CN113384593A - 一种柴胡皂苷a在制备抑制血管生成药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用，所述的血管生成包括肿瘤血管新生，还包括白血病、淋巴瘤或骨髓瘤血液癌症的血管新生。柴胡皂苷A作为单一成分或与其它药学上可接受的成分构成组合物应用在制备抑制血管生成的药物中，所述的其他药学上可接受的成分包括与柴胡皂苷A没有拮抗作用的药物，或药学上允许的一种或多种辅料。与现有技术相比，本发明首次发现柴胡皂苷A具有抗血管生成活性，可作为血管生成抑制剂使用，能够作为血管生成抑制剂应用于血管生成药物的制备以治疗肿瘤、关节炎、银屑病、眼科疾病等新生血管依赖性和新生血管相关性疾病。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用。
背景技术
目前对血管生成(angiogenesis)的定义为在原来的血管基础上通过出芽形成新的毛细血管的过程。包括：内皮细胞增殖、基底膜降解、内皮细胞迁移形成微管、基底膜重塑、最终形成新血管，是一个涉及多种细胞和多种分子的复杂过程，其具有重要的生理及病理意义。
正常情况下，血管生成受到严格调控，该过程由促血管生成因子和抑制因子共同协调，维持在一个稳定的状态。但在肿瘤环境中，二者平衡被打破，血管生成机制被异常激活，病理性生成的血管为肿瘤细胞带来丰富的养料和氧气，且为肿瘤的转移创造了条件。此外，异常新生的血管也与类风湿、视网膜眼底病和银屑病等疾病有关。
恶性肿瘤严重威胁着人类健康，且其发病率呈逐年上升趋势。如何治疗肿瘤成了各国政府的重要课题。研究表明，新生血管是恶性肿瘤快速增长的先决条件，当肿瘤直径大于1mm时，需先形成肿瘤血管为肿瘤的生长提供必须的营养并帮助其排除代谢废物，因此新生的肿瘤血管在肿瘤生长转移中有着重大作用。Folkman于1971年首先提出肿瘤的生长与转移依赖于血管生成，因此可通过抑制血管生成阻滞肿瘤生长这一学说，为后来开发抗肿瘤血管生成药物奠定了坚实的基础。
中国专利文献CN100577180C公开了一种藤黄酸在制备抑制血管生成中的应用。该发明提供了藤黄酸在制备抑制血管生成药物中的应用特别是在制备抑制肿瘤、关节炎、视网膜病、血管瘤、银屑病等疾病的病变组织血管生成药物中的应用。中国专利文献CN109692182A公开了蒲公英多糖在抑制血管中的新用途，研究表明，蒲公英多糖能够通过下调肿瘤细胞VEGF、VEGFR2表达，在体内外抑制肿瘤血管生成；具有能够有效抑制肿瘤血管生成从而达到抗肿瘤作用的优点。中国专利文献CN112402474A公开了竹节参总皂苷在制备类风湿性关节炎血管生成的药物中的应用。该发明公开了竹节参总皂苷在抑制类风湿性关节炎血管生成中的新用途。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现：
发明人知晓，柴胡皂苷A(Saikosaponin A)属于五环三萜类齐墩果烷型化合物，为伞形科植物柴胡(Bupleurum chinense DC.)或狭叶柴胡(Bupleurum scorzonerifoliumWilld.)干燥根的皂苷类主要活性物质，其化学结构式为 C42H68O13，分子量为780.98，但关于柴胡皂苷A在抑制血管生成中的应用还未见报道。
发明人还知晓，柴胡皂苷A具有抗炎、抗病毒和调节免疫的作用。近来，该化合物还被证明由抗肿瘤作用，其可通过活性氧的积累及线粒体途径诱导肝癌细胞HepG2、人乳腺肿瘤细胞MDA-MB-231以及人胃癌细胞MKN-45凋亡，抑制4T1细胞和肝星状细胞HSC的生长等药理活性。
一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用。
进一步地，所述的血管生成包括肿瘤血管新生，还包括白血病、淋巴瘤或骨髓瘤血液癌症的血管新生。
进一步地，所述的肿瘤为实体肿瘤。
进一步地，所述的实体肿瘤包括原发性或继发性实体肿瘤。
进一步地，所述的肿瘤血管新生包括肿瘤病变组织的血管新生或肿瘤导致的血管新生。
进一步地，所述的血管生成包括银屑病病变组织血管新生、良性血管增生疾病的血管新生、关节炎病变组织的血管新生或新生血管性眼病的血管生成。
进一步地，所述的新生血管性眼病包括原发性或继发性新生血管性眼病。
进一步地，所述的柴胡皂苷A作为单一成分或与其它药学上可接受的成分构成组合物应用在制备抑制血管生成的药物中，所述的其他药学上可接受的成分包括与柴胡皂苷A没有拮抗作用的药物，或药学上允许的一种或多种辅料。
优选地，柴胡皂苷A在药物中的浓度不低于10μM，优选10-100μM，更优选30-100μM。
进一步地，所述药物的剂型包括胶囊剂、片剂、微囊制剂、注射剂、栓剂、喷雾剂或软膏剂。
进一步地，所述的药物的给药方式包括注射、口服、吸入式喷雾或透皮给药。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：
(1)本发明提供了柴胡皂苷A的一种新用途，首次发现柴胡皂苷A抗血管生成作用；
首次发现柴胡皂苷A可有效抑制血管内皮细胞的增殖、迁移和小管形成；
首次发现柴胡皂苷A在鸡胚绒毛尿囊膜实验中可剂量性依赖性抑制血管生成；
首次发现柴胡皂苷A可通过抗血管生成抑制裸鼠皮下异位接种肿瘤的生长以及BALB/c小鼠原位接种肿瘤的生长；
首次发现柴胡皂苷A可抑制小鼠体内接种基质胶中血管的生成；
并首次发现柴胡皂苷A可特异性阻断血管内皮生长因子受体2(VEGFR2) 介导的信号通路发挥其抗血管生成作用；
(2)本发明的发现可说明柴胡皂苷A具有抗血管生成活性，可作为血管生成抑制剂使用，能够作为血管生成抑制剂应用于血管生成药物的制备以治疗肿瘤、关节炎、银屑病、眼科疾病等新生血管依赖性和新生血管相关性疾病。柴胡皂苷A为天然植物提取物，能够有效抑制肿瘤血管生成从而达到抗肿瘤作用的目的，具有广阔的应用场景。
附图说明
图1为柴胡皂苷A对肿瘤细胞HCT-15、4T1和HUVEC的抑制增殖情况；
图2为柴胡皂苷A抑制HUVEC细胞水平运动、垂直迁移及小管形成的情况；
图3为柴胡皂苷A抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成情况；
图4为柴胡皂苷A抑制小鼠体内基质胶血管形成情况；
图5为柴胡皂苷A通过抑制HCT-15荷瘤小鼠肿瘤生长情况；
图6为柴胡皂苷A抑制VEGFR2及其下游信号分子磷酸化情况。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明。本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。
下列实施案列中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，所用试剂均可以在市场上购买。
实施例1：柴胡皂苷A抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖实验
目的和原理：采用CCK-8法检测HUVEC的增殖。CCK-8试剂中含有水溶性四唑盐WST-8(化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)，WST-8在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜染料(formazan)。甲臜染料能够溶解在组织培养基中，与活细胞数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。
方法：HUVEC细胞接种于96孔板中培养。细胞过夜培育，将柴胡皂苷A 按以下浓度1、3、10、30、100μM加入孔板中，作用48小时加入CCK-8与培养基的混合溶液(1:9)，每孔100μL。置于的恒温培养箱中继续孵育2h，在450nm处检测96孔板中溶液的OD值，以不含细胞的孔作为空白对照。按如下公式计算细胞活力：
细胞活力(％)＝(ODsample-ODblank)/(ODcontrol-ODblank)×100％
结果与结论：
图1表示柴胡皂苷A在不影响肿瘤细胞HCT-15、4T1活力的情况下抑制 HUVEC的增殖，其中(A)柴胡皂苷A结式。(B)柴胡皂苷A抑制HUVEC 增殖且在相同浓度下不影响HCT-15、4T1细胞活力。
参照附图1B，如图所示柴胡皂苷A对HUVEC增殖有明显的抑制作用。柴胡皂苷A的浓度在10-100μM时对HUVEC的增殖抑制显著性高于HCT-15 和4T1。
实施例2：柴胡皂苷A抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖
目的和原理：Calcein-AM是一种可对活细胞进行荧光标记的低毒性细胞染色试剂。当其进入到细胞质后，酯酶会将其水解为Calcein留在细胞内，发出强绿色荧光。Calcein的激发和发射波长分别为490nm和515nm且仅对活细胞染色。
作为核染色染料的PI不能穿过活细胞的细胞膜，它穿过死细胞膜的无序区域而到达细胞核，并嵌入细胞的DNA双螺旋从而产生红色荧光(激发：488，545nm，发射：617nm)，因此PI仅对死细胞染色。所以，Calcein,AM和PI 经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。通过该种方法可以评价药物对HUVEC增值的影响。
方法：HUVEC细胞接种于96孔板中培养。细胞过夜培育，将柴胡皂苷A 按以下浓度1、3、10、30、100μM加入孔板中，48h后吸出含药培养基，并用PBS洗涤除去多余的药液，每孔加入200μLCalcein-AM(2μM)和PI(4.5 μM)的染色工作液，混匀，在细胞培养箱中继续孵育15min，在荧光显微镜下观察细胞染色情况并拍照，并用Image-Pro Plus 6.0分析统计。
结果：
图1表示柴胡皂苷A在不影响肿瘤细胞HCT-15、4T1活力的情况下抑制 HUVEC的增殖，其中(C、D)柴胡皂苷A抑制HUVEC增殖，提示新生血管细胞对柴胡皂苷A的增殖抑制作用更敏感。
如图1C所示，柴胡皂苷A能剂量依赖性的抑制HUVEC的增殖。
实施例3：柴胡皂苷A抑制HUVEC水平迁移实验
目的与原理：细胞划痕实验是一种操作简易，且价格低廉的研究细胞迁移的体外实验方法，通过融合在单层细胞上人为造成一道空白区域，称为划痕。划痕边缘细胞逐渐迁移进入空白区域“愈合”该划痕。
方法：将HUVEC接种于96孔板中，生长至80％融合。用划痕器在每孔中间轻轻划一道痕。加入不同浓度的柴胡皂苷A的细胞培养液，置于IncuCyte 培养箱中孵育48h。观察并统计HUVEC的迁移情况。
结果与结论：
图2(A)柴胡皂苷A抑制HUVEC划痕迁移照片。
如图2A所示，柴胡皂苷A在10-100μM范围内可显著抑制HUVEC的水平迁移。
*：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有较显著性差异(P＜0.05)
***：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有极显著性差异(P＜ 0.001)
实施例4：柴胡皂苷A抑制HUVEC垂直迁移实验
目的和原理：Transwell实验技术，这项技术的主要材料时Transwell小室(Transwell chamber)，小室的底层有一层通透性的膜(一般常用的是聚碳酸酯膜(polycarbonate membrane))，这层膜带有孔径大小0.1-12μm的微孔，实验中细胞置于小室上，在小室下含有的趋化因子或生长因子的作用下，细胞透过聚碳酸酯膜，从而进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。
方法：下室中加入VEGF165的HUVEC培养液700μL，在上室中加入含有不同浓度柴胡皂苷A与细胞的培养液100μL，细胞密度为8×105/mL，同时设置不加药物的对照组。置于恒温培养箱中培养8h后，弃去孔板中旧的培养液，加入600μL 4％多聚甲醛常温固定15min。用棉签去除上室中未迁移的细胞，然后向下室中加入300μL 0.1％结晶紫溶液室温下过夜染色。用PBS浸洗下室五次，除去多余的结晶紫溶液，在正置显微镜下观察HUVEC细胞迁移情况并拍照统计。
结果与结论：
图2(B)柴胡皂苷A抑制HUVEC Transwell小室垂直迁移的照片。
迁移后的细胞经结晶紫染色后呈紫红色。由图2B显示，与对照组相比，柴胡皂苷A的浓度在10-100μM范围内，HUVEC的迁移能力被显著抑制。
**：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有显著性差异(P＜0.01)
***：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有极显著性差异(P＜ 0.001)
实施例5：柴胡皂苷A抑制HUVEC小管形成实验
目的和原理：Matrigel是从是从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中提取出基底膜基质，其主要成分有层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、肝素糖蛋白，还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。人脐静脉内皮细胞可以在Matrigel上黏附成管，从而可用于研究药物对内皮细胞成管作用的影响。
方法：将Matrigel溶液放置于冰上，使其融化。用预冷的枪头取Matrigel 溶液加入到预冷的96孔培养板中，每孔60μL。在冰上放置5min后，待Matrigel 溶液液面水平。将96孔板放置于37℃恒温培养箱中孵育30min，使Matrigel 溶液固化。将HUVEC细胞用胰蛋白酶消化，并重悬于培养液中，调整细胞密度为2×105/mL。用细胞悬液稀释柴胡皂苷A，调整其浓度为1、3、10、30、 100μM。向铺有Matrigel溶液的96孔板中加入含药的细胞悬液，每孔100μL。将96孔板置于37℃、5％CO2恒温培养箱中，10h后，使用光学显微镜观察血管形成情况，拍照并统计。
结果与结论：
图2(C)柴胡皂苷A抑制HUVEC抑制小管生成的照片。
HUVEC可在Matrigel上延伸生长呈管状并相互连接，形成三维网状结构。由图2C所示，与对照组相比，柴胡皂苷A的浓度在10-100μM范围内，HUVEC 细胞小管形成能力被显著抑制，且在30，100μM时，HUVEC细胞散落存在，未见小管形成，HUVEC的小管形成能力被完全抑制。
*：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有较显著性差异(P＜0.05)
***：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有极显著性差异(P＜0.001)
实施例6：柴胡皂苷A抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成实验
目的和原理：鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)具有丰富的血管网，对于刺激或抑制血管生成的药物敏感，是较为理想的研究抗血管生成药物的体内实验模型。
方法：种蛋用温水(40-50℃)清洗两次后，于1：10000新洁儿灭液中浸泡3分钟；将种蛋孵育于普通培养箱中，温度37.8℃，培养箱中放入水盘(1000 ml水杯)，以保持湿度65-70％；在孵化过程中不停地转蛋，可防止胚胎发生粘连，种蛋钝端(大头端)向上，呈45°倾斜，每天转蛋2-4次；采用照蛋灯每日检查胚胎发育情况，识别胚胎发育的标志特征，随时淘汰死精弱精种蛋和死胎以及胚胎发育不良的种蛋；于第5-7天，在照蛋灯下观测，确定CAM为止，先在气室顶端1-2mm小孔，减压，用眼科镊轻轻揭去凹陷处蛋皮，轻轻撕掉内壳膜，此时该处CAM下陷，形成假气室，制备假气室时切勿损伤CAM，用封口膜封闭假气室；将随机分组好的向其中加入含有不同浓度药物的滤纸片 (5mm×5mm)，用封口膜密封，继续孵育48h后观察鸡胚绒毛尿囊膜上血管形成情况体内抗血管生成活性研究。
结果：由图3所示，柴胡皂苷A的浓度在10-100μM范围内，与对照组相比能显著抑制CAM血管新生。
*：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有较显著性差异(P＜0.05)
**：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有显著性差异(P＜0.01)
***：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有极显著性差异(P＜ 0.001)
实施例7：柴胡皂苷A对Matrigel体内种植的抗血管生成实验
目的与原理：研究柴胡皂苷A对体内血管生成的抑制效果，Matrigel是一种细胞外基质的混合物，其中包含laminin和多种生长因子，与药物混合注入小鼠体内能很好研究药物对血管生成的抑制作用。
方法：Matrigel置于4℃过夜后，Matrigel中加入肝素30U和不同浓度的柴胡皂苷A，对照组中不加入VEGF，实验组均加入100ng/ml VEGF；将充分混匀好的Matrigel以0.5mL注射于小鼠腹部正中区域皮下，待Matrigel形成单一固体胶样种植体后，拔出针头。12天后，颈椎脱臼处死小鼠，取出Matrigel；取出的基质胶用4％多聚甲醛固定，进行石蜡包埋与切片处理以免疫组织化学法完成血管内皮细胞CD31分子的染色，用光镜对切片进行整体扫描观察，查找高密度血管区域，并拍照记录。
结果：由图4所示，柴胡皂苷A在3-30μM范围内，与对照组相比能显著抑制Matrigel内血管生成的数量。
**：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有显著性差异(P＜0.01)
***：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有极显著性差异(P＜ 0.001)
实施例8：柴胡皂苷A抗血管生成抑制荷HCT-15人结直肠癌小鼠肿瘤生长实验分析(CD31：微血管密度，H&E染色：肿瘤坏死面积)，考察药物对于荷瘤小鼠的抗血管生成抑制肿瘤生长的疗效。
方法：将5周龄裸鼠分为对照组(生理盐水)和给药组(柴胡皂苷A)，每组各8只，逐一麻醉后，将HCT-15细胞于右腹部皮下注射100μl(2×106/ 只)，并剪脚趾进行编号；每日观察肿瘤生长的状态，待乳腺肿瘤体积达到～40 mm3，结肠癌肿瘤体积达到50mm3时，并开始给药处理，按照每日剂量10 mg/kg进行腹腔注射，连续给药15天。对照组(Control)用生理盐水做相同处理。从第一次给药开始，每次给药时随即对荷瘤裸鼠称重，游标卡尺测量肿瘤的长和宽并记录。同时观察肿瘤的生长状况及裸鼠的健康状况。处死所有荷瘤裸鼠，剥离出肿瘤，称重并记录。得到的肿瘤组织，经石蜡包埋、切片后进行CD31染色和H&E染色以考察柴胡皂苷A的抗肿瘤作用。
结果与结论：
图5为柴胡皂苷A通过抗血管生成作用抑制HCT-15荷瘤小鼠肿瘤生长，其中(A)小鼠肿瘤体积监测。(B)治疗组和对照组荷瘤小鼠及肿瘤代表性照片。(C)肿瘤重量统计。(D)小鼠体重监测。(E、F)肿瘤组织免疫组化染色 CD31(微血管密度)及统计。(G、H)H&E染色(肿瘤坏死)及统计。
如图5A-C所示，柴胡皂苷A能有效抑制肿瘤生长，治疗组平均肿瘤体积为436.9mm3，瘤重约为0.35g，显著小于对照组肿瘤体积1028.2mm3，瘤重 0.73g，免疫组化分析表明，柴胡皂苷A能显著抑制肿瘤微血管密度(图5E)，从而增加肿瘤坏死面积(图5G)，表明柴胡皂苷A能通过抗血管生成发挥抗肿瘤活性。
**：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有显著性差异(P＜0.01)
***：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有极显著性差异(P＜ 0.001)
实施例9：柴胡皂苷A抑制HUVEC内VEGF刺激的VEGFR2及其下游分子激活实验
目的和原理：在肿瘤血管新生过程中，VEGF通过与其表面的受体VEGFR 结合，在内皮细胞的增殖，迁移和小管形成中发挥重要作用。涉及到新生血管形成VEGF通路主要是由VEGFR2介导的，且VEGFR2的激活可激活其下游的多种信号分子。本研究采用了免疫印迹实验(Western Blot)方法考察柴胡皂苷A对于VEGF刺激引起的HUVEC内VEGFR2及其下游通路的影响。
方法：当HUVEC细胞直至长满整个六孔板，吸去旧培养基，PBS冲洗两次，用无刺激因子培养基饥饿细胞6h；
加入不同浓度的柴胡皂苷A溶液(1-100μM)2ml处理0.5h，PBS冲洗两次后，用含100ng/ml VEGF培养基刺激4min；将6孔板培养板置于冰上。用PBS浸洗两次，向6孔板中加入细胞裂解液(RIPA+PMSF+磷酸酶抑制剂)，每孔50μL，反复研磨。将细胞碎片及裂解液置于1.5mL离心管中，涡旋30s。离心后，弃去沉淀，将上清液转移至新的1.5mL离心管中；样品BCA蛋白定量后，100℃水浴加热5min后，保存至-20℃冰箱。按照计算的量，每孔上样量约为20μL；在60V的条件下，电泳1h使溴酚蓝进入到分离胶中；随后将电压调至90V，电泳1h。接着将电压调至120V，继续电泳直至溴酚蓝到达凝胶底部。然后将PVDF裁剪成合适的大小，甲醇浸润PVDF膜2min，将样品胶与PVDF膜装入转膜夹中，在220V条件下转膜2h。随后把PVDF膜转移至含5％milk-TBST的封闭液中，室温条件下，封闭1h左右；封闭结束后，在脱色摇床上使用足量的TBST溶液漂洗PVDF膜3次，每次5min；使用一抗稀释液按照相应的比例稀释待测分子的一抗。将PVDF膜与配制完成的一抗稀释液加入孵育盒中，在4℃条件下过夜孵育，采用羊抗兔的辣根过氧化物酶标记的二抗室温孵育1h。将超显试剂盒中A液和B液按照1:1的比例混匀稀释至20％，滴加到PVDF膜蛋白面，置于双色成像系统进行显色。
结果与结论：
图6为柴胡皂苷A抑制VEGFR2及其下游信号分子磷酸化，其中(A) 柴胡皂苷A抑制VEGF诱导的HUVEC细胞内VEGFR2及其下游信号分子磷酸化，包括：PLCγ1,FAK,Src和Akt。(B)柴胡皂苷A特异性阻断VEGFR2 介导信号通路的模式图。
如图6A所示，柴胡皂苷A能剂量依赖性的抑制VEGF诱导的HUVEC内的VEGFR2及其下游信号分子PLCγ1,FAK,Src和Akt的磷酸化。图6B表示柴胡皂苷A特异性阻断VEGFR2介导信号通路的模式图。
*：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有较显著性差异(P＜0.05)
**：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有显著性差异(P＜0.01)
***：与对照组(柴胡皂苷A的浓度为0μM)比具有极显著性差异(P＜ 0.001)。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (10)
1.一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用，其特征在于，所述的血管生成包括肿瘤血管新生，还包括白血病、淋巴瘤或骨髓瘤血液癌症的血管新生。
3.根据权利要求2所述的一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用，其特征在于，所述的肿瘤为实体肿瘤。
4.根据权利要求3所述的一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用，其特征在于，所述的实体肿瘤包括原发性或继发性实体肿瘤。
5.根据权利要求2所述的一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用，其特征在于，所述的肿瘤血管新生包括肿瘤病变组织的血管新生或肿瘤导致的血管新生。
6.根据权利要求1所述的一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用，其特征在于，所述的血管生成包括银屑病病变组织血管新生、良性血管增生疾病的血管新生、关节炎病变组织的血管新生或新生血管性眼病的血管生成。
7.根据权利要求6所述的一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用，其特征在于，所述的新生血管性眼病包括原发性或继发性新生血管性眼病。
8.根据权利要求1所述的一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用，其特征在于，所述的柴胡皂苷A作为单一成分或与其它药学上可接受的成分构成组合物应用在制备抑制血管生成的药物中，所述的其他药学上可接受的成分包括与柴胡皂苷A没有拮抗作用的药物，或药学上允许的一种或多种辅料。
9.根据权利要求1-8任一项所述的一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用，其特征在于，所述药物的剂型包括胶囊剂、片剂、微囊制剂、注射剂、栓剂、喷雾剂或软膏剂。
10.根据权利要求1-8任一项所述的一种柴胡皂苷A在制备抑制血管生成药物中的应用，其特征在于，所述的药物的给药方式包括注射、口服、吸入式喷雾或透皮给药。
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| CN107095949A (zh) * | 2017-05-04 | 2017-08-29 | 中国医学科学院医学实验动物研究所 | 柴胡舒肝散在制备非手术型或非放化疗型治疗乳腺癌的药物中的应用 |
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