CN107075550A - 诱导藻胆蛋白合成的方法 - Google Patents
诱导藻胆蛋白合成的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN107075550A CN107075550A CN201580046409.XA CN201580046409A CN107075550A CN 107075550 A CN107075550 A CN 107075550A CN 201580046409 A CN201580046409 A CN 201580046409A CN 107075550 A CN107075550 A CN 107075550A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- biomass
- phycobniliprotein
- microalgae
- induction
- photosynthetic microalgae
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 52
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title claims description 22
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title claims description 22
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 title description 18
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 139
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 claims abstract description 37
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 32
- 108060006184 phycobiliprotein Proteins 0.000 claims abstract description 24
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims abstract description 14
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 239000002417 nutraceutical Substances 0.000 claims abstract description 4
- 235000021436 nutraceutical agent Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 4
- 108010053210 Phycocyanin Proteins 0.000 claims description 40
- 241000192700 Cyanobacteria Species 0.000 claims description 36
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 35
- 241001495180 Arthrospira Species 0.000 claims description 26
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 claims description 25
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 25
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 23
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 19
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Inorganic materials [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 241000206572 Rhodophyta Species 0.000 claims description 11
- 244000085413 Aphanizomenon flos aquae Species 0.000 claims description 8
- 235000013781 Aphanizomenon flos aquae Nutrition 0.000 claims description 8
- 229940054349 aphanizomenon flos-aquae Drugs 0.000 claims description 8
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 6
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 claims description 4
- 230000004907 flux Effects 0.000 claims description 4
- 235000008935 nutritious Nutrition 0.000 claims description 4
- 108010004335 phycoerythrocyanin Proteins 0.000 claims description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims 1
- 241001062009 Indigofera Species 0.000 claims 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 abstract description 3
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 10
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 9
- 240000002900 Arthrospira platensis Species 0.000 description 6
- 235000016425 Arthrospira platensis Nutrition 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 229940082787 spirulina Drugs 0.000 description 5
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000005791 algae growth Effects 0.000 description 4
- 108010004469 allophycocyanin Proteins 0.000 description 4
- 230000002882 anti-plaque Effects 0.000 description 4
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 4
- NUVBSKCKDOMJSU-UHFFFAOYSA-N ethylparaben Chemical compound CCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 NUVBSKCKDOMJSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 3
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 3
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 3
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 3
- MOZDKDIOPSPTBH-UHFFFAOYSA-N Benzyl parahydroxybenzoate Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C(=O)OCC1=CC=CC=C1 MOZDKDIOPSPTBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 2
- OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N all-trans beta-carotene Natural products CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 description 2
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 description 2
- TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N beta-carotene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=CCCCC2(C)C TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N 0.000 description 2
- 235000013734 beta-carotene Nutrition 0.000 description 2
- 239000011648 beta-carotene Substances 0.000 description 2
- 229960002747 betacarotene Drugs 0.000 description 2
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 2
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 2
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 2
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 235000010228 ethyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 2
- 239000004403 ethyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 2
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 2
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 description 2
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 108010007337 Azurin Proteins 0.000 description 1
- 206010034972 Photosensitivity reaction Diseases 0.000 description 1
- 108010059332 Photosynthetic Reaction Center Complex Proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229940011019 arthrospira platensis Drugs 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 201000010251 cutis laxa Diseases 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000027721 electron transport chain Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000003050 experimental design method Methods 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000036211 photosensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 229930010796 primary metabolite Natural products 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000003440 toxic substance Substances 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 238000001429 visible spectrum Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P23/00—Preparation of compounds containing a cyclohexene ring having an unsaturated side chain containing at least ten carbon atoms bound by conjugated double bonds, e.g. carotenes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L17/00—Food-from-the-sea products; Fish products; Fish meal; Fish-egg substitutes; Preparation or treatment thereof
- A23L17/60—Edible seaweed
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/02—Algae
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
- A61K8/645—Proteins of vegetable origin; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9706—Algae
- A61K8/9717—Rhodophycota or Rhodophyta [red algae], e.g. Porphyra
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/10—General cosmetic use
Abstract
本发明涉及制备光合微藻生物质的方法，该光合微藻生物质的藻胆蛋白含量等于所述生物质干重的至少20％。本发明还涉及富含藻胆蛋白的生物质，及其作为食品补充剂或作为营养食品制剂和化妆品制剂的成分的用途。
Description
本发明涉及诱导藻类生物质合成藻胆蛋白的方法。
更具体地，本发明涉及制备光合微藻生物质的方法，该光合微藻生物质的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的20％，所述方法包括阻断所述生物质的生长的步骤和诱导藻胆蛋白合成的步骤。
藻胆蛋白是红藻纲(Rhodophyceae)、隐藻纲(Cryptophyceae)和蓝细菌(蓝绿藻)组中的微藻中存在的光合色素蛋白。它们是着色容量范围从红色到蓝色的蛋白色素。
在藻胆蛋白中，能够区分藻蓝蛋白、藻红蛋白、别藻蓝蛋白和藻红蓝蛋白。
藻蓝蛋白是仅在蓝绿藻：蓝细菌中发现的天然蓝色蛋白色素。藻蓝蛋白是位于藻胆蛋白体中的电子传递链的组件，其作用是收集可见光谱的红色部分中的光能，并将其转移到光合复合体的光合系统II的反应中心。在一些抑制光合活性的应激条件下，藻蓝蛋白参与包括通过荧光耗尽过度能量的保护机制。这些条件导致这种色素的合成增加，及其以细胞的固氮酶储备的形式积累。
控制几个物种的蓝细菌中藻蓝蛋白合成的关键因素是氮和铁含量、光和温度。已证明，蓝细菌可以依据这些参数在各物种独特的变化范围内调节它们的藻蓝蛋白含量(Hemlata,2009)。
藻蓝蛋白具有抗氧化剂属性和荧光属性，能够使其具有多种制药和医学应用(Erikson,2008和Liu et al,2000)。除了其治疗属性及其独特的蓝色外，其天然特性、其在水溶液中在不存在任何有机溶剂下的提取均是使其能够容易整合到与食品和治疗市场相关的欧洲和美国标准的需求中的优势。
此外，解决了与藻蓝蛋白在水溶液中的稳定性、其高光敏感性和其难以保存相关的问题已经使藻蓝蛋白市场在过去几年内风靡全球。
在全球市场上出售的藻蓝蛋白仅从一种蓝细菌：钝顶节旋藻(Arthrospiraplatensis)(螺旋藻)提取。螺旋藻是大规模生产的蓝细菌，并且根据文献，具有在某些条件下合成藻蓝蛋白多达其干重的25％的优势。
藻蓝蛋白生产通常受多种环境因素影响(Niels T.Eriksen,2008,Remziye Aysun&SaadetSaygideger,2012)。特别是，氮和光是最重要的因素。前者是合成构成蛋白质的氨基酸和包括藻蓝蛋白的其他细胞化合物所必需的(Samy Boussiba和Amos E.Richmond,1980，和Remziye Aysun &SaadetSaygideger,2012)，而光是所有光合活性的能量来源。
本领域技术人员已知的是，生物质生产率通过经过最佳值的抛物线关系与培养密度相关联。最佳密度促进初级代谢，因此使能量从光合作用导向生长和繁殖。当密度高过某一阈值时，生长停止，并且通过光合作用收集的能量被导向次级代谢，并因此导向合成防御(或应激)代谢物。在某些应激条件(过量的氮、低亮度)下，藻蓝蛋白构成了合成最多的防御代谢物(Chen et al.,1996；Tomaselli et al.,1997)。
此外，在现有技术中，能够优化藻蓝蛋白合成的培养条件和能够优化生物质生长的培养条件颇为不同。这是因为最佳的微藻生长条件通常是100至200μmol m-2s-1(3300至6600Lux)。在最佳光强度下产生的微藻培养物将能够使生物质快速生长，但将使藻蓝蛋白相当缓慢地合成。相反，在较低光强度(10至40μmol m-2s-1)下产生的微藻培养物生长缓慢，并因此导致生物质的生产率低。然而，在这些相同的低光强度条件下，藻蓝蛋白的含量值可以翻倍或成三倍。
在存在过量的氮并因此使氮含量超过在工业培养物中施用的氮含量的条件下获得最大的藻蓝蛋白合成。
存在多种生产微藻的系统，所谓的在池塘或湖泊中的开放天然系统，和所谓的由光生物反应器组成的封闭系统。
开放系统(通常是浅水湖泊(最大30cm))是最常使用的，因为它们易于使用，并且成本不是很高。然而，它们具有受制于气象条件的变化和水蒸发的缺点，并且培养物的混合常常不足以能够良好地暴露于光。因此，它们具有两个主要缺点：缺少对培养物的控制，以及生产率低。
光生物反应器中的封闭系统是就水或营养物而言受控的系统。然而，它们是成本非常高的系统，其使用不易，特别是就进入光而言。
在发明人对来自不同源和从不同生长培养物(无论是在湖泊中或在光生物反应器中)获得的螺旋藻粉或新鲜生物质进行的整个分析中，获得的最大藻蓝蛋白含量是生物质干重的12％。含量在不同样品之间是可变的，并且在生物质干重的3％至12％之间。因此，获得的藻胆蛋白含量总是低于生物质中最初存在的藻胆蛋白的最大值(干重的20至25％)；这些最大值仅在经过长的生长周期才可获得。
在生长期期间，已经进行了目标为增加藻蓝蛋白合成的所有现有研究。此外，在涉及藻蓝蛋白合成的整个科学文献中，已经彼此独立地研究了促进这一合成的多种应激因素。
在生产过程中，依赖于各因素的强度，对于藻蓝蛋白的合成，各因素彼此以协同或拮抗的方式相互作用。在具有多个因素的过程中，找到应激因素的焦点是这一代谢物合成最大化所必需的。
因此，本发明试图解决的技术问题是通过定义微藻生长和藻胆蛋白合成的最佳条件，优化光合微藻生物质合成藻胆蛋白，而没有不利地影响所述生物质的生长。
该技术问题由本发明所述的方法解决，该方法包括阻断生物质生长的步骤和诱导藻胆蛋白合成的步骤，所述方法适合于任何用于培养微藻的常规系统，只要其在去掉一部分微藻培养物之后进行。
因此，本发明的主要主题是用于制备光合微藻(特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻)生物质的方法，所述方法包括诱导藻胆蛋白在生物质中合成，该生物质的生长被阻断。本发明的方法能够获得藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的20％的生物质。
所述光合微藻特别选自红藻纲、隐藻纲和蓝细菌，更特别是蓝细菌，甚至更特别是钝顶节旋藻和水华束丝藻(Aphanizomenon flos-aquae)，尤其是克拉马斯藻(Klamathalga)。
在诱导期间，其生长被阻断的所述生物质与诱导培养基(特别是诱导液)接触。
本发明的方法能够特别获得藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的21％、22％、23％、24％或25％的生物质。
本发明的方法能够特别获得藻胆蛋白含量为所述生物质干重的20％至25％的生物质。
因为根据本发明的方法在培养罐外进行，使其不会不利地影响生物质的生产率。
术语“生物质”旨在表示在培养物中在给定时刻下活微藻的总质量。其以g/l表示。
术语“藻胆蛋白”旨在表示光合作用的水溶性色素蛋白，诸如别藻蓝蛋白(APC)、藻蓝蛋白家族(C-PC和R-PC)、藻红蛋白家族(R-PE和C-PE)、藻红蓝蛋白(PEC)，其从某些微藻或蓝细菌分离。
术语“诱导合成”旨在表示通过任何方式刺激微藻生物质产生藻胆蛋白。
术语“诱导培养基”旨在表示用于培养微藻的任何培养基，其含有相对于最佳生长所需的盐浓度过量或不足的一种或多种盐。在本发明的上下文中，这一培养基含有通过将NaNO3加入到Zarrouk培养基而获得的过量的氮，浓度为大于2.5g/l，并且优选3至4g/l。
术语“阻断生长”旨在表示停止微藻的增殖。阻断生长是可逆的。这是因为在阻断生长之后，收集了一部分生物质。因此，浓度降低，生物质可以再次生长。因此，生物质没有受到不利的影响。
例如，通过依照微藻生长速率随培养密度变化的曲线确定阻断生长(阻断微藻增殖的事实)。当微藻生长速率为零时，观察到阻断。
在本发明的一个实施方案中，该方法的特征在于阻断所述微藻(特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻)生物质生长是在诱导罐中执行，所述生物质在所述罐中的所述浓度比能够使微藻在培养中最佳生长的浓度高3至13倍。
在本发明的一个实施方案中，该方法的特征在于阻断所述微藻(特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻)生物质生长是在诱导罐中执行，所述生物质在所述罐中的所述浓度比能够使微藻在培养中最佳生长的浓度高3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或13倍。
术语“浓度”可以被术语“密度”代替。提及“生物质密度”或“生物质浓度”时没有区别。密度和浓度均是以g/l表示。
可以接受的是，能够使微藻在培养中最佳生长的密度/浓度为约0.4g/l。
在本发明的上下文中通过将生物质以1至5g/l的浓度引入到诱导罐进行这一阻断，但是这一方式是非限制性的，并且在本发明的上下文中可以使用阻断生物质生长的任何方式。在阻断时所述生物质的浓度可以等于1g/l、1.5g/l、2g/l、2.5g/l、3g/l、3.5g/l、4g/l、4.5g/l或5g/l。
可以通过不同的方法测量生物质的密度/浓度。
-沙奇盘(Secchi disk)：这是能够快速估测水生培养基中培养的细胞密度的简单设备。其由30cm长的有刻度的标尺组成，在底端在零刻度处具有5cm直径的白盘。一旦浸没在培养基中不再能够看到盘时，标注深度，以厘米计。
-在显微镜下计数。这一方法是耗时的，但是其能够估测丝状体数量和每个丝状体的旋转数。通过校准移液管，将一滴样品沉积到凹玻片上，在显微镜下观察它；评价液滴中的丝状体数量，已知我们移液管中的17滴表示1ml体积。如果培养物非常浓，稀释样品。计算随机选择的30个丝状体的平均旋转数。
-665nm下的光密度。这一方法使用665nm处的吸光度能够快速估测生物质，665nm是叶绿素的吸收波长之一。这一体内吸收通常与叶绿素浓度良好相关。使用配有具有平行面的25cl容器的分光光度计。对没有接种的培养基进行归零。
诱导罐可以是中间培养罐或回收罐或用于储存活微藻的任何其他封闭系统。在本发明的优选实施方案中，所述生物质在诱导罐中的浓度在基本上等于或大于1g/l的值至在基本上等于或小于5g/l的值之间。通过将诱导培养基加入到诱导罐获得这一浓度。
1g/l至5g/l的浓度对应的密度比收集时间时生长的生物质密度大3至13倍，收集时间时也就是最佳生长时刻，此时浓度为约0.4g/l。在此浓度下，阻断生长以促进微藻的防御机制。
例如通过过滤、倾析或离心使所述生物质达到1g/l至5g/l的浓度，可以阻断例如在最佳生长、尤其是在约0.4g/l的浓度下的生物质生长。
在将生物质沉积在诱导罐之前，还可以使生物质经受洗涤。洗涤能够除去源自培养基的过多的盐。因此，这能够更好地控制诱导培养基(特别是诱导液)的氮浓度。
在这一情况下，生物质使用生理水或新鲜制备的诱导培养基溶液洗涤3次。
在这些条件下，初始生物质不受方法的影响，并且对藻蓝蛋白合成的诱导不依赖于生物质的培养条件。
这种方法具有能容易地整合到传统螺旋藻培养场的生产线的优势。它可以应用在中间培养罐或回收罐中，持续3个小时、4个小时或直至5个小时。
在本发明的一个特定实施方案中，诱导藻胆蛋白合成的步骤包括：
1)将光合微藻(特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻)生物质暴露于光通量，所述通量具有基本上等于或大于10μmol m-2s-1的值至基本上等于或小于13μmol m-2s-1的值的光强度；
2)加入氮源，以在诱导培养基中获得大于2.5g/l的NaNO3浓度。
例如，通过测量在光合作用中有效的辐射的光度计来测定光强度，以每平方米每秒微摩尔光子计。
应注意，10μmol m-2s-1对应于330Lux，13μmol m-2s-1对应于429Lux，特别是当照明设备是荧光管(例如“植物生长荧光”型)时。在这种情况下，每平方米每秒1μmol光子等于33Lux。
NaNO3在诱导培养基中的浓度特别是3至4g/l或3至5g/l。
范围为10至13μmol m-2s-1的光强度与含有3至5g/l的NaNO3(作为氮源)的培养液的组合使其能够获得含有20至25％藻蓝蛋白的生物质，相比于不施用本发明的方法进行的实验中获得的3至12％的范围，这是特别高的。
可以通过简单的40W功率白炽灯泡或通过荧光管提供光。
优选的诱导培养基包括Zarrouk培养基，但是可以使用适合于螺旋藻的任何其他培养基。在任何情况下，诱导培养基(特别是诱导液)的氮浓度通过加入过量的硝酸钠(NaNO3)来修改。NaNO3的最终浓度必须在3至5g/l范围内，其表示比初始Zarrouk培养基中存在的浓度(2.5g/l的NaNO3)大1.2至2倍的浓度。
在以上限定的培养条件下，诱导步骤进行3小时、4小时或直至5小时，并且足以诱导藻胆蛋白以稳定含量合成，该稳定含量为干生物质的20至25％。
根据本发明的用于制备光合微藻(特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻)生物质的方法包括阻断生物质生长的步骤和诱导藻胆蛋白合成的步骤，所述生物质的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的20％。
根据一个有利的实施方案，生物质的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的21％、22％、23％、24％或25％。
根据一个有利的实施方案，生物质的藻胆蛋白含量为所述生物质干重的20％至25％。
在一个特定的实施方案，本发明的方法可以包括收集微藻(特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻)生物质的在先步骤。当培养物处于指数生长期时，也就是说当生物质生产率最大时，生物质在常规的培养罐中收集。回收的体积通过纱布(或通过倾析或通过离心)过滤，以获得新鲜的生物质。获得的生物质被转移到诱导罐。
根据本发明的方法还可以包括收集富集的生物质的最终步骤。
根据本发明的方法因此可以包括以下步骤：
-a)收集微藻(特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻)生物质
-b)阻断所述生物质生长
-c)诱导藻胆蛋白合成
-d)收集所述的富含藻胆蛋白的生物质。
根据本发明的方法使用选自蓝细菌、红藻门植物或隐芽植物的光合微藻。
优选地，用于实施根据本发明的方法的光合微藻是钝顶节旋藻，也称为螺旋藻。
所述光合微藻特别是选自红藻纲、隐藻纲和蓝细菌，更特别是蓝细菌，甚至更特别是钝顶节旋藻和水华束丝藻，尤其是克拉马斯藻。
在本方法的上下文内合成的藻胆蛋白可以是藻蓝蛋白、别藻蓝蛋白、藻红蛋白或藻红蓝蛋白，或这些藻胆蛋白的至少两种的混合物。
本发明还涉及通过之前描述的方法能够获得的光合微藻(特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻)生物质，其藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的20％。
根据一个有利的实施方案，生物质的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的21％、22％、23％、24％或25％。
根据一个有利的实施方案，生物质的藻胆蛋白含量为所述生物质干重的20％至25％。
更特别地，本发明的光合微藻的生物质是从钝顶节旋藻提取的生物质。
所述光合微藻特别是选自红藻纲、隐藻纲和蓝细菌，更特别是蓝细菌，甚至更特别是钝顶节旋藻和水华束丝藻，尤其是克拉马斯藻。
能够通过本发明的方法获得的光合微藻(特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻)生物质可以用作营养食品产品制剂情况中的食品补充剂或作为化妆品制剂的组分。
营养食品产品旨在表示由食品物质制备的任何产品，但是其可以通常与食品不相关的片剂、粉末、饮品或任何其他药物形式获得，并且其已经被证实对疾病具有有益的生理学作用或保护性作用。
本发明还涉及化妆品组合物或营养食品组合物或预期作为食品补充剂的组合物，其由光合微藻(特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻)的生物质或生物质混合物制成，所述生物质或生物质混合物的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的20％。
根据一个有利的实施方案，生物质的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的21％、22％、23％、24％或25％。
根据一个有利的实施方案，生物质的藻胆蛋白含量为所述生物质干重的20％至25％。
所述光合微藻特别是选自红藻纲、隐藻纲和蓝细菌，更特别是蓝细菌，甚至更特别是钝顶节旋藻和水华束丝藻，尤其是克拉马斯藻。
所述化妆品组合物或营养食品组合物或预期作为食品补充剂的组合物优选由钝顶节旋藻的生物质制备。
根据本发明的化妆品组合物具有强抗皱特性，使其能够对抗深层皱纹、皮肤松弛和肤色黯淡。
根据本发明的化妆品组合物富含抗氧化剂化合物。其抵抗自由基，并刺激细胞充氧。在连续应用后，其重塑面部轮廓，减少深层皱纹，并使肤色更均匀。根据本发明的化妆品组合物还能够减少眼睛下方的眼袋和黑眼圈，并防止脱水以增加舒适度。
根据本发明的化妆品组合物还具有抗斑效果(anti-mark effect)，并且刺激细胞解毒，并且保护免受太阳和污染的影响，并且增加对抗以过量的黑色素为特征的斑的能力。
依赖于斑的强度，每天应用二到四次是必要的。轻的和弥漫性斑在几周内消失，而具有清晰轮廓的暗斑可能需要6至12个月才完全消失。根据本发明的化妆品组合物还被推荐用于源自严重痤疮爆发的残留斑。此外，其对于柔软皮肤具有保湿作用。
在根据本发明的方法处理生物质结束时，可以对所述的富含藻胆蛋白的生物质进行过滤和洗涤。其可以被并入到生产线的排水和干燥回路中。其可以辅助药物制剂出售，如预期增强婴儿的免疫系统的食品补充剂，或具有强抗氧化作用的化妆品。
生物质还可用于一种或多种藻胆蛋白的提取和净化。例如，生产的藻蓝蛋白可以被浓缩并稳定化，并因此被引入食品、化妆品或药物制剂中。
本发明还涉及皮肤病学组合物，其含有作为活性成分的如上所定义的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的20％的光合微藻(特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻)生物质或生物质混合物，和药学上可接受的载体。
根据一个有利的实施方案，生物质的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的21％、22％、23％、24％或25％。
根据一个有利的实施方案，生物质的藻胆蛋白含量为所述生物质干重的20％至25％。
所述光合微藻特别选自红藻纲、隐藻纲和蓝细菌，更特别是蓝细菌，甚至更特别是钝顶节旋藻和水华束丝藻，尤其是克拉马斯藻。
本发明还涉及如上所定义的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的20％的光合微藻(特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻)生物质或生物质混合物作为抗氧化剂的用途。
根据一个有利的实施方案，生物质的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的21％、22％、23％、24％或25％。
根据一个有利的实施方案，生物质的藻胆蛋白含量为所述生物质干重的20％至25％。
所述光合微藻特别选自红藻纲、隐藻纲和蓝细菌，更特别是蓝细菌，甚至更特别是钝顶节旋藻和水华束丝藻，尤其是克拉马斯藻。
表格和附图描述
表1表示可以在本发明的上下文中使用的诱导液的组成，其包含4g/l的NaNO3。
表2表示实验矩阵：三种水平的组合，其对应于两个因素亮度和氮浓度，以及以干重百分比表示的获得的藻胆蛋白收率。
图1表示对于3个小时的诱导持续期，藻蓝蛋白合成随光强度(μmol m-2s-1)和氮浓度(g/l)变化的等收率曲线(iso yield curve)。
图2表示对于24个小时的诱导持续期，藻蓝蛋白合成随光强度(μmol m-2s-1)和氮浓度(g/l)变化的等收率曲线。
图3表示对于3天的诱导持续期，藻蓝蛋白合成随光强度(μmol m-2s-1)和氮浓度(g/l)变化的等收率曲线。
实施例：
实施例1：藻蓝蛋白合成
研究了对于不同氮浓度和在不同的光强度下藻蓝蛋白合成收率的变化。
根据通过具有相互作用的三水平因素设计的实验设计方法进行研究(Goupy,2001)。
在指数生长期，在浓缩5倍的光合蓝细菌钝顶节旋藻的培养物中获得新鲜的生物质。使用的诱导液是改性的Zarrouk培养基：作为氮源的NaNO3浓度为1至4g/l。在诱导培养基中浓缩的生物质经受范围在10至50μmol m-2s-1的多种光强度。
进行了十一个实验，其中9个表示对应两种因素的三个水平(最小、最大和中间)之间的组合。另外三个表示中心点，并且使其能评价实验误差。实验基质在表2中示出。
对于每个条件，在不同的时间周期获取三个样品：处理3小时、一天和三天。
在11个实验条件的每一个结束时，提取藻蓝蛋白。重复两次提取，以提取出所有的藻蓝蛋白。然后，计算藻蓝蛋白收率(每克干物质藻蓝蛋白百分比)。
藻蓝蛋白合成收率(Ren Phy)以作为NaNO3氮浓度(N)和光强度(Lum)的函数来建模。
多个处理显示，3小时的诱导提供最高收率。在这些条件下获得的模型通过以下方程式表示：
RenPhy％(2)＝65-45＊Lum+458＊N+1.02＊Lum2-51＊N2-3.14＊Lum＊N
模型的有效性为95％，相关系数(R2)为95％。
标准误差为15％。
在根据本发明的方法处理3小时后获得的藻蓝蛋白合成随光强度(μmol m-2s-1)和NaNO3浓度(g/l)变化的等收率曲线在图1中示出。10μmol m-2s-1的光强度和4g/l的NaNO3浓度使其能够获得每克干物质22％至24％的藻蓝蛋白收率。
当诱导合成延长到1天时，藻蓝蛋白收率不会超过18％的最大值(图2)。3天处理仅使其能够获得小于12％的最大收率(图3)。
实施例2：抗皱霜剂
获得具有以下组成的抗皱霜剂：
水：59％，
甜杏仁油：18％，
溶解在甘油中的藻胆蛋白：7％，
棕榈油：5％，
蓖麻油：3％，
藻类提取物：3％(β-葫萝卜素)，
蜂蜡：2％，
黄原胶：1.7％，
芳香剂：1％，
对羟基苯甲酸乙酯：0.1％，
对羟基苯甲酸甲酯：0.1％，
对羟基苯甲酸苄酯：0.1％。
实施例3：抗斑霜剂
获得具有以下组成的抗斑霜剂：
抗斑霜剂：
水：59％，
甜杏仁油：19.5％，
溶解在甘油中的藻胆蛋白：7％，
棕榈油：5％，
蓖麻油：3％，
藻类提取物：1.5％(β-葫萝卜素)，
蜂蜡：2％，
黄原胶：1.7％，
芳香剂：1％，
对羟基苯甲酸乙酯：0.1％，
对羟基苯甲酸甲酯：0.1％，
对羟基苯甲酸苄酯：0.1％。
参考文献
Erikson N.T,2008,production of phycocyanin,a pigment withapplications in biology,biotechnology,foods and medicine.Appl MicrobiolBiotechnol,80,1-14.
Hemlata T.F,2009,Screening of cyanobacteria for phycobiliproteins andeffect of different environmental stress on its yield.Bull Environ ContamToxicol,83,509-515.
Liu Y,Xu L,Cheng N,Lin L,Zheng Ch,2000,Inhibitory effect ofphycocyanin from Arthrospira platensis on the growth of human leukemiaK562cells.Journal of applied phycology,12,125-130.
Chen F,Zhang Y and Guo S,1996.Growth and phycocyanin formation ofSpirulina platensis in photoheterotrophic culture.Biotechnology Letters,18,Issue5,pp 603-608.
Remziye Aysun&SaadetSaygideger,2012.Enhancement ofphenolic compound production in Spirulina Platensis by two-step batch modecultivation.J Appl Phycol,24:897-905.
Goupy,J.,2001,Introduction aux plans d’expériences(实验设计介绍),second Edition,Dunod.
Claims (18)
1.一种用于制备光合微藻生物质的方法，所述光合微藻特别是蓝细菌，更特别是钝顶节旋藻，所述光合微藻生物质的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的20％，所述方法包括诱导藻胆蛋白在生长被阻断的生物质中合成。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述微藻生物质的生长通过在诱导罐中浓缩所述生物质被阻断，所述生物质在所述罐中的所述浓度比能够使微藻在培养中最佳生长的密度即0.4g/l高3至13倍。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于所述生物质的所述浓度为1g/l至5g/l。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于诱导藻胆蛋白合成包括：
-将光合微藻生物质暴露于光通量，所述通量具有的光强度为基本上等于或大于10微摩尔m-2s-1(μmol m-2s-1)的值至基本上等于或小于13μmol m-2s-1的值；
-加入氮源，以在所述生物质中获得大于2.5g/l NaNO3的NaNO3浓度。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于诱导步骤进行的持续时间为3个小时、4个小时或5个小时。
6.如权利要求1所述的用于制备光合微藻生物质的方法，所述生物质的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的20％，所述方法包括以下步骤：
-a)阻断所述生物质生长，
-b)诱导藻胆蛋白合成。
7.如权利要求6所述的用于制备光合微藻生物质的方法，其特征在于其包括收集微藻生物质的在先步骤。
8.如权利要求6或权利要求7所述的方法，其特征在于其还包括收集富含藻胆蛋白的生物质的步骤。
9.如权利要求1所述的方法，其包括以下步骤：
-a)收集微藻生物质，
-b)阻断所述生物质生长，
-c)诱导藻胆蛋白合成，
-d)收集所述的富含藻胆蛋白的生物质。
10.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述光合微藻选自蓝细菌、红藻门植物或隐芽植物。
11.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述光合微藻选自红藻纲、隐藻纲和蓝细菌，更特别是蓝细菌，甚至更特别是钝顶节旋藻和水华束丝藻，尤其是克拉马斯藻。
12.如前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于所述藻胆蛋白选自藻蓝蛋白、别藻蓝蛋白、藻红蛋白或藻红蓝蛋白，或这些藻胆蛋白的至少两种的混合物。
13.如权利要求4所述的方法，其中所述氮由包含最终浓度大于2.5g/l且小于5g/l的NaNO3的培养基、特别是Zarrouk培养基提供。
14.能够通过权利要求1至13所述的方法获得的光合微藻生物质，其藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的20％。
15.如权利要求14所述的生物质，其从钝顶节旋藻提取。
16.能够通过权利要求1至13所述的方法获得的光合微藻生物质作为食品补充剂或作为化妆品、皮肤病学制剂或营养食品制剂的组分的用途，所述生物质的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的20％。
17.一种化妆品组合物、皮肤病学组合物或营养食品组合物或预期作为食品补充剂的组合物，其由光合微藻生物质制成，所述生物质的藻胆蛋白含量至少等于所述生物质干重的20％。
18.如权利要求17所述的化妆品组合物、皮肤病学组合物或营养食品组合物或预期作为食品补充剂的组合物，其由钝顶节旋藻生物质制成。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR14/01919 | 2014-08-28 | ||
| FR1401919A FR3025213A1 (fr) | 2014-08-28 | 2014-08-28 | Procede d'induction de la synthese des phycobiliproteines |
| PCT/FR2015/052294 WO2016030644A2 (fr) | 2014-08-28 | 2015-08-28 | Procédé d'induction de la synthèse des phycobiliproteines |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN107075550A true CN107075550A (zh) | 2017-08-18 |
Family
ID=51726577
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201580046409.XA Pending CN107075550A (zh) | 2014-08-28 | 2015-08-28 | 诱导藻胆蛋白合成的方法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20170191024A1 (zh) |
| EP (1) | EP3186384B1 (zh) |
| JP (1) | JP2017532060A (zh) |
| CN (1) | CN107075550A (zh) |
| BR (1) | BR112017004223A2 (zh) |
| FR (1) | FR3025213A1 (zh) |
| WO (1) | WO2016030644A2 (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108913635A (zh) * | 2018-08-10 | 2018-11-30 | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 | 一种生产甘油葡萄糖苷过程中恢复蛋白质含量的方法 |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106190853B (zh) * | 2016-04-18 | 2019-11-26 | 嘉兴泽元生物制品有限责任公司 | 一种高产藻蓝蛋白的红藻培养方法 |
| CA3052737A1 (en) * | 2017-09-06 | 2019-03-14 | Stefano Scoglio | The transdermal use of cyanobacterial algae, and/or extracts thereof, via low or high intensity transporation devices for beauty and health enhancing purposes |
| FR3106726B1 (fr) * | 2020-02-04 | 2022-02-18 | Degro0Te Jacques | Préparation d’un extrait riche en phycobiliprotéines |
| EP4125420A4 (en) * | 2020-03-31 | 2024-04-17 | V2 Food Pty Ltd | FOOD COLOURINGS |
| KR20230029756A (ko) | 2020-06-04 | 2023-03-03 | 우마로 푸즈, 인크. | 전근 고기 및 해산물과 유사한 식품 |
| JP7288170B2 (ja) * | 2020-06-09 | 2023-06-07 | Dic株式会社 | フィコシアニン色素組成物 |
| WO2023039248A1 (en) * | 2021-04-20 | 2023-03-16 | Umaro Foods, Inc. | Food products resembling whole muscle meat and seafood |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005065697A1 (fr) * | 2003-12-12 | 2005-07-21 | Florence Minard | Procede de photo-stabilisation de phycobiliproteines dans un extrait aqueux, compositions contenant des phycobiliproteines stabilisees et utilisation de phycobiliproteines stabilisees |
| CN103102408A (zh) * | 2013-02-05 | 2013-05-15 | 西安岳达植物科技有限公司 | 一种从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19749480A1 (de) * | 1997-11-08 | 1999-05-20 | Univ Leipzig | Verfahren zur Herstellung von L-Carnitin aus Crotonobetain |
| CN101068917B (zh) * | 2004-11-03 | 2010-12-15 | 碧澳维特澳大利亚股份有限公司 | 基于节旋藻的组合物及其用途 |
| CN102899254B (zh) * | 2012-09-13 | 2014-09-03 | 温州大学 | 裂殖壶菌及其高密度发酵生产dha的方法 |
-
2014
- 2014-08-28 FR FR1401919A patent/FR3025213A1/fr not_active Withdrawn
-
2015
- 2015-08-28 US US15/505,935 patent/US20170191024A1/en not_active Abandoned
- 2015-08-28 JP JP2017530439A patent/JP2017532060A/ja active Pending
- 2015-08-28 EP EP15771179.7A patent/EP3186384B1/fr not_active Not-in-force
- 2015-08-28 CN CN201580046409.XA patent/CN107075550A/zh active Pending
- 2015-08-28 WO PCT/FR2015/052294 patent/WO2016030644A2/fr active Application Filing
- 2015-08-28 BR BR112017004223A patent/BR112017004223A2/pt not_active Application Discontinuation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005065697A1 (fr) * | 2003-12-12 | 2005-07-21 | Florence Minard | Procede de photo-stabilisation de phycobiliproteines dans un extrait aqueux, compositions contenant des phycobiliproteines stabilisees et utilisation de phycobiliproteines stabilisees |
| CN103102408A (zh) * | 2013-02-05 | 2013-05-15 | 西安岳达植物科技有限公司 | 一种从螺旋藻中提取藻蓝蛋白的方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| ANAMIKA PATEL等: "Purification and characterization of C-Phycocyanin from cyanobacterial species of marine and freshwater habitat", 《PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION》 * |
| GANKA CHANEVA等: "Effect of light and temperature on the cyanobacterium Arthronema africanum - a prospective phycobiliprotein-producing strain", 《J APPL PHYCOL》 * |
| GAURAV SHARMA等: "Effect of Carbon Content, Salinity and pH on Spirulina platensis for Phycocyanin, Allophycocyanin and Phycoerythrin Accumulation", 《J MICROB BIOCHEM TECHNOL》 * |
| JELICA SIMEUNOVIĆ等: "Impact of nitrogen and drought on phycobiliprotein content in terrestrial cyanobacterial strains", 《J APPL PHYCOL》 * |
| JOSE MORENO等: "Nitrogen-fixing cyanobacteria as source of phycobiliprotein pigments Composition and growth performance of ten filamentous heterocystous strains", 《JOURNAL OF APPLIED PHYCOLOGY》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108913635A (zh) * | 2018-08-10 | 2018-11-30 | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 | 一种生产甘油葡萄糖苷过程中恢复蛋白质含量的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20170191024A1 (en) | 2017-07-06 |
| JP2017532060A (ja) | 2017-11-02 |
| EP3186384A2 (fr) | 2017-07-05 |
| EP3186384B1 (fr) | 2018-09-26 |
| WO2016030644A2 (fr) | 2016-03-03 |
| FR3025213A1 (fr) | 2016-03-04 |
| BR112017004223A2 (pt) | 2017-12-05 |
| WO2016030644A3 (fr) | 2016-04-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107075550A (zh) | 诱导藻胆蛋白合成的方法 | |
| US11007133B2 (en) | Method for producing a stable precipitate enriched in phycobiliproteins | |
| Castro et al. | Biomass production by Arthrospira platensis under different culture conditions | |
| ES2617178T3 (es) | Algas de cepas planctónicas Parachlorella nurekis 1904 KIEG y su uso para exterminar cianobacterias, bacterias y hongos | |
| CN108949644A (zh) | 一种生产甘油葡萄糖苷过程中恢复蛋白质含量的方法 | |
| Jiang et al. | UV-absorbing compounds in Porphyra haitanensis (Rhodophyta) with special reference to effects of desiccation | |
| KR101413371B1 (ko) | 해양심층수를 이용한 특정한 유용성분을 증강시키는 미세조류 배양방법 | |
| CN101292023B (zh) | 制造纯且高品质的微藻的起始试剂盒 | |
| US20190084930A1 (en) | Method of producing phycocyanin powder | |
| Dai et al. | Effect of light with different wavelengths on Nostoc flagelliforme cells in liquid culture | |
| Suyoso et al. | Evaluation of the culture of Spirulina sp. with Walne nutrient plus vitamin B12, KCl, NPK, ZA CaO and urea | |
| Saadatmand et al. | Investigating the effect of different concentrations of nitrate and phosphate on the quantity of mycosporine like amino acids production and growth in Spirulina platensis. | |
| KR100808115B1 (ko) | 심층수를 이용한 스피룰리나 배지제조방법 | |
| Shweta Jain et al. | Optimization of biomass yield of Spirulina platensis grown in petha (Benincasa hispida Thunb.) waste in different culture conditions. | |
| Khatun et al. | Replacement of sodium bicarbonate and micronutrients in Kosaric medium with banana leaf ash extract for culture of Spirulina Platensis | |
| Durmaz et al. | Effect of pigment composition of Porphyridium cruentum as continuously culture method in industrial scale tubular photobioreactor | |
| KR20160045168A (ko) | 고순도 피코시아닌 생산을 위한 2 단계 배양법 개발 | |
| OUADA | TECHNICAL FIELD | |
| Xu et al. | Growth promotion of vegetative gametophytes of Undaria pinnatifida by blue light | |
| Suherman et al. | Protein Content of Spirulina sp. Cultured Using a Combination of Urea and TSP Fertilizers | |
| Sornchai et al. | Effects of Different Initial pH of Modified Zarrok Medium on Large-scale Spirulina Maxima Culture | |
| Nguyen et al. | Effect of shading colours on growth and pigment content of Gracilaria fisheri (Xia & Abbott) Abbott, Zhang & Xia (Gracilariales, Rhodophyta) | |
| CN107567980A (zh) | 一种黄瓜幼苗培育方法 | |
| KR102157596B1 (ko) | 두나리엘라 배양용 조성물 및 이의 배양방법 | |
| Naaj | Collection, isolation and purification of cyanobacteria and their biochemical characterization |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20170818 |
|
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |