CN107206091A - 诺卡胺素的新络合物以及其在药物组合物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及诺卡胺素(去铁胺E)与至少一种金属，确切地与Zn²⁺或Ga³⁺或银或金的络合物或这些络合物的任何组合。本发明进一步提供了用于制备这些络合物和包含所述络合物或所述络合物的任何组合的药物组合物的方法，以及在调节受试者中的细胞因子水平并且从而治疗炎症相关的病症中使用本发明的这些组合物和络合物的方法。

Description

诺卡胺素的新络合物以及其在药物组合物中的用途

技术领域

本发明涉及诺卡胺素(去铁胺E)与金属或金属组合的新型络合物以及其，在细胞内和细胞外充当抗生素并且螯合不稳定性且氧化还原活性的铁而在调节促炎和抗炎细胞因子中的至少一者中的用途。更确切地，本发明提供了用于治疗与炎症、感染和铁超负荷相关联的病状的组合物、方法和试剂盒。

背景参考

以下列出了被认为作为背景与现在披露的主题相关的参考文献：

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在此对以上参考文献的确认并不应推断为意指这些参考文献以任何方式与现在所披露的主题的可专利性相关。

背景技术

炎症是身体组织对刺激诸如病原体、受损的细胞或刺激物的复杂生物应答的一部分。炎症是涉及免疫细胞、血管和分子介体的保护性应答(1)。炎症的目的是消除细胞损伤的初始原因、清除已由于最初损害和炎性过程而受损的坏死细胞和组织，并且启动组织修复。急性炎症的典型生理体征是疼痛、灼热、发红、肿胀以及功能丧失。炎症是通用应答，并且因此它被认为是先天免疫的机制。炎症可以分类为急性或慢性。急性炎症是身体对有害刺激的初始应答，并且通过增加白细胞，尤其是粒细胞从血液到损伤组织中的动员来实现。一系列的生化事件传播并促进炎症应答，涉及了局部血管系统、免疫系统以及损伤组织内的不同细胞。慢性炎症是长期炎症，该炎症导致存在于炎症位点处的细胞类型的渐进性变化，并且其特征在于炎性过程中所累及的组织的同时破坏和愈合(2)。

许多生物活性化合物具有抗炎性特性，经由不同机制起作用。这些机制中的一个可以涉及对环氧合酶活性的直接阻断，从而阻碍促炎分子，即前列腺素的产生。其他生物活性分子在炎症应答过程中抑制促炎细胞因子的活性或干扰嗜中性粒细胞中的L-选择素功能(3)。

确切地经由促炎和抗炎细胞因子和任何其他免疫调节剂的调节来调节免疫应答的化合物因此作为用于调节免疫应答和控制相关病症的工具是有价值的。

诺卡胺素，即铁载体(CAS#26605-16-3)，涉及向细菌、真菌和植物细胞的铁转运。铁是在生物系统中起关键作用的必需元素。铁是人体中的富有金属。在健康成人中，铁的总量是3至4克，其大多数位于血红蛋白内，血红蛋白是红细胞中的氧转运蛋白和主要蛋白组分。机体铁的一部分作为氧结合蛋白即肌红蛋白位于肌肉中。约1％的机体铁结合到各种含铁酶和大量铁依赖性氧化还原蛋白，包括呼吸作用和电子转运中所涉及的蛋白。在另一方面，“不稳定性”且氧化还原活性铁池的部分充当反应性氧衍生物质(ROS)的形成(包括经由芬顿反应(Fenton reaction)形成羟基自由基)中的关键参与者，从而催化组织诱导的损伤，诸如炎性病状的发展(4)。实际上，在不同的器官和组织中过量组织铁与多种病理学和炎性现象之间存在直接关联(5)。因此，铁螯合对致病微生物可以具有抑菌和杀菌作用(6，7)。

铁是为细胞增殖，包括微生物生长所需的。在微生物中，铁获取由低分子量的三价铁离子选择性配体即铁载体家族所介导，这些铁载体经由受体介导的机制使铁穿梭到细胞中，相当于细胞结合受体和相关联的细胞内利用组分。

铁载体与金属离子的络合物的形成可以有助于增加金属的溶解度，并且有助于增强过渡金属离子穿过细胞膜并且作为络合物浸润到细胞和组织中的能力。此外，这些过渡金属离子可以增强抗炎活性和/或抗生素活性(8，9)。一些金属自身展示出抗炎活性，然而，当它们作为与铁载体的络合物被给予时，可以展示出协同效应(10)。

US 5,075,469(11)涉及用于治疗铁介导的损伤的药物组合物。这些组合物含有去铁胺B或青霉胺的锌络合物，用于治疗缺血性损伤、地中海贫血(thallasaemia)和血色素沉着症。

WO 2011/021203(12)是发明人的先前出版物，其涉及包含DFO-B金属络合物的药物组合物，用于预防、治疗、改善或抑制不同的免疫相关病症，包括哮喘、II型和I型糖尿病以及银屑病。

WO 2004/060490(13)涉及去铁胺B-金属络合物用于局部治疗和/或预防暴露于战剂的组织的损伤，例如芥子气诱导的皮肤灼伤和损伤的用途。

US 5,051,523(14)涉及与锰和放射性同位素Ga-67的诺卡胺素(去铁胺E)络合物的形成。后者适用于癌症诊断中和结节病或结核病的炎性过程的定位中的PET扫描，但是不用于治疗中。

已显示与诺卡胺素的锰络合物模拟超氧化物歧化酶活性。这样的络合物可以作为一系列疾病的疗法应用，据推测该应用由超氧自由基离子介导但是不受增加的氢-过氧化物酶水平的影响，氢-过氧化物酶是歧化反应，例如缺血再灌注损伤和多种其他炎性过程的产物(15)。

EP2129762(16)披露包含金属-铁载体络合物，具体地(spesifically)DFO-E金属络合物的洗涤剂和清理剂以及它们作为漂白催化剂的用途。

因此，需要开发可以适用于多种多样的疾病的高效抗炎化合物，这些疾病的发病机理涉及新型金属-诺卡胺素络合物作为抗炎化合物、抗生素和铁螯合物的若干种作用模式。

发明内容

根据一个方面，本发明提供了一种包含诺卡胺素(去铁胺E)与至少一种金属的至少一种络合物的组合物。更确切地，诺卡胺素与锌、镓、铝、银、金、钴、钼、钒或其任何离子形式中的至少一种的络合物。在又一些另外的实施例中，本发明的组合物可以任选地进一步包含稀释剂、载体、赋形剂中的至少一种。

在又一方面中，本发明涉及一种用于调节细胞中的细胞因子水平的方法。在一些具体实施例中，本发明的方法包括将细胞与有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物或其任何衍生物、包含它们的组合物或任何媒介物、基质、纳米或微米颗粒相接触的步骤。在一些另外的实施例中，本发明提供了一种用于通过向受试者给予有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物或其任何衍生物、它们的组合物或包含它们的任何媒介物、基质、纳米或微米颗粒来调节受试者中的细胞因子水平的方法。

本发明的另一个方面涉及一种治疗、预防、抑制、减少、消除、防止或延迟有需要的受试者中的病理学病状或病症的发作的方法。在一些实施例中，该方法包括向受试者给予治疗有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物或其任何组合，或包含它们的任何药物组合物、媒介物、基质、纳米或微米颗粒。

本发明进一步提供了一种诺卡胺素与至少一种金属，确切地锌、镓、银、金、铝、钴、钼或钒的络合物。

本发明的另一个方面涉及在治疗、预防、抑制、减少、消除、防止或延迟有需要的受试者中的病理学病状或病症的发作的方法中使用的本发明组合物。

在又一方面中，本发明涉及一种包括以下各项的试剂盒：(i)呈其盐、酯和酰胺中的任何形式的选自镧系元素、锕系元素、后过渡金属或过渡金属中的至少一种金属或其任何组合、或其药学上可接受的衍生物和药学上可接受的稀释剂、载体、赋形剂或稀释剂，以及(ii)诺卡胺素或其药学上可接受的衍生物。

本发明的这些和其他方面将随着描述的继续进行而变得清楚。

附图说明

为了更好地理解在此所披露的主题并例示其在实践中的实施方式，现在将仅通过非限制性实例的方式，参考附图描述实施例，其中：

图1A-图1C.诺卡胺素、锌-诺卡胺素络合物以及镓-诺卡胺素络合物的比较性质谱分析

图1A示出了诺卡胺素的质谱。

图1B示出了锌-诺卡胺素络合物的质谱。

使用质谱法研究如在实验程序中所概述那样进行制备并纯化至89.8％的锌-诺卡胺素络合物。在直接注射之后(离子源：电喷雾电离(正电的)；蒸发器温度：200℃；毛细管温度100℃；流量：0.005ml/min(100％水)；注射体积：5μl)，示出了代表性谱图。

图1C示出了镓-诺卡胺素络合物的质谱。

如在实验程序中所概述那样由氯化镓(>99.999％纯)溶液(根据制造商的详细信息)和诺卡胺素(>98％纯)制备镓-诺卡胺素络合物。使用质谱法研究该络合物。在直接注射之后(离子源：电喷雾电离(正电的)；蒸发器温度：200℃；毛细管温度100℃；流量：0.005ml/min(100％水)；注射体积：5μl)，示出了代表性谱图。

图2A-图2B.对小鼠耳朵中的巴豆油诱导的刺激性接触性皮炎(ICD)模型的治疗

图2A.使用两组小鼠，两组小鼠均暴露于巴豆油。在暴露3小时之后，一个组使用仅含凡士林(仅媒介物)的软膏处理，而第二组不进行处理。附图示出在暴露于刺激物之后耳朵厚度随时间的增量。示出平均值±SEM。

图2B.使用四组小鼠。与未处理小鼠(第4组)相比，三个小组使用含有诺卡胺素(0.5％)(第1组)、锌-诺卡胺素(0.5％)(第2组)或戊酸倍他米松(0.1％)(第3组)的软膏进行处理。示出平均值±SEM。

图3.使用锌-诺卡胺素软膏对ICD的鼠类模型的治疗：剂量-应答

使用12周大的Balb/c雌性小鼠。如下将三十二只小鼠分成4组，每组八只小鼠：第1组-未处理的对照组；第2组-使用0.1％锌-诺卡胺素处理；第3组-使用0.2％锌-诺卡胺素处理；第4组-使用0.5％锌-诺卡胺素处理。在暴露于刺激物3小时之后，将对应软膏的指尖施加在暴露的耳朵上。示出平均值±SEM。

图4.利用ICD的鼠类模型使用含锌-诺卡胺素络合物的软膏的治疗或通过含锌-诺卡胺素络合物的软膏进行的炎性过程的预防

使用12周大的Balb/c雌性小鼠。将四十只小鼠分成5组，每组八只小鼠；第1组-在暴露于刺激物之前1小时使用锌-诺卡胺素(0.5％软膏)处理的小鼠；第2组-未处理的对照组；第3组-在暴露于刺激物3小时之后使用锌-诺卡胺素(0.5％软膏)处理；第4组-在暴露于刺激物3小时和6小时之后使用锌-诺卡胺素(0.5％软膏)处理；第5组-在暴露于刺激物6小时之后使用锌-诺卡胺素(0.5％软膏)处理。示出平均值±SEM。

图5.局部施加的锌-诺卡胺素对ICD的鼠模型的全身性作用

使用12周大的Balb/c雌性小鼠。如下将二十只小鼠分成4组，每组五只小鼠：第1组-未处理的对照组；第2组-右耳暴露于巴豆油，并且在暴露3小时之后使用0.5％锌-诺卡胺素进行处理；第3组-两只耳朵均暴露于巴豆油，并且在暴露3小时之后使用0.5％锌-诺卡胺素仅对右耳进行处理；第4组-右耳暴露于巴豆油，并且在暴露3小时之后将0.5％锌-诺卡胺素软膏的指尖施加在尾巴的中间部分上。示出平均值±SEM。

图6A-图6D.使用锌-诺卡胺素对ICD的治疗对促炎细胞因子水平的影响

图6A示出了暴露于巴豆油的小鼠耳朵中IL-1α的水平。

图6B示出了暴露于巴豆油的小鼠耳朵中IL-6的水平。

图6C示出了暴露于巴豆油的小鼠耳朵中TNF-α的水平。

图6D示出了暴露于巴豆油的小鼠耳朵中IL-17的水平。

示出平均值±SEM。

图(6A-6D)的每个图中的左边柱示出在暴露于刺激物之前(t＝0)的相应细胞因子的水平，左边第二个条柱示出在暴露于刺激物之后t＝6h时相应细胞因子的水平。右边第二个条柱示出在暴露于刺激物之后t＝6h时相应细胞因子的水平，但是这些耳朵在暴露于刺激物之后t＝3h时使用软膏处理一次。右边条柱示出在暴露于刺激物之后t＝3h时相应细胞因子的水平。

图7.锌-诺卡胺素对ICD的治疗对抗炎细胞因子IL-13水平的影响

左边条柱示出在暴露于刺激物之前(t＝0)IL-13的水平，左边第二个条柱示出在暴露于刺激物之后t＝6h时IL-13的水平。右边第二个条柱示出在暴露于刺激物之后t＝6h时IL-13的水平，(而在暴露之后t＝3h时进行使用本发明的络合物的处理)。右边条柱示出在暴露于刺激物之后t＝3h时IL-13的水平(没有处理)。示出平均值±SEM。

图8A-图8C：锌-诺卡胺素络合物对细菌生长的抗菌作用

图8A示出了锌-诺卡胺素对致病大肠杆菌的影响。

图8B示出了锌-诺卡胺素对铜绿假单胞菌的影响。

图8C示出了锌-诺卡胺素对金黄色葡萄球菌的影响。

图9A-图9C.锌-诺卡胺素对大肠杆菌、铜绿假单胞菌以及金黄色葡萄球菌的杀菌活性

评估锌-诺卡胺素络合物对以下细菌的杀菌活性：图9A.大肠杆菌；图9B.铜绿假单胞菌；以及图9C.金黄色葡萄球菌，这些细菌在具有适当培养基的皮氏培养皿上生长。

如下设定皮氏培养皿的四个象限(1-4)中的锌-诺卡胺素的浓度：1-0mg/ml；2-5mg/ml；3-1.7mg/ml；4-0.5mg/ml。

具体实施方式

发明人在此首次报道铁载体(诺卡胺素)与锌离子的络合物表现出高抗炎活性。他们还揭示了此活性所基于的机制。如实例2-7所示，此抗炎络合物在刺激性接触性皮炎(ICD)模型中进行测试，在该模型中，局部炎症应答通过在小鼠耳朵上施加巴豆油来引发。使用含有相对少量的锌-诺卡胺素络合物的软膏指尖的处理使ICD模型中产生的炎症快速减少。

虽然金属-去铁胺B络合物的抗炎作用先前由发明人示出(12)，但是如本发明所示的金属-诺卡胺素络合物的抗炎作用是意料之外的。更确切地，发明人意外地发现与敦加纳等人的教授内容相比，诺卡胺素的金属络合物可以快速地渗透到细胞中(8)。将去铁胺B和诺卡胺素的铁络合物的晶体结构互相进行比较。在去铁胺B络合物中，在其卷曲结构中发现在分子端部处具有质子化的伯氨基团的悬挂戊烷链。这样的链不能在铁-诺卡胺素中被检测到，这是由于其闭合的环形结构且缺少伯氨基团。同样，发现此链远离酰胺连接环指向并且面对含有羰基基团的分子的表面。预期诺卡胺素中此特征的缺少会损害膜转运过程(8)。因此，诺卡胺素有效渗透到细胞的事实是意料之外的。因此，诺卡胺素本不应当被选择用于制备浸润到细胞中从而表现出细胞内铁活性、抗生素活性和抗炎活性的迅速螯合作用的特性的药物。此外，去铁胺B是具有约50mg/ml的水溶解度的高度亲水分子。在另一方面，诺卡胺素是更具亲脂性的化合物，在加热条件下被描述为可溶于水。存在具有与去铁胺B的那些化学特性更类似的化学特性的其他铁载体。因此，选择诺卡胺素有悖于本领域的学者的自然选择。此外，与去铁胺B不同，据报道诺卡胺素将昆虫家蚕(蚕)卵巢衍生的培养细胞系细胞的形态改变成纺锤形构形。具有改变构形的这些细胞比正常细胞更强地连接到培养瓶。虽然变化机制仍不清楚，但是卵巢细胞中的此特征已被解释为瘤形成过程的指示物，进而导致卵巢癌。鉴于诺卡胺素的这些报告的风险，本发明的金属-诺卡胺素络合物的安全使用和抗癌应用是令人意外的。此外，如实例7中所披露，本发明的金属-诺卡胺素络合物清楚地展示出意料之外的抗菌作用。更确切地，在数个先前的出版物中，本发明人已经示出在金属离子(例如，三价铁、镓和锌)结合之后，去铁胺B的空间结构发生从其细胞凋亡状态的线性结构到球状、卷取结构的明显结构变化。金属结合之后的此变化在促进此络合物的细胞内进入并且因此提供其抗微生物作用中起重要作用(17)。虽然(细胞凋亡)铁载体的线性结构不被目标微生物的铁载体受体识别，部分地模拟铁结合形式的铁载体的更加球形的锌-铁载体络合物结合到受体，被引入到微生物细胞中，但是它并不将(细胞凋亡)铁载体从其锌络合物释放，因此破坏生物的铁引入机构，从而产生抑菌和杀菌作用。因此，本发明的金属-诺卡胺素络合物的有效抗微生物特性是意料之外的。另外，本发明现在意外地显示出金属-诺卡胺素络合物的意料之外的抗炎作用。

因此，在第一方面中，本披露提供了包含至少一种金属-螯合络合物并且确切地环形铁载体去铁胺E(也表示为诺卡胺素或DFO-E)与金属的络合物的组合物。在一些任选的实施例中，本发明的组合物可以进一步包含稀释剂、载体和赋形剂中的至少一种。应当理解，在某些实施例中，本发明的组合物可以包含若干种不同的金属-DFO E络合物或其任何组合。

术语“螯合作用”涉及离子和分子结合金属离子所通过的特定方式。根据国际理论与应用化学联合会(IUPAC)，螯合作用涉及多齿(多重键)配体与单个中心原子之间的两个或更多个单独的配位键的形成或存在。通常这些配体是有机化合物，并且被称为螯合剂(chelants)、螯合物、螯合剂(chelating agents)或多价螯合剂。螯合作用描述与类似的非螯合(单齿)配体的集合体对于金属的亲和力相比的螯合配体对于相同金属离子的亲和力增强。

诺卡胺素是由若干种微生物合成的铁载体(CAS#26605-16-3)，这些微生物包括通常认为安全的(GRAS)细菌橄榄色链霉菌(Streptomyces olivaceus)。诺卡胺素是在单独的异羟肟酸基团之间具有-(CH₂)₅-和-(CH₂)₂-间隔子的环形三异羟肟酸分子。诺卡胺素与过渡金属和后过渡金属非共价地相互作用，从而形成具有1:1的化学计量的络合物。三价铁(Fe³⁺)络合物显示出非常高的稳定性常数，并且其结构上的特征在于扭曲的八面体。

在又一些具体实施例中，本发明的组合物的诺卡胺素如具有化学式I的结构所呈现：

化学式I

如在此详细描述的，诺卡胺素是螯合剂。它包含若干个异羟肟酸基团，这些基团去质子化形成结合金属离子以形成络合物的异羟肟酸盐。

如在此所使用，术语“络合物”(也被称为络合物离子或配位络合物)是指由具有多个结合位点的配体(多齿配体)和金属离子构成的化合物。为螯合剂的配体与至少一种金属离子缔合。

如在此所使用，术语“缔合”是指使两个实体(即，配体和金属离子)固定在一起的化学力或物理力。这样的力可以是本领域的技术人员已知的任何类型的化学或物理键合相互作用。此类缔合相互作用的非限制性实例是离子键合、共价键合、配位键合、络合作用、氢键合、范德瓦尔斯键合、疏水-亲水相互作用等。

在一些实施例中，该缔合作用可以是经由共价结合的。在其他具体实施例中，该缔合可以是经由配位键合的。如在此所使用，术语配位键合或配位键是指两个共用电子源自同一原子的共价键类型(被称为配价键)。在本披露的上下文中，配体与金属之间的缔合包括经由配体中的多个原子到金属上的多个位点的缔合。因此，该缔合可以被视为包括多于一个键，有时两个共价键，有时一个共价键和一个配位键，有时两个配位键。键的数量被称为络合物的配位数。键可以包括单键(σ键)和/或双键(π键)，并且可以是偶极键。

本领域的技术人员应当理解，在一些情况下，两个原子或两个化学实体之间的缔合相互作用可以涉及多于一种类型的化学和/或物理相互作用。

当涉及金属时，应当理解为包括普遍地已知为过渡金属、后过渡金属、镧系元素、锕系元素以及类金属的元素中的任何一种或多种。

在一些实施例中，金属可以通过从供体路易斯碱(即，螯合剂)接受电子对而充当路易斯酸，从而形成络合物或络合物离子。应当注意，供给电子可以被视为供给到空金属轨道中的电子对。在本披露的上下文中，该金属可以被称为“中心金属”。

在一些实施例中，至少一种金属选自下组，该组由以下各项组成：锌、镓、铝、银、金、钴、钼、钒，包括氧钒根基团，或其任何离子形式。在一些实施例中，金属可以存在于人体中，即可以是内源性的无毒金属。

根据本披露，至少一种金属是金属离子。在一些实施例中，至少一种金属离子可以选自下组，该组由以下各项组成：Zn²⁺、Ga³⁺、Al³⁺、Ag¹⁺、Au³⁺、Au¹⁺、Co³⁺、V⁴⁺、V⁵⁺、[VO]²⁺、Mo⁴⁺、Mo⁶⁺。

如在此详细描述的，在将络合物给予到组织或生物中之后，因为配体与金属之间的缔合是可逆的，所以金属离子可以由来自内源性来源的不同金属离子置换，并且进而可以结合另一种细胞组分或者可以配体-游离/非结合形式释放到循环中。当涉及配体-游离/非结合形式时，应当注意金属离子从配体(即，诺卡胺素)游离下来或未结合该配体。

有人提出，金属离子从络合物的释放和伴随的不同金属离子的置换源于两种金属离子中的每一种与配体(即，诺卡胺素)的解离常数的差异。换言之，由于‘新’金属与配体(即，诺卡胺素)的缔合常数高于最初的金属离子，所以解离常数的差异使得络合物的解离和金属离子的释放是热力学上有利的，在此情况下，置换是有利的。在不受到理论的束缚的情况下，有人提出去铁胺E和Zn²⁺的络合物将具有释放金属离子(即Zn²⁺)和结合Fe³⁺的趋势。在一些实施例中，游离未结合形式的金属离子可以具有生理作用，例如抗氧化作用。应当理解，名称诺卡胺素、去铁胺E或DFO E涉及同一化合物，并且在整篇文件中互换使用。在一些另外的实施例中，此化合物在上文通过化学式I披露。

在一些其他实施例中，金属离子是氧化还原惰性金属。换言之，金属离子不参与体内的氧化-还原反应。

在一些实施例中，至少一种金属离子是Zn²⁺。在又一些另外的实施例中，至少一种金属离子是Ga³⁺。在一些实施例中，至少一种金属离子是Ag¹⁺。在一些实施例中，至少一种金属离子是Al³⁺。在一些其他实施例中，至少一种金属离子是Au³⁺或Au¹⁺。在又一些其他实施例中，至少一种金属离子是Co³⁺。在一些另外的实施例中，至少一种金属离子是V⁴⁺、V⁵⁺或[VO]²⁺。在又一些另外的实施例中，至少一种金属离子是Mo⁴⁺或Mo⁶。

此外，本发明的组合物可以包含诺卡胺素与Zn²⁺的至少一种络合物。在一些具体实施例中，本发明的组合物的络合物可以具有如由化学式II或类似化学式所呈现的结构，其中任何两个异羟肟酸基团(在诺卡胺素中存在的3个中)结合锌金属。

化学式II：锌-诺卡胺素络合物

在又一些其他实施例中，本发明的组合物可以包含诺卡胺素与Ga³⁺的至少一种络合物。此外，在某些实施例中，卡胺素与Ga³⁺的络合物可以由化学式III呈现。应当注意，化学式III示出镓-诺卡胺素络合物的结构，该结构类似于相应的铁络合物，其中3个异羟肟酸基团结合金属离子。

化学式III：镓-诺卡胺素络合物

应当理解，本发明的组合物可以包含金属-诺卡胺素的至少一种络合物。在又一些其他实施例中，本发明的组合物可以包含如由本发明所述的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、50、50、60、70、80、90、100种或更多种络合物。此外，必须理解，这些络合物或其任何组合可以在本发明的组合物中以任何比率例如1:1至0,0001-100,000或更多呈现。

在又一些另外的实施例中，本发明的组合物可以包含诺卡胺素与Ga³⁺的至少一种络合物和诺卡胺素与Zn²⁺的至少一种络合物。应当理解，在某些实施例中，此类组合可以在所述组合物中以任何比率，例如范围在约1:1至0.0001:100,000至100,000:0.0001的比率存在。更确切地，0.1:1、0.2:1、0.3:1、0.4:1、0.5:1、0.6:1、0.7:1、0.8:1、0.9:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10或更多。

通过一个实施例，金属离子或诺卡胺素呈具有酸的盐的形式，并且/或者络合物除铁载体和金属离子之外还包含酸。该酸可以选自非限制性实例，是1-羟基-2-萘甲酸、2,2-二氯乙酸、2-酮戊二酸、4-乙酰氨基苯甲酸、4-氨基水杨酸、乙酸、具有任何取代的烷烃磺酸、烯烃磺酸、炔烃磺酸、己二酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟脑酸、樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、异丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸或其衍生物、或取代的烃基磺酸，例如羟基-、烷氧基-、酰氧基-、烷氧羰基-、卤素-、芳基-或氨基-取代的烷基磺酸、烟酸、硝酸、油酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、磷酸、丙酸、焦谷氨酸、水杨酸、癸二酸、亚硒酸、硒酸、或先前所提及的磺酸化合物的任何亚硒酸或硒酸类似物、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、硫氰酸、十一碳烯酸。

金属-诺卡胺素络合物可以原态应用或与糖、淀粉、氨基酸、聚乙二醇或基于聚丙三醇的化合物缀合来应用。

金属-诺卡胺素络合物可以原态应用或与肼、羟胺、胺、卤化物、脂肪族、芳香族、杂环化合物或任何其他药学上可接受的组缀合来应用。

在另一个实施例中，本发明的组合物可以药物组合物配制。更确切地，本发明的组合物包含作为活性成分的如上所述的本发明的金属-诺卡胺素络合物中的至少一种或其任何组合，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂。

如在此所使用，“药学上可接受的载体”包括任何以及所有的溶剂、分散介质、包衣等等。这些介质和药剂用于药物活性物质的用途在本领域中是熟知的。除了与活性成分不相容的任何常规的介质或药剂之外，考虑了其在治疗组合物中的用途。

在一些实施例中，本发明的药物组合物适于全身性给予。本发明的药物组合物可以根据良好的医学实践通过本发明的方法进行给予和给药。更确切地，在下文描述的用于本发明的方法和试剂盒中的组合物可以适于通过全身性、肠胃外、腹膜内、经皮、口服(包括经颊或舌下)、直肠、局部(包括经颊或舌下)、阴道、鼻内以及任何其他适当的途径给予。此类配制品可以通过药学领域中已知的任何方法，例如通过将活性成分与载体或赋形剂进行结合来制备。

如在此所使用的短语“全身性给予”、“全身性地给予”意指以除了直接到中枢血液系统中之外的方式给予化合物、药物或其他材料，这样使得上述物质进入到患者的系统，并且因此经受代谢以及其他类似过程。如在此所使用的短语“肠胃外给予”和“肠胃外地给予”意指除了肠内给予和局部给予之外的、通常通过注射的给予模式，并且包括但不限于静脉内、肌肉内、动脉内、鞘内、囊内、眼眶内、心内、真皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内(intraarticulare)、囊下、蛛网膜下、脊髓内以及胸骨内注射和输注。

全身性给予包括通过静脉内弹丸注射、通过静脉内输注、通过皮下、肌肉内、腹膜内注射或通过栓剂、通过贴剂、或任何其他临床上接受的方法进行的肠胃外注射，当在可接受的载体中施加时，该方法包括含有这些络合物和其组合的片剂、丸剂、锭剂、软锭剂、胶囊剂、可饮用制剂、软膏、乳膏、糊剂、胶囊化的凝胶、贴剂、弹丸、或可喷雾的气溶胶或蒸汽。可替代地，对于任何肺部递送，如通过口服吸入诸如通过使用液体雾化器的、基于气溶胶的定量吸入器(MDI)或干粉分散装置。

在其他实施例中，药物组合物适于局部给予。“局部给予”意指药物组合物和载体可以适于任何模式的局部给予，包括：表皮、口服、支气管肺泡灌洗、眼部给予、灌肠法、鼻腔给予、给予至耳朵、吸入给予。

不管所选择的给予途径，可以合适的水合形式使用的本发明的化合物和/或本发明的药物组合物通过本领域的技术人员已知的常规方法配制成药学上可接受的剂型。

根据本发明用于治疗有需要的受试者的药物组合物通常包含缓冲剂，即调整其同渗浓度的药剂，以及任选地本领域已知的一种或多种药学上可接受的载体、赋形剂和/或添加剂。补充性活性成分也可以并入到组合物中。载体可以是含有例如水、乙醇以及其合适的混合物的溶剂或分散介质。适当流动性可以例如通过使用包衣诸如卵磷脂、通过在分散体的情况下维持所需粒径以及通过使用表面活性剂来维持。

在一些实施例中，包含去铁胺E与金属作为活性成分的药物组合物可以单独给予或与其他金属-诺卡胺素络合物组合给予。

具体相关的是，本发明的络合物的配制品或任何组合物适于用作纳米或微米颗粒。使用脂质体和纳米颗粒的纳米级药物递送系统是用于合理药物递送的新兴技术，提供了改进的药代动力学特性、药物的控制释放和持续释放以及更重要地，较低的全身性毒性。特别希望的溶液允许胶囊化的化合物的外部触发式释放。如果药物递送媒介物诸如脂质体或聚电解质多层胶囊剂并入纳米颗粒(NP)致动器，则可以实现外部控制释放。更确切地，与传统药物形式相比，控制型药物递送系统(DDS)具有多个优点。药物被转运到作用位点，因此，其对活的组织的影响以及不合需要的副作用可以被最小化。治疗性化合物在靶位点的累积增加，并且因此所需要的药物剂量是较低的。当药物的剂量或浓度与其治疗性结果或毒性作用之间存在差异时，此治疗形式是尤其重要的。细胞特异性靶向可以通过将药物连接到专门设计的载体来实现。不同的纳米结构，包括脂质体、聚合物、树枝状聚合物、硅或碳材料以及磁性纳米颗粒已经在药物递送系统中作为载体被测试。因此应当理解，本发明的络合物或其任何组合物可以在此所述的纳米或微米颗粒中的任一种配制。

本发明另一方面涉及用于调节细胞中的细胞因子水平的方法。更确切地，本发明的方法可以包括将所述细胞与有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物或其任何衍生物、包含它们的组合物或任何媒介物、基质、纳米或微米颗粒相接触的步骤。因此，在一些实施例中，本发明的金属-诺卡胺素络合物调节细胞中的细胞因子水平。如下文所指出的，在此所使用的调节可以是增加或降低如下文所述的细胞中或受试者中的细胞因子水平。

此外，在一些实施例中，为了调节细胞中的细胞因子水平，本发明的络合物可以与细胞接触。术语“接触”意指集合在一起、放置在一起、在一起孵育或混合在一起。由此，当第一物品与第二物品例如通过使其彼此触摸或将其组合而集合或放置在一起时，则这两个物品进行了接触。在本发明的上下文中，术语“接触”包括所有的措施或步骤，这些措施或步骤允许本发明的络合物与有待调节的细胞或受试者之间的相互作用，如下文所指定的。

在一些实施例中，由本发明的方法所使用的络合物的金属可以选自由镧系元素、锕系元素、后过渡金属或过渡金属组成的组。在另一个实施例中，由本发明的方法所使用的络合物的金属可以选自锌、镓、铝、银、金、钴、钼、钒或其任何离子形式组成的组。

在另外的实施例中，由本发明的方法所使用的络合物的金属离子可以选自由Zn²⁺、Ga³⁺、Al³⁺、Ag⁺和Au³⁺、Co³⁺、钒以及钼组成的组。

在又一些具体实施例中，由本发明的方法所使用的络合物的金属离子可以是Zn²⁺。在一些具体实施例中，本发明的方法可以使用上文所述的诺卡胺素与Zn²⁺的至少一种络合物。

在可替代的具体实施例中，由本发明的方法所使用的络合物的金属离子可以是Ga³⁺。

在一些另外的实施例中，本发明的组合物可以使用去铁胺E与Ga³⁺的至少一种络合物。

如上所指出的，本发明提供了用于调节细胞中的细胞因子水平的方法。如在此所使用的术语调节是指降低或可替代地升高所述细胞中的细胞因子水平。

在又更具体的实施例中，与未使用本发明的络合物处理的细胞或受试者相比，本发明的金属-诺卡胺素络合物可以导致与本发明的络合物接触的细胞中或给予有本发明的络合物的受试者中的至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、31％、32％、33％、34％、35％、36％、37％、38％、39％、40％、41％、42％、43％、44％、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或约100％的细胞因子水平的降低、减少、消除、衰减或抑制。可替代地，在一些实施例中，与未使用本发明的络合物处理的细胞或受试者相比，调节可以涉及与本发明的络合物接触或给予有本发明的络合物的细胞中或受试者中的至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、31％、32％、33％、34％、35％、36％、37％、38％、39％、40％、41％、42％、43％、44％、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、100％、200％、300％、400％、500％、600％、700％、800％、900％或约1000％的细胞因子水平的增加、升高、增强或增大。

确切地，通过本发明调节细胞因子的方法涉及调节至少一种促炎细胞因子和至少一种抗炎细胞因子。

“细胞因子”属于小蛋白质(约5至20kDa)的类别，由细胞释放并且对于细胞之间的相互作用、细胞之间的通讯或细胞的行为具有特异性作用。细胞因子还可以涉及自分泌信号传导。细胞因子包括趋化因子、干扰素、白细胞介素、淋巴因子、肿瘤坏死因子，但是通常不包括激素或生长因子(虽然有一些术语重叠)。细胞因子由广泛范围的细胞产生，包括像巨噬细胞、B淋巴细胞、T淋巴细胞和肥大细胞的免疫细胞、以及内皮细胞、成纤维细胞和不同的基质细胞；给定的细胞因子可以由多于一种类型的细胞产生。应当注意，在一些实施例中，本发明的方法可以适用于调节如上所述的任何细胞因子的水平。

此外，在一些其他实施例中，本发明的方法可以用于调节细胞中的促炎细胞因子的水平。“促炎细胞因子”是促进全身炎症的细胞因子。由于它们的促炎作用，其通过产生发烧、浮肿、炎症、组织破坏以及在一些情况下甚至休克和死亡来引发病理过程或使其加重。促炎细胞因子的非限制性实例包括但不限于IL1-α、IL1-β、IL6和TNF-α、IL20家族的成员、IL33LIF、IFN-γ、OSM、CNTF、TGF-β、GM-CSF、IL11、IL12、IL17、IL18、IL8以及化学引诱的炎性细胞的各种其他趋化因子。

在若干个实施例中，如在此所使用的促炎细胞因子的调节是指以下细胞因子：IL-1α、TNF-α、IL-6以及IL-17。在更具体的实施例中，本发明的方法可以导致促炎细胞因子水平的降低，确切地，导致IL-1α、TNF-α、IL-6以及IL-17中的至少一种的水平的降低。

在又一些另外的实施例中，本发明的方法可以用于调节细胞中的抗炎细胞因子的水平。抗炎细胞因子是控制促炎细胞因子应答并且与特异性细胞因子抑制剂和可溶解的细胞因子受体共同作用以下调炎性免疫应答的一系列免疫-调控分子。主要的抗炎细胞因子包括但不限于白细胞介素IL-1受体拮抗剂、IL-4、IL-10、IL-11以及IL-13。白血病抑制因子、干扰素-α以及转化生长因子TGF-β在不同情况下被归类为抗炎或促炎细胞因子。IL-1、TNF-α和IL-18的特异性细胞因子受体也用作促炎细胞因子的抑制剂。在一些具体实施例中，本发明的方法可以导致对IL-13、IL-10以及IL-4中的至少一种的水平的调节。

在又一些其他实施例中，本发明的方法可以导致细胞中至少一种抗炎细胞因子水平的升高，并且更确切地，导致IL-13、IL-10以及IL-4中的至少一种的水平的升高。

通过另外的实施例，本发明提供了用于调节受试者中的细胞因子水平的方法。更确切地，在一些实施例中，本发明的方法可以包括向所述受试者给予有效量的诺卡胺素与其至少一种金属的至少一种络合物和包含它们的任何组合物或任何媒介物、基质、纳米或微米颗粒的步骤。应当理解，在某些实施例中，此方法可以使用由本发明所述的任何络合物、其与其他金属-诺卡胺素络合物的任何组合或包含它们的任何组合物、确切地由本发明所述的那些。

因此，在又一些具体实施例中，本发明提供了用于调节受试者中的促炎细胞因子水平的方法。在另外的具体实施例中，本发明的方法可以降低受试者中的至少一种促炎细胞因子的水平。在更具体的实施例中，此类促炎细胞因子可以是IL-1α、IL-6、TNF-α以及IL-17中的至少一种。

此外，在一些具体实施例中，本发明提供了用于调节受试者中的抗炎细胞因子水平的方法。在更具体的实施例中，本发明的方法可以升高受试者中的至少一种抗炎细胞因子的水平。在更具体的实施例中，此类抗炎细胞因子可以是IL-13、IL-4以及IL-10中的至少一种。

降低促炎细胞因子的生物活性，或者可替代地或另外地，升高抗炎细胞因子的水平或活性可以降低由促炎细胞因子介导的疾病攻击的严重性。因此，降低IL-1α和TNF-α的生物活性可以通过若干种不同的但是高度特异性的策略实现，这些策略涉及中和抗体、可溶性受体、受体拮抗剂以及将失活前体转化为活性的成熟分子的蛋白酶的抑制剂。阻断IL-1α或TNF-α在患有银屑病、类风湿关节炎、炎症性肠病或移植物抗宿主疾病的患者中是非常成功的。

因此，在某些实施例中，本发明的方法可以特别适用于患有与促炎细胞因子水平的升高和抗炎细胞因子水平的降低至少一者相关联的病症或患有任何其他免疫介导或相关病症的受试者。

更确切地，本发明对于患有诸如以下病症的受试者是合适的：炎性的、感染性的、增殖性的、神经退行性的、缺血性的、代谢性的、脊髓损伤、创伤、自身免疫病症以及急性或慢性伤口或损伤。

应当注意，在一些实施例中，这些类的病症的共同特性可以是它们与促炎细胞因子(即，IL-1α、IL-6、TNF-α以及IL-17)和/或抗炎细胞因子(确切地IL-13、IL-10或IL-4中的任一种)的下述关系，当病症活跃时，促炎细胞因子升高，抗炎细胞因子降低，并且它们在特效治疗之后返回到基线水平。

如实例5所示，本发明的方法可以导致促炎细胞因子、确切地IL-1α、IL-6、TNF-α以及IL-17中的至少一种的水平的明显降低。根据一些实施例，其中指示“减少”或“降低”促炎细胞因子，例如IL-1α、IL-6、TNF-α以及IL-17中的任一种的表达或水平，意味着这样的降低或减少可以是此类细胞因子表达的约10％至100％之间的减少或抑制。如在此所使用的术语“减少”、“衰减”和“消除”涉及在大小、量、数量或强度上逐渐变小的行为。具体地，与适合的对照相比，表达降低10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。应当进一步注意，减少或降低还可以是减少约2至100倍。此外，应当理解，所述促炎细胞因子的水平或表达的减少可以是在所述细胞因子的转录、翻译或稳定性的方面上。关于以上所述，应当理解，在提供的情况下，百分比值诸如例如10％、50％、120％、500％等可分别与“倍数变化”值，即0.1、0.5、1.2、5等互换。

在一些实施例中，如在此所使用的白细胞介素-1α(IL-1α)，也称为促红细胞生成素-1，是人类中由IL1A基因编码的白细胞介素1家族的蛋白质。总体上，白细胞介素1负责产生炎症并且促进发烧和败血症。正在开发IL-1α抑制剂以阻断这些过程并治疗疾病。

Il-1α主要由活化的巨噬细胞以及嗜中性粒细胞、上皮细胞和内皮细胞产生。多种多样的其他细胞在刺激之后可以产生IL-1α的前体形式。在这些其他细胞之中的是成纤维细胞、巨噬细胞、粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞和嗜碱性粒细胞、内皮细胞、血小板、单核细胞和髓样细胞系、血液T淋巴细胞和B淋巴细胞、星形胶质细胞、肾小球系膜细胞、朗格汉斯细胞、表皮树突细胞、自然杀伤细胞、大颗粒淋巴细胞、小胶质细胞、嗜中性粒细胞、淋巴结细胞、母体胎盘细胞以及若干种其他细胞类型。IL-1α具有代谢、生理、造血活性，并且在免疫应答的调控中担任主要角色之一。它结合白细胞介素-1受体，并且因此启动使肿瘤坏死因子-α活化的途径。

此外，如在此所使用的白细胞介素-6(IL-6)是一种白细胞介素，其充当经典的促炎细胞因子。它是急性期应答的重要介体。它可以通过巨噬细胞、嗜中性粒细胞、脂肪细胞以及肌细胞响应于数种应激介体而分泌，从而刺激嗜中性粒细胞的进一步产生并且启动若干种细胞应激诱导的机制。IL-6刺激多种疾病中的炎性和自身免疫过程，这些疾病诸如银屑病、两种类型的糖尿病、类风湿关节炎、特异性皮炎、刺激性接触性皮炎以及败血症。

肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，也称为恶病质(cachexin)或恶病质素(cachectin)，是涉及全身性炎症的细胞因子。TNF-α是刺激急性期反应的细胞因子组的成员。它主要由活化的巨噬细胞产生，但是也可以由嗜中性粒细胞、肥大下细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞、内皮细胞、成纤维细胞以及自然杀伤细胞分泌。此细胞因子的主要功能(但不是唯一功能)是调控免疫细胞。在通过不同的应激相关刺激活化之后，它可以在数种细胞类型中使用若干种不同的机制诱导发烧、炎症和凋亡性细胞死亡。TNF-α浓度的增加牵涉到大量种类的炎性疾病。已证实，TNF-α浓度的局部增加将诱导典型的炎症体征：灼热、肿胀、发红、疼痛以及功能丧失。存在关于细胞因子诸如IL-1超家族、IL-6和TNF-α的串扰和相互活化的多次报道。

如在此所使用的白细胞介素17A(IL-17或IL-17A)，最初被鉴定为来自啮齿动物T细胞杂交瘤的转录物，它是被称为IL-17家族的细胞因子组的创始成员。在啮齿动物中被称为CTLA8的IL-17显示出与由T淋巴细胞疱疹病毒猴疱疹病毒(Herpesvirus saimiri)的开放阅读框编码的病毒IL-17具有高度同源性。白细胞介素17是一种细胞因子，其通过在不同组织中增加趋化因子产生以向炎症位点募集单核细胞和嗜中性粒细胞而在延迟型反应中充当强效介体，这类似于干扰素γ。IL-17由T辅助细胞产生并且由IL–23诱导，在延迟型反应中引起破坏性组织损伤。白细胞介素17用作对细胞外病原体对免疫系统的入侵作出应答并且诱导病原体细胞基质的破坏的促炎细胞因子。白细胞介素17与肿瘤坏死因子和白细胞介素-1协同作用。为了引发功能，IL-17结合被称为IL-17R的I型细胞表面受体，IL-17R具有至少三种变体，即IL17RA、IL17RB和IL17RC。

已经报道了细胞因子的IL-17家族的数种免疫调控功能，据推测是由于它们诱导许多种免疫信号传导分子。IL-17的最值得注意的作用是其涉及诱导并介导促炎应答。IL-17普遍地与过敏性应答相关联。IL-17诱导从许多细胞类型(成纤维细胞、内皮细胞、上皮细胞、角质化细胞、以及巨噬细胞)产生许多其他细胞因子(诸如IL-6、G-CSF、GM-CSF、IL-1β、TGF-β、TNF-α)、趋化因子(包括IL-8、GRO-α以及MCP-1)以及前列腺素(例如，PGE₂)。细胞因子的释放导致许多功能，诸如气道重塑，这是IL-17应答的一个特征。趋化因子表达增加引诱了其他细胞，包括嗜中性粒细胞，但是不包括嗜酸性粒细胞。IL-17功能对于被称为T辅助17(T_h17)细胞的CD4+T细胞亚群也是必要的。由于这些作用，已经将IL-17家族与许多免疫/自身免疫相关疾病联系起来，这些疾病包括类风湿关节炎、哮喘、狼疮、同种异体移植排斥、抗肿瘤免疫性以及最近的银屑病和多发性硬化症。值得注意是，在此家族中，IL-17F在体外和体内均被良好地表征，并且显示出在哮喘中具有促炎作用，并且其表达水平与疾病严重性相关性。因此，IL-17F可以在过敏性气道炎症中具有关键作用，并且在哮喘中具有重要的治疗性意义。由于其涉及免疫调控功能，IL-17抑制剂作为用于自身免疫性疾病诸如类风湿关节炎、银屑病和炎症性肠病的可能性治疗而正在被研究。

最近，已经开发了用于炎性病症的新的治疗，其中至少一个原理是降低促炎细胞因子的水平。例如，由于已知TNF-α促进炎症应答，已经开发了单克隆抗体来抑制此细胞因子，以便治疗与炎症相关联的疾病，诸如银屑病、类风湿关节炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病以及强直性脊柱炎。另一种TNF-α抑制剂即循环受体融合蛋白已经用于治疗银屑病、类风湿关节炎以及强直性脊柱炎。

降低IL-1和TNF的生物活性通过若干种不同的但是高度特异性的策略实现，这些策略涉及中和抗体、可溶性受体、受体拮抗剂以及将失活前体转化为活性的成熟分子的蛋白酶的抑制剂。阻断IL-1或TNF已经证明对患有类风湿关节炎、炎症性肠病或移植物抗宿主疾病的患者是非常成功的治疗。同样，使用IL-17的抑制剂也是用于治疗与炎症相关联的其他病症的策略。基于来自动物模型的新出现的证据，提出了IL-17作为用于抗炎疗法的靶标，以便改善中风后恢复并减少皮肤癌的形成。IL-17也牵涉到多发性硬化症。IL-17A、IL-17F和IL-17A/F-受体抑制剂：布罗达单抗(brodalumab)、艾克司单抗(ixekizumab)和苏金单抗(secukinumab)最近接收到用于治疗银屑病的批准。因此，本发明所披露的金属-DFO E络合物、组合物、试剂盒以及方法提供了用于治疗和预防与促炎细胞因子水平的升高相关联的任何病症、确切地上文所提及的病症的新型工具。

此外，如实例6中所示，本发明的方法可以导致抗炎细胞因子，确切地IL-13、IL-10以及IL-4中的至少一种的水平的增加。根据一些实施例，其中指示“增加”或“增强”抗炎细胞因子例如IL-13、IL-10以及IL-4中的任一种、特别是IL-13水平的表达，意味着这样的增加或增强可以是此类细胞因子的表达的约10％至100％之间的增加或升高。如在此所使用的术语“增加”、“增大”和“增强”涉及在大小、量、数量或强度上逐渐变大的行为。具体地，与合适的对照相比，表达增加10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。应当进一步注意，增加或升高还可以是增加约2至100倍。此外，应当理解，所述IL-13细胞因子水平或表达的增加可以是在所述细胞因子的转录、翻译或稳定性的方面上。关于以上所述，应当理解，在提供的情况下，百分比值诸如例如10％、50％、120％、500％等可分别与“倍数变化”值，即0.1、0.5、1.2、5等互换。

如在此所使用的白细胞介素-13(IL-13)是抗炎细胞因子的实例。IL-13由许多细胞类型分泌，但是尤其是由T辅助2型(Th2)细胞分泌。若干个出版物将其描述为过敏性“炎症”和疾病的介体，而在另一方面，它还被描述为起到强效抗炎作用的介体。另外，IL-13显示出诱导肠中的多个变化，这些变化产生对寄生虫(蠕虫)不利的环境，最终导致寄生生物从肠壁的脱离以及其移除。

白细胞介素-10(IL-10)是存在于人类免疫应答中的主要抗炎细胞因子。它是Th1细胞因子的强效抑制剂，包括IL-2和IFN-γ两者。此活性解释了其细胞因子合成抑制因子的初始名称。除了作为Th2淋巴细胞细胞因子的活性之外，IL-10还是单核细胞/巨噬细胞促炎细胞因子合成的强效减活化剂。在接合其高亲和力110-kd细胞受体之后，IL-10抑制单核细胞/巨噬细胞衍生的TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8、IL-12、粒细胞集落刺激因子、MIP-1a以及MIP-2a。

由本发明在实例5和实例6(确切地是图2-图7)中呈现的结果清楚地证实锌-诺卡胺素络合物减少炎症相关皮炎的鼠类模型中的炎症体征的治疗性潜力。因此，本发明的药物组合物可以特别适于治疗与炎症相关联的病症。

基于特异性抗炎治疗的可用性不足以及对促炎细胞因子在若干类病症的发病机理中作用的认识，期望开发新的抗炎治疗。因此，当前需要本发明在疗法中被采用。

因此，本发明的另一个方面涉及一种治疗、预防、抑制、减少、消除、防止或延迟有需要的受试者中的病理学病状或病症的发作的方法。在一些具体实施例中，该方法包括向所治疗的受试者给予治疗有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物或其与其他金属-诺卡胺素络合物的任何组合，或包含它们的任何药物组合物、载体、基质或媒介物。在一些具体实施例中，这些病症和/或疾病的特征可以是当不稳定性铁或铜被螯合时，并且更确切地，当与这些病症相关联的促炎细胞因子减少(下调)时和/或当与这些病症相关联的抗炎细胞因子升高(上调)时，具有临床有益效果。在更具体的实施例中，本发明提供了一种用于通过向有需要的所述受试者给予治疗有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物、包含该至少一种络合物的载体、基质或媒介物来治疗、预防、减少、衰减、抑制和消除与升高的促炎细胞因子相关联的病症。

在一些实施例中，由本发明的方法所使用的络合物的金属可以选自由镧系元素、锕系元素、后过渡金属或过渡金属组成的组。

在另一个实施例中，由本发明的方法所使用的络合物的金属可以选自由锌、镓、铝、银、金、钴、钼、钒或其任何离子形式组成的组。

在另外的实施例中，由本发明的方法所使用的络合物的金属离子可以选自由Zn²⁺、Ga³⁺、Al³⁺、Ag⁺以及Au³⁺、Co³⁺、钒和钼组成的组。

在又一具体实施例中，由本发明的方法所使用的络合物的金属离子可以是Zn²⁺。在一些实施例中，本发明的方法可以使用如上文所述的诺卡胺素与Zn²⁺的至少一种络合物。

在可替代的具体实施例中，由本发明的方法所使用的络合物的金属离子可以是Ga³⁺。

在一些另外的实施例中，本发明的方法可以使用诺卡胺素与Ga³⁺的至少一种络合物。

如在此前所披露，根据具体实施例，本发明提供治疗、预防、抑制、减少、消除、防止或延迟疾病或病理学病状或病症的发作的方法，其中所述病症与促炎细胞因子水平的升高和抗炎细胞因子水平的降低中的至少一者相关联。确切地，促炎细胞因子可以是IL-1α、TNF-α、IL-6以及IL-17中的至少一种。在一些另外的实施例中，抗炎细胞因子可以是IL-13、IL-10以及IL-4中的至少一种。

如上所指出，在一些实施例中，本发明涉及一种治疗、预防、抑制、减少、消除、防止或延迟疾病或病症的发作的方法，该疾病或病症与促炎细胞因子水平的升高和抗炎细胞因子水平的降低中的至少一者相关联。在更具体的实施例中，该病症可以是炎性的、感染性的、增殖性的、神经退行性的、缺血性的、代谢性的脊髓损伤、创伤、自身免疫病症以及急性或慢性伤口或损伤。

在具体实施例中，本发明提供了用于治疗有需要的受试者中的炎性病症的方法，这些方法包括向所述受试者给予治疗有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物、包含该至少一种络合物的载体、基质或媒介物的步骤，其中炎性病症涉及选自以下各项的任何病症/疾病、病状：炎性皮肤病症、炎症性肠病(IBD)，确切地溃疡性结肠炎和克罗恩病、关节炎以及炎性呼吸道病症，确切地哮喘。

通用术语“炎性病症”涉及其中炎症是对有害刺激，诸如病原体、受损细胞或刺激物的主要应答的病症。炎症是涉及免疫细胞、血管和分子介体的保护性应答以及长期氧化应激的最终结果。

“炎性病症”是构成各种各样的人类疾病的基础的一大类病症。另外，免疫系统可以涉及炎性病症，其源于生物体针对其自身的物质的异常免疫应答，或由于未知原因而引发的炎性过程，即分别是自身免疫性病症和自身炎性病症。在炎性过程中具有病因学源的非免疫性疾病包括癌症、动脉硬化、以及缺血性心脏病。

炎症的目的是消除细胞损伤的初始原因、清除坏死细胞和组织，并且启动组织修复。急性炎症的典型生理体征是疼痛、灼热、发红、肿胀以及功能丧失。一系列的生化事件传播炎症应答并使炎症应答成熟，涉及了局部血管系统、免疫系统以及损伤组织内的不同细胞。称为“慢性炎症”的长期炎症导致存在于炎症位点处的细胞类型的渐进性迁移，并且其特征在于来自炎性过程的组织的同时损坏和愈合。炎症还诱导高全身性水平的命名为促炎细胞因子的特异性细胞因子，这些细胞因子包括IL-1α、IL-6、IL-8、IFN-γ、TNF-α、IL-17以及IL-18。炎症应答必须在不再需要时被有效地终止，以便防止对组织的不必要的“附带(bystander)”损伤。如果未能这样做，会引起慢性炎症和细胞破坏。炎症消退在不同的组织中通过不同的机制发生。急性炎症通常通过在一定程度上还未知的机制消退。现在新出现的证据表明在炎症应答开始之后，在前几个小时内消退的有效协调程序启动。在进入组织之后，粒细胞促进花生四烯酸衍生的前列腺素和白三烯转换为脂氧素，该脂氧素启动终止序列。因此嗜中性粒细胞募集停止，并且通过细胞凋亡进行的程序性死亡(程序性细胞死亡)开始。这些事件与由ω-3多不饱和脂肪酸的对消退素(resolvin)和保护素(protectin)生物合成一致，该消退素和该保护素通过启动细胞凋亡来极度缩短嗜中性粒细胞浸润期。因此，细胞凋亡的嗜中性粒细胞经历由巨噬细胞进行的吞噬，从而导致嗜中性粒细胞的清除以及抗炎和修复细胞因子诸如转化生长因子-β1的释放。抗炎程序以巨噬细胞通过淋巴管的离开结束。

如在此所使用的术语“与炎症相关联的病理学病状”涉及以下中的至少一种但不限于以下各项：关节炎(强直性脊柱炎、系统性红斑狼疮、骨关节炎、类风湿关节炎、银屑病关节炎)、哮喘、动脉粥样硬化、炎症性肠病(克罗恩病、溃疡性结肠炎)、皮炎(包括银屑病)。

如实例(确切地图2-图6)所示，使用ICD模型的本发明的锌-诺卡胺素络合物的应用显示炎症的明显减少。此外，本发明的锌-诺卡胺素络合物的此抗炎作用伴随促炎细胞因子IL-1α、TNF-α、IL-6以及IL-17的显著减少(图6)。因此，本发明的锌-诺卡胺素络合物降低促炎细胞因子水平以及消除炎症的能力为其抗炎特性提供了实质性证据。与这些结果相符，如图7所证实，在使用本发明的锌-诺卡胺素络合物处理之后，观察到抗炎细胞因子IL-13增加。综合而言，可以得出结论，本发明的金属-诺卡胺素络合物可以用作用于其中炎症是基本机制的病症的合适治疗。

如上所指出的，使用具有炎症(ICD)的鼠类模型，以下实例(确切地图2-图6)清楚地证实了本发明的络合物以及其组合物、方法和试剂盒对于治疗急性和慢性炎性皮肤病症的适用性。因此，在一些实施例中，如在本发明中详细描述的治疗方法可以适于治疗炎性病症诸如慢性或急性炎性皮肤病症。

慢性或急性炎性皮肤病理学病状包括皮炎、炎性皮肤损伤、炎性相关的皮肤色素沉着紊乱，例如白癜风和湿疹。更确切地，本发明的某些实施例涉及使用本发明的络合物，以及其组合物、方法和试剂盒以用于治疗皮炎的用途。术语“皮炎”通常是指皮肤的炎症。不同的种类通常对于特定的过敏原具有共同的过敏反应。该术语可以用于是指湿疹，其还被称为皮炎湿疹或湿疹性皮炎。湿疹的诊断经常暗示特异性皮炎(儿童湿疹)，但是在没有适当环境的情况下，它不过是意指“皮疹(rash)”，即短暂性皮肤炎症。在一些语言中，“皮炎”和湿疹是同义词，而在其他语言中，“皮炎”暗示急性病状并且“湿疹”暗示慢性病状。两种病状经常被分类在一起。在一些具体实施例中，本发明的方法、络合物和组合物可以适用于任何类型的皮炎，确切地特异性皮炎、接触性皮炎、脂溢性皮炎(seborrhoeic dermatitis)或皮脂溢性皮炎(seborrheic dermatitis)以及干性湿疹。更确切地，如在此所使用，特异性皮炎是被认为具有遗传组分并且经常发生在其成员还患有哮喘的家族中的过敏性疾病。发痒性皮疹在头部以及头部和头皮、脖子、肘内部、膝盖后、以及臀部是特别显著的。它在发达国家是非常普遍的，并且正在上升。刺激性接触性皮炎有时被误诊为特异性皮炎。此外，如在此所使用的接触性皮炎具有两种类型：过敏性(产生自对过敏原，诸如毒常春藤、镍或秘鲁香脂的延迟反应)和刺激性(产生自对洗涤剂，诸如例如月桂基硫酸钠的直接反应)。如在此所使用的干性湿疹(亦称皮脂缺乏性湿疹(asteatotic e.)、裂隙性湿疹(e.craquele或craquelatum)、冬季瘙痒、冬季瘙痒病)是由于太严重而变成湿疹的干性皮肤。它在干燥的冬季天气中恶化，并且最经常影响的是四肢以及躯干。瘙痒、一触就痛的皮肤类似于干燥、龟裂的河床。最后，本发明的方法可以用于治疗脂溢性皮炎或皮脂溢性皮炎(婴儿中为“乳痂”)，如在此所使用的该脂溢性皮炎或皮脂溢性皮炎是有时被分类为与头皮屑紧密相关的湿疹形式的病状。它导致头皮、眉毛和脸以及有时躯干的干性或油腻性剥皮。该病状是无害的，除了在严重的乳痂情况下。在新生儿中，它导致称为乳痂的厚的、黄色的、硬性的头皮皮疹，其似乎与缺乏生物素相关并且经常是可治愈的。应当理解，本发明的方法可以适用于在此所披露的任何形式的皮炎。

应当理解，基于其抗炎性质，本发明的络合物和组合物可以适用于治疗另一种炎性皮肤病症、确切地银屑病。

银屑病也是由促炎和抗炎细胞因子介导的炎性病症。虽然银屑病的准确病因和发病机理是未知的，但是已证实银屑病中的促炎1型(Th1)细胞因子的过表达，并且该过表达被认为具有病理生理重要性。重要的是，证实了与其他炎性皮肤病相比，皮肤IL-10mRNA表达相对不足。此外，先前的出版物证实在建立的抗银屑病疗法过程中的患者展示出比疗法之前的患者更高的外周血单核细胞的IL-10mRNA表达。这表明IL-10可能具有抗银屑病能力。实际上，在患者中观察到IL-10皮下给予产生的免疫抑制作用(单核细胞HLA-DR表达、TNF-α和IL-12分泌能力、IL-12血浆水平以及回忆抗原的响应性减弱)以及向2型(Th2)细胞因子模式的转变(IL-4、IL-5和IL-10产生T细胞的比例增加、IgE血清水平的选择性增加)。更确切地，银屑病是特征为伴有鳞屑脱落的皮肤炎症的斑状、突起、红色区域的普遍皮肤病状。银屑病经常影响肘尖和膝盖、头皮、肚脐以及生殖器或肛门周围的区域。银屑病在免疫系统发出加速皮肤细胞的生长周期的错误信号时发生。普遍地由银屑病导致的鳞状斑块被称为银屑病斑，它们是炎症和过量皮肤产生的区域。皮肤在这些位点快速累积，这使其出现银白色外观。斑块时常发生在肘部和膝盖的皮肤上，但是可以影响包括头皮、手心和脚底以及生殖器的任何区域。与湿疹相比，银屑病更可能存在于关节的外侧上。该病症是严重性从小局部斑块变化到完全身体覆盖的慢性复发性病状。指甲和趾甲时常受到影响(银屑病指甲营养不良)并且可以被看作是独立的症状。银屑病还可以导致关节炎症，其被称为银屑病关节炎。百分之十至百分之十五的具有银屑病的人患有银屑病关节炎，其具有慢性复发性性质。银屑病的症状可以各种形式表现。变型包括斑块、脓疱、滴状和屈侧银屑病。银屑病可以被分类为非脓疱和脓疱类型。

非脓疱型银屑病包括寻常型银屑病和银屑病性红皮病。寻常型银屑病(也被称为慢性稳定行银屑病或斑块类银屑病)是银屑病的最普遍形式。它影响80％至90％的患有银屑病的人。斑块状银屑病典型地显现为发炎皮肤的覆盖有银白色鳞状皮肤的突起区域。这些区域被称为斑块。

银屑病性红皮病(红皮病型银屑病)涉及广布的炎症和大部分身体表面上的皮肤剥落。它可能伴随严重的瘙痒、肿胀和疼痛。它经常是不稳定的斑块状银屑病恶化的结果，特别是在突然撤销全身性治疗之后。此形式的银屑病可能是致命的，因为极端炎症和剥落扰乱人体调控温度的能力并且扰乱皮肤执行屏障功能的能力。

在又一具体实施例中，本发明的方法可以用于治疗脓疱型银屑病。脓疱型银屑病显现为填充有非感染性脓(脓疱)的突起块。在脓疱下方和周围的皮肤是红色的且是一触就痛的。脓疱型银屑病可以是普遍地局限在手部和脚部(掌跖脓疱病)，或者泛化为具有随机发生在身体的任何部分上的广布的斑块。脓疱型银屑病亚型包括泛化脓疱型银屑病(冯宗布什(von Zumbusch)的脓疱型银屑病)、掌跖脓疱病(持续性掌跖脓疱病、巴伯类型的脓包型银屑病、肢末端的脓包型银屑病)、环形脓疱型银屑病、连续性肢末端皮炎以及疱疹样脓疱病。

应当理解，本发明的方法还可以适用于治疗任何其他类型的银屑病，例如药物诱导的银屑病、皮褶性银屑病或屈侧银屑病。后者显现为在皮肤褶中，特别是在生殖器(在大腿与腹股沟之间)、腋窝附近、肥胖的腹部下(血管翳)以及在乳房下(乳房下皱襞)的皮肤的光滑发炎斑块。它因摩擦和汗液而加重，并且易受到真菌感染。

此外，本发明的方法可以用于治疗滴状银屑病。此类型的银屑病的特征在于大量小的、鳞状、红色或粉色、泪滴状的病灶。银屑病的这些大量的斑点出现在大的身体区域上，主要在躯干上，但是也在四肢和头皮上。滴状银屑病经常继链球菌感染，典型地在链球菌性咽炎之后发生。

也可以通过本发明的方法治疗的指甲银屑病产生手指甲和脚趾甲外观的各种变化。这些变化包括指甲板下的褪色、指甲的点状凹陷、穿过指甲的线、指甲下的皮肤增厚以及指甲的松动(甲松离)和破裂。

在又一实施例中，本发明的方法可以用于治疗银屑病关节炎。银屑病关节炎涉及关节和结缔组织炎症。银屑病关节炎可以影响任何关节，但是最普遍地在手指和脚趾的关节中。这可以引起手指和脚趾的香肠状肿胀，被称为指炎。银屑病关节炎还可以影响臀部、膝盖和脊柱(脊柱炎)。约10％-15％的患有银屑病的人也患有银屑病关节炎。

在一些实施例中，患有银屑病的受试者的治疗可以改善受试者的病理学状态，例如使由于疾病而粗糙的皮肤光滑。在优选的实施例中，这样的病理学改善可以通过局部施加本发明的金属-络合物来实现，该络合物不刺激皮肤并且不促进炎症。

应当理解，本发明的络合物以及其组合物和方法可以适用于治疗银屑病，以及包括银屑病关节炎的银屑病的皮肤学之外的特征。

痤疮是可以通过本发明的方法治疗的皮肤炎性病症的另一个非限制性实例。痤疮是用于皮肤的发疹性疾病的通用术语。它有时用作寻常型痤疮的同义词。然而，存在多种不同类型的痤疮。这些类型包括寻常型痤疮、聚合性痤疮、粟粒性坏死性痤疮、热带痤疮、幼儿痤疮/新生儿痤疮、剥脱性痤疮、暴发性痤疮、药物诱导型痤疮/药物性痤疮(类固醇痤疮)、卤素痤疮(碘疹、溴疹、氯唑疮)、油性痤疮、焦油痤疮、化妆性痤疮、职业性痤疮、夏季痤疮、项部瘢痕疙瘩性痤疮、机械性痤疮、具有面部浮肿的痤疮、发膏性痤疮、坏死性痤疮、黑头粉刺以及面部播散性粟粒性狼疮。

可以通过本发明的方法治疗的炎症相关的皮肤病症还可以包括昆虫叮咬和螫刺。在螫刺期间，昆虫注射甲酸和/或毒素。这些可以导致即时皮肤反应，经常引起损伤区域的发红和肿胀。来自膜翅目的螫刺通常是疼痛的，并且可能在处于危险中的患者中刺激被称为过敏症的威胁生命的全身性过敏反应。全身性过敏螫刺反应经常引起单独的或与可能累及的其他较不普遍的靶标组织的任何组合的形式的皮肤、血管或呼吸道症状和体征。心脏过敏症还可以导致心搏徐缓、心律失常、心绞痛或心肌梗塞。来自蚊子、跳蚤和螨虫的叮咬更可能导致瘙痒而不是疼痛。对于昆虫叮咬和螫刺的皮肤反应通常持续多达几天。然而，在一些情况下，局部反应可以持续多达两年。对于叮咬的反应具有三种类型。正常反应累及叮咬周围的区域，伴随着发红、瘙痒和疼痛。较大局部反应在肿胀区域大于5cm(直径)时发生。全身性反应是症状发生在叮咬区域以外的区域时的情况。

在又一实施例中，本发明的方法可以适用于治疗白癜风。如在此所使用的白癜风是引起皮肤斑块的色素脱失的慢性病症。它在黑素细胞死亡或不能发挥功能时发生。白癜风的病因是未知的，但是研究表明此病可能由自身免疫、遗传、氧化应激、神经或病毒原因产生。世界范围内的发病率小于1％，其中最普遍的形式是非节段型白癜风。症状通常在10岁与30岁之间开始，包括头发发白或发灰、口腔内皮肤颜色丧失以及眼睛颜色丧失。白癜风最显著的症状是发生在肢末端上的皮肤斑块的色素脱失。在非节段型白癜风(NSV)中，在色素脱失皮肤斑块位置中通常存在某种形式的对称性。新的斑块也会随时间出现并且可以泛化到身体的大部分或局限在特定区域。残留很少色素沉着皮肤的白癜风被称为泛发型白癜风(vitiligo universalis)。与在青少年中远远更流行的节段型白癜风不同，NSV可以发生在任何年龄。非节段型白癜风的分类包括泛化白癜风、泛发型白癜风、局灶型白癜风、肢端性白癜风以及粘膜型白癜风。节段型白癜风(SV)在外观、病因以及发病率方面与相关联疾病不同。它的治疗不同于NSV的治疗。节段型白癜风倾向于影响与脊柱背根相关联的皮肤区域。节段型白癜风比NSV蔓延迅速得多，并且在不经治疗的情况下，它在病程中稳定/静止得多并且与自身免疫性疾病不相关，是响应于局部治疗的可治疗病状。

应当理解，本发明的金属-诺卡胺素络合物、由本发明所述的组合物、络合物、试剂盒以及方法可以适用于任何形式的炎性皮肤病症、确切地在此所披露的任何形式的皮炎或银屑病。

此外，应当理解，在某些实施例中，本发明的方法可以适用于治疗急性或慢性伤口。在又一些另外的实施例中，本发明的方法可以适用于治疗由化学或热烧伤以及由机械击打/锤击导致的急性或慢性损伤。由此，本发明提供了用于伤口愈合的方法。

如在此所使用的术语伤口是发生相对较快的一种损伤类型，其中皮肤被撕裂、割伤或刺破(开放性伤口)，或者其中钝力创伤导致挫伤(闭合性伤口)。在病理学中，它确切地是指使皮肤的真皮受损的锐器损伤。伤口可以进一步分类为贯通的和非贯通的。贯通伤口由穿过皮肤的整个厚度的创伤产生；向下到达下面的组织和器官。非贯通伤口通常是钝器创伤或与其他表面摩擦的结果，并且这种伤口未穿透皮肤。杂项的伤口可以包括但不限于：热伤口：热的或冷的极端温度，可以引起热损伤(像烧伤、晒伤和冻疮)。热烧伤是由与受热物体，诸如开水、蒸汽、热烹饪油、火以及热物体进行接触引起的烧伤类型。烫伤是儿童所遭受的热烧伤的最普遍的类型，而对于成人而言，热烧伤最普遍地由火导致。烧伤总体上根据第一程度至第四程度的严重性分类，但是美国烧伤协会(ABA)几乎仅基于烧伤的深度和大小，将热烧伤归类为轻度、中度以及重度。化学伤口：这些伤口由与接触或吸入导致皮肤或肺部损伤的化学材料而产生。化学烧伤在活组织暴露于腐蚀性物质诸如强酸或强碱时发生。化学烧伤遵循标准烧伤分类并且可以导致广泛的组织损伤。刺激物和/或腐蚀性产品的主要类型是：酸、碱、氧化物/还原剂、溶剂以及烷基化物(alkylant)。另外，化学烧伤可以由一些类型的化学武器导致，例如，起疱剂诸如芥子气和路易氏剂(Lewisite)、或致痒素诸如光气肟。叮咬和螫刺：叮咬可以来自人类、狗、蝙蝠、啮齿动物、蛇、蝎、蜘蛛以及蜱。电伤口：这些伤口通常以后继于高压电流穿过身体的表面烧伤类或螫刺类伤口呈现，并且可以包括更严重的内部损伤。

根据伤口的愈合时间，它可以分类为急性或慢性。分类为急性伤口的那些伤口在预测量的时间内平静地愈合(没有并发症)。分类为慢性伤口的那些伤口花费更长的时间愈合并且可能具有一些并发症。促成非愈合的慢性伤口的因素是糖尿病、静脉或动脉疾病、感染以及老年人的代谢不足。

糖尿病足的非愈合伤口被认为是糖尿病的最显著并发症之一，代表了极大地影响患者生活质量的世界范围内主要的医学、社会和经济负担。与循环不足、静脉功能不良以及不动性相关联，非愈合伤口最时常地发生在老年人和患有糖尿病的人-随着国民年龄和慢性疾病增加而急剧上升的群体中。

虽然糖尿病可以许多方式伤害身体，但是在脚部和小腿上的非愈合溃疡是该疾病的常见外在表现。同样，糖尿病患者经常遭受他们脚部和腿部的神经损伤，从而使得小伤口或刺激在不知情的情况下发展。鉴于微脉管系统的异常以及糖尿病的其他副作用，这些伤口花费长时间愈合并且需要专门的治疗途径以便彻底愈合。

压力性溃疡，也被称为压疮、褥疮和褥疮性溃疡，是通常由于压力或压力与剪切力和/或摩擦的组合而在骨突出部上发生的对皮肤和/或下面的组织的局部损伤。最常见的位点是覆盖骶骨、尾骨、脚后跟或臀部的皮肤，但是其他位点诸如肘部、膝盖、脚踝或颅的后部可能受到影响。

压力性溃疡由于施加到软组织的压力而发生，从而使得向软组织的血液流动被完全或部分阻塞。剪切力也是一个原因，因为它可以拉紧供给皮肤的血管。压力性溃疡最普遍地在不四处走动的个体，诸如卧床不起的或约束于轮椅的个体中出现。广泛地认为其他因素可以影响皮肤对于压力和剪切力的耐受性，从而增加压力性溃疡发展的风险。这些因素是蛋白质-卡路里不足性营养不良、微气候(由出汗或失禁导致的皮肤湿润)、减少向皮肤的血液流动的疾病诸如动脉硬化或降低皮肤的感觉的疾病诸如麻痹或神经病变。压力性溃疡的愈合可能由于个人的年龄、医学病状(诸如动脉硬化、糖尿病或感染)、吸烟或药品诸如抗炎药物而减慢。

如上所指出的，在一些实施例中，本发明进一步提供了用于伤口愈合的方法。伤口愈合是皮肤或其他身体组织自身修复或在损伤之后被修复的复杂过程。在正常皮肤中，表皮(表面层)和真皮(更深层)形成针对外部环境的保护性屏障。当屏障被打破时，协调的生化事件级联快速开始行动来修复损伤。此过程被分成可预测的阶段：凝血(止血)、发炎、新组织生长(增殖)以及组织重塑(成熟)。

不应当忽略的是，本发明的组合物，特别是当用于治疗炎性皮肤病症时，作为局部施加的组合物可以是可接受的。具体实施例考虑了通过对受影响的皮肤区域局部给予以下各项进行的皮肤炎性病状、确切地银屑病治疗：软膏、乳膏、悬浮液、糊剂、洗剂、粉末、溶液、油、胶囊化的凝胶、含有络合物的脂质体、含有本发明的络合物的任何纳米颗粒或含有这些络合物的组合的可喷雾气溶胶或蒸汽。常规的药物载体、水性基质、粉末基质或油性基质、增稠剂等可能是需要的或希望的。术语“局部施加的”或“局部给予的”意指软膏、乳膏、软化剂、香膏、洗剂、溶液、药膏、油膏或任何其他药物形式被施加到患者皮肤的受到或已经受到银屑病或其他皮肤病变的一种或多种症状影响或者显示出或已经显示出该一种或多种症状的皮肤的一些或全部部分。

以此类推，本发明的金属-诺卡胺素络合物或其任何药物组合物以及本发明的方法可以适用于预防、治疗、改善或抑制另一种炎症/免疫介导病症，例如炎症性肠病(IBD)、确切地溃疡性结肠炎和克罗恩病。

炎症性肠病(IBD)是普遍的肠胃病症，它可以被认为是免疫应答的Th1-促炎亚型与Th-2抗炎亚类型之间的平衡紊乱的结果。IBD是结肠和小肠的炎性病状组。主要类型的IBD是克罗恩病和溃疡性结肠炎(UC)。其他形式的IBD所占的情况远远更少。这些情况是胶原性结肠炎、淋巴细胞结肠炎、缺血性结肠炎、改道性结肠炎以及未确定型结肠炎，在这些情况下不可能进行将克罗恩病与溃疡性结肠炎区分开的确定性诊断。

克罗恩病与UC之间的主要差异是炎性变化的位置和性质。克罗恩病可以影响从口腔到肛门的胃肠道的任何部分(跳跃性病变)，但是大部分情况在回肠末端中开始。相比之下，溃疡性结肠炎局限于结肠和直肠。在显微镜下，溃疡性结肠炎局限于粘膜(肠的上皮层)，而克罗恩病影响整个肠壁。最后，克罗恩病和溃疡性结肠炎与不同比例的肠外表现(诸如肝脏问题、关节炎、皮肤表现以及眼睛问题)一起出现。克罗恩病和溃疡性结肠炎具有相同的症状，诸如腹泻、呕吐、体重减轻、发烧以及腹痛。

最近的假设断定IBD的可能起因是：由于缺少传统靶标诸如寄生虫和蠕虫，过度活跃的免疫系统攻击消化道的不同组织。随着寄生虫诸如蛔虫、钩虫和人类鞭虫感染的数量下降，被诊断患有IBD的人的数量已经增加，并且该病状在寄生虫感染普遍的国家中仍然是少见的。

存在若干种伴随IBD的肠外表现，例如：自身免疫现象，其中免疫络合物在靶器官损伤中起作用。患有IBD的患者具有针对结肠细胞的组分和若干种不同的细菌性抗原的抗体。这些抗原由于上皮损伤而获得进入免疫系统的机会。T细胞介导的免疫性的异常，诸如减弱的对T细胞刺激的应答性，也在这些患者中有所描述。此外，鉴定出粘膜细胞介导的免疫性的变化，包括粘膜IgG细胞浓度的增加和T细胞亚群的变化，表明了抗原刺激。靶抗原在感染、免疫或毒性损伤之后的暴露导致粘膜免疫细胞的活化，从而产生导致粘膜炎症性应答的细胞因子。促炎细胞因子诸如IFN-γ的分泌有助于增加粘膜通透性，并且已在IBD的动物模型中有所描述。

与许多其他慢性炎性疾病相同，克罗恩病可以导致各种全身性症状。在儿童中，生长不足是普遍的。基于不能保持生长，许多儿童首先被诊断患有克罗恩病(儿科克罗恩病)。除累及全身和肠胃之外，克罗恩病可以影响许多其他器官系统。被称为葡萄膜炎的眼睛内部部分的炎症可以导致眼痛，尤其是当暴露于光时(畏光)。炎症还可以累及眼睛的白色部分(巩膜)，一种被称为巩膜外层炎的病状。如果不进行治疗，巩膜外层炎和葡萄膜炎两者均可以导致失明。

克罗恩病与被称为血清阴性脊柱关节病的风湿性疾病类型相关联。此类疾病的特征在于一个或多个关节炎症(关节炎)或肌肉附着点的炎症(起止点炎)。关节炎可以影响较大关节诸如膝盖或肩膀，或者可以排他地累及手部和脚部的小关节。关节炎还可以累及脊柱，从而导致强直性脊柱炎(如果整个脊柱受累下)或者只是骶髂关节炎(如果仅下部脊柱受累)。关节炎的症状包括关节疼痛、发热、肿胀、强硬以及关节可动性或功能丧失。

结肠镜检查是用于诊断克罗恩病的最好的检测，因为它允许对结肠和回肠末端的直接可视化，从而鉴定出疾病累及的模式。发现累及结肠或回肠但不累及直肠的疾病的斑状分布表明有克罗恩病。

当前没有针对克罗恩病的疗法，并且缓解可能是不可能的或者如果实现也不会长久。针对克罗恩病的治疗仅在该疾病是活跃的情况下才需要，并且首先涉及治疗急性问题，然后维持缓解。

溃疡性结肠炎是胃肠道的内层的另一种慢性炎症。溃疡性结肠炎在美国发生于35-100人/100,000人中，或小于人口的0.1％中。该疾病在世界的北方国家，以及在个别国家或其他区域的北方地区更加流行。溃疡性结肠炎在北美的发生率是10-12个新病例/100,000人/年，其中溃疡性结肠炎的峰值发生率出现在15与25岁之间。发病率是1/1000。认为存在发作年龄的双峰分布，其中发作率的第二峰出现在生命的第6个十年中。该疾病影响女性多于男性。溃疡性结肠炎和克罗恩病的地理分布在世界范围内是类似的，其中最高的发生率在美国、加拿大、英国以及斯堪的纳维亚。在欧洲和美国，与南方位置相比，在北方位置中看到更高的发生率。

与克罗恩病一样，溃疡性结肠炎的发病率在德系犹太人中更高，并且在犹太血统的其他类群、非犹太白种人、非洲人、西班牙人以及亚洲人中逐渐降低。

溃疡性结肠炎的临床表现取决于疾病过程的程度。患者通常表现出逐渐发作的混有血液和粘液的腹泻。他们还可能具有体重减轻和直肠检查上有血液的体征。该疾病通常伴随不同程度的腹痛，从轻微不适到严重疼痛的绞痛。

溃疡性结肠炎通常限于结肠(大肠)，其中直肠几乎普遍地被累及。受影响的结肠的内层变得发炎，并且特征在于开放性疮或溃疡，其出血并且产生脓液。结肠中的炎症还导致结肠时常是空的，从而导致混有血液的腹泻。溃疡性结肠炎是间歇性疾病，具有症状恶化的时期和相对无症状的时期。虽然溃疡性结肠炎的症状有时可以自动减弱，但是该疾病通常需要治疗以便进入缓解期。

溃疡性结肠炎与影响身体的许多部分的一般炎性过程相关联。有时这些相关联的肠外症状是该疾病的初始体征，诸如青少年的疼痛的、关节炎的膝盖。然而，该疾病的存在直至发作肠表现才能被确认。

诊断患有溃疡性结肠炎的人中约一半具有温和症状。其他人遭受频繁发烧、带血腹泻、恶心以及严重的腹部绞痛。溃疡性结肠炎还可以导致以下问题，诸如关节炎(血清阴性关节炎、强直性脊柱炎、骶髂关节炎)、眼睛炎症(虹膜炎、葡萄膜炎、巩膜外层炎)、肝脏疾病以及骨质疏松症。这些并发症可能是由免疫系统触发的炎症的结果，因为患有溃疡性结肠炎的人具有免疫系统的异常。

根据一些实施例，本发明的方法可以特别适用于防止、治疗、改善或抑制炎性关节炎。

对于关节炎，以举例的方式，相关的病状可以包括所有类型的原发性炎性关节炎，例如类风湿关节炎、银屑病关节炎、强直性脊柱炎(先前被称为别赫捷列夫氏病(Bechterew's disease)或别赫捷列夫综合征)、幼年特发性关节炎(JIA)以及痛风(代谢性关节炎)。除所指出的所有原发性形式的关节炎之外，由本发明治疗的病状可以包括所有继发性形式的关节炎，例如红斑狼疮、过敏性紫癜(Henoch-purpura)、血色素沉着症、肝炎、韦格纳氏肉芽肿病(Wegener's granulomatosis)(和许多其他血管炎综合征)、莱姆病(Lyme disease)以及家族性地中海热。

因为炎性过程是免疫介导病症的主要支持，所以本发明的组合物的抗炎作用使其适于治疗患有免疫介导病症，例如不同形式的关节炎的受试者。

应当理解，不同形式的关节炎总体上可以分成两个主要类别：炎性关节炎和退行性关节炎，每个类别具有不同的病因。因此，根据一个具体实施例，本发明的金属-诺卡胺素络合物或其任何药物组合物可以确切地旨在用于治疗和/或改善炎性病症，例如炎性关节炎。

炎性关节炎的特征在于滑膜炎、骨侵蚀、骨质减少、软组织肿胀以及均一的关节间隙变窄。更确切地，关节炎症的标志是滑膜炎和骨侵蚀。后者初始地表现为薄的、白色的、软骨下接骨板的病灶中断。正常地，此软骨下接骨板甚至在严重骨质减少的情况也可以被看到，而其中断指示了侵蚀。虽然确实关节周围的骨质减少和病灶软骨下的骨质减少可以在真正的骨侵蚀之前出现，但是指示确定性关节炎症的是骨侵蚀的存在。随着骨侵蚀扩大，骨破坏延伸到髓腔内的小梁中。炎性关节炎的一个重要特征涉及边缘骨侵蚀的概念。此术语是指位于发炎的滑膜关节的边缘处的骨侵蚀。此特定位置代表关节的是关节内的但未由透明软骨所覆盖的部分。因此，早期关节炎症在关节面下的软骨下接骨板侵蚀之前产生边缘性侵蚀。当寻找骨侵蚀时，多个关节视图对于描绘不同骨表面是必要的。炎性关节过程的第二个重要的特征是均一的关节间隙变窄。此情况出现的原因是关节软骨的破坏在整个关节内间隙是均一。炎性关节疾病的第三个发现是软组织肿胀。

应当理解，炎性关节炎可以进一步分成若干种亚类，并且因此，在此所述的本发明的金属-诺卡胺素络合物、组合物和方法可以适用于治疗包括不同亚类的关节炎的每一种炎性关节炎。

全身性关节炎的特征在于累及多个关节，并且包括两个主要类别，即类风湿关节炎和血清阴性脊柱关节病。

根据一个实施例，本发明的金属-诺卡胺素络合物、组合物以及方法可以用于治疗和/或改善类风湿关节炎。类风湿关节炎(RA)是最普遍地导致关节(关节炎)和腱鞘内的炎症和组织损伤以及贫血的慢性、全身性自身免疫病症。它还可以产生肺、心包、胸膜以及眼睛巩膜中的弥漫性炎症，并且也产生最普遍地在皮下组织中的结节性病变。它可以是致残的且疼痛的病状，该病状可以导致功能和可动性的实质性丧失。血清标记物诸如类风湿因子和针对环瓜氨酸肽的抗体是类风湿关节炎的重要指示物。类风湿关节炎的放射学特征是关节炎症的那些放射学特征，并且包括具体的骨质减少、均一的关节间隙损失、骨侵蚀以及软组织肿胀。由于炎症的慢性性质，另外的发现诸如关节半脱位和软骨下囊肿也可以是明显的。

血清阴性脊柱关节病类别包括银屑病关节炎、反应性关节炎和强直性脊柱炎，并且特征在于炎症体征、多个关节累及以及具有骨增殖添加特征的手部和脚部的远端涉及。因此，根据一个实施例，本发明的金属-诺卡胺素络合物、组合物和方法可以用于治疗和/或改善血清阴性脊柱关节病类别的任何病状。

更确切地，根据非限制性实施例，本发明的金属-诺卡胺素络合物、组合物和方法可以用于预防、治疗、改善或抑制任何类型的关节炎，包括银屑病关节炎。银屑病关节炎是特征在于皮肤炎症(银屑病)和关节炎症(关节炎)的慢性疾病。

男性和女性等可能地患银屑病。对于银屑病关节炎，男性更可能患脊柱炎形式(其中脊柱受到影响)，并且女性更可能患类风湿形式(其中可能累及许多关节)。银屑病关节炎通常在年龄为35-55岁的人中发展。然而，它可以在几乎任何年龄的人中发展。银屑病关节炎与若干种其他关节炎病状，诸如强直性脊柱炎、反应性关节炎以及与克罗恩病和溃疡性结肠炎相关联的关节炎共有许多特征。所有这些病状可以导致脊柱和关节中、眼睛、皮肤、口腔以及不同器官中的炎症。

根据另一个非限制性实施例，本发明的金属-诺卡胺素络合物、组合物和方法可以用于预防、治疗、改善或抑制强直性脊柱炎。

强直性脊柱炎(AS，先前被称为别赫捷列夫氏病、别赫捷列夫综合征、强直性脊柱炎(Marie-Strümpell disease)以及脊柱关节炎形式)通常是慢性和渐进式形式的关节炎，由多个关节，典型地在脊柱基部处的脊柱小平面关节和骶髂关节的炎症导致。虽然强直性脊柱炎倾向于影响脊柱周围的这些关节和软组织，但是也可以影响其他关节以及围绕关节的组织(起止点，其中肌腱和韧带连接到骨)。强直性脊柱炎也可以累及身体的除关节以外的区域，诸如眼睛、心脏和肺。此病症时常引起骨性关节强直(或融合)，因此衍生自希腊词语ankylos的术语强直性的意指关节的强硬化。椎骨(spondylos)意指脊椎(或脊柱)并且是指一个或多个脊椎的炎症。

估计该疾病影响普通人群的大约0.1％-0.2％。强直性脊柱炎主要影响年轻男性。男性患强直性脊柱炎的可能性比女性高四至十倍。患有该疾病的大多数人在15-35岁的年龄发展该疾病，其中发作的平均年龄是26岁。

虽然确切的病因是未知的，但是据信强直性脊柱炎是由遗传影响和触发性环境因素的组合而造成的。与普通人群中有7％相比，患有强直性脊柱炎的患者中有大约90％-95％具有组织抗原人类白细胞抗原B27(HLA-B27)。患有强直性脊柱炎的人经常具有该疾病的家族史。

在又一个实施例中，本发明的金属-诺卡胺素络合物、组合物以及方法可以用于预防、治疗、改善或抑制反应性关节炎(ReA)。反应性关节炎即血清阴性脊柱关节病的另一种类型是响应于身体的另一部分中的感染而发展的自身免疫病状。与细菌接触并且形成感染可以触发反应性关节炎。它具有类似于共同地称为“关节炎”的不同其他病状诸如风湿病的症状。它由另一种感染导致并且因此是“反应性的”，即，依赖于其他病状。在慢性病例中，“触发”性感染经常被治愈或者缓解，因此使得难以确定初始病因。

反应性关节炎的症状非常经常地包括三种似乎没有联系的症状的组合，即大关节的炎性关节炎、眼睛的炎症(结膜炎和葡萄膜炎)以及尿道炎。应当指出，ReA也被称为莱特尔氏综合征(以德国医师汉斯莱特尔(Hans Reiter)命名)也被称为尿道性关节炎、性病性关节炎和肠多动脉炎(polyarteritis enterica)。

应当理解，存在许多其他形式的炎性关节炎，包括幼年特发性关节炎、痛风和假痛风以及与结肠炎或银屑病相关联的关节炎。因此应当理解，本发明的金属-诺卡胺素络合物、组合物以及方法也适用于这些病状。

因此，本发明的金属-诺卡胺素络合物、组合物以及方法可以用于预防、治疗、改善或抑制幼年特发性关节炎(JIA)。JIA是儿童中的持续性关节炎的最普遍形式(在本文中幼年是指在16岁之前发作，特发性是指无确定病因的病状，并且关节炎是关节滑膜的炎症)。JIA是见于儿童中的关节炎的亚类，其可以是短暂的且自限的或慢性的。它显著地不同于普遍地见于成年人中的关节炎(类风湿关节炎)和可以存在于儿童中的为慢性病状的其他类型的关节炎(例如，银屑病关节炎和强直性脊柱炎)。

此外，在针对炎性病状的一些具体实施例中，任何炎性呼吸道疾病诸如哮喘可以从使用本发明的金属-诺卡胺素络合物、组合物的治疗中受益，在该治疗中，向患有该疾病的受试者给予治疗有效量的该金属-诺卡胺素络合物的组合物。因此，在具体实施例中，本发明的方法可以用于预防、治疗和/或改善呼吸道病症、确切地哮喘。

哮喘是气道的常见慢性炎性疾病，其特征在于可变的和复发性症状、可逆气流阻塞和支气管痉挛。常见的症状包括喘鸣、咳嗽、胸闷以及呼吸短促。

哮喘被认为是由遗传因素和环境因素的组合导致的。它的诊断通常是基于症状的模式、随时间对疗法的应答以及肺活量测定法。它在临床上根据症状的频率被分类为一秒内用力呼气量(FEV1)和呼气流速峰值。哮喘还可以被分类为特异性(外源性)或非特异性(内源性)，其中特异反应性是指向1型超敏反应发展的倾向性。

治疗急性哮喘症状通常使用吸入型短效β-2激动剂(诸如沙丁胺醇)和口服皮质类固醇。在非常严重的情况下，可能需要静脉内皮质类固醇、硫酸镁以及住院治疗。症状可以通过避免触发物诸如过敏原和刺激物以及通过使用吸入型皮质类固醇来预防。如果哮喘症状仍未得到控制，除吸入型皮质类固醇之外，可以使用长效β激动剂(LABA)或抗白三烯剂。

哮喘是慢性气道炎症的结果，其随后引起周围平滑肌收缩性增加。此因素以及其他因素导致气道变窄和典型的喘鸣症状的发作。该变窄在有或没有治疗的情况下典型地是可逆的。气道自身偶尔变化。典型的气道变化包括嗜酸性粒细胞增加和网状板增厚。慢性地，气道平滑肌的大小可能随粘液腺数量的增加而一起增加。所涉及的其他细胞类型包括：T淋巴细胞、巨噬细胞以及嗜中性粒细胞。还可能涉及免疫系统的其他组分，包括：细胞因子、趋化因子、组胺以及白三烯。

虽然没有用于哮喘的疗法，但是症状典型地可以被改善。应当创建用于前摄地监测和管理症状的具体的、定制的计划。该计划应当包括减少对过敏原的暴露、进行测试以评价症状的严重性以及药品的使用。治疗计划应当被写下并且根据症状变化提出对治疗的调整。

重要的是，本发明的金属-铁载体、确切地金属-诺卡胺素络合物向当前可用的药品提供附加的治疗维度，因为它们不仅充当对抗所描述的呼吸道病症病理的发展的预防性措施，而且还减弱接着发生的组织损伤。

应当注意，用于哮喘和其他呼吸道相关联的病症的药品典型地被提供作为与哮喘间隔器组合的定量吸入器(MDI)或提供为为干粉吸入器。该间隔器是使药品与空气混合的塑料圆柱体，从而使得更易于接受全剂量的药物。还可以使用雾化器。本发明的金属-DFO E络合物因此可以使用此类MDI来给予，并且还可以与任何其他哮喘药品、确切地以上所指出的那些药品组合。

如上所指出的，本发明考虑了用于治疗不同的免疫相关呼吸道疾病的方法。除哮喘之外，此类呼吸道疾病可以包括气道中的任何其他急性过敏性反应表现、慢性鼻窦炎(CRS)、过敏性鼻炎、COPD、鼻瘜肉(NP)、血管运动性鼻炎、气道高反应性、囊性纤维化以及肺纤维化或过敏性鼻窦炎。因此，本发明提供了用于预防、治疗、改善或抑制以上所述的任何呼吸道疾病的方法、组合型组合物和试剂盒。

因此，在某些实施例中，本发明提供了用于治疗鼻窦炎的方法、组合物和试剂盒。鼻窦炎是副鼻窦的炎症，其可以是由感染、过敏性反应或自身免疫问题而造成的。大多数病例是由于病毒感染而造成的并且在10天的病程中消退。它是普遍的病状，每年在美国发生超过两千四百万个病例。

就其本身而言，慢性鼻窦炎持续长于三个月，并且可以由共有窦的慢性炎症作为共同症状的许多不同疾病导致。慢性鼻窦炎病例被细分成具有息肉的病例和没有息肉的病例。当息肉存在时，该病状被称为慢性增生性鼻窦炎；然而，这些病例被了解得很少并且可以包括过敏性反应、环境因素诸如灰尘或污染、细菌性感染或真菌(过敏性、感染性或反应性)。非过敏性因素诸如血管运动性鼻炎也可以导致慢性窦问题。

可以由本发明的方法治疗的过敏性鼻炎、花粉症或枯草热是鼻腔气道的过敏性炎症。它在过敏原诸如花粉或灰尘被具有敏化免疫系统的个体吸入时发生，并且触发抗体产生。这些抗体大部分结合到肥大细胞，这些肥大细胞含有组胺。当肥大细胞被花粉和灰尘刺激时，组胺(和其他化学物)被释放。这导致瘙痒、肿胀和粘液产生。症状的严重性在个体之间有所不同。非常敏感的个体可能经历荨麻疹或其他皮疹。

慢性阻塞性肺病(COPD)，也被称为慢性阻塞性肺疾病(COLD)、慢性阻塞性气道疾病(COAD)、慢性气流受限(CAL)以及慢性阻塞性呼吸道疾病(CORD)，是指慢性支气管炎和肺气肿，即气道变窄的肺部的一对普遍共存的疾病。这导致去往和离开肺部的空气流动受限，从而导致呼吸短促。相比于哮喘，该气流受限是可逆性差的并且通常随时间变得逐渐更差。COPD是由最普遍地来自吸烟的有害颗粒或气体导致，该颗粒或气体触发肺部的异常炎症应答。较大气道中的炎症应答被称为慢性支气管炎，其在人定期地咳嗽出痰时在临床上被诊断。在肺泡中，炎症应答导致肺部组织的破坏，被称为肺气肿的一种过程。COPD的自然病程的特征在于被称为急性恶化的症状的偶发性突然加重，其大多数由感染或空气污染导致。本发明的方法、组合型组合物和试剂盒适用于治疗COAD和COPD。

此外，本发明的方法可以用于治疗鼻息肉。鼻息肉是主要产生自鼻和副鼻窦的粘膜的息肉状肿块。它们是时常伴随过敏性鼻炎的粘膜的过度生长。它们是自由地可移动的并且非一触就痛的。鼻息肉通常分类为上颌后窦鼻孔息肉和筛骨息肉。上颌窦后鼻孔息肉产生自上颌窦并且是远不太常见的，筛骨息肉产生自筛骨窦。上颌窦后鼻孔息肉通常是单个的且是单侧的，而筛骨息肉是多个的且是双侧的。

非过敏性鼻炎是指不是由过敏性反应而造成的鼻漏。非过敏性鼻炎可以被分类为非炎性鼻炎或炎性鼻炎。有时与过敏性反应混淆的非炎性、非过敏性鼻炎的一个非常普遍的类型被称为血管运动性鼻炎，其中某些非过敏性触发物诸如气味、烟气、烟雾、灰尘以及温度变化导致鼻炎。认为这些非过敏性触发物导致鼻子内层中的血管扩张，其引起肿胀和排流。血管运动性鼻炎可以与过敏性鼻炎共存，并且这被称为“混合性鼻炎”。血管运动性鼻炎看起来在女性中比在男性中明显更普遍，从而使一些研究人员认为是激素起作用。总体上，与可以在任何年龄发展的过敏性鼻炎不同，血管运动性鼻炎的发作年龄发生在20岁之后。患有血管运动性鼻炎的个体典型地经历全年性症状，但是症状可能在快速天气变化更普遍的春天和秋天恶化。估计有1700万美国公民患有血管运动性鼻炎。抗组胺药氮卓斯汀已经显示出对于过敏性的、混合性的和血管运动性鼻炎是有效的。

气道高应答性(或与支气管或高反应性的其他组合)是特征在于易于触发的支气管痉挛(细支气管或小气道的收缩)的一种状态。气道高应答性可以使用支气管激发试验来评价。这最经常使用像乙酰甲胆碱或组胺的产品。这些化学物也在正常个体中触发支气管痉挛，但是患有支气管高应答性的人具有更低的阈值。支气管高应答性是哮喘的标志，但是也时常发生在患有慢性阻塞性肺病(COPD)的人中。

囊性纤维化(也被称为CF)是可以由本发明的方法治疗的病状的另一个实例，它是影响整个身体的常见疾病，其导致渐进性失能并且经常导致早期死亡。名称囊性纤维化是指胰腺内的特征性瘢痕(纤维化)和囊肿形成。呼吸困难是最严重的症状并且由通过抗生素和其他药品治疗但未治愈的肺部感染产生。众多其他症状，包括窦感染、生长缓慢、腹泻以及不育，由CF对身体其他部分的影响产生。CF由囊性纤维化跨膜传导调节蛋白(CFTR)的基因突变导致，并且被认为是常染色体隐性疾病。

肺纤维化是肺中的过量纤维结缔组织的形成或发展(纤维化)。它可以被描述为“肺的瘢痕化”。肺纤维化涉及正常肺实质与纤维组织的逐步替换。瘢痕组织的增厚导致氧扩散容量的不可逆降低。此外，顺应性降低使得肺纤维化成为限制性肺疾病。该顺应性降低是肺实质固有的限制性肺疾病的主要病因。

一些实施例涉及根据本发明的、具体地用于治疗呼吸道疾病的方法。根据一个实施例，此类组合物可以特别适于通过口服或鼻吸入进行的肺部递送。更确切地，肺部递送可能需要使用液体雾化器、基于气溶胶的定量吸入器(MDI)或干粉分散装置。

在另外的实施例中，本发明提供了一种治疗或预防哺乳动物受试者中的由任何病原体、确切地细菌性病原体、病毒性病原体或寄生虫中的至少一种导致的感染性疾病或病状。更确切地，该方法包括向有需要的受试者给予有效量的本发明的金属-诺卡胺素络合物或其任何组合物的步骤。

如在此所使用的“感染”是致病因子对生物体组织的入侵、这些致病因子的扩增以及宿主组织对这些生物和它们产生的毒素的反应。感染性疾病，也被称为传染性疾病或可传播疾病，是由感染产生的疾病。应当理解，在此所使用的感染性疾病还涵盖由病原体导致的任何感染性疾病。病原体包括细菌、病毒、原核微生物、低等真核微生物、复杂真核生物、朊病毒、寄生虫、酵母、线虫诸如寄生蛔虫和蛲虫、节肢动物诸如蜱、螨、跳蚤和虱子、真菌诸如癣、以及其他大寄生虫诸如绦虫和其他肠虫。

原核微生物包括如下文详细描述的细菌，例如革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、革兰氏染色不定细菌、抗酸性生物以及细胞内细菌。

低等真核生物包括酵母或真菌，诸如但不限于卡氏肺囊虫(Pneumocystiscarinii)、白色念珠菌(Candida albicans)、曲霉属(Aspergillus)、荚膜组织胞浆菌(Histoplasma capsulatum)、皮炎芽生菌(Blastomyces dermatitidis)、新型隐球菌(Cryptococcus neoformans)Cryptococcus neoformans)、毛癣菌属(Trichophyton)以及小孢子菌属(Microsporum)。

复杂真核生物包括蠕虫、昆虫、蛛形纲动物、线虫、aemobe、溶组织内阿米巴(Entamoeba histolytica)、兰伯氏贾第虫(Giardia lamblia)、阴道毛滴虫(Trichomonasvaginalis)、冈比亚布氏锥虫(Trypanosoma brucei gambiense)、克氏锥虫(Trypanosomacruzi)、结肠小袋纤毛虫(Balantidium coli)、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)、隐孢子虫(Cryptosporidium)或利什曼原虫(Leishmania)。

术语“病毒”以其最广泛的意义被用于包括以下家族的病毒：腺病毒、乳多空病毒、疱疹病毒(单纯性、水痘带状、艾巴氏病毒(Epstein-Barr)、CMV)、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、甲型流感病毒和乙型流感病毒、痘病毒：天花、牛痘、鼻病毒、脊髓灰质炎病毒、风疹病毒、虫媒病毒、狂犬病病毒、黄病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、HIV、HTLV I和HTLV II。

术语“真菌”包括例如导致以下疾病的真菌：诸如癣菌病、组织胞浆菌病、芽生菌病、曲霉菌病、隐球菌病、孢子丝菌病、球孢子菌病、副球孢子菌病以及念珠菌病。

术语“寄生虫”包括但不限于由以下各项导致的感染：体细胞绦虫、血吸虫、组织蛔虫、阿米巴(ameba)以及疟原虫(Plasmodium)、锥虫(Trypanosoma)、利什曼原虫和弓形虫物种。

应当注意，诺卡胺素与至少一种金属的络合物可以螯合不稳定性铁和/或铜，降低用于微生物的合成和增殖目的的不稳定性铁的可用性，从而抑制致病微生物的生长并且减弱感染/炎症的程度。

因此，在一些实施例中，本发明提供了用于治疗由细菌性病原体导致的感染性疾病的方法。

在一些具体实施例中，细菌性病原体可以是肠致病性大肠杆菌(EPEC)、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌中的至少一种。

细菌性感染是炎症相关病症的实例。本发明进一步提供了用于使用本发明的络合物或其任何组合以及其药物组合物来预防、治疗、改善或抑制细菌性感染的方法。如图8和图9所呈现，锌-诺卡胺素的抗菌作用在以下类型的致病细菌上展示出：大肠杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌。更确切地，对大肠杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌的生长抑制通过本发明的络合物的杀菌活性(对细菌生存力的抑制)来证实。

更确切地，术语“细菌性感染”涉及由细菌导致的感染。术语“细菌(bacteria)”(单数为“细菌(bacterium)”)在这个背景下是指单细胞微生物的任何类型。此术语在此涵盖根据其基本形状而属于一般分类的细菌，即球形(球菌)、杆状(杆菌)、螺旋状(螺旋菌)、逗点状(弧菌)或螺旋体状(螺旋体)；以及作为单个细胞以对、链或簇存在的细菌。

在更具体的实施例中，术语“细菌”确切地是指革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌或抗酸性生物。革兰氏阳性细菌可以被识别为保留了在细菌鉴别的革兰氏染色法中使用的结晶紫染色，并且因此在显微镜下看起来是紫色的。革兰氏阴性细菌不保留结晶紫，从而使得阳性鉴定是可能的。换言之，术语‘细菌’在此适用于在细胞膜外侧的细胞壁中具有较厚的肽聚糖层的细菌(革兰氏阳性)，并且适用于其细胞壁中具有夹在内部细胞质细胞膜与细菌外膜之间的薄肽聚糖层的细菌(革兰氏阴性)。

本发明进一步涉及锌-诺卡胺素络合物的生物活性：它充当抗炎剂、抑菌和/或杀菌剂以及不稳定性和氧化还原活性铁的强螯合剂。

在一些实施例中，在此所考虑的细菌的实例包括以下属的种类：密螺旋体属(Treponema sp.)、包柔氏螺旋体属(Borrelia sp.)、奈瑟氏菌属(Neisseria sp.)、军团杆菌属(Legionella sp.)、博代氏菌属(Bordetella sp.)、埃希氏菌属(Escherichia sp.)、沙门氏菌属(Salmonella sp.)、志贺氏菌属(Shigella sp.)、克雷白氏杆菌属(Klebsiellasp.)、耶尔森氏菌属(Yersinia sp.)、弧菌属(Vibrio sp.)、嗜血杆菌属(Hemophilussp.)、立克次体属(Rickettsia sp.)、衣原体属(Chlamydia sp.)、支原体属(Mycoplasmasp.)、葡萄球菌属(Staphylococcus sp.)、链球菌属(Streptococcus sp.)、芽孢杆菌属(Bacillus sp.)、梭状芽孢杆菌属(Clostridium sp.)、棒状杆菌属(Corynebacteriumsp.)、丙酸杆菌属(Proprionibacterium sp.)、分枝杆菌属(Mycobacterium sp.)、脲原体属(Ureaplasma sp.)以及李斯特菌属(Listeria sp.)。在又一些更具体的实施例中，在本发明的上下文中的细菌性病原体可以包括但不限于肠致病性大肠杆菌(EPEC)、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)、艰难梭菌(Clostidiumdifficile)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)、克雷白氏肺炎杆菌(Klebsiellapneumonia)、鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumanni)和肠杆菌种属(Enterobacterspecies)、结核分枝杆菌(Mycobacterum tuberculosis)、粪产碱菌(Alcaligenesfaecalis)、脑膜炎奈瑟氏菌(Neisseria meningitis)、中间普雷沃菌(Prevotellaintermedia)、牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)、沙门氏菌、志贺氏菌、变形杆菌(Proteus)、普罗维登斯菌(Enterobacter)以及摩根氏菌(Morganella)的种属。

因此，本发明的组合物表现出实质性的抗菌作用，这使其适用于治疗感染介导的病症。还应当理解，本发明的金属-DFO E络合物或本发明的任何组合物的有益抗菌作用可以通过其与其他已知的抗菌剂的组合来增强。

在又一些另外的实施例中，本发明的方法可以特别适用于治疗和/或预防由病毒性病原体导致的感染性疾病，该病毒性病原体确切地是以下中的至少一种：疱疹病毒(单纯性、水痘带状)、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、甲型流感病毒和乙型流感病毒、腺病毒、乳多空病毒、艾巴氏病毒、CMV、痘病毒：天花、牛痘、乙型肝炎、鼻病毒、脊髓灰质炎病毒、风疹病毒、虫媒病毒、狂犬病病毒、黄病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、HIV、HTLV I以及HTLV II。

在又一些实施例中，本发明的方法可以适用于治疗有需要的受试者中的增殖性病症。在一些具体实施例中，本发明的方法可以包括向受试者给予治疗有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物，或如由本发明所披露的任何药物组合物、包含它们的载体、基质或媒介物。应当进一步理解，本发明的方法可以是与增殖性病症特别相关的，这些增殖性病症是与促炎细胞因子升高和抗炎细胞因子水平的降低中的至少一者相关联的恶性肿瘤。

术语“增殖性病症”意指并非整个生物的正常细胞更新、代谢、生长或繁殖的部分的细胞分裂和生长。不想要的细胞增殖见于肿瘤和细胞的其他病理增殖中，其不发挥正常功能，并且对于大部分在不存在外部干预的情况下以超过正常组织细胞的生长速率继续无约束生长。由于不想要的细胞增殖而接着发生的病理状态在此是指“过度增殖性疾病”或“过度增殖性病症”。应当注意，术语“增殖性病症”、“癌症”、“肿瘤”以及“恶性肿瘤”均等同地涉及组织或器官的增生。总体上，本发明的组合物和方法可以用于治疗非实体或实体肿瘤。

此外，如在本发明中所考虑的恶性肿瘤可以是癌、黑色素瘤、淋巴瘤、白血病、骨髓瘤以及肉瘤中的任一种。

如在此所使用的癌是指由转化的上皮细胞组成的侵入性恶性肿瘤。可替代地，它是指由未知的组织发生的转化细胞组成的恶性肿瘤，但是其具有与上皮细胞相关联的特异性分子或组织学特征，诸如产生细胞角蛋白或细胞间桥。

如在此所使用的黑色素瘤是黑素细胞的恶性肿瘤。黑素细胞是产生黑色色素即黑色素的细胞，该黑色素负责皮肤颜色。它们主要发生在皮肤中，但是也发现于身体的其他部分中，包括肠和眼睛。黑色素瘤可以发生在含有黑色素的任何身体部分中。

白血病是指血液形成器官的渐进性、恶性疾病，并且总体上其特征在于白细胞和其前体在血液和骨髓中的失调增殖和发展。白血病通常在临床上基于以下各项进行分类：(1)疾病的持续时间和特征-急性的或慢性的；(2)所涉及的细胞的类型；脊髓的(骨髓性的)、淋巴的(淋巴性的)或单核细胞的；以及(3)异常细胞在血液中的数量的增加或非增加-白血病的或非白血性的(亚白血病的)。

肉瘤是产生自转化的结缔组织细胞的癌症。这些细胞源自中胚层或中层，该中胚层或中层形成骨、软骨以及脂肪组织。这与癌相反，其起源于上皮中。上皮沿整个身体的结构表面排列，并且是乳房、结肠和胰腺中的癌症的起源。

如在此所提及的骨髓瘤是浆细胞的癌症，这些浆细胞是白细胞的一种类型，通常是负责产生抗体的。异常细胞的集合体在骨和在骨髓中累积，在骨中它们导致骨病变，在骨髓中它们干扰正常血细胞的产生。骨髓瘤的大多数病例的特征还在于产生副蛋白，该副蛋白是可以导致肾问题并且干扰正常抗体的产生，从而造成免疫缺陷的一种异常抗体。高血钙(高钙水平)是经常遇到的。

淋巴瘤是免疫系统的淋巴细胞中的癌症。典型地，淋巴癌呈现为淋巴细胞的实体肿瘤。这些恶性肿瘤细胞经常起源自淋巴结中，呈现为结的肿大(肿瘤)。它还可以影响其他器官，在该种情况下，它被称为结外淋巴瘤。淋巴瘤的非限制性实例包括何杰金氏病(Hodgkin's disease)、非何杰金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphomas)和伯基特淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)。

可以用于本发明中的另外的恶性肿瘤包括但不限于恶性血液病(包括如上所述的淋巴瘤、白血病和骨髓增生性病症)、再生不良性和再生障碍性贫血(由病毒诱导的和特发性的两者)、骨髓增生异常综合症、所有类型的副肿瘤综合征(免疫介导的和特发性的两者)以及实体肿瘤(包括胃肠道、结肠、肺、肝脏、乳房、前列腺、胰腺以及卡波西氏肉瘤(Kaposi's sarcoma))。本发明还可以适用于治疗或抑制实体肿瘤，诸如唇和口腔、咽、喉、副鼻窦、大唾液腺、甲状腺、食管、胃、小肠、结肠、结肠直肠、肛管、肝脏、胆囊、肝外胆管、法特氏壶腹(肝胰管)、外分泌胰腺、肺、胸膜间皮瘤、骨中的肿瘤；软组织肉瘤；皮肤、乳房、外阴、阴道、子宫颈、子宫体、卵巢、输卵管的癌和恶性黑色素瘤；妊娠性滋养细胞肿瘤；阴茎、前列腺、睾丸、肾、肾盂、输尿管、膀胱、尿道肿瘤；眼睑癌；结膜癌；结膜恶性黑色素瘤；葡萄膜恶性黑色素瘤；视网膜母细胞瘤；泪腺癌；眼眶、大脑、脊髓、血管系统的肉瘤；血管肉瘤；以及卡波西氏肉瘤

在一些另外的实施例中，本发明提供了用于治疗有需要的受试者中的神经退行性病症的方法，这些方法包括向所述受试者给予治疗有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物或其任何组合，或包含它们的任何药物组合物、载体、基质或媒介物的步骤。在一些实施例中，神经退行性病症是特征在于神经退行性过程的“神经退行性疾病”组中的至少一种，并且包括以下各项中的至少一种：肌萎缩性侧索硬化症、帕金森病(Parkinson's)、阿尔茨海默氏病(Alzheimer's)以及亨廷顿氏病(Huntington's)。此类疾病是不可治愈的，从而引起神经元细胞的渐进性变性和/或死亡。

术语“神经变性”是用于神经元的结构或功能的渐进性丧失，从而导致其死亡的通用术语。神经退行性疾病的最大风险因子是老化。线粒体DNA突变以及氧化应激两者均促成老化。这些疾病中的许多是晚发性的，意味着对于每种疾病，存在随着人老化而改变的某一因素。一个恒定因素是在每种疾病中，在疾病随着年龄进行时，神经元逐渐丧失功能。

在又一些另外的实施例中，本发明的方法可以适用于治疗脊髓损伤和创伤。

脊髓损伤(SCI)是对脊髓的导致其功能变化的伤害。损伤可以发生在脊髓的任何水平处，并且可以分类为完全损伤和不完全损伤，完全损伤是感觉和肌肉功能的全部丧失，不完全损伤意指一些神经信号能够行进通过脊髓的损伤区域。根据沿着脊髓的损伤的位置和严重性，症状可以广泛地变化，从轻微诸如疼痛或麻木到严重，诸如麻痹和失禁。

脊髓损伤可以是创伤性的或非创伤性的，并且可以基于病因被分类为三种类型：机械力、毒性和缺血性(来自供血不足)。该损伤还可以被分为原发性和继发性损伤：在原发性损伤中，细胞死亡在最初损伤时立即发生；在继发性损伤中，通过最初损害启动的生化级联可以导致另外的组织损伤，包括缺血级联的活化、炎症、肿胀、细胞自杀以及神经递质失调。它们可以在损伤之后发生数分钟或数周。

通常该损伤由物理创伤诸如车祸、射击、跌落或运动损伤产生，但是它也可以由其他原因诸如感染、血液流动不足或来自肿瘤的压力产生。

非物理创伤性SCI是在所有SCI的从30％至80％的范围内。SCI可以发生在感染、椎间盘病以及脊髓血管病中。自发性出血可能发生在沿脊髓排列的保护膜的内部或外部，并且椎间盘可能突出。损伤可以由血管的机能障碍产生，如在动静脉畸形的情况下，或者当血块卡在血管中并且切断对脊髓的供血时。当全身血压下降时，向脊髓的血液流动可能减少，从而潜在地导致由受影响的脊髓水平供应的区域中的感觉和随意运动的丧失。挤压脊髓的先天性病状和肿瘤也可以导致SCI，如脊椎的椎关节强硬和缺血可以的那样。多发性硬化症是可以使脊髓受损的疾病，如感染性或炎性病状诸如结核病、带状疱疹或单纯性疱疹、脑膜炎、脊髓炎以及梅毒可以的那样。在发达国家中，最普遍的非创伤性SCI病因是退行性疾病，接着是肿瘤；在许多发展中国家中，主要病因是感染诸如HIV和结核病。

SCI还根据受损的程度分类。脊髓损伤神经学分类国际标准(ISNCSCI)，由美国脊柱损伤协会(ASIA)发表，广泛用于记录SCI之后的感觉和运动受损。它是基于神经应答、在每个生皮节中测试的触感和针刺感以及控制身体两侧的关键运动的肌肉强度。

预后的范围广泛，从完全康复到四肢的永久麻痹，其在颈部水平处的损伤中被称为四肢瘫痪(tetraplegia)(也被称为四肢瘫痪(quadriplegia))，并且在下部损伤中被称为截瘫(两肢麻痹)。在损伤之后可以短期和长期发生的并发症包括肌肉萎缩、压疮、感染以及呼吸道问题。

肿胀可以通过减少供血和导致缺血而产生对脊髓的另外的损伤，该缺血可以引起伴有使神经元受损的毒素的释放的缺血级联。

应当进一步理解，本发明的方法可以适用于在此所述的任何脊髓损伤和任何相关的病状或并发症。

在另外的实施例中，本发明提供了用于治疗有需要的受试者中的缺血性病症的方法，这些方法包括向所述受试者给予治疗有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物、其任何组合，或包含它们的任何药物组合物、载体、基质或媒介物的步骤，其中缺血性病症是以下中的至少一种：心脏、大脑、手臂、腿部、骨盆以及肾中的动脉的动脉粥样硬化。

术语“缺血”意指“供血减少”。如在此所使用的术语“缺血性病症”是指缺血性血管病-特征在于在血管内积累并且从而限制正常血液流动的被称斑块为蜡状物质的一类病症。当斑块在动脉中积累时，该病状被称为“动脉粥样硬化”。动脉粥样硬化可以影响身体中的任何动脉，包括心脏、大脑、手臂、腿部、骨盆以及肾中的动脉。因此，不同疾病可能基于所影响的动脉而发展。

“缺血性血管病”(IVD)是包括由斑块的积累而导致的一类疾病的术语。以下是IVD的具体非限制性实例：

此外，在一些实施例中，本发明的方法可以适用于冠心病(CHD)。冠心病是动脉粥样硬化影响心脏中的冠状动脉的疾病。如果向心肌的富氧血的流动被减少或阻断，则可能分别发生心绞痛(疼痛)或心脏病发作。

在一些实施例中，本发明的方法可以适用于心脏病发作。如果向心肌的一部分的富氧血的流动被阻断，则发生心脏病发作。如果血液流动不快速恢复，则该心肌部分开始死亡。在没有快速治疗的情况下，心脏病发作可能导致严重的问题并且甚至导致死亡。此外，在一些实施例中，本发明的方法可以适用于颈动脉病(CAD)。如果斑块在颈动脉的任一侧的动脉中积累，则发生颈动脉病。这些动脉向大脑供给富氧血。因此，如果向大脑的血液流动被减少或阻断，甚至持续几分钟，则缺氧可能导致脑细胞损伤或死亡，这被称为中风。如果脑细胞由于中风死亡或受损，则症状发生在这些脑细胞所控制的身体部分中。中风症状的实例包括突然虚弱无力；面部、手臂或腿部的麻痹或麻木；说话或理解语言困难；以及视觉困难。

在又一些另外的实施例中，本发明的方法可以适用于外周动脉病(PAD)。PAD是斑块在腿部或手臂的动脉中积累的疾病。阻断向腿部的血液流动可能导致疼痛和麻木。它还可以升高在受影响的肢体中获得感染的风险。如果足够严重，阻断血液流动可能导致坏疽(组织死亡)。

如上所提及，所有类型的缺血性血管病是由动脉粥样硬化导致的。动脉粥样硬化可能在某些因素使动脉的内层受损时开始。这些因素包括：吸烟、血液中大量的某些脂肪和胆固醇、由于胰岛素抵抗性或糖尿病而造成的高血压和血液中大量糖。

在一些另外的实施例中，本发明提供了用于治疗有需要的受试者中的代谢性病症的方法，这些方法包括向所述受试者给予治疗有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物、其任何组合，或它们的任何药物组合物、载体、基质或媒介物的步骤。在一些实施例中，本发明的方法可以是与代谢性病症、确切地I型糖尿病、II型糖尿病以及任何糖尿病相关病状中的至少一种是特别相关的。

代谢是身体使用食物获得或产生能量的过程。食物由蛋白质、碳水化合物以及脂肪组成。消化系统中的化学物将食物部分分解成糖和酸，并且身体可以立即使用这些分解的产物，或者它可以将能量储存在身体组织，诸如肝脏、肌肉以及身体脂肪中。

“代谢性病症”在异常化学反应扰乱此过程时发生。个体可以在一些器官，诸如肝脏或胰腺患病或不正常发挥功能时患上代谢性病症。糖尿病是代谢性病症的非限制性实例。糖尿病糖尿病(Diabetes mellitus)(DM)通常被称为糖尿病(diabetes)，它是在长时间内具有高血糖水平的一类代谢性疾病。如果不进行治疗，糖尿病可能导致许多并发症。急性并发症包括糖尿病性酮症酸中毒和非酮性高渗性昏迷。严重的长期并发症包括心血管疾病、中风、慢性肾衰竭、腿部溃疡以及对眼睛的损伤。糖尿病是由于胰腺不产生足够的胰岛素(I型糖尿病)或缺乏身体细胞对所产生的胰岛素的适当应答(II型糖尿病)而造成的。

关于炎症与2型糖尿病的病理之间的联系有越来越多的证据。表明胰岛素抵抗性和2型糖尿病可能具有免疫组分的此进展性概念为2型糖尿病的抗炎疗法提供了新的途径。因此，基于其抗炎作用，本发明的组合物以及方法可以用于治疗和/或改善自身免疫病症诸如糖尿病。

糖尿病是特征在于失调代谢和不适当的高血糖(高血糖症)的一种综合征，其由低水平的激素胰岛素或由对胰岛素作用的异常抵抗性加上用来补偿的胰岛素分泌水平不足而产生。特征症状是产生过量尿液(多尿)、过度口渴和流体摄入增加(多饮)以及视力模糊；如果仅轻微地升高血糖，则这些症状可能不存在。

有三种糖尿病的主要形式：1型糖尿病、2型糖尿病和妊娠糖尿病(发生在怀孕期间)。1型糖尿病的特征在于胰腺中的郎格罕氏岛的胰岛素产生β细胞的缺失，从而导致胰岛素不足。此β细胞丧失的主要原因是T细胞介导的自身免疫攻击。没有已知可以针对1型糖尿病采取的预防性措施。大多数受感染的人在其他方面是健康的并且在发作发生时具有健康体重。对胰岛素的敏感性和应答性通常是正常的，尤其是在早期阶段。1型糖尿病可以影响儿童或成人，并且传统上被称为“幼年糖尿病”，因为它代表影响儿童的糖尿病的大部分病例。

在又另一个具体实施例中，本发明的组合物可以用于预防、治疗、改善或抑制2型糖尿病。2型糖尿病或非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)或成人发作性糖尿病是特征在于在胰岛素抵抗性和相对胰岛素不足的情况下的高血糖的一种代谢性病症。随着病状进行，可能需要药品。来自高血糖的长期并发症包括增加的心脏病发作风险、中风、截肢以及肾衰竭。有许多可能潜在地产生2型糖尿病或使其恶化的因素。这些因素包括肥胖症、高血压、高胆固醇(混合型高脂血症)，以及通常被称为代谢性综合征(它还被称为X综合征、Reavan氏综合征或CHAOS)的病状。其他病因包括肢端肥大症、库兴综合征(Cushing's syndrome)、甲状腺毒症、嗜铬细胞瘤、慢性胰腺炎、癌症以及药物。发现增加2型糖尿病的风险的另外的因素包括老化、高脂肪饮食以及缺乏运动的生活方式。

胰岛素抵抗性意指在胰岛素存在时，身体细胞未适当地作出应答。与1型糖尿病不同，胰岛素抵抗性总体上是“受体后”，这意味它是关于对胰岛素作出应答的细胞的问题而不是关于胰岛素产生的问题。严重的并发症可以由管理不适当的2型糖尿病产生，包括肾衰竭、勃起机能障碍、失明、伤口(包括外科手术切口)愈合缓慢以及动脉病包括冠状动脉病。2型的发作在中年和晚期生命中最普遍，但是由于儿童肥胖症和不活动性的增加，它更时常地见于少年和青年中。

应当进一步理解，本发明的方法、试剂盒和络合物可以适用于治疗糖尿病相关病状。应当理解，可互换使用的术语“相关联的”和“相关的”在此涉及病理时意指疾病、病症、病状或任何病理，其中至少一种共有因果关系、以比巧合频率更高的频率共同存在，或者其中至少一种疾病、病症、病状或病理导致第二疾病、病症、病状或病理。此类病状可以包括例如眼睛相关的并发症(白内障、青光眼、视网膜病变)、神经病变、肾病、心肌病、中风、高血压、外周动脉病以及疮和任何溃疡、慢性溃疡或任何缓慢愈合的溃疡或与糖尿病病状相关联的皮肤或器官损伤。根据本发明，所治疗或预防的不希望的副作用优选地是与眼睛和/或视力相关的不希望的副作用诸如白内障。

还可以为了患有糖尿病相关或相关联的疾病或病症的受试者而利用本发明的治疗方法和用途，这些疾病或病症包括高胰岛素血症、血脂障碍、高胆固醇血症、葡萄糖耐量减低、高血压、心血管疾病、糖尿病心肌病、糖尿病心律失常(diabetic cardiacdysrhytmia)、动脉粥样硬化、糖尿病肾病、肾小球肾炎、肾小球硬化、肾病综合征、高血压性肾硬化、末期肾脏疾病、微量蛋白尿以及蛋白尿。

如在此所使用的血胰岛素过多症(hyperinsulinemia)或高胰岛素血症(hyperinsulinaemia)是血液中具有过量水平的循环胰岛素的一种病状。也被称为前期糖尿病、胰岛素抵抗性和X综合征，它常见地与女性中的PCOS(多囊卵巢综合征)相关联。血胰岛素过多症经常被误认为是糖尿病或低血糖，而其中的两者均是单独的病状。如果未被监测和未被治疗，血胰岛素过多症可能发展成糖尿病，并且可能在糖尿病发生时仍然存在。如普遍地认为的，血胰岛素过多症不是由糖尿病导致的。血胰岛素过多症可以在一些患者中导致低血糖。

如在此所使用的血脂障碍是对血液中脂质的量的扰乱。在发达国家的社会中，大多数血脂障碍是高脂血症；即，经常由于饮食和生活方式而造成的血液中脂质升高。长期的胰岛素水平升高可以导致血脂障碍。已知O-GlcNAc转移酶(OGT)水平增加导致血脂障碍。

葡萄糖耐量减低(IGT)是与胰岛素抵抗性和心血管病理风险增加相关联的血糖代谢障碍的一种前期糖尿病状态。IGT可以早于II型糖尿病许多年。

如在此所使用的高血压(HTN)或血压过高是动脉中的血压升高的一种慢性医学病状。它与低血压是相对的。它被分类为原发性(主要的)或继发性。约90％-95％的病例被称为“原发性高血压”，其是指不能找到医学病因的高血压。剩余的5％-10％的病例(继发性高血压)是由影响肾、动脉、心脏或内分泌系统的其他病状导致的。持续性高血压是中风、心脏病发作、心力衰竭以及动脉瘤的风险因子之一，并且是慢性肾衰竭的主要病因。

如在此所使用的心肌病是心肌功能的衰退，例如在冠状动脉粥样硬化和高血压不存在的情况下，心室机能障碍在患有糖尿病的患者中出现时所诊断的临床或亚临床病状。它在功能上的特征在于在舒张机能障碍存在的情况下的心室扩张、肌细胞肥大、间质纤维化以及降低的或保留的收缩功能。

动脉粥样硬化(也被称为动脉硬化性血管病或ASVD)是由于脂肪材料诸如胆固醇的积累而导致动脉壁增厚的一种病状。它是影响动脉血管的综合征，在动脉壁中的一种慢性炎症应答，其主要是由于巨噬细胞型白细胞的累积而造成的，并且在没有通过功能性高密度脂蛋白(HDL)将来自巨噬细胞的脂肪和胆固醇的充分移除的情况下被低密度脂蛋白(带走胆固醇和甘油三酸酯的血浆蛋白)促进。它通常被称为动脉的硬化或生垢(furring)。它是由动脉内多个斑块的形成导致的。

糖尿病肾病(肾病糖尿病)，也被称为金-威综合征(Kimmelstiel-Wilsonsyndrome)或结节性糖尿病肾小球硬化和毛细管间肾小球肾炎，是由肾小球中毛细管的血管病导致的一种渐进性肾脏疾病。它的特征在于肾病综合征和弥漫性肾小球硬化。它是由于长期存在的糖尿病造成的，并且在许多西方国家中是透析的主要适应症。

肾小球肾炎，也被称为肾小球性肾炎(GN)，是特征在于肾脏中的肾小球或小血管的炎症的一种肾疾病。它可能与单独的血尿和/或蛋白尿(血液和/或蛋白存在于尿液中)一起呈现；或者以肾病综合征、肾炎综合征、急性肾衰竭或慢性肾衰竭形式呈现。它们被归类为若干种不同的病理模式，这些病理模式被宽泛地分组到非增殖性类型或增殖性类型中。原发性病因是肾所固有的病因，而继发性病因与某些感染(细菌性、病毒性或寄生性病原体)、药物、全身病症(SLE、血管炎)或糖尿病相关联。

肾小球硬化是指肾脏中的肾小球的硬化。它是描述肾小球的瘢痕化的通用术语。蛋白尿(大量蛋白质在尿液中)是肾小球硬化的体征之一。糖尿病是肾小球硬化的常见病因。

肾病综合征是一种非特异性病症，其中肾受损，使得其将大量蛋白质(至少3.5克蛋白尿/天/1.73m²体表面积)从血液泄漏到尿液中。

受肾病综合征影响的肾脏在足细胞中具有小孔，这些小孔足够大而允许蛋白尿(并且因此允许低白蛋白血，因为一些蛋白质白蛋白从血液进入到尿液)，但是并不足够大而允许细胞通过(因此没有血尿)。相比之下，在肾炎综合征中，RBC穿过孔，从而导致血尿。糖尿病经常是肾病综合征的基础病因。

高血压性肾病或高血压性肾硬化或肾性高血压病是关于由于慢性血压过高而产生对肾的损伤的一种医学病状。在肾脏中，由于良性高动脉压，透明素(粉色的、无定形的均质物质)在小动脉和细动脉的壁中累积，从而产生其壁的增厚和管腔的变窄-透明性小动脉硬化。随之发生的缺血产生小管萎缩、间质纤维化、肾小球改变(具有不同程度的透明化的更小的肾小球-从轻微到肾小球硬化)以及肾小球周围纤维化。在晚期阶段，肾衰竭发生。功能性肾单位具有扩张的小管，经常在管腔中具有透明管型。经常与高血压性肾病相关联的另外的并发症包括引起蛋白尿和血尿的肾小球损伤。

末期肾疾病是慢性肾脏疾病(CKD)的晚期阶段，也被称为慢性肾疾病。CKD表现为经数月或数年的时间段的肾脏功能的渐进性丧失。恶化的肾功能的症状不是特定的，并且可能包括总体上感觉不好并且经历食欲降低。最近的专业准则以五个阶段对慢性肾脏疾病的严重性进行分类，其中阶段1是最轻微的并且通常导致很少症状，并且阶段5是严重的疾病，如果不进行治疗则具有较短的期望寿命。阶段5CKD也被称为建立的慢性肾脏疾病，并且与现在更新的术语末期肾疾病(ESRD)、慢性肾脏衰竭(CKF)或慢性肾衰(CRF)是同义的。

如上所指出的，本发明的方法可以用于治疗任何免疫相关病症。应当注意，“免疫相关病症”是一种下述病状，该病状通过对免疫系统的活化或抑制而与受试者的免疫系统相关联，或可以通过靶向受试者的免疫应答诸如适应性或先天性免疫应答的某一组分来治疗、预防或诊断。这样的病症可以是炎性疾病或自身免疫性疾病中的任一种。

根据一个具体实施例，本发明的方法可以特别适于治疗炎性疾病或炎性相关病状。术语“炎性疾病”或“炎性相关病状”是指可以从至少一种炎性参数，例如炎性细胞因子IFN-γ和IL-2的诱导的降低获益的任何疾病或病理学上的病状。该病状可以(原发性地)由炎症导致，或者炎症可以是由另一种生理原因导致的疾病的表现中的一种。

可以通过本发明的方法和试剂盒治疗的其他免疫相关病症的实例包括但不限于溃疡性结肠炎、克罗恩病、肠易激疾病(IBD)、斑秃、红斑狼疮、强直性脊柱炎、美尼尔病(Meniere's disease)、抗磷脂综合征、混合性结缔组织病、自身免疫性阿狄森病(autoimmune Addison's disease)、多发性硬化症、自身免疫性溶血性贫血、重症肌无力、自身免疫性肝炎、寻常性天疱疮、贝切特氏病(Behcet's disease)、恶性贫血、大疱性类天疱疮、结节性多关节炎、心肌病、多软骨炎、疱疹样皮炎、多腺性综合征、慢性疲乏综合症(CFIDS)、风湿性多肌痛、慢性炎性脱髓鞘、多发性肌炎和皮肌炎、慢性炎性多神经病变、原发性无丙种球蛋白血症、丘-施二氏血管炎(Churg-Strauss syndrome)、原发性胆汁性肝硬化、瘢痕性类天疱疮、银屑病、CREST综合征、雷诺氏现象、冷凝集素病、莱特尔氏综合征、风湿热、盘状狼疮、类风湿关节炎、原发性混合型冷球蛋白血症、结节病、纤维肌痛、硬皮病、格雷夫斯氏病(Grave's disease)、修格兰氏综合征(Sjogren's syndrome)、格林-巴利综合征(Guillain Barre disease)、僵人综合征、桥本氏甲状腺炎(Hashimoto'sthyroiditis)、大动脉炎(Takayasu arteritis)、特发性肺纤维化、颞动脉炎/巨细胞动脉炎、特发性血小板减少性紫癜(ITP)、IgA肾病、葡萄膜炎、血管炎、扁平苔癣以及白癜风。在此所述的金属-诺卡胺素络合物可以被给予至受试者以治疗或预防与与以上疾病相关联的异常的或不想要的免疫应答相关联的病症。

本发明进一步涵盖本发明的组合物用于治疗与以上所述的病症相关的任何病状的用途。应当理解，可互换使用的术语“相关联的”和“相关的”在此涉及病理时，意指疾病、病症、病状或任何病理，其中至少一种共有因果关系、以比巧合频率更高的频率共同存在，或者其中至少一种疾病、病症、病状或病理导致第二疾病、病症、病状或病理。

此外，应当理解，对于本发明的这些络合物存在大量潜在的临床应用，包括但不限于治疗肌萎缩性侧索硬化症、与年龄相关的黄斑变性、白内障、败血症、伤口愈合、由于暴露于化学试剂、热或冷而产生的损伤、缺血和再灌注损伤、中风、电离辐射损伤、与地中海贫血和血色素沉着症相关联的损伤以及威尔逊病(Wilson disease)。

此外，应当注意，在某些实施例中，本发明的方法可以适用于治疗与IL-1α水平的升高相关联的任何病症。此类病症的实例包括但不限于以下中的任一种：败血症、类风湿关节炎、克罗恩病、炎症性肠病、心肌梗塞、冠状动脉病、动脉粥样硬化、炎性心肌病、心脏肥大、骨关节炎、CAPS、施尼茨勒氏综合征、强直性脊柱炎、系统性红斑狼疮、家族性地中海热、全身发作幼年特发性关节炎、穆-韦综合征(Muckle-Wells syndrome)、痛风、假痛风、2型糖尿病、银屑病关节炎、银屑病、反合成酶综合征、膝前十字韧带撕裂、复发性多软骨炎、手部血色素沉着症相关关节炎、慢性复发性多病灶性骨髓炎、手部侵蚀性骨关节炎、心力衰竭、糖尿病诱导的心肌病、郁积型骨髓瘤、巨细胞动脉炎、干眼病、代谢综合征、化脓性汗腺炎、痤疮、贝切特氏病(Behcett's disease)、布劳综合征(Blau syndrome)/肉芽肿性关节炎、甲羟戊酸激酶缺乏症、马吉德综合征(Majeed syndrome)、过敏性紫癜、特发性复发性心包炎、巨噬细胞活化综合征、斯威特氏综合征(Sweet’s syndrome)/嗜中性粒细胞皮肤病、嗜中性粒细胞性脂膜炎、埃德海姆-切斯特(Erdheim–Chester)/组织细胞增多症、多中心卡斯尔曼氏病(multicentric Castleman disease)、耶斯纳-卡诺夫病(Jessner–Kanofdisease)、川崎氏病(Kawasaki disease)、慢性肉芽肿性疾病中的结肠炎、PAPA综合征、SAPHO综合征、肝细胞癌、胰腺导管腺癌、纤维肉瘤、1型糖尿病、中风、急性脑损伤、阿尔茨海默氏病、结肠直肠癌、乳腺癌、黑色素瘤、神经胶质瘤、前列腺癌、宫颈癌、肺癌以及膀胱癌、佩吉特氏病(Paget's disease)、肿瘤坏死因子相关性周期性综合征。

在其他实施例中，本发明的方法可以适用于治疗与TNF-α水平的升高相关联的任何病症。非限制性实例包括感染性休克、炎症性肠病、溃疡性结肠炎、幼年特发性关节炎、大动脉炎、病理性角膜血管生成和淋巴管生成、结节病、淀粉样变性、术后认知机能障碍、卵巢癌、中风、类风湿关节炎、强直性脊柱炎、克罗恩病、炎症性肠病、银屑病、银屑病关节炎、小儿克罗恩病、小儿溃疡性结肠炎、结肠直肠癌、特发性肺纤维化、囊性纤维化、色素性视网膜炎、胰腺癌、佩吉特氏病、肿瘤坏死因子相关性周期性综合征。

此外，应当注意，在某些实施例中，本发明的方法可以适用于治疗与IL-6水平的升高相关联的任何病症。此类病症包括类风湿关节炎、克罗恩病、炎症性肠炎、溃疡性结肠炎、齿根骨膜炎、肺炎、特发性肺纤维化、抑郁症、结肠直肠癌、葡萄膜炎、卡斯尔氏曼氏病、全身性幼年特发性关节炎、系统性红斑狼疮、系统性硬化病、多发性肌炎、血管炎综合征、脊柱关节炎、复发性多软骨炎、获得性A型血友病、自身免疫溶血性贫血、成人发作斯蒂尔氏病(adult-onset Still's disease)、淀粉样蛋白A淀粉样变性、风湿性多肌痛、缓解性血清阴性对称性滑膜炎伴凹陷水肿、贝切特氏病、植物抗宿主疾病、肿瘤坏死因子相关性周期性综合征、肺动脉高血压、特异性皮炎、坐骨神经痛、复发性多软骨炎、2型糖尿病、肥胖症、格雷夫斯氏眼病(Grave's ophthalmopathy)、类风湿关节炎中的心血管疾病、巨细胞动脉炎、非ST升高的心肌梗塞、精神分裂症、卵巢癌、骨纤维性结构不良、原发性修格兰氏综合征、强直性脊柱炎、埃德海姆切斯特病、ANCA-相关性脉管炎、视神经脊髓炎、慢性肾小球肾炎、大动脉炎、前列腺癌、肾细胞癌、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、细胞因子释放综合征、李氏杆菌病、哮喘、COPD、银屑病、多发性硬化症、骨关节炎、败血症、间质性肺病、眼内炎症、子宫内膜异位、阿耳茨海默氏病、脑外伤、乳腺癌、胰腺癌、AIDS相关病理、皮肤和系统性浆细胞病、胃癌、宫颈癌、黑色素瘤、肝细胞癌、白血病、成神经胶质细胞瘤、子宫癌(uteral carcinoma)、囊性纤维化病、口腔癌、佩吉特氏病。

在某些实施例中，本发明的方法可以适用于治疗与IL-17水平的升高相关联的任何病症。此类病症的实例可以包括炎症性肠病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、银屑病、类风湿关节炎、银屑病关节炎、强直性脊柱炎、多发性硬化症、哮喘、结肠直肠癌、肺癌、肝细胞癌、肝纤维化、食管鳞状细胞癌、成神经胶质细胞瘤、卵巢癌、乳腺癌、黑色素瘤、胃癌、头颈癌、鼻咽癌、COPD、SAPHO综合征、肺纤维化、心脏纤维化、肾纤维化、佩吉特氏病、骨肉瘤、胃溃疡、膀胱癌、全身性幼年特发性关节炎、系统性红斑狼疮、气道嗜中性白血球增多、囊性纤维化、过敏性鼻炎、斑秃、特异性皮炎、皮肤T淋巴细胞瘤、肥大细胞增生症。

如在此所使用，术语“方法”是指用于完成给定任务的方式、手段、技术以及程序，包括但不限于化学、药理学、生物学、生物化学以及医学领域的从业者已知的或容易由已知方式、手段、技术以及程序来开发的那些方式、手段、技术以及程序。

如在此所使用，“疾病”、“病症”、“病状”等在它们涉及受试者的健康时，可互换使用并且具有归于此类术语中的每一个和所有的意义。

如在此所使用的术语“治疗”是指给予治疗有效量的本发明的组合物，该治疗有效量有效于地改善与疾病相关联的不希望的症状、在此类症状发生之前预防其表现、减慢该疾病的进展、减慢症状的恶化、增强缓解期的起效、减慢在疾病的渐进性慢性阶段中导致的不可逆损伤、延迟所述渐进性阶段的开始、减轻严重性或治愈疾病、提高存活率或使得更快地恢复、或防止疾病发生或以上各项中的两个或更多个的组合。

用于在此所披露的目的的“有效量”通过可以在本领域中已知的此类考虑确定。该量必须有效地实现如上所述的希望的治疗性作用，尤其取决于有待治疗的疾病的类型和严重性以及治疗方案。有效量典型地在适当设计的临床试验(剂量范围研究)中确定，并且精通于本领域的个人将知道如何适当地实施此类试验来确定有效量。如通常已知的，有效量取决于各种因素包括在身体内的分布概况、各种药理参数诸如在身体中的半衰期、不希望的副作用(如果有的话)、诸如年龄和性别的因素，等等。

更确切地，可以给予含有本发明的金属-诺卡胺素络合物的组合物或其任何组合、混合物或鸡尾酒式混合物(cocktail)以用于预防性和/或治疗性治疗。在治疗性应用中，以足以治愈或至少部分地抑制病状及其并发症的量向受炎症或免疫相关病症、或确切地与促炎细胞因子水平的升高和抗炎细胞因子水平的降低中的至少一者相关联的病症影响的患者给予组合物。足够实现此目的的量被定义为“治疗有效剂量”。用于此用途的有效量取决于病状的严重性和患者自身的免疫系统的总体状态，但是其通常是在从约0.01至约10,000mg/kg的范围内，确切地是约0.01至约1000、500、250、100、90、80、70、60、50、40、30、20、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1、0.1mg/kg。应当注意，在某些实施例中，有效量可以是1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10mg/kg或更大。在又一些另外的实施例中，有效量可以是2.5mg/kg的本发明的络合物或其任何组合。可以使用由治疗医师选择的剂量水平和模式来实施按每日、每周或每月计划的单次或多次给予。更具体的实施例涉及每周使用典型地2-3个剂量。

术语“预防”是指防止以下项或降低以下项的风险：生物或医学事件的发生、确切地与促炎细胞因子水平的升高和抗炎细胞因子水平的降低中的至少一者相关联的病症的发生或复发，该发生或复发是为研究人员、兽医、医学医生或其他临床医生力求在组织、系统、动物或人类中所要防止的，并且术语“预防有效量”旨在意指实现此目标的药物组合物的量。因此，在具体实施例中，本发明的方法在预防，即防止与感染性疾病相关联的病状中是特别有效的。因此，被给予所述组合物的受试者不太可能经历与所述感染性病状相关联的症状，这些症状也不太可能在过去已经经历过其的受试者中复发。

如在此所提及的术语“改善”涉及通过根据本发明的组合物和方法所带来的症状的减少和受试者病状的改善，其中所述改善可以下述形式表现：对与在此所述的免疫相关病症相关联的病理过程的抑制、这些病理过程强度的显著减小或患病受试者生理状态的改善。

术语“抑制”以及此术语的所有变型旨在涵盖对病理学症状的过程和恶化或病理学过程进展的限制或阻止，所述病理学过程症状或过程是相关联的。

术语“消除”涉及任选地根据以下所述的本发明方法实质性地根除或去除病理学症状以及可能的病理学病因。

术语“延迟”、“延迟发作”、“阻滞”以及其所有的变型旨在涵盖减慢病理学病症或感染性疾病以及其症状的过程和/或恶化、减慢它们的进展、进一步的恶化或发展，以便比没有根据本发明的治疗的情况出现得较晚。

更确切地，治疗或预防包括预防或推迟疾病的发展、预防或推迟症状的发展和/或降低将要或预期发展的此类症状的严重性。这些进一步包括改善现有的症状、预防另外的症状以及改善或预防症状的基础代谢病因。应当理解，如在此所提及的术语“抑制”、“缓和”、“减少”或“衰减”涉及阻滞、约束或减少过程的约1％至99.9％，确切地约1％至约5％、约5％至10％、约10％至15％、约15％至20％、约20％至25％、约25％至30％、约30％至35％、约35％至40％、约40％至45％、约45％至50％、约50％至55％、约55％至60％、约60％至65％、约65％至70％、约75％至80％、约80％至85％、约85％至90％、约90％至95％、约95％至99％、或约99％至99.9％中的任一者。

本发明涉及治疗有需要的受试者或患者。“患者”或“有需要的受试者”意指可以受以上提及的病原体感染的和需要在此所述的预防性(preventive/prophylactic)试剂盒、系统和方法的任何生物，包括人类、家养的和非家养的哺乳动物诸如犬和猫受试者、牛、猿、马和鼠受试者、啮齿动物、家禽、水产养殖动物、鱼以及外来的水族箱鱼。应当理解，所治疗的受试者还可以是任何爬行动物或动物园动物。更确切地，本发明的试剂盒和方法旨在用于预防哺乳动物中的病理学病状。“哺乳动物受试者”意指需要所提出的疗法的任何哺乳动物，包括人类、马、犬和猫受试者，最确切地是人类。应当注意，确切地，在非人类受试者的情况下，本发明的方法可以使用经由注射、饮水、饲料、喷雾、口腔灌洗以及直接到有需要的受试者的消化道中的给予来执行。

本发明的另一个方面涉及诺卡胺素与至少一种金属的络合物。

在一些实施例中，诺卡胺素与至少一种金属的络合物，其中至少一种金属选自由镧系元素、锕系元素、后过渡金属或过渡金属组成的组。

在另一个实施例中，本发明涉及诺卡胺素与至少一种金属的络合物，其中该金属选自由锌、镓、铝、银、金、钴、钼以及钒组成的组。

在另外的实施例中，诺卡胺素与至少一种金属的络合物，其中该金属选自由Zn²⁺、Ga³⁺、Al³⁺、Ag⁺以及Au³⁺、Co³⁺组成的组。

在具体实施例中，该络合物是诺卡胺素与Zn²⁺的。

在又一些其他实施例中，本发明的络合物可以是诺卡胺素与Ga³⁺。

在一些具体实施例中，本发明涉及一种在治疗、预防、抑制、减少、消除、防止或延迟有需要的受试者中的病理学病状或病症的发作的方法中使用的诺卡胺素与至少一种金属的组合物。

作为另一方面，本发明还涉及将单独的药物组合物组合成试剂盒形式。该试剂盒包括至少两种单独的药物组合物：(i)呈其盐、酯和酰胺中的任何形式的镧系元素、锕系元素、后过渡金属或过渡金属中的至少一种或其任何组合，和药学上可接受的载体或稀释剂，以及(ii)诺卡胺素或其药学上可接受的衍生物。

在又一些具体实施例中，包含在本发明的试剂盒中的金属可以是锌、镓、铝、银、金、钼以及钒中的至少一种。

在一些具体实施例中，本发明的试剂盒可以包括锌。在又一些具体实施例中，本发明的试剂盒可以包括镓。此外，在一些实施例中，本发明的试剂盒可以包括锌和镓。

更确切地，该试剂盒包括用于包含两种单独的组合物的容器装置，诸如分隔瓶或分隔式箔包。然而，单独的组合物也可以包含在单个的、未分隔的容器中。典型地，该试剂盒包括用于给予单独组分的使用说明书。当单独组分优选以不同的剂型(例如，肠胃外的相对于局部的)给予、以不同的剂量间隔给予时，或者当开处方的医师希望滴定组合中的各个组分时，该试剂盒形式是特别有利的。

本发明的试剂盒可以在分开的容器中进一步包括酸。在一些实施例中，该酸可以选自以下列表，该列表由以下各项组成：1-羟基-2-萘甲酸、2,2-二氯乙酸、2-酮戊二酸、4-乙酰氨基苯甲酸、4-氨基水杨酸、乙酸、具有任何取代的烷烃磺酸、烯烃磺酸、炔烃磺酸、己二酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟脑酸、樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、异丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸或其衍生物、或取代的烃基磺酸，例如羟基-、烷氧基-、酰氧基-、烷氧羰基-、卤素-、芳基-或氨基-取代的烷基磺酸、烟酸、硝酸、油酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、磷酸、丙酸、焦谷氨酸、水杨酸、癸二酸、亚硒酸、硒酸、或先前所提及的磺酸化合物的任何亚硒酸或硒酸类似物、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、硫氰酸、十一碳烯酸。

在一些实施例中，本发明的试剂盒能够使活性成分用于治疗、预防、抑制、减少、消除、防止或延迟有需要的受试者中的病理学病状或病症的发作的方法中。

在又一些其他具体的和非限制性实施例中，本发明进一步提供用于降低患有伴随升高的IL-1α、TNF-α、IL-6以及IL-17的病症的受试者中的IL-1α、TNF-α、IL-6以及IL-17的水平的治疗性方法，这些治疗性方法包括向患有如上概述的病理学病状或疾病的受试者给予任选地与至少一种治疗性化合物组合的治疗有效量的本发明试剂盒的步骤。应当进一步注意，本发明的试剂盒或其任何组分的应用可以形成用于患有如上概述的病理学病症或疾病的患者的互补性治疗方案。

此外，本发明的试剂盒和络合物以及其任何组分可以作为单个日剂量或多个日剂量，优选地每1至7天一次施加。确切地考虑的是，这种施加可以每日一次、两次、三次、四次、五次或六次进行，或者可以每天一次、每2天一次、每3天一次、每4天一次、每5天一次、每6天一次、每周一次、每两周一次、每三周一次、每四周一次或甚至每月一次执行。本发明的试剂盒或其任何组分的施加可以持续一天、两天、三天、四天、五天、六天、一周、两周、三周、四周、一个月、两个月、三个月或甚至更久。确切地，施加可以持续从一天至一个月。更确切地，施加可以持续从一天至7天。

本发明进一步涉及一种用于产生诺卡胺素与钴或钼、或钒包括氧钒根形式、或锌、或铝或银或金的络合物的方法。该方法包括：在以下所述的条件下，将诺卡胺素(去铁胺E)与钴或钼、钒、锌、银或金混合，所含有的金属与诺卡胺素的分子比率是在1:0.01至1:100之间，典型地是1:1。

关于一个选择，混合是在例如来自由以下各项组成的列表的酸的存在下进行的：1-羟基-2-萘甲酸、2,2-二氯乙酸、2-酮戊二酸、4-乙酰氨基苯甲酸、4-氨基水杨酸、乙酸、具有任何取代的烷烃磺酸、烯烃磺酸、炔烃磺酸、己二酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟脑酸、樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、异丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸或其衍生物、或取代的烃基磺酸，例如羟基-、烷氧基-、酰氧基-、烷氧羰基-、卤素-、芳基-或氨基-取代的烷基磺酸、烟酸、硝酸、油酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、磷酸、丙酸、焦谷氨酸、水杨酸、癸二酸、亚硒酸、硒酸、或先前所提及的磺酸化合物的任何亚硒酸或硒酸类似物、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、硫氰酸、十一碳烯酸，酸与诺卡胺素的分子比率是在1:0.01至1:100之间，典型地是1:1。

本发明的另一个方面涵盖了一种制备诺卡胺素与金属离子的络合物的方法，该方法包括：使诺卡胺素与选自下组的金属离子接触，该组由以下各项组成：钴或钼、或钒包括氧钒根形式、或锌、铝、银或金，所含有的金属与诺卡胺素的分子比率是在1:0.01至1:100之间。

在一些选择性实施例中，金属与诺卡胺素的化学计量比是1:1。

在一些实施例中，用于产生诺卡胺素与金属离子的络合物的方法包括以下步骤：在酸存在下将诺卡胺素(去铁胺E)与选自下组的金属离子接触，该组由以下各项组成：钴、钼、钒包括氧钒根形式、锌、铝、银或金，其中诺卡胺素和/或金属离子是呈盐的形式，所含有的金属与诺卡胺素的分子比率是在1:0.01至1:100之间，其中该酸选自下组，该组由以下各项组成：1-羟基-2-萘甲酸、2,2-二氯乙酸、2-酮戊二酸、4-乙酰氨基苯甲酸、4-氨基水杨酸、乙酸、具有任何取代的烷烃磺酸、烯烃磺酸、炔烃磺酸、己二酸、抗坏血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟脑酸、樟脑-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、异丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸或其衍生物、或取代的烃基磺酸，例如羟基-、烷氧基-、酰氧基-、烷氧羰基-、卤素-、芳基-或氨基-取代的烷基磺酸、烟酸、硝酸、油酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、磷酸、丙酸、焦谷氨酸、水杨酸、癸二酸、亚硒酸、硒酸、或先前所提及的磺酸化合物的任何亚硒酸或硒酸类似物、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、硫氰酸、十一碳烯酸，酸与诺卡胺素的分子比率是在1:0.01至1:100之间。

本发明的其他目的和优点将随着描述的进行而变得清楚。虽然以上描述仅详细描述了本发明的几个具体实施例，但是本领域的技术人员应当理解，本发明不限于此，并且在不偏离在此所披露的本发明的范围和精神或超过权利要求书的范围的情况下，其他形式的变型和细节可以是可能的。

如由权利要求书所限定的本发明、其内容应当被解读为包括在说明书的披露内容内，并且现在将通过举例的方式参考附图进行描述。

除非另外指明，在此所使用的所有科学和技术术语具有本领域所普遍使用的意义。在此所提供的定义是为了有助于理解在此频繁使用的某些术语，并且不意味着限制本披露的范围。

如在此所使用，术语“约”是指±10％。术语“包括(comprises)”、“包括(comprising)”、“包含(includes)”、“包含(including)”、“具有(having)”和它们的动词变化意指“包括但不限于”。术语“主要由……组成”意指组合物、方法或结构可包括另外的成分、步骤和/或部分，但条件是这些另外的成分、步骤和/或部分不实质性地改变所要求保护的组合物、方法或结构的基本特征和新颖特征。

如在此所使用的术语“约”指示可以偏离多至1％，更确切地5％，更确切地10％，更确切地15％并且在一些情况下多至20％而高于或低于所提及的值的值，偏差范围包括整数值，并且如果适用的话，还包括非整数值，从而构成连续的范围。如在此所使用，术语“约”是指±10％。

贯穿本说明书以及以下的实例和权利要求，除非本文另有要求外，词语“包括”以及变化形式如“包括(comprises)”和“包括(comprising)”将理解为隐含包括一个陈述的整体或步骤或一组整体或步骤，但不排除任何其他整体或步骤或任何其他组整体或步骤。

应当注意，本发明的不同实施例可以呈现为一个范围格式。应当理解，在范围格式内的描述仅为了方便和简洁，并且不应当解释为是对本发明的范围的硬性限制。因此，一个范围的描述应当被认为是具有确切披露的所有可能的子范围以及此范围内的单独数值。例如，一个范围诸如从1至6的描述应当被认为是具有确切披露的子范围，诸如从1至3、从1至4、从1至5、从2至4、从2至6、从3至6等，以及此范围内的单独数字，例如1、2、3、4、5和6。无论范围的宽度为多少，此均适用。每当在此指示数值范围时，意味着包括所指示范围内的任何引用数字(分数或整数)。短语第一指示数字与第二指示数字“之间的变动范围/范围”以及第一指示数字“至”第二指示数字的“变动范围/范围”在此可互换使用，并且意味着包括该第一指示数字和第二指示数字以及在此之间的所有分数和整数。

如在此所使用，术语“方法”是指用于完成给定任务的方式、手段、技术以及程序，包括但不限于化学、药理学、生物学、生物化学以及医学领域的从业者已知的或容易由已知方式、手段、技术以及程序来开发的那些方式、手段、技术以及程序。

应当理解，出于清楚的目的描述于单独实施例的背景下的本发明的某些特征还可以按组合形式提供于单个实施例中。相反地，为简洁起见，在单个实施例的背景下描述的本发明的不同特征也可以单独地或以任何适合的子组合或在适当情况下提供于本发明的任何其他描述实施例中。在不同实施例的背景下描述的某些特征不应当认为是那些实施例的必需特征，除非实施例在没有那些要素的情况下是无效的。

如上文描绘的并且如下文权利要求书部分中要求保护的本发明的不同实施例和方面在以下实例中找到实验支持。

在此披露和描述了本发明，应当理解的是本发明不限于在此披露的具体实例、方法步骤和组合物，因为此类方法步骤和组合物可以稍有变化。还应当理解的是，在此所使用的术语用于仅描述具体实施例的目的，并且不旨在是限制性的，因为本发明的范围将仅由所附的权利要求书及其等同物限制。

必须注意的是，如在本说明书和所附权利要求中所使用，单数形式“一个/一种(a/an)”和“该(the)”包括复数指代物，除非内容另外清楚地指明。

以下实例是由发明人在实施本发明的各方面中所采用的代表性技术。应当理解，虽然这些技术对用于实践本发明的优选实施例是示例性的，但是根据本披露，本领域的技术人员将认识到在不偏离本发明的精神和意图范围的情况下，可以做出大量修改。

实例

无需进一步详细阐述，认为本领域的普通技术人员可以使用前述说明在最大程度上利用本发明。因此，以下优选具体实施例应当被解释为仅是说明性的，并且不以任何方式限制要求保护的发明。

在此未具体描述的本领域已知的标准分子生物学实验方案通常基本如萨姆布鲁克(Sambrook)等人，分子克隆：实验室手册(Molecular cloning:A laboratory manual)，冷泉港实验室，纽约(1989,1992)中和奥苏贝尔(Ausubel)等人，当代分子生物学实验技术(Current Protocols in Molecular Biology)，约翰威利父子公司(John Wiley andSons)，巴尔的摩，马里兰州(1988)中进行。

在此未具体描述的本领域已知的标准有机合成实验方案通常基本如有机合成(Organic syntheses)：第1-79卷，编者变化，J.威利公司(J.Wiley)，纽约，(1941-2003)；耶韦特(Gewert)等人，有机合成工作手册(Organic synthesis workbook)，威利-VCH公司(Wiley-VCH)，魏恩海姆(Weinheim)(2000)；史密斯和马奇(Smith&March)，先进有机化学(Advanced Organic Chemistry)，威利跨学科公司(Wiley-Interscience)；第5版(2001)中进行。

在此未具体描述的本领域已知的标准药物化学方法通常基本如由培格曼出版社出版的由不同作者和编者所著的“综合药物化学(Comprehensive Medicinal Chemistry)”丛书中进行。

无需进一步详细阐述，认为本领域的普通技术人员可以使用前述说明在最大程度上利用本发明。因此，以下优选具体实施例应当被解释为仅是说明性的，并且不以任何方式限制要求保护的发明。

在此未具体描述的本领域已知的标准分子生物学实验方案通常基本如范德科肯K(Vanderkerken K)，多发性骨髓瘤的5T2MM鼠类模型：维护和分析(The 5T2MM murinemodel of multiple myeloma:maintenance and analysis)[分子医学方法(MethodsMol.Med.)113:191-205(2005)；爱泼斯坦J(Epstein J.)SCID-hu骨髓瘤模型分子医学方法(Methods Mol.Med.)113:183-90(2005)]中进行。

动物

^*对于刺激性接触性皮炎(ICD)模型，使用12周大的Balb\c雌性小鼠。刺激性接触性皮炎通过向小鼠右耳表皮施加在丙酮和橄榄油(4:1)中的15μl的1％巴豆油溶液来诱导。

^*对于佐剂诱导的关节炎模型，对六至八周大的雌性近交路易斯大鼠(Lewisrats)(哈兰实验室(Harlan Laboratories)，以色列)在尾巴根部处注射在CFA(Difco)中的1mg结核分枝杆菌(MT)H37Ra(Difco，底特律(Detroit)，密歇根州(MI))

^*对于胶原诱导的关节炎模型，使用九周大的雄性DBA/1小鼠(哈兰实验室，以色列)。对小鼠在尾巴根部处皮下注射乳化在CFA(Difco)中的200μg II型胶原。三周之后，使用相同浓度的II胶原来皮下加强小鼠。

^*对于TNBS结肠炎模型，使用在50％乙醇中的2.5％浓度下的160μL半抗原剂TNBS(西格玛-奥德里奇公司(Sigma-Aldrich)，圣路易斯(St.Louis)，密苏里州(MO))通过皮肤涂抹敏化Balb/C小鼠。

^*斯普拉-道来(Sprague-Dawley)(SD)雄性大鼠，购自哈兰-以色列机构、使用链脲菌素(70mg/kg)处理以用作I型糖尿病模型。

^*8周大的雌性C57BL/6小鼠，通过将乳化在含有5mg/ml热灭活的结核分枝杆菌的完全弗氏佐剂(CFA)中的125μg髓鞘质少突神经胶质细胞糖蛋白35-55肽(MOG35–55)皮下注射到左边腰区中以用作MS模型。

实验程序

诺卡胺素分离

发明人对由迈韦斯等人(18)所描述的应用方法进行修改。将橄榄色链霉菌(S.olivaceus)接种在每升自来水含有4g葡萄糖、10g麦芽提取物、4g酵母提取物、20g琼脂的pH 7.3下的HA培养基上，并且在27℃下孵育10天。将每升去离子水含有20g大豆饼粉和20g甘露醇的pH 7.5下的预培养基接种有橄榄色链霉菌的孢子，并且在旋转的振荡器(120rpm)上在27℃孵育48小时。这些培养物用于生产培养基的接种。基础生产培养基每升去离子水含有：30g蔗糖、3g(NH₄)₂SO₄、0.5g NaCl、0.2g MgSO₄ ^*7H₂O、0.1g CaCl₂-2H₂O、2mgZnSO₄-7H₂O、1g KH₂PO₄100mM N-三(羟甲基)甲基-2-氨基乙磺酸(TES)、5g赖氨酸，并且使用3N NaOH将pH调整至7.5。使用Chelex 100小珠和伴清蛋白将每一个培养基中的铁的浓度降低至纳摩尔水平。将具有生产培养基的烧瓶在与预培养相同的条件下孵育48h。过滤培养基并且将液相冻干。执行用1-丁醇对水相的提取。蒸发丁醇提取物，并且残余物使用乙醚研磨，去除乙醚。然后将残余物溶解在热甲醇中，并且添加活性碳。在-20℃下孵育48h之后，形成沉淀，对该沉淀进行进一步过滤和干燥。使用甲醇与二氯甲烷的混合物作为流动相，通过在硅胶(0.040-0.063mm)上的柱色谱法对所获得的干燥沉淀进行纯化。使用旋转蒸发器干燥洗脱物，并且通过分光光度滴定法(λ＝435nm)测试所得到的诺卡胺素的纯度。通过质谱法对诺卡胺素进行鉴定，其与购自亚历克西斯生物化学公司(Alexis Biochemicals)(圣地亚哥(San Diego)，加利福尼亚州(CA)，美国)的诺卡胺素相同。

锌-诺卡胺素络合物制备-方法I

为了获得锌-诺卡胺素络合物以用于结构/化学研究，制备氯化锌和诺卡胺素的等摩尔水溶液。为了形成该络合物，将等体积的溶液混合，然后冷却至4℃，使用98％甲酸滴定至pH 2.96，并且然后最初通过25％NH₄OH溶液，并之后使用5％NH₄OH溶液使pH变至7.06。在45℃下将混合物孵育30min，并且冷却至室温。将溶液冻干，并且使用分光光度法(在λ＝435nm下)测量其纯度。假定诺卡胺素到锌的结合是完全的，通过质谱法确认锌-诺卡胺素络合物的形成。

锌-诺卡胺素络合物制备-方法II

为了获得锌-诺卡胺素络合物以用于药学用途，制备氯化锌和诺卡胺素的等摩尔水溶液。为了形成该络合物，在室温下将等体积的溶液混合。为了有助于络合物形成，使用1N HCl使混合物的pH变至3，并且然后使用NaOH溶液使其变至7。在45℃下将混合物孵育30min，并且冷却至室温。将溶液冻干并且在与三价铁反应之后使用分光光度法(在λ＝435nm下)测量其纯度，并且假定锌-诺卡胺素络合物的形成是完全的。

锌-诺卡胺素软膏制备

为了制备含有0.5％锌-诺卡胺素络合物的3g基于凡士林的软膏，使用15mg纯诺卡胺素；为此(称重16.7mg的89.8％纯的诺卡胺素)。在玻璃管中将诺卡胺素粉末溶解在465μlDDW中。添加17μl的192mg/ml Zn²⁺(作为ZnCl₂水溶液)，并且再次对管进行涡旋和超声处理。使用盐酸使pH降低至3，并且然后使用NaOH溶液使其变至7。然后，添加135μl吐温80。对管进行涡旋2分钟并且进行超声处理。在单独的玻璃管(管B)中，在预加热至65℃的水浴上熔化2.4g凡士林，并且将含有锌-诺卡胺素络合物水溶液的管A倒入到管B中。在65℃下搅拌管B15秒，并且将其放置在冰上。获得3g量的油膏。

镓-诺卡胺素络合物制备-方法I

为了获得镓-诺卡胺素络合物以用于结构/化学研究，制备氯化镓(99.999％纯)和诺卡胺素(89.8％纯)的等摩尔水溶液。将等体积的溶液混合，然后冷却至10℃，使用98％甲酸滴定至pH 3.2，并且然后最初通过25％NH₄OH溶液，并之后使用5％NH₄OH溶液使pH变至7.1。在45℃下将混合物孵育30min，并且冷却至室温。将溶液冻干，并且使用分光光度法(在λ＝435nm下)测量其纯度。通过质谱法确认镓-诺卡胺素络合物的形成。

镓-诺卡胺素络合物制备-方法II

为了获得镓-诺卡胺素络合物以用于药学用途，制备氯化镓和诺卡胺素的等摩尔水溶液。在室温下将等体积的溶液混合。使用1N HCl使混合物的pH变至3.2，并且然后使用NaOH溶液使其变至7。在45℃下将混合物孵育30min，并且冷却至室温。将溶液冻干，并且在与三价铁反应之后使用分光光度法(在λ＝435nm下)测量其纯度。

银-诺卡胺素络合物制备

如下制备银-诺卡胺素络合物：将1mmol(203mg)的甲磺酸银溶解在100ml双重蒸馏水(DDW)中。将等量的诺卡胺素(1mmol-600mg)溶解在80ml DDW中。将溶液混合，并且在50℃下，在连续搅拌下将合并溶液在暗处中保持10分钟。然后将pH调整至6.8-7.4。将混合物冷却至室温并且冻干，得到灰白色粉末。

金-诺卡胺素络合物制备-方法I

如下制备金-诺卡胺素络合物：将20μmol的氯化金(作为[HAuCl₄.4H₂O]MW＝412，金含量48％)(8.2mg)溶解在5mlDDW中。将等量的诺卡胺素(20μmole-12mg)溶解在2ml DDW中。将两种溶液混合，使pH变至3，并且在50℃下，在连续搅拌下将合并溶液在暗处中保持10分钟。然后将pH调整至6.8-7.4。将混合物冻干，得到黄色粉末。

金-诺卡胺素络合物制备-方法II

如下制备金-诺卡胺素甲磺酸盐络合物：将20μmol的AuCl₃(6.0mg)和20μmol的甲磺酸钠(2.2mg)溶解在5ml DDW中。将等量的诺卡胺素(20μmol-12.0mg)溶解在1.6ml DDW中。将溶液混合在一起，将pH调整至6.8-7.4，在暗处中，在50℃下，在连续搅拌下保持10分钟，并且冷却至室温。将混合物冻干，得到黄色粉末。

金-诺卡胺素络合物制备-方法III

如下制备金-诺卡胺素甲磺酸络合物：将于3ml DDW中的20μmol的AuCl₃(6.0mg)溶液和于1.6ml DDW中的等量的诺卡胺素(20μmol＝12.0mg)溶液混合。将20μmol的甲磺酸钠(2.2mg)溶解在400μl DDW中，并且与氯化金和诺卡胺素已混合溶液合并。将pH调整至5并且在5下维持20分钟；然后将pH调整至6.8并且在50℃下在连续搅拌下在暗处保持10分钟。然后将其冷却至室温并且冻干，得到黄色粉末。

质谱法分析

通过直接注射在赛默科技公司(Thermo Scientific)TSQ MS装置(马萨诸塞州(MA)，美国)上执行质谱法分析(电喷雾正电离；蒸发器温度200℃；毛细管温度100℃；流量：0.005ml/min(100％水)；注射体积：5μl)。

抗菌作用

在以下类型的致病细菌上评估锌-诺卡胺素的抗菌作用：大肠杆菌(革兰氏阴性)、铜绿假单胞菌(革兰氏阳性)以及金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性)(在耶路撒冷艾因-凯伦地区哈达萨医院(Hadassah-Ein Karem Hospital)中分离)。更确切地，如下执行该实验：将每种细菌菌株在200rpm的通气下，在37℃下在适当的培养基中生长过夜，(EPEC(大肠杆菌))和铜绿假单胞菌在LB肉汤中，金黄色葡萄球菌在BHI肉汤中生长。两种培养基均购自BD公司(新泽西州(NJ)，美国)。在96孔板中执行三倍连续稀释的系列，并且然后在最终0.01的OD₆₀₀下将细菌添加至孔。使用所有三种菌株一式两份地执行实验。预先制备锌-诺卡胺素10mg/ml水溶液；在实验之前，以1:2的比率将其稀释在适当的培养基中，以获得5mg/ml的原液浓度。将此原液进一步稀释至1.7、0.5、0.18、0.06、0.02、0.002、0.0007以及0.0002mg/ml，并且添加至适当的孔。然后将该板在板读出器中孵育24h，并且通过Eon板读出器(伯腾公司(BioTek)，佛蒙特(VE)，美国)每20分钟一次记录OD测量值的动力学。分析每种菌株的细菌生长曲线-所呈现的数据展示出对应于产生以下锌-诺卡胺素浓度0、5、1.7和0.5(单位为mg/ml)的稀释液的重复实验的平均值，其中观察到对生长的影响。

在具有适当培养基的皮氏培养皿上执行细菌生存力实验。

测量细胞因子水平

对样品进行均化处理，并且通过布拉德福程序(Bradford procedure)测量蛋白质浓度。根据制造商实验方案(瑞博奥生物科技公司(RayBiotech)，佐治亚州(GA)，美国)，使用可商购获得的试剂盒通过ELISA方法测定细胞因子的浓度。

刺激性接触性皮炎(ICD)模型

巴豆油诱导的刺激性接触性皮炎(ICD)模型是针对皮肤炎症的良好建立的且广泛使用的模型(19)。使用12周大的Balb\c雌性小鼠。如果没有另外提及，ICD通过向表皮右耳施加在丙酮和橄榄油(4:1)中的15μl的1％巴豆油溶液来诱导。在施加巴豆油前不久，并且在施加巴豆油后3、6、8和10小时使用工程师的测微计测量耳朵厚度。测量耳朵肿胀并且通过从暴露后厚度值中减去暴露前厚度值来表达。

佐剂诱导的关节炎的诱导和临床评价

对六至八周大的雌性近交路易斯大鼠在尾巴根部处注射在CFA(Difco)中的1mg结核分枝杆菌(MT)H37Ra(Difco，底特律，密歇根州)。如下由不知情的观察者每隔一天评价关节炎的严重性(关节炎指数)：0，没有关节炎；1，关节发红；2，关节发红并肿胀。对每只爪的脚踝和跗骨-跖骨关节进行评分。可以获得16的最大得分。

佐剂诱导的关节炎的组织病理学评价

对大鼠进行安乐死，并且将后腿去除并固定在福尔马林中。使用苏木精和曙红(H&E)对关节进行染色并且由专门的兽医病理学家进行评估。

胶原诱导的关节炎的诱导和临床评价

对九周大雄性DBA/1小鼠在尾巴根部处皮下注射乳化在CFA(Difco)中的200μg II型胶原。三周之后，使用相同浓度的II胶原来皮下加强小鼠。每日通过不知情的观察者由卡尺测量后爪和前爪的腿直径来评价关节炎的严重性。作为对照，使用未注射胶原的同样年龄的4只小鼠。健康小鼠的平均值充当“切分点(cut-off)”测量值。从加强注射之后的第5天开始，将具有健康小鼠(以一个爪或多个爪)的平均值以上的得分值的每只小鼠分配到处理组中的一个。

半抗原介导(TNBS)的结肠炎的诱导和临床评价

^*使用在50％乙醇中的2.5％浓度下的160μL半抗原剂TNBS通过皮肤涂抹敏化Balb/C小鼠。在一周之后，经由3.5-法兰西(French)导管直肠内给予在50％乙醇中的120μL的1％TNBS。在直肠内TNBS给予之后3天将小鼠处死。在敏化、直肠内给予时并且在此之后的每一天对动物进行称重，直至处死为止。通过评估体重减轻和结肠组织事后剖析的组织病理学来实施临床评价。

TNBS结肠炎的组织病理学评价

将组织固定在含有4％福尔马林的磷酸盐缓冲生理盐水中并且包埋在石蜡中。使用苏木精和曙红对切片(5μm)进行染色。由不知情的病理学家使用以下0-4的得分系统来评价炎症的程度：0-没有炎症体征；1-低水平的白细胞浸润；2-中等水平的白细胞浸润；3-高水平的白细胞浸润、高血管密度、肠壁增厚；4-透壁浸润、杯状细胞损失、高血管密度、强肠壁增厚、浮肿。

用于MS的实验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)模型

通过以下方式在8周大的雌性C57BL/6小鼠中诱导EAE：将乳化在含有5mg/ml热灭活的结核分枝杆菌的完全弗氏佐剂(CFA)中的125μg髓鞘质少突神经胶质细胞糖蛋白35-55肽(MOG35–55)皮下注射到左边腰区中。在此之后不久以及再在48h时，对小鼠在腹膜内接种0.5ml百日咳毒素(400ng)。7天之后，通过将在CFA中的MOG35–55肽的额外注射液注射到右边腰区中来进一步激发小鼠。使用本发明的诺卡胺素-金属络合物或所指出的适当对照物对小鼠进行处理。

如下评估EVE临床得分：

0-没有临床疾病；

1-尾巴虚弱；

2-足以妨害扶正的后肢虚弱；

3-一条肢麻痹(plagic)；

4-伴随前肢虚弱的截瘫；

5-四肢瘫痪；

6-死亡。

实例1

诺卡胺素、锌-诺卡胺素以及镓-诺卡胺素络合物的比较性质谱(MS)分析

使用MS研究如在实验程序中所述制备的锌-诺卡胺素络合物。在m/z＝663-667周围的峰簇反映了诺卡胺素与锌的天然丰富的同位素的络合物，从而证实了此络合物的存在(图1B)。在m/z＝726.9周围的峰簇表示在实验过程中在MS仪器内形成的Zn₂-诺卡胺素(图1B)。623.21的峰表示在实验过程中在MS仪器内形成的钠-诺卡胺素物质。601.16的峰表示单独诺卡胺素的单一质子化形式(图1A)。

如在实验程序中所述制备镓-诺卡胺素络合物，并且通过MS进行研究。在m/z＝667周围的峰反映了诺卡胺素与2种天然丰富的镓同位素的络合物，从而证实此络合物的存在(图1C)。明显地，所有的诺卡胺素分子结合、大部分结合镓。

实例2

使用刺激性接触性皮炎(ICD)模型的锌-诺卡胺素络合物对皮肤炎症的抗炎作用

在鼠类ICD模型中测试锌-诺卡胺素络合物作为抗炎剂的治疗活性。

为了确认软膏的治疗性作用源于锌-诺卡胺素络合物而不是源于基于凡士林的媒介物，执行适当的初级实验。将十六只小鼠分成2组，每组八只小鼠。将两组小鼠暴露于刺激物，即巴豆油。在暴露3小时之后，第一组使用仅含媒介物(凡士林)的软膏进行处理，而第二组不进行处理。在这些组之间没有观察到差异，从而证实媒介物不提供有益的治疗性作用(图2A)。

为了测试治疗性作用是否源于锌-诺卡胺素络合物，发明人制备了如实验程序中所概述的含有锌-诺卡胺素络合物(0.5％；w/w)的软膏。在暴露于巴豆油3小时之后，用指尖将此络合物施加到小鼠的右耳，并且在以下实验组之间比较此处理的抗炎作用：第1组-暴露于巴豆油但不进行处理-对照组(n＝8)；第2组-暴露并使用含有诺卡胺素(0.5％:w/w)的软膏处理；第3组-暴露并使用含有锌-诺卡胺素(0.5％；w/w)的软膏处理；以及第4组-暴露并使用商业戊酸倍他米松软膏0.1％处理。在t＝0时将动物暴露于刺激物，并且通过在暴露于刺激物之后t＝3h时将对应软膏的指尖施加在暴露的耳朵上来进行处理；在暴露之后t＝6h时，进行检验。

如图2B所示，如所预期的，在暴露于刺激物3小时之后，两个组中的暴露的耳朵肿胀至相同程度。暴露的耳朵使用锌-诺卡胺素软膏的单一处理展示出与使用商业倍他米松软膏所观察到的类似的针对ICD的高功效(图2B)。使用锌-诺卡胺素软膏的处理导致浮肿的快速且明显减少。此外，此实验示出锌-诺卡胺素的治疗性功效与单独的诺卡胺素的治疗性功效之间相比的实质性差异。虽然使用单独的诺卡胺素处理的动物比未处理的动物恢复更好，但是其恢复比在接受锌-诺卡胺素络合物的小鼠中所观察到的恢复慢得多(图2B)。

为了建立锌-诺卡胺素在基于凡士林的软膏中的最佳浓度，在暴露于刺激物之后3h时，将增加浓度的锌-诺卡胺素施加在小鼠的右耳上。此剂量-应答实验的结果显示锌-诺卡胺素络合物在基于凡士林的软膏中的最佳浓度是0.5％(图3)。因此，在接下来的实验中采用此浓度。

实例3

锌-诺卡胺素络合物对炎症晚期的ICD的抗炎作用

发明人接下来测试对炎性过程晚期(暴露之后6h时)的实验性ICD的处理是否仍然是有益处的(图4)。此外，通过在暴露于巴豆油前1h时施加含有软膏的络合物来研究锌-诺卡胺素络合物的预防性作用(图4)。此实验的结果揭示在暴露于刺激物之前1h时使用锌-诺卡胺素软膏的处理几乎消除了炎性损伤作用。此外，显示出了即使在炎性过程的晚期阶段(晚期)施加，锌-诺卡胺素软膏也是有效的(图4)。另外，当在暴露于刺激物之后6h施加处理时，观察到了浮肿快速减少(图4)。

实例4

对使用ICD模型的局部施加的锌-诺卡胺素络合物的全身性治疗性作用的评价

进行此实验以便将局部施加的锌-诺卡胺素软膏的局部作用与此处理提供的可假定的全身性作用相比较。如图5所示，甚至当向对侧耳朵施加锌-诺卡胺素软膏时，由ICD诱导的耳朵浮肿也显著地减少。类似地，当向小鼠尾巴施加软膏时，观察到耳朵浮肿减少。此实验的结果显示锌-诺卡胺素络合物表现出针对刺激性接触性皮炎的明显的治疗性功效，甚至在其不直接施加在受刺激皮肤的位点上的情况下同样如此(图5)。这些发现证实锌-诺卡胺素软膏穿过细胞膜并且到达血流，从而实现治疗性活性浓度的能力高。

实例5

锌-诺卡胺素对促炎细胞因子的影响

为了研究锌-诺卡胺素络合物的内在机制，通过测量在实验方案过程中耳朵中不同促炎细胞因子确切地IL-1α、IL-6、IL-17以及TNF-α的浓度来测试其假定的抗炎活性。在已暴露于巴豆油(在t＝0时)并且至t＝6h时保持不处理的耳朵组织中测量这些细胞因子的浓度。将该浓度与在t＝0时暴露并且在t＝3h时使用络合物处理的耳朵中的在t＝6h的浓度进行比较。

ICD诱导的炎性过程对耳朵组织内的IL-1α、IL-6、TNF-α以及IL-17的浓度的影响在图6A-图6D中示出。更确切地，如下将二十二只小鼠分成四组：第1组(n＝6)-对照小鼠，未暴露于刺激物并且未处理；第2组(n＝6)：暴露于巴豆油，未处理，在暴露之后6h时处死，同时预期炎症达到其峰值；第3组(n＝6)：耳朵暴露于巴豆油(t＝0)并且使用含有锌-诺卡胺素(0.5％)的软膏的指尖局部处理(在t＝6h时)；第4组(n＝4)：耳朵暴露于巴豆油，保持未处理，并且在暴露之后t＝3h时处死，从而评价炎性过程的动力学。根据制造商实验方案(瑞博奥生物科技公司，佐治亚州，美国)，使用可商购获得的试剂盒通过ELISA方法测定细胞因子的浓度。

在暴露于巴豆油之后3h时IL-1α、IL-6、TNF-α的浓度显著地增加，IL-1α增加2.8倍，并且IL-6增加1.8倍，TNF-α增加1.8倍。然而，在暴露于刺激物之后3h时IL-17的浓度变化不是统计学上显著的(图6D)。在暴露于刺激物六小时之后观察到发炎耳朵组织内的每种细胞因子进一步显著增加。增加的幅度是：IL-1α增加7.9倍，IL-6增加3.2倍，TNF-α增加3.7倍，并且IL-17增加2.1倍。使用锌-诺卡胺素(0.5％)的处理缩短了炎性作用，并且将细胞因子的浓度降低至几乎基准水平。

检验炎性细胞因子在暴露于刺激物而没有随后处理的小鼠耳朵中的变化模式，可以看到浮肿的程度在暴露之后t＝6h时达到其峰值。暴露三小时之后，耳朵肿胀至其峰值一半的程度。

在处理之后细胞因子IL-1、IL-6、IL-17以及TNF-α的蛋白质水平的降低为锌-诺卡胺素络合物的抗炎作用提供了另外的证据，并且因此证实了在希望减少促炎细胞因子的病状中使用本发明的金属-诺卡胺素络合物的可行性。

实例6

锌-诺卡胺素络合物对抗炎细胞因子的影响

通过测量小鼠耳朵组织中不同抗炎细胞因子，确切地IL-4、IL-10和IL-13的浓度来测试锌-诺卡胺素络合物的假定抗炎活性。测量这些细胞因子的浓度并且对于每种细胞因子比较这些浓度在实验过程中的变化模式：在基线t＝0时(没有暴露)、在暴露于巴豆油之后t＝3h时、在暴露于巴豆油之后t＝6h时、以及在这些耳朵在暴露于巴豆油之后t＝3h时使用锌-诺卡胺素络合物处理的情况下的暴露于巴豆油之后t＝6h时。耳朵组织内的IL-13在实验方案过程中的水平在图7中示出。更确切地，如下将二十二只小鼠分成四组：第1组(n＝6)-对照小鼠(未暴露并且未处理的)；第2组(n＝6)-耳朵暴露于巴豆油并且未处理，在暴露之后6h时处死，同时预期炎症达到其最大值；第3组(n＝6)：耳朵暴露于巴豆油(在t＝0时)，使用锌-诺卡胺素(0.5％软膏)的指尖进行局部处理(在t＝3h时)；第4组(n＝4)：耳朵暴露于巴豆油(在t＝0时)，未处理，并且在暴露之后t＝3h时处死。附图示出炎性过程的动力学。根据制造商实验方案(瑞博奥生物科技公司，佐治亚州，美国；戴克隆公司(Diaclone)，贝桑松法国)，使用可商购获得的ELISA试剂盒通过ELISA方法测定细胞因子的浓度测定细胞因子的浓度。

在暴露于巴豆油之后3h时所测量的Il-13浓度与基线水平相比较降低了2.5倍(图7)。在暴露于刺激物六小时之后，此降低被部分地修复，但是保持低于基线水平1.4倍。在t＝3h时使用锌-诺卡胺素(0.5％软膏)的处理增强了抗炎作用，如通过使t＝6h时的IL-13水平恢复至其基线水平所指示的。

实例7

锌-诺卡胺素的抗菌特性

锌-诺卡胺素的抗菌特性在图8中示出。在以下类型的致病细菌上评估锌-诺卡胺素的抗菌作用：大肠杆菌(革兰氏阴性)、铜绿假单胞菌(革兰氏阳性)以及金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性)(在耶路撒冷艾因-凯伦地区哈达萨医院(Hadassah-Ein Karem Hospital)中分离)。更确切地，如下执行该实验：每种细菌菌株如下那样生长过夜：EPEC(大肠杆菌)和铜绿假单胞菌在LB肉汤中生长。金黄色葡萄球菌在BHI肉汤中生长。预先制备锌-诺卡胺素10mg/ml水溶液并且在实验之前，以1:2的比率将其稀释在适当的培养基中，以获得5mg/ml的原液浓度。在96孔板中执行三倍连续稀释的系列，并且然后在最终0.01的OD₆₀₀下将细菌添加至孔。使用所有三种菌株一式两份地执行所有实验。然后将该板在板读出器中孵育24h，并且每20分钟一次记录OD测量值的动力学。分析每种菌株的细菌生长曲线-所呈现的数据展示出对应于产生0、5、1.7和0.5mg/ml的锌-诺卡胺素的稀释液的重复实验的平均值，其中观察到生长影响。在具有适当培养基的皮氏培养皿上执行细菌生存力实验。

如图8所示，在1.7mg/ml的锌-诺卡胺素络合物下，关于大肠杆菌、铜绿假单胞菌(轻微抑制)或金黄色葡萄球菌观察到生长抑制。此外，在0.5mg/ml的络合物下观察到金黄色葡萄球菌生长抑制。

杀菌活性(细菌生存力的抑制)实验在具有适当培养基的皮氏培养皿上执行，并且在图9中示出。在5mg/ml的锌-诺卡胺素络合物下，关于大肠杆菌、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌获得杀菌活性。

实例8

锌-诺卡胺素络合物对哮喘的实验模型的作用

使用卵清蛋白(OVA)-诱导的哮喘的鼠类模型执行该实验。如下将三十二只BALB/c雌性8周大小鼠分成4组(n＝8)：(1)对照；(2)患哮喘的，假处理；(3)患哮喘的，使用金属-诺卡胺素络合物腹膜内(i/p)和鼻内(i/n)处理；(4)患哮喘的，使用金属-诺卡胺素络合物仅i/n处理。通过在实验的第0天、第7天和第14天腹膜内100μl注射(10μg卵清蛋白和3mg Al(OH)₃，在0.9％盐水中)使动物对卵清蛋白敏化。在第17天、第19天、第20天和第23天将小鼠进一步暴露于鼻内滴注的OVA(50μl)。

第3组的小鼠在第一次敏化之前的第5天和第1天接受2次i/p注射(每次100μl，含有溶解在盐水缓冲液中的1mg金属-诺卡胺素络合物/kg体重)的预防性处理。随后，在OVA敏化之前的第一天和之后的第一天给予仅含1/3剂量(0.3mg/kg)的i/p注射液，同时在敏化的那天给予1mg/kg体重的剂量。从第15天开始，i/n给予络合物。

基于与第3组类似的给予模式，第4组的小鼠仅通过i/n接受5mg/kg金属-诺卡胺素络合物。根据相同的方案，第1组和第2组中的动物接受盐水注射和鼻内滴注。在实验结束时，在第24天，通过氯胺酮/赛拉嗪混合物的注射使动物安乐死。

在安乐死之后立即执行使用盐水溶液的支气管肺泡灌洗(BAL)。将BAL流体在细胞离心涂片器载玻片(cytospin slide)上固定并染色，并且计数BAL中的嗜酸性粒细胞和嗜中性粒细胞。在灌洗之后，切除肺部并且从肺组织中取样品以用于均浆化。在均浆中定量铁蛋白和铁蛋白结合的铁。

使来自每个组的5只小鼠的肺填充有4％低聚甲醛溶液，并且纵向切成3部分。将中间的三分之一包埋在石蜡中，随机地切片，并且使用曙红-苏木精染色。评价支气管周围的和血管周围的细胞浸润的强度和粘液含量。使用过碘酸希夫(PAS)染色来评价上皮细胞组织转化，并且使用梅森氏三色染色(Masson's trichrome staining)来评估纤维结缔组织的存在。

实例9

锌-诺卡胺素络合物对脊髓损伤模型的作用

使用无限地平线脊髓撞击器研究挫伤脊髓损伤模型。在100ms 70kdyn的力设定下，在麻醉并且固定的小鼠(C57BL 8周大，雄性)的暴露的T12脊椎上执行损伤。使用旷场巴索小鼠量表(BMS)在接下来的42天每日如下评价具有或没有处理的小鼠的创伤后恢复：

0-没有踝关节运动；

1-轻微的踝关节运动；

2-大范围的踝关节运动；

3-在具有或没有重量支撑的情况下的爪的足底放置-或者-

偶然的、频繁的或连续的脚背踏步(dorsal stepping)，但是没有足底踏步(plantar stepping)；

4-偶然的足底踏步；

5-频繁的或连续的足底踏步，不协调-或者-

频繁的或连续的足底踏步，有时协调，爪子在初始接触和离地时旋转(R/R)；

6-频繁的或连续的足底踏步，有时协调，爪子在初始接触时平行(P/R、P/P)-或者-

频繁的或连续的足底踏步，大部分协调，爪子在初始接触和离地时旋转(R/R)；

7-频繁的或连续的足底踏步，大部分协调，爪子在初始接触时平行并且在离地时旋转(P/R)-或者-

频繁的或连续的足底踏步，大部分协调，爪子在初始接触和离地时平行(P/P)，以及严重的躯干不稳定性；

8-频繁的或连续的足底踏步，大部分协调，爪子在初始接触和离地时平行(P/P)，以及轻微的躯干不稳定性-或者-

频繁的或连续的足底踏步，大部分协调，爪子在初始接触和离地时平行(P/P)，以及正常的躯干稳定性并且尾巴下垂或或时而离地时而下垂；

9-频繁的或连续的足底踏步，大部分协调，爪子在初始接触和离地时平行(P/P)，以及正常的躯干稳定性并且尾巴总是上挑；

P-平行的；R-旋转的。

实例10

锌-诺卡胺素络合物对II型糖尿病的嗜沙肥鼠模型的作用

II型糖尿病的特征在于胰岛素抵抗性和渐进性β细胞衰竭。在胰岛素前体分子比例增加的情况下的胰岛素分泌不足是II型糖尿病的普遍特征；这可能由β细胞功能不当和/或β细胞量减少产生。沙鼠，即嗜沙肥鼠(Psammomys obesus)是解决与胰岛素抵抗性和β细胞衰竭在营养上诱导的糖尿病中的作用相关的问题的良好模型。在其由自然的低卡路里饮食变化到卡路里丰富的实验室食物之后，嗜沙肥鼠患上与餐后高血糖相关联的中度肥胖症。一旦餐后高血糖发展起来(非禁食血糖>8.3mmol/l)，糖尿病的进展是非常快速的，从而在启动卡路里丰富的饮食的4-6周内达到该疾病的晚期，其特征在于严重的低胰岛素血症、高脂血症和酮病。嗜沙肥鼠中的高血糖是可逆的，但该疾病的低胰岛素血症晚期除外；血糖量正常可以通过限制卡路里摄入来再次获得。连续的饮食负荷，叠加于其先天胰岛素抵抗性之上，引起胰腺胰岛素储备的耗尽，其中胰岛素前体分子在胰腺和血液中的比例增加。前胰岛素原基因对胰岛素增加的应答不足是糖尿病进展的重要原因。主要的罪魁祸首是不适当的胰岛素产生，结果引发胰岛素储备的耗尽。类似的机制可以在人类II型糖尿病的演变中起作用。高血糖沙鼠倾向于患上微血管病并发症，引起糖尿病肾病和糖尿病诱导的白内障。

将体重为160-190g的三十二只雄性沙鼠(嗜沙肥鼠)分成四组(每组n＝8)-第1组-通过低能量饮食喂养的对照动物；第2-4组-以高能量致糖尿病饮食喂养。每3-5天一次监测血糖水平和体重，进行63天。第1和第2组的动物使用100μl盐水的腹膜内注射处理。第3组的动物使用锌-诺卡胺素(2.5mg/kg)处理，并且第4组使用镓-诺卡胺素(2.5mg/kg)处理。处理在前两周每周给予三次，并且直至实验结束每周给予两次。

实例11

使用糖尿病小鼠模型的金属-诺卡胺素络合物对糖尿病的治疗

受到使用ICD模型所证实的本发明的金属-诺卡胺素络合物对于炎性病状的有益作用的鼓舞，发明人接下来使用小鼠糖尿病模型检验金属-诺卡胺素络合物对于另一种免疫相关病症的潜在有益作用。因此，接下来使用NOD小鼠作为糖尿病模型检验金属-诺卡胺素络合物在预防和/或改善糖尿病中的可能用途。

发明人使用NOD小鼠通过在第8周和第12周静脉内给予本发明的金属-诺卡胺素络合物检验金属-诺卡胺素络合物的作用。对照小鼠接受PBS。每隔一周检测小鼠的血糖水平和体重。

实例12

金属-诺卡胺素络合物对胶原诱导的关节炎的作用

使用小鼠中的胶原诱导的关节炎(CIA)模型的实验模型检验金属-诺卡胺素络合物的体内作用。使用乳化在CFA中的II型胶原在第0天对雄性DBA/1小鼠进行免疫以诱导关节炎，并且在第21天给予加强剂量。大多数小鼠在加强注射之后的2.5周内患上CIA。在出现疾病的临床体征之后，使用单剂量的本发明的金属-诺卡胺素络合物或使用盐水(作为适当的对照)对小鼠进行处理。

实例13

金属-诺卡胺素络合物对建立的佐剂诱导的关节炎的作用

接下来检验金属-诺卡胺素络合物在建立的关节炎的实验模型中的体内作用。在第0天使用MT/CFA对路易斯大鼠进行免疫以诱导关节炎；经由临床得分来测量关节炎严重性。在第14天，将大鼠分成实验组。在第15天，在接近疾病的高峰时，使用金属-诺卡胺素络合物或使用盐水(作为适当的对照)对大鼠进行处理。

实例14

本发明的金属-诺卡胺素络合物对TNBS诱导的实验结肠炎，即炎症性肠病(IBD)的动物模型的作用

在自身免疫炎性疾病的另外的实验模型中检验本发明的金属-诺卡胺素络合物的作用。在此描绘的模型是TNBS结肠炎模型，一种被广泛接受并广泛使用的IBD动物模型。

通过TNBS皮肤涂抹(指定为第-7天)，接着在一周之后(指定第0天)进行直肠内给予TNBS来对二十只Balb/C小鼠进行敏化。金属-诺卡胺素络合物在三个时间点(第-6天、第-2天、第+1天)经由i.p.注射给予至处理组中的动物，将这些动物与未处理组动物进行比较。在敏化、直肠内给予时并且在之后每一天对所有动物进行称重。在直肠内给予之后三天处死动物(指定第+3天)，并且取出结肠组织，并且对其进行组织学分析。

实例15

金属-诺卡胺素络合物对于人类患者中的银屑病的治疗

在年龄为17至71岁的20名患者(10名男性和10名女性)的样本中执行人类实验。呈现出了每种形式的银屑病：斑块状银屑病、头皮银屑病、滴状银屑病、红皮病型银屑病以及反向银屑病。

治疗由在第1天、第2天、第4天、第7天、第10天以及第14天对本发明的金属-诺卡胺素络合物的局部施加组成，利用了络合物薄层的施加。若需要，治疗再继续进行一周。

在此研究的过程中未使用银屑病的常规治疗，其方式使得所获得的结果仅可能归因于本发明的金属-诺卡胺素络合物。

如上所指出那样给予治疗，并且监测所治疗的银屑病斑块的光滑化以及正常外观皮肤的改善。

实例16

金属-诺卡胺素络合物对于小鼠中的实验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)的治疗和预防

为了进一步研究金属-诺卡胺素络合物对免疫相关病症的作用，接下来使用EAE作为多发性硬化症(MS)的模型。通过在实验的第一天和第七天注射髓鞘质少突神经胶质细胞糖蛋白35-55肽(MOG35–55)在8周大的雌性C57BL/6小鼠中诱导EAE。如在实验程序中所指示，在实验的第一天和第二天对小鼠进一步接种百日咳毒素。如在实验程序中详细描述的，评估四组小鼠(每组10只小鼠)的临床得分。第一组(A)-检验金属-诺卡胺素络合物的潜在预防性和保护性作用，每周接受金属-诺卡胺素络合物的治疗，每周三次。处理在MOG注射前三天启动并且在第37天终止，并且接着从第37天至第52天进行使用媒介物的处理。第二组(B)的小鼠每周进行处理，每周3次，其中金属-诺卡胺素络合物在MOG注射之后的第七天开始，一直至第52天实验结束。第三组(C)的小鼠每周接受处理，每周3次，其中金属-诺卡胺素络合物在第一天开始，一直至第52天实验结束。对照组(D)使用盐水进行处理以作为适当的对照，该处理在第1天开始，一直至第52天实验结束。

根据实验程序中所提出的标准对小鼠进行临床评分。

实例17

金属-诺卡胺素络合物对于疱疹(感冒疮)的治疗

对年龄为28-38岁的8名患者(4名男性和4名女性)执行该试验。在所有患者中通过一天两次在嘴唇上局部施加含有本发明的锌-诺卡胺素络合物(0.5％)的软膏，连续进行三天(总共6次给予)来治疗单纯性疱疹病毒(HSV)表现(唇疱疹)。没有其他药物(药剂)与本发明的锌-诺卡胺素络合物软膏的施加并行使用。

Claims (45)

1.一种组合物，该组合物包含诺卡胺素(去铁胺E)与至少一种金属的至少一种络合物，所述组合物任选地进一步包含稀释剂、载体、赋形剂中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述至少一种金属选自由镧系元素、锕系元素、后过渡金属或过渡金属组成的组。

3.根据权利要求1和权利要求2中任一项所述的组合物，其中至少一种金属选自由锌、镓、铝、银、金、钴、钼、钒或其任何离子形式组成的组。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中该至少一种金属离子是Zn²⁺。

5.根据权利要求4所述的组合物，其中所述络合物是诺卡胺素(去铁胺E)与Zn²⁺。

6.根据权利要求1至3中任一项所述的组合物，其中所述络合物是诺卡胺素(去铁胺E)与Ga³⁺。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的组合物，其中所述组合物是药物组合物，所述组合物包含至少一种药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂。

8.一种用于调节细胞中的细胞因子水平的方法，该方法包括使所述细胞与有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物、所述络合物的任何组合、这些络合物的包含任何载体、基质或媒介物的任何药物组合物相接触的步骤。

9.根据权利要求8所述的方法，其中至少一种金属选自由镧系元素、锕系元素、后过渡金属或过渡金属组成的组。

10.根据权利要求9所述的方法，其中至少一种金属选自由锌、镓、铝、银、金、钴、钼、钒或其任何离子形式组成的组。

11.根据权利要求10所述的方法，其中至少一种金属离子是Zn²⁺。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述络合物是诺卡胺素与Zn²⁺的络合物。

13.根据权利要求10所述的方法，其中所述络合物是诺卡胺素与Ga³⁺的络合物。

14.根据权利要求8所述的方法，其中所述调节是所述细胞中的细胞因子水平的降低或升高中的至少一者。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述细胞因子是至少一种促炎细胞因子和至少一种抗炎细胞因子中的至少一种。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述方法降低所述细胞中的至少一种促炎细胞因子的水平，并且其中所述促炎细胞因子是以下各项中的至少一种：IL-1α、IL-6、TNF-α以及IL-17。

17.根据权利要求15所述的方法，其中所述方法升高所述细胞中的至少一种抗炎细胞因子的水平，并且其中所述抗炎细胞因子是以下各项中的至少一种：IL-13、IL-4以及IL-10。

18.根据权利要求8至13中任一项所述的用于调节受试者中的细胞因子水平的方法，所述方法包括向所述受试者给予有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物、所述络合物的任何组合、这些络合物的包含任何载体、基质或媒介物的任何药物组合物的步骤。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述调节是降低所述受试者中的至少一种促炎细胞因子的水平，所述促炎细胞因子是IL-1α、IL-6、TNF-α以及IL-17中的至少一种。

20.根据权利要求18所述的方法，其中调节是升高所述受试者中的至少一种抗炎细胞因子的水平，所述抗炎细胞因子是IL-13、IL-4以及IL-10中的至少一种。

21.根据权利要求18所述的方法，其中所述受试者患有与至少一种促炎细胞因子水平的升高和至少一种抗炎细胞因子水平的降低中的至少一者相关联的病症。

22.根据权利要求21所述的方法，其中所述病症是以下各项中的至少一种：炎性的、感染性的、自身免疫的、增殖性的、缺血性的、代谢性的、神经退行性的病症、脊髓损伤和创伤以及急性和慢性伤口或损伤。

23.一种治疗、预防、抑制、减少、消除、防止或延迟有需要的受试者中的病理学病状或病症的发作的方法，所述方法包括以下步骤：向所述受试者给予治疗有效量的诺卡胺素与至少一种金属的至少一种络合物、所述络合物的任何组合、这些络合物的包含任何载体、基质或媒介物的任何药物组合物。

24.根据权利要求23所述的方法，其中至少一种金属选自由镧系元素、锕系元素、后过渡金属或过渡金属组成的组。

25.根据权利要求24所述的方法，其中至少一种金属选自由锌、镓、铝、银、金、钴、钼、钒或其任何离子形式组成的组。

26.根据权利要求25所述的方法，其中至少一种金属离子是Zn²⁺。

27.根据权利要求26所述的方法，其中所述络合物是诺卡胺素与Zn²⁺的络合物。

28.根据权利要求25所述的方法，其中所述络合物是诺卡胺素与Ga³⁺的络合物。

29.根据权利要求23所述的方法，其中所述病症与至少一种促炎细胞因子水平的升高和至少一种抗炎细胞因子水平的降低中的至少一者相关联。

30.根据权利要求29所述的方法，其中所述病症是以下各项中的至少一种：炎性的、感染性的、自身免疫的、增殖性的、缺血性的、代谢性的、自身免疫的、神经退行性的病症、脊髓损伤和创伤以及急性和慢性伤口或损伤。

31.根据权利要求30所述的方法，其中炎性病症是炎性皮肤病症、炎症性肠病(IBD)、关节炎以及炎性呼吸道病症中的至少一种。

32.根据权利要求31所述的方法，其中所述病症是至少一种慢性或急性炎性皮肤病症和至少一种急性或慢性伤口或损伤中的至少一者。

33.根据权利要求30所述的方法，其中所述病症是由细菌性病原体、病毒性病原体以及寄生虫中的至少一种导致的感染性疾病。

34.根据权利要求33所述的方法，其中所述细菌性病原体是肠致病性大肠杆菌(EPEC)、铜绿假单胞菌以及金黄色葡萄球菌中的至少一种。

35.根据权利要求33所述的方法，其中所述病毒性病原体是疱疹、肝炎病毒、流感病毒、腺病毒、乳多空病毒以及痘病毒中的至少一种。

36.根据权利要求30所述的方法，其中所述增殖性病症是与促炎细胞因子水平的升高和抗炎细胞因子水平的降低中的至少一者相关联的恶性肿瘤。

37.根据权利要求30所述的方法，其中所述代谢性病症是I型糖尿病、II型糖尿病以及任何糖尿病相关病状中的至少一种。

38.一种诺卡胺素与至少一种金属的络合物。

39.根据权利要求38所述的络合物，其中至少一种金属选自由镧系元素、锕系元素、后过渡金属或过渡金属组成的组。

40.根据权利要求39所述的络合物，其中至少一种金属选自由锌、镓、铝、银、金、钴、钼、钒或其任何离子形式组成的组。

41.根据权利要求40所述的络合物，其中至少一种金属离子是Zn²⁺。

42.根据权利要求41所述的络合物，其中所述络合物是与Zn²⁺的诺卡胺素络合物。

43.一种根据权利要求1至7中任一项所述的组合物，该组合物在治疗、预防、抑制、减少、消除、防止或延迟有需要的受试者中的病理学病状或病症的发作的方法中使用。

44.一种试剂盒，该试剂盒包括：

(i)呈其盐、酯和酰胺中的任何形式的选自镧系元素、锕系元素、后过渡金属或过渡金属中的至少一种金属或所述络合物的任何组合，或其药学上可接受的衍生物和药学上可接受的载体或稀释剂，以及

(ii)诺卡胺素或其药学上可接受的衍生物。

45.根据权利要求44所述的试剂盒，该试剂盒在治疗、预防、抑制、减少、消除、防止或延迟有需要的受试者中的病理学病状或病症的发作的方法中使用。