CN107034201A - 表观修饰酶setd2的抗病毒作用及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种表观修饰酶SETD2的抗病毒作用及其应用。本发明涉及生物技术和医学领域，具体是免疫调节分子SETD2的抗病毒感染作用及其应用。本发明具体涉及SETD2或SETD2编码序列、其促进剂在制备用于抑制病毒感染的药物或试剂盒中的用途，且进一步涉及上述物质在抵抗病毒感染、治疗因病毒感染导致的慢性炎症性疾病的用途和应用方法以及相应的药物、药物组合物或试剂盒。本发明可用于预防和抑制病毒感染，提高干扰素抗病毒感染的疗效，具有广泛的应用前景。

Description

表观修饰酶SETD2的抗病毒作用及其应用

技术领域

本发明涉及生物技术和医学领域，具体地说，是一种表观修饰酶SETD2，即含有SET结构域的蛋白2(SET domain containing 2，SETD2)在预防或治疗与病毒感染相关的疾病或征状、控制病毒感染导致损伤中的效应、作用机制、实施方法和用途。

背景技术

感染尤其是病毒感染是一种危害极大的临床常见疾病。人们最初对于机体抗病毒感染的分子机制并不完全了解，随着一类细胞因子——干扰素的发现，机体针对病毒感染所产生的天然免疫细胞和继发的获得性免疫细胞和及其作用的分子生物学基础逐步得到了认识。干扰素(interferon，IFN)是一类具有强大抗病毒功能的细胞因子家族的总称。1957年，Alick Isaacs和Jean Lindenmann教授在研究流感病毒感染鸡胚的过程中发现了一种成分，这种成分能显著地阻止流感病毒的增殖，他们将这种成分命名为干扰素(Isaacs，A.等，Proc R Soc Lond B Biol Sci.1957；927:258-267.)。此后，干扰素家族的细胞因子被陆续发现具有十分广谱且有效的抗病毒效应。目前，干扰素已被广泛应用于临床上防御病毒感染及治疗病毒感染引起的各种疾病。

干扰素家族主要分为三个亚家族：即I型干扰素(IFN-I)、II型干扰素(IFN-II)、III型干扰素(IFN-III)。I型干扰素是其中种类最多、功能最全的亚家族细胞因子，包含13种IFNα亚型、IFNβ、IFNε、IFNτ、IFNκ、IFNω、IFNδ和IFNζ等。目前研究发现，I型干扰素不仅具有强大的抗病毒功能，还具有抗细菌感染、调节免疫应答及抗肿瘤进展等多种功能。II型干扰素仅含有一种基因编码的细胞因子产物——IFNγ，它主要由T细胞核自然杀伤性细胞(NK细胞)产生，具有很强的细胞毒性，起细胞杀伤作用。III型干扰素主要包含IFNλ1、IFNλ2和IFNλ3等，也分别称作白细胞介素(interleukin，IL)-29、IL-28A和IL-28B。III型干扰素和I型干扰素具有相似的抗病毒功能，但是其抗病毒的活性受到一定程度的限制。其原因为：III型干扰素的识别受体IL-28R仅在表皮细胞中有表达，多数免疫细胞中均不表达III型干扰素的受体(Pestka，S.等，Immunol.Rev.2004；202,8-32；Schoenborn，J.R.等，Adv.Immunol.2007；96,41-101；O’Brien，T.R.等，J.Interferon Cytokine Res.2014；34,829-838.)。

感染机体的不同病原体中一般含有相似的结构或分子特征，或为病毒相对保守的序列特征，或为病原微生物所共有的组成型表达分子等。这些相似的结构、特征被统称为病原体相关分子模式(Pathogen associated molecular patterns，PAMPs)；而与之相互识别的细胞表面受体则被称为模式识别受体(Pattern recognition receptors，PRRs)。例如：特异性识别RNA病毒的PPR有RNA helicases retinoic acid-inducible gene I(RIG-I，也叫DDX58)和melanoma differentiation-associated gene 5(MDA5，也叫IFIH1)等，它们主要识别感染在细胞内的RNA病毒中富含AT元件的部分。特异性识别DNA病毒的PRR有DNA-dependent activator of IFN-regulatory factors(DAI，也称作ZBP1)和cytosolic GAMPsynthase(cGAS，也称作MB21D1)等(Goubau，D.等；Immunity，2013；38,855-869.)。这些PPR识别病毒后，通过激发宿主内的免疫应答信号通路，诱导产生大量的I型干扰素，从而迅速的建立起机体抗感染的第一道防线，抵御病原体的感染。

当机体产生大量的IFN-I后，IFN-I便以自分泌或旁分泌的方式作用于自身或临近细胞，与细胞表面受体IFNAR1和IFNAR2结合激活细胞内信号通路。识别了IFN-I的受体IFNAR1和IFNAR2分别磷酸化激活其下游底物Janus kinase 1(JAK1)和non-receptortyrosine kinase 2(TYK2)。活化的JAK1和TYK2进一步催化下游的转录因子signaltransducer and activator of transcription1(STAT1)和STAT2发生磷酸化修饰，激活其转录因子的活性。活化的STAT1和STAT2进而招募IFN-regulatory factor 9(IRF9)，形成活化型的STAT1-STAT2-IRF9三聚体复合物——The interferon-stimulated gene factor 3(ISGF3)。复合物ISGF3转位入核，识别含有高度保守DNA序列的“TTTCNNTTTC”的IFN刺激应答元件，诱导一系列IFN刺激基因(IFN-stimulated gene，ISG)的表达。除此之外，IFN-I信号活化后还能诱导STAT1形成同源二聚体复合物，在不需要IRF9和STAT2的参与的情况下，识别序列为“TTCNNNGAA”的保守DNA基序(γ活化的序列，gamma-activated sequence，GAS)，诱导启动子区含有该基序的ISG基因表达(Stark，G.R.等,Immunity，2012；36，503-514.)。IFN-I同样可以通过诱导其他的STAT蛋白(包括STAT3、STAT4、STAT5A和STAT5B)激活ISG基因的表达。除了STAT蛋白依赖的信号外，IFN-I也可诱导phosphoinositide 3-kinase(PI3K)-mammalian target of rapamycin(mTOR)信号通路和multiple mitogen-activated protein kinase(MAPK)信号通路的活化，刺激另一些ISG基因的表达。ISG基因所编码的蛋白在各个方面发挥着抗病毒功能，如促进病毒的降解、抑制病毒的复制、破坏病毒从细胞中释放以及抵抗病毒的二次感染等。总而言之，IFN-I通过诱导细胞内多条信号通路的活化，最大化地发挥其抗病毒的效应(Ivashkiv，L.B.等，Nature Rev.Immunol.2014；14,36-49.)。

此外，IFN-I还具有免疫调节功能。如促进CD4阳性T细胞和CD8阳性T细胞的增殖和其细胞杀伤能力(Havenar-Daughton，C.等，J.Immunol.2006；176，3315-3319；Marshall，H.D.等，J.Virol.2011；85，5929-5939.)；增强NK细胞的免疫反应(Martinez，J.等，J.Immunol.2008；180,1592-1597.)；激活B细胞、增强B细胞的抗体识别和类别转换(ClassSwithing)(Le Bon，A.等，Immunity；2001，14，461-470.)等。

临床上，IFN-I已经应用于治疗多种疾病。例如，IFNα2a以及聚乙二醇缓释过的IFN(Peglated-IFNα)已经被美国食品及药物管理局批准用于治疗乙型肝炎病毒(Hepatitis Bvirus,HBV)和丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)感染所引起的肝炎(Lau，G.K.等.NEngl J Med，2005；352，2682-2695.)。IFN-α2a和2b也被应用到多毛细胞白血病(Golomb，H.M.等，J Clin Oncol.1986；4，900-905.)，及黑色素瘤(Bart，R.S.等，Cancer Res.1980；40,614-619.)卡波济肉瘤(Real,F.X.等，J Clin Oncol.1986；4，544-551.)等实体瘤的治疗中。最近，IFNβ在治疗多发性硬化症(multiple sclerosis，MS)——一种中枢神经系统白质炎性脱髓鞘病变的自身免疫性疾病的应用中也取得良好的效果(Annibali，V.等，Cytokine Growth Factor Rev.2015；26，221-228.)。

然而，尽管IFN已经取得了诸多的治疗效果，但也产生了一些临床不良反应，如可能导致患者甲状腺功能异常(Goischke，H.K.等，Verdauungskrankheiten，2004；22，275-283.)、肾功能降低乃至衰竭等(Stein，D.F.等，Digestive Diseases&Sciences，2001；46，530-534.)，部分患者还出现了系统性红斑性狼疮等自身性免疫疾病症状(Crow M.K.等，Autoimmunity，2003；36，481-490.)。并且，IFN对一些病毒慢性感染疾病的疗效也不显著。例如，干扰素对HBV E抗原(hepatitis B e antigen，HBeAg)阳性的乙肝病人治疗有效率较高，为33％，而在HBeAg阴性的乙肝病人中IFN治疗的有效率仅有25％(Scaglione，S.J.等，Gastroenterology.2012；142，1360-1368.)。由于IFN通过激活细胞内免疫应答信号和诱导大量抗病毒蛋白发挥其抗病毒机制(Lucifora,J.等，Science.2014；343,1221-1228；Yan,R.等，J.Virol.2015；89,9200-9212.)，因此，开发出一种有效增强IFN抗病毒效应的治疗方案是目前迫切需要解决的问题。

含有SET结构域的蛋白2(SET domain containing 2，SETD2)，又名亨廷顿结合蛋白B(Huntingtin interacting protein B,HYPB)，是一种含有SET结构域的组蛋白甲基转移酶，主要负责催化组蛋白H3第36位赖氨酸的三甲基化修饰(H3K36me3)(Edmunds，J.W.等，EMBO J.2008；27,406-420.)。目前研究发现了SETD2在很多生命活动中的重要功能。例如：SETD2可以促进蛋白质翻译过程中的选择性剪切(Luco，R.F.等，Science，2010；327,996-1000.)、维持转录的延伸(Carvalho；S.等，Nucleic Acids Res.2013；41,2881-2893.)、参与DNA损伤后修复(Carvalho；S.等，eLife.2014，3,e02482；Pfister；S.X.等，CellRep.2014；7,2006-2018.)、促进胚胎发育(Zhang,，Y.等，Cell Rep.2014,；8，1989-2002.)等。此外，SETD2的突变与多种肿瘤的疾病进展相关，包括急性淋巴细胞白血病(Zhu，X.等，Nat.Genet.2014；46，287-293.)，肾透明细胞癌(Dalgliesh，G.L.等，Nature.2010；463，360-363.)等。然而到目前为止，SETD2蛋白在免疫应答及抗病毒感染中的作用尚不明确。

综上所述，本领域迫切需要开发出一种可调控干扰素活性、增强抗病毒效应、有效抵抗病毒感染、控制病毒感染引起损伤的免疫学活性物质。

发明内容

本发明的目的在于提供SETD2、其编码序列、其促进剂或其抑制剂在调控IFN信号活化和抗病毒能力中的用途，并进一步提供它们在治疗或预防病毒感染相关的疾病或征状中的用途。本发明的药物、药物组合物或试剂盒可用于有效抵抗病毒感染、控制病毒感染性疾病的产生。

本发明的第一方面，提供含有SET结构域的蛋白2，即SETD2或SETD2编码序列、其促进剂在制备用于抑制病毒感染的药物或试剂盒中的用途。

优选的，所述SETD2选自：

(a)SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列；或

(b)与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列同源，且具有抑制病毒感染的蛋白质或多肽；或

(c)(a)或(b)的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸、且具有抑制病毒感染的由(a)或(b)衍生的蛋白质或多肽。

更优选的，所述SETD2选自：SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列。

所述SETD2编码序列选自：

(i)SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:1的第2889-5267位序列、SEQ ID NO:3或SEQ IDNO:3的第2861-5218位序列所示的核苷酸序列；或

(ii)在严格条件下与(i)限定的核苷酸序列杂交的分子；或

(iii)(i)或(ii)的核苷酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个核苷酸、且编码具有抑制病毒感染的蛋白质或多肽的分子。

更优选的，所述SETD2编码序列选自：SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:1的第2889-5267位序列、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:3的第2861-5218位序列所示的核苷酸序列。

优选的，所述SETD2或SETD2编码序列的所述促进剂选自：SETD2或SETD2编码序列的过表达载体、外源性SETD2、SETD2或SETD2编码序列的裸DNA、SETD2或SETD2编码序列的脂质体包裹DNA、SETD2蛋白；

优选的，所述SETD2是：天然纯化的蛋白、化学合成的产物、或使用重组技术从原核或真核宿主中产生。所述宿主选自：细菌、酵母、高等动物和哺乳动物细胞。更优选为人SETD2。

在本发明的一个实施例中，所述SETD2或SETD2编码序列、或其促进剂抑制病毒感染。所述SETD2、SETD2编码序列或其促进剂促进IFNα的抗病毒效应。

在本发明的一个实施例中，SETD2或SETD2编码序列的抑制剂抑制细胞抗病毒感染的能力，对病毒在细胞中的复制具有促进作用。SETD2或SETD2编码序列的所述抑制剂选自针对SETD2或其编码序列的：抗体、siRNA、miRNA、反义寡核苷酸、拮抗剂、阻断剂。

优选的，所述药物或试剂盒包含SETD2或SETD2编码序列、或其促进剂，并通过抑制病毒感染进一步用于预防或治疗与病毒感染相关的疾病和/或其征状、病毒感染导致的慢性炎症性疾病(特别是自身免疫性疾病)和/或其征状。

优选的，所述与病毒感染相关的疾病和/或其征状为选自下组的一种或两种以上因病毒感染引起的疾病和/或征状：病毒感染后引起的组织损伤；器官的炎症损伤；多器官功能衰竭。

优选的，所述病毒感染是由选自下组的一种或两种以上病毒引起的：乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、仙台病毒、水疱性口炎病毒等多数DNA病毒和RNA病毒。更优选乙型肝炎病毒(HBV)。

优选的，所述器官选自：肝脏、肺脏、脾脏、肾、肠道。

在本发明的一个优选实施例中，所述病毒感染相关的疾病和/或其征状为乙型肝炎病毒感染引起的肝脏损伤。

在一些实例中，所述肝组织活性标志选自：谷丙转氨酶和谷草转氨酶。这两种转氨酶是肝脏代谢过程中必需的“催化剂”，主要存在肝细胞中发挥作用。肝细胞发生炎症、坏死等造成肝细胞受损的病变后，转氨酶便会进入血液中，使血清中的转氨酶含量升高。

优选的，所述病毒感染导致的慢性炎症性疾病和/或其征状包括：自身免疫性疾病如炎症性肠病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、慢性肾炎、结核病、慢性胃肠道疾病。

优选的，所述药物的给药方法选自：给予SETD2编码序列，例如直接裸DNA注射法、脂质体包裹DNA直接注射法、金包被DNA基因枪轰击法、繁殖缺陷细菌携带质粒DNA法、复制缺陷腺病毒携带目的DNA法；给予SETD2蛋白，例如注射给药(如直接注射SETD2蛋白或用脂质体包埋的SETD2蛋白)、鼻腔给药、肺部给药、口服给药、透皮给药(如离子导入)、瘤内给药。

本发明的第二方面，提供一种抑制病毒感染的药物组合物，其包含：

(A)治疗有效量的SETD2或SETD2编码序列、其促进剂；以及

(B)药学上或免疫学上可接受的载体或赋形剂。

优选的，所述药物组合物中SETD2或SETD2编码序列、其促进剂占药物组合物总重量的0.001～99.9wt％。

优选的，所述药物组合物中SETD2或SETD2编码序列、其促进剂占药物组合物总重量的1～95wt％，优选为5～90wt％，更优选10～80wt％。余量为药学上可接受的载体以及其它添加剂等物质。

优选的，在给予本发明的药物组合物之前、同时或之后，给予调控抗病毒感染的其它活性物质。所述其它活性物质具有预防或治疗与病毒感染相关的疾病、感染导致的损伤、感染导致的慢性炎症性疾病和/或其征状的活性。所述病毒感染为选自下组中的一种或两种以上：乙肝病毒感染、丙肝病毒感染、单纯疱疹病毒、仙台病毒感染、水疱性口炎病毒。

更优选的，所述药物组合物还包含抑制病毒感染的其它活性物质。所述其它活性物质具有预防或治疗与病毒感染相关的疾病、感染导致的损伤、感染导致的慢性炎症性疾病和/或其征状的活性。

在本发明的优选实施方式中，所述其它活性物质选自：临床常用抗生素，包括β-内酰胺类(青霉素类和头孢菌素类)、氨基糖甙类、四环素类、氯霉素类、大环内脂类、抗真菌抗生素、抗结核类抗生素中的一种或两种以上；临床常用抗病毒药物(三环胺类、焦磷酸类、蛋白酶抑制药、核苷类药物及干扰素、反义寡核苷酸类等)中的一种或两种以上；临床常用免疫抑制剂(包括糖皮质激素、环磷酰胺、氯喹、环孢霉素A、雷公藤、中药制剂、抗TNF单克隆抗体)中的一种或两种以上。

本发明的第三方面，提供一种预防或治疗病毒感染、病毒感染导致的慢性炎症性疾病和/或其征状的方法，所述方法包括：给予需要预防或治疗的对象有效量的SETD2或SETD2编码序列、和/或其促进剂、或本发明的药物组合物。

优选的，所述病毒感染为选自下组中的一种或两种以上：乙肝病毒感染、丙肝病毒感染、单纯疱疹病毒感染、仙台病毒感染、水疱性口炎病毒感染。

优选的，所述病毒感染导致的慢性炎症性疾病和/或其征状为选自下组的一种或两种以上因病毒感染引起的疾病和/或征状：病毒感染后组织损伤；器官的炎症损伤；多器官功能衰竭。

优选的，所述器官选自：肝脏、肺脏、脾脏、肾、肠道。

本领域的技术人员可对前述的技术方案和技术特征进行任意组合而不脱离本发明的发明构思和保护范围。本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

本发明优点在于：

1、本发明揭示了SETD2、其编码序列、促进剂的新功能，即促进IFNα的抗病毒效应；

2、基于上述新功能，本发明的SETD2、其编码序列或其促进剂可进一步用于预防或治疗病毒感染，例如直接抑制病毒在细胞内的拷贝数、保护病毒感染所引起的肝损伤；

3、本发明提供了一种可有效抑制病毒感染、提高感染个体的生存率的新型药物，可用于预防和抑制病毒感染，提高干扰素抗病毒感染的疗效，具有广泛的应用前景。

附图说明

图1：针对SETD2的干扰RNA转染HepG2细胞导致HBV感染增加。图为荧光定量检测HBV-DNA拷贝数(*，P<0.05)。

图2：针对SETD2的干扰RNA转染HepG2细胞导致HBsAg分泌增加。图为ELISA分析(*，P<0.05)。

图3：SETD2表达载体抑制HBsAg分泌。图为ELISA分析(*，P<0.05)。

图4：SETD2-F2表达载体抑制HBV感染小鼠肝脏。图为免疫荧光结果。

图5：SETD2-F2表达载体降低小鼠病毒感染后的肝脏损伤。图为ELISA分析(*，P<0.05)。

具体实施方式

本发明通过大量的研究和动物模型试验，发现SETD2在感染性疾病中，能有效抑制病毒感染、改善器官功能状态、提高患者的生存率。在此基础上完成了本发明。

具体而言，针对抗病毒相关基因进行应用研究是天然免疫分子生物学和细胞生物学研究的热点，将抗病毒基因的核苷酸和蛋白质应用于病毒感染的预防和治疗是人工干预感染的有效技术，因此无论是在功能基因组研究，还是病毒感染相关的基因治疗方面均具有广阔地应用前景。

本发明针对具有抗病毒作用的新型免疫调节分子SETD2，对其在抗病毒感染方面的功能和作用进行了研究，并且验证了应用该分子对病毒感染动物的治疗和保护作用。实验证明：1)干扰SETD2表达可以增加病毒的感染；2)过表达SETD2可以抑制病毒感染；3)SETD2过表达可以抑制小鼠肝脏中HBV的感染；4)SETD2过表达可以降低病毒感染引起的肝脏损伤，提高生存率。这些实验结果提示SETD2具备治疗病毒感染性(如HBV的感染等)疾病的应用前景。由此，本发明提供了将抗病毒分子SETD2应用于抑制病毒感染，或用于病毒感染性疾病的预防和治疗中的方法和策略，特别是用于控制病毒感染所导致的肝脏损伤。

本文中提供的所有数值范围旨在清楚地包括落在范围端点之间的所有数值及它们之间的数值范围。可对本发明提到的特征或实施例提到的特征进行组合。本说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

如本文所用，“含有”、“具有”或“包括”包括了“包含”、“主要由……构成”、“基本上由……构成”、和“由……构成”；“主要由……构成”、“基本上由……构成”和“由……构成”属于“含有”、“具有”或“包括”的下位概念。

SETD2蛋白(多肽)

如本文所用，术语“SETD2(多肽)”、“SETD2蛋白(多肽)”、“SETD2”可互换使用，是指一类含有SET结构域的SETD2蛋白，其是在结构上高度保守的组蛋白H3K36me3甲基转移酶。本发明的SETD2蛋白可为由SEQ ID NO:1的序列(人cDNA全长序列)或SEQ ID NO:1的第2889-5267位序列(人CDS序列)或SEQ ID NO:3(小鼠全长序列)或SEQ ID NO:3的第2861-5218位序列(小鼠CDS序列)所编码的蛋白质或这些蛋白质具有抗炎作用的同源序列(例如可通过本领域已知的数据库或比对软件获得SETD2的同源序列)、变异体或修饰形式。例如，所述SETD2蛋白可选自：(a)SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列；或(b)在(a)限定的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有抑制炎症因子的活性的由(a)衍生的蛋白质或多肽。

本发明的蛋白质或多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等动物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。本发明中SETD2蛋白或多肽优选由人SETD2基因或其同源基因或家族基因编码。

本发明蛋白质或多肽的变异形式包括(但并不限于)：一个或多个(通常为1-50个，较佳地1-30个，更佳地1-20个，最佳地1-10个，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)氨基酸的缺失、插入和/或取代，以及在C末端和/或N末端添加一个或数个(通常为20个以内，较佳地为10个以内，更佳地为5个以内)氨基酸。例如，在本领域中，用性能相近或相似的氨基酸进行取代时，通常不会改变蛋白质或多肽的功能。又比如，在C末端和/或N末端添加一个或数个氨基酸通常也不会改变蛋白质或多肽的功能，例如本发明的SETD2蛋白质或多肽可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基而仍然具有抑制病毒感染的活性。

可采用辐射或暴露于诱变剂下来产生随机诱变，也可通过定点诱变法或其它已知的分子生物学技术来获得上述(b)中的蛋白质或多肽。可利用编码所述蛋白质或多肽的编码序列来构建转基因动物，并观察该转基因动物对病毒感染是否具有抵抗作用或对病毒的抵抗性是否有所改良来筛选和鉴别所得蛋白质或多肽。

根据重组生产方案所用的宿主，本发明的蛋白质或多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。该术语还包括SETD2蛋白的活性片段和活性衍生物。

该多肽的变异形式包括：同源序列、保守性变异体、等位变异体、天然突变体、诱导突变体、在高或低的严紧度条件下能与SETD2蛋白编码序列杂交的序列所编码的蛋白、以及利用抗SETD2蛋白的抗血清获得的多肽或蛋白。本发明还可使用其它多肽，如包含SETD2蛋白或其片段的融合蛋白。除了几乎全长的多肽外，本发明还包括了SETD2蛋白的可溶性片段。通常，该片段具有SETD2蛋白序列的至少约10个连续氨基酸，通常至少约30个连续氨基酸，较佳地至少约50个连续氨基酸，更佳地至少约80个连续氨基酸，最佳地至少约100个连续氨基酸。

SETD2编码序列

如本文所用，术语“SETD2基因”、“SETD2编码基因”、“SETD2蛋白编码基因”或“SETD2蛋白编码序列”可互换使用，均是指一种编码本发明所述的SETD2蛋白或多肽的序列，其可为SEQ ID NO:1(人全长)或SEQ ID NO:1的第2889-5267位(人CDS)序列、SEQ IDNO:3(小鼠全长)或SEQ ID NO:3的第2861-5218位(小鼠CDS)序列所示的核苷酸序列、在严格条件下与这些序列杂交的分子、或与上述分子高度同源的家族基因分子，所述基因的表达对炎症因子的产生和影响具有一定的抑制作用。本发明的SETD2基因可选自：(i)SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:1的第2889-5267位序列、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:3的第2861-5218位序列所示的核苷酸序列；或(ii)在严格条件下与(i)限定的序列杂交且具有抑制炎症因子活性的分子。

如本文所用，术语“严格条件”是指：(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱，如0.2×SSC，0.1％SDS，60℃；或(2)杂交时加有变性剂，如50％(v/v)甲酰胺，0.1％小牛血清/0.1％Ficoll，42℃等；或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在50％，优选55％以上、60％以上、65％以上、70％以上、75％以上、80％以上、85％以上或90％以上，更优选是95％以上时才发生杂交。例如，所述序列可为(a)中所限定序列的互补序列。

本发明的SETD2基因核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据本发明所公开的有关核苷酸序列，尤其是开放阅读框序列来设计引物，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板，扩增而得有关序列。当序列较长时，常常需要进行两次或多次PCR扩增，然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。

应理解，本发明的SETD2基因优选获自人，获自其它动物的与人SETD2基因高度同源(如具有50％以上，优选55％以上、60％以上、65％以上、70％以上、75％以上、80％以上，更优选85％以上如85％、90％、95％、98％甚至99％或以上的序列相同性)的其它基因也在本发明优选考虑的等同范围之内。比对序列相同性的方法和工具也是本领域周知的，如BLAST。

SETD2或SETD2编码序列的促进剂

本发明中还涉及SETD2或SETD2编码序列的“促进剂”。术语“促进剂”或“SETD2或其编码序列的促进剂”可互换使用，是指可提高SETD2或其编码序列的水平或活性的物质。可用于本发明中的促进剂包括但不限于：SETD2表达载体、外源性SETD2、SETD2或其编码序列的裸DNA、SETD2或其编码序列的脂质体包裹DNA、SETD2蛋白。

本发明的SETD2或SETD2编码序列或其促进剂可抑制病毒感染，从而可进一步用于预防或治疗与病毒感染相关的疾病、和/或病毒感染引发的相关征状，以及感染导致的慢性炎症性疾病、和/或其征状。

载体、宿主及转基因动物

本发明还涉及包含SETD2基因的载体，以及用该载体经基因工程产生的宿主细胞，以及通过转基因获得高表达SETD2的转基因动物。

通过常规的重组DNA技术(Science，1984；224：1431)，可利用本发明的编码序列可用来表达或生产重组的SETD2蛋白。一般来说有以下步骤：

(1)用本发明的编码SETD2蛋白的多核苷酸(或变异体)，或用含有该多核苷酸的重组表达载体转化或转导合适的宿主细胞；

(2)在合适的培养基中培养的宿主细胞；

(3)从培养基或细胞中分离、纯化蛋白质或多肽。

本发明中，术语“载体”与“重组表达载体”可互换使用，指本领域熟知的细菌质粒、噬菌体、酵母质粒、动物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒或其它载体。总之，只要能在宿主体内复制和稳定，任何质粒和载体都可以用。表达载体的一个重要特征是通常含有复制起点、启动子、标记基因和翻译控制元件。

本领域的技术人员熟知的方法能用于构建含SETD2编码序列和合适的转录/翻译控制信号的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等。所述的DNA序列可有效连接到表达载体中的适当启动子上，以指导mRNA合成。表达载体还包括翻译起始用的核糖体结合位点和转录终止子。本发明中优选使用pcDNA3.1载体表达系统。

此外，表达载体优选地包含一个或多个选择性标记基因，以提供用于选择转化的宿主细胞的表型性状，如真核细胞培养用的二氢叶酸还原酶、新霉素抗性以及绿色荧光蛋白(GFP)，或用于大肠杆菌的四环素或氨苄青霉素抗性。

包含上述的适当DNA序列以及适当启动子或者控制序列的载体，可以用于转化适当的宿主细胞，以使其能够表达蛋白质或多肽。宿主细胞可以是原核细胞，如细菌细胞；或是低等真核细胞，如酵母细胞；或是高等真核细胞，如动物细胞。代表性例子有：大肠杆菌，链霉菌属、农杆菌；真菌细胞如酵母；动物细胞等。在本发明中，优选采用大肠杆菌细菌细胞、人的肝脏细胞作为宿主细胞。

本发明的多核苷酸在高等真核细胞中表达时，如果在载体中插入增强子序列时将会使转录得到增强。增强子是DNA的顺式作用因子，通常大约有10到300个碱基对，作用于启动子以增强基因的转录。本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体、启动子、增强子和宿主细胞。

本发明中术语“转基因动物”、或“转化动物”可互换使用，均指通过常规转基因的方法获得的转入本发明SETD2基因并稳定高表达SETD2蛋白或多肽的细胞、器官、组织或个体。

在上面的方法中的重组多肽可在细胞内或在细胞膜上表达或分泌到细胞外。如果需要，可利用其物理的、化学的和其它特性通过各种分离方法分离和纯化重组的蛋白。这些方法是本领域技术人员所熟知的。这些方法的例子包括但并不限于：常规的复性处理、用蛋白沉淀剂处理(盐析方法)、离心、渗透破菌、超处理、超离心、分子筛层析(凝胶过滤)、吸附层析、离子交换层析、高效液相层析和其它各种液相层析技术及这些方法的结合。

药物、药物组合物或试剂盒

本发明还提供了一种药物、药物组合物或试剂盒，其中含有有效量的本发明的SETD2或SETD2编码序列、其促进剂，以及药学上或免疫学上可接受的载体。如本文所用，术语“活性物质”或“本发明的活性物质”可互换使用，是指SETD2或SETD2编码序列、其促进剂。

在较佳的实施方案中，所述药物组合物可用于预防或治疗与病毒感染相关的疾病、病毒感染导致的慢性炎症性疾病、和/或其征状；例如，本发明的药物组合物可用于预防或治疗与现有技术中已知可治疗或预防病毒感染性疾病，例如病毒感染引起的组织损伤；器官的炎性损伤；多器官功能衰竭。

如本文所用，术语“含有”或“包括”包括了“包含”、“基本上由……构成”、和“由……构成”。如本文所用，术语“药学上可接受的”成分是适用于人和/或动物而无过度不良反应(如毒性、刺激和变态反应)的，即有合理的效益/风险比的物质。如本文所用，术语“有效量”是指可对人和/或动物产生功能或活性的且可被人和/或动物所接受的量。

如本文所用，术语“药学上可接受的载体”指用于治疗剂给药的载体，包括各种赋形剂和稀释剂。该术语指这样一些药剂载体：它们本身并不是必要的活性成分，且施用后没有过分的毒性。合适的载体是本领域普通技术人员所熟知的，在《雷明顿药物科学》(Remington’s Pharmaceutical Sciences，Mack Pub.Co.，N.J.1991)中可找到关于药学上可接受的赋形剂的充分讨论。

在组合物中药学上可接受的载体可含有液体，如水、盐水、甘油和乙醇。另外，这些载体中还可能存在辅助性的物质，如填充剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、泡腾剂、润湿剂或乳化剂、矫味剂、pH缓冲物质等。通常，可将这些物质配制于无毒的、惰性的和药学上可接受的水性载体介质中，其中pH通常约为5-8，较佳地，pH约为6-8。

本发明的组合物中的活性物质占组合物总重量的0.001～99.9wt％；优选为组合物总重量的1～95wt％，较优选为5～90wt％，更优选10～80wt％。余量为药学上可接受的载体以及其它添加剂等物质。

如本文所用，术语“单位剂型”是指为了服用方便，将本发明的组合物制备成单次服用所需的剂型，包括但不限于各种固体剂(如片剂)、液体剂、胶囊剂、缓释剂。

在本发明的另一优选实施方式中，所述组合物为单位剂型或多剂型，且其中活性物质的含量为0.01～2000mg/剂，优选0.1～1500mg/剂，更优选1～1000mg/剂。在本发明的另一个优选例中，每天施用1～6剂本发明的组合物，优选施用1～3剂；最优选的，每天服用的剂量为1剂。

应理解，所用SETD2蛋白或其编码序列等活性物质的有效剂量可随待施用或治疗的对象的严重程度而变化。具体情况根据对象的个体情况(例如对象体重、年龄、身体状况、所需达到的效果)来决定，这在熟练医师可以判断的范围内。

本发明的组合物，可以为固态(如颗粒剂、片剂、冻干粉、栓剂、胶囊、舌下含片)或液态(如口服液)或其它合适的形状。给药途径可采用：(1)直接裸DNA或者蛋白质注射法；(2)将SETD2的cDNA、mRNA和蛋白质与转铁蛋白/多聚L-赖氨酸复合物连接，以增强其生物效应；(3)cDNA、mRNA和蛋白质与带正电荷的脂类形成复合物，以克服磷酸骨架负电荷所致的穿越细胞膜的困难；(4)用脂质体包裹cDNA、mRNA和蛋白质后介导进入细胞，既有利于大分子的顺利进入又免受细胞外各种酶的水解作用；(5)cDNA、mRNA和蛋白质与胆固醇结合使其胞浆保持时间增加10倍；(6)用免疫脂质体转运cDNA、mRNA和蛋白质可使其特异性转运至靶组织和靶细胞；(7)将cDNA、mRNA和蛋白质体外转染给转载细胞(如成纤维细胞)也可较好地将SETD2相关药物载入靶细胞内；(8)电打孔(electroporation)，即借助于电流将cDNA、mRNA和蛋白质导入靶细胞。

此外，本发明的组合物中还可含有用于改善和治疗病毒感染性疾病的其它活性物质，所述的其它活性物质选自下组：临床常用抗生素，包括β-内酰胺类(青霉素类和头孢菌素类)、氨基糖甙类、四环素类、氯霉素类、大环内脂类、抗真菌抗生素、抗结核类抗生素中的一种或多种。

本发明的SETD2相关的核苷酸和蛋白质药物相互间可以联合应用，还可以与其它药物和治疗手段联合，用于细菌性感染疾病的预防和治疗。

实施例

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。本领域技术人员可对本发明做出适当的修改、变动，这些修改和变动都在本发明的范围之内。

下列实施例中未注明具体条件的实验方法，可采用本领域中的常规方法，例如参考《分子克隆实验指南》(第三版，纽约，冷泉港实验室出版社，New York：Cold SpringHarbor Laboratory Press，1989)或按照供应商所建议的条件。DNA的测序方法为本领域常规的方法，也可由商业公司提供测试。

除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

实施例1：干扰SETD2表达对HBV在细胞中的复制具有促进作用

HepG2细胞(购自ATCC)用DMEM培养基培养，细胞用基于pHBV1.3的框架的HBV表达质粒转染，模拟细胞感染HBV的环境。接着用针对SETD2的小干扰RNA(si-SETD2)及模拟物对照(si-模拟物)转染细胞(转染试剂INTERFERin购自Polyplus公司)。

针对SETD2的干扰RNA(Si-SETD2)及模拟物对照(Si-模拟物)购自Genephama公司，Si-SETD2的序列如SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示，Si-模拟物的序列如SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示，合成时在3'增加2个dT使序列更加稳定。具体序列如下：

Si-SETD2序列：

5'-GGUGUAACUUAUGCAUUAATT-3'(顺义)；

5'-UUAAUGCAUAAGUUACACCTT-3'(反义)。

Si-模拟物序列：

5'-UUCUCCGAACGUGUCACGUTT-3'(顺义)；

5'-ACGUGACACGUUCGGAGAATT-3′(反义)。

转染24小时后的HepG2细胞(5×10⁵个细胞/ml)，用1000U/ml的IFNα(购自PestkaBiomedical Laboratories公司)处理细胞12小时。收集贴壁的HepG2细胞，提取细胞的DNA，检测HBV的复制情况；同时收取细胞培养上清，使用酶联免疫标记ELISA试剂盒检测细胞培养上清中HBV病毒表面抗原HBsAg的分泌情况。

HBV拷贝数分析的结果如图1所示，HBsAg分泌情况如图2所示。

结果显示：针对SETD2的小干扰RNA转染HepG2细胞可显著促进HBV的复制，并且显著促进HBV分泌HBsAg到细胞外。

该结果表明：干扰SETD2表达导致HBV在细胞中的复制增加。

实施例2：过表达SETD2对抑制细胞中HBsAg分泌

首先将SETD2(NM_014159.6)的cDNA分成3段分别导入真核表达载体pcDNA3.1质粒中，分别构建SETD2-F1、SETD2-F2、SETD2-F3表达载体。

其中，SETD2-F1包含的核苷酸序列为SEQ ID NO:1第54-2888位，编码人SETD2蛋白SEQ ID NO:2第1-945位；

SETD2-F2包含的核苷酸序列为SEQ ID NO:1第2889-5267位，编码人SETD2蛋白SEQID NO:2第946-1738位，此截短体含有SET结构域；

SETD2-F3包含的核苷酸序列为SEQ ID NO:1第5268-7748位，编码人SETD2蛋白SEQID NO:2第1739-2564位，此截短体含有WW结构域。

将SETD2-F1、SETD2-F2、SETD2-F3分别以1ng/ml的密度转染HepG2细胞，并同时转染pHBV1.3质粒。48小时后更换新鲜DMEM培养基。

将HBV感染后的HepG2细胞，5×10⁵个细胞/ml，用1000U/ml的IFNα处理细胞12小时，收集细胞培养上清，用ELISA试剂盒细胞培养上清中HBV病毒表面抗原HBsAg的分泌情况。

HBsAg分泌情况如图3所示。

结果显示：SETD2-F2转染细胞可抑制HBV分泌HBsAg到细胞外。

该结果表明：过表达SETD2-F2(含有SET结构域)可以抑制HBV的HBsAg的分泌。

实施例3：过表达SETD2对抑制HBV在小鼠肝脏中的感染

构建SETD2-F2表达载体(同实施例2)。将20ng SETD2-F2通过尾静脉高压注射入小鼠(8周雄性SDF级C57BL6小鼠，购自Sipper BK公司)，同时尾静脉高压注射10ng pHBV1.3的质粒，模拟小鼠HBV感染。72小时后腹腔内注射IFNα(15mg/kg)。24小时后解剖，取小鼠肝脏组织，使用免疫荧光的方法检测小鼠肝脏上HBV核心抗原(HBcAg)表达情况，以指示小鼠HBV感染的情况。

肝脏HBV感染小鼠检测结果如图4所示。

结果显示：SETD2-F2在小鼠中过表达可以抑制HBV在小鼠肝脏中的感染。

该结果表明：过表达SETD2可以抑制病毒在体内的感染。

实施例4：过表达SETD2降低病毒感染引起的肝脏损伤

将20ng SETD2-F2通过尾静脉高压注射入小鼠，同时尾静脉高压注射10ngpHBV1.3的质粒，模拟小鼠HBV感染(同实施例2)。72小时后腹腔内注射IFNα(15mg/kg)。24小时后眼球取血，收集小鼠血清，使用ELISA试剂盒检测谷丙转氨酶活性和谷草转氨酶活性。

ELISA结果如图5所示。

结果显示：SETD2-F2表达载体降低小鼠血清中的谷丙转氨酶活性和谷草转氨酶活性。

该结果表明：过表达SETD2可以降低病毒感染引起的肝脏损伤。

以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可做出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。

SEQUENCE LISTING

<110> 中国人民解放军第二军医大学

<120> 表观修饰酶SETD2的抗病毒作用及其应用

<130> /

<160> 8

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 8452

<212> DNA

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 1

gcgtcgccct gctgcgggga gggggctcgc gtcgccgtct ccagccgctc ccgatgaagc 60

agctgcagcc gcagccgcct ccgaagatgg gggatttcta cgacccggag cacccgaccc 120

ctgaagaaga agaaaatgag gcaaagattg aaaatgtgca gaaaacaggt ttcatcaaag 180

gaccaatgtt caaaggtgtt gcttctagtc gatttttgcc caaaggcacc aaaacaaaag 240

ttaatttgga agaacaggga cgacagaagg tgtcattcag cttcagcctt acaaagaaaa 300

ctttgcagaa taggtttctc actgcacttg gcaatgaaaa gcaaagtgat actccaaacc 360

ctccagctgt acctcttcag gtagactcga ctcctaaaat gaaaatggaa attggtgata 420

ccttatctac tgcagaagaa tcttccccac caaagtcaag ggtggaattg ggcaaaattc 480

attttaagaa acatctgctt catgtaacat ccaggccact gctggctact accacagcag 540

tagcatctcc acctactcat gcagcaccat taccagcagt gatagcagaa tcaacaactg 600

tagactcacc gccctcatct ccgcctccac cgcctccacc tgcccaagcc acaacactct 660

catcaccagc accagtaaca gagccagtgg ccttgccaca tacaccaata acagttctaa 720

tggcagcacc agtaccctta ccagtagatg tagcagttag atctctgaaa gaaccaccaa 780

ttataattgt accagaatct ttagaagcag atactaagca ggacactata tctaatagtt 840

tagaagaaca cgtaactcaa atattgaatg agcaagcaga tatttcctca aaaaaagaag 900

attcccatat tgggaaggat gaagaaattc cagatagttc taagattagt ctgagctgta 960

aaaaaacagg ttctaagaag aaatcctcac aatctgaagg catctttctt ggttcagaat 1020

ctgatgaaga ttctgtacgg acttcttcaa gtcaaagatc acatgattta aaattttcag 1080

caagcattga aaaggaaaga gattttaaaa agagctcagc acctttaaaa agtgaggatc 1140

tagggaaacc ttcacgatct aaaacagaca gagatgataa atattttagc tattcaaaac 1200

ttgaaagaga tactcggtat gtatcttccc gatgtagatc agaaagagag cgacggcgga 1260

gcagatctca ctctaggtct gagagaggct ctagaactaa tttatcctat tccaggtcag 1320

aacgatctca ttattatgac tctgatcgtc gctaccatag gagctcccct tatcgagaga 1380

ggacgcgcta ttctcggcca tacacagata acagagcacg agagagttct gactcagaag 1440

aagagtataa gaagacatac tcaaggcgta cctcatctca ttcctcttct tacagagacc 1500

taaggacatc atcctattct aaatctgatc gggactgtaa aactgagacc tcttacttag 1560

agatggaaag aagaggcaag tattcttcaa aactagaaag agaatctaaa aggacttcag 1620

aaaatgaagc aattaaaaga tgttgttctc cccctaatga actgggattc cgacgagggt 1680

catcatattc taagcatgac agtagtgctt cccgttataa atctaccctt tcaaaaccta 1740

tacccaagtc tgataaattt aaaaattctt tctgttgtac agaattaaat gaagaaatca 1800

aacagtctca ttcttttagt ttacagacac cttgttcaaa aggtagtgaa ttaagaatga 1860

ttaataaaaa tcctgaaaga gaaaaggctg ggtctccagc tccatcaaat cgattaaatg 1920

attcacctac tttaaaaaag ctagatgaat tgcctatttt taagtccgaa tttataacac 1980

atgatagcca tgatagtatt aaggaattag actctttatc taaagtgaag aatgatcaat 2040

taagaagttt ttgtcccata gaattaaata taaatggatc tcctggggca gaatctgatt 2100

tggcaacatt ttgcacttct aaaactgatg ctgttttaat gacttctgat gatagtgtga 2160

ctggatcgga attatcccct ttggtcaaag catgcatgct ttcatcaaat ggatttcaga 2220

atattagtag gtgcaaagaa aaagacttgg atgatacctg catgctgcat aagaagtcag 2280

aaagcccatt tagagaaaca gaacctctgg tgtcaccaca ccaagataaa ctcatgtcta 2340

tgccagttat gactgtggat tattccaaaa cagtagttaa agaaccagtt gatacgaggg 2400

tttcttgctg caaaaccaaa gattcagaca tatactgtac tttgaacgat agcaaccctt 2460

ctttgtgtaa ctctgaagct gaaaatattg agccttcagt tatgaagatt tcttcaaata 2520

gctttatgaa tgtgcatttg gaatcaaaac cagttatatg tgatagtaga aatttgacag 2580

atcactcaaa atttgcatgt gaagaatata agcagagcat cggtagcact agttcagctt 2640

ctgttaatca ttttgatgat ttatatcaac ctattgggag ttcaggtatt gcttcatctc 2700

ttcagagtct tccaccagga ataaaggtgg acagtctaac tctcttgaaa tgcggagaga 2760

acacatctcc agttctggat gcagtgctaa agagtaaaaa aagttcagag tttttaaagc 2820

atgcagggaa agaaacaata gtagaagtag gtagtgacct tcctgattca ggaaagggat 2880

ttgcttccag ggagaacagg cgtaataatg ggttatctgg gaaatgtttg caagaggctc 2940

aagaagaagg gaattccata ttgcctgaaa gaagaggaag accagaaatc tctttagatg 3000

aaagaggaga aggaggacat gtgcatactt ctgatgactc agaagttgta ttttcttctt 3060

gtgatttgaa tttaaccatg gaagacagtg atggtgtaac ttatgcatta aagtgtgaca 3120

gtagtggtca tgccccagaa attgtgtcta cagttcatga agattattct ggctcttctg 3180

aaagttcaaa tgatgaaagt gattcagaag atacagattc ggatgatagc agtattccaa 3240

gaaaccgtct ccagtctgtt gtggttgtgc caaagaattc tactttgccc atggaagaaa 3300

caagtccttg ttcttctcgg agcagtcaaa gttatagaca ctattctgac cattgggaag 3360

atgagagatt ggagtcaagg agacatttgt atgaggaaaa atttgaaagt atagcaagta 3420

aagcctgtcc tcaaactgat aagtttttcc ttcataaagg aacagagaag aatccggaaa 3480

tttcttttac acagtccagt agaaaacaaa tagataatcg cctgcctgaa ctttctcatc 3540

ctcagagtga tggggttgat agtacaagtc atacagatgt gaaatctgac cctctgggtc 3600

acccaaattc agaggaaacc gtgaaagcca aaataccttc taggcagcaa gaagagctgc 3660

caatttattc ttctgatttt gaagatgtcc caaataagtc ttggcaacag accactttcc 3720

aaaacaggcc agatagtaga ctgggaaaaa cagaattgag tttttcttcc tcttgtgaga 3780

taccacatgt ggatggcttg cactcatcag aagagctcag aaacttaggt tgggacttct 3840

ctcaagaaaa gccttctacc acgtatcagc aacctgacag tagctatgga gcttgtggtg 3900

gacacaagta tcagcaaaat gcagaacagt atggtgggac acgtgattac tggcaaggca 3960

atggttactg ggatccaaga tcaggtagac ctcctggaac tggggttgtg tatgatcgaa 4020

ctcaaggaca agtaccagat tccctaacag atgatcgtga agaagaggag aattgggatc 4080

aacaggatgg atcccatttt tcagaccagt ccgataaatt tcttctatcc cttcagaaag 4140

acaaggggtc agtgcaagca cctgaaataa gcagcaattc cattaaggac actttagctg 4200

tgaatgaaaa gaaagatttt tcaaaaaact tagaaaaaaa tgatatcaaa gatagagggc 4260

ctcttaaaaa aaggaggcag gaaatagaga gtgattctga aagtgatggt gagcttcagg 4320

acagaaagaa agttagagtg gaggtagagc agggagagac atcagtgccc ccaggttcag 4380

cactggttgg gccctcctgt gtcatggatg acttcaggga cccacagcga tggaaggaat 4440

gtgccaagca agggaaaatg ccatgttact ttgatcttat tgaagaaaat gtttatttaa 4500

cagaaagaaa gaagaataaa tctcatcgag atattaagcg aatgcagtgt gagtgtacac 4560

ctctttctaa agatgaaaga gctcaaggtg aaatagcatg tggggaagat tgtcttaatc 4620

gtcttctcat gattgaatgt tcttctcggt gtccaaatgg ggattattgt tccaatagac 4680

ggtttcagag aaaacagcat gcagatgtgg aagtcatact cacagaaaag aaaggctggg 4740

gcttgagagc tgccaaagac cttccttcga acacctttgt cctagaatat tgtggagagg 4800

tactcgatca taaagagttt aaagctcgag tgaaggagta tgcacgaaac aaaaacatcc 4860

attactattt catggccctg aagaatgatg agataataga tgccactcaa aaaggaaatt 4920

gctctcgttt catgaatcac agctgtgaac caaattgtga aacccaaaaa tggactgtga 4980

acggacaact gagggttggg ttttttacca ccaaactggt tccttcaggc tcagagttaa 5040

cgtttgacta tcagttccag agatatggaa aagaagccca gaaatgtttc tgcggatcag 5100

ccaattgccg gggttacctg ggaggagaaa acagagtcag catcagagca gcaggaggga 5160

aaatgaagaa ggaacgatct cgtaagaagg attcagtgga tggagagcta gaagctctga 5220

tggaaaatgg tgagggtctc tctgataaaa accaggtgct cagcttatcc cggctaatgg 5280

ttagaattga aactttggag cagaaactta cctgtctgga actcatacag aacacacact 5340

cacagtcctg cctgaagtcc tttctggaac gtcatgggct gtctttgttg tggatctgga 5400

tggcagagct aggtgacggc cgggaaagta accagaagct tcaggaagag attataaaga 5460

ctttggaaca cttgcccatt cctactaaaa atatgttgga ggaaagcaaa gtacttccaa 5520

ttattcaacg ctggtctcag actaagactg ctgtccctcc gttgagtgaa ggagatgggt 5580

attctagtga gaatacatcg cgtgctcata caccactcaa cacacctgat ccttccacca 5640

agctgagcac agaagctgac acagacactc ccaagaaact aatgtttcgc agactgaaaa 5700

ttataagtga aaatagcatg gacagtgcaa tctctgatgc aaccagtgag ctagaaggca 5760

aggatggcaa agaggatctt gatcaattag aaaatgtccc tgtagaggaa gaggaagaat 5820

tgcagtcaca acagctactc ccacaacagc tgcctgaatg caaagttgat agtgaaacca 5880

acatagaagc tagtaagcta cctacatctg aaccagaagc tgacgctgaa atagagccca 5940

aagagagcaa cggcacaaaa ctagaagaac ctattaatga agaaacacca tcccaagatg 6000

aagaggaggg tgtgtctgat gtggagagtg aaaggagcca agaacagcca gataaaacag 6060

tggatataag tgatttggcc accaaactcc tggacagttg gaaagaccta aaggaggtat 6120

atcgaattcc aaagaaaagt caaactgaaa aggaaaacac aacaactgaa cgaggaaggg 6180

atgctgttgg cttcagagat caaacacctg ccccgaagac tcctaatagg tcaagagaga 6240

gagacccaga caagcaaact caaaataaag agaaaaggaa acgaagaagc tccctctcac 6300

caccctcttc tgcctatgag cggggaacaa aaaggccaga tgacagatat gatacaccaa 6360

cttctaaaaa gaaagtacga attaaagacc gcaataaact ttctacagag gaacgccgga 6420

agttgtttga gcaagaggtg gctcaacggg aggctcagaa acaacagcaa cagatgcaga 6480

acctgggaat gacatcacca ctgccctatg actctcttgg ttataatgcc ccgcatcatc 6540

cctttgctgg ttacccacca ggttatccca tgcaggccta tgtggatccc agcaacccta 6600

atgctggaaa ggtgctcctg cccacaccca gcatggaccc agtgtgttct cctgctcctt 6660

atgatcatgc tcagcccttg gtgggacatt ctacagaacc cctttctgcc cctccaccag 6720

taccagtggt gccacatgtg gcagctcctg tggaagtttc cagttcccag tatgtggccc 6780

agagtgatgg tgtagtacac caagactcca gcgttgctgt cttgccagtg ccggcccccg 6840

gcccagttca gggacagaat tatagtgttt gggattcaaa ccaacagtct gtcagtgtac 6900

agcagcagta ctctcctgca cagtctcaag caaccatata ttatcaagga cagacatgtc 6960

caacagtcta tggtgtgaca tcaccttatt cacagacaac tccaccaatt gtacagagtt 7020

atgcccagcc aagtcttcag tatatccagg ggcaacagat tttcacagct catccacaag 7080

gagtggtggt acagccagcc gcagcagtga ctacaatagt tgcaccaggg cagcctcagc 7140

ccttgcagcc atctgaaatg gttgtgacaa ataatctctt ggatctgccg cccccctctc 7200

ctcccaaacc aaaaaccatt gtcttacctc ccaactggaa gacagctcga gatccagaag 7260

ggaagattta ttactaccat gtgatcacaa ggcagactca gtgggatcct cctacttggg 7320

aaagcccagg agatgatgcc agccttgagc atgaagctga gatggacctg ggaactccaa 7380

catatgatga aaaccccatg aaggcctcga aaaagcccaa gacagcagaa gcagacacct 7440

ccagtgaact agcaaagaaa agcaaagaag tattcagaaa agagatgtcc cagttcatcg 7500

tccagtgcct gaacccttac cggaaacctg actgcaaagt gggaagaatt accacaactg 7560

aagactttaa acatctggct cgcaagctga ctcacggtgt tatgaataag gagctgaagt 7620

actgtaagaa tcctgaggac ctggagtgca atgagaatgt gaaacacaaa accaaggagt 7680

acattaagaa gtacatgcag aagtttgggg ctgtttacaa acccaaagag gacactgaat 7740

tagagtgact gttgggccag ggtgggagga tgggtggtca ggtaagacag actctaggga 7800

gaggaaatcc tgtgggcctt tctgtcccac ccctgtcagc actgtgctac tgatgataca 7860

tcaccctggg gaattcaacc ctgcagatgt caactgaagg ccacaaaaat gaactccatc 7920

tacaagtgat tacctagttg tgagctgttg gcatgtggtt agaagccatc agaggtgcaa 7980

gggcttagaa aagaccctgg ccagacctga ctccactctt aaacctgggt cttctccttg 8040

gcggtgctgt cagcgcacag acccatgcgc atccccaccc acaacccttt accctgatga 8100

tctgtattat attttaatgt atatgtgaat atattgaaaa taatttgttt tttcctggtt 8160

tttgtttggt tttcgttttg cttttagcct ctacatgcta ggatcacagg aagactttgt 8220

aaggacagtt taagttctcc tgcaaggttt aatttgttat catgtaaata ttccaaagca 8280

ggctgccttg tggttttggc cagccttgtg ctatgttgat aagattgatt tactgcttaa 8340

aatcacttta ctttatccaa tttttactga actttttatg taaaaaaata aaatcaatta 8400

aagaacttgg catgtgtgtt ccctaaaagt taaaaaaaaa aaaaaaaaaa aa 8452

<210> 2

<211> 2564

<212> PRT

<213> 智人(Homo sapiens)

<400> 2

Met Lys Gln Leu Gln Pro Gln Pro Pro Pro Lys Met Gly Asp Phe Tyr

1 5 10 15

Asp Pro Glu His Pro Thr Pro Glu Glu Glu Glu Asn Glu Ala Lys Ile

20 25 30

Glu Asn Val Gln Lys Thr Gly Phe Ile Lys Gly Pro Met Phe Lys Gly

35 40 45

Val Ala Ser Ser Arg Phe Leu Pro Lys Gly Thr Lys Thr Lys Val Asn

50 55 60

Leu Glu Glu Gln Gly Arg Gln Lys Val Ser Phe Ser Phe Ser Leu Thr

65 70 75 80

Lys Lys Thr Leu Gln Asn Arg Phe Leu Thr Ala Leu Gly Asn Glu Lys

85 90 95

Gln Ser Asp Thr Pro Asn Pro Pro Ala Val Pro Leu Gln Val Asp Ser

100 105 110

Thr Pro Lys Met Lys Met Glu Ile Gly Asp Thr Leu Ser Thr Ala Glu

115 120 125

Glu Ser Ser Pro Pro Lys Ser Arg Val Glu Leu Gly Lys Ile His Phe

130 135 140

Lys Lys His Leu Leu His Val Thr Ser Arg Pro Leu Leu Ala Thr Thr

145 150 155 160

Thr Ala Val Ala Ser Pro Pro Thr His Ala Ala Pro Leu Pro Ala Val

165 170 175

Ile Ala Glu Ser Thr Thr Val Asp Ser Pro Pro Ser Ser Pro Pro Pro

180 185 190

Pro Pro Pro Pro Ala Gln Ala Thr Thr Leu Ser Ser Pro Ala Pro Val

195 200 205

Thr Glu Pro Val Ala Leu Pro His Thr Pro Ile Thr Val Leu Met Ala

210 215 220

Ala Pro Val Pro Leu Pro Val Asp Val Ala Val Arg Ser Leu Lys Glu

225 230 235 240

Pro Pro Ile Ile Ile Val Pro Glu Ser Leu Glu Ala Asp Thr Lys Gln

245 250 255

Asp Thr Ile Ser Asn Ser Leu Glu Glu His Val Thr Gln Ile Leu Asn

260 265 270

Glu Gln Ala Asp Ile Ser Ser Lys Lys Glu Asp Ser His Ile Gly Lys

275 280 285

Asp Glu Glu Ile Pro Asp Ser Ser Lys Ile Ser Leu Ser Cys Lys Lys

290 295 300

Thr Gly Ser Lys Lys Lys Ser Ser Gln Ser Glu Gly Ile Phe Leu Gly

305 310 315 320

Ser Glu Ser Asp Glu Asp Ser Val Arg Thr Ser Ser Ser Gln Arg Ser

325 330 335

His Asp Leu Lys Phe Ser Ala Ser Ile Glu Lys Glu Arg Asp Phe Lys

340 345 350

Lys Ser Ser Ala Pro Leu Lys Ser Glu Asp Leu Gly Lys Pro Ser Arg

355 360 365

Ser Lys Thr Asp Arg Asp Asp Lys Tyr Phe Ser Tyr Ser Lys Leu Glu

370 375 380

Arg Asp Thr Arg Tyr Val Ser Ser Arg Cys Arg Ser Glu Arg Glu Arg

385 390 395 400

Arg Arg Ser Arg Ser His Ser Arg Ser Glu Arg Gly Ser Arg Thr Asn

405 410 415

Leu Ser Tyr Ser Arg Ser Glu Arg Ser His Tyr Tyr Asp Ser Asp Arg

420 425 430

Arg Tyr His Arg Ser Ser Pro Tyr Arg Glu Arg Thr Arg Tyr Ser Arg

435 440 445

Pro Tyr Thr Asp Asn Arg Ala Arg Glu Ser Ser Asp Ser Glu Glu Glu

450 455 460

Tyr Lys Lys Thr Tyr Ser Arg Arg Thr Ser Ser His Ser Ser Ser Tyr

465 470 475 480

Arg Asp Leu Arg Thr Ser Ser Tyr Ser Lys Ser Asp Arg Asp Cys Lys

485 490 495

Thr Glu Thr Ser Tyr Leu Glu Met Glu Arg Arg Gly Lys Tyr Ser Ser

500 505 510

Lys Leu Glu Arg Glu Ser Lys Arg Thr Ser Glu Asn Glu Ala Ile Lys

515 520 525

Arg Cys Cys Ser Pro Pro Asn Glu Leu Gly Phe Arg Arg Gly Ser Ser

530 535 540

Tyr Ser Lys His Asp Ser Ser Ala Ser Arg Tyr Lys Ser Thr Leu Ser

545 550 555 560

Lys Pro Ile Pro Lys Ser Asp Lys Phe Lys Asn Ser Phe Cys Cys Thr

565 570 575

Glu Leu Asn Glu Glu Ile Lys Gln Ser His Ser Phe Ser Leu Gln Thr

580 585 590

Pro Cys Ser Lys Gly Ser Glu Leu Arg Met Ile Asn Lys Asn Pro Glu

595 600 605

Arg Glu Lys Ala Gly Ser Pro Ala Pro Ser Asn Arg Leu Asn Asp Ser

610 615 620

Pro Thr Leu Lys Lys Leu Asp Glu Leu Pro Ile Phe Lys Ser Glu Phe

625 630 635 640

Ile Thr His Asp Ser His Asp Ser Ile Lys Glu Leu Asp Ser Leu Ser

645 650 655

Lys Val Lys Asn Asp Gln Leu Arg Ser Phe Cys Pro Ile Glu Leu Asn

660 665 670

Ile Asn Gly Ser Pro Gly Ala Glu Ser Asp Leu Ala Thr Phe Cys Thr

675 680 685

Ser Lys Thr Asp Ala Val Leu Met Thr Ser Asp Asp Ser Val Thr Gly

690 695 700

Ser Glu Leu Ser Pro Leu Val Lys Ala Cys Met Leu Ser Ser Asn Gly

705 710 715 720

Phe Gln Asn Ile Ser Arg Cys Lys Glu Lys Asp Leu Asp Asp Thr Cys

725 730 735

Met Leu His Lys Lys Ser Glu Ser Pro Phe Arg Glu Thr Glu Pro Leu

740 745 750

Val Ser Pro His Gln Asp Lys Leu Met Ser Met Pro Val Met Thr Val

755 760 765

Asp Tyr Ser Lys Thr Val Val Lys Glu Pro Val Asp Thr Arg Val Ser

770 775 780

Cys Cys Lys Thr Lys Asp Ser Asp Ile Tyr Cys Thr Leu Asn Asp Ser

785 790 795 800

Asn Pro Ser Leu Cys Asn Ser Glu Ala Glu Asn Ile Glu Pro Ser Val

805 810 815

Met Lys Ile Ser Ser Asn Ser Phe Met Asn Val His Leu Glu Ser Lys

820 825 830

Pro Val Ile Cys Asp Ser Arg Asn Leu Thr Asp His Ser Lys Phe Ala

835 840 845

Cys Glu Glu Tyr Lys Gln Ser Ile Gly Ser Thr Ser Ser Ala Ser Val

850 855 860

Asn His Phe Asp Asp Leu Tyr Gln Pro Ile Gly Ser Ser Gly Ile Ala

865 870 875 880

Ser Ser Leu Gln Ser Leu Pro Pro Gly Ile Lys Val Asp Ser Leu Thr

885 890 895

Leu Leu Lys Cys Gly Glu Asn Thr Ser Pro Val Leu Asp Ala Val Leu

900 905 910

Lys Ser Lys Lys Ser Ser Glu Phe Leu Lys His Ala Gly Lys Glu Thr

915 920 925

Ile Val Glu Val Gly Ser Asp Leu Pro Asp Ser Gly Lys Gly Phe Ala

930 935 940

Ser Arg Glu Asn Arg Arg Asn Asn Gly Leu Ser Gly Lys Cys Leu Gln

945 950 955 960

Glu Ala Gln Glu Glu Gly Asn Ser Ile Leu Pro Glu Arg Arg Gly Arg

965 970 975

Pro Glu Ile Ser Leu Asp Glu Arg Gly Glu Gly Gly His Val His Thr

980 985 990

Ser Asp Asp Ser Glu Val Val Phe Ser Ser Cys Asp Leu Asn Leu Thr

995 1000 1005

Met Glu Asp Ser Asp Gly Val Thr Tyr Ala Leu Lys Cys Asp Ser

1010 1015 1020

Ser Gly His Ala Pro Glu Ile Val Ser Thr Val His Glu Asp Tyr

1025 1030 1035

Ser Gly Ser Ser Glu Ser Ser Asn Asp Glu Ser Asp Ser Glu Asp

1040 1045 1050

Thr Asp Ser Asp Asp Ser Ser Ile Pro Arg Asn Arg Leu Gln Ser

1055 1060 1065

Val Val Val Val Pro Lys Asn Ser Thr Leu Pro Met Glu Glu Thr

1070 1075 1080

Ser Pro Cys Ser Ser Arg Ser Ser Gln Ser Tyr Arg His Tyr Ser

1085 1090 1095

Asp His Trp Glu Asp Glu Arg Leu Glu Ser Arg Arg His Leu Tyr

1100 1105 1110

Glu Glu Lys Phe Glu Ser Ile Ala Ser Lys Ala Cys Pro Gln Thr

1115 1120 1125

Asp Lys Phe Phe Leu His Lys Gly Thr Glu Lys Asn Pro Glu Ile

1130 1135 1140

Ser Phe Thr Gln Ser Ser Arg Lys Gln Ile Asp Asn Arg Leu Pro

1145 1150 1155

Glu Leu Ser His Pro Gln Ser Asp Gly Val Asp Ser Thr Ser His

1160 1165 1170

Thr Asp Val Lys Ser Asp Pro Leu Gly His Pro Asn Ser Glu Glu

1175 1180 1185

Thr Val Lys Ala Lys Ile Pro Ser Arg Gln Gln Glu Glu Leu Pro

1190 1195 1200

Ile Tyr Ser Ser Asp Phe Glu Asp Val Pro Asn Lys Ser Trp Gln

1205 1210 1215

Gln Thr Thr Phe Gln Asn Arg Pro Asp Ser Arg Leu Gly Lys Thr

1220 1225 1230

Glu Leu Ser Phe Ser Ser Ser Cys Glu Ile Pro His Val Asp Gly

1235 1240 1245

Leu His Ser Ser Glu Glu Leu Arg Asn Leu Gly Trp Asp Phe Ser

1250 1255 1260

Gln Glu Lys Pro Ser Thr Thr Tyr Gln Gln Pro Asp Ser Ser Tyr

1265 1270 1275

Gly Ala Cys Gly Gly His Lys Tyr Gln Gln Asn Ala Glu Gln Tyr

1280 1285 1290

Gly Gly Thr Arg Asp Tyr Trp Gln Gly Asn Gly Tyr Trp Asp Pro

1295 1300 1305

Arg Ser Gly Arg Pro Pro Gly Thr Gly Val Val Tyr Asp Arg Thr

1310 1315 1320

Gln Gly Gln Val Pro Asp Ser Leu Thr Asp Asp Arg Glu Glu Glu

1325 1330 1335

Glu Asn Trp Asp Gln Gln Asp Gly Ser His Phe Ser Asp Gln Ser

1340 1345 1350

Asp Lys Phe Leu Leu Ser Leu Gln Lys Asp Lys Gly Ser Val Gln

1355 1360 1365

Ala Pro Glu Ile Ser Ser Asn Ser Ile Lys Asp Thr Leu Ala Val

1370 1375 1380

Asn Glu Lys Lys Asp Phe Ser Lys Asn Leu Glu Lys Asn Asp Ile

1385 1390 1395

Lys Asp Arg Gly Pro Leu Lys Lys Arg Arg Gln Glu Ile Glu Ser

1400 1405 1410

Asp Ser Glu Ser Asp Gly Glu Leu Gln Asp Arg Lys Lys Val Arg

1415 1420 1425

Val Glu Val Glu Gln Gly Glu Thr Ser Val Pro Pro Gly Ser Ala

1430 1435 1440

Leu Val Gly Pro Ser Cys Val Met Asp Asp Phe Arg Asp Pro Gln

1445 1450 1455

Arg Trp Lys Glu Cys Ala Lys Gln Gly Lys Met Pro Cys Tyr Phe

1460 1465 1470

Asp Leu Ile Glu Glu Asn Val Tyr Leu Thr Glu Arg Lys Lys Asn

1475 1480 1485

Lys Ser His Arg Asp Ile Lys Arg Met Gln Cys Glu Cys Thr Pro

1490 1495 1500

Leu Ser Lys Asp Glu Arg Ala Gln Gly Glu Ile Ala Cys Gly Glu

1505 1510 1515

Asp Cys Leu Asn Arg Leu Leu Met Ile Glu Cys Ser Ser Arg Cys

1520 1525 1530

Pro Asn Gly Asp Tyr Cys Ser Asn Arg Arg Phe Gln Arg Lys Gln

1535 1540 1545

His Ala Asp Val Glu Val Ile Leu Thr Glu Lys Lys Gly Trp Gly

1550 1555 1560

Leu Arg Ala Ala Lys Asp Leu Pro Ser Asn Thr Phe Val Leu Glu

1565 1570 1575

Tyr Cys Gly Glu Val Leu Asp His Lys Glu Phe Lys Ala Arg Val

1580 1585 1590

Lys Glu Tyr Ala Arg Asn Lys Asn Ile His Tyr Tyr Phe Met Ala

1595 1600 1605

Leu Lys Asn Asp Glu Ile Ile Asp Ala Thr Gln Lys Gly Asn Cys

1610 1615 1620

Ser Arg Phe Met Asn His Ser Cys Glu Pro Asn Cys Glu Thr Gln

1625 1630 1635

Lys Trp Thr Val Asn Gly Gln Leu Arg Val Gly Phe Phe Thr Thr

1640 1645 1650

Lys Leu Val Pro Ser Gly Ser Glu Leu Thr Phe Asp Tyr Gln Phe

1655 1660 1665

Gln Arg Tyr Gly Lys Glu Ala Gln Lys Cys Phe Cys Gly Ser Ala

1670 1675 1680

Asn Cys Arg Gly Tyr Leu Gly Gly Glu Asn Arg Val Ser Ile Arg

1685 1690 1695

Ala Ala Gly Gly Lys Met Lys Lys Glu Arg Ser Arg Lys Lys Asp

1700 1705 1710

Ser Val Asp Gly Glu Leu Glu Ala Leu Met Glu Asn Gly Glu Gly

1715 1720 1725

Leu Ser Asp Lys Asn Gln Val Leu Ser Leu Ser Arg Leu Met Val

1730 1735 1740

Arg Ile Glu Thr Leu Glu Gln Lys Leu Thr Cys Leu Glu Leu Ile

1745 1750 1755

Gln Asn Thr His Ser Gln Ser Cys Leu Lys Ser Phe Leu Glu Arg

1760 1765 1770

His Gly Leu Ser Leu Leu Trp Ile Trp Met Ala Glu Leu Gly Asp

1775 1780 1785

Gly Arg Glu Ser Asn Gln Lys Leu Gln Glu Glu Ile Ile Lys Thr

1790 1795 1800

Leu Glu His Leu Pro Ile Pro Thr Lys Asn Met Leu Glu Glu Ser

1805 1810 1815

Lys Val Leu Pro Ile Ile Gln Arg Trp Ser Gln Thr Lys Thr Ala

1820 1825 1830

Val Pro Pro Leu Ser Glu Gly Asp Gly Tyr Ser Ser Glu Asn Thr

1835 1840 1845

Ser Arg Ala His Thr Pro Leu Asn Thr Pro Asp Pro Ser Thr Lys

1850 1855 1860

Leu Ser Thr Glu Ala Asp Thr Asp Thr Pro Lys Lys Leu Met Phe

1865 1870 1875

Arg Arg Leu Lys Ile Ile Ser Glu Asn Ser Met Asp Ser Ala Ile

1880 1885 1890

Ser Asp Ala Thr Ser Glu Leu Glu Gly Lys Asp Gly Lys Glu Asp

1895 1900 1905

Leu Asp Gln Leu Glu Asn Val Pro Val Glu Glu Glu Glu Glu Leu

1910 1915 1920

Gln Ser Gln Gln Leu Leu Pro Gln Gln Leu Pro Glu Cys Lys Val

1925 1930 1935

Asp Ser Glu Thr Asn Ile Glu Ala Ser Lys Leu Pro Thr Ser Glu

1940 1945 1950

Pro Glu Ala Asp Ala Glu Ile Glu Pro Lys Glu Ser Asn Gly Thr

1955 1960 1965

Lys Leu Glu Glu Pro Ile Asn Glu Glu Thr Pro Ser Gln Asp Glu

1970 1975 1980

Glu Glu Gly Val Ser Asp Val Glu Ser Glu Arg Ser Gln Glu Gln

1985 1990 1995

Pro Asp Lys Thr Val Asp Ile Ser Asp Leu Ala Thr Lys Leu Leu

2000 2005 2010

Asp Ser Trp Lys Asp Leu Lys Glu Val Tyr Arg Ile Pro Lys Lys

2015 2020 2025

Ser Gln Thr Glu Lys Glu Asn Thr Thr Thr Glu Arg Gly Arg Asp

2030 2035 2040

Ala Val Gly Phe Arg Asp Gln Thr Pro Ala Pro Lys Thr Pro Asn

2045 2050 2055

Arg Ser Arg Glu Arg Asp Pro Asp Lys Gln Thr Gln Asn Lys Glu

2060 2065 2070

Lys Arg Lys Arg Arg Ser Ser Leu Ser Pro Pro Ser Ser Ala Tyr

2075 2080 2085

Glu Arg Gly Thr Lys Arg Pro Asp Asp Arg Tyr Asp Thr Pro Thr

2090 2095 2100

Ser Lys Lys Lys Val Arg Ile Lys Asp Arg Asn Lys Leu Ser Thr

2105 2110 2115

Glu Glu Arg Arg Lys Leu Phe Glu Gln Glu Val Ala Gln Arg Glu

2120 2125 2130

Ala Gln Lys Gln Gln Gln Gln Met Gln Asn Leu Gly Met Thr Ser

2135 2140 2145

Pro Leu Pro Tyr Asp Ser Leu Gly Tyr Asn Ala Pro His His Pro

2150 2155 2160

Phe Ala Gly Tyr Pro Pro Gly Tyr Pro Met Gln Ala Tyr Val Asp

2165 2170 2175

Pro Ser Asn Pro Asn Ala Gly Lys Val Leu Leu Pro Thr Pro Ser

2180 2185 2190

Met Asp Pro Val Cys Ser Pro Ala Pro Tyr Asp His Ala Gln Pro

2195 2200 2205

Leu Val Gly His Ser Thr Glu Pro Leu Ser Ala Pro Pro Pro Val

2210 2215 2220

Pro Val Val Pro His Val Ala Ala Pro Val Glu Val Ser Ser Ser

2225 2230 2235

Gln Tyr Val Ala Gln Ser Asp Gly Val Val His Gln Asp Ser Ser

2240 2245 2250

Val Ala Val Leu Pro Val Pro Ala Pro Gly Pro Val Gln Gly Gln

2255 2260 2265

Asn Tyr Ser Val Trp Asp Ser Asn Gln Gln Ser Val Ser Val Gln

2270 2275 2280

Gln Gln Tyr Ser Pro Ala Gln Ser Gln Ala Thr Ile Tyr Tyr Gln

2285 2290 2295

Gly Gln Thr Cys Pro Thr Val Tyr Gly Val Thr Ser Pro Tyr Ser

2300 2305 2310

Gln Thr Thr Pro Pro Ile Val Gln Ser Tyr Ala Gln Pro Ser Leu

2315 2320 2325

Gln Tyr Ile Gln Gly Gln Gln Ile Phe Thr Ala His Pro Gln Gly

2330 2335 2340

Val Val Val Gln Pro Ala Ala Ala Val Thr Thr Ile Val Ala Pro

2345 2350 2355

Gly Gln Pro Gln Pro Leu Gln Pro Ser Glu Met Val Val Thr Asn

2360 2365 2370

Asn Leu Leu Asp Leu Pro Pro Pro Ser Pro Pro Lys Pro Lys Thr

2375 2380 2385

Ile Val Leu Pro Pro Asn Trp Lys Thr Ala Arg Asp Pro Glu Gly

2390 2395 2400

Lys Ile Tyr Tyr Tyr His Val Ile Thr Arg Gln Thr Gln Trp Asp

2405 2410 2415

Pro Pro Thr Trp Glu Ser Pro Gly Asp Asp Ala Ser Leu Glu His

2420 2425 2430

Glu Ala Glu Met Asp Leu Gly Thr Pro Thr Tyr Asp Glu Asn Pro

2435 2440 2445

Met Lys Ala Ser Lys Lys Pro Lys Thr Ala Glu Ala Asp Thr Ser

2450 2455 2460

Ser Glu Leu Ala Lys Lys Ser Lys Glu Val Phe Arg Lys Glu Met

2465 2470 2475

Ser Gln Phe Ile Val Gln Cys Leu Asn Pro Tyr Arg Lys Pro Asp

2480 2485 2490

Cys Lys Val Gly Arg Ile Thr Thr Thr Glu Asp Phe Lys His Leu

2495 2500 2505

Ala Arg Lys Leu Thr His Gly Val Met Asn Lys Glu Leu Lys Tyr

2510 2515 2520

Cys Lys Asn Pro Glu Asp Leu Glu Cys Asn Glu Asn Val Lys His

2525 2530 2535

Lys Thr Lys Glu Tyr Ile Lys Lys Tyr Met Gln Lys Phe Gly Ala

2540 2545 2550

Val Tyr Lys Pro Lys Glu Asp Thr Glu Leu Glu

2555 2560

<210> 3

<211> 8350

<212> DNA

<213> 小鼠(Mus musculus)

<400> 3

cggccgcctc ccctccggtc ccctcccccg catcggcctg ccgcggggag ggggctagcg 60

tcgccgcctc cagccgctcc tcatgaagcc gctgccgtcg cagcagccgc caccgaagat 120

gggggatttc tacgatcccg agcacccgac ccctgaagaa gaagaaaatg aggcaaagat 180

tgaaaatgtg cagaaaacag gtttcatcaa aggaccagtg ttcaaaggtg ttgcttcaag 240

tcgatttttg cccaaaggca cgaagacaaa agttaatttg gaggaacagg gacggcaaaa 300

ggtgtcattc agcttcagtt ttacaaagaa aactttacag aatagatttc tcactgcgct 360

tagcaatgaa aagcaaagtg attctccaaa ctccccagct ccccctcttc aagtagactc 420

aaaccctaaa gttaaaatgg acgctggaga tacttttcct gctacagaag aatcttcgcc 480

accaaaatcg agagtggaat tgggcagaat tcattttaag aaacatttgc ttcatgtgac 540

atctaggcca cagctggctg caagtacaac agcagcatct ccccttcctc ctacaacaca 600

gttaccagca gtcttagcag agtcgatgat agactcacca ccttcatctc cacccccacc 660

tcctccacct ccccaggcct catcaccctc accaccagca cagatatcag agccagtggc 720

cttgccgcaa cccccagcaa cagcactaat gacatcacca ccaggacctt taccaggaga 780

cgtagccgtg agagctcaga aagaatcacc agttaaaagt ggacccgaag ttttagaggt 840

ggatacaaag caagatattg tatctaatag tttggaagaa cacacagttc aaactttgaa 900

ggaacaagca gatcatctcc tgcaaaaaga agattcccat attgggaagg aagaagaggt 960

ttcagatggc tctaagataa gcctcagttc taaaaaagca agttctaaga agaaatcttc 1020

acaatttgaa ggcacatttc ttggttcaga gtctgatgaa gattctgtac ggacttcttc 1080

cagtcaaaga tcacatgatt taaaatcttc aacaagcatt gacaaggaaa gagattttaa 1140

gaagagctca gcaccttcaa aaagtgagga tttggggaaa tcatcaagat cgaaaacaga 1200

gagagatgat agatattgta gctactcaaa acttgaacga gatactcggt atgtatcttc 1260

ccgatgtcgg tccgaaagag atcgaaggcg aagccgatct cgttctagat ctgacagagc 1320

ctctagaact agtttgtctt attctcgctc agaaagatct cattattatg attctgaacg 1380

gcgctaccat aggagttccc cttatcgtga gaggacacgc tattctcggc catatactga 1440

taacagggca cgggagagct cagactctga agatgagtat aagaagacat acccacggcg 1500

tacctcagcc cattcctaca gagacctaag gacatcatca tcttactcta aatttgatcg 1560

ggactgtaaa actgagacct cttacttaga gatggagaga agaggaaagt atacttcaaa 1620

actagaaaga gaatccaaac ggacttcaga gcatgaaacc ataaaaagat gttgttctcc 1680

cccaaatgaa ctgggattcc gacgggggtc atcatattcc aagcatgata acagtacttc 1740

ccgttataaa tctgcccttt caaaatctat atccaagaat gataaattta aaaattcttt 1800

ctgttgtaca gaattaaatg aggaaaacaa acaatctcat tcgtttagtt tgcagactcc 1860

ttgttcaaaa ggtagtgaat taagaacaat taataagatt tctgaaagag aaaagactgg 1920

gtctccaact ccatcaaatc aattaaacga ttcacctact tttaaaaagc tagatgaatc 1980

tcctgttctt aagcctgaat ttataggaca cgatggccgt gaaagtatta aagaattgga 2040

gttatcaaaa gtgaaaaatg atcaattaag aaatttttgt tccattgaat taaatgtaaa 2100

cggatctcca gagacagaag ctgatgtggc aacattttgt acttctaaga cagatgctat 2160

atcaatgact tctgatgata gtgtgactgg atcagaggta tcccctttga tcaaggcttg 2220

catgctttca tcaaatggat ttcagaatgt tggtagatgc agagaaaggg actcagatga 2280

tacttgtagg cagcataata cgtcaaaaag tccatttagg gaaatggaac ctttgttgtc 2340

accacaccat gataaactca tgtctttgcc agttaagact atagattatc ccaaaacatt 2400

aattaaagaa ccagttgata agagacattc ttgctgcaaa accaaagatt cagatatata 2460

ctgttctcca aatgaaaacc ctgaagctga gaacgctgaa ccttcagcta tgacgatttc 2520

ttcacatagc tttgtgaatg tgcatttgga atccaagaca gttatatgtg ataataggga 2580

gccgacagac cggcactcag agaatacatg tgatgaatat aagcagagca ttggtagcac 2640

tagttcagct tctcataacc attttgatgg tttgtatgag cctataggga gttcaggtat 2700

ttcatctctc cagagtcctc cgtcaggaat aagatgtgaa gaaaacacat ctccaactct 2760

agatgcagtg gagagtaaaa aaggcataga ttttttaaag tatgcacgga aagaaacaga 2820

tgttggtagt gcccttcctg attcaggaaa aggattttct tgggaaaaca ggcataataa 2880

tgtgttatct gggcagtctt tgcaagaggc tcaagaagaa gggaattcca tattgcatga 2940

gagaagagga agaccagaaa tccccttaga tgaggaacaa agaggccata cacatatttc 3000

tgatgattca gaagtggtat ttccttatga tttgaacttg accatggaag acagtgatgg 3060

tataacctac accttaaaat gtgatagtag tggaaatgct ccagagattg tatctactgt 3120

ccatgaagac tattctggat cttctgcaag ttcaagcgat gaaagtgatt ctgaagatac 3180

agagtctgat gatagcagta ttccaagaaa ccgactccag tctgttgtgg ttgtgccaaa 3240

gaattctact ttgcccatgg aagagacaag tccctgttct tctcggagca gtcagagcta 3300

caaacattat tctgaccgct gggaagatgg attagagacc aggagacatg catatgagga 3360

agagtatgag agtaaaggct gttctcaaac tgaaaaatac ttccttcata aaggaacaga 3420

gagaagtgca gaaagttgtt attcacagtt tggcaggaaa gcagataatc acctgcctga 3480

cattgctcat gctcagagtg acggggttga tagtacaagt cagacagact cgagatctga 3540

ccatctaggt cacctgaatc cagaggacac attaagagcc aaaacatcta ggccacaaga 3600

gctaccagtt tattctgacg attttgaaga tctcccaaat aagtctcggc agcagatgat 3660

tttctctaat cggccagata gtagtagact aggaaaaaca gagctgagtt tttcttcctc 3720

ttgtgacatt tcccgaatgg atggcttgca ctcatcagaa gagctcagaa acctagggtg 3780

ggacttttcc caacaggaaa ggcccaccac cacataccag cagcctgaca gcagctatgg 3840

aacctgtggt acacataagt atcaacaaag tactgaacac tatggtggga cccataatta 3900

ctggcaaggc aatggctatt gggatccaag atcagcaggt agacctccag gaactgggct 3960

tgcttatgat cgaatccaag ggcaagtacc agattctcta acagacgatc gtgaagaaga 4020

ggaacattgg gatcaacgaa gtggatcaca tttttcaagc ccgtccaata aatttttctt 4080

ccatcagaag gacaagggat cagtgcaagc accggaaata agcagcaatt caattaaaga 4140

cgctttagtt atgaacgaaa ggaaagattt ttcgaaaaac tttgaaaaaa atgatataaa 4200

agagagaggg cctcctaaaa aacgaaggca agagttggag agtgattctg aaagtgatgg 4260

tgaactacag gctagaaaga aagttagagt ggagatggag cagggagaat catctgtgcc 4320

ccagcactca gaactgatgg ggccttcgtg tgctatggat gacttcaggg acccacagcg 4380

gtggaaagaa tttgccaagc tggggaagat gccatgttac tttgatctta ttgaagaaaa 4440

tgtttattta acagaaagga agaagaacaa atcccaccgg gatattaagc gaatgcagtg 4500

tgagtgtaca cctctttcta aggatgaaag agctcaaggt gaagtagcat gtggagaaga 4560

ttgccttaat cgtctcctca tgattgaatg ttcctctcga tgtccaaatg gagattactg 4620

ttcaaacaga cggtttcaga gaaaacagca tgcagatgta gaagtcatac ttacagaaaa 4680

gaaaggctgg ggcttaaggg ctgctaagga tcttccttcg aacacctttg tcctggaata 4740

ctgtggagag gtacttgatc ataaagagtt taaagctcgg gtgaaagaat atgcacggaa 4800

caaaaacatc cactactact tcatggccct gaaaaatgac gagataatag atgccactca 4860

aaaagggaat tgctctcgtt tcatgaatca tagctgtgaa ccaaactgtg aaacccagaa 4920

atggactgtg aatggacagc tgagggttgg attttttacc accaaactag ttccttcagg 4980

ctcagaatta acttttgact accagttcca aagatatggc aaagaagctc agaagtgttt 5040

ctgtgggtca gccaactgcc ggggctactt gggaggagaa aacagagtca gtatcagagc 5100

tgcaggaggg aagatgaaaa aggaacgctc tcgaaagaag gattcagtgg atggagaact 5160

tgaagcactg atggaaaatg gtgaaggcct ctctgataag aaccaggttc ttagtttatc 5220

ccggctcatg gttagaattg aaactttgga acagaaactt acctgtctta agctcattca 5280

gaacacacac tcacagtcct gcctcaagtc atttctggaa cgtcatgggt tgtcactgtt 5340

gtggatctgg atggcagagc ttggcgacgg ccgggaaagt aaccagaagc ttcaggaaga 5400

gattataaag actttggagc atttgcccat tcctactaaa aatatgttgg aagaaagcaa 5460

agtacttcca attattcagc gctggtctca aactaagact gctgttcctc agttaagtga 5520

aggagacggg tattctagtg agaatacatc acgtgctcac acaccgctta atacaccgga 5580

cccttctgcc aagccgagca cggaaatgga tacagatact cccaagaaac tcatattccg 5640

cagactgaag attataagtg aaaatagcat ggacagtgca gtctcggacg tcactagtga 5700

gctagaatgc aaggatggca aagaggacct tgatcagtta gagactgtca ctgtggaaga 5760

ggatgaagag ctgcagtccc agcagctcct cccacagcag ctgtgcgagt ccaaagttga 5820

gagtgaagcc actattgaag tcagtaagtt acccacatct gaaccggagg cagacacgga 5880

gacagagccc aaagacagca atggcacaaa actagaagaa actattgctg aggaaacacc 5940

atcccaagat gaagaagagg gagtgtctga tgttgaaagt gagagaagcc aggagccacc 6000

agataaaaca gtggatataa gtgatttggc taccaagtta ctagacagtt ggaaagatct 6060

aaaggaggtg tatcggattc caaagaaaag tcaaactgaa aaggagagca cagtagctga 6120

acgaggaaga gatgctgctg ccttcagaga tcaaacagct ccaaagactc ctaacaggtc 6180

tagagagaga gacccagaca agcagtctca aaataaagag aaaaggaaac gacggggctc 6240

tctgtcacca ccctcttctg catatgagcg gggaacaaaa aggccagatg acagatatga 6300

tacaccaact tctaaaaaga aagtacgaat taaagaccga aacaaacttt ctacagagga 6360

gcgcaggaag ttgtttgaac aagaggtggc acagagggaa gctcagaagc aacagcaaca 6420

gatgcagaac ttggggatga catcaccact cccctttgac tctctgggat ataatgcctc 6480

tcatcacccc tttgctgggt acccaccagg ttaccccatg caagcctatg tggatcccag 6540

caaccctaat gctggaaagg tgcttctgcc cacacctagc atggaccctg tgtgctcccc 6600

tgctccttat gatcacgctc agcccttggt aggacattct acagaatccc ttgctgctcc 6660

cccatctgtg ccagtggtgc cgcatgtggc agcctctgtg gaagtttcca gttctcagta 6720

tgtagctcag aatgaaagtg ttgtacacca agactccaat gttcctgtaa tgccagtaca 6780

agctccaggc ccagtccaag gacagaatta caatgtctgg gagtcaaacc aacagtctgt 6840

cagtgtacaa cagcagtatt ctcctgcaca atctcaaaca accatatatt atcaaggaca 6900

gacatgttca actgtctata gtgtgacctc gccttattca cagacaactc ctccaattgt 6960

gcagagttat gcccagccaa gtcttcagta tatccaggga cagcagattt tcacagctca 7020

cccacaagga gtggtggtac agccaactgc agccgtgact tcaatagttg caccagggca 7080

gcctcagtcc ttacagccac ctgaaatggt tgtaacaaat aatctactgg acctgccacc 7140

accctcccct ccaaaaccaa aaacgattgt tttacctccc aactggaaga cagcccgaga 7200

ccctgagggg aagatctact actaccacgt gatcacaaga cagactcagt gggatcctcc 7260

tacttgggaa agcccaggag atgatgccag ccttgagcat gaagctgaaa tggacctggg 7320

aaccccaacc tatgatgaaa accccatgaa gacatcaaaa aagcccaaga cagcagaagc 7380

agacacctcc agtgagctgg caaagaaaag caaagaagta ttcagaaaag agatgtctca 7440

gttcattgtc cagtgcctga atccttaccg gaaacctgac tgcaaggtgg gcaggatcac 7500

caccactgaa gatttcaagc acctcgcccg aaagctgact catggagtta tgaataagga 7560

gctgaagtac tgtaagaacc ccgaggacct ggagtgcaat gagaatgtga aacacaaaac 7620

caaggagtac atcaagaagt acatgcagaa gtttggggct gtttacaaac ctaaagagga 7680

cactgaacta gagtgacctc aggccagagt ggagtatgag cggaaaggat gaatcctgtg 7740

gcttctgccc taccccacgg ccaaggctgt gctactgatg tgatgaccca ccatcctgag 7800

cagttcaaac ctgcaggtgt cagctgtaag ctgcaaaagt gagctctgtc tccaaatgac 7860

ccctagttgt gagctgttgg tgtaacagtt acaggccatc agaggcagta gcctagggaa 7920

gaccttggcc acacgacccc attctcaaat ctgggtctcc cccttggcgg tgctgtcagc 7980

gcacagaccc atgcgcacct cccccagatc ctttaccctg acaatatgta ttatatttta 8040

atgtatatgt gaagatattg aaaataattt gtttttcctg gtttttgttc tgtttttgtt 8100

tgctgttagc atctatgtgc tggaatcaag gaaagacttt gtgaggatag tataaattct 8160

cctgcaaggt tggatttgtt atcatgtaaa tatcccaacg caggctgcct tgtggtttgg 8220

ccgccttgtg ctatgttgat aagattgatt tactgcttca gatcacttta ctttatccaa 8280

tttttactga actttttatg taaaaaataa aatcaattaa agaacttgga atgtgtgctc 8340

cctcaaaatt 8350

<210> 4

<211> 2537

<212> PRT

<213> 小鼠(Mus musculus)

<400> 4

Met Lys Pro Leu Pro Ser Gln Gln Pro Pro Pro Lys Met Gly Asp Phe

1 5 10 15

Tyr Asp Pro Glu His Pro Thr Pro Glu Glu Glu Glu Asn Glu Ala Lys

20 25 30

Ile Glu Asn Val Gln Lys Thr Gly Phe Ile Lys Gly Pro Val Phe Lys

35 40 45

Gly Val Ala Ser Ser Arg Phe Leu Pro Lys Gly Thr Lys Thr Lys Val

50 55 60

Asn Leu Glu Glu Gln Gly Arg Gln Lys Val Ser Phe Ser Phe Ser Phe

65 70 75 80

Thr Lys Lys Thr Leu Gln Asn Arg Phe Leu Thr Ala Leu Ser Asn Glu

85 90 95

Lys Gln Ser Asp Ser Pro Asn Ser Pro Ala Pro Pro Leu Gln Val Asp

100 105 110

Ser Asn Pro Lys Val Lys Met Asp Ala Gly Asp Thr Phe Pro Ala Thr

115 120 125

Glu Glu Ser Ser Pro Pro Lys Ser Arg Val Glu Leu Gly Arg Ile His

130 135 140

Phe Lys Lys His Leu Leu His Val Thr Ser Arg Pro Gln Leu Ala Ala

145 150 155 160

Ser Thr Thr Ala Ala Ser Pro Leu Pro Pro Thr Thr Gln Leu Pro Ala

165 170 175

Val Leu Ala Glu Ser Met Ile Asp Ser Pro Pro Ser Ser Pro Pro Pro

180 185 190

Pro Pro Pro Pro Pro Gln Ala Ser Ser Pro Ser Pro Pro Ala Gln Ile

195 200 205

Ser Glu Pro Val Ala Leu Pro Gln Pro Pro Ala Thr Ala Leu Met Thr

210 215 220

Ser Pro Pro Gly Pro Leu Pro Gly Asp Val Ala Val Arg Ala Gln Lys

225 230 235 240

Glu Ser Pro Val Lys Ser Gly Pro Glu Val Leu Glu Val Asp Thr Lys

245 250 255

Gln Asp Ile Val Ser Asn Ser Leu Glu Glu His Thr Val Gln Thr Leu

260 265 270

Lys Glu Gln Ala Asp His Leu Leu Gln Lys Glu Asp Ser His Ile Gly

275 280 285

Lys Glu Glu Glu Val Ser Asp Gly Ser Lys Ile Ser Leu Ser Ser Lys

290 295 300

Lys Ala Ser Ser Lys Lys Lys Ser Ser Gln Phe Glu Gly Thr Phe Leu

305 310 315 320

Gly Ser Glu Ser Asp Glu Asp Ser Val Arg Thr Ser Ser Ser Gln Arg

325 330 335

Ser His Asp Leu Lys Ser Ser Thr Ser Ile Asp Lys Glu Arg Asp Phe

340 345 350

Lys Lys Ser Ser Ala Pro Ser Lys Ser Glu Asp Leu Gly Lys Ser Ser

355 360 365

Arg Ser Lys Thr Glu Arg Asp Asp Arg Tyr Cys Ser Tyr Ser Lys Leu

370 375 380

Glu Arg Asp Thr Arg Tyr Val Ser Ser Arg Cys Arg Ser Glu Arg Asp

385 390 395 400

Arg Arg Arg Ser Arg Ser Arg Ser Arg Ser Asp Arg Ala Ser Arg Thr

405 410 415

Ser Leu Ser Tyr Ser Arg Ser Glu Arg Ser His Tyr Tyr Asp Ser Glu

420 425 430

Arg Arg Tyr His Arg Ser Ser Pro Tyr Arg Glu Arg Thr Arg Tyr Ser

435 440 445

Arg Pro Tyr Thr Asp Asn Arg Ala Arg Glu Ser Ser Asp Ser Glu Asp

450 455 460

Glu Tyr Lys Lys Thr Tyr Pro Arg Arg Thr Ser Ala His Ser Tyr Arg

465 470 475 480

Asp Leu Arg Thr Ser Ser Ser Tyr Ser Lys Phe Asp Arg Asp Cys Lys

485 490 495

Thr Glu Thr Ser Tyr Leu Glu Met Glu Arg Arg Gly Lys Tyr Thr Ser

500 505 510

Lys Leu Glu Arg Glu Ser Lys Arg Thr Ser Glu His Glu Thr Ile Lys

515 520 525

Arg Cys Cys Ser Pro Pro Asn Glu Leu Gly Phe Arg Arg Gly Ser Ser

530 535 540

Tyr Ser Lys His Asp Asn Ser Thr Ser Arg Tyr Lys Ser Ala Leu Ser

545 550 555 560

Lys Ser Ile Ser Lys Asn Asp Lys Phe Lys Asn Ser Phe Cys Cys Thr

565 570 575

Glu Leu Asn Glu Glu Asn Lys Gln Ser His Ser Phe Ser Leu Gln Thr

580 585 590

Pro Cys Ser Lys Gly Ser Glu Leu Arg Thr Ile Asn Lys Ile Ser Glu

595 600 605

Arg Glu Lys Thr Gly Ser Pro Thr Pro Ser Asn Gln Leu Asn Asp Ser

610 615 620

Pro Thr Phe Lys Lys Leu Asp Glu Ser Pro Val Leu Lys Pro Glu Phe

625 630 635 640

Ile Gly His Asp Gly Arg Glu Ser Ile Lys Glu Leu Glu Leu Ser Lys

645 650 655

Val Lys Asn Asp Gln Leu Arg Asn Phe Cys Ser Ile Glu Leu Asn Val

660 665 670

Asn Gly Ser Pro Glu Thr Glu Ala Asp Val Ala Thr Phe Cys Thr Ser

675 680 685

Lys Thr Asp Ala Ile Ser Met Thr Ser Asp Asp Ser Val Thr Gly Ser

690 695 700

Glu Val Ser Pro Leu Ile Lys Ala Cys Met Leu Ser Ser Asn Gly Phe

705 710 715 720

Gln Asn Val Gly Arg Cys Arg Glu Arg Asp Ser Asp Asp Thr Cys Arg

725 730 735

Gln His Asn Thr Ser Lys Ser Pro Phe Arg Glu Met Glu Pro Leu Leu

740 745 750

Ser Pro His His Asp Lys Leu Met Ser Leu Pro Val Lys Thr Ile Asp

755 760 765

Tyr Pro Lys Thr Leu Ile Lys Glu Pro Val Asp Lys Arg His Ser Cys

770 775 780

Cys Lys Thr Lys Asp Ser Asp Ile Tyr Cys Ser Pro Asn Glu Asn Pro

785 790 795 800

Glu Ala Glu Asn Ala Glu Pro Ser Ala Met Thr Ile Ser Ser His Ser

805 810 815

Phe Val Asn Val His Leu Glu Ser Lys Thr Val Ile Cys Asp Asn Arg

820 825 830

Glu Pro Thr Asp Arg His Ser Glu Asn Thr Cys Asp Glu Tyr Lys Gln

835 840 845

Ser Ile Gly Ser Thr Ser Ser Ala Ser His Asn His Phe Asp Gly Leu

850 855 860

Tyr Glu Pro Ile Gly Ser Ser Gly Ile Ser Ser Leu Gln Ser Pro Pro

865 870 875 880

Ser Gly Ile Arg Cys Glu Glu Asn Thr Ser Pro Thr Leu Asp Ala Val

885 890 895

Glu Ser Lys Lys Gly Ile Asp Phe Leu Lys Tyr Ala Arg Lys Glu Thr

900 905 910

Asp Val Gly Ser Ala Leu Pro Asp Ser Gly Lys Gly Phe Ser Trp Glu

915 920 925

Asn Arg His Asn Asn Val Leu Ser Gly Gln Ser Leu Gln Glu Ala Gln

930 935 940

Glu Glu Gly Asn Ser Ile Leu His Glu Arg Arg Gly Arg Pro Glu Ile

945 950 955 960

Pro Leu Asp Glu Glu Gln Arg Gly His Thr His Ile Ser Asp Asp Ser

965 970 975

Glu Val Val Phe Pro Tyr Asp Leu Asn Leu Thr Met Glu Asp Ser Asp

980 985 990

Gly Ile Thr Tyr Thr Leu Lys Cys Asp Ser Ser Gly Asn Ala Pro Glu

995 1000 1005

Ile Val Ser Thr Val His Glu Asp Tyr Ser Gly Ser Ser Ala Ser

1010 1015 1020

Ser Ser Asp Glu Ser Asp Ser Glu Asp Thr Glu Ser Asp Asp Ser

1025 1030 1035

Ser Ile Pro Arg Asn Arg Leu Gln Ser Val Val Val Val Pro Lys

1040 1045 1050

Asn Ser Thr Leu Pro Met Glu Glu Thr Ser Pro Cys Ser Ser Arg

1055 1060 1065

Ser Ser Gln Ser Tyr Lys His Tyr Ser Asp Arg Trp Glu Asp Gly

1070 1075 1080

Leu Glu Thr Arg Arg His Ala Tyr Glu Glu Glu Tyr Glu Ser Lys

1085 1090 1095

Gly Cys Ser Gln Thr Glu Lys Tyr Phe Leu His Lys Gly Thr Glu

1100 1105 1110

Arg Ser Ala Glu Ser Cys Tyr Ser Gln Phe Gly Arg Lys Ala Asp

1115 1120 1125

Asn His Leu Pro Asp Ile Ala His Ala Gln Ser Asp Gly Val Asp

1130 1135 1140

Ser Thr Ser Gln Thr Asp Ser Arg Ser Asp His Leu Gly His Leu

1145 1150 1155

Asn Pro Glu Asp Thr Leu Arg Ala Lys Thr Ser Arg Pro Gln Glu

1160 1165 1170

Leu Pro Val Tyr Ser Asp Asp Phe Glu Asp Leu Pro Asn Lys Ser

1175 1180 1185

Arg Gln Gln Met Ile Phe Ser Asn Arg Pro Asp Ser Ser Arg Leu

1190 1195 1200

Gly Lys Thr Glu Leu Ser Phe Ser Ser Ser Cys Asp Ile Ser Arg

1205 1210 1215

Met Asp Gly Leu His Ser Ser Glu Glu Leu Arg Asn Leu Gly Trp

1220 1225 1230

Asp Phe Ser Gln Gln Glu Arg Pro Thr Thr Thr Tyr Gln Gln Pro

1235 1240 1245

Asp Ser Ser Tyr Gly Thr Cys Gly Thr His Lys Tyr Gln Gln Ser

1250 1255 1260

Thr Glu His Tyr Gly Gly Thr His Asn Tyr Trp Gln Gly Asn Gly

1265 1270 1275

Tyr Trp Asp Pro Arg Ser Ala Gly Arg Pro Pro Gly Thr Gly Leu

1280 1285 1290

Ala Tyr Asp Arg Ile Gln Gly Gln Val Pro Asp Ser Leu Thr Asp

1295 1300 1305

Asp Arg Glu Glu Glu Glu His Trp Asp Gln Arg Ser Gly Ser His

1310 1315 1320

Phe Ser Ser Pro Ser Asn Lys Phe Phe Phe His Gln Lys Asp Lys

1325 1330 1335

Gly Ser Val Gln Ala Pro Glu Ile Ser Ser Asn Ser Ile Lys Asp

1340 1345 1350

Ala Leu Val Met Asn Glu Arg Lys Asp Phe Ser Lys Asn Phe Glu

1355 1360 1365

Lys Asn Asp Ile Lys Glu Arg Gly Pro Pro Lys Lys Arg Arg Gln

1370 1375 1380

Glu Leu Glu Ser Asp Ser Glu Ser Asp Gly Glu Leu Gln Ala Arg

1385 1390 1395

Lys Lys Val Arg Val Glu Met Glu Gln Gly Glu Ser Ser Val Pro

1400 1405 1410

Gln His Ser Glu Leu Met Gly Pro Ser Cys Ala Met Asp Asp Phe

1415 1420 1425

Arg Asp Pro Gln Arg Trp Lys Glu Phe Ala Lys Leu Gly Lys Met

1430 1435 1440

Pro Cys Tyr Phe Asp Leu Ile Glu Glu Asn Val Tyr Leu Thr Glu

1445 1450 1455

Arg Lys Lys Asn Lys Ser His Arg Asp Ile Lys Arg Met Gln Cys

1460 1465 1470

Glu Cys Thr Pro Leu Ser Lys Asp Glu Arg Ala Gln Gly Glu Val

1475 1480 1485

Ala Cys Gly Glu Asp Cys Leu Asn Arg Leu Leu Met Ile Glu Cys

1490 1495 1500

Ser Ser Arg Cys Pro Asn Gly Asp Tyr Cys Ser Asn Arg Arg Phe

1505 1510 1515

Gln Arg Lys Gln His Ala Asp Val Glu Val Ile Leu Thr Glu Lys

1520 1525 1530

Lys Gly Trp Gly Leu Arg Ala Ala Lys Asp Leu Pro Ser Asn Thr

1535 1540 1545

Phe Val Leu Glu Tyr Cys Gly Glu Val Leu Asp His Lys Glu Phe

1550 1555 1560

Lys Ala Arg Val Lys Glu Tyr Ala Arg Asn Lys Asn Ile His Tyr

1565 1570 1575

Tyr Phe Met Ala Leu Lys Asn Asp Glu Ile Ile Asp Ala Thr Gln

1580 1585 1590

Lys Gly Asn Cys Ser Arg Phe Met Asn His Ser Cys Glu Pro Asn

1595 1600 1605

Cys Glu Thr Gln Lys Trp Thr Val Asn Gly Gln Leu Arg Val Gly

1610 1615 1620

Phe Phe Thr Thr Lys Leu Val Pro Ser Gly Ser Glu Leu Thr Phe

1625 1630 1635

Asp Tyr Gln Phe Gln Arg Tyr Gly Lys Glu Ala Gln Lys Cys Phe

1640 1645 1650

Cys Gly Ser Ala Asn Cys Arg Gly Tyr Leu Gly Gly Glu Asn Arg

1655 1660 1665

Val Ser Ile Arg Ala Ala Gly Gly Lys Met Lys Lys Glu Arg Ser

1670 1675 1680

Arg Lys Lys Asp Ser Val Asp Gly Glu Leu Glu Ala Leu Met Glu

1685 1690 1695

Asn Gly Glu Gly Leu Ser Asp Lys Asn Gln Val Leu Ser Leu Ser

1700 1705 1710

Arg Leu Met Val Arg Ile Glu Thr Leu Glu Gln Lys Leu Thr Cys

1715 1720 1725

Leu Lys Leu Ile Gln Asn Thr His Ser Gln Ser Cys Leu Lys Ser

1730 1735 1740

Phe Leu Glu Arg His Gly Leu Ser Leu Leu Trp Ile Trp Met Ala

1745 1750 1755

Glu Leu Gly Asp Gly Arg Glu Ser Asn Gln Lys Leu Gln Glu Glu

1760 1765 1770

Ile Ile Lys Thr Leu Glu His Leu Pro Ile Pro Thr Lys Asn Met

1775 1780 1785

Leu Glu Glu Ser Lys Val Leu Pro Ile Ile Gln Arg Trp Ser Gln

1790 1795 1800

Thr Lys Thr Ala Val Pro Gln Leu Ser Glu Gly Asp Gly Tyr Ser

1805 1810 1815

Ser Glu Asn Thr Ser Arg Ala His Thr Pro Leu Asn Thr Pro Asp

1820 1825 1830

Pro Ser Ala Lys Pro Ser Thr Glu Met Asp Thr Asp Thr Pro Lys

1835 1840 1845

Lys Leu Ile Phe Arg Arg Leu Lys Ile Ile Ser Glu Asn Ser Met

1850 1855 1860

Asp Ser Ala Val Ser Asp Val Thr Ser Glu Leu Glu Cys Lys Asp

1865 1870 1875

Gly Lys Glu Asp Leu Asp Gln Leu Glu Thr Val Thr Val Glu Glu

1880 1885 1890

Asp Glu Glu Leu Gln Ser Gln Gln Leu Leu Pro Gln Gln Leu Cys

1895 1900 1905

Glu Ser Lys Val Glu Ser Glu Ala Thr Ile Glu Val Ser Lys Leu

1910 1915 1920

Pro Thr Ser Glu Pro Glu Ala Asp Thr Glu Thr Glu Pro Lys Asp

1925 1930 1935

Ser Asn Gly Thr Lys Leu Glu Glu Thr Ile Ala Glu Glu Thr Pro

1940 1945 1950

Ser Gln Asp Glu Glu Glu Gly Val Ser Asp Val Glu Ser Glu Arg

1955 1960 1965

Ser Gln Glu Pro Pro Asp Lys Thr Val Asp Ile Ser Asp Leu Ala

1970 1975 1980

Thr Lys Leu Leu Asp Ser Trp Lys Asp Leu Lys Glu Val Tyr Arg

1985 1990 1995

Ile Pro Lys Lys Ser Gln Thr Glu Lys Glu Ser Thr Val Ala Glu

2000 2005 2010

Arg Gly Arg Asp Ala Ala Ala Phe Arg Asp Gln Thr Ala Pro Lys

2015 2020 2025

Thr Pro Asn Arg Ser Arg Glu Arg Asp Pro Asp Lys Gln Ser Gln

2030 2035 2040

Asn Lys Glu Lys Arg Lys Arg Arg Gly Ser Leu Ser Pro Pro Ser

2045 2050 2055

Ser Ala Tyr Glu Arg Gly Thr Lys Arg Pro Asp Asp Arg Tyr Asp

2060 2065 2070

Thr Pro Thr Ser Lys Lys Lys Val Arg Ile Lys Asp Arg Asn Lys

2075 2080 2085

Leu Ser Thr Glu Glu Arg Arg Lys Leu Phe Glu Gln Glu Val Ala

2090 2095 2100

Gln Arg Glu Ala Gln Lys Gln Gln Gln Gln Met Gln Asn Leu Gly

2105 2110 2115

Met Thr Ser Pro Leu Pro Phe Asp Ser Leu Gly Tyr Asn Ala Ser

2120 2125 2130

His His Pro Phe Ala Gly Tyr Pro Pro Gly Tyr Pro Met Gln Ala

2135 2140 2145

Tyr Val Asp Pro Ser Asn Pro Asn Ala Gly Lys Val Leu Leu Pro

2150 2155 2160

Thr Pro Ser Met Asp Pro Val Cys Ser Pro Ala Pro Tyr Asp His

2165 2170 2175

Ala Gln Pro Leu Val Gly His Ser Thr Glu Ser Leu Ala Ala Pro

2180 2185 2190

Pro Ser Val Pro Val Val Pro His Val Ala Ala Ser Val Glu Val

2195 2200 2205

Ser Ser Ser Gln Tyr Val Ala Gln Asn Glu Ser Val Val His Gln

2210 2215 2220

Asp Ser Asn Val Pro Val Met Pro Val Gln Ala Pro Gly Pro Val

2225 2230 2235

Gln Gly Gln Asn Tyr Asn Val Trp Glu Ser Asn Gln Gln Ser Val

2240 2245 2250

Ser Val Gln Gln Gln Tyr Ser Pro Ala Gln Ser Gln Thr Thr Ile

2255 2260 2265

Tyr Tyr Gln Gly Gln Thr Cys Ser Thr Val Tyr Ser Val Thr Ser

2270 2275 2280

Pro Tyr Ser Gln Thr Thr Pro Pro Ile Val Gln Ser Tyr Ala Gln

2285 2290 2295

Pro Ser Leu Gln Tyr Ile Gln Gly Gln Gln Ile Phe Thr Ala His

2300 2305 2310

Pro Gln Gly Val Val Val Gln Pro Thr Ala Ala Val Thr Ser Ile

2315 2320 2325

Val Ala Pro Gly Gln Pro Gln Ser Leu Gln Pro Pro Glu Met Val

2330 2335 2340

Val Thr Asn Asn Leu Leu Asp Leu Pro Pro Pro Ser Pro Pro Lys

2345 2350 2355

Pro Lys Thr Ile Val Leu Pro Pro Asn Trp Lys Thr Ala Arg Asp

2360 2365 2370

Pro Glu Gly Lys Ile Tyr Tyr Tyr His Val Ile Thr Arg Gln Thr

2375 2380 2385

Gln Trp Asp Pro Pro Thr Trp Glu Ser Pro Gly Asp Asp Ala Ser

2390 2395 2400

Leu Glu His Glu Ala Glu Met Asp Leu Gly Thr Pro Thr Tyr Asp

2405 2410 2415

Glu Asn Pro Met Lys Thr Ser Lys Lys Pro Lys Thr Ala Glu Ala

2420 2425 2430

Asp Thr Ser Ser Glu Leu Ala Lys Lys Ser Lys Glu Val Phe Arg

2435 2440 2445

Lys Glu Met Ser Gln Phe Ile Val Gln Cys Leu Asn Pro Tyr Arg

2450 2455 2460

Lys Pro Asp Cys Lys Val Gly Arg Ile Thr Thr Thr Glu Asp Phe

2465 2470 2475

Lys His Leu Ala Arg Lys Leu Thr His Gly Val Met Asn Lys Glu

2480 2485 2490

Leu Lys Tyr Cys Lys Asn Pro Glu Asp Leu Glu Cys Asn Glu Asn

2495 2500 2505

Val Lys His Lys Thr Lys Glu Tyr Ile Lys Lys Tyr Met Gln Lys

2510 2515 2520

Phe Gly Ala Val Tyr Lys Pro Lys Glu Asp Thr Glu Leu Glu

2525 2530 2535

<210> 5

<211> 19

<212> RNA

<213> 人工序列

<400> 5

gguguaacuu augcauuaa 19

<210> 6

<211> 19

<212> RNA

<213> 人工序列

<400> 6

uuaaugcaua aguuacacc 19

<210> 7

<211> 19

<212> RNA

<213> 人工序列

<400> 7

uucuccgaac gugucacgu 19

<210> 8

<211> 19

<212> RNA

<213> 人工序列

<400> 8

acgugacacg uucggagaa 19

Claims (10)

1.SETD2或SETD2编码序列、其促进剂在制备用于抑制病毒感染的药物或试剂盒中的用途。

2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，

所述SETD2选自：

(a)SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列；或

(b)与SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列同源，且具有抑制病毒感染的蛋白质或多肽；或

(c)(a)或(b)的氨基酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸、且具有抑制病毒感染的由(a)或(b)衍生的蛋白质或多肽；

所述SETD2编码序列选自：

(i)SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:1的第2889-5267位序列、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:3的第2861-5218位序列所示的核苷酸序列；或

(ii)在严格条件下与(i)限定的核苷酸序列杂交的分子；或

(iii)(i)或(ii)的核苷酸序列中经过取代、缺失或添加一个或几个核苷酸、且编码具有抑制病毒感染的蛋白质或多肽的分子；

SETD2或SETD2编码序列的所述促进剂选自：SETD2或SETD2编码序列的过表达载体、外源性SETD2、SETD2或SETD2编码序列的裸DNA、SETD2或SETD2编码序列的脂质体包裹DNA、SETD2蛋白。

3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述SETD2、其编码序列或其促进剂抑制病毒感染。

4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物或试剂盒包含SETD2或SETD2编码序列、或其促进剂，并通过抑制病毒感染进一步用于预防或治疗与病毒感染相关的疾病和/或其征状、病毒感染导致的慢性炎症性疾病和/或其征状。

5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述与病毒感染相关的疾病和/或其征状为选自下组的一种或两种以上因病毒感染引起的疾病和/或征状：病毒感染后引起的组织损伤；器官的炎症损伤；多器官功能衰竭。

6.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述病毒感染是由选自下组的一种或两种以上病毒引起的：乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、仙台病毒、水疱性口炎病毒。

7.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述与病毒感染相关的疾病和/或其征状为乙型肝炎病毒感染引起的肝脏损伤。

8.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物的给药方法选自：

给予SETD2编码序列：包括直接裸DNA注射法、脂质体包裹DNA直接注射法、金包被DNA基因枪轰击法、繁殖缺陷细菌携带质粒DNA法、复制缺陷腺病毒携带目的DNA法；

给予SETD2蛋白：包括注射给药，直接注射SETD2蛋白或用脂质体包埋的SETD2蛋白、鼻腔给药、肺部给药、口服给药、透皮给药、瘤内给药。

9.一种抑制病毒感染的药物组合物，其包含：

(A)治疗有效量的SETD2或SETD2编码序列、其促进剂；以及

(B)药学上或免疫学上可接受的载体或赋形剂。

10.根据权利要求9所述的抑制病毒感染的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物还包含抑制病毒感染的其它活性物质，所述其它活性物质具有预防或治疗与病毒感染相关的疾病、感染导致的损伤、感染导致的慢性炎症性疾病和/或其征状的活性。