CN107095949A - 柴胡舒肝散在制备非手术型或非放化疗型治疗乳腺癌的药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及药物用途技术领域,特别涉及柴胡舒肝散在制备非手术型或非放化疗型治疗乳腺癌的药物中的应用。本发明研究发现柴胡舒肝散可抑制乳腺癌细胞生长增殖,抑制乳腺癌细胞克隆形成能力,抑制乳腺癌移植瘤生长。根据乳腺癌的复杂病因病理,该药以疏肝理气,活血化瘀为主,能通过对机体整体调节达到治疗效果。该药物可直接用于乳腺癌的治疗,可不通过手术或放化疗治疗,即可有很好的抑瘤效果,为乳腺癌治疗提供一个简单有效的治疗药物。同时,该药为传统的中药复方且广泛用于临床,副作用小,疗效确切,提高患者的生存质量且减轻经济负担。
Description
技术领域
本发明涉及药物用途技术领域,特别涉及柴胡舒肝散在制备非手术型或非放化疗型治疗乳腺癌的药物中的应用。
背景技术
乳腺癌,是通常发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤,也是目前中国女性最常见的恶性肿瘤之一。每年中国乳腺癌新发病例和死亡数量分别占全球的12.2%和9.6%,而且中国患病人数呈持续增长趋势,发病年龄正日渐年轻化,已严重影响女性的身心健康及生命安全。
目前,手术、放化疗以及包括靶向治疗的个性化用药依然是乳腺癌治疗的主要手段。其中手术后并发症和放疗和化疗药物的副作用,严重地影响了患者的生活质量;其治疗费又用极其昂贵,给患者和家庭带来极大的经济负担。而且对低分化型和晚期癌症治疗效果不佳。还有一些患者因身体原因不适用手术治疗。如患者有严重心肺或者肝肾功能不全等则不能采用手术治疗。乳腺癌最佳治疗的及时性与有效性影响临床疗效,不同地区不同医院对治疗乳腺癌所采用的手术方式有很大差别,保乳手术便成为了参考指南推荐的手术治疗方式,而一项全国范围内的调查显示,乳房切除术依然占到原发性乳腺癌手术的88.8%,保乳术采用率低的主要原因是缺乏放射治疗的资源,放射治疗作为保乳术治疗的一部分,在欠发达的农村尤为欠缺。在中国,药物报销政策对于最佳系统疗法选择上影响巨大,许多药没有涵盖在医疗保险之中,新疗法花费负担重,这无形中增加了病人自掏腰包的花费,缺失获得新药的途径也限制了转移性疾病系统治疗的选择范围。随着转移的出现,病人对医生和西药逐渐失去信任,经常转而投向传统中医疗法。
近几年在乳腺癌的综合治疗中,中药治疗在抑制肿瘤生长、缓解术后症状和并发症、减轻放化疗的毒副作用、抗复发转移等方面的优势显著。但也有不足之处,需充分应用现代科学技术和手段对其作用进行深入研究,充分发挥中药的优势。
柴胡舒肝散,中医方剂名。为理气剂,具有疏肝理气,活血止痛之功效。主治肝气郁滞证,胁肋疼痛,胸闷善太息,情志抑郁易怒,或嗳气,脘腹胀满,脉弦。临床常用于治疗慢性肝炎、慢性胃炎、肋间神经痛等属肝郁气滞者。柴胡舒肝散配方中包括柴胡、香附、川芎、枳壳、陈皮、甘草、芍药七味中草药,各味药的重量分数比为柴胡4份、香附3份、川芎3份、枳壳3份、陈皮4份、甘草1份、芍药3份,其中柴胡疏肝木以解郁,白芍养血柔肝,川芎化凝血以归肝,枳壳破滞气,陈皮利中气,香附调气解气郁,甘草缓中以泻肝火。临床中也有使用柴胡疏肝散联合化疗药物治疗乳腺癌、柴胡疏肝散加减方用于三阴性乳腺癌以及乳腺癌术后调理的报道,认为肝郁气滞、痰瘀互结始终贯穿于乳腺癌的全过程。但柴胡疏肝散联合化疗药物、柴胡疏肝散加减方的治疗方案在治疗乳腺癌的效果上欠佳。
发明内容
有鉴于此,本发明提供了一种柴胡舒肝散在制备非手术型或非放化疗型治疗乳腺癌的药物中的应用。研究表明柴胡疏肝散可直接用于乳腺癌治疗,无需调整组方。
为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
本发明提供了柴胡舒肝散在制备非手术型或非放化疗型治疗乳腺癌的药物中的应用。
柴胡舒肝散具有如下功效:
1)疏肝理气:药物中柴胡疏肝解郁。其提取物具有保护肝细胞和促进肝脏中脂质代谢的作用。
2)活血化瘀:药物中川芎的提取物川芎嗪有提高红细胞和血小板表面电荷,降低血粘粘度,改善血液流变作用。白芍提取物有抑制血小板聚集的作用,芍药甙有扩张血管,增强器官血流量的作用。
3)增强免疫作用:柴胡对机体特异性免疫和非特异性免疫均有一定的调节作用,柴胡皂甙能够增强巨噬细胞的活性,提高血浆中免疫球蛋白IgA、IgG水平。白芍总甙脂质能够增强巨噬细胞的吞噬功能,促进淋巴细胞转化反应,提高机体的免疫功能。白芍总苷既能促进IgM生成,又能使IgM生成降低,对体液免疫起着双向调节作用。芍药酸性多糖和中性多糖均有激活网状内皮系统功能的作用。甘草多糖通过刺激T淋巴细胞的增殖增强机体的免疫力,同时甘草多糖还能激活内皮系统,诱导人体免疫球蛋白的产生,具有抗补体活性作用。还可直接刺激B淋巴细胞增殖,诱导干扰素来增强机体杀伤细胞的作用。
4)抗肿瘤作用:柴胡中柴胡皂甙具有抗肿瘤细胞分子黏附,干扰肿瘤细胞s期DNA合成及蛋白质代谢,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡等作用。柴胡皂苷d可能通过影响缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/COX-2信号通路发挥其抑癌作用川芎嗪能够抑制血管内皮细胞的生长于增殖,诱导血管内皮细胞和癌细胞凋亡,抑制癌细胞血管内皮细胞生长因子的表达。柴胡皂苷d可能通过影响缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/COX-2信号通路发挥其抑癌作用。川芎中阿魏酸钠对免疫系统有一定的调节作用。枳壳和陈皮提取物川陈皮素具有抗肿瘤转移的作用,并且可抑制基质金属蛋白酶表达,破坏微管蛋白动态平衡体系,抑制微管蛋白聚合,促进肿瘤细胞凋亡。枳壳中柚皮苷能引起癌细胞凋亡和防止正常细胞癌变。香附挥发油对细胞有溶解和促进凋亡作用。陈皮多甲氧基黄酮通过抑制血管生长因子及碱性成纤维细胞生长因子的表达,从而抑制肿瘤血管生成和生长。甘草多糖单独使用可以诱导肿瘤细胞凋亡。
5)雌激素样作用:香附的挥发油有轻度的雌激素样活性,在体内转化后其成分活性会增强。甘草中异甘草素具有雌激素样作用,可以抑制乳腺癌细胞增殖。
6)抗氧化、抗炎作用:柴胡多糖在自由基清除试验发现其有显著的抗氧化作用,并呈剂量一来方式。有研究发现,柴胡提取物总黄酮具有很好的抗氧化活性。芍药苷具有显著的抗炎作用,其中丹皮酚有较强的抗炎作用。芍药苷和丹皮酚对多种致炎剂所致的毛细血管通透性亢进、渗出和水肿以及免疫性炎症,均有显著的抑制功效。香附的甲醇提取物能够抑制诱导型一氧化氮合酶及其蛋白表达来抑制炎症反应。川芎嗪具有清除自由基的活性,并能抑制过氧化氢诱导的胞内活性氧的生产。川芎生物碱具有抗氧化作用,能够降低一氧化氮、丙二醛的含量和一氧化氮合酶活性,提高超氧化物歧化酶活性。甘草次酸钠通过抑制前列腺素E合成,降低毛细血管通透性,清除氧自由基而发挥抗炎作用。甘草提取物对氧自由基的清除效果尤为明显,并且对油脂过氧化终产物丙二醛的成长有明显的抑制作用。
本发明研究发现柴胡疏肝散对乳腺癌细胞的生长均具有一定的抑制效果,根据乳腺癌的复杂病因病理,该药以疏肝理气,活血化瘀为主,能通过对机体整体调节达到治疗效果。
在本发明中,柴胡舒肝散由柴胡、香附、川芎、枳壳、陈皮、甘草、芍药制成。
作为优选,以重量份计,柴胡舒肝散由柴胡4份、香附3份、川芎3份、枳壳3份、陈皮4份、甘草1份、芍药3份制成。
作为优选,柴胡舒肝散的制备方法为:将原料进行水煎制得。
作为优选,水煎的用水量为原料重量的10~20倍。
在本发明提供的一具体实施例中,水煎的用水量为原料重量的10倍。
作为优选,水煎的次数为3次,每次30~45min。
优选地,水煎的次数为3次,每次30min。
在本发明提供的一具体实施例中,柴胡舒肝散的水煎剂的制备方法为:第一次加10倍药量的水,浸泡30分钟后,开始武火加热至沸腾后改文火30分钟,倒出药液;再加10倍药量的水,开始武火加热至沸腾后改文火30分钟,然后将两次煮好的药液混匀,再煎煮30分钟,即可。
作为优选,药物的剂型为水煎剂、粉剂、片剂、丸剂或胶囊剂。
在本发明提供的一具体实施例中,应用为柴胡舒肝散在制备抑制乳腺癌细胞生长增殖药物中的应用。
在本发明提供的另一具体实施例中,应用为柴胡舒肝散在制备抑制乳腺癌细胞克隆形成能力药物中的应用。
在本发明提供的另一具体实施例中,应用为柴胡舒肝散在制备抑制乳腺癌移植瘤生长药物中的应用。
本发明提供了一种柴胡舒肝散在制备非手术型或非放化疗型治疗乳腺癌的药物中的应用。本发明具有的技术效果为:
1、本发明研究发现柴胡舒肝散可抑制乳腺癌细胞生长增殖,抑制乳腺癌细胞克隆形成能力,抑制乳腺癌移植瘤生长。根据乳腺癌的复杂病因病理,该药以疏肝理气,活血化瘀为主,能通过对机体整体调节达到治疗效果。
2、本发明研究发现柴胡舒肝散可直接用于乳腺癌的治疗,可不通过手术或放化疗治疗,即可有很好的抑瘤效果,为乳腺癌治疗提供一个简单有效的治疗药物。
3、该药为传统的中药复方且广泛用于临床,副作用小,疗效确切,提高患者的生存质量且减轻经济负担。
附图说明
图1:柴胡疏肝散水煎剂抑制乳腺癌细胞的生长增殖能力;
图2:柴胡疏肝散水煎剂抑制乳腺癌细胞的克隆形成能力;2A为不同剂量柴胡舒肝散水煎剂处理乳腺癌细胞后的克隆形成扫描图片;2B为不同剂量柴胡舒肝散水煎剂处理乳腺癌细胞后形成的克隆数柱状图(***表示p<0.001);
图3:柴胡疏肝散水煎剂抑制MDA-MB-231荷瘤小鼠的肿瘤生长;3A为MDA-MB-231荷瘤小鼠肿瘤;3B为MDA-MB-231荷瘤小鼠肿瘤重量量化图;3C为小鼠体重变化图(*表示p<0.05,**表示p<0.01);
图4:柴胡疏肝散水煎剂抑制4T-1荷瘤小鼠的肿瘤生长;4A为4T-1荷瘤小鼠肿瘤;4B为4T-1荷瘤小鼠肿瘤重量量化图;4C为小鼠体重变化图(*表示p<0.05,***表示p<0.001)。
具体实施方式
本发明公开了一种柴胡舒肝散在制备非手术型或非放化疗型治疗乳腺癌的药物中的应用,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
本发明提供的柴胡舒肝散在制备非手术型或非放化疗型治疗乳腺癌的药物中的应用中所用原料或辅料均可由市场购得。
以下实施例中,柴胡舒肝散配方的水煎剂的制备方法为:第一次加10倍药量的双蒸水,浸泡30分钟后,开始武火加热至沸腾后改文火30分钟,倒出药液;再加10倍药量的双蒸水,开始武火加热至沸腾后改文火30分钟,然后将两次煮好的药液混匀,再煎煮30分钟,即可服用。
下面结合实施例,进一步阐述本发明:
实施例1
本实施例采用柴胡舒肝散配方的水煎剂上清,对体外乳腺癌细胞系及体内乳腺癌荷瘤裸鼠模型进行的药敏实验,结果显示柴胡舒肝散配方的水煎剂对体外乳腺癌细胞及乳腺癌移植瘤均具有生长抑制作用,且呈剂量依赖性。具体结果如下:
1)柴胡疏肝散水煎剂抑制乳腺癌细胞生长增殖:
运用细胞增殖/毒性检测试剂(CCK8)对3株乳腺癌细胞系(分别是人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞和鼠源乳腺癌4T-1细胞系)进行体外药效评估,乳腺癌细胞用含10%胎牛血清的DMEM培养基培养,对数生长期细胞消化后铺96孔板(4×103个/孔),待细胞贴壁后分别加入梯度浓度的水煎剂,即0(溶剂对照)、2.5mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml(均折合成生药量),于培养0h、24h、48h、72h、96h时取待测的96孔板,吸弃上清,更换完全培养液(含10%(V/V)CCK8),继续37℃孵箱培养3h,振荡床轻微振荡10s,采用自动酶标仪(Bio-Rad)检测各孔450nm波长吸光度,每个条件设3个平行孔,绘制生长曲线分析。结果如图1所示,柴胡疏肝散水煎剂对3株乳腺癌细胞均表现良好的抑瘤效果,并具有剂量依赖性。
2)柴胡疏肝散水煎剂抑制乳腺癌细胞克隆形成能力:
肿瘤细胞克隆形成能力也能反映肿瘤细胞的生长增殖能力,将细胞消化成单个细胞悬液,按每孔500个细胞量接种于6孔板,细胞贴壁后,加入不同浓度的药物及溶剂对照处理,分别0(溶剂对照)、5mg/ml和10mg/ml(均折合成生药量),继续培养12天至肉眼可见的细胞克隆。弃液,PBS洗一遍,冰甲醇固定30min,0.1%结晶紫染色30min,照相并计数。计算肉眼可见的克隆数(>50个细胞为一个克隆),结果如图2所示,柴胡疏肝散水煎剂能显著抑制3株乳腺癌细胞的克隆形成能力(p<0.001),并且呈量效趋势。
3)柴胡疏肝散水煎剂抑制乳腺癌移植瘤的生长
体内实验中,首先构建乳腺癌移植瘤模型,分别于BALB/C-nu裸鼠和BALB/C小鼠皮下分别接种MDA-MB-231细胞(约1*106个/只)和4T-1细胞(5*105个/只),待瘤块长到100mm3时,开始灌胃给药,剂量为0.2mL/次/只/天,柴胡疏肝散水煎剂设置3个浓度梯度,分别0(溶剂对照PBS)、0.7g/ml和1.4g/ml(均折合成生药量),连续给药三周。期间,每三天称体重和量瘤块体积。最后一次给药后次日,断颈处死裸鼠,取瘤块,称重、拍照。比较各组瘤块重量,并绘制瘤块生长曲线和瘤重柱状图。结果分别如图3、图4所示,柴胡疏肝散水煎剂对乳腺癌均呈现出良好的抑制现象,实验过程中,裸鼠和BALB/C小鼠的体重变化无明显差别(图3C、4C),说明生药量0.7g/ml和1.4g/ml的柴胡疏肝散水煎剂没有明显的毒副作用。生药量0.7g/ml和1.4g/ml的柴胡疏肝散对人源的MDA-MB-231乳腺癌移植瘤分别达到28%和40.8%,对鼠源的4T-1乳腺癌抑制率分别达到32.2%和53.9%。
以上的体内外实验结果均证明柴胡疏肝散对乳腺癌细胞的生长均具有一定的抑制效果,根据乳腺癌的复杂病因病理,该药以疏肝理气,活血化瘀为主,能通过对机体整体调节达到治疗效果。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.柴胡舒肝散在制备非手术型或非放化疗型治疗乳腺癌的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述柴胡舒肝散由柴胡、香附、川芎、枳壳、陈皮、甘草、芍药制成。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于,以重量份计,所述柴胡舒肝散由柴胡4份、香附3份、川芎3份、枳壳3份、陈皮4份、甘草1份、芍药3份制成。
4.根据权利要求2或3所述的应用,其特征在于,所述柴胡舒肝散的制备方法为:将原料进行水煎制得。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述水煎的用水量为原料重量的10~20倍。
6.根据权利要求4或5所述的应用,其特征在于,所述水煎的次数为3次,每次30~45min。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的应用,其特征在于,所述药物的剂型为水煎剂、粉剂、片剂、丸剂或胶囊剂。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的应用,其特征在于,所述应用为柴胡舒肝散在制备抑制乳腺癌细胞生长增殖药物中的应用。
9.根据权利要求1至7中任一项所述的应用,其特征在于,所述应用为柴胡舒肝散在制备抑制乳腺癌细胞克隆形成能力药物中的应用。
10.根据权利要求1至7中任一项所述的应用,其特征在于,所述应用为柴胡舒肝散在制备抑制乳腺癌移植瘤生长药物中的应用。
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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