CN107021988A - 一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物及其提取方法和在制备抗肿瘤药物中的应用 - Google Patents

一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物及其提取方法和在制备抗肿瘤药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN107021988A
CN107021988A CN201710277032.XA CN201710277032A CN107021988A CN 107021988 A CN107021988 A CN 107021988A CN 201710277032 A CN201710277032 A CN 201710277032A CN 107021988 A CN107021988 A CN 107021988A
Authority
CN
China
Prior art keywords
extracted
chinese scholartree
bosom
dichloromethane
red sandalwood
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201710277032.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN107021988B (zh
Inventor
赵渤年
王平
于蓓蓓
于宗渊
闫雪生
张丽美
高燕
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shandong Academy of Chinese Medicine
Original Assignee
Shandong Academy of Chinese Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shandong Academy of Chinese Medicine filed Critical Shandong Academy of Chinese Medicine
Priority to CN201710277032.XA priority Critical patent/CN107021988B/zh
Publication of CN107021988A publication Critical patent/CN107021988A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107021988B publication Critical patent/CN107021988B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
    • C07H1/06—Separation; Purification
    • C07H1/08—Separation; Purification from natural products

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物及其提取方法和在制备抗肿瘤药物中的应用，它为美迪紫檀素‑3‑O‑β‑D‑葡萄糖苷，结构式如下。用怀槐的干燥树皮经乙醇提取、乙醚萃取、二氯甲烷萃取，然后将二氯甲烷萃取物经硅胶、Sephadex LH‑20凝胶柱层析，纯化制得。本发明提取方法简便易行，所得化合物纯度高，化合物具有显著的抗肿瘤作用，特别是对抗肝癌HepG2细胞，可应用在制备抗肿瘤药物中。

Description

一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物及其提取方法和在制 备抗肿瘤药物中的应用
技术领域
本发明涉及一种新的提取物，特别涉及一种从怀槐中提取的化合物及其提取方法和应用，属于医药技术领域。
背景技术
怀槐(Maackia amurensis Rupr.et Maxim.)，为豆科马鞍树属植物，又名山槐，高丽槐，朝鲜槐，其分布于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、河北、山东等地，俄罗斯远东地区和朝鲜也有分布。民间将其树皮作为祛风湿、镇痛、消炎和止血药，用来治疗胆囊炎、瘀血肿痛、风湿性关节炎、溃疡等症。国内有关怀槐的化学成分及药理活性研究较少。
现有技术中有用提取溶媒提取怀槐的心材、根皮、茎皮、枝皮、叶、叶梗、花、果实和种子；过滤该提取液并浓缩；浓缩液通过大孔吸附树脂，以不同浓度的甲醇或乙醇水溶液洗脱；收集洗脱液并浓缩至干，获得怀槐总黄酮提取物。专利CN101434592A公开了从怀槐中提取的7种新化合物，分别为怀槐黄酮A(MAACKIAFLAVANONE A)、怀槐黄酮B(MAACKIAFLAVANONE B)、怀槐酮素(MAACKIAPENTONE)、怀槐紫檀素A(MAACKIAPTEROCARPANA)、怀槐紫檀素B(MAACKIAPTEROCARPAN B)、怀槐异黄酮苷(MAACKIAISOFLAVONOSIDE)和怀槐黄烷(8-3,3-DIMETHYLALLYL-5-HYDROXY-7-METHOXY CHROMONE)，是研究怀槐活性成分的很大进步，但这不一定就是全部，对于怀槐活性成分的进一步研究也很有必要。
发明内容
本发明的目的是提供一种新的从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物及其提取方法。
本发明的另一目的是提供该种化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明采取的技术方案为：
一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物，其结构式为:
上述化合物的提取方法，包括步骤如下：
(1)将怀槐的干燥树皮用乙醇加热回流提取，并将提取液浓缩成无醇味的浸膏；
(2)将得到的浸膏用热水混悬，然后加入盐酸溶液调至pH＝2，用乙醚萃取，将乙醚萃取后的水层先用氨水碱化至pH＝10，再用二氯甲烷萃取，将二氯甲烷萃取后的水层先用碳酸钾饱和，再用二氯甲烷萃取至Dragendorff′s(德雷根道尔夫试剂)反应呈阴性，将两次二氯甲烷萃取后的二氯甲烷萃取液层合并，减压干燥得二氯甲烷萃取物；
(3)将二氯甲烷萃取物用少量乙醇在加热下溶解，加入与乙醇等体积的硅胶混合均匀，干燥后研细得流动性很好的拌样硅胶粉；
(4)将拌样硅胶粉干法上样于硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇洗脱液洗脱，按洗出顺序每5个柱体积的洗脱液为1个流分，第2个流分静置后析出结晶，抽滤，将结晶用95％乙醇洗涤至呈白色粉末，得化合物，将滤液及洗涤液合并浓缩，经葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱用甲醇-水层析纯化，也得化合物。
上述方法中，步骤(1)所述的乙醇为95％(v/v)乙醇，加热回流提取3次。
步骤(2)所述的盐酸溶液质量浓度为10％，氨水质量浓度为25％；所述的乙醚萃取、二氯甲烷萃取均为一次萃取3遍。
步骤(3)所述的硅胶为100-200目。
步骤(4)所述的硅胶柱硅胶粒度200-300目，体积量为拌样硅胶量的7～10倍，柱体径高比为1∶5～7；洗脱液二氯甲烷、甲醇体积比为17∶1；所述的甲醇-水，均为甲醇与水体积比1:1。
本发明提取的化合物为美迪紫檀素-3-O-β-D-葡萄糖苷(Medicarpin-3-O-β-D-glucoside，MDCG)，是一种紫檀烷苷；提取方法简便易行，所得化合物纯度高(高效液相色谱面积归一化法测得纯度为99.0％)。本发明化合物具有显著的抗肿瘤作用，特别是对肝癌HepG2细胞的抑瘤效果显著，可应用在制备抗肿瘤药物中。
附图说明
图1为本发明提取化合物的13CNMR谱图；
图2为本发明提取化合物的1HNMR谱图；
图3为本发明提取化合物的HPLC色谱图；色谱条件：
固定相：十八烷基硅烷键和硅胶；
流动相：甲醇-0.1％磷酸水溶液，0～30min，50％甲醇；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：310nm；进样量：l0μL。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明的技术方案做进一步具体的说明。
实施例1
提取方法：
(1)将怀槐的干燥树皮用95％(v/v)乙醇加热回流提取3次，将提取液浓缩成无醇味的浸膏；
(2)将浸膏用热水混悬，加10％(质量浓度)的盐酸至pH＝2，用乙醚萃取3次，得到的水层用25％(质量浓度)的氨水碱化至pH＝10，再用二氯甲烷萃取3次，萃取后水层以碳酸钾饱和，再用二氯甲烷萃取至Dragendorff′s反应阴性，将两次二氯甲烷萃取的二氯甲烷萃取液合并，减压干燥得二氯甲烷萃取物；
(3)将二氯甲烷萃取物用少量乙醇在加热下溶解，加入与乙醇等体积硅胶(100-200目)混合均匀，干燥后研细得流动性很好的拌样硅胶粉；
(4)将拌样硅胶粉干法上样于硅胶柱(硅胶粒度200-300目，体积量为拌样硅胶量的7～10倍，柱体径高比约为1∶5～7)，以二氯甲烷-甲醇(体积比17∶1)洗脱，按洗出顺序每5个柱体积的洗脱液为1个流分，第2个流分静置后析出结晶，抽滤，将结晶以适量95％乙醇洗涤至呈白色粉末，得化合物，将滤液及洗液合并浓缩，经Sephadex LH-20柱甲醇-水(体积比1∶1)纯化，也得化合物。
该化合物成分的核磁共振氢谱、碳谱数据及图谱如图1、图2及表1所示，其结构式为：
表1 MDCG的NMR(600MHz)数据(溶剂DMSO-d6，δppm，J＝Hz)
提取的化合物MDCG对肝癌HepG2肿瘤细胞抑制作用的研究
取对数生长期的HepG2肝癌肿瘤细胞，倾去上清液，以PBS洗2次，加入适量胰酶－EDTA消化液，消化至细胞边缘收缩，倒掉消化液并以PBS洗去残余的消化液，加入6ml PBS以吸管轻轻吹打使细胞脱落并均匀打散，1000rpm离心5min，弃去上清液，以6ml含10％(m/m)小牛血清的RPM I-1640培养液混悬沉淀的细胞，细胞计数后根据细胞种类不同调至含细胞20000-100000个/ml备用。
每孔加入100μL上述细胞悬液，置37℃5％(v/v)CO2培养箱中培养。细胞贴壁后，弃去上清液，每孔加入不同浓度梯度的MDCG样品各50μL，然后每孔加入50μL RPM I-1640培养液，以50μL PBS和50μL培养液作为对照组，培养48h。弃去上清液，每孔加入50μL PBS和10μL5mg/ml的MTT，置37℃5％(v/v)CO2培养箱中培养4h后，弃去上清液，每孔加入150μL DMSO，振荡10min后在酶标仪上以检测波长570nm检测。按下式计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率:
肿瘤细胞生长抑制率％＝(1-实验组平均OD值/对照组平均OD值)×100％。
实验结果见表2。
表2 MDCG成分对HepG2肿瘤细胞体外抑制作用(n＝4)
从怀槐MDCG成分对肝癌HepG2细胞的抑瘤效果上分析，样品最高抑瘤率达到87.46％，对肝癌HepG2细胞的抑瘤效果较佳，适合进一步开发成抗肝癌的产品。
以上是结合具体实施例对本发明的详细介绍，本发明的保护范围不限于此。

Claims (10)

1.一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物，其结构式如下：
2.权利要求1所述的一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物的提取方法，其特征是，包括步骤如下：
(1)将怀槐的干燥树皮用乙醇加热回流提取，并将提取液浓缩成无醇味的浸膏；
(2)将得到的浸膏用热水混悬，然后加入盐酸溶液调至pH＝2，用乙醚萃取，将乙醚萃取后的水层先用氨水碱化至pH＝10，再用二氯甲烷萃取，将二氯甲烷萃取后的水层先用碳酸钾饱和，再用二氯甲烷萃取至Dragendorff′s反应呈阴性，将两次二氯甲烷萃取后的二氯甲烷萃取液层合并，减压干燥得二氯甲烷萃取物；
(3)将二氯甲烷萃取物用少量乙醇在加热下溶解，加入与乙醇等体积的硅胶混合均匀，干燥后研细得流动性很好的拌样硅胶粉；
(4)将拌样硅胶粉干法上样于硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇洗脱液洗脱，按洗出顺序每5个柱体积的洗脱液为1个流分，第2个流分静置后析出结晶，抽滤，将结晶用95％乙醇洗涤至呈白色粉末，得化合物，将滤液及洗涤液合并浓缩，经葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱用甲醇-水层析纯化，也得化合物。
3.根据权利要求2所述的一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物的提取方法，其特征是，步骤(1)所述的乙醇为体积浓度95％的乙醇，加热回流提取3次。
4.根据权利要求2所述的一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物的提取方法，其特征是，步骤(2)所述的盐酸溶液质量浓度为10％，氨水质量浓度为25％。
5.根据权利要求2所述的一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物的提取方法，其特征是，步骤(2)所述的乙醚萃取、二氯甲烷萃取均为一次萃取3遍。
6.根据权利要求2所述的一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物的提取方法，其特征是，步骤(3)所述的硅胶为100-200目。
7.根据权利要求2所述的一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物的提取方法，其特征是，步骤(4)所述的硅胶柱硅胶粒度200-300目，体积量为拌样硅胶量的7～10倍，柱体径高比为1∶5～7。
8.根据权利要求2所述的一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物的提取方法，其特征是，步骤(4)所述的洗脱液二氯甲烷、甲醇体积比为17∶1；所述的甲醇-水两组分体积比为1∶1。
9.权利要求1所述的一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
10.含权利要求1所述的一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物及其药学上可接受的载体的混合物。
CN201710277032.XA 2017-04-25 2017-04-25 一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物及其提取方法和在制备抗肿瘤药物中的应用 Expired - Fee Related CN107021988B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710277032.XA CN107021988B (zh) 2017-04-25 2017-04-25 一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物及其提取方法和在制备抗肿瘤药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710277032.XA CN107021988B (zh) 2017-04-25 2017-04-25 一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物及其提取方法和在制备抗肿瘤药物中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107021988A true CN107021988A (zh) 2017-08-08
CN107021988B CN107021988B (zh) 2019-10-29

Family

ID=59527383

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710277032.XA Expired - Fee Related CN107021988B (zh) 2017-04-25 2017-04-25 一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物及其提取方法和在制备抗肿瘤药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107021988B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114478567A (zh) * 2022-03-03 2022-05-13 中国科学院新疆理化技术研究所 从鹰嘴豆芽中制备紫檀烷类化合物高丽槐素和美迪紫檀素的方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101434592A (zh) * 2008-12-19 2009-05-20 沈阳药科大学 朝鲜槐中提取的新的黄酮类化合物
CN104510752A (zh) * 2014-12-25 2015-04-15 上海中医药大学 紫檀烷苷的医药用途

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101434592A (zh) * 2008-12-19 2009-05-20 沈阳药科大学 朝鲜槐中提取的新的黄酮类化合物
CN104510752A (zh) * 2014-12-25 2015-04-15 上海中医药大学 紫檀烷苷的医药用途

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHENGLE YIN ET AL.: "Pterocarpans and triterpenoids from Gueldenstaedtia verna", 《FITOTERAPIA》 *
KYRMYZYGUEL, SUEHEYLA ET AL.: "Spinonin, a Novel Glycoside from Ononis spinosa subsp. leiosperma", 《JOURNAL OF NATURAL PRODUCTS》 *
PAN, QI-MING ET AL.: "Cytisine-type alkaloids and flavonoids from the rhizomes of Sophora tonkinensis", 《JOURNAL OF ASIAN NATURAL PRODUCTS RESEARCH》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114478567A (zh) * 2022-03-03 2022-05-13 中国科学院新疆理化技术研究所 从鹰嘴豆芽中制备紫檀烷类化合物高丽槐素和美迪紫檀素的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN107021988B (zh) 2019-10-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101190258A (zh) 富含小白菊内酯的总倍半萜内酯提取物及其制备方法和应用
CN101260131A (zh) 从杜仲中提取环烯醚萜活性部位及单体的方法
CN105237537B (zh) 一种制备苦豆子中苦参碱和槐定碱的方法
CN106946766A (zh) 马齿苋中生物碱化合物及其提取分离方法
CN104817432B (zh) 一种二萜类化合物的抗肿瘤用途
CN103483402A (zh) 甜菊苷及莱鲍迪苷a的提纯制备方法
CN105998103B (zh) 板栗花活性提取物及其制备方法和应用
CN102746362A (zh) 从黄芪中提取精制黄芪甲苷的方法
CN111110726A (zh) 一种莲房总黄酮的制备方法
CN105132172A (zh) 一种从鸢尾根中制备烟草用鸢尾根黄酮类物质的方法
CN105859805A (zh) 核桃青皮中一种新的酚苷化合物的制备方法和用途
CN107021988B (zh) 一种从怀槐中提取的紫檀烷苷类化合物及其提取方法和在制备抗肿瘤药物中的应用
CN105175426B (zh) 一种从四方藤中提取纯化岩白菜素的方法
CN101823964A (zh) 鸡树条荚蒾叶中绿原酸的制备工艺
CN103191143B (zh) 一种强心苷化合物的用途
CN104857245A (zh) 紫萼玉簪花总皂苷的制备方法和应用
CN112851615B (zh) 一种异戊烯基黄酮的制备及其作为治疗宫颈癌药物的应用
CN107383129A (zh) 一种香豆素苷类化合物及其制备方法和应用
CN104829529B (zh) 一种毛叶鹰爪花总生物碱提取物及其应用
CN105646627B (zh) 一种从蛹虫草培养液中提取纯化虫草素的方法
CN108727441A (zh) 一种红景天苷的提取方法
CN104398532B (zh) 一种强心苷化合物的用途
CN106138294B (zh) 一种翻白草总黄酮的制备方法
CN108530505A (zh) 一种黄酮苷类化合物及其制备方法和应用
CN108014176A (zh) 一种番石榴叶三萜类化合物的提纯方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20191029

Termination date: 20200425

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee