CN107056485A - 一种虫生真菌颗粒剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种虫生真菌颗粒剂,包括颗粒载体和虫生真菌孢子,所述颗粒载体为发酵过的天然农作物颗粒或人工合成营养颗粒,且需颗粒载体表面完好无损;所述虫生真菌孢子为活化后的虫生真菌孢子,所述虫生真菌孢子包附(包裹附着)于所述颗粒载体表面。本发明所述虫生真菌颗粒剂既不含有任何粘合剂、润滑剂、分散剂等添加剂,也不是由孢子粉混合配置而成,而是由所述颗粒载体和处于待繁殖状态的虫生真菌孢子构成。将本发明所述虫生真菌颗粒剂施于土壤内部后,其表面不易被杂菌污染,且在土壤内部具有长达2个月的持效期。
Description
技术领域
本发明涉及一种虫生真菌颗粒剂及其制备方法,具体用于土壤内部防治蛴螬、地老虎、金针虫等地下害虫。
背景技术
虫生真菌是指能够寄生在金龟子、蜘蛛、白蚁、蝗虫、蛴螬、地老虎、金针虫等昆虫体内,且能够使昆虫致病致死的真菌,虫生真菌包括虫霉、子囊菌、担子菌、半知菌(如白僵菌、绿僵菌)。基于其致病特性,虫生真菌(尤其是白僵菌和绿僵菌)通常被用来开发成粉剂、油悬浮剂、颗粒剂等生物农药制剂。
CN104770397A公开了一种白僵菌粉剂,包括白僵菌孢子粉1-5%、抗紫外线保护剂0.5-2%、填料94-98%,各组分均为质量百分比。CN1225985A公开了一种白僵菌油剂,由白僵菌纯孢子粉、色拉油、维生素E、三氧化二铁及乳化剂溴氰菊酯乳油制备而成;CN100348108C公开了一种悬浮剂,由白僵菌纯孢子粉、松节油、乳化剂磺酸盐阴离子、多元醇、紫外防护剂、化学杀虫剂制备而成。浙江大学微生物防治所发表的期刊文章(应华盛,冯明光.球孢白僵菌分生孢子乳悬剂的配方筛选[J],2001,28(4):345-351),公开了一种悬乳剂,它以惰性矿物油、乳化剂蔗糖脂肪酸酯S-1、羧甲基纤维素、抗坏血酸配制而成。述生物农药制剂用于防治地表的害虫效果较好,但是将其施于土壤内部后,其持效期较短。CN105230665A公开了一种蜡纸基缓释型生物防治剂及其制备方法,其原料包括废旧蜡纸、虫生真菌孢子粉和粘连剂。制备方法包括:将废旧蜡纸粉碎成粒径为2-4mm的碎片,然后与接种的真菌孢子粉混合均匀得到物料a;然后将所得物料a用粘连剂制备成颗粒状物料;再将颗粒状物料表面涂上颜色得到缓释型生物防治剂。该缓释型生物防治剂是通过人工抛晒,机械抛洒,礼花弹或航空抛洒的方式均匀植入农田或林地,虽然从某种程度上能够延长虫生真菌孢子粉的释放时间,但是却无法延长其在地下的持效期。
除此之外,CN101411338A公开了一种白僵菌颗粒剂,它是由白僵菌孢子粉1-20%、载体70-95%、粘合剂0.05-3%、崩解剂0.5-5%、助崩解剂0-2%、分散剂0.01-1%、抗紫外剂0.5-5%、润滑剂0-3%、着色剂0-2%组成,各组分均为质量百分比。该颗粒剂是先收集虫生真菌孢子粉,再采用相应配方和工艺制成白僵菌颗粒剂,并通过相关助剂控制颗粒剂的崩解速度和分生孢子的释放速度来延长持效期,虽具有缓释作用,但是在防治地下害虫时,颗粒剂表面容易被杂菌污染。
发明内容
针对现有技术中存在的问题,本发明的目的在于提供一种虫生真菌颗粒剂。
为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
一种虫生真菌颗粒剂,包括颗粒载体和虫生真菌孢子,其特征在于:所述颗粒载体为发酵过的天然农作物颗粒或人工合成营养颗粒,且需颗粒载体表面完好无损;所述虫生真菌孢子为活化后的虫生真菌孢子,所述虫生真菌孢子包附(包裹附着)于所述颗粒载体表面。
上述虫生真菌颗粒剂由颗粒载体和活化后的虫生真菌孢子构成,不含有任何粘合剂、润滑剂等添加剂。将其施于土壤内部后,颗粒载体表面不易被杂菌污染,且在土壤内部可达2个月的持效期。
为进一步防止颗粒剂表面被杂菌污染,所述颗粒载体的单位活孢数(本发明所述单位活孢数是指每克虫生真菌颗粒剂中存在的活孢数量)为0.2-3亿个孢子/克颗粒剂。
进一步地,所述颗粒载体为发酵过的大米、小米、大麦、小麦、黄豆或西米中的一种或几种组合;优选大米、西米或小麦。
进一步地,所述颗粒载体的粒径为3-20mm。
进一步地,所述虫生真菌孢子为白僵菌分生孢子或绿僵菌分生孢子。
本发明的另一目的在于提供一种虫生真菌颗粒剂的制备方法。
前述虫生真菌颗粒剂的制备方法,其特征在于步骤如下:先将虫生真菌菌种活化后接种于真菌液体培养基上,培养2.5-3天后得到液体菌种,再将液体菌种与颗粒载体按照质量比=1:100-1:10混合,搅拌均匀后培养4-15天,干燥后得到虫生真菌颗粒剂。
进一步地,先将虫生真菌菌种置于1/4SDAY平板(蛋白胨0.25%、酵母浸提物0.5%、葡萄糖1.0%、琼脂1.8%)上活化,然后将其接种于真菌液体培养基上,置于26℃条件下培养2.5-3天得到液体菌种;再将大米、西米或小麦置于水中浸泡1-5小时,沥干后作灭菌处理,冷却后得到颗粒载体;再将液体菌种与颗粒载体按照质量比=1:100-3:100混合,搅拌均匀后置于26℃条件下培养5-12天,干燥后得到虫生真菌颗粒剂。
进一步地,所述真菌液体培养基为经灭菌处理后的1/4SDAY液体培养基,且其蛋白胨含量0.25%、酵母浸提物含量0.5%、葡萄糖含量1.0%、琼脂1.8%、其余为水。
本发明虫生真菌颗粒剂的制备方法是直接将液体菌种按照前述比例接种于所述颗粒载体(颗粒载体为发酵过的大米、小米、大麦、小麦、黄豆或西米中的一种或几种组合,且需颗粒载体表面完好无损)上,在特定的条件下培养后得到虫生真菌颗粒剂。本发明在不添加粘合剂、润滑剂等添加剂的条件下制得虫生真菌颗粒剂,制备过程简单、实用,对于工业生产而言,大大降低了生产成本。
相比于现有技术中的虫生真菌颗粒剂,本发明所述虫生真菌颗粒剂既不含有任何粘合剂、润滑剂、分散剂等添加剂,也不是由孢子粉混合配置而成,而是由所述颗粒载体和处于待繁殖状态的虫生真菌孢子构成。将本发明所述虫生真菌颗粒剂施于土壤内部后,其表面不易被杂菌污染,且在土壤内部具有长达2个月的持效期。
相比于现有技术,本发明所述虫生真菌颗粒剂在施药后的前20天内具有很好的活性。经试验证明,将其施于土壤中后,虫生真菌在前20天内活孢数呈大幅上升趋势。
本发明所述虫生真菌颗粒剂还具有较好的防虫效果,尤其适用于土壤内部防治蛴螬、地老虎、金针虫等地下害虫。此外,本发明所述虫生真菌颗粒剂还能够有效改善土壤板结,同时还能增强土壤供肥性,是一种集生物防虫性能和土壤供肥性为一体的产品。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明,在此指出以下实施例不能理解为对本发明保护范围的限制,本领域普通技术人员根据本发明的内容作出一些非本质的改进和调整,均在本发明保护范围内。除特殊说明外,所述百分比均为重量百分比;本发明中所述原料均是本领域普通技术人员知晓的市售产品,其中,真菌液体培养基为上海冠导生物工程有限公司生产的1/4SDAY萨氏液体培养基(1/4指的是培养基的强度),本发明中所用菌种是由重庆大学基因工程中心提供;所述颗粒载体是指能够为真菌生长提供营养物质的天然农作物颗粒(如大米、小米、大麦、小麦、豌豆、黄豆、玉米)或人工合成营养颗粒(如西米)。
实施例1:先将金龟子绿僵菌(CQMa421)菌种置于1/4SDAY平板(蛋白胨0.25%、酵母浸提物0.5%、葡萄糖1.0%、琼脂1.8%)上活化,然后将其接种于经灭菌处理后的1/4SDAY萨氏液体培养基上,于26℃条件下培养2.5天(60小时)得到液体菌种;再将粒径为3mm的大米置于水中浸泡3小时,沥干后作灭菌处理,冷却后得到颗粒载体;再将液体菌种与颗粒载体按照质量比=3:100混合,搅拌均匀后置于26℃条件下培养5天,干燥后得到0.2亿个活孢/克的金龟子绿僵菌颗粒剂。
实施例2:先将金龟子绿僵菌(CQMa421)菌种置于1/4SDAY平板(蛋白胨0.25%、酵母浸提物0.5%、葡萄糖1.0%、琼脂1.8%)上活化,然后将其接种于经灭菌处理后的1/4SDAY萨氏液体培养基上,置于26℃条件下培养2.5天得到液体菌种;再将粒径为3mm的大米置于水中浸泡3小时,沥干后作灭菌处理,冷却后得到颗粒载体;再将液体菌种与颗粒载体按照质量比=3:100混合,搅拌均匀后置于26℃条件下培养7天,干燥后得到0.5亿个活孢/克的金龟子绿僵菌颗粒剂。
实施例3:先将金龟子绿僵菌(CQMa421)菌种置于1/4SDAY平板(蛋白胨0.25%、酵母浸提物0.5%、葡萄糖1.0%、琼脂1.8%)上活化,然后将其接种于经灭菌处理后的1/4SDAY萨氏液体培养基上,置于26℃条件下培养2.5天得到液体菌种;再将大麦置于水中浸泡4小时,沥干后作灭菌处理,冷却后得到颗粒载体;再将液体菌种与颗粒载体按照质量比=3:100混合,搅拌均匀后置于26℃条件下培养11天,干燥后得到1亿个活孢/克的金龟子绿僵菌颗粒剂。
实施例4:先将金龟子绿僵菌(CQMa421)菌种置于1/4SDAY平板(蛋白胨0.25%、酵母浸提物0.5%、葡萄糖1.0%、琼脂1.8%)上活化,然后将其接种于经灭菌处理后的1/4SDAY萨氏液体培养基上,置于26℃条件下培养2.5天得到液体菌种;再将小米置于水中浸泡5小时,沥干后作灭菌处理,冷却后得到颗粒载体;再将液体菌种与颗粒载体按照质量比=3:100混合,搅拌均匀后置于26℃条件下培养15天,干燥后得到2亿个活孢/克的金龟子绿僵菌颗粒剂。
实施例5:先将金龟子绿僵菌(CQMa421)菌种置于1/4SDAY平板(蛋白胨0.25%、酵母浸提物0.5%、葡萄糖1.0%、琼脂1.8%)上活化,然后将其接种于经灭菌处理后的1/4SDAY萨氏液体培养基上,置于26℃条件下培养3天(72小时)得到液体菌种;再将粒径为20mm的西米置于水中浸泡1小时,沥干后作灭菌处理,冷却后得到颗粒载体;再将液体菌种与颗粒载体按照质量比=3:100混合,搅拌均匀后置于26℃条件下培养8天,干燥后得到1.5亿个活孢/克的金龟子绿僵菌颗粒剂。
实施例6:先将球孢白僵菌(CQBb007)菌种置于1/4SDAY平板(蛋白胨0.25%、酵母浸提物0.5%、葡萄糖1.0%、琼脂1.8%)上活化,然后将其接种于经灭菌处理后的1/4SDAY萨氏液体培养基上,置于26℃条件下培养2.5天(60小时)得到液体菌种;再将粒径为3mm的小麦置于水中浸泡5小时,沥干后作灭菌处理,冷却后得到颗粒载体;再将液体菌种与颗粒载体按照质量比=1:100混合,搅拌均匀后置于26℃条件下培养5天,干燥后得到0.5亿个活孢/克的球孢白僵菌颗粒剂。
实施例7:先将球孢白僵菌(CQBb007)菌种置于1/4SDAY平板(蛋白胨0.25%、酵母浸提物0.5%、葡萄糖1.0%、琼脂1.8%)上活化,然后将其接种于经灭菌处理后的1/4SDAY萨氏液体培养基上,置于26℃条件下培养3天(72小时)得到液体菌种;再将粒径为8mm的黄豆与西米按照重量比=1:1混合后置于水中浸泡2小时,沥干后作灭菌处理,冷却后得到颗粒载体;再将液体菌种与颗粒载体按照质量比=3:100混合,搅拌均匀后置于26℃条件下培养8天,干燥后得到1.5亿个活孢/克的球孢白僵菌颗粒剂。
实施例8:先将球孢白僵菌(CQBb007)菌种置于1/4SDAY平板(蛋白胨0.25%、酵母浸提物0.5%、葡萄糖1.0%、琼脂1.8%)上活化,然后将其接种于经灭菌处理后的1/4SDAY萨氏液体培养基上,置于26℃条件下培养2.8天(67.2小时)得到液体菌种;再将粒径为5mm的黄豆置于水中浸泡4小时,沥干后作灭菌处理,冷却后得到颗粒载体;再将液体菌种与颗粒载体按照质量比=1:10混合,搅拌均匀后置于26℃条件下培养12天,干燥后得到3亿个活孢/克的球孢白僵菌颗粒剂。
效果测试
金龟子绿僵菌颗粒剂在土壤里繁殖情况测试:
取实施例1中制备的金龟子绿僵菌颗粒剂与土壤(土层厚20cm)按重量比=1:100混合后转入粒径为10cm塑料钵中,置于25℃恒温箱中。在第5天收取塑料钵内的土样(土样为取自5个不同点位的混合土样),取10克土样用0.05%的吐温-80分散过滤制得10Kg滤液,所得滤液经离心10分钟后收集金龟子绿僵孢子,再用0.05%的吐温-80分散金龟子绿僵孢子得到稀释液。将所得稀释液涂覆在筛选培养基上(含0.2mg/ml氨苄青霉素、0.1%茶皂素的1/4SDAY平板),于26℃条件下培养48小时,统计1/4SDAY平板上的绿僵菌数量,并计算土壤的活孢数,结果见表1;参照前述方法,分别在第0天、第10天、第20天、第30天、第45天、第60天收取塑料钵内的土样,分别统计1/4SDAY平板上的金龟子绿僵菌数量,并计算土壤的活孢数,结果见表1。参照前述方法,分别测试实施例2-5中的金龟子绿僵菌颗粒剂在土壤中的孢子繁殖情况,结果见表1。
选用包括硅藻土和金龟子绿僵菌(CQMa421)孢子粉制得的含量为2.0亿活孢数/克的粉剂作为对照组1,参照前述方法统计1/4SDAY平板上的绿僵菌数量,并计算土壤的活孢数,重复3次取平均值,结果见表1;
表1土壤中金龟子绿僵菌的活孢数(104活孢子/克土壤)
从表1可以看出,在第0-20天,土壤中活孢数明显增加,表面金龟子绿僵菌颗粒剂表层的孢子能利用颗粒中营养进行生长繁殖并在颗粒表面长满新的孢子。第10天孢子数量增加了5-50倍,其中实施例1中颗粒剂的活孢数可达到695×104活孢子/克,高于对照组粉剂的活孢数的(65×104活孢子/克)10倍。而且在第60天,仍然能在土壤中仍检测到活孢子(4-6×104活孢子/克),相比于对照组1中的粉剂,其持效期延长了近30天。
球孢白僵菌颗粒剂在土壤里繁殖情况测试:
参照金龟子绿僵菌颗粒剂在土壤里繁殖情况测试方法,分别统计1/4SDAY平板上的球孢白僵菌数量,并计算土壤的活孢数,结果见表2;选用包括硅藻土和球孢白绿僵菌(CQBb007)孢子粉制得的含量为3亿活孢数/克的粉剂作为对照组1,参照前述方法统计1/4SDAY平板上的绿僵菌数量,并计算土壤的活孢数,重复3次取平均值,结果见表2;
表2土壤中金球孢白绿僵菌的活孢数(104活孢子/克土壤)
实施例 | 0天 | 10天 | 20天 | 30天 | 40天 | 50天 |
实施例6中颗粒剂 | 228±39 | 1129±62a | 481±46 | 277±21 | 139±33 | 24±11 |
实施例7中颗粒剂 | 128±27 | 1198±49a | 482±44 | 281±32 | 146±24 | 16±8 |
实施例8中颗粒剂 | 35±11 | 1078±54a | 445±51 | 269±23 | 131±19 | 13±5 |
对照组2中的粉剂 | 269±35 | 155±23b | 22±13 | 无 | 无 | 无 |
从表2可以看出,在第0-10天,土壤中活孢数明显增加,表面球孢白僵菌菌颗粒剂表层的孢子能利用颗粒中营养进行生长繁殖并在颗粒表面长满新的孢子。第10天孢子数量增加了5-30倍,其中实施例6中颗粒剂的活孢数可达到1129×104活孢子/克,高于对照组粉剂的活孢数(155×104活孢子/克)的7倍。而且在第50天,仍然能在土壤中仍检测到活孢子(13-24×104活孢子/克),相比于对照组2中的粉剂,其持效期可达50天。
颗粒剂上杂菌生长情况测试:
取实施例1中制备的金龟子绿僵菌颗粒剂与土壤(土层厚20cm)按重量比=1:100混合后转入粒径为10cm塑料钵中,置于25℃恒温箱中。分别在第0天、第10天和15天收取塑料钵内的土样(土样为取自5个不同点位的混合土样),取10克土样用0.05%的吐温-80分散过滤制得10Kg滤液,所得滤液经离心10分钟后收集孢子,再用0.05%的吐温-80分散孢子稀释液10倍梯度稀释后涂覆在筛选培养基上(含0.2mg/ml氨苄青霉素、0.1%茶皂素的1/4SDAY平板),于26℃条件下培养48小时,统计1/4SDAY平板上的杂菌(曲霉、青霉)量,结果见表3。参照前述方法,测试实施例6中制备的球孢白僵菌颗粒剂表面杂菌生长情况,结对照组3:参照前述方法,测试CN101411338A中公开的白僵菌颗粒剂在土壤中的杂菌生长情况;对照组4:取实施例1中制备的金龟子绿僵菌颗粒剂,采用搅拌机(九阳JYL-C012)搅碎后(绿僵菌颗粒剂搅碎后相当于粉剂)按前述方法测定土壤中杂菌(曲霉、青霉)量,结果见表3;
表3杂菌数量(104个/克土壤)
从表3可以看出,在第0天,不同处理土壤中杂菌量差异不大,杂菌量在22-26×104个/克土壤之间;在第10天和15天,实施例1中颗粒剂和实施例6中颗粒剂杂菌数与对照差异不大,但是对照组3和对照组4中杂菌量大幅增加至178-280×104个/克土壤,表明完整的颗粒剂表层能有效阻碍杂菌的繁殖。此外,经发明人研究发现,对照组3中杂菌大量集中于颗粒剂表面的缝隙处,对照组3中杂菌大量集中于颗粒剂的断面处,当颗粒剂存在断面或者有缝隙时,土壤中的杂菌容易侵入颗粒剂的断面或缝隙处,进而通过吸取营养物质快速生长繁殖。
金龟子绿僵菌颗粒剂的田间防效:
选用本发明实施例1和实施例2制得的颗粒剂,分别将其按2公斤/亩的用量施于甘蔗种植沟中,覆土种植;选用普通市售金龟子绿僵菌孢子粉与硅藻土混合后配成含量为2.0亿孢子活孢数/克的粉剂,将其按2公斤/亩的用量施于甘蔗种植沟中,覆土种植,作为对照组3。定期随机抽查5点土样中的活孢数的数量,其平均值见表4;定期随机抽查甘蔗作物种植沟中以及未施药土壤中的蛴螬数量,以10株为一组,计算每组的平均蛴螬数,并计算金龟子绿僵菌颗粒剂的防效(防效=100×(未施药处理组蛴螬数—处理组蛴螬数)/未施药处理组蛴螬数),结果见表5:
表4田间土壤中的绿僵菌活孢数(104活孢子/克土壤)
实施例 | 0天 | 10天 | 20天 | 30天 | 50天 | 60天 |
实施例1中颗粒剂 | 23±18 | 408±55 | 715±51 | 337±23 | 81±14 | 9±5 |
实施例2中颗粒剂 | 76±31 | 478±55 | 745±51 | 369±23 | 96±14 | 13±5 |
对照组3中的粉剂 | 229±25 | 115±33 | 26±14 | 无 | 无 | 无 |
从表4可以看出,绿僵菌颗粒剂施于田间后,绿僵菌活孢子逐渐上升,第20天达到最高值,之后逐渐下降,在第60天还能检测到绿僵菌活孢数,表明绿僵菌在田间土壤中也存在生长和繁殖过程,自第10天后,使用绿僵菌颗粒剂处理后土壤中的活孢数明显高于对照组3中的粉剂;而对照组3中的粉剂施于田间后活孢数逐渐下降,30天之后检测不到绿僵菌活孢数;
表5绿僵菌颗粒剂的田间防效
从表5可以看出,在第20天后,施用本发明绿僵菌颗粒剂区域的蛴螬数显著低于对照组和未施药区域的蛴螬数;在施药后第45天至第60天,绿僵菌颗粒剂处理仍有较高的防效,而对照组中粉剂防效迅速下降,表明本发明绿僵菌颗粒剂对蛴螬的持续防治时间较长,且持效期可达60天。
球孢白僵菌颗粒剂的田间防效
选用本发明实施例5和实施例8制得的颗粒剂,分别将其按3公斤/亩的用量施于小白菜种植沟中,覆土种植。定期随机抽查小白菜根茎附近以及未施药土壤中的地老虎数,统计25株/组中的地老虎数,并计算球孢白僵菌颗粒剂的防效(防效=100×(未施药处理组地老虎数—处理组地老虎数)/未施药处理组地老虎数),结果见表6;
表6球孢白僵菌颗粒剂的田间防效
从表6可以看出,在10天以内,施用本发明球孢白僵菌颗粒剂区域的地老虎数量均少于2只,在施药后第40天,球孢白僵菌颗粒剂仍有防效,表明其持效期可达40天,且在40天内防效下降较慢。
此外,本发明所述虫生真菌颗粒剂采用营养颗粒作为载体,在助力于虫生真菌的繁殖过程中还可以作为有机肥料供作物生长,同时达到改良土壤的作用。
Claims (9)
1.一种虫生真菌颗粒剂,包括颗粒载体和虫生真菌孢子,其特征在于:
所述颗粒载体为发酵过的天然农作物颗粒或人工合成营养颗粒,且需颗粒载体表面完好无损;所述虫生真菌孢子为活化后的虫生真菌孢子,所述虫生真菌孢子包附于所述颗粒载体表面。
2.根据权利要求1所述的虫生真菌颗粒剂,其特征在于:所述颗粒载体的单位活孢数为0.2-3亿个孢子/克颗粒剂。
3.根据权利要求1或2所述的虫生真菌颗粒剂,其特征在于:所述颗粒载体为发酵过的大米、小米、大麦、小麦、黄豆或西米中的一种或几种组合。
4.根据权利要求3所述的虫生真菌颗粒剂,其特征在于:所述颗粒载体为大米、西米或小麦。
5.根据权利要求4所述的虫生真菌颗粒剂,其特征在于:所述颗粒载体的粒径为3-20mm。
6.根据权利要求5所述的虫生真菌颗粒剂,其特征在于:所述虫生真菌孢子为白僵菌分生孢子或绿僵菌分生孢子。
7.如权利要求1-6任一项所述虫生真菌颗粒剂的制备方法,其特征在于步骤如下:先将虫生真菌菌种活化后接种于真菌液体培养基上,培养2.5-3天后得到液体菌种,再将液体菌种与颗粒载体按照质量比=1:100-1:10混合,搅拌均匀后培养4-15天,干燥后得到虫生真菌颗粒剂。
8.如权利要求7所述的虫生真菌颗粒剂的制备方法,其特征在于:先将虫生真菌菌种置于1/4SDAY平板(蛋白胨0.25%、酵母浸提物0.5%、葡萄糖1.0%、琼脂1.8%)上活化,然后将其接种于真菌液体培养基上,置于26℃条件下培养2.5-3天得到液体菌种;再将大米、西米或小麦置于水中浸泡1-5小时,沥干后作灭菌处理,冷却后得到颗粒载体;再将液体菌种与颗粒载体按照质量比=1:100-3:100混合,搅拌均匀后置于26℃条件下培养5-12天,干燥后得到虫生真菌颗粒剂。
9.如权利要求8所述的虫生真菌颗粒剂的制备方法,其特征在于:所述真菌液体培养基为经灭菌处理后的1/4SDAY液体培养基,且其蛋白胨含量为0.25%、酵母浸提物含量为0.5%、葡萄糖含量为1.0%、琼脂为1.8%、其余为水。
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