CN107118758B - 一种基于聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇荧光探针及其在检测金霉素中的应用 - Google Patents

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Abstract

一种基于聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇荧光探针及其在检测金霉素中的应用，属于荧光探针技术领域。双金属金/铂纳米簇具有很大的斯托克斯位移(～150nm)，能够在极端pH、高离子浓度的溶液中稳定存在，且在长时间紫外光照射下释放出稳定的荧光，这些特点均有利于该纳米簇在医药和生物领域广泛应用。此外，探针基于荧光猝灭的机制用于检测四环素类抗生素；同时，通过加入Al3+基于荧光增强的机制，可以将金霉素从四环素中区分开，达到特异性检测金霉素的目的。对金霉素进行检测，线性范围为0.5～30μM，检测限为0.5μM。与此同时，这种荧光探针成功在牛奶中对金霉素进行实物检测并获得了很好的效果，说明该荧光探针能够用于检测食品中金霉素残留。

Description

一种基于聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇荧光探针及 其在检测金霉素中的应用
技术领域
本发明属于荧光探针技术领域，具体涉及一种基于聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇荧光探针及其在检测金霉素中的应用。
背景技术
由于抗生素具有杀灭细菌的能力，因此被广泛应用于各种疾病的治疗。然而滥用或错用这些抗生素可能会导致极其严重的副作用，如过敏反应、机体抗药性等，从而降低治疗感染的效果。如四环素类抗生素(TCs)是一类重要的广谱抗生素类药物，包括金霉素(CTC)、土霉素(OTC)、四环素(TC)以及强力霉素(DC)等，这类抗生素为广谱抑菌剂，高浓度时具杀菌作用。除了常见的革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌以及厌氧菌外，多数立克次体属、支原体属、衣原体属、非典型分枝杆菌属、螺旋体也对该品敏感。所以，这些抗生素类药物目前主要用于动物的促进生长剂。但是，在动物饲料中过多的使用TCs也会造成其相关农副产品如牛奶、肉类、蜂蜜、鱼类以及鸡蛋中TCs的富集。长期食用这些食物会增加人体内病原体对抗生素类药物的免疫能力并且导致一系列对人体健康有害的影响。与此同时，抗生素药物残留被认为是影响水环境的重要污染物之一。因此开发在食品及环境中的高选择性、高灵敏度的有效检测TCs的方法是十分必要的。
相比于传统的检测方法，荧光探针技术由于具有高灵敏度、快速检测、廉价、简单以及实用性强等特点，被认为是检测痕量污染物的有效手段。至今为止，很多荧光材料(尤其是纳米荧光材料)已经被设计、合成并应用于TCs检测。这些荧光检测的方法大致可以分为两类：(1)对多种TCs的同时检测。这类方法虽然能同时检测多种四环素，但由于TCs中各类抗生素的分子主体结构十分相似，很难通过上述方法对他们加以区分。因此，近期很多的研究都把目光集中到了(2)对单一四环素类药物的检测上来。目前，其他四环素类药物包括四环素、土霉素以及强力霉素都有了相应的荧光检测方法，但对于金霉素(CTC)进行特异性检测的荧光探针还未有报道。
另一方面，新型金属纳米簇(NCs)由于其自身独特的光学性质、极佳的稳定性、低毒性以及很好的生物相容性等优点，近期得到越来越广泛的关注。此外，相比于单一金属的NCs(Au,Ag,Cu和Pt)，双金属杂合NCs(Au/Ag,Au/Pt和Ag/Pt)能够更好的增强NCs的性能。至今，在合成和表征双金属NCs方面已取得了很大的进步。金/铂双金属纳米簇(Au/Pt NCs)是被研究得比较广泛的一种双金属NCs。目前，该类杂合双金属NCs已被广泛应用于催化及燃料电池研究领域。但是，所报道的合成Au/PtNCs的方法和过程通常都十分复杂、不易操作、且耗时。
发明内容
本发明的目的在于提供一种基于聚乙烯亚胺(PEI)保护的金/铂双金属纳米簇(Au/PtNCs)荧光探针及其在检测金霉素中的应用。该纳米簇为金/铂双金属纳米簇，聚乙烯亚胺作用于纳米簇表面。采用水热方法，基于实施例7的制备条件得到最强激发波长为355～375nm，最强发射波长为505～520nm，具有较大的斯托克斯位移(～150nm)。金/铂双金属纳米簇能够在极端pH,高离子浓度的溶液中稳定存在，且在长时间紫外光照射下释放出稳定的荧光，这些特点均有利于该纳米簇在医药和生物领域广泛应用。该金属纳米簇以一种核壳结构存在，大量的Au原子以Au(0)的形式集中在纳米簇的中心，为少量的Au和所有的Pt原子以Au(I)、Pt(I)和Pt(II)的形式分布在纳米簇的外层。聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇荧光探针被用来对金霉素进行特异性检测。金/铂双金属纳米簇探针基于荧光猝灭的机制用于检测四环素类抗生素；同时，通过加入Al3+基于荧光增强的机制，可以将金霉素从四环素类药物中区分开，达到特异性检测金霉素的目的。结果发现：检测金霉素的线性范围为0.5～30μM，检测限为0.5μM。与此同时，这种荧光探针成功在牛奶中对金霉素进行实物检测并获得了很好的效果，说明该荧光探针能够用于检测食品中金霉素残留。
本发明采用一步水热法成功合成出Au/PtNCs，是以H2PtCl6·6H2O和HAuCl4·3H2O作为Pt和Au源，GSH(谷胱甘肽)与PEI(聚乙烯亚胺)作为稳定剂，AA(抗坏血酸)作为还原剂；首先是将H2PtCl6·6H2O和HAuCl4·3H2O溶解于GSH的超纯水溶液中，搅拌10～30min；再向上述溶液中加入PEI，反应1～3h后加入AA；然后通过加入1.0M的HCl或NaOH溶液调节混合体系的pH值为3～11；最后将混合溶液在60～150℃条件下水热反应20～100min，从而得到本发明所述的基于金/铂双金属纳米簇的荧光探针溶液。
上述方法中，AA的摩尔用量与H2PtCl6·6H2O和HAuCl4·3H2O的摩尔用量之和的比例为1：1～20：1，H2PtCl6·6H2O和HAuCl4·3H2O的摩尔用量的比例为1：9～9：1，GSH和HAuCl4·3H2O的摩尔用量的比例为1：1～20：1，PEI和HAuCl4·3H2O的摩尔用量的比例为10：1～10：9；在上述反应体系溶液中，HAuCl4·3H2O的浓度范围为25～225μM。
附图说明
图1：Au/PtNCs的荧光强度随各种实验条件的变化柱形图：(a)AA与(Pt+Au),(b)Pt与Au,(c)GSH与Au的摩尔比，(d)各种pH值,(e)水热温度及(f)反应时间对Au/PtNCs荧光强度的影响。
图2：(a)Au/PtNCs的透射电镜(HR-TEM))图，(b)晶粒尺寸分布图，(c)紫外-可见(UV-vis)吸收谱以及(d)荧光激发与发射谱。
图3：Au/PtNCs中Au,Pt原子价态及分布示意图。
图4：Au/PtNCs荧光强度随(a)pH值，(b)NaCl浓度以及(c)紫外光照时间的影响曲线。
图5：Au/PtNCs荧光强度随(a)TC,(b)CTC,(c)OTC和(d)DC的浓度变化曲线。
图6：(a)Au/PtNCs相对荧光强度随CTC浓度变化曲线,(b)Au/PtNCs对CTC检测的线性曲线。
图7：Al3+对Au/PtNCs-TC,Au/PtNCs-CTC,Au/PtNCs-OTC,Au/PtNCs-DC溶液的荧光强度变化柱形图。
图8：Al3+对Au/PtNCs-CTC荧光响应的选择性分析柱形图。
图9：Au/PtNCs对CTC荧光响应的选择性和抗干扰分析柱形图。
表1采用Au/PtNCs荧光探针在牛奶中检测CTC残留。
图1对应实施案例1～7；图1～图4对应实施案例7；图5～图6对应实施案例8；图7～图9对应实施案例9；表1对应实施案例10。
采用HR-TEM对在优化的条件下制备出的Au/PtNCs进行形貌表征(图2a)。从图中可以看出纳米颗粒的分散性较高、且粒径较为均一(图2b)。通过对大约200个颗粒进行系统分析后发现晶粒平均尺寸为～2.3nm。颗粒(图2a中插图)的晶面间距(～0.231nm)介于Pt(111)(0.226nm)和Au(111)(0.236nm)之间。此外，UV–vis吸收光谱以及荧光光谱分别对Au/PtNCs的光学性质进行了初步分析。如图2c所示，在吸收光谱中350nm附近存在一个较宽的吸收峰；365nm激发下得到了波长为512nm的发射峰(图2d)。结果说明Au/PtNCs具有较大的斯托克斯位移(～150nm)。Au/PtNCs中的Au和Pt一共有四种价态共存，它们分别是Au(0),Au(I),Pt(I)和Pt(II)。Au(I)、Pt(I)和Pt(II)均分布在NCs的外侧，而NCs内部则由Au(0)所组成，结构如图3所示。Au/PtNCs的荧光量子产率为12％。图4a表明，Au/PtNCs在波长为512nm的荧光峰强在pH范围为2.0～12.0之间没有明显变化。此外，同样的平稳反应现象也在不同的NaCl溶液中得到(图4b)。同时，Au/PtNCs经365nm光照30min后,其荧光强度基本保持稳定(图4c)。
如图5a-d所示，随着在Au/PtNCs溶液中逐步加入不同浓度(0，0.5，1，2，5，10，20，50，100，150μM)的TCs(TC、CTC、OTC和DC)，所有的荧光强度都有明显的猝灭现象。在从0.5到150μM很宽的范围内Au/PtNCs都对CTC表现出很好的线性响应。随着CTC浓度的增加，荧光探针在512nm处的荧光强度随之下降,最后在150μM消失(6a)。在512nm处的相对荧光强度F0-F(F0和F分别表示加入CTC前后的探针荧光强度)与CTC浓度的线性关系如图6b所表示，对于CTC的线性响应在0.5～150μM(R2＝0.98648)之间变化。并且采用5μM的Au/PtNCs Tris-HCl缓冲溶液(pH 6.0)，计算得到对CTC的检测限为0.5μM(信噪比S/N＝3时的浓度，Anal.Biochem.,1993,211,279～287.)。
Au/PtNCs-TC、Au/PtNCs-CTC、Au/PtNCs-OTC和Au/PtNCs-DC对Al3+的荧光响应，如图7所示。结果表明它们的荧光强度都有不同程度的增加，但是相比于CTC，其它荧光增加的幅度都很小。因此，我们可以通过荧光增加幅度的明显区别将CTC与其他三类四环素类药物区分开来。通过定量分析，对于CTC，荧光强度增加为原来的7.0倍，而对于TC、OTC和DC而言，其荧光强度分别增加为原来的2.0,1.5和1.2倍。
此外，还分析了Au/PtNCs-CTC对其他金属离子如Na+,K+,Ca2+,Mg2+,Zn2+,Cu2+,Mn2+,Ba2+,Fe3+,Cr3+,Ni2+,Co2+,Pb2+,Cd2+,Hg2+,Cu+和Fe2+的影响(图8)，结果表明，除Al3+外，其他金属离子均不会引起Au/PtNCs-CTC荧光强度的变化。如此之外，其他相关的物质(离子及氨基酸等)也采用超纯水制备成溶液检验Au/PtNCs对TCs的干扰性。干扰性测试的方法是在Au/PtNCs的Tris-HCl缓冲溶液(pH 6.0)中分别加入一系列干扰物,然后进行荧光光谱测试。图9显示只有CTC能够明显猝灭Au/PtNCs荧光。而且，在含有CTC的溶液中加入其他干扰物，均不会影响Au/PtNCs对CTC的荧光响应。因此，我们认为这些离子及氨基酸等对荧光Au/PtNCs探针检测CTC没有影响，说明该方法在实际应用中是一种检测CTC的有效手段。
具体实施方式
本发明中使用的聚乙烯亚胺(PEI，MW 10 000)，盐酸金霉素(CTC)、盐酸四环素(TC)、盐酸土霉素(OTC)，盐酸强力霉素(DC)和三羟甲基氨基甲烷(Tris)购买于上海阿拉丁试剂公司。六水合氯铂酸(H2PtCl6·6H2O)、三水合氯金酸(HAuCl4·3H2O)购买于上海国药集团。牛血清白蛋白(BSA)、谷胱甘肽(GSH)、抗坏血酸(AA)以及20种天然氨基酸(Val,Met,Cys,Ile,Pro,Arg,Phe,Gly,Gln,Glu,Thr,Trp,Ser,Ala,Asp,Lys,Leu,Asn,Tyr,His)购买于北京鼎国生物有限公司。氢氧化钠(NaOH)、盐酸(HCl)等基础药品均购买于天津光复试剂公司。Britton-Robinson(BR)缓冲溶液用于研究分析Au/Pt NCs对pH值的稳定性，由0.04M硼酸、乙酸和磷酸组成，再用0.20M NaOH溶液调节pH值。所有的化学药品均是分析纯，且没有再纯化。超纯水用于整个实验过程。
实施例1：
将1.25μmol H2PtCl6·6H2O和1.25μmol HAuCl4·3H2O溶解于含有25μmol GSH的10mL超纯水中，搅拌20min后，再加入2.5μmol PEI，2h后，分别加入2.5、12.5、25、50μmolAA，使AA对(Pt+Au)的摩尔比分别为1:1,5:1,10:1和20：1。然后，用1.0M的HCl溶液调节混合体系的pH值为5。之后，将此混合物放入50mL高压反应釜中，90℃水热反应60min，得到不同AA量值(摩尔数)条件下，聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇(Au/PtNCs)。
结果显示：当AA对(Pt+Au)的摩尔比为10:1，即反应溶液中AA为25μmol时。Au/PtNCs的荧光强度最高。
实施例2：
分别将2.25，1.25，0.25μmol H2PtCl6·6H2O和0.25，1.25，2.25μmol HAuCl4·3H2O(Pt对Au的摩尔比分别为9:1,1:1和1:9)溶解于含有25μmol GSH的10mL超纯水中，搅拌20min后，再加入2.5μmol PEI，2h后，加入25μmol AA。然后，用1.0M的HCl溶液调节混合体系的pH值为5。之后，将此混合物放入50mL高压反应釜中，90℃水热反应60min，得到不同Pt对Au的摩尔比条件下，聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇(Au/PtNCs)。
结果显示：当Pt对Au的摩尔比为1:1，即反应溶液中H2PtCl6·6H2O和HAuCl4·3H2O分别为1.25μmol和1.25μmol时。Au/PtNCs的荧光强度最高。
实施例3：
将1.25μmol H2PtCl6·6H2O和1.25μmol HAuCl4·3H2O溶解于分别含有2.5，12.5，25，50μmol GSH的10mL超纯水中(GSH对Au的原料摩尔比分别为1:1,5:1,10:1和20:1)，搅拌20min后，再加入2.5μmol PEI，2h后，加入25μmol AA。然后，用1.0M的HCl溶液调节混合体系的pH值为5。之后，将此混合物放入50mL高压反应釜中，90℃水热反应60min，得到不同GSH对Au的摩尔比条件下，聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇(Au/PtNCs)。
结果显示：当GSH对Au的摩尔比为10:1，即反应溶液中GSH为25μmol时。Au/PtNCs的荧光强度最高。
实施例4：
将1.25μmol H2PtCl6·6H2O和1.25μmol HAuCl4·3H2O溶解于含有25μmol GSH的10mL超纯水中，搅拌20min后，再加入2.5μmol PEI，2h后，加入25μmol AA。然后，用1.0M的HCl或NaOH溶液调节混合体系的pH值分别为3，5，7，9和11。之后，将此混合物放入50mL高压反应釜中，90℃水热反应60min，得到不同pH值条件下，聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇(Au/PtNCs)。
结果显示：当反应溶液pH为5时。Au/PtNCs的荧光强度最高。
实施例5：
将1.25μmol H2PtCl6·6H2O和1.25μmol HAuCl4·3H2O溶解于含有25μmol GSH的10mL超纯水中，搅拌20min后，再加入2.5μmol PEI，2h后，加入25μmol AA。然后，用1.0M的HCl溶液调节混合体系的pH值为5。之后，将此混合物放入50mL高压反应釜中，分别采用反应温度为60，90，125和150℃水热反应60min，得到不同水热温度条件下，聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇(Au/PtNCs)。
结果显示：当反应温度为90℃时。Au/PtNCs的荧光强度最高。
实施例6：
将1.25μmol H2PtCl6·6H2O和1.25μmol HAuCl4·3H2O溶解于含有25μmol GSH的10mL超纯水中，搅拌20min后，再加入2.5μmol PEI，2h后，加入25μmol AA。然后，用1.0M的HCl溶液调节混合体系的pH值为5。之后，将此混合物放入50mL高压反应釜中，90℃温度下，分别水热反应20,40,60,80和100min，得到不同反应时间下，聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇(Au/PtNCs)。
结果显示：当反应时间为60min时。Au/PtNCs的荧光强度最高。
实施例7：
基于实施例1-6，将1.25μmol H2PtCl6·6H2O和1.25μmol HAuCl4·3H2O溶解于含有25μmol GSH的10mL超纯水中，搅拌20min后，再加入2.5μmol PEI，2h后，加入25μmol AA。然后，用1.0M的HCl溶液调节混合体系的pH值为5。之后，将此混合物放入50mL高压反应釜中，90℃水热反应60min，得到荧光强度最高的聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇(Au/PtNCs)。
如图1所示。结果表明基于以上实验条件得到了制备荧光强度最高的Au/PtNCs：AA对(Pt+Au)，Pt对Au，以及GSH对Au的原料用量比(摩尔比)分别为10：1、1：1和10：1。此外，pH值设定为5.0，合成温度为90℃，反应时间设定为60min，以上这些条件为合成高荧光强度Au/PtNCs的最佳条件。
结果显示：基于实施例7得到的Au/PtNCs最强激发波长为355～375nm，最强发射波长为505～520nm，该Au/PtNCs具有较大的斯托克斯位移(～150nm)。采用HR-TEM对在优化的条件下制备出的Au/PtNCs进行形貌表征(图2a)。从图中可以看出纳米颗粒的分散性较高、且粒径较为均一(图2b)。通过对大约200个颗粒进行系统分析后发现晶粒平均尺寸为～2.3nm。颗粒(图2a中插图)的晶面间距(～0.231nm)介于Pt(111)(0.226nm)和Au(111)(0.236nm)之间。此外，UV–vis吸收光谱以及荧光光谱分别对Au/PtNCs的光学性质进行了初步分析。如图2c所示，在吸收光谱中350nm附近存在一个较宽的吸收峰；365nm激发下得到了波长为512nm的发射峰(图2d)。结果说明Au/PtNCs具有较大的斯托克斯位移(～150nm)。Au/PtNCs中的Au和Pt一共有四种价态共存，它们分别是Au(0),Au(I),Pt(I)和Pt(II)。Au(I)、Pt(I)和Pt(II)均分布在NCs的外侧，而NCs内部则由Au(0)所组成，结构可能如图3所示。Au/PtNCs的荧光量子产率为12％。图4a表明，Au/PtNCs在波长为512nm的荧光峰强在pH范围为2～12之间没有明显变化。此外，同样的平稳反应现象也在不同的NaCl溶液中得到(图4b)。同时，Au/PtNCs经365nm光照30min后,其荧光强度基本保持稳定(图4c)。
实施例8：
将实施例7中得到的Au/PtNCs(以Pt和Au总量计量)溶于pH 6.0的Tris-HCl缓冲溶液中，配置成浓度为5μM的Au/PtNCs溶液。然后将一定量(100μM)的CTC加入到该体系中，快速混合，孵育2min。为了研究Au/PtNCs对CTC的选择性，以下物质也进行了对照实验：TC、OTC、DC、Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl-、CO3 2-、HCO3 -、PO4 3-、HPO4 2-、H2PO4 -、BSA、葡萄糖以及20种天然氨基酸。所有的荧光测试均在室温下进行。结果显示，除TC、OTC及DC会使荧光猝灭外，其他均未对CTC造成干扰。说明Au/PtNCs荧光探针能够对所有四环素类抗生素进行有效检测，但是单一使用Au/PtNCs荧光探针很难把CTC与其他四环素类药物(TC,OTC及DC)进行有效区分。
实施例9：
为了在四环素药物中区分出CTC，我们引入了Al3+。首先，将100μM CTC加入到实施例7中得到的5μM Au/PtNCs溶于Tris-HCl缓冲溶液中(pH 6.0)，然后，将Al3+引入该体系中，孵育30min后，进行荧光光谱测试。为了研究Au/PtNCs-CTC对Al3+的选择性，以下金属阳离子也进行了对照实验：Na+,K+,Ca2+,Mg2+,Zn2+,Cu2+,Mn2+,Ba2+,Fe3+,Cr3+,Ni2+,Co2+,Pb2+,Cd2+,Hg2+,Cu+及Fe2+。所有的荧光测试均在室温下进行。结果说明除Al3+外，其他金属离子均不会引起Au/PtNCs-CTC荧光强度的变化。其他相关的物质(Na+,K+,Ca2+,Mg2+,Cl-,CO3 2-,HCO3 -,PO4 3-,HPO4 2-,H2PO4 -,BSA,葡萄糖以及20种天然氨基酸：Val,Met,Cys,Ile,Pro,Arg,Phe,Gly,Gln,Glu,Thr,Trp,Ser,Ala,Asp,Lys,Leu,Asn,Tyr,His)也采用超纯水制备成溶液检验Au/PtNCs对CTC的干扰性。干扰性测试的方法是在Au/PtNCs的Tris-HCl缓冲溶液(pH6.0)中分别加入一系列干扰物(Na+,K+,Ca2+,Mg2+,Cl-,CO3 2-,HCO3 -,PO4 3-,HPO4 2-,H2PO4 -,BSA,葡萄糖以及20种天然氨基酸)，然后进行荧光光谱测试。图9显示只有CTC能够明显猝灭Au/PtNCs荧光。而且，在含有CTC的溶液中加入其他干扰物，均不会影响Au/PtNCs对CTC的荧光响应。因此，我们认为这些离子及氨基酸等对荧光Au/PtNCs探针检测CTC没有影响，说明该方法在实际应用中是一种检测CTC的有效手段。
随着CTC浓度的增加，荧光探针在512nm处的荧光强度随之下降，最后在150μM消失(图6a)。在512nm处的相对荧光强度F0-F(F0和F分别表示加入CTC前后的探针荧光强度)与CTC浓度的线性关系如图6b所表示，对于CTC的线性响应在0.5～150μM(R2＝0.98648)之间变化。并且采用5μM的Au/PtNCs Tris-HCl缓冲溶液(pH 6.0)，计算得到对CTC的检测限为0.5μM(信噪比S/N＝3时的浓度，Anal.Biochem.,1993,211,279～287.)。
实施例10：
牛奶样品来自于当地农场。为了除去牛奶中的蛋白质及脂肪，我们进一步改进了文献报道的方法[44]，对牛奶样品进行预处理。取1mL牛奶用水稀释至10mL，然后加入2mL、质量分数5％的三氯乙酸的水溶液，用漩涡仪混匀1min，再超声处理30min。之后，将该混合物在10 000rpm速度下离心10min。取上清液，再用0.2μm的超滤膜过滤，滤液在4℃下保存备用。
将三种不同含量的CTC(2μM、5μM、8μM)分别加入到上述牛奶滤液中，其浓度在0.5～10μM之间(记为1#～3#)，之后再加入相同浓度的Au/PtNCs@PEI溶液(5μM)。孵育2min后，进行荧光光谱测试。结果表明回收率在97.2％～102.7％之间，相对标准偏差(RSDs)均低于5％，说明Au/PtNCs可以应用在实物检测中(表1)。
表1：采用Au/PtNCs荧光探针在牛奶中检测CTC残留数据
还需要说明的是，本发明的具体实施例只是用来示例性说明，并不以任何方式限定本发明的保护范围，本领域的相关技术人员可以根据上述一些说明加以改进或变化，但所有这些改进和变化都应属于本发明权利要求的保护范围。

Claims (3)

1.一种基于聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇荧光探针，其特征在于：是以H2PtCl6·6H2O和HAuCl4·3H2O作为Pt和Au源，谷胱甘肽GSH与聚乙烯亚胺PEI作为稳定剂，抗坏血酸AA作为还原剂；首先是将H2PtCl6·6H2O和HAuCl4·3H2O溶解于GSH的超纯水溶液中，搅拌10～30min；再向上述溶液中加入PEI，反应1～3h后加入AA；然后通过加入1.0M的HCl或NaOH溶液调节混合体系的pH值为3～11；最后将混合溶液在60～150℃条件下水热反应20～100min，从而得到基于聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇荧光探针。
2.如权利要求1所述的一种基于聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇荧光探针，其特征在于：AA的摩尔用量与H2PtCl6·6H2O和HAuCl4·3H2O的摩尔用量之和的比例为1：1～20：1，H2PtCl6·6H2O和HAuCl4·3H2O的摩尔用量的比例为1：9～9：1，GSH和HAuCl4·3H2O的摩尔用量的比例为1：1～20：1，PEI和HAuCl4·3H2O的摩尔用量的比例为10：1～10：9；在上述反应体系溶液中，HAuCl4·3H2O的浓度范围为25～225μM。
3.权利要求1或2所述的一种基于聚乙烯亚胺保护的金/铂双金属纳米簇荧光探针在检测金霉素中的应用。
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