CN107029273A - 一种基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料及其制备方法与应用，将贻贝粘蛋白与聚乳酸微球混合，得到基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料；得到的新型修复敷料具有极强的黏附性能，可广泛地黏附到创伤表面，具有很好的生物相容性和可降解性，不仅对人体无毒害作用，而且能够加快伤口的愈合。

Description

一种基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料及其 制备方法与应用

技术领域

本发明涉及一种医用材料，具体涉及一种基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料及其制备方法与应用。

背景技术

医用敷料主要功能是覆盖、保护破损皮肤，同时提供有助于伤口愈合的环境，应对人体无刺激，不会引起中毒、病变等。天然贻贝类蛋白(MAP) 是一种从贻贝足丝中提取出来的黏附蛋白，该蛋白质富含多巴胺(DOPA)，然而贻贝粘蛋白的灭菌等级只能达到抑菌，不能灭菌，杀菌，不适用于严重感染创面。聚乳酸是一种高分子聚合物，已广泛应用于免疫学、基因治疗、肿瘤治疗、眼科等诸多医学领域，但在皮肤黏膜创面修复领域中还未得到发展和应用。目前生物敷料种类繁多，但是尚无一种敷料同时兼具抗菌、促伤口愈合、提供微量元素及营养的功能。

发明内容

本发明的目的是提供一种基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料及其制备方法，得到的新型修复敷料具有极强的黏附性能，可广泛地黏附到创伤表面，具有很好的生物相容性和可降解性，不仅对人体无毒害作用，而且能够加快伤口的愈合。

本发明公开了一种基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料的制备方法，包括以下步骤，将贻贝粘蛋白与聚乳酸微球混合，得到基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料。本发明创造性的将贻贝粘蛋白与聚乳酸微球混合，从而得到了具有良好组织相容性和生物降解性、无生理活性、刺激性小、用于皮肤表面直接降解的的医用材料，而且具备阻止细菌进入创面，止痒，止痛，促进皮肤再生，加速愈合，减少疤痕等优点，尤其是具备优异的粘附性能。

优选的，在表面活性剂存在下，将贻贝粘蛋白与聚乳酸微球混合；表面活性剂、贻贝粘蛋白、聚乳酸微球的质量比为（3-10）∶（0.5-5）∶（85-96.5），优选10∶5∶85、3∶0.5∶96.5有助于蛋白分散，从而制备的复合敷料中聚乳酸微球装载均匀，并且装载效率高。

优选的，先将贻贝粘蛋白与修饰剂、交联剂、添加剂中的一种或几种混合制备贻贝粘蛋白混合物，再与聚乳酸微球混合；向贻贝粘蛋白水溶液中加入修饰剂、交联剂、添加剂中的一种或几种，制备贻贝粘蛋白混合物；使得贻贝粘蛋白溶液更稳定。

上述技术方案中，修饰剂包括醋酸钙，硫酸铜，硫酸铁，硫酸锌，氧化锰等；交联剂包括SPDP（3-(2-吡啶二巯基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯）、戊二醛；添加剂包括胶原蛋白、白蛋白，壳聚糖等。

进一步优选的，室温下，将醋酸钙加入贻贝粘蛋白中，再与修饰剂、交联剂、添加剂中的一种或几种混合制备贻贝粘蛋白混合物。比如，室温下，向贻贝粘蛋白溶液加入醋酸钙溶液，混合均匀后，再加入SPDP溶液，室温下交联4h，再加入胶原蛋白，充分搅拌使混合均匀，制备贻贝粘蛋白混合物，在与聚乳酸微球混合前可以用生理盐水稀释，优选制成贻贝粘蛋白溶液的浓度为0.5mg/ml。

上述技术方案中，当贻贝粘蛋白与修饰剂、交联剂、添加剂混合时，贻贝粘蛋白、修饰剂、交联剂、添加剂的质量比为（80-97）∶（1-10）∶（1-5）∶（1-5），优选80∶10∶5∶5、97∶1∶1∶1。

优选的，聚乳酸微球装载灭菌剂、细胞生长因子的一种或几种；进一步优选的，聚乳酸微球装载环丙沙星，当样品喷出，与自然光接触，在二氧化钛的催化下，使得聚合物逐渐降解，发挥缓释作用，既避免药物初期过度释放造成患处过度受激，有延长药物作用时间，以合理的释药速度作用患处，杀灭细菌、抑制细菌生长、阻止细菌进入创面，止痒，止痛，促进皮肤再生，加速愈合，减少疤痕。

优选的，聚乳酸微球表面覆盖聚甲基丙烯酸甲酯层，防止聚乳酸微球的降解，更主要是防止药性受到影响。

比如，将聚乳酸溶于二氯甲烷中，并将灭菌剂（比如环丙沙星）、细胞生长因子、光催化剂（比如二氧化钛）中的一种或几种分散于其中，搅拌下，缓慢加到分散介质（比如5.0wt%PVA溶液）中，乳化后，喷雾干燥得到聚乳酸微球；或者乳化后，乳液倾入到扩散介质（比如1.0%wtPVA溶液）中挥发二氯甲烷，然后离心、过滤、干燥，得到聚乳酸微球；最后将聚乳酸微球浸入到含有聚甲基丙烯酸甲酯和光催化剂的溶液中，离心、过滤、干燥，即得产品。

上述技术方案中，灭菌剂或者细胞生长因子、光催化剂、聚甲基丙烯酸甲酯的质量比为（50-90）∶（5-20）∶（5-30），优选50∶20∶30、90∶5∶5。

上述技术方案中，搅拌速度为1000rpm，利于聚乳酸微球的形成，并较好包覆灭菌剂、细胞生长因子等，尤其是形成的微球力学性能较好，无坍塌开裂等缺陷。

比如，优选本发明公开的基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料的制备方法，包括以下步骤，

（1）向贻贝粘蛋白水溶液中加入修饰剂、交联剂、添加剂，制备贻贝粘蛋白混合液；

（2）以聚乳酸、环丙沙星、二氧化钛为原料，制备改性聚乳酸微球；

（3）贻贝粘蛋白混合液与改性聚乳酸微球混合制备基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料。

本发明还用公开了根据上述制备方法制备的基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料。具有极强的黏附性能，可广泛地黏附到创伤表面，水解的最终产物是水和二氧化碳，中间产物也是人体内的正常代谢产物，无生理活性、刺激性小、易从体内排出而不蓄积、可以随粪便排出，避免了对患者的伤害，研究证明其无毒、与组织无反应、生物可降解、降解产物不滞留于活体组织中，不会引起中毒、病变等；尤其是抗菌、抑菌性较好，预防伤口感染。因此，本发明进一步公开了上述基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料在制备创面修复医用材料中的应用。

本发明进一步公开了一种创面修复医用材料，包括上述基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料；还可以包括载体，比如拖布等。

本发明公开的基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料的制备方法设备简单，可连续性操作，基本上实现自动化，生产效率较高，得到的产品可制备创面修复材料，成本较低，适合医用工业化生产，可被广泛用于创面恢复等领域。

本发明首次结合贻贝粘蛋白与聚乳酸微球制备新型创面敷料，解决了现有聚乳酸微球没有粘附性，不可以作用于皮肤创面修复材料以及贻贝粘蛋白产品只能用于浅表性创面、不能杀菌，对于感染伤口不适用，临床应用比较窄的问题，制备的敷料同时兼具抗菌、促伤口愈合、提供微量元素及营养的功能。

本发明公开的基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料用于创面修复时，保湿、吸湿性良好，能有效保留伤口渗液同时不形成积液；伤口组织处粘连程度轻，不易与伤口渗液粘连成痂，减轻换药时的疼痛及造成新生组织损伤；抗菌、抑菌性较好，预防伤口感染；生物相容性优良；有效解决了现有敷料对于感染伤口，需要口服抗生素，到达伤口处的药物浓度低，增加了对胃肠道、肝脏和肾脏的损害，并且换药时，需要用生理盐水冲洗创口，引发疼痛及新的创伤的缺陷。

本发明制备的贻贝黏蛋白-聚乳酸微球复合医用敷料无毒，无热源，生物相容性高；具有杀灭细菌、抑制细菌生长、阻止细菌进入创面，止痒，止痛，促进皮肤再生，加速愈合，减少疤痕等优点，制备工艺简单，是一种具有开发前景的医用敷料。

附图说明

图1为实施例一的环丙沙星释放曲线图。

具体实施方式

下面通过实施例进一步详细阐述本发明，但是本领域技术人员了解，本发明的实施例并非对本发明保护范围的限制，任何在本发明基础上做出的改进和变化，都在本发明的保护范围之内。

实施例一

制备贻贝黏蛋白溶液：取贻贝粘蛋白溶液1ml（贻贝粘蛋白80mg），室温条件加入醋酸钙溶液10ul（醋酸钙9mg），将贻贝粘蛋白与醋酸钙溶液充分混合均匀后，加入SPDP（5mg）溶液室温下交联4h，交联后的蛋白溶液中再加入胶原蛋白（5mg），充分搅拌使混合均匀，生理盐水稀释，制成贻贝粘蛋白溶液的浓度为0.5mg/ml。

获取或制备载药PLA微球：采用乳化-溶剂蒸发法制备环丙沙星聚乳酸微球，将0.6g聚乳酸溶于10ml二氯甲烷中，并将环丙沙星和6mg的二氧化钛分散于其中，在搅拌速度为1000rpm下，缓慢加到分散介质（PVA溶液）（5.0%）中，乳化一定时间后，再倾入到扩散介质（低浓度PVA溶液）（1.0%）中挥发二氯甲烷，然后离心、过滤、干燥，最后再浸入到含有PMMA和二氧化钛的溶液中，离心、过滤、干燥，即得环丙沙星聚乳酸微球，微球的形态圆整，表面光滑，流动性好，粒度分布均匀，突释量小于10%，缓释微球在体外释药性能符合长效制剂特征，图1为环丙沙星缓释微球体外累计释药曲线图，环丙沙星、二氧化钛、聚甲基丙烯酸甲酯的质量比为50∶20∶30。

制备贻贝黏蛋白-PLA微球溶液：贻贝粘蛋白溶液（1ml），PLA微球（100mg），表面活性剂（10mg）充分混合均匀，即得产品。

实施例二

制备贻贝黏蛋白溶液：取贻贝粘蛋白溶液1ml（贻贝粘蛋白97mg），室温条件加入氧化锰溶液15ul（氧化锰5mg），将贻贝粘蛋白与氧化锰溶液充分混合均匀后，加入戊二醛（1mg）溶液室温下交联4h，交联后的蛋白溶液中再加入壳聚糖（1mg），充分搅拌使混合均匀，生理盐水稀释，制成贻贝粘蛋白溶液的浓度为0.5mg/ml。

获取或制备载药PLA微球：采用乳化-溶剂蒸发法制备环丙沙星聚乳酸微球，将0.6g聚乳酸溶于10ml二氯甲烷中，并将环丙沙星和6mg的二氧化钛分散于其中，在搅拌速度为1000rpm下，缓慢加到分散介质（PVA溶液）（5.0%）中，乳化一定时间后，再倾入到扩散介质（低浓度PVA溶液）（1.0%）中挥发二氯甲烷，然后离心、过滤、干燥，最后再浸入到含有PMMA和二氧化钛的溶液中，离心、过滤、干燥，即得环丙沙星聚乳酸微球，微球的形态圆整，表面光滑，流动性好，粒度分布均匀，突释量小于10%，缓释微球在体外释药性能符合长效制剂特征，环丙沙星、二氧化钛、聚甲基丙烯酸甲酯的质量比为90∶5∶5。

制备贻贝黏蛋白-PLA微球溶液：贻贝粘蛋白溶液（10ml），PLA微球（85mg），表面活性剂（10mg）充分混合均匀，即得产品。

本发明公开的贻贝黏蛋白-聚乳酸微球复合医用敷料直接作用于患处表面，具有较强的粘附性、杀菌缓释性、无刺激性、直接接降解性，可以加速患处恢复，提高杀菌效果，避免了现有抗炎药物需要口服、不能直接施用破损患处的缺陷，也避免了现有外敷药物需要经常清洗的弊端。选取20名志愿者分为两组，对手臂破损进行治疗，程度从微红至出血，一组利用本发明产品，一组利用现有技术；可以看出，利用本发明产品无需口服药物，伤口无炎症，并且恢复时间为现有技术的50%至65%，现有技术针对出血症状，还需配合口服消炎药物。

Claims (10)

1.一种基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤，将贻贝粘蛋白与聚乳酸微球混合，得到基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料。

2.根据权利要求1所述的基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料的制备方法，其特征在于，在表面活性剂存在下，将贻贝粘蛋白与聚乳酸微球混合；所述表面活性剂、贻贝粘蛋白、聚乳酸微球的质量比为（3-10）∶（0.5-5）∶（85-96.5）。

3.根据权利要求1所述的基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料的制备方法，其特征在于，先将贻贝粘蛋白与修饰剂、交联剂、添加剂中的一种或几种混合制备贻贝粘蛋白混合物，再与聚乳酸微球混合。

4.根据权利要求3所述的基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料的制备方法，其特征在于，所述修饰剂包括醋酸钙、硫酸铜、硫酸铁、硫酸锌、氧化锰；所述交联剂包括SPDP、戊二醛；所述添加剂包括胶原蛋白、白蛋白、壳聚糖；当贻贝粘蛋白与修饰剂、交联剂、添加剂混合时，贻贝粘蛋白、修饰剂、交联剂、添加剂的质量比为（80-97）∶（1-10）∶（1-5）∶（1-5）。

5.根据权利要求1所述的基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料的制备方法，其特征在于，所述聚乳酸微球装载灭菌剂、细胞生长因子、光催化剂中的一种或几种；聚乳酸微球表面覆盖聚甲基丙烯酸甲酯层。

6.根据权利要求5所述的基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料的制备方法，其特征在于，灭菌剂或者细胞生长因子、光催化剂、聚甲基丙烯酸甲酯的质量比为（50-90）∶（5-20）∶（5-30）。

7.根据权利要求5所述的基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料的制备方法，其特征在于，将聚乳酸溶于二氯甲烷中，并将灭菌剂、细胞生长因子、光催化剂中的一种或几种分散于其中，搅拌下，加到分散介质中，乳化后，喷雾干燥或者蒸发溶剂得到聚乳酸微球；将聚乳酸微球浸入到含有聚甲基丙烯酸甲酯和光催化剂的溶液中，离心、过滤、干燥，在聚乳酸微球表面覆盖聚甲基丙烯酸甲酯层。

8.根据权利要求1所述制备方法制备得到的基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料。

9.权利要求8所述基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料在制备创面修复医用材料中的应用。

10.一种创面修复医用材料，包括权利要求8所述的基于贻贝粘蛋白与聚乳酸微球的复合创面修复敷料。