca aat cct aag cag cca aca aat cct 2108
Arg Glu Ile Ala Arg Lys Leu Ala Asn Pro Lys Gln Pro Thr Asn Pro
615 620 625
ttt ctg gaa atg gtc aaa ttt ctt ttg gaa aga att gct cct gta cat 2156
Phe Leu Glu Met Val Lys Phe Leu Leu Glu Arg Ile Ala Pro Val His
630 635 640
att gac tca gaa gcc att agt gca cta gta aaa ttg atg aat aaa tca 2204
Ile Asp Ser Glu Ala Ile Ser Ala Leu Val Lys Leu Met Asn Lys Ser
645 650 655
ata gag ggg aca gct gat gat gaa gag gag ggt gta agt cct gat act 2252
Ile Glu Gly Thr Ala Asp Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Pro Asp Thr
660 665 670
gca att cgt gca gga ctt gaa ctt ctc aag gtt ctg tcc ttt aca cat 2300
Ala Ile Arg Ala Gly Leu Glu Leu Leu Lys Val Leu Ser Phe Thr His
675 680 685 690
cct acc tcg ttt cac tct gcg gag acc tat gag tct ctg ctg cag tgc 2348
Pro Thr Ser Phe His Ser Ala Glu Thr Tyr Glu Ser Leu Leu Gln Cys
695 700 705
ctc agg atg gaa gat gat aag gta gct gag gca gcc ata cag att ttc 2396
Leu Arg Met Glu Asp Asp Lys Val Ala Glu Ala Ala Ile Gln Ile Phe
710 715 720
aga aac acg ggt cac aaa ata gaa aca gac ctg cca cag ata aga tca 2444
Arg Asn Thr Gly His Lys Ile Glu Thr Asp Leu Pro Gln Ile Arg Ser
725 730 735
aca tta att cca att ttg cat cag aaa gca aaa aga ggc act ccc cat 2492
Thr Leu Ile Pro Ile Leu His Gln Lys Ala Lys Arg Gly Thr Pro His
740 745 750
cag gca aaa caa gcc gtt cac tgt ata cat gcc ata ttt tca aat aaa 2540
Gln Ala Lys Gln Ala Val His Cys Ile His Ala Ile Phe Ser Asn Lys
755 760 765 770
gaa gtg caa ctt gct cag atc ttt gag cct ctt agt aga agt ttg aat 2588
Glu Val Gln Leu Ala Gln Ile Phe Glu Pro Leu Ser Arg Ser Leu Asn
775 780 785
gct gat gta cca gaa caa ctg ata act cca tta gtc tca ctg ggt cac 2636
Ala Asp Val Pro Glu Gln Leu Ile Thr Pro Leu Val Ser Leu Gly His
790 795 800
att tct atg ttg gct cca gac cag ttt gct tct cca atg aaa tct gtt 2684
Ile Ser Met Leu Ala Pro Asp Gln Phe Ala Ser Pro Met Lys Ser Val
805 810 815
gtt gca aat ttc gtt gta aaa gat ctt cta atg aat gac agg tca aca 2732
Val Ala Asn Phe Val Val Lys Asp Leu Leu Met Asn Asp Arg Ser Thr
820 825 830
ggt gag aaa aat gga aag ttg tgg tct cca gat gaa gag gtg tct cca 2780
Gly Glu Lys Asn Gly Lys Leu Trp Ser Pro Asp Glu Glu Val Ser Pro
835 840 845 850
gaa gta cta gca aag gtg caa gca att aaa ctt ttg gta cgc tgg ctg 2828
Glu Val Leu Ala Lys Val Gln Ala Ile Lys Leu Leu Val Arg Trp Leu
855 860 865
ctg ggt atg aaa aac aac cag tca aaa tct gca aat tcc aca ctc cga 2876
Leu Gly Met Lys Asn Asn Gln Ser Lys Ser Ala Asn Ser Thr Leu Arg
870 875 880
ttg tta tca gct atg ctt gtc agt gaa gga gac ttg aca gaa cag aag 2924
Leu Leu Ser Ala Met Leu Val Ser Glu Gly Asp Leu Thr Glu Gln Lys
885 890 895
cga atc agt aaa tcc gat atg tct cga cta cga tta gct gct ggc agt 2972
Arg Ile Ser Lys Ser Asp Met Ser Arg Leu Arg Leu Ala Ala Gly Ser
900 905 910
gca ata atg aag ctt gca cag gaa cca tgt tac cat gaa ata att acc 3020
Ala Ile Met Lys Leu Ala Gln Glu Pro Cys Tyr His Glu Ile Ile Thr
915 920 925 930
cca gaa cag ttc caa ctc tgt gcg ctc gtc att aat gat gag tgc tac 3068
Pro Glu Gln Phe Gln Leu Cys Ala Leu Val Ile Asn Asp Glu Cys Tyr
935 940 945
caa gtg agg cag ata ttt gcc cag aaa ctg cat aaa gca ctt gtg aaa 3116
Gln Val Arg Gln Ile Phe Ala Gln Lys Leu His Lys Ala Leu Val Lys
950 955 960
tta ctg ctc cct ttg gaa tat atg gca atc ttt gct ttg tgt gcc aaa 3164
Leu Leu Leu Pro Leu Glu Tyr Met Ala Ile Phe Ala Leu Cys Ala Lys
965 970 975
gat cct gtg aaa gag aga aga gca cat gcc aga cag tgc ttg ctt aaa 3212
Asp Pro Val Lys Glu Arg Arg Ala His Ala Arg Gln Cys Leu Leu Lys
980 985 990
aac atc agt ata cga aga gag tat att aag cag aat cct atg gct 3257
Asn Ile Ser Ile Arg Arg Glu Tyr Ile Lys Gln Asn Pro Met Ala
995 1000 1005
aac gaa aaa ttg ctg tcc ttg ctg cct gaa tat gtg gta cca tat 3302
Asn Glu Lys Leu Leu Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val Pro Tyr
1010 1015 1020
atg att cat tta ctg gca cat gat cca gat ttc aca aaa cct cag 3347
Met Ile His Leu Leu Ala His Asp Pro Asp Phe Thr Lys Pro Gln
1025 1030 1035
gat gtt gat cag ctt cgt gat gtc aaa gag tgc ctg tgg ttc atg 3392
Asp Val Asp Gln Leu Arg Asp Val Lys Glu Cys Leu Trp Phe Met
1040 1045 1050
ctt gaa gtt tta atg aca aag aat gag aac aat agc cat gcc ttc 3437
Leu Glu Val Leu Met Thr Lys Asn Glu Asn Asn Ser His Ala Phe
1055 1060 1065
atg aaa aag atg gca gaa aac atc aag ctt aca cga gat gcc cag 3482
Met Lys Lys Met Ala Glu Asn Ile Lys Leu Thr Arg Asp Ala Gln
1070 1075 1080
tct cct gat gag cca aag gcc aat gag aaa ctt tat aca gta tgt 3527
Ser Pro Asp Glu Pro Lys Ala Asn Glu Lys Leu Tyr Thr Val Cys
1085 1090 1095
gat gta gca ctg tgt gta atc aac agc aaa agt gct tta tgc aat 3572
Asp Val Ala Leu Cys Val Ile Asn Ser Lys Ser Ala Leu Cys Asn
1100 1105 1110
gca gat tca cca aag gac cct gta ttg cca acc aaa ttt ttt aca 3617
Ala Asp Ser Pro Lys Asp Pro Val Leu Pro Thr Lys Phe Phe Thr
1115 1120 1125
caa cct gaa aag gat ttt tcc aat gac cgg aat tac att tca gaa 3662
Gln Pro Glu Lys Asp Phe Ser Asn Asp Arg Asn Tyr Ile Ser Glu
1130 1135 1140
gag aca aga gtt ctt ctt ttg aca gga aag cca aaa cca act ggt 3707
Glu Thr Arg Val Leu Leu Leu Thr Gly Lys Pro Lys Pro Thr Gly
1145 1150 1155
gtg tta gat aca gta aac aag cca ttg tct gca act gga agg aga 3752
Val Leu Asp Thr Val Asn Lys Pro Leu Ser Ala Thr Gly Arg Arg
1160 1165 1170
ccg tat att aga act aca gga tca gag act gga agc aat atc agt 3797
Pro Tyr Ile Arg Thr Thr Gly Ser Glu Thr Gly Ser Asn Ile Ser
1175 1180 1185
gta aac tct gag ctg agc tct tct gca gga aac aga tca agg gaa 3842
Val Asn Ser Glu Leu Ser Ser Ser Ala Gly Asn Arg Ser Arg Glu
1190 1195 1200
caa agt tca gat ata tca gaa act ggt gtc agt gaa aac gat gaa 3887
Gln Ser Ser Asp Ile Ser Glu Thr Gly Val Ser Glu Asn Asp Glu
1205 1210 1215
aac cct gtg cga att att tca gtc aca cca gca aag aca gaa cct 3932
Asn Pro Val Arg Ile Ile Ser Val Thr Pro Ala Lys Thr Glu Pro
1220 1225 1230
gtg aaa aat aag gaa att aat tct gac cag gct acg caa gga aac 3977
Val Lys Asn Lys Glu Ile Asn Ser Asp Gln Ala Thr Gln Gly Asn
1235 1240 1245
agt act gaa cgt ggg aaa aaa aga aca gca aca gca tct gga act 4022
Ser Thr Glu Arg Gly Lys Lys Arg Thr Ala Thr Ala Ser Gly Thr
1250 1255 1260
gag aat att cat cag aaa gca gaa gaa aac aat gca gat gaa aca 4067
Glu Asn Ile His Gln Lys Ala Glu Glu Asn Asn Ala Asp Glu Thr
1265 1270 1275
gga cca tcg ctt gca gca aaa acc agg aga ggg cgt cca ccc aaa 4112
Gly Pro Ser Leu Ala Ala Lys Thr Arg Arg Gly Arg Pro Pro Lys
1280 1285 1290
cct gaa cct cag ggt acc act gca aaa aat gag gaa aca aat aag 4157
Pro Glu Pro Gln Gly Thr Thr Ala Lys Asn Glu Glu Thr Asn Lys
1295 1300 1305
cca cct gtc agg gga aga aaa agg gca gca gcc agt caa gaa agt 4202
Pro Pro Val Arg Gly Arg Lys Arg Ala Ala Ala Ser Gln Glu Ser
1310 1315 1320
cca ggg agt tta gag gca ggt aac gcc aaa gca cca aaa cag caa 4247
Pro Gly Ser Leu Glu Ala Gly Asn Ala Lys Ala Pro Lys Gln Gln
1325 1330 1335
gac aca gca aaa aag cca gca gca gca cag aga cag atc gat cta 4292
Asp Thr Ala Lys Lys Pro Ala Ala Ala Gln Arg Gln Ile Asp Leu
1340 1345 1350
caa agg taa aaagaaaact cactcgaaaa gggaggaaat gaaggccaaa 4341
Gln Arg
1355
taaaggcatg ctccaagctt ctgcaaaaac taggattcag aaatttcctg tacaggaact 4401
gaaattgctt caaaacacac agctttcagc tctgaaaaca gaaggaaaac tatgcttccc 4461
tttcacgtga aattaatcct tctcaatgga aatgtaaagc agaaactctt gagaaagagg 4521
ctaaaagcat ctgtacttat ttccccagag acttttttta tgaaaagtca ataattaagc 4581
aaattgctta acacttggtt ccagttcctg cattctggag tttaaaagtg tatttacacc 4641
attaattttc atgctgcatt ttcttttttt ttttaaagga agtcagaggg aggtccttac 4701
actgacactg aaaattcgcg atcctagagc caggtattcc catgttccac agaaaaagta 4761
gaagtctact gaatggattt taaataagac tagaaaaaaa aaaaaaaa 4809
<210> 12
<211> 1356
<212> PRT
<213> 鸡（Gallus gallus）
<400> 12
Met Leu His Leu Pro Glu Leu Arg Glu Arg Pro Val Glu Asp Cys Ala
1 5 10 15
Glu Gly Lys Phe Leu Ser Ser Gly Thr Arg Met Asp Phe Pro Ala Ala
20 25 30
Gln Pro Lys Pro Ala Ala Asp Gly Lys Ile Ile Tyr Tyr Pro Pro Gly
35 40 45
Val Lys Glu Thr Thr Asp Lys Ile Thr Asn Asp Glu Val Val Lys Arg
50 55 60
Leu Lys Met Val Val Lys Thr Phe Met Asp Met Asp Gln Asp Ser Glu
65 70 75 80
Asp Glu Lys Gln Gln Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His Leu Ala Ser Glu
85 90 95
Phe Phe Leu Arg Asn Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu Leu Val Ala Cys
100 105 110
Cys Leu Ala Asp Ile Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu Ala Pro Tyr Thr
115 120 125
Ser His Asp Lys Leu Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile Thr Arg Gln Leu
130 135 140
Lys Gly Leu Glu Asp Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn Arg Tyr Phe Tyr
145 150 155 160
Leu Leu Glu Asn Leu Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn Ile Cys Phe Glu
165 170 175
Leu Glu Asp Cys Asn Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe Arg Thr Leu Phe
180 185 190
Ser Val Ile Asn Asn Ser His Asn Gln Lys Val Gln Met His Met Leu
195 200 205
Asp Leu Met Ser Ser Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly Val Thr Gln Glu
210 215 220
Leu Leu Asp Ser Ile Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu
225 230 235 240
Asn Lys Gln Ala Phe Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu Lys Arg Thr Val
245 250 255
Gln Thr Ile Glu Pro Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn Gln Val Leu Val
260 265 270
Leu Gly Lys Ser Ser Val Ser Asp Leu Ser Glu His Val Phe Asp Leu
275 280 285
Ile Leu Glu Leu Phe Ala Ile Asp Pro His Leu Leu Leu Ser Val Met
290 295 300
Pro Gln Leu Glu Phe Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly Glu Glu Arg Leu
305 310 315 320
Ala Val Val Arg Leu Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser Lys Asp Ser Asp
325 330 335
Leu Ala Thr Gln Asn Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe Leu Gly Arg Phe
340 345 350
Asn Asp Ile His Val Pro Val Arg Leu Glu Ser Val Lys Phe Ala Ser
355 360 365
His Cys Leu Met Asn His Pro Asp Leu Ala Lys Asp Leu Thr Glu Tyr
370 375 380
Leu Lys Val Arg Ser His Asp Pro Glu Glu Ala Ile Arg His Asp Val
385 390 395 400
Ile Val Thr Ile Ile Thr Ala Gly Lys Arg Asp Leu Ser Leu Val Asn
405 410 415
Asp Gln Leu Leu Gly Phe Val Arg Glu Arg Thr Leu Asp Lys Arg Trp
420 425 430
Arg Val Arg Lys Glu Ala Met Met Gly Leu Ala Gln Leu Tyr Lys Lys
435 440 445
Tyr Cys Leu His Ala Glu Ala Gly Lys Asp Ala Ala Glu Lys Val Ser
450 455 460
Trp Ile Lys Asp Lys Leu Leu His Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser Ile Asp
465 470 475 480
Asp Lys Leu Leu Val Glu Lys Ile Phe Ala Gln Tyr Leu Val Pro His
485 490 495
Asn Leu Glu Thr Glu Glu Arg Met Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu Tyr Ala
500 505 510
Ser Leu Asp Pro Asn Ala Val Lys Ala Leu Asn Glu Met Trp Lys Cys
515 520 525
Gln Asn Met Leu Arg Ser His Val Arg Glu Leu Leu Asp Leu His Lys
530 535 540
Gln Pro Thr Ser Glu Ala Asn Ser Ala Ala Met Phe Gly Lys Leu Met
545 550 555 560
Thr Ile Ala Lys Asn Leu Pro Asp Pro Gly Lys Ala Gln Asp Phe Val
565 570 575
Lys Lys Phe Asn Gln Val Leu Gly Asp Asp Glu Lys Leu Arg Ser Gln
580 585 590
Leu Glu Leu Leu Ile Ser Pro Thr Cys Ser Cys Lys Gln Ala Asp Val
595 600 605
Cys Val Arg Glu Ile Ala Arg Lys Leu Ala Asn Pro Lys Gln Pro Thr
610 615 620
Asn Pro Phe Leu Glu Met Val Lys Phe Leu Leu Glu Arg Ile Ala Pro
625 630 635 640
Val His Ile Asp Ser Glu Ala Ile Ser Ala Leu Val Lys Leu Met Asn
645 650 655
Lys Ser Ile Glu Gly Thr Ala Asp Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Pro
660 665 670
Asp Thr Ala Ile Arg Ala Gly Leu Glu Leu Leu Lys Val Leu Ser Phe
675 680 685
Thr His Pro Thr Ser Phe His Ser Ala Glu Thr Tyr Glu Ser Leu Leu
690 695 700
Gln Cys Leu Arg Met Glu Asp Asp Lys Val Ala Glu Ala Ala Ile Gln
705 710 715 720
Ile Phe Arg Asn Thr Gly His Lys Ile Glu Thr Asp Leu Pro Gln Ile
725 730 735
Arg Ser Thr Leu Ile Pro Ile Leu His Gln Lys Ala Lys Arg Gly Thr
740 745 750
Pro His Gln Ala Lys Gln Ala Val His Cys Ile His Ala Ile Phe Ser
755 760 765
Asn Lys Glu Val Gln Leu Ala Gln Ile Phe Glu Pro Leu Ser Arg Ser
770 775 780
Leu Asn Ala Asp Val Pro Glu Gln Leu Ile Thr Pro Leu Val Ser Leu
785 790 795 800
Gly His Ile Ser Met Leu Ala Pro Asp Gln Phe Ala Ser Pro Met Lys
805 810 815
Ser Val Val Ala Asn Phe Val Val Lys Asp Leu Leu Met Asn Asp Arg
820 825 830
Ser Thr Gly Glu Lys Asn Gly Lys Leu Trp Ser Pro Asp Glu Glu Val
835 840 845
Ser Pro Glu Val Leu Ala Lys Val Gln Ala Ile Lys Leu Leu Val Arg
850 855 860
Trp Leu Leu Gly Met Lys Asn Asn Gln Ser Lys Ser Ala Asn Ser Thr
865 870 875 880
Leu Arg Leu Leu Ser Ala Met Leu Val Ser Glu Gly Asp Leu Thr Glu
885 890 895
Gln Lys Arg Ile Ser Lys Ser Asp Met Ser Arg Leu Arg Leu Ala Ala
900 905 910
Gly Ser Ala Ile Met Lys Leu Ala Gln Glu Pro Cys Tyr His Glu Ile
915 920 925
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930 935 940
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945 950 955 960
Val Lys Leu Leu Leu Pro Leu Glu Tyr Met Ala Ile Phe Ala Leu Cys
965 970 975
Ala Lys Asp Pro Val Lys Glu Arg Arg Ala His Ala Arg Gln Cys Leu
980 985 990
Leu Lys Asn Ile Ser Ile Arg Arg Glu Tyr Ile Lys Gln Asn Pro Met
995 1000 1005
Ala Asn Glu Lys Leu Leu Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val Pro
1010 1015 1020
Tyr Met Ile His Leu Leu Ala His Asp Pro Asp Phe Thr Lys Pro
1025 1030 1035
Gln Asp Val Asp Gln Leu Arg Asp Val Lys Glu Cys Leu Trp Phe
1040 1045 1050
Met Leu Glu Val Leu Met Thr Lys Asn Glu Asn Asn Ser His Ala
1055 1060 1065
Phe Met Lys Lys Met Ala Glu Asn Ile Lys Leu Thr Arg Asp Ala
1070 1075 1080
Gln Ser Pro Asp Glu Pro Lys Ala Asn Glu Lys Leu Tyr Thr Val
1085 1090 1095
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1100 1105 1110
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1115 1120 1125
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1130 1135 1140
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1145 1150 1155
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1160 1165 1170
Arg Pro Tyr Ile Arg Thr Thr Gly Ser Glu Thr Gly Ser Asn Ile
1175 1180 1185
Ser Val Asn Ser Glu Leu Ser Ser Ser Ala Gly Asn Arg Ser Arg
1190 1195 1200
Glu Gln Ser Ser Asp Ile Ser Glu Thr Gly Val Ser Glu Asn Asp
1205 1210 1215
Glu Asn Pro Val Arg Ile Ile Ser Val Thr Pro Ala Lys Thr Glu
1220 1225 1230
Pro Val Lys Asn Lys Glu Ile Asn Ser Asp Gln Ala Thr Gln Gly
1235 1240 1245
Asn Ser Thr Glu Arg Gly Lys Lys Arg Thr Ala Thr Ala Ser Gly
1250 1255 1260
Thr Glu Asn Ile His Gln Lys Ala Glu Glu Asn Asn Ala Asp Glu
1265 1270 1275
Thr Gly Pro Ser Leu Ala Ala Lys Thr Arg Arg Gly Arg Pro Pro
1280 1285 1290
Lys Pro Glu Pro Gln Gly Thr Thr Ala Lys Asn Glu Glu Thr Asn
1295 1300 1305
Lys Pro Pro Val Arg Gly Arg Lys Arg Ala Ala Ala Ser Gln Glu
1310 1315 1320
Ser Pro Gly Ser Leu Glu Ala Gly Asn Ala Lys Ala Pro Lys Gln
1325 1330 1335
Gln Asp Thr Ala Lys Lys Pro Ala Ala Ala Gln Arg Gln Ile Asp
1340 1345 1350
Leu Gln Arg
1355
<210> 13
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> T3 引物
<400> 13
aattaaccct cactaaaggg 20
<210> 14
<211> 19
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> T7 引物
<400> 14
taatacgact cactatagg 19
<210> 15
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 正向引物
<400> 15
aatagcatcg atgacaaact gttgg 25
<210> 16
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 反向引物
<400> 16
ggtcaggcaa attctttgct atgg 24
<210> 17
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 正向引物
<400> 17
gtaaggtggc tgttgggtat g 21
<210> 18
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 反向引物
<400> 18
ggctagcagg tgaatcatgt atgg 24
<210> 19
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 反向引物
<400> 19
acttctggta aggtggctgt tgg 23
<210> 20
<211> 25
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 反向引物
<400> 20
gggctaggag gtgaatcatg tatgg 25
<210> 21
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> GAPDH 引物
<400> 21
gggctgcttt taactctg 18
<210> 22
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> GAPDH 引物
<400> 22
ccaggaaatg agcttgac 18
<210> 23
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> gapdh 引物
<400> 23
cttcaccacc atggagaagg 20
<210> 24
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> gapdh 引物
<400> 24
tgaagtcgca ggagacaacc 20
<210> 25
<211> 33
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 正向引物
<400> 25
atggacttca cgcagccgaa gcctgccact gcc 33
<210> 26
<211> 40
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 反向引物
<400> 26
ttacctttgt aaatcaattt gtctctctgc tggaactgcc 40
<210> 27
<211> 9
<212> PRT
<213> 人（Homo sapiens）
<400> 27
Asn Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu
1 5
<210> 28
<211> 10
<212> PRT
<213> 人（Homo sapiens）
<400> 28
Lys Glu Cys Leu Trp Phe Met Leu Glu Val
1 5 10
<210> 29
<211> 10
<212> PRT
<213> 人（Homo sapiens）
<400> 29
Phe Leu Gly Arg Phe Asn Asp Ile His Val
1 5 10
<210> 30
<211> 10
<212> PRT
<213> 人（Homo sapiens）
<400> 30
Leu Leu Leu Pro Leu Glu Tyr Met Ala Ile
1 5 10
<210> 31
<211> 10
<212> PRT
<213> 人（Homo sapiens）
<400> 31
Ser Leu Asp Pro Asn Ala Val Lys Ala Leu
1 5 10
<210> 32
<211> 9
<212> PRT
<213> 人（Homo sapiens）
<400> 32
Lys Leu Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile
1 5
<210> 33
<211> 10
<212> PRT
<213> 人（Homo sapiens）
<400> 33
Leu Leu Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val
1 5 10
<210> 34
<211> 9
<212> PRT
<213> 人（Homo sapiens）
<400> 34
Lys Met Ala Glu Asn Ile Lys Leu Thr
1 5
<210> 35
<211> 10
<212> PRT
<213> 人（Homo sapiens）
<400> 35
Gln Val Leu Val Leu Gly Arg Ser Ser Val
1 5 10
<210> 36
<211> 9
<212> PRT
<213> 人（Homo sapiens）
<400> 36
Leu Gln Cys Cys Ser Ala Tyr Lys Leu
1 5
<210> 37
<211> 34
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 正向引物
<400> 37
gcggccgcat ggacttcacc gcgcagccca agcc 34
<210> 38
<211> 45
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 反向引物
<400> 38
ctcgagttac ctttgtaagt caatctgtct ctctgctggt actgc 45
<210> 39
<211> 29
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 正向引物
<400> 39
gcggccgcat ggacttcacc gcgcagccc 29
<210> 40
<211> 29
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 反向引物
<400> 40
ctcgagttac ctttgtaagt caatttgtc 29
<210> 41
<211> 31
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 正向引物
<400> 41
gcggccgcat ggacttcacg cagccgaagc c 31
<210> 42
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 反向引物
<400> 42
ctcgagttac ctttgtaaat caatttg 27
<210> 43
<211> 7190
<212> DNA
<213> 人（Homo sapiens）
<220>
<221> CDS
<222> (541)..(4554)
<223>
<400> 43
ggccggcgga ggaaggggag ggagcgagga gcgcgcgctg ctctcgcgtg ctctcgcgcc 60
gctcgcgtga ccggccggtg tgtgcgcgag gccccggctc ccggggcacg gacggccggg 120
cgcgcgcctc tgcgaggggc gtccgggtcc gagtcggcgg tccgggccgg cgcgaggtgc 180
gtgcgggcgg gccgcggggg tcccggacgg acacaagcgc acacactccc ggaggagcct 240
tcgaggctgc tcttcctcgg ccagacggag agcggcactg tctccccgcc cagcgctcac 300
tcgccccgcg tctccccccg cggcggctgc tcctcctcgg caccgccagc cccagcgccg 360
ctcccgggcg ggcgggcggc ggcggcggcg gcggcgggac ccgcggagcc gctttgtgtg 420
cagcccgact aggggcggcg gcgcaaccac ctgacagagg cccgggcgct cgatgcacct 480
tccgcccgca tgaggaggag aggccggtag aggactgtga accaaaagtt gtcccccagg 540
atg gac ttc acc gcg cag ccc aag cct gcc act gcc ctc tgt ggc gtc 588
Met Asp Phe Thr Ala Gln Pro Lys Pro Ala Thr Ala Leu Cys Gly Val
1 5 10 15
gtg agt gcc gac ggg aag atc gct tac cct ccg ggg gta aaa gag atc 636
Val Ser Ala Asp Gly Lys Ile Ala Tyr Pro Pro Gly Val Lys Glu Ile
20 25 30
acc gac aag atc acc acg gac gag atg atc aaa cgc ctg aag atg gta 684
Thr Asp Lys Ile Thr Thr Asp Glu Met Ile Lys Arg Leu Lys Met Val
35 40 45
gtg aaa acc ttt atg gat atg gat cag gac tca gaa gat gaa aaa cag 732
Val Lys Thr Phe Met Asp Met Asp Gln Asp Ser Glu Asp Glu Lys Gln
50 55 60
cag tat ctc cca cta gcc ttg cat ctt gca tct gaa ttc ttc ctc agg 780
Gln Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His Leu Ala Ser Glu Phe Phe Leu Arg
65 70 75 80
aac ccc aat aaa gat gtg cgt ctc ctt gta gca tgt tgt ttg gct gat 828
Asn Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu Leu Val Ala Cys Cys Leu Ala Asp
85 90 95
atc ttt cgt atc tat gcc cca gaa gct cca tat act tcc cat gat aaa 876
Ile Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu Ala Pro Tyr Thr Ser His Asp Lys
100 105 110
ctt aag gac ata ttt ttg ttt att acc aga caa tta aaa ggt ttg gag 924
Leu Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile Thr Arg Gln Leu Lys Gly Leu Glu
115 120 125
gat aca aag agt cca cag ttt aat aga tac ttt tat tta tta gag aat 972
Asp Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn Arg Tyr Phe Tyr Leu Leu Glu Asn
130 135 140
tta gct tgg gtt aaa tca tat aac atc tgc ttt gaa ttg gaa gat tgc 1020
Leu Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn Ile Cys Phe Glu Leu Glu Asp Cys
145 150 155 160
aat gaa att ttt att cag ctt ttt aga act ctc ttc tca gtg atc aac 1068
Asn Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe Arg Thr Leu Phe Ser Val Ile Asn
165 170 175
aat agc cac aat aag aag gta caa atg cac atg cta gat ttg atg agt 1116
Asn Ser His Asn Lys Lys Val Gln Met His Met Leu Asp Leu Met Ser
180 185 190
tct atc atc atg gaa ggt gat gga gtt act caa gaa tta ttg gac tcc 1164
Ser Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly Val Thr Gln Glu Leu Leu Asp Ser
195 200 205
att ctt att aac ctc att cct gca cat aag aac tta aat aaa cag tcc 1212
Ile Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu Asn Lys Gln Ser
210 215 220
ttt gac ctt gca aaa gtg cta ttg aaa aga aca gtc cag act att gag 1260
Phe Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu Lys Arg Thr Val Gln Thr Ile Glu
225 230 235 240
gca tgc att gct aat ttt ttc aat caa gtc ctg gtg ctg gga aga tca 1308
Ala Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn Gln Val Leu Val Leu Gly Arg Ser
245 250 255
tca gta agt gat ttg tca gaa cat gta ttt gat ctg att cag gaa ctt 1356
Ser Val Ser Asp Leu Ser Glu His Val Phe Asp Leu Ile Gln Glu Leu
260 265 270
ttt gct ata gat cct cat tta tta tta tcc gtc atg cca cag ctt gaa 1404
Phe Ala Ile Asp Pro His Leu Leu Leu Ser Val Met Pro Gln Leu Glu
275 280 285
ttc aaa cta aag agc aat gat gga gaa gag cga tta gct gtt gtt cga 1452
Phe Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly Glu Glu Arg Leu Ala Val Val Arg
290 295 300
ctt cta gct aaa ttg ttt ggc tcc aaa gat tct gat ttg gca aca cag 1500
Leu Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser Lys Asp Ser Asp Leu Ala Thr Gln
305 310 315 320
aat cgt cct ctt tgg caa tgt ttt ctt gga cga ttt aat gat att cat 1548
Asn Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe Leu Gly Arg Phe Asn Asp Ile His
325 330 335
gtt cct gtg aga tta gaa agt gtg aaa ttt gcc agt cat tgt tta atg 1596
Val Pro Val Arg Leu Glu Ser Val Lys Phe Ala Ser His Cys Leu Met
340 345 350
aat cac cca gat tta gcg aag gat ctc aca gaa tat tta aag gtt aga 1644
Asn His Pro Asp Leu Ala Lys Asp Leu Thr Glu Tyr Leu Lys Val Arg
355 360 365
tca cat gat cca gaa gaa gct att cgt cat gat gtc att gtt act ata 1692
Ser His Asp Pro Glu Glu Ala Ile Arg His Asp Val Ile Val Thr Ile
370 375 380
ata aca gct gcc aag agg gac ctg gcc tta gta aat gat cag ctg ctt 1740
Ile Thr Ala Ala Lys Arg Asp Leu Ala Leu Val Asn Asp Gln Leu Leu
385 390 395 400
ggc ttt gta agg gaa aga aca ctg gat aaa cgg tgg cga gta aga aaa 1788
Gly Phe Val Arg Glu Arg Thr Leu Asp Lys Arg Trp Arg Val Arg Lys
405 410 415
gaa gct atg atg ggt ctg gct cag ctt tat aag aaa tac tgt ctt cat 1836
Glu Ala Met Met Gly Leu Ala Gln Leu Tyr Lys Lys Tyr Cys Leu His
420 425 430
ggt gaa gca gga aag gaa gct gca gag aaa gtc agc tgg ata aag gac 1884
Gly Glu Ala Gly Lys Glu Ala Ala Glu Lys Val Ser Trp Ile Lys Asp
435 440 445
aaa ctt ctg cat att tat tat cag aac agc att gac gac aaa ctg ttg 1932
Lys Leu Leu His Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser Ile Asp Asp Lys Leu Leu
450 455 460
gta gag aaa atc ttt gct cag tat ctt gtc ccc cac aac ctg gaa aca 1980
Val Glu Lys Ile Phe Ala Gln Tyr Leu Val Pro His Asn Leu Glu Thr
465 470 475 480
gaa gag aga atg aaa tgc tta tat tac tta tat gct agt ttg gat cca 2028
Glu Glu Arg Met Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu Tyr Ala Ser Leu Asp Pro
485 490 495
aat gct gta aaa gct ctc aac gaa atg tgg aag tgt cag aac atg ctt 2076
Asn Ala Val Lys Ala Leu Asn Glu Met Trp Lys Cys Gln Asn Met Leu
500 505 510
cgg agc cat gta cgc gaa cta ttg gat ttg cac aag cag cct aca tca 2124
Arg Ser His Val Arg Glu Leu Leu Asp Leu His Lys Gln Pro Thr Ser
515 520 525
gag gct aac tgt tct gcc atg ttt gga aaa ctg atg acc ata gca aag 2172
Glu Ala Asn Cys Ser Ala Met Phe Gly Lys Leu Met Thr Ile Ala Lys
530 535 540
aat ttg cct gac ccc ggg aaa gca caa gat ttt gtg aag aaa ttt aac 2220
Asn Leu Pro Asp Pro Gly Lys Ala Gln Asp Phe Val Lys Lys Phe Asn
545 550 555 560
cag gtt ctc ggc gat gat gag aaa ctt cgg tct cag ttg gag tta tta 2268
Gln Val Leu Gly Asp Asp Glu Lys Leu Arg Ser Gln Leu Glu Leu Leu
565 570 575
att agc cca acc tgt tct tgc aaa caa gca gat att tgt gtg aga gaa 2316
Ile Ser Pro Thr Cys Ser Cys Lys Gln Ala Asp Ile Cys Val Arg Glu
580 585 590
ata gcc cgg aaa ctt gca aat cct aag caa cca aca aat cct ttt cta 2364
Ile Ala Arg Lys Leu Ala Asn Pro Lys Gln Pro Thr Asn Pro Phe Leu
595 600 605
gag atg gtc aaa ttt ctg ttg gaa aga atc gca cct gtg cac att gat 2412
Glu Met Val Lys Phe Leu Leu Glu Arg Ile Ala Pro Val His Ile Asp
610 615 620
tca gaa gcc ata agt gca cta gtg aaa ttg atg aat aag tca ata gag 2460
Ser Glu Ala Ile Ser Ala Leu Val Lys Leu Met Asn Lys Ser Ile Glu
625 630 635 640
ggg aca gca gat gat gaa gag gag ggt gta agt cca gat aca gct atc 2508
Gly Thr Ala Asp Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Pro Asp Thr Ala Ile
645 650 655
cgt tca gga ctt gaa ctt ctt aag gtt ctg tct ttt aca cat cct acc 2556
Arg Ser Gly Leu Glu Leu Leu Lys Val Leu Ser Phe Thr His Pro Thr
660 665 670
tcg ttc cac tct gca gag aca tat gag tcc ttg tta cag tgc cta aga 2604
Ser Phe His Ser Ala Glu Thr Tyr Glu Ser Leu Leu Gln Cys Leu Arg
675 680 685
atg gag gat gac aag gta gca gaa gct gct att caa att ttt aga aat 2652
Met Glu Asp Asp Lys Val Ala Glu Ala Ala Ile Gln Ile Phe Arg Asn
690 695 700
aca ggt cac aaa ata gaa aca gac ctt ccc cag ata cga tcg acc tta 2700
Thr Gly His Lys Ile Glu Thr Asp Leu Pro Gln Ile Arg Ser Thr Leu
705 710 715 720
att ccc att tta cat caa aaa gca aag agg ggt act cca cac caa gca 2748
Ile Pro Ile Leu His Gln Lys Ala Lys Arg Gly Thr Pro His Gln Ala
725 730 735
aaa cag gct gtg cac tgt ata cac gcc ata ttc aca aat aaa gaa gtc 2796
Lys Gln Ala Val His Cys Ile His Ala Ile Phe Thr Asn Lys Glu Val
740 745 750
cag ctt gca cag att ttt gag cca ctc agt agg agt ctg aat gct gat 2844
Gln Leu Ala Gln Ile Phe Glu Pro Leu Ser Arg Ser Leu Asn Ala Asp
755 760 765
gtg cca gaa caa ctt ata act cca tta gtt tca ttg ggc cac att tct 2892
Val Pro Glu Gln Leu Ile Thr Pro Leu Val Ser Leu Gly His Ile Ser
770 775 780
atg tta gca cca gat cag ttt gct tcc cca atg aaa tct gta gta gca 2940
Met Leu Ala Pro Asp Gln Phe Ala Ser Pro Met Lys Ser Val Val Ala
785 790 795 800
aat ttt att gtg aaa gat ctg cta atg aat gac agg tca aca ggt gaa 2988
Asn Phe Ile Val Lys Asp Leu Leu Met Asn Asp Arg Ser Thr Gly Glu
805 810 815
aag aat gga aaa ctg tgg tct cca gat gaa gag gtt tcc cct gaa gta 3036
Lys Asn Gly Lys Leu Trp Ser Pro Asp Glu Glu Val Ser Pro Glu Val
820 825 830
cta gca aag gta cag gca att aaa ctt ctg gta agg tgg ctg ttg ggt 3084
Leu Ala Lys Val Gln Ala Ile Lys Leu Leu Val Arg Trp Leu Leu Gly
835 840 845
atg aaa aac aac cag tct aaa tct gcc aat tca acc ctt cgg tta tta 3132
Met Lys Asn Asn Gln Ser Lys Ser Ala Asn Ser Thr Leu Arg Leu Leu
850 855 860
tca gcg atg ttg gtt agt gag ggt gac ctg aca gag caa aag agg atc 3180
Ser Ala Met Leu Val Ser Glu Gly Asp Leu Thr Glu Gln Lys Arg Ile
865 870 875 880
agt aaa tct gat atg tct cgc ttg cga tta gct gct ggt agt gcc ata 3228
Ser Lys Ser Asp Met Ser Arg Leu Arg Leu Ala Ala Gly Ser Ala Ile
885 890 895
atg aag ctt gct cag gaa cct tgt tac cat gaa att att acc cca gaa 3276
Met Lys Leu Ala Gln Glu Pro Cys Tyr His Glu Ile Ile Thr Pro Glu
900 905 910
cag ttt cag ctc tgt gca ctt gtt att aat gat gag tgt tac caa gta 3324
Gln Phe Gln Leu Cys Ala Leu Val Ile Asn Asp Glu Cys Tyr Gln Val
915 920 925
agg cag ata ttt gct cag aag ctg cat aag gca ctt gtg aag tta ctg 3372
Arg Gln Ile Phe Ala Gln Lys Leu His Lys Ala Leu Val Lys Leu Leu
930 935 940
ctc cca ttg gag tat atg gcg atc ttt gcc ttg tgt gcc aaa gat cct 3420
Leu Pro Leu Glu Tyr Met Ala Ile Phe Ala Leu Cys Ala Lys Asp Pro
945 950 955 960
gtg aag gag aga aga gca cac gca cga caa tgt tta ctg aaa aat atc 3468
Val Lys Glu Arg Arg Ala His Ala Arg Gln Cys Leu Leu Lys Asn Ile
965 970 975
agt ata cgc agg gaa tac att aag cag aat cct atg gct act gag aaa 3516
Ser Ile Arg Arg Glu Tyr Ile Lys Gln Asn Pro Met Ala Thr Glu Lys
980 985 990
tta tta tca ctg ttg cct gaa tat gta gtt cca tac atg att cac ctg 3564
Leu Leu Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val Pro Tyr Met Ile His Leu
995 1000 1005
cta gcc cat gat cca gat ttt aca aga tca caa gat gtt gat cag 3609
Leu Ala His Asp Pro Asp Phe Thr Arg Ser Gln Asp Val Asp Gln
1010 1015 1020
ctt cgt gat atc aaa gag tgc cta tgg ttc atg ctt gaa gtt tta 3654
Leu Arg Asp Ile Lys Glu Cys Leu Trp Phe Met Leu Glu Val Leu
1025 1030 1035
atg aca aag aat gaa aac aat agc cat gcc ttt atg aag aag atg 3699
Met Thr Lys Asn Glu Asn Asn Ser His Ala Phe Met Lys Lys Met
1040 1045 1050
gca gag aac atc aag tta acc aga gat gcc cag tct cca gat gaa 3744
Ala Glu Asn Ile Lys Leu Thr Arg Asp Ala Gln Ser Pro Asp Glu
1055 1060 1065
tcc aag aca aat gaa aaa ctg tat aca gta tgt gat gtg gct ctc 3789
Ser Lys Thr Asn Glu Lys Leu Tyr Thr Val Cys Asp Val Ala Leu
1070 1075 1080
tgt gtt ata aat agt aaa agt gct ttg tgc aat gca gat tca cca 3834
Cys Val Ile Asn Ser Lys Ser Ala Leu Cys Asn Ala Asp Ser Pro
1085 1090 1095
aag gac cca gtc ctc cca atg aaa ttt ttt aca caa cct gaa aag 3879
Lys Asp Pro Val Leu Pro Met Lys Phe Phe Thr Gln Pro Glu Lys
1100 1105 1110
gac ttc tgt aac gat aag agt tat att tca gaa gag aca aga gta 3924
Asp Phe Cys Asn Asp Lys Ser Tyr Ile Ser Glu Glu Thr Arg Val
1115 1120 1125
ctt ctg tta aca gga aag cca aag cct gct gga gta cta ggt gca 3969
Leu Leu Leu Thr Gly Lys Pro Lys Pro Ala Gly Val Leu Gly Ala
1130 1135 1140
gta aat aag cct tta tca gca acg gga agg aaa ccc tat gtt aga 4014
Val Asn Lys Pro Leu Ser Ala Thr Gly Arg Lys Pro Tyr Val Arg
1145 1150 1155
agc act ggc act gag act gga agc aat att aat gta aat tca gag 4059
Ser Thr Gly Thr Glu Thr Gly Ser Asn Ile Asn Val Asn Ser Glu
1160 1165 1170
ctg aac cct tca acc gga aat cga tca agg gaa cag agt tca gag 4104
Leu Asn Pro Ser Thr Gly Asn Arg Ser Arg Glu Gln Ser Ser Glu
1175 1180 1185
gca gca gaa act gga gtt agt gaa aat gaa gag aac cct gtg agg 4149
Ala Ala Glu Thr Gly Val Ser Glu Asn Glu Glu Asn Pro Val Arg
1190 1195 1200
att att tca gtc aca cct gta aag aat att gac cca gta aag aat 4194
Ile Ile Ser Val Thr Pro Val Lys Asn Ile Asp Pro Val Lys Asn
1205 1210 1215
aag gaa att aat tct gat cag gct acc cag ggc aac atc agc agt 4239
Lys Glu Ile Asn Ser Asp Gln Ala Thr Gln Gly Asn Ile Ser Ser
1220 1225 1230
gac cga gga aag aaa aga aca gta aca gca gct ggt gca gag aat 4284
Asp Arg Gly Lys Lys Arg Thr Val Thr Ala Ala Gly Ala Glu Asn
1235 1240 1245
atc caa caa aaa aca gat gag aaa gta gat gaa tcg gga cct ccc 4329
Ile Gln Gln Lys Thr Asp Glu Lys Val Asp Glu Ser Gly Pro Pro
1250 1255 1260
gcc cct tcc aaa ccc agg aga gga cgt cga ccc aag tct gaa tct 4374
Ala Pro Ser Lys Pro Arg Arg Gly Arg Arg Pro Lys Ser Glu Ser
1265 1270 1275
cag ggc aat gct acc aaa aat gat gat cta aat aaa cct att aac 4419
Gln Gly Asn Ala Thr Lys Asn Asp Asp Leu Asn Lys Pro Ile Asn
1280 1285 1290
aag gga agg aag aga gct gca gtg ggt cag gag agc cct ggg ggt 4464
Lys Gly Arg Lys Arg Ala Ala Val Gly Gln Glu Ser Pro Gly Gly
1295 1300 1305
ttg gaa gca ggt aat gcc aaa gca ccc aaa ctg caa gat tta gcc 4509
Leu Glu Ala Gly Asn Ala Lys Ala Pro Lys Leu Gln Asp Leu Ala
1310 1315 1320
aaa aag gca gca cca gca gaa aga caa att gac tta caa agg taa 4554
Lys Lys Ala Ala Pro Ala Glu Arg Gln Ile Asp Leu Gln Arg
1325 1330 1335
aaatgcattt gcaaagggag aaaatgaagg ccaaacagaa gcaggctcca gcttctgcaa 4614
aaacttggat tcacaaatgt ccctgaacag aaaatgaagc tcacttcaga acacacactc 4674
tctgccttga aaactaaaga gactattact tccttttcac atgaccacaa gtcctctgat 4734
ggaaatgtac agcagaaact cttgagagag aggctaaaag caactctgtt ctcccccttc 4794
ccctagactt ttcttacgaa aagtcaataa ttaagcaaat tgcttaacac ttggttccag 4854
ttcctgccta tctggagttt aaatgcgtaa tacaccatta atttccacgc tgcagttttt 4914
attttaaaga aagtaacaag atgtctttac actgacactg aaaattcatc cattttagag 4974
ccaggaattc ccatgttaca caggaaaaaa tagaagtcta ctgaattaat tttttaaaag 5034
aaaagagatc agattaaata tttctttgtt tttccttttg gaaactttta tgtataattc 5094
tttctgcctg cctacttttc tgcaaaaatg agatgtacag atttcggttc cctgctatga 5154
aaagtgatgt ggtagcaatt ttataaatgt tgctttctga tttttatcag agtgagaaaa 5214
ttaaaattat tgatttgcaa gtagtaaaca gttcatattt tgatttcccc tcattttagt 5274
ttaatataat ttgcaataaa tgtacatatt gttgtttgtt tcataaagca tatcacttta 5334
aaatggtttt tactcctgtg attatgttgg aatatttgga attttaaagg agtaaagact 5394
gtccagcatt tggttttata atgtttgtca ccagattttt attaatgtaa aaaaaatcaa 5454
tttttaaaaa atagttggac tttggcagct tttaaggaaa gttggaggtg ttttaggatt 5514
gctatcaatt ttcagcattg tgctatttgg aaataagtgt tttgcttttg tctgatggtc 5574
tgggctcatt tttatgttta ttttagaaaa ctgttgcatc aatatattat gtttcttggc 5634
attgttcagc ataggtaatg tgtgcacttt atgtgtacac ataatcatat ttaagttttt 5694
tgcataaaat aaatgcttct agatgtcatg gcagtctttt taatcttttt atcatatgct 5754
ttcttgtgaa ttttttcatg ttaaagagct aaagtcataa catgattaca gtcaactctc 5814
cattatctat ataaaatagt gactaagcct caggttttta attttgtgat aacaaaataa 5874
cgaaggcatg taagacctga ttctggagga acatgaaatt tgtcttttct catgtccaga 5934
gttctatcct gcccccactg tccactgtag ggtcatccgc aaagccctag cagaatgtgc 5994
tcactccatt tccttacacg tttctagcat gggtcagagg aaacaacatt tgtgttataa 6054
cttcgtcttg ataggctgta gtgtacatgg gatgtaaaac aaacaagtgt atcaaaggtg 6114
gatgattctg ttagagtgaa gtttgagagt aaatgtcact tacgtttctc atagataatc 6174
aagagttggc tgtgtattga ctgaaagatg ggtaattatt ttaaatatgc atttacacac 6234
atttaggtat cagaagatgc ttagggaaca atggatacca atgatagaaa atgatacctt 6294
tacaggggca gaaaaatccc cactcttcct tattgcctct tcagaaccct ttagaaagta 6354
taaaatattg cctccaacat gctgaaaaag agtatctatg cataagtatc agagaagtcc 6414
ctcaagcaat cagtaggtgt gttctattta gagagagttt aaagttctct tagcatcaga 6474
caacttgatt cctaaggttt ccagtgtgtc accaacaaaa agtgcattga tagggacctt 6534
tgtctcttcc tccctttgat taattgcccg gcatcacagt ttactagatt accaagtgtt 6594
acatcatatt aaataaaatg tagcagaacc atctgcatca atatattcct gtttagattt 6654
ttgcaggaga gaagttaaaa ggatttgctc cttgtatgat gtaagtggcc caccccaatt 6714
ttgtaacatg atgcaagtgt ctggcactaa gggaagcaag agtagggttg tggaaagacc 6774
aagctgatgg ggagggactt gtttacggga atttttttag ttttcctttt caaaggaaaa 6834
cattaaaatc ccttaggaat ttggtattca catctcagag aactacaaca caaaagtgca 6894
gacttatatt tgagaattaa tgttaaccct ttgtgtctag tttgaagctt cttgtatttg 6954
tctaaaacaa caagccagaa ttttgtatct cctttgataa aaagtgtgta taatgtaaag 7014
tagttttgca tattcttgtg ctgcacatgg gctgaatttt taaatttttt ttaaaaactt 7074
gaagcagaac cttgtaattt gtgtaaatga caagtgtaaa atcctaccat aaaatgctaa 7134
aaatatgcac tgtttcaaat aaaaccaaga aatgcagcat taaaaaaaaa aaaaaa 7190
<210> 44
<211> 1337
<212> PRT
<213> 人（Homo sapiens）
<400> 44
Met Asp Phe Thr Ala Gln Pro Lys Pro Ala Thr Ala Leu Cys Gly Val
1 5 10 15
Val Ser Ala Asp Gly Lys Ile Ala Tyr Pro Pro Gly Val Lys Glu Ile
20 25 30
Thr Asp Lys Ile Thr Thr Asp Glu Met Ile Lys Arg Leu Lys Met Val
35 40 45
Val Lys Thr Phe Met Asp Met Asp Gln Asp Ser Glu Asp Glu Lys Gln
50 55 60
Gln Tyr Leu Pro Leu Ala Leu His Leu Ala Ser Glu Phe Phe Leu Arg
65 70 75 80
Asn Pro Asn Lys Asp Val Arg Leu Leu Val Ala Cys Cys Leu Ala Asp
85 90 95
Ile Phe Arg Ile Tyr Ala Pro Glu Ala Pro Tyr Thr Ser His Asp Lys
100 105 110
Leu Lys Asp Ile Phe Leu Phe Ile Thr Arg Gln Leu Lys Gly Leu Glu
115 120 125
Asp Thr Lys Ser Pro Gln Phe Asn Arg Tyr Phe Tyr Leu Leu Glu Asn
130 135 140
Leu Ala Trp Val Lys Ser Tyr Asn Ile Cys Phe Glu Leu Glu Asp Cys
145 150 155 160
Asn Glu Ile Phe Ile Gln Leu Phe Arg Thr Leu Phe Ser Val Ile Asn
165 170 175
Asn Ser His Asn Lys Lys Val Gln Met His Met Leu Asp Leu Met Ser
180 185 190
Ser Ile Ile Met Glu Gly Asp Gly Val Thr Gln Glu Leu Leu Asp Ser
195 200 205
Ile Leu Ile Asn Leu Ile Pro Ala His Lys Asn Leu Asn Lys Gln Ser
210 215 220
Phe Asp Leu Ala Lys Val Leu Leu Lys Arg Thr Val Gln Thr Ile Glu
225 230 235 240
Ala Cys Ile Ala Asn Phe Phe Asn Gln Val Leu Val Leu Gly Arg Ser
245 250 255
Ser Val Ser Asp Leu Ser Glu His Val Phe Asp Leu Ile Gln Glu Leu
260 265 270
Phe Ala Ile Asp Pro His Leu Leu Leu Ser Val Met Pro Gln Leu Glu
275 280 285
Phe Lys Leu Lys Ser Asn Asp Gly Glu Glu Arg Leu Ala Val Val Arg
290 295 300
Leu Leu Ala Lys Leu Phe Gly Ser Lys Asp Ser Asp Leu Ala Thr Gln
305 310 315 320
Asn Arg Pro Leu Trp Gln Cys Phe Leu Gly Arg Phe Asn Asp Ile His
325 330 335
Val Pro Val Arg Leu Glu Ser Val Lys Phe Ala Ser His Cys Leu Met
340 345 350
Asn His Pro Asp Leu Ala Lys Asp Leu Thr Glu Tyr Leu Lys Val Arg
355 360 365
Ser His Asp Pro Glu Glu Ala Ile Arg His Asp Val Ile Val Thr Ile
370 375 380
Ile Thr Ala Ala Lys Arg Asp Leu Ala Leu Val Asn Asp Gln Leu Leu
385 390 395 400
Gly Phe Val Arg Glu Arg Thr Leu Asp Lys Arg Trp Arg Val Arg Lys
405 410 415
Glu Ala Met Met Gly Leu Ala Gln Leu Tyr Lys Lys Tyr Cys Leu His
420 425 430
Gly Glu Ala Gly Lys Glu Ala Ala Glu Lys Val Ser Trp Ile Lys Asp
435 440 445
Lys Leu Leu His Ile Tyr Tyr Gln Asn Ser Ile Asp Asp Lys Leu Leu
450 455 460
Val Glu Lys Ile Phe Ala Gln Tyr Leu Val Pro His Asn Leu Glu Thr
465 470 475 480
Glu Glu Arg Met Lys Cys Leu Tyr Tyr Leu Tyr Ala Ser Leu Asp Pro
485 490 495
Asn Ala Val Lys Ala Leu Asn Glu Met Trp Lys Cys Gln Asn Met Leu
500 505 510
Arg Ser His Val Arg Glu Leu Leu Asp Leu His Lys Gln Pro Thr Ser
515 520 525
Glu Ala Asn Cys Ser Ala Met Phe Gly Lys Leu Met Thr Ile Ala Lys
530 535 540
Asn Leu Pro Asp Pro Gly Lys Ala Gln Asp Phe Val Lys Lys Phe Asn
545 550 555 560
Gln Val Leu Gly Asp Asp Glu Lys Leu Arg Ser Gln Leu Glu Leu Leu
565 570 575
Ile Ser Pro Thr Cys Ser Cys Lys Gln Ala Asp Ile Cys Val Arg Glu
580 585 590
Ile Ala Arg Lys Leu Ala Asn Pro Lys Gln Pro Thr Asn Pro Phe Leu
595 600 605
Glu Met Val Lys Phe Leu Leu Glu Arg Ile Ala Pro Val His Ile Asp
610 615 620
Ser Glu Ala Ile Ser Ala Leu Val Lys Leu Met Asn Lys Ser Ile Glu
625 630 635 640
Gly Thr Ala Asp Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Pro Asp Thr Ala Ile
645 650 655
Arg Ser Gly Leu Glu Leu Leu Lys Val Leu Ser Phe Thr His Pro Thr
660 665 670
Ser Phe His Ser Ala Glu Thr Tyr Glu Ser Leu Leu Gln Cys Leu Arg
675 680 685
Met Glu Asp Asp Lys Val Ala Glu Ala Ala Ile Gln Ile Phe Arg Asn
690 695 700
Thr Gly His Lys Ile Glu Thr Asp Leu Pro Gln Ile Arg Ser Thr Leu
705 710 715 720
Ile Pro Ile Leu His Gln Lys Ala Lys Arg Gly Thr Pro His Gln Ala
725 730 735
Lys Gln Ala Val His Cys Ile His Ala Ile Phe Thr Asn Lys Glu Val
740 745 750
Gln Leu Ala Gln Ile Phe Glu Pro Leu Ser Arg Ser Leu Asn Ala Asp
755 760 765
Val Pro Glu Gln Leu Ile Thr Pro Leu Val Ser Leu Gly His Ile Ser
770 775 780
Met Leu Ala Pro Asp Gln Phe Ala Ser Pro Met Lys Ser Val Val Ala
785 790 795 800
Asn Phe Ile Val Lys Asp Leu Leu Met Asn Asp Arg Ser Thr Gly Glu
805 810 815
Lys Asn Gly Lys Leu Trp Ser Pro Asp Glu Glu Val Ser Pro Glu Val
820 825 830
Leu Ala Lys Val Gln Ala Ile Lys Leu Leu Val Arg Trp Leu Leu Gly
835 840 845
Met Lys Asn Asn Gln Ser Lys Ser Ala Asn Ser Thr Leu Arg Leu Leu
850 855 860
Ser Ala Met Leu Val Ser Glu Gly Asp Leu Thr Glu Gln Lys Arg Ile
865 870 875 880
Ser Lys Ser Asp Met Ser Arg Leu Arg Leu Ala Ala Gly Ser Ala Ile
885 890 895
Met Lys Leu Ala Gln Glu Pro Cys Tyr His Glu Ile Ile Thr Pro Glu
900 905 910
Gln Phe Gln Leu Cys Ala Leu Val Ile Asn Asp Glu Cys Tyr Gln Val
915 920 925
Arg Gln Ile Phe Ala Gln Lys Leu His Lys Ala Leu Val Lys Leu Leu
930 935 940
Leu Pro Leu Glu Tyr Met Ala Ile Phe Ala Leu Cys Ala Lys Asp Pro
945 950 955 960
Val Lys Glu Arg Arg Ala His Ala Arg Gln Cys Leu Leu Lys Asn Ile
965 970 975
Ser Ile Arg Arg Glu Tyr Ile Lys Gln Asn Pro Met Ala Thr Glu Lys
980 985 990
Leu Leu Ser Leu Leu Pro Glu Tyr Val Val Pro Tyr Met Ile His Leu
995 1000 1005
Leu Ala His Asp Pro Asp Phe Thr Arg Ser Gln Asp Val Asp Gln
1010 1015 1020
Leu Arg Asp Ile Lys Glu Cys Leu Trp Phe Met Leu Glu Val Leu
1025 1030 1035
Met Thr Lys Asn Glu Asn Asn Ser His Ala Phe Met Lys Lys Met
1040 1045 1050
Ala Glu Asn Ile Lys Leu Thr Arg Asp Ala Gln Ser Pro Asp Glu
1055 1060 1065
Ser Lys Thr Asn Glu Lys Leu Tyr Thr Val Cys Asp Val Ala Leu
1070 1075 1080
Cys Val Ile Asn Ser Lys Ser Ala Leu Cys Asn Ala Asp Ser Pro
1085 1090 1095
Lys Asp Pro Val Leu Pro Met Lys Phe Phe Thr Gln Pro Glu Lys
1100 1105 1110
Asp Phe Cys Asn Asp Lys Ser Tyr Ile Ser Glu Glu Thr Arg Val
1115 1120 1125
Leu Leu Leu Thr Gly Lys Pro Lys Pro Ala Gly Val Leu Gly Ala
1130 1135 1140
Val Asn Lys Pro Leu Ser Ala Thr Gly Arg Lys Pro Tyr Val Arg
1145 1150 1155
Ser Thr Gly Thr Glu Thr Gly Ser Asn Ile Asn Val Asn Ser Glu
1160 1165 1170
Leu Asn Pro Ser Thr Gly Asn Arg Ser Arg Glu Gln Ser Ser Glu
1175 1180 1185
Ala Ala Glu Thr Gly Val Ser Glu Asn Glu Glu Asn Pro Val Arg
1190 1195 1200
Ile Ile Ser Val Thr Pro Val Lys Asn Ile Asp Pro Val Lys Asn
1205 1210 1215
Lys Glu Ile Asn Ser Asp Gln Ala Thr Gln Gly Asn Ile Ser Ser
1220 1225 1230
Asp Arg Gly Lys Lys Arg Thr Val Thr Ala Ala Gly Ala Glu Asn
1235 1240 1245
Ile Gln Gln Lys Thr Asp Glu Lys Val Asp Glu Ser Gly Pro Pro
1250 1255 1260
Ala Pro Ser Lys Pro Arg Arg Gly Arg Arg Pro Lys Ser Glu Ser
1265 1270 1275
Gln Gly Asn Ala Thr Lys Asn Asp Asp Leu Asn Lys Pro Ile Asn
1280 1285 1290
Lys Gly Arg Lys Arg Ala Ala Val Gly Gln Glu Ser Pro Gly Gly
1295 1300 1305
Leu Glu Ala Gly Asn Ala Lys Ala Pro Lys Leu Gln Asp Leu Ala
1310 1315 1320
Lys Lys Ala Ala Pro Ala Glu Arg Gln Ile Asp Leu Gln Arg
1325 1330 1335

Claims (11)

1.一种免疫诱导剂，是癌的治疗用的免疫诱导剂，其中，作为有效成分，含有选自以下(a)或(b)的多肽类、并且具有免疫诱导活性的至少1种多肽，或者含有包含编码该多肽的多核苷酸、并能够在生物体内表达该多肽的重组载体，所述癌是与健常人相比显著高地检测到抗PDS5A蛋白质抗体的癌，
(a)具有序列表的序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列的多肽，
(b)与所述(a)的多肽具有90％以上的序列同一性的多肽。
2.根据权利要求1所述的免疫诱导剂，所述(b)的多肽是与所述(a)的多肽具有95％以上的序列同一性的多肽。
3.根据权利要求1或2所述的免疫诱导剂，所述抗PDS5A蛋白质抗体是与具有序列表的序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列的多肽有免疫反应性的抗体。
4.根据权利要求1～3的任一项所述的免疫诱导剂，所述癌是乳癌、脑肿瘤、食道癌、肺癌、肾癌、大肠癌、肛周腺癌、神经母细胞瘤或白血病。
5.根据权利要求1～4的任一项所述的免疫诱导剂，其还包含免疫增强剂。
6.一种癌的预防用和/或治疗用的分离的抗原呈递细胞的制造方法，其包括使选自以下(a)或(b)的多肽类的多肽与抗原呈递细胞在体外接触的工序，
(a)具有序列表的序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列的多肽，
(b)与所述(a)的多肽具有90％以上的序列同一性的多肽。
7.根据权利要求6所述的制造方法，所述癌是在从患者分离的试样中，与健常人相比显著高地检测到抗PDS5A蛋白质抗体的癌。
8.一种癌的预防用和/或治疗用的分离的T细胞的制造方法，其包括：通过权利要求6或7所述的分离的抗原呈递细胞的制造方法来制造分离的抗原呈递细胞的工序，和使所得的分离的抗原呈递细胞与T细胞在体外接触的工序。
9.根据权利要求8所述的制造方法，所述癌是在从患者分离的试样中，与健常人相比显著高地检测到抗PDS5A蛋白质抗体的癌。
10.一种癌的检测方法，其包括下述步骤：针对从生物体分离出的试样，测定抗PDS5A蛋白质抗体，以及确认抗PDS5A蛋白质抗体是否与健常人相比显著高。
11.根据权利要求10所述的癌的检测方法，所述抗PDS5A蛋白质抗体是与具有序列表的序列号2、4、6、8、10、12或44所示的氨基酸序列的多肽有免疫反应性的抗体。
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Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2634862C2 (ru) * 2011-05-19 2017-11-07 Торэй Индастриз, Инк. Агент, индуцирующий иммунитет
AU2012256757B2 (en) * 2011-05-19 2017-06-15 Toray Industries, Inc. Immunity inducing agent
US20170266266A1 (en) * 2012-01-31 2017-09-21 Kieu Hoang Functions of 55 Newfound Proteins and Their Medicinal Application in the Treatment and Prevention of Disease
CN107530411B (zh) 2015-04-30 2021-08-13 东丽株式会社 免疫诱导剂
RU2021127767A (ru) * 2015-08-10 2021-11-23 Торэй Индастриз, Инк. Индуктор иммунитета
EP3424518B1 (en) * 2016-03-02 2021-08-11 Toray Industries, Inc. Immunity inducer
BR112018069489A2 (pt) * 2016-03-28 2019-07-30 Toray Industries agente indutor da imunidade e métodos para preparar uma célula apresentadora de antígeno, para preparar uma célula t citotóxica e para induzir a imunidade
WO2023159138A2 (en) * 2022-02-17 2023-08-24 Northwestern University Use of dinucleotide repeat rnas to treat cancer

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002081641A2 (en) * 2001-04-06 2002-10-17 Georgetown University Gene scc-112 and diagnostic and therapeutic uses thereof
CN101072875A (zh) * 2004-12-07 2007-11-14 东丽株式会社 新型癌抗原肽及其用途

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001095584A (ja) 1999-09-30 2001-04-10 Kouji Egawa 癌細胞特異的ｈｌａ−ｆ抗原、およびそれを用いた癌の診断方法
AU2002362454A1 (en) * 2001-10-03 2003-04-14 Origene Technologies, Inc. Regulated breast cancer genes
US20030215809A1 (en) * 2002-05-14 2003-11-20 Zairen Sun Regulated breast cancer genes
TW200413725A (en) * 2002-09-30 2004-08-01 Oncotherapy Science Inc Method for diagnosing non-small cell lung cancers
ES2364670T3 (es) * 2005-02-25 2011-09-12 Oncotherapy Science, Inc. Vacunas de péptidos para cánceres de pulmón que expresan polipéptidos ttk.
KR100689274B1 (ko) * 2005-03-30 2007-03-08 김현기 인간 원암 유전자, 이에 의해 코드되는 단백질
US7842467B1 (en) * 2005-05-12 2010-11-30 Celera Corporation Breast disease targets and uses thereof
WO2009090651A2 (en) * 2008-01-15 2009-07-23 Technion Research And Development Foundation Ltd. Major histocompatibility complex hla-b2705 ligands useful for therapy and diagnosis

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002081641A2 (en) * 2001-04-06 2002-10-17 Georgetown University Gene scc-112 and diagnostic and therapeutic uses thereof
CN101072875A (zh) * 2004-12-07 2007-11-14 东丽株式会社 新型癌抗原肽及其用途

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ZHENG M Z等: "SCC-112 gene is involved in tumor progression and promotes the cell proliferation in G2/M phase", 《JOURNAL OF CANCER RESEARCH AND CLINICAL ONCOLOGY 》 *

Also Published As

Publication number Publication date
JP2016040290A (ja) 2016-03-24
DK2474315T3 (en) 2018-03-12
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US20120177673A1 (en) 2012-07-12
CA2773083A1 (en) 2011-03-10
ES2662325T3 (es) 2018-04-06
KR20120073199A (ko) 2012-07-04
CA2773083C (en) 2019-02-12
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