CN107029214A - 一种调节肠道微生物的组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种调节肠道微生物的组合物,包括溶剂和如下组分:干细胞生长因子50~500ng/mL;人干扰素‑λ500~5000U/mL;人白介素2 500~5000U/mL;人白介素11 50~1000U/mL;艾叶提取物1~10μg/mL;人血浆白蛋白溶液1vol%~3vol%。本发明采用上述的干细胞生长因子、人干扰素‑λ、人白介素2、人白介素11、人血浆白蛋白溶液和艾叶提取物协同作用,可以改善机体的整个免疫系统,加强自身免疫细胞对有害菌群的杀伤和清除;同时可以有效的调节肠道微生物菌群,增加益生菌,减少有害细菌,维持整个肠道的健康环境。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域,尤其是涉及一种调节肠道微生物的组合物及其制备方法。
背景技术
人体内存在大量共生微生物,它们大部分寄居在人的肠道中,数量超过1000万亿(1014数量级),是人体细胞总数的10倍以上,其总重量超过1.5公斤,若将单个微生物排列起来可绕地球两圈.胃肠道是微生物的“大仓库”,人体就是一个移动的微生物聚集地。从基因组角度看,一个健康成年人肠道微生物的全部基因组数量异常庞大。在漫长的进化过程中,肠道微生物与人类达成了良好的合作,对人体的营养、代谢和免疫都起着至关重要的作用,许多研究者更多地是将人体肠道微生物群落看作是人体的一个“器官”,或者是人体第二基因组,其中蕴含的海量遗传信息与人类密切相关。
大量的研究数据表明,肠道微生物在宿主的药物代谢与毒性、能量代谢、免疫系统的发育与成熟和术后恢复等方面发挥了重要作用。它们可以帮助机体消化食物、代谢药物及外源复合物、合成维生素、抑制病原体的侵袭,影响免疫系统发育和大脑活动,甚至调控宿主的情绪行为,影响自闭症的病理。因此,进行肠道微生物的研究对于肥胖症的了解和干预,及其他慢性病的防治起着至关重要的作用。通过干涉和调整肠道微生物的群落结构来实现对慢性病的预防甚至对某些疾病的治疗已经受到广泛关注。
影响人体肠道微生物群落结构的因素有很多,而对健康的人来说,饮食是影响肠道微生物群落结构最主要的一个因素。现有技术大多数都是通过口服含有中药成分或中药提取物的酸性饮料或酸性牛奶来影响肠道微生物中益生菌和有害菌的平衡,从而达到预防疾病的目的。
现有的技术方法虽然可以调节人体微生物的环境,但增加益生菌的数量,减少有害菌的数量的效果不明显,不利于长期维持,且人体肠道微生物的维持将对中药成分产生依赖,因此不是一种很好的改善肠道微生物菌群的方式。
发明内容
有鉴于此,本发明要解决的技术问题在于提供一种调节肠道微生物的组合物,本发明提供的调节肠道微生物的组合物可以增加益生菌的数量,减少有害菌的数量。
本发明提供了一种调节肠道微生物的组合物,包括溶剂和如下组分:
优选的,包括溶剂和如下组分:
优选的,包括溶剂和如下组分:
优选的,还包括大豆提取物;所述大豆提取物的量为1~10μg/mL;
还包括玉米提取物;所述玉米提取物的量为1~10μg/mL;
还包括苹果肉提取物;所述苹果肉提取物的量为1~10μg/mL;
还包括葡萄籽提取物;所述葡萄籽提取物的量为1~10μg/mL;
还包括桂圆肉提取物;所述桂圆肉提取物的量为1~10μg/mL。
本发明还提供了一种调节肠道微生物的组合物的制备方法,包括如下步骤:
将干细胞生长因子、人干扰素-λ、人白介素2、艾叶提取物、人血浆白蛋白溶液和溶剂混合,得到。
优选的,所述干细胞生长因子按照如下方法制备:
收集P3代脐带间充质干细胞的培养上清液,浓缩得到。
优选的,所述人干扰素-λ按照如下方法制备:
收集T淋巴细胞培养上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子,提纯得到人干扰素-λ。
本发明提供了一种上述技术方案所述的组合物在制备调节肠道微生物的食品或保健品中的应用。
本发明提供了一种调节肠道微生物的食品/保健品,包括上述技术方案所述的组合物。
本发明提供了一种调节肠道微生物的针剂,包括上述技术方案所述的组合物。
与现有技术相比,本发明提供了一种调节肠道微生物的组合物,包括溶剂和如下组分:干细胞生长因子50~500ng/mL;人干扰素-λ500~5000U/mL;人白介素2 500~5000U/mL;人白介素1150~1000U/mL;艾叶提取物1~10μg/mL;人血浆白蛋白溶液1vol%~3vol%。本发明的干细胞生长因子可以调节干细胞生长的微环境,同时可以调节机体微环境,对机体的细胞提供有力的生长条件。干扰素-λ具有调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种作用,是机体防御系统的重要组成部分。白介素2和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调,相互作用,共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息,激活与白介素调节免疫细胞,介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。人白介素11可有效的调节体内免疫细胞的增殖与活化,影响免疫系统的功能。本发明采用上述的干细胞生长因子、人干扰素-λ、人白介素2、人白介素11、人血浆白蛋白溶液和艾叶提取物协同作用,可以改善机体的整个免疫系统,加强自身免疫细胞对有害菌群的杀伤和清除;同时可以有效的调节肠道微生物菌群,增加益生菌,减少有害细菌,维持整个肠道的健康环境。
具体实施方式
本发明提供了一种调节肠道微生物的组合物,包括溶剂和如下组分:
在本发明人对于所述干细胞生长因子、人干扰素-λ、人白介素2、人白介素11、人血浆白蛋白溶液和艾叶提取物不进行限定,为本领域技术人员熟知的即可,对上述来源也不进行限定,可以为市售。
干细胞生长因子(Stem Cell Growth Factors)是美国AgingOff Biotech,Inc.联合哈弗大学、宾夕法尼亚大学、匹兹堡大学、麻省理工大学等机构共同开放的一种具有刺激自体内源性干细胞生长的高效蛋白质、酶组合,也是体外培养干细胞必不可少的各种细胞生长因子的组合,富含表皮生长因子(EGF)、纤维细胞生长因子(FGF)、神经生长因子(NGF)、肝细胞生长因子(HGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、血小板源性生长因子(PDGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF)等多重有效成分。
干细胞生长因子是从干细胞培养的微环境中提取的得到的生长因子,是干细胞培养过程中分泌的所有细胞因子的总称,可以调节干细胞生长的微环境,同时可以调节机体微环境,对机体的细胞提供有力的生长条件。
干扰素(IFN)是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,从而抑制乙肝病毒的复制,其类型分为三类,α-(白细胞)型、β-(成纤维细胞)型,γ-(淋巴细胞)型;同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用,并增强抗病毒能力。干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质(主要是糖蛋白),是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长,以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。
干扰素-λ是T淋巴细胞在培养过程中分泌的细胞因子。是一类具有广泛生物学活性的蛋白质,具有调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种作用,是机体防御系统的重要组成部分。
白细胞介素,简称白介素,是指在白细胞或免疫细胞间相互作用的淋巴因子,它和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调,相互作用,共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息,激活与调节免疫细胞,介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。
白介素2是指在白细胞或免疫细胞间相互作用的淋巴因子,它和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调,相互作用,共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息,激活与白介素调节免疫细胞,介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。
白介素11由骨髓基质细胞分泌,可有效的调节体内免疫细胞的增殖与活化,影响免疫系统的功能。
血浆白蛋白存在于血浆中的水溶性很高的球状蛋白质,可以制备成浓度达30%的溶液;也称血清白蛋白。它占血液中总蛋白质含量的50~60%,分子量66000,不含糖,但制剂中常含长链脂肪酸的脂质,可用硫酸铵沉淀或乙醇沉淀的方法生产。
艾叶提取物的常规提取方法为:以水-乙醇为提取溶剂,加热回流提取三次,每次2小时,合并提取液,弃去药渣,提取液经浓缩回收乙醇,蒸发水分,采用喷雾干燥方式,得到艾叶提取物粉末,粉末经粉碎机粉碎,100-120目摇摆振动筛筛分,得100-120目粉末,经混合器混合1小时,采用出口级别纸板桶包装,内层为双层聚氯乙烯材质塑料袋,常用为25KG/桶,入库。
在本发明的一部分实施例中,所述调节肠道微生物的组合物包括溶剂和如下组分:
在本发明的一部分实施例中,所述调节肠道微生物的组合物包括溶剂和如下组分:
在本发明的一部分实施例中,所述调节肠道微生物的组合物包括溶剂和如下组分:
在本发明的一部分实施例中,所述调节肠道微生物的组合物包括溶剂和如下组分:
在本发明中,所述溶剂包括但不限于氯化钠的水溶液;优选为生理盐水。
在本发明中,所述调节肠道微生物的组合物还包括大豆提取物;所述大豆提取物的量优选为1~10μg/mL;更优选为2~10μg/mL;最优选为5~10μg/mL。
在本发明中,所述调节肠道微生物的组合物还包括玉米提取物;所述玉米提取物的量优选为1~10μg/mL;更优选为2~10μg/mL;最优选为5~10μg/mL。
在本发明中,所述调节肠道微生物的组合物还包括还包括苹果肉提取物;所述苹果肉提取物的量优选为1~10μg/mL;更优选为2~10μg/mL;最优选为5~10μg/mL。
在本发明中,所述调节肠道微生物的组合物还包括葡萄籽提取物;所述葡萄籽提取物的量优选为1~10μg/mL;更优选为2~10μg/mL;最优选为5~10μg/mL。
在本发明中,所述调节肠道微生物的组合物还包括桂圆肉提取物;所述桂圆肉提取物的量优选为1~10μg/mL;更优选为2~10μg/mL;最优选为5~10μg/mL。
本发明对于所述大豆提取物、玉米提取物、苹果肉提取物、葡萄籽提取物、桂圆肉提取物不进行限定,本领域技术人员熟知的即可。
在本发明的一部分实施例中,所述调节肠道微生物的组合物包括溶剂和如下组分:
在本发明的一部分实施例中,所述调节肠道微生物的组合物包括溶剂和如下组分:
在本发明的一部分实施例中,所述调节肠道微生物的组合物包括溶剂和如下组分:
在本发明的一部分实施例中,所述调节肠道微生物的组合物包括溶剂和如下组分:
本发明该调节肠道微生物的组合物的成分相对较少,制备简单;该组合物同时可以改善机体的整个免疫系统,加强自身免疫细胞对有害菌群的杀伤和清除;该组合物协同作用调节肠道微生物菌群的效果更好,有效的增加益生菌的数量,减少有害菌的数量,维持整个肠道微生物的健康环境。
本发明还提供了一种调节肠道微生物的组合物的制备方法,包括如下步骤:
将干细胞生长因子、人干扰素-λ、人白介素2、艾叶提取物、人血浆白蛋白溶液和溶剂混合,得到。
本发明对于干细胞生长因子的来源不进行限定,可以为市售,优选按照如下方法制备:
收集P3代脐带间充质干细胞的培养上清液,浓缩得到。
本发明对于所述培养和浓缩不进行限定,本领域技术人员熟知的即可。
本发明对于人干扰素-λ的来源不进行限定,可以为市售,优选按照如下方法制备:
收集T淋巴细胞培养上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子,提纯得到人干扰素-λ。
本发明对于所述培养、浓缩和提纯不进行限定,本领域技术人员熟知的即可。
本发明对于人白介素2的来源不进行限定,可以为市售,优选按照如下方法制备:
收集T淋巴细胞培养上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子,提纯出人白介素2。
本发明对于所述培养、浓缩和提纯不进行限定,本领域技术人员熟知的即可。
本发明对于人白介素11的来源不进行限定,可以为市售,优选按照如下方法制备:
收集T淋巴细胞培养上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子,提纯出人白介素11。
本发明对于所述培养、浓缩和提纯不进行限定,本领域技术人员熟知的即可。
本发明对于艾叶提取物、人血浆白蛋白溶液和溶剂的来源不进行限定,可以为市售;本发明对于所述苹果肉提取物、大豆提取物、玉米提取物、葡萄籽提取物和桂圆肉提取物的来源不进行限定,可以为市售。
本发明首先按照上述比例准备干细胞生长因子、人干扰素-λ、人白介素2、艾叶提取物、人血浆白蛋白溶液和溶剂;本发明上述已经对于干细胞生长因子、人干扰素-λ、人白介素2、艾叶提取物、人血浆白蛋白溶液和溶剂的浓度和比例有了清楚的描述和限定,在此不再赘述。
在无菌条件下将干细胞生长因子、人干扰素-λ、人白介素2、艾叶提取物、人血浆白蛋白溶液和溶剂混合,得到。
本发明提供了一种上述技术方案所述的组合物在制备调节肠道微生物的食品或保健品中的应用。
本发明提供了一种调节肠道微生物的食品/保健品,包括上述技术方案所述的组合物。
本发明提供了一种调节肠道微生物的针剂,包括上述技术方案所述的组合物。
本发明提供了一种调节肠道微生物的组合物,包括溶剂和如下组分:干细胞生长因子50~500ng/mL;人干扰素-λ500~5000U/mL;人白介素2500~5000U/mL;人白介素11 50~1000U/mL;艾叶提取物1~10μg/mL;人血浆白蛋白溶液1vol%~3vol%。本发明的干细胞生长因子可以调节干细胞生长的微环境,同时可以调节机体微环境,对机体的细胞提供有力的生长条件。干扰素-λ具有调节机体免疫功能、抗病毒、抗肿瘤等多种作用,是机体防御系统的重要组成部分。白介素2和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调,相互作用,共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息,激活与白介素调节免疫细胞,介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。人白介素11可有效的调节体内免疫细胞的增殖与活化,影响免疫系统的功能。本发明采用上述的干细胞生长因子、人干扰素-λ、人白介素2、人白介素11、人血浆白蛋白溶液和艾叶提取物协同作用,可以改善机体的整个免疫系统,加强自身免疫细胞对有害菌群的杀伤和清除;同时可以有效的调节肠道微生物菌群,增加益生菌,减少有害细菌,维持整个肠道的健康环境。
本发明优选采用如下方式对益生菌的数量进行测定:
收集服用过本专利的针剂的人的粪便,分离出粪便中的乳酸菌和双歧杆菌。将乳酸菌培养在市售的发酵培养基中生长,培养3-5天后,数每皿中的菌落数,求其平均值,求出乳酸菌数;同时将双歧杆菌培养在市售的营养琼脂蛋白培养基上生长,培养3-5天后,数每皿中的菌落数,求其平均值,求出双歧杆菌数。
为了进一步说明本发明,以下结合实施例对本发明提供的调节肠道微生物的组合物及其制备方法进行详细描述。
实施例1
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子50ng/mL,人干扰素-λ500U/mL、人白介素2 500U/mL、人白介素11 50U/mL、艾叶提取物1μg/mL、1vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例2
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子100ng/mL,人干扰素-λ1000U/mL、人白介素2 1000U/mL、人白介素11 100U/mL、艾叶提取物2μg/mL、1vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例3
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子100ng/mL,人干扰素-λ2000U/mL、人白介素2 1000U/mL、人白介素11 200U/mL、艾叶提取物3μg/mL、2vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例4
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子100ng/mL,人干扰素-λ2000U/mL、人白介素2 1000U/mL、人白介素11 500U/mL、艾叶提取物5μg/mL、2vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例5
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子300ng/mL,人干扰素-λ3500U/mL、人白介素2 3500U/mL、人白介素11 900U/mL、艾叶提取物8μg/mL、3vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例6
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子400ng/mL,人干扰素-λ4000U/mL、人白介素2 4000U/mL、人白介素11 1000U/mL、艾叶提取物10μg/mL、3vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例7
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子400ng/mL,人干扰素-λ5000U/mL、人白介素2 4000U/mL、人白介素11 1000U/mL、艾叶提取物10μg/mL、3vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例8
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子500ng/mL,人干扰素-λ5000U/mL、人白介素2 5000U/mL、人白介素11 1000U/mL、艾叶提取物10μg/mL、3vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例9
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物、大豆提取物、玉米提取物、苹果肉提取物、葡萄籽提取物和桂圆肉提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子50ng/mL,人干扰素-λ500U/mL、人白介素2 500U/mL、人白介素11 50U/mL、艾叶提取物1μg/mL、大豆提取物1μg/mL、玉米提取物1μg/mL、苹果肉提取物1μg/mL、葡萄籽提取物1μg/mL、桂圆肉提取物1μg/mL、1vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例10
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物、大豆提取物、玉米提取物、苹果肉提取物、葡萄籽提取物和桂圆肉提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子100ng/mL,人干扰素-λ1000U/mL、人白介素2 1000U/mL、人白介素11 100U/mL、艾叶提取物2μg/mL、大豆提取物2μg/mL、玉米提取物2μg/mL、苹果肉提取物2μg/mL、葡萄籽提取物2μg/mL、桂圆肉提取物2μg/mL、1vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例11
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物、大豆提取物、玉米提取物、苹果肉提取物、葡萄籽提取物和桂圆肉提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子100ng/mL,人干扰素-λ2000U/mL、人白介素2 1000U/mL、人白介素11 200U/mL、艾叶提取物3μg/mL、大豆提取物3μg/mL、玉米提取物3μg/mL、苹果肉提取物3μg/mL、葡萄籽提取物3μg/mL、桂圆肉提取物3μg/mL、2vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例12
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物、大豆提取物、玉米提取物、苹果肉提取物、葡萄籽提取物和桂圆肉提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子100ng/mL,人干扰素-λ2000U/mL、人白介素2 1000U/mL、人白介素11 500U/mL、艾叶提取物5μg/mL、大豆提取物5μg/mL、玉米提取物5μg/mL、苹果肉提取物5μg/mL、葡萄籽提取物5μg/mL、桂圆肉提取物5μg/mL、2vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例13
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物、大豆提取物、玉米提取物、苹果肉提取物、葡萄籽提取物和桂圆肉提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子300ng/mL,人干扰素-λ3500U/mL、人白介素2 3500U/mL、人白介素11 900U/mL、艾叶提取物8μg/mL、大豆提取物8μg/mL、玉米提取物8μg/mL、苹果肉提取物8μg/mL、葡萄籽提取物8μg/mL、桂圆肉提取物8μg/mL、3vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例14
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物、大豆提取物、玉米提取物、苹果肉提取物、葡萄籽提取物和桂圆肉提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子400ng/mL,人干扰素-λ4000U/mL、人白介素2 4000U/mL、人白介素11 1000U/mL、艾叶提取物10μg/mL、大豆提取物10μg/mL、玉米提取物10μg/mL、苹果肉提取物10μg/mL、葡萄籽提取物10μg/mL、桂圆肉提取物10μg/mL、3vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例15
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物、大豆提取物、玉米提取物、苹果肉提取物、葡萄籽提取物和桂圆肉提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子400ng/mL,人干扰素-λ5000U/mL、人白介素2 4000U/mL、人白介素11 1000U/mL、艾叶提取物10μg/mL、大豆提取物10μg/mL、玉米提取物10μg/mL、苹果肉提取物10μg/mL、葡萄籽提取物10μg/mL、桂圆肉提取物10μg/mL、3vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
实施例16
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物、大豆提取物、玉米提取物、苹果肉提取物、葡萄籽提取物和桂圆肉提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子500ng/mL,人干扰素-λ5000U/mL、人白介素2 5000U/mL、人白介素11 1000U/mL、艾叶提取物10μg/mL、大豆提取物10μg/mL、玉米提取物10μg/mL、苹果肉提取物10μg/mL、葡萄籽提取物10μg/mL、桂圆肉提取物10μg/mL、3vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
比较例1
收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:人干扰素-λ500U/mL、人白介素2 500U/mL、人白介素11 50U/mL、艾叶提取物1μg/mL、1vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
比较例2
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出白介素2和白介素11;购买艾叶提取物、大豆提取物、玉米提取物、苹果肉提取物、葡萄籽提取物和桂圆肉提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子50ng/mL,人白介素2 500U/mL、人白介素11 50U/mL、艾叶提取物1μg/mL、1vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
比较例3
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ和白介素11;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子50ng/mL,人干扰素-λ500U/mL、人白介素11 50U/mL、艾叶提取物1μg/mL、1vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
比较例4
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子50ng/mL,人干扰素-λ500U/mL、人白介素2 500U/mL、艾叶提取物1μg/mL、1vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
比较例5
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子50ng/mL,人干扰素-λ500U/mL、人白介素2 500U/mL、人白介素11 50U/mL、1vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
比较例6
收集P3代脐带间充质干细胞的培养基上清液,经过浓缩得到干细胞生长因子;收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出干扰素-λ、白介素2和白介素11;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:干细胞生长因子50ng/mL,人干扰素-λ500U/mL、人白介素2 500U/mL、人白介素11 50U/mL、艾叶提取物1μg/mL。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
比较例7
收集T淋巴细胞的培养基上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子。从免疫细胞因子中提纯出白介素2和白介素11;购买艾叶提取物。
根据各个成分的用量,具体为:人白介素2 500U/mL、人白介素11 50U/mL、艾叶提取物1μg/mL、1vol%的人血浆白蛋白溶液。在无菌条件下将上述成分溶解和稀释在生理盐水中,使最终的组合物体积为100mL,得到调节肠道微生物的组合物,置于安瓿瓶内,5mL/瓶。
将本发明所述的组合物静脉输注,按照本发明所述的方式收集注射过本专利的针剂的人的粪便,分离出乳酸菌和双歧杆菌。将这两种菌液用1mL生理盐水进行稀释到2mL,均匀涂布在血平皿上使其生长,3天内观察结果,数出菌落数。结果如表1所示。
表1实施例和对比例乳酸菌和双歧杆菌的数量
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种调节肠道微生物的组合物,其特征在于,包括溶剂和如下组分:
2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,包括溶剂和如下组分:
3.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,包括溶剂和如下组分:
4.根据权利要求1~3任意一项所述的组合物,其特征在于,还包括大豆提取物;所述大豆提取物的量为1~10μg/mL;
还包括玉米提取物;所述玉米提取物的量为1~10μg/mL;
还包括苹果肉提取物;所述苹果肉提取物的量为1~10μg/mL;
还包括葡萄籽提取物;所述葡萄籽提取物的量为1~10μg/mL;
还包括桂圆肉提取物;所述桂圆肉提取物的量为1~10μg/mL。
5.一种调节肠道微生物的组合物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
将干细胞生长因子、人干扰素-λ、人白介素2、艾叶提取物、人血浆白蛋白溶液和溶剂混合,得到。
6.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述干细胞生长因子按照如下方法制备:
收集P3代脐带间充质干细胞的培养上清液,浓缩得到。
7.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述人干扰素-λ按照如下方法制备:
收集T淋巴细胞培养上清液,经过浓缩得到免疫细胞的细胞因子,提纯得到人干扰素-λ。
8.一种权利要求1~4任意一项所述的组合物在制备调节肠道微生物的食品或保健品中的应用。
9.一种调节肠道微生物的食品/保健品,其特征在于,包括权利要求1~4任意一项所述的组合物。
10.一种调节肠道微生物的针剂,其特征在于,包括权利要求1~4任意一项所述的组合物。
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CN106491657A (zh) * | 2016-10-25 | 2017-03-15 | 广西泰和制药有限公司 | 一种加强调节肠道菌群功能的保健食品及其制备方法 |
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Date | Code | Title | Description |
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PB01 | Publication | ||
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SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20170811 |
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