CN107001354B

CN107001354B - 组蛋白去乙酰酶抑制剂

Info

Publication number: CN107001354B
Application number: CN201580019257.4A
Authority: CN
Inventors: 阎云; 刘景平; 张俊彦; 王家仪
Original assignee: Institute Of Health; Taipei Medical University TMU
Current assignee: Institute Of Health; Taipei Medical University TMU
Priority date: 2014-04-11
Filing date: 2015-04-09
Publication date: 2021-06-22
Anticipated expiration: 2035-04-09
Also published as: EP3129373B1; US10246455B2; TWI573787B; TW201609642A; CN107001354A; JP6726658B2; EP3129373A1; EP3129373A4; JP2017510660A; US20170057956A1; WO2015157504A1

Abstract

本文阐明式(I)的稠和二环吲哚、吲哚啉、氮杂吲哚、氮杂吲哚啉化合物。本文亦揭示此等化合物的医药上可接受的盐及包含其的医药组合物。本文进一步揭示一种使用此等化合物治疗癌症(例如，胶质瘤、前列腺癌、及结肠直肠癌)的方法。

Description

组蛋白去乙酰酶抑制剂

技术领域

背景技术

组蛋白去乙酰酶(HDAC)是一类经由组蛋白乙酰化作用来调节基因表现的酶，例如，HDAC1-11。已知HDAC抑制剂会诱发p21及/或p27表现，p21及p27是两种在肿瘤细胞中诱发细胞生长抑制、分化及细胞凋亡的蛋白质。参见Nimmanapalli等人，Blood 2003，101，3236-39；及Roy等人，Molecular Cancer Therapeutics 2007，6，2696-2707。其由此作为强效抗癌剂受到大量关注。参见，例如，Lu等人，Journal of Medicinal Chemistry 2005，48，5530-35；Kulp等人，Clinical Cancer Research 2006，12，5199-5206；及Ryan等人，Journal of Clinical Oncology 2005，23，3912-22。

发明内容

本发明是基于某些吲哚、吲哚啉、氮杂吲哚及氮杂吲哚啉化合物可有效抑制HDAC的意外发现。

在一态样中，本发明关于如下显示的式(I)之化合物：

在该式中，R₁是SO₂R_a或CH₂R_a，其中R_a是C₁-C₁₀烷基、C₂-C₁₀烯基、C₂-C₁₀炔基、芳基、杂芳基、C₃-C₁₀环烷基、C₃-C₁₀环烯基、C₁-C₁₀杂环烷基、或C₁-C₁₀杂环烯基；烷基、烯基、及炔基各者视情况经卤基、羟基、硝基、氰基、胺基、C₁-C₆烷氧基、

取代；及芳基、杂芳基、环烷基、环烯基、杂环烷基或杂环烯基各者视情况经卤基、羟基、硝基、氰基、胺基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆烷基、C₂-C₆烯基、C₂-C₆炔基、芳基、杂芳基、C₃-C₁₀环烷基、C₃-C₁₀环烯基、C₁-C₁₀杂环烷基、C₁-C₁₀杂环烯基、

取代；R₂及R₃各者独立地是H、C₁-C₁₀烷基、C₂-C₁₀烯基、C₂-C₁₀炔基、C₃-C₂₀环烷基、C₃-C₂₀环烯基、C₃-C₂₀杂环烷基、C₃-C₂₀杂环烯基、芳基、或杂芳基；X是C、CH、N、或NH；A是杂芳基；及--是单或双键。

此等化合物的一子集包括彼等其中A是吡啶环或嘧啶环及X是CH、C、或N者。吡啶环及嘧啶环各者视情况经卤基、羟基、硝基、氰基、胺基、C₁-C₆烷胺基、C₂-C₁₀二烷胺基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆烷基、C₂-C₆烯基、C₂-C₆炔基、芳基、杂芳基、C₃-C₁₀环烷基、C₃-C₁₀环烯基、C₁-C₁₀杂环烷基、或C₁-C₁₀杂环烯基单、双、或三取代，其中烯基视情况经C(O)OR'、C(O)NR'R”取代，R'是H或C₁-C₆烷基及R”是H、OH、C₁-C₆烷基、或芳基。

R_a可为萘基或苯基，其各者视情况经卤基、羟基、硝基、氰基、胺基、C₁-C₆烷胺基、C₂-C₁₀二烷胺基、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₆烷基、C₂-C₆烯基、C₂-C₆炔基、芳基、杂芳基、C₃-C₁₀环烷基、C₃-C₁₀环烯基、C₁-C₁₀杂环烷基、或C₁-C₁₀杂环烯基单、双、或三取代，烯基视情况经C(O)OR”'取代，其中R”'是H或C₁-C₆烷基。

R_a亦可视情况经

取代的苯基。

通常，R₂是H或缺失及R₃是H。

在另一态样中，本发明是关于式(I)的化合物，其中R₁是SO₂R_b或CH₂R_b，R_b视情况经

取代的苯基；R₂及R₃各者独立地是H、C₁-C₁₀烷基、C₂-C₁₀烯基、C₂-C₁₀炔基、C₃-C₂₀环烷基、C₃-C₂₀环烯基、C₃-C₂₀杂环烷基、C₂-C₂₀杂环烯基、芳基、或杂芳基；X是C、CH、N、或NH；A是苯基；及--是单或双键。

先前刚描述化合物的一子集包括彼等其中X是CH、C、或N；R₂是H或缺失；及R₃是H者。

本文术语「烷基」是指含有1至20个(例如，1至10个或1至6个)碳原子的直链或分支链烃基。实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基及第三丁基。术语「伸烷基」是指二价烷基。实例包括-CH₂-、-CH₂CH₂-、-CH₂CH₂CH₂-、-CH₂(CH₃)CH₂-及-CH₂CH₂CH₂CH₂-。术语「烷氧基」是指-O-烷基。实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、及异丙氧基。

术语「烯基」是指含有2至20个(例如，2至10个及2至6个)碳原子及一或多个双键的直链或分支链烃基。实例包括-CH＝CH₂、-CH＝CHCH₃、-CH₂CH＝CH₂、及-CH₂CH＝CHCH₃。术语「炔基」是指含有2至20个(例如，2至10个及2至6个)碳原子及一或多个三键的直链或分支链烃基。

术语「环烷基」是指具有3至12个碳的饱和单环、双环、三环、或四环烃基。环烷基的实例包括但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基及环辛基。术语「环烯基」是指具有3至12个碳及一或多个双键的部分不饱和单环、双环、三环、或四环烃基。

术语「杂环烷基」是指具有一或多个杂原子(例如，O、N、P、及S)的非芳族5至8员单环、8至12员双环、或11至14员三环系统。杂环烷基的实例包括但不限于，哌嗪基、咪唑啶基、氮杂环庚烷基、吡咯啶基、二氢噻二唑基、二氧杂环己基、吗啉基、四氢吡喃基、及四氢呋喃基。术语「杂环伸烷基」是指二价杂环烷基。术语「杂环烯基」是指具有一或多个杂原子(例如，O、N、P及S)及一或多个双键的非芳族5至8员单环、8至12员双环、或11至14员三环系统。

术语「芳基」是指6碳单环、10碳双环、14碳三环芳族环系统，其中各个环可具有1至5个取代基。芳基的实例包括苯基、萘基、及蒽基。

术语「杂芳基」是指具有一或多个杂原子(例如，O、N、P及S)的芳族5至8员单环、8至12员双环、或11至14员三环系统。实例包括三唑基、恶唑基、噻二唑基、四唑基、吡唑基、吡啶基、呋喃基、咪唑基、苯并咪唑基、嘧啶基、噻吩基、喹啉基、吲哚基、噻唑基、及苯并噻唑基。

术语「卤基」是指氟、氯、溴、或碘基。术语「胺基」是指衍生自胺的基团，其未经取代或经烷基、芳基、环烷基、杂环烷基、或杂芳基单/双取代。术语「烷胺基」是指烷基-NH-。术语「二烷胺基」是指烷基-N(烷基)-。

本文提及的烷基、环烷基、杂环烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、烷氧基及芳氧基包括经取代及未经取代部分。取代基的实例包括但不限于，卤基、羟基、胺基、氰基、硝基、巯基、烷氧羰基、酰胺基、羧基、烷磺酰基、烷羰基、脲基、胺甲酰基、羰基、硫脲基、硫氰酰基、磺酰胺基、烷基、烯基、炔基、烷氧基、芳基、杂芳基、环烷基及杂环烷基，其中烷基、烯基、炔基、烷氧基、芳基、杂芳基、环烷基、及杂环烷基可进一步经取代。

上文描述的化合物若适用亦包括其盐及溶剂化物。盐可在化合物中阴离子与带正电荷基团(例如，胺基)间形成；适宜阴离子的实例包括氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、柠檬酸根、甲磺酸根、三氟乙酸根、乙酸根、苹果酸根、甲苯磺酸根、酒石酸根、延胡索酸根、谷胺酸根、尿甘酸根、乳酸根、戊二酸根、马来酸根。盐亦可在阳离子与带负电荷基团间形成；适宜阳离子的实例包括钠离子、钾离子、镁离子、钙离子、及铵阳离子诸如四甲基铵离子。盐进一步包括彼等含有四级氮原子者。溶剂化物是指在活性化合物与医药上可接受之溶剂间形成的络合物。医药上可接受的溶剂的实例包括水、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、乙酸、及醇胺。

一种含有上述化合物之一作为治疗剂及医药上可接受的载剂的医药组合物亦在本发明范围内。该医药组合物可进一步含有另一用于治疗癌症之治疗剂。本发明亦以上述化合物之一于制造用于治疗癌症之药物的用途为特征。

一种藉由投与给有需要的个体有效量的任一上述化合物来治疗癌症的方法仍在本发明范围内。该化合物可习知上每天一次地投与给有需要之个体。术语「治疗」是指出于治愈、愈合、缓解、减轻、改变、补救、改善、改良或影响该疾病、症状、或诱因的目的施用或投与该化合物给患有癌症的个体。「有效量」是指对个体产生期望影响所需要的化合物量。如熟习此项技术者所了解，有效量取决于投与途径、赋形剂用法、及与其他治疗剂疗法(诸如使用其他活性剂)共使用的可能性而改变。

可藉由本发明方法治疗的癌症包括各种器官的实体及血液肿瘤。实体肿瘤之实例是胰腺癌；膀胱癌；结肠直肠癌；乳癌，包括转移性乳癌；前列腺癌，包括雄激素依赖性及雄激素非依赖性前列腺癌；肾癌，包括转移性肾细胞癌症；肝细胞癌；肺癌，包括非小型细胞肺癌(NSCLC)、细支气管肺泡癌(BAC)、及肺腺癌；卵巢癌，包括进行性上皮细胞或原发性腹膜癌；宫颈癌；胃癌；食道癌；头颈癌，包括头及颈部鳞细胞癌；黑色素瘤；神经内分泌癌，包括转移性神经内分泌肿瘤；脑肿瘤，包括胶质瘤、间变少突胶质瘤、成人胶质母细胞红斑、及成人间变星状胶质细胞瘤；骨癌；及软组织肉瘤。血液恶性肿瘤的实例是急性骨髓白血病；慢性髓细胞性白血病(CML)，包括加速CML及CML胚细胞相；急性淋巴母细胞白血病；慢性淋巴母细胞白血病；霍奇金氏(Hodgkin)病；非霍奇金氏淋巴瘤，包括卵泡淋巴瘤及大脑皮质细胞淋巴瘤；B细胞淋巴瘤；T细胞淋巴瘤；多发性骨髓瘤；瓦尔登斯特伦氏(Waldenstrom)巨球蛋白血症；骨髓增生异常症候群，包括难治型贫血、环形铁粒幼红细胞性难治性贫血、母细胞过多性难治性贫血(RAEB)、及转化中RAEB；及骨髓增生症候群。

为实践本发明的方法，上述医药组合物可藉由吸入喷雾、经局部、经直肠、经鼻、经颊、经阴道、或经由植入储液器以经口、非经肠方式投与。本文使用的术语「非经肠」包括皮下、皮内、静脉内、肌肉内、肋内、动脉内、腔内、胸骨内、鞘内、病灶内、颅内注射或输注技术。

经口投与的组合物可呈包括胶囊、锭剂、乳液、水性悬浮液、分散液、及溶液的各种经口可接受剂量形式。在锭剂情况下，通常使用的载剂包括乳糖及玉米淀粉。亦通常添加润滑剂，诸如硬脂酸镁。对于呈胶囊形式的经口投与，可用稀释剂包括乳糖及干燥玉米淀粉。当水性乳液或悬浮液是经口投与时，可将该活性成分悬浮或溶于与乳化剂或悬浮剂组合的油相中。若需要，可添加某些甜味剂、香料、或着色剂。经口固体剂型可藉由非晶型喷雾干燥技术、热熔挤出策略、微粒化、及奈米研磨技术来制备。

一种吸入组合物或经鼻气溶胶可根据医药调配技术中熟知的技术来制备。其通常制成含于盐水中的溶液，采用苄醇或其他适宜防腐剂、吸收促进剂、氟碳、及/或其他增溶剂或分散剂。

一种具有活性化合物的组合物亦可呈用于直肠投与的栓剂的形式投与。

医药组合物中的载剂必须是在以下意义上「可接受」：其与该组合物的活性成分相容(较佳地，能使该活性成分稳定)及对于待治疗的个体没有不利影响。一或多种增溶剂可用作递送活性化合物的医药赋形剂。其他载剂的实例包括胶态二氧化硅、硬脂酸镁、纤维素、月桂基硫酸钠及D&C Yellow#10。

本发明的化合物可与一或多种治疗癌症的其他活性剂一起使用。由此，本发明亦关于一种藉由投与给有需要的个体有效量的本发明化合物及有效量的一或多种其他活性剂来治疗癌症的方法。活性剂包括但不限于，免疫调节剂，诸如干扰素α、β及γ；抗病毒剂，诸如病毒唑及金刚胺；吲哚胺2,3-二加氧酶及/或色胺酸2,3-二加氧酶抑制剂；及在HDAC相关联条件中其他目标的抑制剂。此活性剂及本发明化合物可在两个分开时间或同时但以两种剂型施用给个体。或者，其可在如上文描述用作单一剂型的组合物中组合。

本发明的一或多个实施例的细节在下文描述中阐明。本发明的其他特征、目标及优点在该描述及专利申请范围中显而易见。

具体实施方式

下文表1中显示本发明的实例化合物：

表1：实例化合物

本发明的化合物可藉由在此项技术中熟知的合成方法来制备。参见R.Larock，Comprehensive Qrganic Transformations(第二版，VCH出版商1999)；P.G.M.Wuts及T.W.Greene，Greene's Protective Groups in Organic Synthesis(第四版，John Wileyand Sons 2007)；L.Fieser及M.Fieser，Fieserand Fieser's Reagents for OrganicSynthesis(John Wiley and Sons 1994)；及L.Paquette编辑，Encyclopedia of Reagentsfor Organic Synthesis(第二版，John Wiley and Sons 2009)及其随后版本。可用于合成本发明化合物的具体途径可在Vinodkumar等人，J.Polym.Sci.A.2008，14，37-49；及Varasi等人，J.Med.Chem.2011，54，3051-64中发现。

下文反应图1描绘可根据其来合成本发明化合物1至8的途径。注意在反应图1及下文反应图中Het是指在化合物25至32各者中的杂环。

反应图1.化合物1至8的合成途径

在上文反应图中，试剂及条件如下：(a)3-溴代苯磺酰氯、KOH、硫酸氢四丁铵(TBAHS)、CH₂Cl₂、室温(RT)，产率56％至93％；(b)NaHCO₃、PPh₃、Pd(OAc)₂、丙烯酸第三丁酯、三乙胺(TEA)、二甲基甲酰胺(DMF)，80℃，产率37％至89％；(c)三氟乙酸(TFA)，RT，产率97％至54％；及(d)i.六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯啶鏻(PyBOP)，Et₃N，邻(四氢-2H-哌喃-2-基)羟胺(NH₂OTHP)、DMF，RT；ii.5％TFA、MeOH，RT，产率10％至33％。

化合物1至8的合成及其分析数据如下显示。

(E)-3-(3-(1H-吲哚-1-基磺酰基)苯基)-N-羟基丙烯酰胺(1)

可依与描述用于制备3的方式相似的方式由化合物35a以5％总产率获得标题化合物，均在下文显示。熔点(mp)＝188至191℃。¹H NMR(500MHz，CD₃OD及DMSO)：δ6.66(d，J＝15.0Hz，1H)、6.85(s，1H)、7.29(t，J＝7.0Hz，1H)、7.39(t，J＝8.0Hz，2H)、7.57至7.63(m，2H)，7.78至7.81(m，2H)、7.91(t，J＝7.5Hz，1H)、8.04(d，J＝8.0Hz，1H)、8.10(s，1H)。MS(EI)m/z：341.0(M⁺，1.2％)，344.0(100％)。C₁₇H₁₄O₄N₂S(M⁺)的HRMS(EI)：计算值342.3691；实测值342.0676。

(E)-N-羟基-3-(3-(吲哚啉-1-基磺酰基)苯基)丙烯酰胺(2)

可依与下文显示描述用于制备3的方式相似的方式由化合物35b以1.04％总产率获得标题化合物。mp＝207至209℃。¹H NMR(500MHz，CD₃OD)：δ2.65(t，J＝8.0)、3.70(td，J＝5.0、8.5，2H)、6.35(d，J＝1.65，1H)、6.75(d，J＝5.5Hz，1H)、6.85(d，J＝7.0Hz，1H)、6.97(d，J＝7.0Hz，1H)、7.29(t，J＝8.0Hz，1H)、7.36(t，J＝8.0Hz，1H)、7.40(d，J＝16.0Hz，1H)、7.50(t，J＝8.0Hz，1H)、7.57(t，J＝8.0Hz，1H)、7.69(d，J＝11.0Hz，1H)。MS(EI)m/z：343.0(M⁺，0.16％)，116(100％)。C₁₇H₁₆O₄N₂S(M⁺)的HRMA(EI)：计算值344.3849；实测值344.0834。

(E)-3-(3-(1H-吲唑-1-基磺酰基)苯基)-N-羟基丙烯酰胺(3)

将含于无水CH₂Cl₂(30mL)中的吲唑(500mg，4.23mmol)、氢氧化钾(470mg，8.46mmol)及硫酸氢四丁铵(220mg，0.63mmol)的混合物利用氮气搅拌30分钟。过滤该混合物及使用水(30mL)及CH₂Cl₂(30mL x 3)萃取滤液。收集有机层及经无水MgSO₄干燥。在经由过滤移除MgSO₄之后，在真空中浓缩该滤液以产生油状产物。藉由急骤管柱经硅胶(3:1EtOAc/正己烷；R_f＝0.28)来纯化残留物以获得1270mg(89％)呈白色固体的33c：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.32(t，J＝8.0Hz，1H)、7.36(t，J＝8.0Hz，1H)、7.59(td，J＝1.5、8.5Hz，1H)、7.68(d，J＝8.0Hz，1H)、7.71(d，J＝8.0Hz，1H)、7.91(d，J＝8.0Hz，1H)、8.13(t，J＝2.0Hz，1H)、8.19(d，J＝8.5Hz，1H)、8.22(s，1H)。

将化合物33c(1250mg，3.71mmol)、丙烯酸第三丁酯(0.60mL，4.45mmol)、三乙胺(TEA；0.75mL，6.32mmol)、三苯基膦(TPP；480mg，1.86mmol)、乙酸钯(410mg，1.86mmol)、及碳酸氢钠(310mg，3.70mmol)的混合物在DMF(2mL)中加热至80℃持续5小时。随后使用水中止此反应及使用CH₂Cl₂(3x30mL)萃取。收集有机层及经无水MgSO₄干燥。在经由过滤移除MgSO₄之后，在真空中浓缩该滤液。藉由急骤管柱经硅胶(3:1EtOAc/正己烷；R_f＝0.28)来纯化残留物以获得1180mg(81％)呈固体的34c：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ1.51(s，9H)、6.38(dd，J＝6.0、16.5Hz，1H)、7.35(t，J＝7.5Hz，1H)、7.48(d，J＝16.0Hz，1H)、7.55(d，J＝8.0Hz，2H)、7.58(td，J＝1.0、7.0Hz，1H)、7.70(d，J＝8.0Hz，1H)、7.98(d，J＝2.0Hz，2H)、8.20(s，1H)、8.22(d，J＝8.5Hz，1H)。

向化合物34c(1030mg，2.60mmol)固体及三氟乙酸(8.60mL，0.13mmol)及搅拌30分钟，接着添加水(20mL)以产生白色固体。藉由过滤收集所得固体及藉由乙醇再结晶纯化以获得450mg(53％)呈粉色固体的35c：¹H NMR(500MHz，CD₃OD及CDCl₃)δ6.07(d，J＝16.0Hz，1H)、6.97(t，J＝7.5Hz，1H)、7.11(t，J＝8.0Hz,1H)、7.19(d，J＝7.0Hz，1H)、7.22(d，J＝7.5Hz，1H)、7.36(dd，J＝8.0、13.5Hz，2H)、7.52(d，J＝8.0Hz，1H)、7.69(s，1H)、7.78(d，J＝8.5Hz，1H)、7.89(s，1H)。

将化合物35c(420mg，1.28mmol)、PyBOP(770mg，1.52mmol)、DMF(1mL)、NH₂OTHP(150mg，1.29mmol)及TEA(1mL，3.52mmol)的混合物在氮气中搅拌5小时。过滤该混合物及使用水(30mL)及CH₂Cl₂(3x 30mL)萃取滤液。收集有机层及经无水MgSO₄干燥。在经由过滤移除MgSO₄之后，在真空中浓缩滤液以产生油状产物。藉由急骤管柱经硅胶(1:2EtOAc/正己烷；R_f＝0.39)来纯化残留物以产生白色固体。随后向固体添加5％三氟乙酸(60mL)及甲醇(3mL)，随后搅拌30分钟。在真空中浓缩此反应及过滤以产生白色产物。藉由水/CH₂Cl₂清洗该混合物以获得80mg(18％)呈紫色固体的3：mp＝166至168℃；¹H NMR(500MHz，CD₃OD及DMSO)δ6.52(d，J＝16.0Hz，1H)、7.39(t，J＝7.5Hz，1H)、7.51至7.54(m，2H)、7.64(t，J＝8.0Hz，1H)、7.79(d，J＝8.0Hz，2H)、7.90(d，J＝8.0Hz，1H)、8.11(s，1H)、8.21(d，J＝8.5Hz，1H)、8.35(s，1H)；C₁₆H₁₃O₄N₃S(M-H)的HRMS(ESI)计算值343.0627，实测值342.0541。

(E)-3-(3-((7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)磺酰基)苯基)-N-羟基丙烯酰胺(4)

可依与上文描述用于制备3的方式相似的方式由化合物35d以59.88％总产率获得标题化合物：¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ6.62(d，J＝15.5Hz，1H)、6.96(d，J＝4.0Hz，1H)、7.51(d，J＝15.5Hz，1H)、7.67(t，J＝8.0Hz，1H)、7.92(d，J＝7.5Hz，1H)，8.00(d，J＝4.0Hz，1H)、8.10(d，J＝8.0Hz，1H)、8.37(s，1H)、9.00(s，1H)、9.12(s，1H)。

(E)-3-(3-(1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-N-羟基丙烯酰胺(5)

可依与描述用于制备3的方式相似的方式由化合物35e以17％总产率获得标题化合物：mp＝148至150℃。¹H NMR(500MHz，CD₃OD)：δ6.58(d，J＝16.0Hz，1H)、7.04(d，J＝4.0Hz，1H)、7.59(d，J＝15.5Hz，1H)、7.63(t，J＝8.0Hz，1H)、7.69(dd，J＝5.5、8.5Hz，1H)、7.91(d，J＝7.5Hz，1H)、8.06(d，J＝7.5Hz，1H)、8.24(s，1H)、8.37(d，J＝4Hz，1H)、8.64(d，J＝5.0Hz，1H)、8.86(d，J＝8.5Hz，1H)。

(E)-3-(3-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-N-羟基丙烯酰胺(6)

可依与描述用于制备3的方式相似的方式由化合物35f以33％总产率获得标题化合物：mp＝128至129℃；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ6.58(d，J＝17.0Hz，1H)、7.19(d，J＝3.5Hz，1H)、7.59(d，J＝15.5Hz，1H)、7.65(t，J＝8.0Hz，1H)、7.95(d，J＝7.5Hz，1H)、8.13(d，J＝8.0Hz，1H)、8.18(d，J＝6.0Hz，1H)、8.30(s，1H)、8.49(d，J＝6.5Hz，1H)、8.54(d，J＝3.5Hz，1H)、9.56(s，1H)；MS(EI)m/z：342.0(M⁺，3.57％)，118(100％)；C₁₆H₁₃O₄N₃S(M⁺)的HRMS(EI)计算值343.0627；实测值343.0629。

(E)-3-(3-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-N-羟基丙烯酰胺(7)

可依与描述用于制备3的方式相似的方式从化合物35g以20％总产率获得标题化合物：mp＝188至191℃；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ6.55(d，J＝15.5Hz，1H)、6.74(d，J＝4.0Hz，1H)、7.25(dd，J＝5.0、7.5Hz，1H)、7.54(m，1H)、7.57(d，J＝4.0Hz，1H)、7.78(d，J＝8.0Hz，1H)、7.82(d，J＝4.0Hz，1H)、7.97(dd，J＝1.5、7.5Hz，1H)、8.06(d，J＝7.5Hz，1H)、8.33(dd，J＝1.5、4.5Hz，1H)、8.36(s，1H)；MS(EI)m/z：342.0(M⁺，2.20％)，118(100％)；C₁₆H₁₃O₄N₃S(M⁺)的HRMS(EI)：计算值343.0627；实测值343.0626。

(E)-3-(3-(2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-N-羟基丙烯酰胺(8)

可依与描述用于制备3的方式相似的方式由化合物35h以10％总产率获得标题化合物：mp＝228至230℃；¹H NMR(500MHz，CD₃OD及CDCl₃)δ3.04(t，J＝8.0Hz，2H)、4.04(t，J＝8.0Hz，2H)、6.50(dd，J＝5.0、8.0Hz，1H)、7.45(d，J＝7.5Hz，1H)、7.51(d，J＝7.5Hz，1H)、7.55(d，J＝16.0Hz，1H)、7.72(d，J＝7.0Hz，1H)、7.97(d，J＝8.0Hz，1H)、8.00(d，J＝8.0Hz，1H)、8.05(d，J＝4.5Hz，1H)、8.21(s，1H)；MS(EI)m/z：347.0(M⁺，0.90)，116(100％)；C₁₆H₁₅O₄N₃S(M⁺)的HRMS(EI)：计算值345.3730；实测值345.0783。

下文反应图2显示制备本发明化合物9至13的合成途径。

在此反应图中，试剂及条件是如下：(a)4-溴代苯磺酰氯、KOH、TBAHS、CH₂Cl₂、RT，88％至93％；(b)NaHCO₃、PPh₃、Pd(OAc)₂、丙烯酸第三丁酯、NEt₃、DMF、80℃，35％至83％；(c)TEA、RT，97％至53％；及(d)i.PyBOP、Et₃N、NH₂OTHP、DMF，RT；ii.5％TFA、MeOH、RT，9％至44％。

制备化合物9至13是在下文详细描述。

反应图2.合成化合物9至13

(E)-3-(4-(1H-吲唑-1-基磺酰基)苯基)-N-羟基丙烯酰胺(9)

向含于无水CH₂Cl₂(30mL)中的吲唑(500mg，4.23mmol)、氢氧化钾(470mg，8.46mmol)、及硫酸氢四丁铵(220mg，0.63mmol)的混合物添加4-溴代苯磺酰氯(1300mg，5.10mmol)及添加之后搅拌过夜。过滤该混合物及添加水接着使用CH₂Cl₂(3x30mL)萃取。收集有机层及经无水MgSO₄干燥及在真空中浓缩以产生油状产物。藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯：正己烷＝3:1；R_f＝0.30)来纯化残留物以获得1250mg(产率88％)呈固体的36a：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ7.11(td，J＝2.5、8.5Hz，1H)、7.31(dd，J＝2.0、7.5Hz，1H)、7.64(dd，J＝9.0、16.0Hz，2H)、7.68(d，J＝9.0Hz，2H)、7.96(dd，J＝1.5、7.0Hz，2H)、8.62(s，1H)。

将36a(1270mg，3.78mmol)、丙烯酸第三丁酯(0.60mL，4.54mmol)、三乙胺(0.75mL，6.45mmol)、三苯基膦(490mg，1.90mmol)、乙酸钯(420mg，1.90mmol)、及碳酸氢钠(320mg，3.78mmol)的混合物在DMF(2mL)中加热至80℃持续5小时。随后过滤该混合物及使用水(30mL)及CH₂Cl₂(3x30mL)萃取滤液。收集有机层及经无水MgSO₄干燥。在经由过滤移除MgSO₄之后，在真空中浓缩滤液以产生油状产物，藉由急骤管柱经硅胶(1:10EtOAc/正己烷)来纯化该油状产物以获得680mg(47％)呈黄色固体的37a：¹H NMR(500MHz，CDCl₃)δ1.57(s，9H)、6.38(d，J＝16.0Hz，1H)、7.46(t，J＝7.5Hz，1H)、7.50至7.59(m，3H)、7.70(dd，J＝3.5、8.5Hz，1H)、7.98(dd，J＝9.0、17.0Hz，2H)、8.19至8.23(m，2H)。

向化合物37a(560mg，1.46mmol)固体添加三氟乙酸(4.80mL，0.07mmol)及搅拌30分钟接着添加水(20mL)以产生白色固体。藉由过滤收集所得固体及藉由甲醇再结晶来纯化以获得410mg(86％)呈白色固体的38a：¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ6.44(d，J＝16.0Hz，1H)、7.35(t，J＝8.0Hz，1H)、7.53至7.62(m，4H)、7.71(d，J＝8.0Hz，1H)、7.94(d，J＝8.0Hz，2H)、8.16(d，J＝8.5Hz，1H)、8.23(s，1H)。

将化合物38a(640mg，1.96mmol)、PyBOP(1170mg，2.31mmol)、DMF(1mL)、NH₂OTHP(230mg，1.96mmol)、及三乙胺(1mL，5.35mmol)的混合物在氮气下搅拌5小时，随后过滤，及使用水(30mL)及CH₂Cl₂(30mL x 3)萃取该滤液。收集有机层及经无水MgSO₄干燥。在经由过滤移除MgSO₄之后，在真空中浓缩该滤液以产生油状残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2；R_f＝0.40)来纯化该残留物以产生白色固体。随后向固体添加5％三氟乙酸(60mL)及甲醇(3mL)，随后搅拌30分钟。在真空中浓缩此反应混合物及过滤以产生白色产物，其经水/CH₂Cl₂清洗以获得110mg(16％)呈紫色固体的9：mp＝140至142℃；¹H NMR(500MHz，CD₃OD及DMSO)δ6.53(d，J＝16.0Hz，1H)、7.39(t，J＝7.5Hz，1H)、7.52(d，J＝16.0Hz，1H)、7.63(t，J＝8.0Hz，1H)、7.67(d，J＝8.0Hz，2H)、7.79(d，J＝8.0Hz，1H)、7.94(d，J＝8.5Hz，2H)、8.20(d，J＝9.0Hz，1H)、8.34(s，1H)；C₁₆H₁₃O₄N₃S(M⁺)的HRMS(EI)计算值343.0627，实测值343.0627。

(E)-3-(4-(1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-N-羟基丙烯酰胺(10)

可依与上文描述用于制备9的方式相似的方式由化合物38b以44％总产率获得标题化合物：mp＝118至190℃。¹H NMR(500MHz，CD₃OD)：δ6.57(d，J＝16.0Hz，1H)、7.01(d，J＝3.5Hz，1H)、7.54(d，J＝15.5Hz，1H)、7.63(dd，J＝5.5、8.5Hz，1H)、7.74(d，J＝8.5Hz，2H)、8.07(d，J＝8.5Hz，2H)、8.28(d，J＝4.0Hz，1H)、8.61(d，J＝5.0Hz，1H)、8.76(d，J＝8.5Hz，1H)。

(E)-3-(4-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-N-羟基丙烯酰胺(11)

可依与描述用于制备9的方式相似的方式由化合物38c以22％总产率获得标题化合物：mp＝167至169℃；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ6.53(d，J＝16.0Hz，1H)、7.15(d，J＝3.5Hz，1H)、7.54(d，J＝15.5Hz，1H)、7.76(d，J＝8.5Hz，2H)、8.12(d，J＝6.5Hz，1H)、8.14(d，J＝8.5Hz，2H)、8.46(t，J＝3.5Hz，1H)、8.48(s，1H)、9.51(s，1H)；C₁₆H₁₃O₄N₃S(M-H)的HRMS(ESI)计算值343.0627，实测值342.0542。

(E)-3-(4-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-N-羟基丙烯酰胺(12)

可依与描述用于制备9的方式相似的方式由化合物38d以9％总产率获得标题化合物：mp＝169至170℃；¹H NMR(500MHz，CD₃OD)δ6.54(d，J＝16.0Hz，1H)、6.74(d，J＝3.5Hz，1H)、7.25(dd，J＝5.0、9.0Hz，1H)、7.53(d，J＝16.0Hz，1H)、7.68(d，J＝8.5Hz，2H)、7.81(d，J＝4.0Hz，1H)、8.97(dd，J＝1.5、8.0Hz，1H)、8.11(d，J＝8.5Hz，2H)、8.31(dd，J＝1.0、4.5Hz，1H)；C₁₆H₁₃O₄N₃S(M⁺)的HRMS(EI)计算值343.3571，实测值343.0627。

(E)-3-(4-(2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)-N-羟基丙烯酰胺(13)

可依与描述用于制备9的方式相似的方式由化合物38e以28％总产率获得标题化合物：mp＝220至223℃：¹H NMR(500MHz，CD₃OD及DMSO)δ3.04(t，J＝8.0Hz，2H)、4.04(t，J＝8.0Hz，2H)、6.54(d，J＝16.0Hz，1H)、6.51(dd，J＝5.0、7.5Hz，1H)、7.49(d，J＝9.0Hz，1H)、7.53至7.58(m，2H)、7.77(d，J＝8.0Hz，1H)、7.98(d，J＝7.5Hz，1H)、8.04(d，J＝5.0Hz，1H)、8.23(s，1H)；C₁₆H₁₃O₄N₃S(M⁺)的HRMS(EI)计算值345.3571，实测值345.0783.

下文在反应图3中显示制备本发明的化合物14至21的合成途径。

试剂及条件如下：(a)i.4-氯代甲基苯甲酸甲酯、NaH、DMF，RT；ii.1N KOH、MeOH，回流；及(b)邻苯二胺、N-(3-二甲胺基丙基)-N'-乙基碳二酰亚胺盐酸盐(EDC)、羟基苯并三唑(HOBt)、TEA、DMF，RT。

反应图3.化合物14至21的合成

化合物14至21的制法在下文详细描述。

4-((1H-吲哚-1-基)甲基)-N(2-胺基苯基)苯甲酰胺(14)

将含于无水CH₂Cl₂(30mL)中的吲哚(500mg，4.27mmol)、氢氧化钾(480mg，8.54mmol)、及NH₂OTHF(220mg，0.643mmol)的混合物于氮气氛围下搅拌30分钟，其后添加4-(氯甲基)苯甲酸甲酯(950mg，5.12mmol)。搅拌混合物过夜及过滤。添加水至该滤液接着使用CH₂Cl₂(30mL x 3)萃取。收集有机层及经无水MgSO₄干燥及在真空中浓缩以产生油状产物。向所得残留物添加氢氧化锂(210mg，8.58mmol)及随后在含有MeOH(7.6mL)及水(7.6mL)的溶剂中加热至100℃持续2h。过滤该混合物及添加水接着使用CH₂Cl₂(30mL x 3)萃取。收集有机层及经无水MgSO₄干燥及在真空中浓缩以产生油状产物，使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1；R_f＝0.325)来纯化该油状产物以产生呈固体的40a(570mg，79％)。¹HNMR(500MHz，CD₃OD)：δ5.40(s，2H)、6.59(d，J＝3.0Hz，1H)、7.11至7.25(m，6H)、7.67(d，J＝8.0Hz，1H)、8.02(d，J＝8.5Hz，2H)。

向含于干燥DMF(2mL)中的化合物40a(570mg，2.27mmol)的混合物添加4-甲基吗啉(0.5mL，7.95mmol)，经氮气搅拌30分钟。向该反应混合物添加HOBt(460mg，3.41mmol)及EDC(650mg，3.41mmol)及邻苯二胺(270mg，2.50mmol)及搅拌5小时，其随后经过滤。向滤液添加水，接着使用CH₂Cl₂(30mL x 3)萃取。收集有机层及经无水MgSO₄干燥及在真空中浓缩以产生油状产物，使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1；R_f＝0.22)来纯化及使用乙酸乙酯/丙酮再结晶该油状产物以产生呈固体的14(240mg，31％)。mp＝207至210℃。¹H NMR(500MHz，CD₃OD)：δ5.48(s，2H)、6.51(d，J＝3.0Hz，1H)、6.73(t，J＝8.0Hz，1H)、6.86(dd，J＝1.0、8.0Hz，1H)、6.99至7.09(m，3H)、7.14(d，J＝8.0Hz，1H)、7.22(d，J＝8.5Hz，2H)、7.26(d，J＝8.0Hz，1H)、7.29(d，J＝3.5Hz，1H)、7.55(d，J＝7.5Hz，1H)、7.87(d，J＝8.5Hz，2H)。MS(EI)m/z：341.0(M⁺，39.63％)，57(100％)。C₂₁H₁₈ON₄(M⁺)的HRMS(EI)：计算值341.4058；实测值341.1529。

N-(2-胺基苯基)-4-(吲哚啉-1-基甲基)苯甲酰胺(15)

可依与描述用于制备14的方式相似的方式由化合物40b以31％总产率获得标题化合物：¹H NMR(500MHz，CD₃OD)：δ2.99(t，J＝8.5Hz，2H)、3.37(t，J＝8.5Hz，2H)、4.38(s，2H)、6.57(d，J＝8.0Hz，1H)、6.66(t，J＝7.5Hz，1H)、6.76(t，J＝7.5Hz，1H)、6.90(d，J＝7.5Hz，1H)、7.03(t，J＝7.5Hz，1H)、7.07至7.10(m，2H)、7.23(d，J＝7.0Hz，1H)、7.56(d，J＝8.5Hz，2H)、8.00(d，J＝8.0Hz，2H)。MS(EI)m/z：343.0(M⁺，100％)。C₂₂H₂₁ON₃(M⁺)的HRMS(EI)：计算值343.4216；实测值343.1683。

4-((1H-吲唑-1-基)甲基)-N-(2-胺基苯基)苯甲酰胺(16)

可依与描述用于制备14的方式相似的方式由化合物40c以30％总产率获得标题化合物：mp＝185至188℃。¹H NMR(500MHz，CDCl₃及CD₃OD)：δ5.46(s，2H)、6.58(t，J＝8.0Hz，1H)、6.64(d，J＝8.0Hz，1H)、6.86(t，J＝8.0Hz，1H)、6.94至6.98(m，2H)、7.04(d，J＝8.0Hz，2H)、7.17(d，J＝5.5Hz，2H)、7.55(d，J＝8.0Hz，1H)、7.67(d，J＝8.0Hz，2H)、7.84(s，1H)。MS(EI)m/z：342.0(M⁺，32.79％)，235(100％)。MS(EI)m/z：342.0(M⁺，32.79％)，235(100％)。C₂₁H₁₈ON₄(M⁺)的HRMS(EI)：计算值342.3938；实测值342.1478。

4-((1H-吡咯并[3,2-b]吡啶-1-基)甲基)-N-(2-胺基苯基)-苯甲酰胺(17)

可依与描述用于制备14的方式相似的方式由化合物45d以23％总产率获得标题化合物：mp＝116至118℃。¹H NMR(500MHz，CDCl₃及CD₃OD)：δ5.26(s，2H)、6.53(d，J＝3.5Hz，1H)、6.62(t，J＝8.0Hz，1H)、6.67(d，J＝8.0Hz，1H)、6.89(t，J＝8.0Hz，1H)、6.53(dd，J＝5.0、8.5Hz，1H)、7.01(d，J＝7.0HZ，1H)、7.02(d，J＝8.0Hz，2H)、7.31(d，J＝3.5Hz，1H)、7.44(d，J＝8.5Hz，1H)、7.72(d，J＝8.0Hz，2H)、8.15(d，J＝4.5Hz，1H)。MS(EI)m/z：342.0(M⁺，89.71％)，208(100％)。C₂₁H₁₈ON₄(M⁺)的HRMS(EI)：计算值342.3938；实测值342.1483。

4-((1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-1-基)甲基)-N-(2-胺基苯基)苯甲酰胺(18)

可依与描述用于制备14的方式相似的方式由化合物40e以32％总产率获得标题化合物：mp＝165至167℃。¹H NMR(500MHz，CD₃OD)：δ5.59(s，2H)、6.76(t，J＝7.5Hz，1H)、6.81(d，J＝3.5Hz，1H)、6.89(d，J＝8.0Hz，1H)、7.07(t，7.0Hz，1H)、7.16(d，J＝7.5Hz，1H)、7.31(d，J＝8.0Hz，2H)、7.51(d，J＝6.0Hz，1H)、7.55(d，J＝3.0Hz，1H)、7.93(d，J＝8.0Hz，2H)、8.17(d，J＝6.0Hz，1H)、8.86(s，1H)。MS(EI)m/z：342.0(M⁺，21.0％)，207(100％)。C₂₁H₁₈ON₄(M⁺)的HRMS(EI)：计算值342.3938；实测值342.1479。

4-((1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-基)甲基)-N-(2-胺基苯基)-苯甲酰胺(19)

可依与描述用于制备14的方式相似的方式由化合物40f以27％总产率获得标题化合物：mp＝154至155℃。¹H NMR(500MHz，CD₃OD)：δ5.64(s，2H)、6.65(d，J＝3.0Hz，1H)、6.74(t，J＝7.5Hz，1H)、6.87(d，J＝8.5Hz，1H)、7.05(t，J＝8.0Hz，1H)、7.15(d，J＝8.0Hz，1H)、7.31(d，J＝8.0Hz，2H)、7.63(d，J＝5.5Hz，1H)、7.67(d，J＝3.0Hz，1H)、7.92(d，J＝8.0Hz，2H)、8.08(d，J＝4.0Hz，1H)、8.66(s，1H)。MS(EI)m/z：342.0(M⁺，21.11％)，207(100％)。C₂₁H₁₈ON₄(M⁺)的HRMS(EI)：计算值342.3938；实测值342.1480。

4-((1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)甲基)-N-(2-胺基苯基)苯甲酰胺(20)

可依与描述用于制备14的方式相似的方式由化合物40g以37％总产率获得标题化合物：mp＝158至159℃。¹H NMR(500MHz，CDCl₃及CD₃OD)：δ5.29(s，2H)、6.28(d，J＝3.5Hz，1H)、6.51(t，J＝7.5Hz，1H)、6.58(d，J＝3.0Hz，1H)、6.78(t，J＝6.5Hz，1H)、6.85(dd，J＝5.0、8.0Hz，1H)、6.91(d，J＝8.0Hz，1H)、6.98(d，J＝8.0Hz，2H)、7.00(d，J＝3.5Hz，1H)、7.61(d，J＝8.0Hz，2H)、7.72(dd，1.5、8.0Hz，1H)、7.97(d，J＝3.5Hz，1H)。MS(EI)m/z：342.0(M⁺，72.6％)，147(100％)。

N-(2-胺基苯基)-4-((2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基)甲基)苯甲酰胺(21)

可依与描述用于制备14的方式相似的方式由化合物40h以49％总产率获得标题化合物：mp＝105至107℃。¹H NMR(500MHz，CD₃OD及DMSO)：δ2.99(t，J＝8.5Hz，2H)、3.42(t，J＝8.5Hz，2H)、4.17(s，2H)、4.63(s，2H)、6.47(dd，J＝5.5、6.5Hz，1H)、6.77(dd，J＝5.0，6.5Hz，1H)、6.82(d，J＝8.0Hz，1H)、7.05(t，J＝7.5Hz，1H)、7.22(d，J＝7.0Hz，1H)、7.31(d，J＝7.5Hz，1H)、7.43(d，J＝8.0Hz，2H)、7.86(d，J＝5.0Hz，1H)、7.97(d，J＝8.0Hz，2H)、9.21(s，1H)。MS(EI)m/z：344.0(M⁺,51.03％)，237(100％)。C₂₁H₂₀ON₄(M⁺)的HRMS(EI)：计算值344.4097；实测值344.1636。

下文在反应图4中显示制备本发明的化合物22至24的合成途径。

反应图4.合成化合物22至24

试剂及条件如下：(a)i.3-氯代磺酰基苯甲酸甲酯、NaH、DMF，RT；ii.1N KOH、MeOH，回流；(b)邻苯二胺、EDC、HOBt、TEA、DMF，RT；及(c)i.邻苯羟胺、EDC、HOBt、TEA、DMF，RT；ii.Pd/C、H₂、MeOH，RT。

化合物22至24的制法在下文详细描述。

N-(2-胺基苯基)-4-(吲哚啉-1-基磺酰基)苯甲酰胺(22)

向3-(氯代磺酰基)苯甲酸(220mg，1.01mmol)、水(30mL)及吲哚啉(120mg，1.01mmol)的混合物添加NaHCO₃以将混合物pH调整至8。在搅拌2小时后，在该混合物中添加HCl直至pH＝3，随后在真空中浓缩，及过滤以产生白色产物，藉由在乙醇中再结晶来纯化该白色产物以产生呈白色固体的41(100mg，33％)。¹H NMR(500MHz，CD₃OD)：δ2.92(t，J＝8.0Hz，2H)、3.98(t，J＝8.0Hz，2H)、7.00(t，J＝7.4Hz，1H)、7.09(d，J＝7.4Hz，1H)、7.23(t，J＝7.8Hz，1H)、7.57(t，J＝7.8Hz，1H)、7.65(t，J＝8.1Hz，1H)、8.01(d，J＝7.9Hz，1H)、8.27(d，J＝7.8Hz，1H)、8.54(s，1H)。

将化合物41(100mg，0.33mmol)添加至含于干燥DMF(1mL)中的4-甲基吗啉(0.2mL，1.38mmol)溶液，将其在氮气氛围下搅拌30分钟。在所得反应混合物中添加HOBt(80mg，0.59mmol)、EDC(110mg，0.59mmol)、及邻苯二胺(50mg，0.43mmol)及搅拌5小时，其后过滤。将水添加至滤液，接着使用CH₂Cl₂(30mL x 3)萃取。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生油状产物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2；R_f＝0.19)来纯化该油状产物以产生呈白色固体的22(100mg，77％)。mp＝192至193℃。¹H NMR(500MHz，CDCl₃及CD₃OD)：δ2.74(t，J＝8.4Hz，2H)、3.81(t，J＝8.4Hz，2H)、6.65(t，J＝7.5Hz，1H)、6.70(d，J＝8.0Hz，1H)、6.82(t，J＝8.0Hz，1H)、6.93(d，J＝7.4Hz，1H)、6.94(d，J＝7.5Hz，1H)、7.02(d，J＝7.5Hz，1H)、7.03(d，J＝7.4Hz，1H)、7.41(t，J＝8.0Hz，1H)、7.44(d，J＝8.0Hz，1H)、7.74(d，J＝7.5Hz，1H)、8.00(d，J＝8.0Hz，1H)、8.24(s，1H)。MS(EI)m/z：393.0(M⁺，68.13％)，116(100％)。C₂₁H₁₉O₃N₃S(M⁺)的HRMS(EI)：计算值393.4589；实测值393.1143。

N-羟基-4-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基甲基-苯甲酰胺(23)

将40g(0.51g，4.2mmol)、EDC(1.82g，11.7mmol)、HOBt(1.68g、12.4mmol)、NMM(1.2mL)、邻苯羟胺(0.67g，4.2mmol)、及DMF(10mL)的混合物在室温下搅拌1小时。向该混合物添加水(30mL)，及随后使用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取。收集有机层，干燥，及浓缩以获得油状残留物。将所得残留物添加至Pd/C及MeOH(20mL)，在氢气下于室温下搅拌其1小时，及随后过滤。浓缩该滤液及使用管柱层析法纯化以产生白色固体(0.44g，39％)。¹H NMR(500MHz，CD₃OD)：δ5.55(s，2H)、6.55(d，J＝3.5Hz，1H)、7.11至7.14(m，1H)、7.21(d，J＝8.0Hz，2H)、7.40(d，J＝3.5Hz，1H)、7.65(d，J＝8.0Hz，2H)、8.01(dd，J＝1.0、8.0Hz，1H)、8.21(dd，J＝1.0、4.5Hz，1H)。

4-(2,3-二氢-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基甲基)-N-羟基-苯甲酰胺(24)

可以用于制备23描述的方式相似的方式由化合物40h以36％总产率获得标题化合物：¹H NMR(500MHz，CD₃OD)：δ2.99(t，J＝8.5Hz，2H)、3.43(t，J＝8.5Hz，2H)、4.58(s，2H)、6.50(t，J＝6.5Hz，1H)、7.29(t，J＝7.0Hz，1H)、7.39(d，J＝8.0Hz，2H)、7.70至7.73(m，3H)。

下文反应图5中显示制备本发明的化合物2a至2p、3a至3p、4a至4p、及5a至5p的合成途径。

反应图5.合成化合物2a至2p、3a至3p、4a至4p及5a至5p

试剂及条件：

(a)Br₂、吡啶、CH₂Cl₂，0℃

(b)经取代的苯磺酰氯、吡啶，90℃

(c)Pd(OAc)₂、TPP、TEA、NaHCO₃、丙烯酸甲酯、DMF，120℃

(d)1M LiOH(水溶液)、LiOH，40℃

(e)EDC·HCl、HOBt、NMM、NH₂OTHP、DMF，RT，随后10％TFA(水溶液)，MeOH，RT

本发明的化合物6a、7a、8a、9a及10a可经由在下文反应图6、7、及8中显示的合成途径来制备。

反应图6

试剂及条件：

(a)EDC·HCl、HOBt、NMM、邻苯二胺、DMF，RT

反应图7

试剂及条件：

(a)10％Pd/C、MeOH、H₂，RT

反应图8

试剂及条件：

(a)CuCN、DMF，150℃

(b)10％KOH(水溶液)、MeOH，回流

(c)EDC·HCl、HOBt、NMM、NH₂OTHP、DMF，RT，随后10％TFA(水溶液)，RT

本发明的化合物11a至11i、12a至12i、13a至13i、及14a至14i可使用在下文反应图9中显示的合成途径来制备。

反应图9

试剂及条件：

(a)NaH、经取代的苯磺酰氯、DMF，RT

(b)Pd(OAc)₂、TPP、TEA、NaHCO₃、丙烯酸第三丁酯、DMF，120℃

(c)TFA，RT

(d)EDC·HCl、HOBt、NMM、NH₂OTHP、DMF，RT，随后10％TFA(水溶液)，MeOH，RT

下文详细提供本发明的化合物1a、2a至2p、3a至3p、4a至4p、5a至5p、6a、7a、8a、9a、10a、11a至11i、12a至12i、13a至13i、及14a至14i的制法。

5-溴-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(1a)

在7-氮杂吲哚啉(4g，33.29mmol)、吡啶(4mL)、及DCM(40mL)的混合物中使用加料漏斗，于冰浴下在氮气中添加含于DCM(24mL)中的Br₂(1.72mL，33.29mmol)及搅拌2小时。随后使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生深棕色产物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.63)来纯化该深棕色产物以产生呈黄色固体的1(4.88g，73.65％)。¹H NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.06(t，J＝8.5Hz，2H)、3.64(t，J＝8.5Hz，2H)、7.31(s，1H)、7.85(s，1H)。

5-溴-1-(苯基磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2a)

使1a(0.35g，1.76mmol)、苯磺酰氯(0.34mL，2.64mmol)及吡啶(3mL)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.73)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2a(0.47g，78.73％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.04(t，J＝8.5Hz，2H)、4.08(t，J＝8.5Hz，2H)、7.46(s，1H)、7.49(t，J＝8.0Hz，2H)、7.58(t，J＝7.5Hz，1H)、8.08(t，J＝8.0Hz，2H)、8.18(s，1H)。

(E)-3-(1-(苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3a)

将2a(0.47g，1.39mmol)、乙酸钯(0.03g，0.14mmol)、三苯基膦(0.07g，0.28mmol)、三乙胺(0.19mL，1.39mmol)、碳酸氢钠(0.23g，2.78mmol)及DMF(3mL)的混合物搅拌10分钟，及，在于120℃添加丙烯酸甲酯(0.15mL，1.67mmol)之后，再次搅拌过夜。随后使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.38)来纯化该混合物以产生呈黄色固体的3a(0.38g，79.38％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、3.80(s，3H)、4.12(t，J＝8.5Hz，2H)、6.30(d，J＝16.0Hz，1H)、7.50(t，J＝8.0Hz，2H)、7.56(d，J＝16.0Hz，1H)、7.57至7.60(m，2H)、8.12(t，J＝8.0Hz，2H)、8.25(s，1H)。

(E)-3-(1-(苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4a)

将3a(0.38g，1.11mmol)、二恶烷(5mL)、及1M LiOH水溶液(2.22mL，2.22mmol)的混合物于40℃搅拌过夜，其后移除该溶剂。持续添加水及3N HCl水溶液至所得残留物，接着过滤。浓缩该滤液以产生呈白色固体的4a(0.36g，98.17％)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.08(t，J＝8.5Hz，2H)、4.08(t，J＝8.5Hz，2H)、6.44(d，J＝16.0Hz，1H)、7.50(d，J＝16.0Hz，1H)、7.58(t，J＝7.5Hz，2H)、7.68(t，J＝7.5Hz，1H)、7.94(s，1H)、8.01(d，J＝8.5Hz，2H)、8.26(s，1H)。

(E)-N-羟基-3-(1-(苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(5a)

将4a(0.30g，0.91mmol)、EDC(0.26g，1.37mmol)、HOBt(0.15g，1.09mmol)、N-甲基吗啉(NMM；0.24mL，2.18mmol)及DMF(2mL)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.13g，1.09mmol)之后，及再次搅拌过夜。移除溶剂产生残留物。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.18)来纯化该残留物以获得油状产物。将MeOH(5mL)及10％TFA溶液(5mL)添加至该油状产物，接着于室温搅拌过夜。随后添加H₂O以沉淀白色产物，藉由过滤收集该白色产物以产生5a(0.28g，89.09％)。m.p.198.1至199.0。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.08(t，J＝8.5Hz，2H)、4.06(t，J＝8.5Hz，2H)、6.35(d，J＝16.0Hz，1H)、7.36(d，J＝16.0Hz，1H)、7.58(t，J＝7.5Hz，2H)、7.67(t，J＝7.5Hz，1H)、7.74(s，1H)、8.00(d，J＝7.5Hz，2H)、8.19(s，1H)。

5-溴-1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2b)

使1a(0.99g，4.97mmol)、4-甲氧基苯磺酰氯(1.54g，7.4mmol)及吡啶(4mL)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30mL x3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.60)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2b(0.96g，52.31％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.02(t，J＝8.5Hz，2H)、3.84(s，3H)、4.05(t，J＝8.5Hz，2H)、6.94(d，J＝9.5Hz，2H)、7.45(s，1H)、8.01(d，J＝8.0Hz，2H)、8.18(s，1H)。

(E)-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(3b)

将2b(0.15g，0.41mmol)、乙酸钯(0.01g，0.04mmol)、三苯基膦(0.03g，0.08mmol)、三乙胺(0.06mL，0.41mmol)、碳酸氢钠(0.07g，0.82mmol)及DMF(1.5mL)的混合物搅拌10分钟，及，在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.07mL，0.49mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，R_f＝0.25)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的3b(0.10g，58.56％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.52(s，9H)、3.05(t，J＝8.5Hz，2H)、3.84(s，3H)、4.08(t，J＝8.5Hz，2H)、6.23(d，J＝15.5Hz，1H)、6.94(t，J＝9.0Hz，2H)、7.46(d，J＝16.0Hz，1H)、7.51(s，1H)、8.05(d，J＝9.0Hz，2H)、8.22(s，1H)。

(E)-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4b)

向3b(1.26g，3.03mmol)的混合物中添加三氟乙酸(10.1mL)。随后于室温搅拌该混合物1小时。接着，将水添加至所得反应混合物中以沉淀浅黄色产物4b，藉由过滤收集该产物(0.81g，74.18％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、3.83(s，3H)、4.07(t，J＝8.5Hz，2H)、6.42(d，J＝16.0Hz，1H)、7.05(d，J＝9.0Hz，2H)、7.58(d，J＝16.0Hz，1H)、7.86(s，1H)、7.97(d，J＝9.0Hz，2H)、8.16(s，1H)。

(E)-N-羟基-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(5b)

将4b(0.80g，2.22mmol)、EDC(0.64g，3.33mmol)、HOBt(0.36g，2.66mmol)、NMM(0.59mL，5.33mmol)及DMF(2mL)的混合物搅拌10分钟，及，在添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.31g，2.66mmol)之后，于室温再次搅拌过夜。移除溶剂获得残留物。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.18)来纯化该残留物以获得油状产物。添加MeOH(3.5mL)及10％TFA(水溶液)(3.5mL)之后，于室温搅拌其16小时。添加水来沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生5b(0.45g，88.79％)。m.p.201.6至202.6。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.06(t，J＝8.5Hz，2H)、3.80(s，3H)、4.01(t，J＝8.5Hz，2H)、6.34(d，J＝16.0Hz，1H)、7.08(d，J＝9.0Hz，2H)、7.38(d，J＝16.0Hz，1H)、7.72(s，1H)、7.93(t，J＝9.0Hz，2H)、8.19(s，1H)、8.99(br，1H)、10.70(s，1H)。

5-溴-1-(3-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2c)

使1a(0.35g，1.76mmol)、3-甲氧基苯磺酰氯(0.37mL、2.64mmol)及吡啶(3mL)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30mL x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.73)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2c(0.56g，86.17％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.04(t，J＝8.5Hz，2H)、3.84(s，3H)、4.07(t，J＝8.5Hz，2H)、7.11(dd，J＝2.5、9.0Hz，1H)、7.38(t，J＝8.0Hz，1H)、7.46(s，1H)、7.62(dd，J＝1.5、8.0Hz，1H)、7.65(s，1H)、8.19(s，1H)。

(E)-3-(1-(3-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(3c)

将2c(0.56g，1.52mmol)、乙酸钯(0.03g，0.15mmol)、三苯基膦(0.08g，0.30mmol)、三乙胺(0.21ml，1.52mmol)、碳酸氢钠(0.26g，3.04mmol)及DMF(2.5ml)的混合物搅拌10分钟。随后于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.27ml，1.82mmol)。在搅拌过夜之后移除该溶剂以获得残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.75)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的3c(0.61g，96.36％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.52(s，9H)、3.06(t，J＝8.5Hz，2H)、3.83(s，3H)、4.09(t，J＝8.5Hz，2H)、6.23(d，J＝16.0Hz，1H)、7.10(d，J＝8.0Hz，1H)、7.38(t，J＝8.0Hz，1H)、7.46(d，J＝16.0Hz，1H)、7.53(s，1H)、7.64(d，J＝8.0Hz，1H)、7.69(s，1H)、8.24(s，1H)。

(E)-3-(1-(3-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4c)

将3c(0.62g，1.49mmol)及三氟乙酸(5.0ml)的混合物于室温搅拌1小时。随后添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生呈黄色固体的4c(0.52g，96.84％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、3.82(s，3H)、4.08(t，J＝8.5Hz，2H)、6.42(d，J＝16.0Hz，1H)、7.18(dd，J＝2.0、8.5Hz，1H)、7.44(t，J＝8.5Hz，2H)、7.57至7.61(m，3H)、7.83(s，1H)、8.19(s，1H)。

(E)-N-羟基-3-(1-(3-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(5c)

将4c(0.40g，1.11mmol)、EDC(0.32g，1.67mmol)、HOBt(0.18g，1.33mmol)、NMM(0.29ml，2.66mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.16g，1.34mmol)之后，再次于室温搅拌过夜。藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.33)来纯化该残留物。由此获得的油状产物随后溶于MeOH(3ml)及10％TFA(水溶液)(3ml)，及于室温搅拌过夜。向该反应混合物添加H₂O以沉淀白色固体，藉由过滤收集该固体以产生5c(0.17g，40.80％)。m.p.219.1至220.4。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.07(t，J＝8.5Hz，2H)、3.79(s，3H)、4.03(t，J＝8.5Hz，2H)、6.35(d，J＝16.0Hz，1H)、7.22至7.24(m，1H)、7.37(d，J＝16.0Hz，1H)、7.47至7.56(m，3H)、7.74(s，1H)、8.23(s，1H)。

5-溴-1-(3,4-二甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2d)

使1a(0.35g，1.76mmol)、3,4-二甲氧基苯磺酰氯(0.62g，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.50)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2d(0.59g，83.96％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.03(t，J＝8.5Hz，2H)、3.91(s，6H)、4.04(t，J＝8.5Hz，2H)、6.90(d，J＝8.5Hz，1H)、7.46(s，1H)、7.64至7.66(m，2H)、8.19(s，1H)。

(E)-3-(1-(3,4-二甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(3d)

将2d(0.59g，1.48mmol)、乙酸钯(0.03g，0.15mmol)、三苯基膦(0.08g，0.30mmol)、三乙胺(0.21ml，1.48mmol)、碳酸氢钠(0.25g，2.96mmol)及DMF(2.5ml)的混合物搅拌10分钟，及在添加丙烯酸第三丁酯(0.26ml，1.78mmol)之后，于120℃再次搅拌过夜。藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.43)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的3d(0.46g，69.61％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.51(s，9H)、3.05(t，J＝8.5Hz，2H)、3.90(s，6H)、4.06(t，J＝8.5Hz，2H)、6.23(d，J＝16.0Hz，1H)、6.90(d，J＝8.5Hz，1H)、7.46(d，J＝16.0Hz，1H)、7.52(s，1H)、7.66至7.69(m，2H)、8.23(s，1H)。

(E)-3-(1-(3,4-二甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4d)

将3d(0.46g，1.03mmol)及三氟乙酸(3.05ml)的混合物于室温搅拌1小时。随后将水添加至其中以沉淀白色固体，藉由过滤收集该固体以产生4d(0.40g，99.47％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ3.07(t，J＝8.0Hz，2H)、3.83(s，3H)、3.86(s，3H)、4.04(t，J＝8.0Hz，2H)、6.42(d，J＝16.0Hz，1H)、7.06(d，J＝8.5Hz，1H)、7.57至7.62(m，3H)、7.82(s，1H)、8.19(s，1H)。

(E)-3-(1-(3,4-二甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(5d)

将4d(0.40g，1.02mmol)、EDC(0.29g，1.53mmol)、HOBt(0.16g，1.22mmol)、NMM(0.27ml，2.45mmol)及DMF(2ml)混合物搅拌10分钟，及在添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.14g，1.22mmol)之后，再次于室温搅拌过夜。藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.23)来纯化该残留物。由此获得的油状产物随后溶于MeOH(5ml)及10％TFA(水溶液)(5ml)及随后于室温搅拌过夜。将水添加至该反应混合物以沉淀黄色固体，收集该固体以产生5d(0.31g，74.96％)。m.p.215.2至216.2。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.04(t，J＝8.0Hz，2H)、3.78(s，3H)、3.79(s，3H)、3.98(t，J＝8.0Hz，2H)、6.35(d，J＝15.5Hz，1H)、7.11(d，J＝8.5Hz，1H)、7.37(d，J＝16.0Hz，1H)、7.51(s，1H)、7.56(d，J＝8.0Hz，1H)、7.73(s，1H)、8.23(s，1H)。

5-溴-1-(4-氟苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2e)

使1a(0.35g，1.76mmol)、4-氟苯磺酰氯(0.51g，2.64mmol)、及吡啶(3ml)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.80)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2e(0.55g，87.49％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.06(t，J＝8.0Hz，2H)、4.07(t，J＝8.0Hz，2H)、7.15至7.18(m，2H)、7.47(s，1H)、8.10至8.13(m，2H)、8.17(s，1H)。

(E)-3-(1-(4-氟苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3e)

将2e(0.38g，1.06mmol)、乙酸钯(0.02g，0.11mmol)、三苯基膦(0.06g，0.21mmol)、三乙胺(0.15ml、1.06mmol)、碳酸氢钠(0.18g，2.12mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸甲酯(0.11ml，1.27mmol)之后，及再次搅拌过夜。藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.60)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的3e(0.31g，80.70％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.07(t，J＝8.5Hz，2H)、3.80(s，3H)、4.11(t，J＝8.5Hz，2H)、6.31(d，J＝16.0Hz，1H)、7.15至7.19(m，2H)、7.55(s，1H)、7.58(d，J＝16.0Hz，1H)、8.14至8.17(m，2H)、8.23(s，1H)。

(E)-3-(1-(4-氟苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4e)

将4e(0.31g，0.86mmol)、二恶烷(5ml)、及1M LiOH(水溶液)(1.72ml，1.72mmol)的混合物于40℃搅拌过夜。在移除该溶剂之后，所得残留物溶于水中。添加3N HCl(水溶液)以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生5e(0.20g，66.76％)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.08(t，J＝8.5Hz，2H)、4.08(t，J＝8.5Hz，2H)、6.45(d，J＝16.0Hz，1H)、7.41至7.45(m，2H)、7.51(d，J＝16.0Hz，1H)、7.95(s，1H)、8.07至8.10(m，2H)、8.26(s，1H)。

(E)-3-(1-(4-氟苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-N-羟基丙烯酰胺(5e)

将4e(0.40g，1.15mmol)、EDC(0.33g，1.73mmol)、HOBt(0.19g，1.38mmol)、NMM(0.30ml，2.76mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.16g，1.38mmol)之后，再次于室温搅拌过夜。藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.25)来纯化由溶剂移除所得残留物。由此获得的油状产物随后溶于MeOH(5ml)及10％TFA(水溶液)(5ml)中，及于室温搅拌过夜。添加水以沉淀浅黄色固体，藉由过滤收集该固体以产生5e(0.22g，52.65％)。m.p.209.7至210.9。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、4.09(t，J＝8.5Hz，2H)、6.38(d，J＝16.0Hz，1H)、7.26至7.30(m，2H)、7.47(d，J＝16.0Hz，1H)、7.73(s，1H)、8.10至8.13(m，2H)、8.16(s，1H)。

5-溴-1-(3-氟苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2f)

使1a(0.35g，1.76mmol)、3-氟苯磺酰氯(0.35ml，2.64mmol)、及吡啶(3ml)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:4，R_f＝0.25)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2f(0.79g，62.83％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.087(t，J＝8.5Hz，2H)、4.09(t，J＝8.5Hz，2H)、7.27至7.30(m，1H)、7.46至7.50(m，2H)、7.82至7.84(m，1H)、7.87至7.89(m，1H)、8.19(s，1H)。

(E)-3-(1-(3-氟苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3f)

将2f(0.15g，0.42mmol)、Pd₂(dba)₃(0.04g，0.04mmol)、[(t-Bu)₃PH]BF₄(0.02g，0.08mmol)、三乙胺(0.06ml，0.42mmol)、碳酸氢钠(0.07g、0.84mmol)及DMF(1.5ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸甲酯(0.04ml，0.50mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，R_f＝0.25)纯化以产生呈黄色固体的3f(0.12g，78.84％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.10(t，J＝8.5Hz，2H)、3.79(s，3H)、4.11(t，J＝8.5Hz，2H)、6.31(d，J＝16.0Hz，1H)、7.28至7.30(m，1H)、7.46至7.50(m，1H)、7.58(d，J＝16.5Hz，2H)、7.85至7.87(m，1H)、7.91(d，J＝8.0Hz，1H)、8.25(s，1H)。

(E)-3-(1-(3-氟苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4f)

将3f(0.34g，0.94mmol)、二恶烷(10ml)、及1M LiOH(水溶液)(1.88ml，1.88mmol)的混合物于40℃搅拌过夜。在移除溶剂之后，所得残留物溶于水中。添加3N HCl(水溶液)以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生4f(0.25g，76.35％)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、4.11(t，J＝8.5Hz，2H)、6.46(d，J＝16.0Hz，1H)、7.50(d，J＝16.0Hz，1H)、7.54至7.58(m，1H)、7.63至7.67(m，1H)、7.82(d，J＝8.5Hz，1H)、7.86(d，J＝8.0Hz，1H)、7.97(s，1H)、8.28(s，1H)。

(E)-3-(1-(3-氟苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-N-羟基丙烯酰胺(5f)

将4f(0.25g，0.72mmol)、EDC(0.21g，1.08mmol)、HOBt(0.12g，0.86mmol)、NMM(0.19ml，1.73mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.10g，0.86mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.38)纯化。由此获得的油状产物随后溶于MeOH(3ml)及10％TFA(水溶液)(3ml)中，于室温搅拌过夜，添加水以沉淀白色固体，藉由过滤收集该固体以产生5f(0.15g，57.34％)。m.p.207.1至208.0。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.10(t，J＝8.5Hz，2H)、4.10(t，J＝8.5Hz，2H)、6.36(d，J＝16.0Hz，1H)、7.36(d，J＝16.0Hz，1H)、7.56(td，J＝2.5、8.5Hz，1H)、7.63至7.68(m，1H)、7.77(s，1H)、7.82(d，J＝8.5Hz，1H)、7.86(d，J＝8.0Hz，1H)、8.22(s，1H)、10.73(br，1H)。

5-溴-1-(4-氯苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2g)

使1a(0.35g，1.76mmol)、4-氯苯磺酰氯(0.56g，2.64mmol)、及吡啶(3ml)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.78)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2g(0.55g，83.63％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.06(t，J＝8.5Hz，2H)、4.08(t，J＝8.5Hz，2H)、7.46至7.47(m，3H)、8.03(d，J＝9.0Hz，2H)、8.17(s，1H)。

(E)-3-(1-(4-氯苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3g)

将2g(0.40g，1.07mmol)、乙酸钯(0.02g、0.11mmol)、三苯基膦(0.06g、0.21mmol)、三乙胺(0.15ml、1.07mmol)、碳酸氢钠(0.18g、2.14mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸甲酯(0.11ml，1.28mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:3，R_f＝0.28)纯化以产生呈黄色固体的3g(0.37g，91.28％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.10(t，J＝8.5Hz，2H)、3.80(s，3H)、4.11(t，J＝8.5Hz，2H)、6.31(d，J＝16.0Hz，1H)、7.47(d，J＝8.5Hz，1H)、7.56(s，1H)、7.58(d，J＝16.0Hz，1H)、8.07(d，J＝8.5Hz，2H)、8.23(s，1H)。

(E)-3-(1-(4-氯苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4g)

将3g(0.37g，0.98mmol)、二恶烷(5ml)及1M LiOH(水溶液)(1.96ml，1.96mmol)的混合物于40℃搅拌过夜。在移除该溶剂之后，所得残留物溶于水中。添加3N HCl(水溶液)以沉淀白色固体，藉由过滤收集该固体以产生4g(0.18g，50.35％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ3.11(t，J＝8.5Hz，2H)、4.11(t，J＝8.5Hz，2H)、6.42(d，J＝16.0Hz，1H)、7.56至7.60(m，3H)、7.84(s，1H)、8.03(d，J＝8.5Hz，2H)、8.17(s，1H)。

(E)-3-(1-(4-氯苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-N-羟基丙烯酰胺(5g)

将4g(0.30g，0.82mmol)、EDC(0.24g，1.23mmol)、HOBt(0.13g，0.98mmol)、NMM(0.22ml，1.97mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.11g，0.98mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.20)来纯化由溶剂移除所得的残留物。由此获得的油状产物随后溶于MeOH(3ml)及10％TFA(水溶液)(3ml)中，及于室温搅拌过夜。添加水以沉淀浅黄色产物，藉由过滤收集该产物以产生5g(0.20g，64.22％)。m.p.207.6至208.7。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、4.07(t，J＝8.5Hz，2H)、6.36(d，J＝16.0Hz，1H)、7.38(d，J＝16.0Hz，1H)、7.66(d，J＝8.5Hz，2H)、7.76(s，1H)、8.01(d，J＝8.5Hz，2H)、8.19(s，1H)、9.01(br，1H)、10.72(s，1H)。

5-溴-1-(3-氯苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2h)

将1a(0.35g，1.76mmol)、3-氯苯磺酰氯(0.37ml，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及物使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，R_f＝0.55)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2h(0.50g，76.03％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.08(t，J＝8.5Hz，2H)、4.09(t，J＝8.5Hz，2H)、7.44(t，J＝8.0Hz，1H)、7.49(s，1H)、7.55(d，J＝7.5Hz，1H)、7.99(d，J＝8.0Hz，1H)、8.10(s，1H)、8.19(s，1H)。

(E)-3-(1-(3-氯苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3h)

将2h(0.15g，0.40mmol)、Pd₂(dba)₃(0.04g，0.04mmol)、[(t-Bu)₃PH]BF₄(0.02g，0.08mmol)、三乙胺(0.06ml，0.40mmol)、碳酸氢钠(0.07g，0.80mmol)及DMF(1.5ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸甲酯(0.04ml，0.44mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正及烷＝1:2，R_f＝0.20)来纯化由溶剂移除所得的残留物以产生呈黄色固体的3h(0.13g，85.79％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.11(t，J＝8.5Hz，2H)、3.79(s，3H)、4.13(t，J＝8.5Hz，2H)、6.31(d，J＝16.0Hz，1H)、7.44(t，J＝8.0Hz，1H)、7.54至7.60(m，3H)、8.03(t，J＝8.0Hz，1H)、8.13(s，1H)、8.25(s，1H)。

(E)-3-(1-(3-氯苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4h)

将3h(0.36g，0.95mmol)、二恶烷(10ml)及1M LiOH(水溶液)(1.90ml，1.90mmol)的混合物于40℃搅拌过夜。在移除该溶剂之后，所得残留物溶于水中。添加3N HCl(水溶液)以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生4h(0.31g，89.45％)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、4.11(t，J＝8.5Hz，2H)、6.46(d，J＝15.5Hz，1H)、7.51(d，J＝16.0Hz，1H)、7.63(t，J＝8.0Hz，1H)、7.77(d，J＝8.0Hz，1H)、7.97至7.98(m，2H)、8.02(s，1H)、8.28(s，1H)。

(E)-3-(1-(3-氯苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-N-羟基丙烯酰胺(5h)

将4h(0.31g，0.85mmol)、EDC(0.25g，1.28mmol)、HOBt(0.14g，1.02mmol)、NMM(0.22ml，2.04mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.29g，2.45mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经二氧化硅(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.20)纯化。由此获得的油状产物于室温溶于MeOH(4ml)及10％TFA(水溶液)(4ml)中，再次搅拌过夜。添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生5h(0.23g，71.24％)。m.p.214.9至216.2。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.10(t，J＝8.5Hz，2H)、4.10(t，J＝8.5Hz，2H)、6.36(d，J＝16.0Hz，1H)、7.37(d，J＝15.5Hz，1H)、7.63(t，J＝8.0Hz，1H)、7.75至7.77(m，2H)、7.97(d，J＝8.0Hz，1H)、8.03(s，1H)、8.22(s，1H)。

5-溴-1-(4-硝基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2i)

使1(0.35g，1.76mmol)、4-硝基苯磺酰氯(0.59g，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.73)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2i(0.35g，51.76％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.10(t，J＝8.5Hz，2H)、4.13(t，J＝8.5Hz，2H)、7.51(s，1H)、8.29至8.34(m，4H)。

(E)-3-(1-(4-硝基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]-吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(3i)

将2i(0.35g，0.91mmol)、乙酸钯(0.02g，0.09mmol)、三苯基膦(0.05g，0.18mmol)、三乙胺(0.13ml，0.91mmol)、碳酸氢钠(0.15g，1.82mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.16ml，1.09mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，R_f＝0.28)纯化以产生呈黄色固体的3i(0.13g，32.11％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.52(s，9H)、3.13(t，J＝8.5Hz，2H)、4.16(t，J＝8.5Hz，2H)、6.25(d，J＝16.0Hz，1H)、7.46(t，J＝16.0Hz，1H)、7.56(s，1H)、8.22(s，1H)、8.34(s，4H)。

(E)-3-(1-(4-硝基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-丙烯酸(4i)

将3i(0.13g，0.31mmol)及三氟乙酸(1.03ml)的混合物于室温搅拌2小时。在该反应混合物中添加水以沉淀黄色产物，藉由过滤收集该产物以产生4i(0.06g，51.56％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ3.16(t，J＝8.5Hz，2H)、4.19(t，J＝8.5Hz，2H)、6.44(d，J＝15.5Hz，1H)、7.59(d，J＝16.0Hz，1H)、7.87(s，1H)、8.22(s，1H)、8.34(t，J＝8.0Hz，2H)、8.41(d，J＝9.0Hz，2H)。

(E)-N-羟基-3-(1-(4-硝基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(5i)

将4i(0.30g，0.80mmol)、EDC(0.23g，1.20mmol)、HOBt(0.13g，0.96mmol)、NMM(0.21ml，1.92mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.11g，0.96mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.23)纯化。由此获得的油状产物随后溶于MeOH(3ml)及10％TFA(水溶液)(3ml)中，及于室温搅拌过夜。添加水以沉淀黄色固体，藉由过滤收集该固体以产生5i(0.14g，44.83％)。m.p.200.4至201.5。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD+DMSO-d₆)：δ3.14(t，J＝8.5Hz，2H)、4.18(t，J＝8.5Hz，2H)、6.40(d，J＝16.0Hz，1H)、7.47(d，J＝16.0Hz，1H)、7.76(s，1H)、8.19(s，1H)、8.33(t，J＝8.0Hz，2H)、8.40(d，J＝9.0Hz，2H)。

5-溴-1-(3-硝基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2j)

使1a(0.35g，1.76mmol)、3-硝基苯磺酰氯(0.59g，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.50)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2j(0.36g，53.24％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.11(t，J＝8.5Hz，2H)、4.16(t，J＝8.5Hz，2H)、7.51(s，1H)、7.72(t，J＝9.0Hz，1H)、8.18(s，1H)、8.42至8.44(m，1H)、8.46至8.49(m，1H)、8.96(t，J＝9.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(3-硝基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(3j)

将2j(0.36g，1.76mmol)、乙酸钯(0.02g，0.09mmol)、三苯基膦(0.05，0.19mmol)、三乙胺(0.13ml，0.94mmol)、碳酸氢钠(0.16g，1.88mmol)及DMF(2ml))的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.16ml，1.13mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，R_f＝0.20)纯化以产生呈黄色固体的3j(0.30g，73.99％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.52(s，9H)、3.14(t，J＝8.5Hz，2H)、4.18(t，J＝8.5Hz，2H)、6.25(d，J＝16.0Hz，1H)、7.46(d，J＝16.0Hz，1H)、7.56(s，1H)、7.72(t，J＝8.0Hz，1H)、8.23(s，1H)、8.42至8.44(m，1H)、8.50至8.52(m，1H)、9.00(t，J＝9.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(3-硝基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4j)

将3j(0.30g，0.70mmol)及三氟乙酸(2.33ml)的混合物于室温搅拌2小时。在该反应混合物中添加水以沉淀黄色产物，藉由过滤收集该产物以产生4j(0.16g，60.89％)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.10(t，J＝8.5Hz，2H)、4.15(t，J＝8.5Hz，2H)、6.46(d，J＝16.0Hz，1H)、7.51(d，J＝16.0Hz，1H)、7.90(t，J＝8.0Hz，1H)、7.97(s，1H)、8.29(s，1H)、8.44(d，J＝8.0Hz，1H)、8.50(d，J＝8.0Hz，1H)、8.74(s，1H)。

(E)-N-羟基-3-(1-(3-硝基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(5j)

将4j(0.27g，0.72mmol)、EDC(0.21g，1.08mmol)、HOBt(0.12g、0.86mmol)、NMM(0.19ml、1.73mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.10g，0.86mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.20)纯化。由此获得的油状产物于室温溶于MeOH(5ml)及10％TFA(水溶液)(5ml)中，及搅拌过夜。添加水以沉淀黄色固体，藉由过滤收集该固体以产生5j(0.20g，71.16％)。m.p.158.8至160.3。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD+DMSO-d₆)：δ3.14(t，J＝8.5Hz，2H)、4.17(t，J＝8.5Hz，2H)、6.39(d，J＝16.0Hz，1H)、7.47(d，J＝15.5Hz，1H)、7.75(s，1H)、7.84(t，J＝8.0Hz，1H)、8.20(s，1H)、8.46(d，J＝8.0Hz，1H)、8.48至8.50(m，1H)、8.90(t，J＝9.0Hz，1H)。

5-溴-1-(4-溴苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2k)

使1a(0.35g，1.76mmol)、4-溴苯磺酰氯(0.67g，2.64mmol)、及吡啶(3ml)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.80)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2k(0.57g，77.46％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.05(t，J＝8.5Hz，2H)、4.06(t，J＝8.5Hz，2H)、7.47(s，1H)、7.62(d，J＝8.5Hz，2H)、7.95(d，J＝8.5Hz，2H)、8.16(s，1H)。

(E)-4-(4-(5-((E)-3-第三丁氧基-3-侧氧基丙-1-烯基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丁-2-烯酸第三丁酯(3k)

将2k(0.57g，1.36mmol)、乙酸钯(0.06g，0.27mmol)，三苯基膦(0.14g，0.54mmol)、三乙胺(0.38ml，2.72mmol)、碳酸氢钠(0.46g，5.44mmol)及DMF(3ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.47ml，3.26mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，R_f＝0.25)纯化以产生呈黄色固体的3k(0.56g，80.33％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.52(s，18H)、3.08(t，J＝8.5Hz，2H)、4.12(t，J＝8.5Hz，2H)、6.23(d，J＝16.0Hz，1H)、6.43(d，J＝15.5Hz，1H)、7.46(d，J＝16.0Hz，1H)、7.52至7.55(m，2H)、7.59(d，J＝8.5Hz，2H)、8.12(d，J＝8.5Hz，2H)、8.22(s，1H)。

(E)-4-(4-(5-((E)-2-羧乙烯基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丁-2-烯酸(4k)

将3k(0.56g，1.09mmol)及三氟乙酸(5.50ml)的混合物于室温搅拌2小时。在该反应化合物中添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生4k(0.23g，52.70％)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、4.10(t，J＝8.5Hz，2H)、6.45(d，J＝16.0Hz，1H)、6.65(d，J＝16.0Hz，1H)、7.50(d，J＝16.0Hz，1H)、7.59(d，J＝16.5Hz，1H)、7.88(d，J＝8.5Hz，2H)、7.95(s，1H)、8.01(d，J＝8.0Hz，2H)、8.27(s，1H)。

(E)-N-羟基-4-(4-(5-((E)-3-(羟基胺基)-3-侧氧基丙-1-烯基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丁-2-烯酰胺(5k)

将4k(0.30g，0.75mmol)、EDC(0.43g，2.25mmol)、HOBt(0.24g，1.80mmol)、NMM(0.46ml，3.60mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.21g，1.80mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯，R_f＝0.25)纯化。由此获得的油状产物随后溶于MeOH(3ml)及10％TFA(水溶液)(3ml)中，及于室温搅拌过夜。添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生5k(0.05g，15.49％)。m.p.194.9至196.0(分解)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.07(t，J＝8.5Hz，2H)、4.07(t，J＝8.5Hz，2H)、6.34(d，J＝16.0Hz，1H)、6.54(d，J＝16.0Hz，1H)、7.36(d，J＝16.0Hz，1H)、7.45(d，J＝16.0Hz，1H)、7.72至7.84(m，3H)、8.00(d，J＝8.5Hz，2H)、8.18(s，1H)、10.70(s，1H)、10.83(s，1H)。

5-溴-1-(3-溴苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2l)

使1a(0.35g，1.76mmol)、4-溴苯磺酰氯(0.67g，2.64mmol)、及吡啶(3ml)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.75)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2l(0.56g，76.10％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.07(t，J＝8.5Hz，2H)、4.09(t，J＝8.5Hz，2H)、7.37(t，J＝8.0Hz，1H)、7.48至7.49(m，1H)、7.69至7.71(m，1H)、8.03至8.05(m，1H)、8.19(d，J＝9.0Hz，1H)、8.25(d，J＝8.0Hz，1H)。

(E)-3-(3-(5-((E)-3-第三丁氧基-侧氧基丙-1-烯基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸第三丁酯(3l)

将2l(0.56g，1.34mmol)、乙酸钯(0.06g，0.27mmol)、三苯基膦(0.14g，0.54mmol)、三乙胺(0.37ml，2.68mmol)、碳酸氢钠(0.45g，5.36mmol)及DMF(3ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.47ml，3.22mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，R_f＝0.25)纯化以产生呈黄色固体的3l(0.65g，94.63％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.52(s，9H)、1.54(s，9H)、3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、4.12(t，J＝8.5Hz，2H)、6.24(d，J＝16.0Hz，1H)、6.48(d，J＝16.0Hz，1H)、7.46(d，J＝16.0Hz，1H)、7.49至7.53(m，2H)、7.57(d，J＝16.0Hz，1H)、7.68(d，J＝8.5Hz，1H)、8.10(d，J＝7.5Hz，1H)、8.24至8.28(m，2H)。

(E)-3-(3-(5-((E)-2-羧乙烯基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸(4l)

将3l(0.65g，1.27mmol)及三氟乙酸(6.35ml)的混合物于室温搅拌2小时。在该反应混合物中添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生4l(0.19g，37.36％)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)，4.15(t，J＝8.5Hz，2H)、6.44(d，J＝16.0Hz，1H)、6.62(d，J＝16.0Hz，1H)、7.49(d，J＝16.0Hz，1H)、7.61至7.66(m，2H)、7.95(s，1H)、8.02(t，J＝9.0Hz，2H)、8.21(s，1H)、8.26(s，1H)。

(E)-N-羟基-3-(3-(5-((E)-3-(羟基胺基)-3-侧氧基丙-1-烯基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酰胺(5l)

将4l(0.30g，0.75mmol)、EDC(0.43g，2.25mmol)、HOBt(0.24g，1.80mmol)、NMM(0.46ml，3.60mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.21g，1.80mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯，R_f＝0.30)纯化。由此获得的油状产物于室温溶于MeOH(5ml)及10％TFA(水溶液)(5ml)中，及搅拌过夜。添加水以沉淀白色固体，藉由过滤收集该固体以产生5l(0.12g，37.17％)。m.p.219.6至220.7。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、4.10(t，J＝8.5Hz，2H)、6.35(d，J＝16.0Hz，1H)、6.56(d，J＝16.0Hz，1H)、7.36(d，J＝16.0Hz，1H)、7.50(d，J＝16.0Hz，1H)、7.61(t，J＝8.5Hz，1H)、7.75(s，1H)、7.84(d，J＝8.0Hz，1H)、7.97(d，J＝8.0Hz，1H)、8.22(d，J＝10.0Hz，2H)、10.71(s，1H)、10.84(s，1H)。

5-溴-1-(2-溴苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2m)

使1a(0.35g，1.76mmol)、2-溴苯磺酰氯(0.67g，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.83)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2m(0.30g，40.77％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.18(t，J＝8.5Hz，2H)、4.49(t，J＝8.5Hz，2H)、7.38至7.42(m，1H)、7.48至7.52(m，2H)、7.67(t，J＝8.0Hz，1H)、7.92(s，1H)、8.43(d，J＝8.0Hz，1H)。

(E)-3-(2-(5-((E)-3-甲氧基-3-侧氧基丙-1-烯基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸甲酯(3m)

将2m(0.31g，0.74mmol)、乙酸钯(0.04g，0.14mmol)、三苯基膦(0.08g，0.30mmol)、三乙胺(0.20ml，1.48mmol)、碳酸氢钠(0.24g，2.96mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及于120℃下添加丙烯酸甲酯(0.16ml，1.78mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，R_f＝0.38)纯化以产生呈黄色固体的3m(0.17g，55.11％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、3.74(s，3H)、3.79(s，3H)、4.32(t，J＝8.5Hz，2H)、6.22至6.25(m，2H)、7.48(d，J＝16.0Hz，1H)、7.51至7.57(m，4H)、7.98(s，1H)、8.32(d，J＝7.5Hz，1H)、8.52(d，J＝16.0Hz，1H)。

(E)-3-(2-(5-((E)-2-羧乙烯基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸(4m)

将3m(0.30g，0.70mmol)、二恶烷(5ml)及1M LiOH(水溶液)(2.88ml，2.80mmol)的混合物于40℃搅拌过夜。在移除溶剂之后，所得残留物溶于水中。添加3N HCl(水溶液)以沉淀黄色产物，藉由过滤收集该产物以产生4m(0.17g，60.65％)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.11(t，J＝8.5Hz，2H)、4.32(t，J＝8.5Hz，2H)、6.39至6.43(m，2H)、7.45(d，J＝16.0Hz，1H)、7.64(t，J＝8.0Hz，1H)、7.70(t，J＝8.0Hz，1H)、7.86(d，J＝7.5Hz，1H)、7.95(s，1H)、8.07(s，1H)、8.14(d，J＝8.0Hz，1H)、8.33(d，J＝16.0Hz，1H)。

(E)-N-羟基-3-(2-(5-((E)-3-(羟基胺基)-3-侧氧基丙-1-烯基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酰胺(5m)

将4m(0.17g，0.42mmol)、EDC(0.24g，1.26mmol)、HOBt(0.14g，1.01mmol)、NMM(0.22ml，2.02mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.12g，1.01mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝4:1，R_f＝0.10)来纯化由移除溶剂所得残留物。由此获得的油状产物于室温溶于MeOH(2ml)及10％TFA(水溶液)(2ml)中，再次搅拌过夜。添加水以沉淀浅黄色固体，藉由过滤收集该固体以产生5m(0.06g，33.19％)。m.p.220.2至221.4。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.10(t，J＝8.5Hz，2H)、4.28(t，J＝8.5Hz，2H)、6.26至6.33(m，2H)、7.31(d，J＝16.0Hz，1H)、7.60至7.71(m，3H)、7.74(s，1H)、7.96(s，1H)、8.14至8.17(m，2H)、8.99(br，1H)、9.17(br，1H)、10.69(s，1H)、10.83(s，1H)。

4-(5-溴-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯甲腈(2n)

将l(0.35g，1.76mmol)、4-氰基苯磺酰氯(0.39g，2.64mmol)、及吡啶(2ml)的混合物于室温搅拌过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层及经无水MgSO₄搅拌，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.58)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2n(0.35g，54.60％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、4.11(t，J＝8.5Hz，2H)、7.50(s，1H)、7.79(d，J＝8.5Hz，2H)、8.17(s，1H)、8.23(d，J＝8.5Hz，2H)。

(E)-3-(1-(4-氰基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(3n)

将2n(0.15g，0.41mmol)、Pd₂(dba)₃(0.04g，0.04mmol)、[(t-Bu)₃PH]BF₄(0.02g，0.08mmol)、三乙胺(0.06ml，041g)、碳酸氢钠(0.07g，0.82mmol)及DMF(1ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.07ml，0.49mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，R_f＝0.35)纯化以产生呈黄色固体的3n(0.20g，34.04％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.52(s，9H)、3.12(t，J＝8.5Hz，2H)、4.14(t，J＝8.5Hz，2H)、6.25(d，J＝16.0Hz，1H)、7.46(t，J＝16.0Hz，1H)、7.56(s，1H)、7.79(d，J＝8.5Hz，2H)、8.21(s，1H)、8.27(d，J＝8.5Hz，2H)。

(E)-3-(1-(4-氰基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4n)

将3n(0.20g，0.49mmol)及三氟乙酸(1.63ml)的混合物于0℃搅拌40分钟。在该反应混合物中添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生4n(0.15g，86.14％)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.10(t，J＝8.5Hz，2H)、4.13(t，J＝8.5Hz，2H)、6.45(d，J＝16.0Hz，1H)、7.50(t，J＝16.0Hz，1H)、7.96(s，1H)、8.07(d，J＝9.0Hz，2H)、8.18(d，J＝8.5Hz，2H)、8.25(s，1H)。

(E)-3-(1-(4-氰基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)N-羟基丙烯酰胺(5n)

将4n(0.15g，0.42mmol)、EDC(0.12g，0.63mmol)、HOBt(0.07g，0.50mmol)、NMM(0.11ml，1.01mmol)及DMF(1ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.06g，0.50mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.25)纯化。于室温下，由此获得的油状产物溶于MeOH(4ml)及10％TFA(水溶液)(4ml)中，及搅拌过夜。添加水以沉淀黄色固体，藉由过滤收集该固体以产生5n(0.12g，77.14％)。m.p.226.2至227.4。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ3.10(t，J＝8.5Hz，2H)、4.12(t，J＝8.5Hz，2H)、6.36(d，J＝16.0Hz，1H)、7.36(t，J＝16.0Hz，1H)、7.77(s，1H)、8.07(d，J＝8.5Hz，2H)、8.18(d，J＝8.5Hz，3H)。

5-溴-1-(萘-1-基磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(2o)

使1a(0.35g，1.76mmol)、4-萘磺酰氯(0.60g，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.75)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2o(0.30g，43.79％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.06(t，J＝8.5Hz，2H)、4.32(t，J＝8.5Hz，2H)、7.42(s，1H)、7.55至7.59(m，2H)、7.62至7.66(m，1H)、7.91(d，J＝8.0Hz，1H)、8.05(s，1H)、8.07(d，J＝8.0Hz，1H)、8.53(d，J＝8.5Hz，1H)、8.83(d，J＝8.5Hz，1H)。

(E)-3-(1-(萘-1-基磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3o)

将2o(0.29g，0.74mmol)、乙酸钯(0.02g，0.07mmol)、三苯基膦(0.04g，0.15mmol)、三乙胺(0.10ml，0.74g)、碳酸氢钠(0.12g，1.48mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸甲酯(0.08ml，0.89mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.50)纯化以产生呈黄色固体的3o(0.20g，68.52％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.10(t，J＝8.5Hz，2H)、3.77(s，3H)、4.36(t，J＝8.5Hz，2H)、6.26(d，J＝16.0Hz，1H)、7.51(s，1H)、7.54至7.61(m，2H)、7.63至7.66(m，2H)、7.91(d，J＝9.0Hz，1H)、8.08(d，J＝8.0Hz，1H)、8.11(s，1H)、8.57(d，J＝8.5Hz，1H)、8.85(d，J＝9.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(萘-1-基磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4o)

向3o(0.20g，0.51mmol)及二恶烷(3ml)的混合物添加1M LiOH(水溶液)(1.02ml，1.02mmol)。于40℃搅拌该混合物过夜。在移除该溶剂之后，所得残留物溶于水中。添加3NHCl(水溶液)以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生4o(0.15g，77.31％)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.13(t，J＝8.5Hz，2H)、4.32(t，J＝8.5Hz，2H)、6.41(d，J＝16.0Hz，1H)、7.45(d，J＝16.0Hz，1H)、7.65(t，J＝7.5Hz，1H)、7.69至7.74(m，2H)、7.92(s，1H)、8.08(d，J＝8.0Hz，1H)、8.11(s，1H)、8.28(d，J＝8.0Hz，1H)、8.41(d，J＝7.0Hz，1H)、8.64(d，J＝8.5Hz，1H)。

(E)-N-羟基-3-(1-(萘-1-基磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(5o)

将4o(0.30g，0.79mmol)、EDC(0.23g，1.19mmol)、HOBt(0.13g，0.95mmol)、NMM(0.21ml，1.90mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.11g，0.90mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.18)纯化。由此所得油状产物随后溶于MeOH(3ml)及10％TFA(水溶液)(3ml)中，及在室温搅拌过夜。添加水以沉淀黄色固体，藉由过滤收集该固体以产生5o(0.20g，64.02％)。m.p.164.5至165.7。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.13(t，J＝8.5Hz，2H)、4.31(t，J＝8.5Hz，2H)、6.31(d，J＝16.0Hz，1H)、7.31(d，J＝16.0Hz，1H)、7.65(t，J＝7.5Hz，1H)、7.69至7.74(m，3H)、8.04(s，1H)、8.08(d，J＝8.0Hz，1H)、8.27(d，J＝8.5Hz，1H)、8.40(d，J＝8.0Hz，1H)、8.65(d，J＝8.5Hz，1H)。

5-(5-溴-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)-N,N-二甲基-萘-1-胺(2p)

使1a(0.35g，1.76mmol)、丹酰基磺酰氯(0.71g，2.64mmol)及吡啶(3ml)的混合物回流过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:2，R_f＝0.68)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的2a(0.17g，22.34％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ2.91(s，6H)、3.06(t，J＝8.5Hz，2H)、4.31(t，J＝8.5Hz，2H)、7.21(s，1H)、7.42(s，1H)、7.53至7.60(t，J＝8.0Hz，1H)、8.04(s，1H)、8.52(d，J＝7.5Hz，2H)、8.62(s，1H)。

(E)-3-(1-(5-(二甲基胺)萘-1-基磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸甲酯(3p)

将2p(0.37g，0.86mmol)、乙酸钯(0.02g，0.09mmol)、三苯基膦(0.04g，0.17mmol)、三乙胺(0.12ml，0.86mmol)、碳酸氢钠(0.14g，1.72mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.09ml，1.03mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.50)纯化以产生呈黄色固体的3p(0.17g，45.18％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD+DMSO-d₆)：δ2.89(s，6H)、3.19(t，J＝8.5Hz，2H)、4.24(s，3H)、4.37(t，J＝8.5Hz，2H)、6.50(d，J＝16.0Hz，1H)、7.29(d，J＝8.0Hz，1H)、7.59至7.64(m，2H)、7.69(t，J＝8.0Hz，1H)、7.88(s，1H)、8.13(s，1H)、8.41(d，J＝9.0Hz，1H)、8.48(d，J＝8.0Hz，1H)、8.62(d，J＝8.5Hz，1H)。

(E)-3-(1-(5-(二甲基胺基)萘-1-基磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(4p)

向3p(0.17g，0.39mmol)及二恶烷(3ml)的混合物添加1M LiOH(水溶液)(0.78ml，0.78mmol)。于40℃搅拌该混合物过夜。在移除该溶剂之后，所得残留物溶于水中。添加3NHCl(水溶液)以沉淀黄色产物，藉由过滤收集该产物以产生4p(0.05g，30.27％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ3.12(t，J＝8.5Hz，2H)、3.13(s，6H)、4.31(t，J＝8.5Hz，2H)、6.37(d，J＝15.5Hz，1H)、7.52(d，J＝16.0Hz，1H)、7.72至7.83(m，4H)、8.01(s，1H)、8.56(t，J＝7.5Hz，2H)、8.79(s，1H)。

(E)-3-(1-(5-(二甲基胺基)萘-1-基磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-N-羟基丙烯酰胺(5p)

将4p(0.23g，0.54mmol)、EDC(0.16g，0.81mmol)、HOBt(0.09g，0.65mmol)、NMM(0.14ml，1.30mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.08g，0.65mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.20)纯化。由此获得的油状产物随后溶于MeOH(3ml)及10％TFA(水溶液)(3ml)中，及在室温搅拌过夜。添加水以沉淀浅黄色固体，藉由过滤收集该固体以产生5p(0.11g，46.45％)。m.p.183.1至184.7。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ2.80(s，6H)、3.14(t，J＝8.5Hz，2H)、4.30(t，J＝8.5Hz，2H)、6.32(d，J＝15.5Hz，1H)、7.24(d，J＝7.5Hz，1H)、7.32(d，J＝16.0Hz，1H)、7.60(t，J＝8.0Hz，1H)、7.68(t，J＝8.0Hz，1H)、7.73(s，1H)、8.05(s，1H)、8.27(d，J＝9.0Hz，1H)、8.38(d，J＝7.0Hz，1H)、8.50(t，J＝8.0Hz，1H)、10.70(s，1H)。

(E)-N-(2-胺苯基)-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(6a)

将4b(0.20g，0.55mmol)、EDC(0.16g，0.83mmol)、HOBt(0.09g，0.66mmol)、NMM(0.15ml，1.32mmol)及DMF(1.5ml)的混合物搅拌10分钟，随后于室温添加邻苯二胺(0.07g，0.66mmol)，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝4:1，R_f＝0.28)纯化以产生呈橘色固体的6a(0.16g，64.57％)。m.p.209.1至209.9。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、3.80(s，3H)、4.04(t，J＝8.5Hz，2H)、4.91(s，2H)、6.56(t，J＝7.5Hz，1H)、6.73(d，J＝8.0Hz，1H)、6.79(d，J＝16.0Hz，1H)、6.90(t，J＝7.5Hz，1H)、7.09(d，J＝9.0Hz，2H)、7.31(d，J＝8.0Hz，1H)、7.47(d，J＝15.5Hz，1H)、7.76(s，1H)、7.95(d，J＝9.0Hz，2H)、8.25(s，1H)、9.35(s，1H)。

N-羟基-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-丙酰胺(7a)

将5b(0.11g，0.29mmol)及甲醇(4ml)的混合物搅拌10分钟，及，在于室温添加催化剂10％碳载钯之后，再次在氢气下搅拌过夜。藉由MeOH清洗该残留物及经由硅藻土以移除10％碳载钯而不进一步纯化以产生呈深粉色固体的7a(0.09g，82.23％)。m.p.151.0至151.7。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ2.18(t，J＝7.5Hz，2H)、2.68(t，J＝7.5Hz，2H)、2.97(t，J＝8.5Hz，2H)、3.79(s，3H)、3.93(t，J＝8.5Hz，2H)、7.06(d，J＝9.0Hz，2H)、7.36(s，1H)、7.85(s，1H)、7.90(t，J＝9.0Hz，2H)。

1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲腈(8a)

将2b(0.20g，0.54mmol)、氰化亚铜(I)(0.10g，1.08mmol)及DMF(3ml)的混合物于150℃搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.43)纯化以产生呈黄色固体的8a(0.09g，52.58％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ3.10(t，J＝8.5Hz，2H)、3.85(s，3H)、4.14(t，J＝8.5Hz，2H)、6.96(d，J＝9.0Hz，2H)、7.51(s，1H)、8.03(t，J＝9.0Hz，2H)、8.40(s，1H)。

1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酸(9a)

向8a(0.09g，0.29mmol)及甲醇(3ml)的混合物中添加10％KOH(水溶液)(3ml)。使该混合物回流2小时。在其冷却至室温之后，随后添加3N HCl(水溶液)以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生9a(0.06g，61.88％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ3.09(t，J＝8.5Hz，2H)、3.83(s，3H)、4.09(t，J＝8.5Hz，2H)、7.04(d，J＝9.0Hz，2H)、7.97至8.00(m，3H)、8.66(s，1H)。

N-羟基-1-(4-甲氧基苯磺酰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-甲酰胺(10a)

将9a(0.31g，0.93mmol)、EDC(0.27g，1.40mmol)、HOBt(0.15g，1.12mmol)、NMM(0.28ml，2.23mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.11g，1.12mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.30)纯化。由此获得的油状产物于室温溶于MeOH(5ml)及10％TFA(水溶液)(5ml)中，及搅拌过夜。添加水以沉淀白色固体，藉由过滤收集该固体以产生10a(0.22g，74.09％)。m.p.198.5至199.9。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.07(t，J＝8.5Hz，2H)、3.80(s，3H)、4.03(t，J＝8.5Hz，2H)、7.08(d，J＝9.0Hz，2H)、7.80(s，1H)、7.94(d，J＝9.0Hz，2H)、8.36(s，1H)。

5-溴-1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(11a)

向5-溴-7-氮杂吲哚(1.00g，5.08mmol)及DMF(3ml)的混合物添加60％NaH(0.13g，5.59mmol)。搅拌该混合物10分钟，及在添加苯磺酰氯(0.71ml，5.59mmol)之后，再次于室温搅拌过夜。使用水中止该反应及使用乙酸乙酯(30ml x 3)萃取该混合物。收集有机层，经无水MgSO₄干燥，及在真空中浓缩以产生棕色残留物，藉由急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:1，R_f＝0.40)来纯化该残留物以产生呈黄色固体的11a(0.95g，55.46％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ6.55(d，J＝4.5Hz，1H)、7.50(t，J＝8.0Hz，2H)、7.59(t，J＝7.5Hz，1H)、7.74(d，J＝4.0Hz，1H)、7.97(d，J＝2.0Hz，1H)、8.17(t，J＝8.0Hz，2H)、8.45(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(12a)

将11a(0.15g，0.44mmol)、乙酸钯(0.01g，0.04mmol)、三苯基膦(0.03g，0.09mmol)、三乙胺(0.06ml，0.44mmol)、碳酸氢钠(0.07g，0.88mmol)及DMF(1.5ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.08ml，0.53mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:5，R_f＝0.20)纯化以产生呈黄色固体的12a(0.11g，65.03％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.54(s，9H)、6.40(d，J＝16.0Hz，1H)、6.61(d，J＝3.5Hz，1H)、7.50(t，J＝7.5Hz，2H)、7.59(t，J＝7.5Hz，1H)、7.64(d，J＝16.0Hz，1H)、7.75(d，J＝4.0Hz，1H)、7.97(d，J＝2.0Hz，1H)、8.20(t，J＝8.5Hz，2H)、8.55(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(13a)

将12a(1.27g，3.30mmol)及三氟乙酸(11.0ml)的混合物于室温搅拌2小时。在该反应混合物中添加水以沉淀白色固体，藉由过滤收集该固体以产生13a(0.80g，73.84％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ6.57(d，J＝16.0Hz，1H)、6.77(d，J＝4.0Hz，1H)、7.54(t，J＝8.0Hz，2H)、7.65(t，J＝7.5Hz，1H)、7.75(d，J＝16.0Hz，1H)、7.85(d，J＝4.0Hz，1H)、8.13(t，J＝8.0Hz，2H)、8.25(s，1H)、8.52(s，1H)。

(E)-N-羟基-3-(1-(苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(14a)

将13a(2.00g，6.09mmol)、EDC(1.52g，9.14mmol)、HOBt(0.99g，7.31mmol)、NMM(1.61ml，4.62mmol)及DMF(3ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.86g，7.31mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.25)来纯化由移除溶剂所得残留物。由此获得的油状产物于室温溶于MeOH(2ml)及10％TFA(水溶液)(2ml)中，及搅拌过夜。添加水以沉淀白色固体，藉由过滤收集该固体以产生14a(1.00g，88.79％)。m.p.210.2至211.5。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ6.57(d，J＝15.5Hz，1H)、6.75(d，J＝7.0Hz，1H)、7.54(t，J＝7.5Hz，2H)、7.64(t，J＝7.5Hz，1H)、7.69(d，J＝16.0Hz，1H)、7.85(d，J＝6.5Hz，1H)、8.13(t，J＝8.5Hz，2H)、8.17(s，1H)、8.51(s，1H)。

5-溴-1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(11b)

将5-溴-7-氮杂吲哚(0.35g，1.78mmol)、DMF(2ml)及60％NaH(0.06g，2.67mmol)的混合物搅拌10分钟，在添加4-甲氧基苯磺酰氯(0.55g，2.67mmol)之后，再次于室温搅拌过夜。添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生11b(0.57g，87.20％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.83(s，3H)、6.52(d，J＝4.0Hz，1H)、6.93(t，J＝9.0Hz，2H)、7.73(t，J＝4.0Hz，1H)、7.96(d，J＝2.0Hz，1H)、8.11(d，J＝9.0Hz，2H)、8.44(d，J＝2.5Hz，1H)。

(E)-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(12b)

将11b(0.57g，1.55mmol)、乙酸钯(0.04g，0.16mmol)、三苯基膦(0.08g，0.31mmol)、三乙胺(0.22ml，1.55mmol)、碳酸氢钠(0.26g，3.10mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.27ml，1.86mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:4，R_f＝0.33)纯化以产生呈黄色固体的12b(0.58g，90.28％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.54(s，9H)、3.82(s，3H)、6.40(d，J＝16.0Hz，1H)、6.58(d，J＝4.0Hz，1H)、6.94(t，J＝9.0Hz，2H)、7.64(d，J＝16.0Hz，1H)、7.74(t，J＝4.0Hz，1H)、7.97(d，J＝2.0Hz，1H)、8.14(d，J＝9.0Hz，2H)、8.54(d，J＝1.5Hz，1H)。

(E)-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(13b)

将12b(0.58g，1.40mmol)及三氟乙酸(4.67ml)的混合物于室温搅拌1小时。在该反应混合物中添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生13b(0.49g，97.66％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ3.82(s，3H)、6.57(d，J＝16.0Hz，1H)、6.73(d，J＝4.0Hz，1H)、7.03(t，J＝9.0Hz，2H)、7.76(d，J＝16.0Hz，1H)、7.83(t，J＝4.0Hz，1H)、8.08(d，J＝9.0Hz，2H)、8.24(d，J＝2.0Hz，1H)、8.52(d，J＝2Hz，1H)。

(E)-N-羟基-3-(1-(4-甲氧基苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(14b)

将13b(0.44g，1.23mmol)、EDC(0.35g，1.85mmol)、HOBt(0.20g，1.48mmol)、NMM(0.32ml，2.95mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.17g，1.48mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.38)来纯化由移除溶剂所得残留物。由此获得的油状产物于室温溶于MeOH(5ml)及10％TFA(水溶液)(5ml)中，及搅拌过夜。添加水以沉淀白色固体，藉由过滤收集该白色固体以产生14b(0.37g，90.91％)。m.p.192.5至193.3。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.78(s，3H)、6.52(d，J＝16.0Hz，1H)、6.81(d，J＝4.0Hz，1H)、7.10(t，J＝9.0Hz，2H)、7.54(d，J＝16.0Hz，1H)、7.89(t，J＝4.0Hz，1H)、8.03(d，J＝9.0Hz，2H)、8.23(d，J＝1.5Hz，1H)、8.55(d，J＝1.5Hz，1H)。

5-溴-1-(3-甲氧基苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(11c)

将5-溴-7-氮杂吲哚(0.35g，1.78mmol)、DMF(2ml)及60％NaH(0.06g，2.67mmol)的混合物搅拌10分钟，及在添加3-甲氧基苯磺酰氯(0.38ml，2.67mmol)之后，再次于室温搅拌过夜。添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生11c(0.57g，87.20％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.84(s，3H)、6.55(d，J＝4.0Hz，1H)、7.09至7.11(m，1H)、7.37(t，J＝8.0Hz，1H)、7.69至7.75(m，3H)、7.98(d，J＝2.0Hz，1H)、8.46(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(3-甲氧基苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(12c)

将11c(0.60g，1.63mmol)、乙酸钯(0.04g，0.16mmol)、三苯基膦(0.09g，0.33mmol)、三乙胺(0.23ml，1.63mmol)、碳酸氢钠(0.27g，3.26mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.29ml，1.96mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:4，R_f＝0.38)来纯化由移除溶剂所得残留物以产生呈黄色固体的12c(0.49g，72.53％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.54(s，9H)、3.84(s，3H)、6.40(d，J＝16.0Hz，1H)、6.60(d，J＝4.0Hz，1H)、7.09(t，J＝8.5Hz，1H)、7.37(t，J＝8.5Hz，1H)、7.64(d，J＝16.0Hz，1H)、7.71至7.78(m，2H)、7.78(s，1H)、7.98(d，J＝2.0Hz，1H)、8.56(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(3-甲氧基苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(13c)

将12c(0.49g，1.18mmol)及三氟乙酸(3.93ml)的混合物于室温搅拌1小时。在该反应混合物中添加水以沉淀白色固体，藉由过滤收集该固体以产生13c(0.39g，92.23％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD+DMSO-d₆)：δ3.86(s，3H)、6.62(d，J＝16.0Hz，1H)、6.81(d，J＝4.0Hz，1H)、7.23(t，J＝8.5Hz，1H)、7.48(d，J＝8.0Hz，1H)、7.69至7.74(m，2H)、7.78(d，J＝16.0Hz，1H)、7.89(d，J＝4.0Hz，1H)、8.31(d，J＝2.0Hz，1H)、8.60(d，J＝2.5Hz，1H)。

(E)-N-羟基-3-(1-(3-甲氧基苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酰胺(14c)

将13c(0.39g，1.09mmol)、EDC(0.31g，1.64mmol)、HOBt(0.18g，1.31mmol)、NMM(0.29ml，2.62mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.15g，1.31mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.50)来纯化由移除溶剂所得产物。由此获得的油状产物于室温溶于MeOH(5ml)及10％TFA(水溶液)(5ml)中，及搅拌过夜。添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该白色产物以产生14c(0.30g，83.69％)。m.p.207.3至208.3。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.78(s，3H)、6.53(d，J＝15.5Hz，1H)、6.84(d，J＝3.5Hz，1H)、7.26(dd，J＝2.0、7.0Hz，1H)、7.50至7.56(m，2H)、7.61至7.64(m，2H)、7.92(d，J＝4.0Hz，1H)、8.25(d，J＝1.5Hz，1H)、8.59(d，J＝1.5Hz，1H)。

5-溴-1-(3,4-二甲氧基苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(11d)

将5-溴-7-氮杂吲哚(0.35g，1.78mmol)、DMF(2ml)及60％NaH(0.06g，2.67mmol)的混合物搅拌10分钟，及在添加3,4-二甲氧基苯磺酰氯(0.63g，2.67mmol)之后，再次于室温搅拌过夜。添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生11d(0.58g，82.03％)，¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ3.89(s，3H)、3.92(s，3H)、6.52(d，J＝4.0Hz，1H)、6.88(d，J＝8.5Hz，1H)、7.71至7.73(m，2H)、7.76(t，J＝8.5Hz，1H)、7.79至8.01(m，1H)、8.44(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(3,4-二甲氧基苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(12d)

将11d(0.58g，1.46mmol)、乙酸钯(0.03g，0.15mmol)、三苯基膦(0.08g，0.29mmol)、三乙胺(0.20ml，1.46mmol)、碳酸氢钠(0.25g，2.92mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.25ml，1.75mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:4，R_f＝0.10)纯化以产生呈黄色固体的12d(0.60g，92.45％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.54(s，9H)、3.89(s，3H)、3.93(s，3H)、6.40(d，J＝16.0Hz，1H)、6.59(d，J＝4.0Hz，1H)、6.89(t，J＝8.5Hz，1H)、7.64(d，J＝16.0Hz，1H)、7.73(t，J＝4.0Hz，1H)、7.78至7.80(m，2H)、7.98(d，J＝1.5Hz，1H)、8.55(d，J＝1.5Hz，1H)。

(E)-3-(1-(3,4-二甲氧基苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(13d)

将12c(0.60g,1.35mmol)及三氟乙酸(4.5ml)的混合物于室温搅拌1小时。在该反应混合物中添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生13c(0.48g，91.55％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD+DMSO-d₆)：δ3.85(s，3H)、3.87(s，3H)、6.60(d，J＝16.0Hz，1H)、6.77(d，J＝4.0Hz，1H)、7.08(t，J＝9.0Hz，1H)、7.74至7.75(m，2H)、7.78(d，J＝16.0Hz，1H)、7.86(d，J＝4.0Hz，1H)、8.29(d，J＝2.0Hz，1H)、8.58(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(3,4-二甲氧基苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-N-羟基丙烯酰胺(14d)

将13d(0.64g，1.65mmol)、EDC(0.48g，2.48mmol)、HOBt(0.27g，1.98mmol)、NMM(0.44ml，3.96mmol)及DMF(2.5ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.23g，1.98mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.43)纯化。由此获得的油状产物于室温溶于MeOH(6ml)及10％TFA(水溶液)(6ml)中，再次搅拌过夜。添加水以沉淀白色固体，藉由过滤收集该固体以产生14d(0.37g，63.85％)。m.p.212.3至213.5。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ3.78(s，3H)、3.79(s，3H)、6.53(d，J＝15.5Hz，1H)、6.80(d，J＝4.0Hz，1H)、7.12(t，J＝8.5Hz，1H)、7.54(d，J＝15.5Hz，1H)、7.64(d，J＝2.0Hz，1H)、7.69(d，J＝8.5Hz，1H)、7.89(d，J＝4.0Hz，1H)、8.23(d，J＝1.5Hz，1H)、8.59(d，J＝1.5Hz，1H)。

5-溴-1-(4-氟苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(11e)

将5-溴-7-氮杂吲哚(0.35g，1.78mmol)、DMF(2ml)及60％NaH(0.06g，2.67mmol)的混合物搅拌10分钟，及在添加4-氟苯磺酰氯(0.52g，2.67mmol)之后，再次于室温搅拌过夜。添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生11e(0.59g，93.32％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ6.55(d，J＝4.0Hz，1H)、7.17(t，J＝9.0Hz，2H)、7.72(t，J＝4.0Hz，1H)、7.99(d，J＝2.5Hz，1H)、8.21至8.23(m，2H)、8.44(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(4-氟苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(12e)

将11e(0.59g，1.66mmol)、乙酸钯(0.04g，0.17mmol)、三苯基膦(0.09g，0.33mmol)、三乙胺(0.23ml，1.66mmol)、碳酸氢钠(0.28g，3.32mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.29ml，1.99mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:4，R_f＝0.28)纯化以产生呈黄色固体的12e(0.44g，65.86％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.54(s，9H)、6.40(d，J＝16.0Hz，1H)、6.61(d，J＝4.0Hz，1H)、7.17(t，J＝8.5Hz，2H)、7.64(d，J＝16.0Hz，1H)、7.73(t，J＝4.0Hz，1H)、7.98(d，J＝2.0Hz，1H)、8.25(dd，J＝5.0、9.0Hz，2H)、8.54(d，J＝1.5Hz，1H)。

(E)-3-(1-(4-氟苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(13e)

将12e(0.47g，1.06mmol)及三氟乙酸(4.24ml，4.24mmol)的混合物于室温搅拌2小时。在该反应混合物中添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生13e(0.42g，95.84％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ6.58(d，J＝16.0Hz，1H)、6.77(d，J＝3.5Hz，1H)、7.29(t，J＝8.5Hz，2H)、7.76(d，J＝16.0Hz，1H)、7.85(t，J＝4.0Hz，1H)、8.22至8.25(m，2H)、8.26(s，1H)、8.53(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(4-氟苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-N-羟基-丙烯酰胺(14e)

将13e(0.36g，1.04mmol)、EDC(0.30g，1.56mmol)、HOBt(0.17g，1.25mmol)、NMM(0.27ml，2.50mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.15g，1.25mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.63)来纯化由移除溶剂所得残留物。由此获得的油状产物于室温溶于MeOH(4ml)及10％TFA(水溶液)(4ml)中，及搅拌过夜。添加水以沉淀白色固体，藉由过滤收集该白色固体以产生14e(0.26g，86.69％)。m.p.213.6至214.5。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ6.52(d，J＝15.5Hz，1H)、6.86(d，J＝4.0Hz，1H)、7.47(t，J＝9.0Hz，2H)、7.55(d，J＝15.5Hz，1H)、7.93(d，J＝4.0Hz，1H)、8.18至8.21(m，2H)、8.25(s，1H)、8.56(s，1H)。

5-溴-1-(4-氯苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(11f)

将5-溴-7-氮杂吲哚(0.35g，1.78mmol)、DMF(2ml)及60％NaH(0.06g，2.67mmol)的混合物搅拌10分钟，及在添加4-氯苯磺酰氯(0.56g，2.67mmol)之后，于室温再次搅拌过夜。添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生11f(0.55g，83.14％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ6.56(d，J＝3.5Hz，1H)、7.46(t，J＝8.5Hz，2H)、7.71(t，J＝4.0Hz，1H)、7.98(d，J＝2.5Hz，1H)、8.12(d，J＝8.5Hz，2H)、8.44(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(4-氯苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸第三丁酯(12f)

将11f(0.49g，1.32mmol)、乙酸钯(0.03g，0.13mmol)、三苯基膦(0.07g，0.26mmol)、三乙胺(0.18ml，1.32mmol)、碳酸氢钠(0.22g，2.64mmol)及DMF(1.5ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.23ml，1.58mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:4，R_f＝0.35)来纯化由移除溶剂所得残留物以产生呈黄色固体的12f(0.38g，68.72％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.54(s，9H)、6.40(d，J＝16.0Hz，1H)、6.62(d，J＝3.5Hz，1H)、7.47(t，J＝9.0Hz，2H)、7.64(d，J＝16.0Hz，1H)、7.72(t，J＝4.0Hz，1H)、7.98(d，J＝2.0Hz，1H)、8.15(d，J＝8.5Hz，2H)、8.54(d，J＝1.5Hz，1H)。

(E)-3-(1-(4-氯苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)丙烯酸(13f)

将12f(0.54g，1.29mmol)及三氟乙酸(4.3ml)的混合物于室温搅拌1小时。在该反应混合物中添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生13f(0.43g，91.88％)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ6.63(d，J＝16.0Hz，1H)、6.86(d，J＝4.0Hz，1H)、7.67至7.74(m，3H)、7.94(t，J＝4.0Hz，1H)、8.11(d，J＝8.5Hz，2H)、8.41(d，J＝1.5Hz，1H)、8.65(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(1-(4-氯苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)-N-羟基-丙烯酰胺(14f)

将13f(0.42g，1.16mmol)、EDC(0.33g，1.74mmol)、HOBt(0.19g，1.39mmol)、NMM(0.13ml，2.78mmol)及DMF(2ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.16g，1.39mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝2:1，R_f＝0.44)来纯化由移除溶剂所得残留物。于室温下，由此获得的油状产物溶于MeOH(5ml)及10％TFA(水溶液)(5ml)中，及搅拌过夜。添加水以沉淀白色固体，藉由过滤收集该固体以产生14f(0.34g，86.53％)。m.p.210.4至211.5。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ6.52(d，J＝16.0Hz，1H)、6.87(d，J＝4.0Hz，1H)、7.56(d，J＝16.0Hz，1H)、7.70(t，J＝8.5Hz，2H)、7.93(d，J＝4.0Hz，1H)、8.12(d，J＝8.5Hz，2H)、8.25(s，1H)、8.56(s，1H)。

5-溴-1-(4-溴苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(11g)

将5-溴-7-氮杂吲哚(0.35g，1.78mmol)、DMF(2ml)及60％NaH(0.06g，2.67mmol)的混合物搅拌10分钟，及在添加4-溴苯磺酰氯(0.68g，2.67mmol)之后，再次于室温搅拌过夜。添加水以沉淀黄色产物，藉由过滤收集该产物以产生11g(0.60g，81.20％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ6.56(d，J＝4.0Hz，1H)、7.64(t，J＝9.0Hz，2H)、7.71(t，J＝4.0Hz，1H)、7.99(s，1H)、8.04(d，J＝9.0Hz，2H)、8.44(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(4-(5-((E)-3-第三丁氧基-3-侧氧基丙-1-烯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸第三丁酯(12g)

将11g(0.60g，1.45mmol)、乙酸钯(0.06g，0.30mmol)、三苯基膦(0.16g，0.58mmol)、三乙胺(0.40ml，2.90mmol)、碳酸氢钠(0.48g，5.80mmol)及DMF(3ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.50ml，3.48mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:4，R_f＝0.50)纯化以产生呈黄色固体的12g(0.71g，95.90％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.51(s，9H)、1.53(s，9H)、6.40(d，J＝16.0Hz，1H)、6.41(d，J＝16.0Hz，1H)、6.62(d，J＝4.0Hz，1H)、7.51(d，J＝16.0Hz，1H)、7.59(t，J＝8.5Hz，2H)、7.63(d，J＝16.0Hz，1H)、7.74(t，J＝4.0Hz，1H)、7.98(d，J＝2.0Hz，1H)、8.19(d，J＝8.5Hz，2H)、8.54(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(4-(5-((E)-2-羧乙烯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸(13g)

将12g(0.71g，1.39mmol)及三氟乙酸(4.63ml)的混合物于室温搅拌1小时。添加水以沉淀黄色固体，藉由过滤收集该固体以产生13g(0.51g，92.09％)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ6.63(d，J＝16.0Hz，1H)、6.65(d，J＝16.0Hz，1H)、6.85(d，J＝4.0Hz，1H)、7.57(d，J＝15.5Hz，1H)、7.68(d，J＝16.0Hz，1H)、7.91(d，J＝8.5Hz，2H)、7.96(d，J＝4.0Hz，1H)、8.10(d，J＝8.5Hz，2H)、8.41(d，J＝2.0Hz，1H)、8.67(d，J＝1.5Hz，1H)。

(E)-N-羟基-3-(4-(5-((E)-3-(羟基胺基)-3-侧氧基丙-1-烯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酰胺(14g)

将13g(0.48g，1.20mmol)、EDC(0.69g，3.60mmol)、HOBt(0.39g，2.88mmol)、NMM(0.63ml，5.76mmol)及DMF(3ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.34g，2.88mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝4:1，R_f＝0.48)来纯化由移除溶剂所得残留物。由此获得的油状产物于室温溶于MeOH(2ml)及10％TFA(水溶液)(2ml)中，及搅拌过夜。添加水以沉淀浅黄色固体，藉由过滤收集该固体以产生14g(0.05g，38.90％)。m.p.188.7至190.5(分解)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ6.54(t，J＝16.0Hz，2H)、6.86(d，J＝4.0Hz，1H)、7.44(d，J＝15.5Hz，1H)、7.54(d，J＝15.5Hz，1H)、7.77(d，J＝8.5Hz，2H)、7.93(d，J＝4.0Hz，1H)、8.10(d，J＝8.5Hz，2H)、8.25(s，1H)、8.56(s，1H)。

5-溴-1-(3-溴苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(11h)

将5-溴-7-氮杂吲哚(0.35g，1.78mmol)、DMF(2ml)及60％NaH(0.06g，2.67mmol)的混合物搅拌10分钟，及在添加3-溴苯磺酰氯(0.68g，2.67mmol)之后，再次于室温搅拌过夜。添加水以沉淀白色产物，藉由过滤收集该产物以产生11h(0.63g，85.26％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ6.57(d，J＝3.5Hz，1H)、7.38(t，J＝8.0Hz，1H)、7.71(d，J＝4.5Hz，2H)、7.99(d，J＝2.0Hz，1H)、8.13(d，J＝8.0Hz，1H)、8.33(s，1H)、8.46(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(3-(5-((E)-3-第三丁氧基-3-侧氧基丙-1-烯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸第三丁酯(12h)

将11h(0.63g，1.52mmol)、乙酸钯(0.06g，0.30mmol)、三苯基膦(0.16g，0.60mmol)、三乙胺(0.42ml，3.04mmol)、碳酸氢钠(0.52g，6.08mmol)及DMF(3ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.54ml，3.64mmol)之后，再次搅拌过夜。使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:4，R_f＝0.40)来纯化由移除溶剂所得残留物以产生呈黄色固体的12h(0.70g，90.19％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.53(s，9H)、1.54(s，9H)、6.40(d，J＝15.5Hz，1H)、6.45(d，J＝16.0Hz，1H)、6.62(d，J＝4.0Hz，1H)、7.49至7.69(m，4H)、7.75(t，J＝4.0Hz，1H)、7.98(d，J＝2.0Hz，1H)、8.16至8.34(m，1H)、8.36(d，J＝1.5Hz，1H)、8.56(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-3-(3-(5-((E)-2-羧乙烯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸(13h)

将12h(0.70g，1.37mmol)及三氟乙酸(4.57ml)的混合物于室温搅拌1小时。添加水以沉淀黄色产物，藉由过滤收集该产物以产生13h(0.53g，97.10％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD+DMSO-d₆)：δ6.62(d，J＝16.0Hz，2H)、6.83(d，J＝4.0Hz，1H)、7.63(d，J＝8.0Hz，1H)、7.69(d，J＝16.0Hz，1H)、7.77(d，J＝16.0Hz，1H)、7.94(d，J＝4.0Hz，2H)、8.18(d，J＝8.0Hz，1H)、8.31(d，J＝2.0Hz，1H)、8.42(s，1H)、8.60(d，J＝2.0Hz，1H)。

(E)-N-羟基-3-(3-(5-((E)-3-(羟基胺基)-3-侧氧基丙-1-烯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酰胺(14h)

将13h(0.57g，1.43mmol)、EDC(0.82g，4.29mmol)、HOBt(0.46g，3.43mmol)、NMM(0.75ml，6.86mmol)及DMF(3.5ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.40g，3.43mmol)，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝4:1，R_f＝0.43)纯化。由此获得的油状产物随后溶于MeOH(3ml)及10％TFA(水溶液)(3ml)中，及于室温搅拌过夜。添加水以沉淀浅黄色固体，藉由过滤收集该固体以产生14h(0.13g，67.83％)。m.p.219.4至221.3(分解)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ6.52(t，J＝15.5Hz，1H)、6.59(d，J＝16.0Hz，1H)、6.87(d，J＝4.0Hz，1H)、7.50(d，J＝16.0Hz，1H)、7.55(d，J＝15.5Hz，1H)、7.64(t，J＝8.5Hz，1H)、7.89(d，J＝8.0Hz，1H)、7.94(d，J＝4.0Hz，1H)、8.05(d，J＝8.0Hz，1H)、8.25(s，1H)、8.34(s，1H)、8.59(s，1H)。

5-溴-1-(2-溴苯磺酰基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶(11i)

将5-溴-7-氮杂吲哚(0.35g，1.78mmol)、DMF(2ml)及60％NaH(0.06g，2.67mmol)的混合物搅拌10分钟，及在添加2-溴苯磺酰氯(0.68g，2.67mmol)之后，再次于室温搅拌过夜。添加水以沉淀黄色产物，藉由过滤收集该产物以产生11i(0.66g，89.32％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ6.57(d，J＝4.0Hz，1H)、7.44(t，J＝8.0Hz，1H)、7.57(t，J＝8.0Hz，1H)、7.63(d，J＝8.0，1H)、7.96(d，J＝4.0Hz，1H)、7.99(d，J＝2.0Hz，1H)、8.25(d，J＝1.5Hz，1H)、8.61(d，J＝8.0Hz，1H)。

(E)-3-(2-(5-((E)-3-第三丁氧基-3-侧氧基丙-1-烯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸第三丁酯(12i)

将11i(0.98g，2.36mmol)、Pd₂(dba)₃(0.43g，0.47mmol)、[(t-Bu)₃PH]BF₄(0.27g，0.94mmol)、三乙胺(0.66ml、4.72mmol)、碳酸氢钠(0.79g，9.44mmol)及DMF(2.5ml)的混合物搅拌10分钟，及在于120℃添加丙烯酸第三丁酯(0.82ml，5.66mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝1:4，R_f＝0.45)纯化以产生呈黄色固体的12i(1.17g，97.09％)。¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.52(s，9H)、1.56(s，9H)、5.99(d，J＝15.5Hz，1H)、6.36(d，J＝16.0Hz，1H)、6.59(d，J＝4.0Hz，1H)、7.49至7.51(m，1H)、7.57至7.60(m，3H)、7.89(d，J＝4.0Hz，1H)、7.95(s，1H)、8.29(d，J＝16.0Hz，1H)、8.37(s，1H)、8.52至8.53(m，1H)。

(E)-3-(2-(5-((E)-2-羧乙烯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酸(13i)

将12i(0.23g，0.45mmol)及三氟乙酸(1.5ml)的混合物于室温搅拌1小时。添加水以沉淀黄色产物，藉由过滤收集该产物以产生13i(0.15g，83.67％)。¹H-NMR(500MHz，CD₃OD+DMSO-d₆)：δ6.15(d，J＝16.0Hz，1H)、6.55(d，J＝16.0Hz，1H)、6.76(d，J＝4.0Hz，1H)、7.66至7.74(m，4H)、7.91(d，J＝4.0Hz，1H)、8.26(s，1H)、8.39至8.42(m，2H)、8.45(d，J＝16.0Hz，1H)。

(E)-N-羟基-3-(2-(5-((E)-3-(羟基胺基)-3-侧氧基丙-1-烯基)-1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-1-基磺酰基)苯基)丙烯酰胺(14i)

将13i(0.90g，2.26mmol)、EDC(1.30g，6.78mmol)、HOBt(0.74g，5.42mmol)、NMM(1.20ml，10.84mmol)及DMF(3ml)的混合物搅拌10分钟，及在于室温添加邻(四氢-2H-吡喃-2-基)羟胺(0.64g，5.42mmol)之后，再次搅拌过夜。移除溶剂后所得残留物使用急骤管柱经硅胶(乙酸乙酯:正己烷＝4:1，R_f＝0.45)纯化。由此获得的油状产物于室温溶于MeOH(8ml)及10％TFA(水溶液)(8ml)中，及搅拌过夜。添加水以沉淀浅黄色固体，藉由过滤收集该固体以产生14i(0.38g，67.20％)。m.p.159.6至161.9(分解)。¹H-NMR(500MHz，DMSO-d₆)：δ6.19(d，J＝15.5Hz，1H)、6.49(d，J＝5.5Hz，1H)、6.84(d，J＝4.0Hz，1H)、7.51(d，J＝16.0Hz，1H)、7.65至7.70(m，2H)、7.76(t，J＝7.0Hz，1H)、7.86(d，J＝4.0Hz，1H)、8.10(d，J＝15.5Hz，1H)、8.24(s，1H)、8.27(d，J＝8.0Hz，1H)、8.41(s，1H)。

HDAC活性分析法

使化合物1至21、23、5a至5p、6a、7a、10a、14a至14i接受若干如下文描述的HDAC活性分析法。

更特定而言，测试化合物的IC₅₀值是藉由根据制造商指示进行荧光组蛋白去乙酰酶分析法来测定。对于泛HDAC分析法而言，HeLa核萃取物用作组蛋白去乙酰酶源(BioVision Inc.)。使用经纯化的各种异构体的重组体组蛋白去乙酰酶蛋白质(BPSBioscience Inc.)进行组蛋白去乙酰酶异构体抑制分析法。反应是在0.1mol/L KCl、20mmol/L HEPES/NaOH(pH 7.9)、20％甘油、0.2mmol/L DTA、0.5mmol/L DTT及0.5mmol/L苯甲磺酰氟中进行。Fluor de Lys底物及各种浓度(nmol/L至μmol/L)的测试化合物是在37℃于缓冲液中使用，该缓冲液含有25mmol/L Tris-Cl，pH 8.0、137mmol/L NaCl、2.7mmol/LKCl及1mmol/L MgCl₂。以在360nm的波长激发测量荧光及检测460nm的发光(TECAN ULTRA384)。包括阴性(无酶、无抑制剂、无HDAC抑制活性的药物)及阳性对照(不具有HDAC抑制剂及熟知HDAC抑制剂SAHA的HeLa核萃取物)。半数最大抑制浓度(IC₅₀)测定为测试化合物浓度，该浓度导致在培养期间HDAC活性增加相对对照孔减少50％。对于各测试化合物重复三次进行反应。各点代表复本的平均值±SD。

化合物1至21、23、5a至5p、6a、7a、10a、14a至14i各者显示在KB细胞系(口腔癌)中抑制HDAC的低于6μM的IC₅₀值。其中，化合物5、6、7、12、5a至5j、5n至5p、7a及14a至14f各者具有低于1μM的IC₅₀值。值得注意的是，化合物7显示在全部10个测试细胞系中的抑制活性。参见下文表2。

表2.在人类癌细胞系中抑制HDAC

化合物5b及14a在24个细胞系中的抑制作用显示在下文表3中。

表3.5b及14a抗人类癌细胞系的IC₅₀值

二维/三维细胞生长抑制分析法

使化合物5b及7接受按照下述程序的二维/三维细胞生长抑制分析法。

对于二维分析法而言，将处于对数期的癌细胞于37℃及5％CO₂下培养于96孔板的完全培养基中，培养过夜，及使用各种浓度测试化合物处理持续三个繁殖期。随后用含有0.5mg/mM的最终浓度的溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑鎓(MTT)的无血清培养基培养细胞4小时。MTT由代谢活细胞转化为三苯基甲臜。三苯基甲臜随后在37℃溶于含有20％SDS的50％DMF溶液中过夜。使用spectramax M5微板读取仪(Molecular Devices，UK)于570nm测量吸亮度。

对于三维分析法而言，将处于对数期的细胞于37℃及5％CO₂下培养在96孔板的含50％基质胶的完全培养基中，培养5天，及使用适当浓度的测试化合物处理持续三个繁殖期。在显微镜下取球体影像，及藉由MTT分析法来测定球体细胞存活率。

结果显示在下文表4至7中。

表4.与紫杉醇、长春新碱、亚德里亚霉素及SAHA相比的化合物7

表5.抗前列腺癌细胞化合物7的IC₅₀值

上文表5显示化合物7及SAHA对前列腺癌细胞的2D细胞培养物及3D细胞球体培养物的抗肿瘤效应。在2D培养物中，细胞在完全培养基中培养过夜；在3D细胞球体培养物中，细胞在由GFR-Matrigel^TM(BD Biosciences，目录号356231)及完全培养基(v:v＝1:1)组成的半固体培养基中培养五至七天以允许形成三维细胞球体。该等细胞(在2D培养物中)及细胞球体(在3D培养物中)经测试化合物处理72小时，及随后接受MTT比色分析法。各值代表三个独立实验的平均值。在半固体中形成的细胞球体及对细胞球体的药物影响是使用相差光显微镜来检测。化合物5b在人类前列腺癌细胞的二及三维细胞培养物系统中均具有相似抗增殖活性。

表6.与紫杉醇、长春新碱、亚德里亚霉素及SAHA相比的化合物5b

表7.在人类前列腺癌细胞的二及三维细胞培养物系统中的化合物5b的IC₅₀值

测试化合物7抗3D培养物中生长的PC3前列腺癌细胞的抗肿瘤效应。更特定而言，在半固体中形成的细胞球体及对细胞球体的药物影响是使用相差光显微镜检测。使用4x放大、10x放大、及20x放大分析细胞的3D结构。化合物7以浓度依赖性方式破坏PC3肿瘤的球体结构。化合物7的细胞毒性在3D球体培养物及2D培养物中均强有效。

SDS-PAGE及西方墨点分析

使化合物7、5b、及14a接受按照下文描述程序的SDS-PAGE及西方墨点分析。

更特定而言，最初将处在对数期中的细胞以1x10⁶的密度接种在100mm²盘中。在使用各种浓度测试化合物(即，0.5x、1x、2x、及4 x IC₅₀；IC₅₀化合物指示活体外效能)处理指定时间(即，24及48小时)之后，收集贴附细胞以用于蛋白质萃取物制备。简言之，使用含有1mM DTT、1mM PMSF及蛋白酶抑制剂的细胞裂解试剂CelLytic^TMM(Sigma-Aldrich)裂解细胞用于完整细胞溶胞产物制备。等量溶胞产物(在蛋白质基础上)随后使用SDS-PAGE去分化，涂印在PVDF膜上，与各种特异性一级抗体结合，及随后由适当二级抗体探测。免疫反应谱带是使用ECL方法来检测及在Kodak Bio-MAX MR薄膜上可见。

萃取获自细胞的蛋白质及使其接受西方墨点分析。β肌动蛋白用作内部对照。该去乙酰酶分析法是基于均匀荧光释放分析法。使用底物及各种浓度测试化合物(即，对于化合物7及5b，1nM、10nM、100nM及1000nM；对于化合物14a，0.5x、1x、2x及4 x IC₅₀)培育经纯化重组的HDAC酶24小时。在去乙酰底物的荧光团之后，检测荧光标记。

化合物7以浓度依赖性方式抑制PC3细胞中的HDAC 1至10的活性持续48小时。

在24小时研究中，化合物5b在50nM或更低下诱发HDAC1及HDAC2的抑制及在约100nM诱发HDAC6的抑制。

化合物7、5b及14a均以浓度依赖性方式诱发PC3细胞中的组蛋白及α-微管蛋白乙酰化作用。此外，化合物5b亦诱发在人类BJAB B细胞淋巴瘤及MDA-MD-231乳癌中的组蛋白及α-微管蛋白的乙酰化作用；及化合物14a亦诱发在人类DU145细胞中的组蛋白及α微管蛋白的乙酰化作用。

细胞周期分析法

使化合物7、5b及14a接受按照下文描述程序的细胞周期分析法。

更特定而言，起初将处在对数期中的细胞以1x10⁶的密度接种在100mm²盘中。在使用各种浓度的测试化合物处理指定时间之后，细胞经胰蛋白酶处理，使用PBS清洗，及固定在70％乙醇中。经固定细胞随后使用50μg/mL核糖核酸酶处理及使用50μg/mL碘化丙啶于室温下染色20分钟。藉由BD FACS Calibur流式细胞仪(BD Bioscience)测定DNA含量。对于各个分析法而言，计数10,000个细胞，及使用ModFit LT软件(Verity Sotfware House,Inc.)来计算各个时期的细胞百分数。

使用各种剂量(即，0.5x、1x、2x、4x、及8 x IC₅₀)的化合物7、5b及14a处理人类雄激素依赖性PC3前列腺癌细胞不同时间(即，对于化合物7及5b，24及48小时；对于化合物14a，6、12、24及48小时)。

化合物7、5b及14a全部诱发在雄激素非依赖性PC3前列腺癌细胞中的细胞周期抑制及细胞凋亡。化合物5b亦诱发p21上调。

活体外C6胶质瘤中的细胞增殖

使用化合物7处理大鼠C6胶质瘤细胞系及根据下文描述程序进行分析。

C6胶质瘤细胞系系获自美国菌种保藏中心(American Type CultureCollection)。使用媒剂或者化合物7处理经培养细胞24、48、或72小时及进一步藉由MTT分析法(Liu等人，Toxicol.Res，2015)测量。简言之，于37℃下，使用0.25mg/mL MTT(Sigma)培育细胞1小时及在晶体于DMSO中溶解之后由分光亮度法(μQuant，Bio-TAK)在595nm测量MTT三苯基甲臜。

对于细胞周期分析而言，使用各种浓度化合物7预处理C6胶质瘤细胞系指定时间(参见「细胞周期分析」，前述)。在处理之后，细胞进一步经胰蛋白酶处理，使用PBS清洗，及固定在70％乙醇中。随后使用核糖核酸酶处理经固定细胞及使用50mg/mL碘化丙啶于室温下染色20分钟。指示DNA含量的染色荧光强度是藉由BD FACS Calibur流式细胞仪(BDBiosciences)来测定。对于各个分析而言，计数10,000个细胞，及计算各个时期(即，SubG1、G0至G1、S、或G2-M)中细胞的百分数。

出乎意料，化合物7以浓度依赖性方式抑制细胞增殖及在30μM显示约50％细胞增殖抑制。相对而言，SAHA(一种HDAC6抑制剂)在相同浓度不发挥任何抑制作用。

活体外C6胶质瘤细胞凋亡

使用化合物7处理大鼠C6胶质瘤细胞系及按照下文描述程序进行分析。

细胞凋亡系藉由乳酸脱氢酶(LDH)分析法进行分析。在实验之后离心培养基及使用LDH细胞毒性检测套组(Roche)检测释放至培养基中的LDH活性。可藉由以下等式测定细胞毒性百分数：[(实验组-对照组)/(经氚核-100处理组(100％最大凋亡)-对照组)]x100％。已发现该测试化合物以浓度依赖性方式诱发细胞凋亡。意外地显示在3天后于30μM下诱发约100％细胞凋亡，相比较，藉由SAHA诱发约70％。

活体外人体神经胶母细胞瘤(U87MG或GBM8401)中细胞存活率

使用化合物7处理U87MG人类神经胶母细胞瘤细胞系及根据下文描述程序进行分析。

藉由MTT分析法评定细胞存活率。简言之，在37℃使用0.25mg/mL MTT(Sigma)培养细胞1小时及在晶体于DMSO中溶解之后由分光亮度法(μQuant，Bio-Tek)于595nm测定MTT三苯基甲臜。

化合物7以浓度依赖性方式降低人类神经胶母细胞瘤(U87MG或GBM8401)细胞的存活率及在30μM显示约70％降低细胞存活率。

活体内HDAC抑制分析法

使化合物7接受根据下文描述程序的小鼠活体内HDAC抑制分析法。

更特定而言，在人类PC3异种移植的小鼠中检测化合物7的抗肿瘤效应。采用源自中国台湾实验动物中心的皮下接种5x10⁶个PC3细胞的无特异性病原体雄性无胸腺小鼠(菌株BALB/cAnN.Cg-Foxn1nu/CrlNarl)。随后在无特异性病原体条件下饲养该等小鼠及提供无菌水及食物。当肿瘤体积达到150至200mm³时，将小鼠随机分组及藉由经口投与使用媒剂对照及25mg/kg化合物7处理4、8、及24小时(n＝3)，及随后在指定时间杀死。获得肿瘤样品及于液氮中冷冻再于-80℃储藏。萃取肿瘤蛋白质及接受西方墨点分析。β肌动蛋白用作内部对照。

藉由监测PC3异种移植模型中的p21、p27、组蛋白及α-微管蛋白乙酰化作用，化合物7于25mg/kg下在抑制HDAC方面有效。

活体内抗肿瘤活性分析法

在根据下文描述程序的活体内抗肿瘤活性分析法中测试化合物7及5b。

在具有人类PC3前列腺癌细胞或HCT 116结肠直肠癌细胞的异种移植小鼠中检测该两种测试化合物的抗肿瘤效应。

将5百万个PC3细胞皮下接种至源自中国台湾实验动物中心的无特异性病原体雄性无胸线小鼠(菌株BALB/cAnN.Cg-Foxn1nu/CrlNarl)。随后在无特异性病原体条件下饲养小鼠及提供无菌水及食物。当肿瘤体积达到150至200mm³时，将小鼠随机分组及使用媒剂对照或25/50/100mg/kg的化合物7或5b处理。藉由经口投与，每天投与该化合物一次，5天/周持续2周(n＝6)。一周两次地测量肿瘤体积及体重变化。在实验结束时(首次给药后第25天)，在含CO₂室中使动物安乐死，及收集肿瘤并固定在甲醛中。进行末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记分析法(TUNEL)检测细胞凋亡。使用FITC原位细胞凋亡检测套组(Roche)及荧光显微镜分析肿瘤组织切片。使用经脱氧核糖核酸酶处理的组织作为阳性对照。绿色荧光标记核表示已引发DNA片段化。

在首次给药后第25天，25mg/kg及50mg/kg的化合物7均抑制人类PC3异种移植生长约50％而不引起大幅度体重改变。

在首次给药后第22天，25mg/kg、50mg/kg及100mg/kg的化合物7亦抑制人类结肠直肠HCT116异种移植生长约50至60％，仍然不引起大幅度体重改变。

在首次给药后第29天，50mg/kg的化合物5b抑制人类PC3异种移植生长约70％。出乎意料地，100mg/kg的化合物5b完全抑制人类PC3异种移植生长及在首次给药后第8天至第29天达到肿瘤退化。

化合物7对抗人类神经胶母细胞异种移植的活体内抗肿瘤活性

在异种移植小鼠模型中，在人类神经胶母细胞瘤(U87-MG-LucNeo细胞)中检测化合物7的抗肿瘤效应。使用一种HDAC6抑制剂(即，SAHA)及临床第一线及抗神经胶母细胞瘤药物替莫唑胺(temozolomide)(TMZ)作为对照。

5至6周龄雄性无胸腺裸小鼠获自BioLasco(中国台湾)及维持在无特异性病原体设施中。全部实验程序由台北医科大学动物保护及使用委员会协会核准。使用腹膜腔内注射赛拉嗪(xylazine)(Sigma)及唑拉西泮(zolazepam)(Zoletil 50，Virbac)麻醉各裸小鼠，及随后固定在立体定位架中。如先前所述(Liu等人，Toxicol.RES.，2015)，将表现荧光酶的U87细胞(含于PBS中的10⁶个细胞)颅内植入右纹状体。植入一周后，使用TMZ(50mg/kg，p.o.)、SAHA(150mg/kg，p.o.)或化合物7(50至100mg/kg，p.o.)处理裸小鼠及在包括媒剂组的4组中分析其存活率。存活率分析显示化合物7与TMZ相比意外地较长地延长存活。

原位肿瘤尺寸测量

本实验中使用如上文所述的经药物或媒剂处理的异种移植裸小鼠的另一平行组处理。

生物发光IVIS 2000成像系统用于测量如先前描述(Liu等人，Toxicol.Res.，2015)的体内肿瘤尺寸。成像分析揭示低剂量的化合物7(25mg/kg)与较高剂量的SAHA(150mg/kg)或相同剂量的TMZ(25mg/kg)相比降低肿瘤尺寸更多。

其他实施例

无需进一步详细描述，据信熟习此项技术者可基于上文描述，将本发明运用至其完整程度。本文列举的全部公开案以引用的方式并入本文中。

在本说明书中揭示的全部特征可以任何组合方式组合。在本说明书中揭示的各个特征可由用于相同、等效、或相似目的的替代特征替代。由此，除非另作明确说明，否则揭示的各个特征仅是一系列等效或相似特征的一实例。

根据上文描述，熟习此项技术者可轻易确定本发明的基本特征，及在不脱离其主旨及范围下，可制作本发明的各种变化及改良以使其适应各种用途及条件。例如，亦可制备及筛选结构相似于本发明化合物的化合物针对抗吲哚胺2,3-二加氧酶(IDO)/色胺酸2,3-二加氧酶(TDO)的抑制活性及治疗IDO/TDO相关联病状。由此，其他实施例亦在申请专利范围内。

Claims

1.一种化合物或其医药上可接受的盐，其选自以下化合物：

2.根据权利要求1的化合物或其医药上可接受的盐，其中所述化合物是

3.一种化合物或其医药上可接受的盐，其中该化合物是选自以下化合物：

4.一种医药组合物，其包含根据权利要求1至3中任一项的化合物及医药上可接受的载剂。

5.一种根据权利要求1至3中任一项的化合物的用途，其用于制备治疗癌症的药剂。

6.根据权利要求5的用途，其中该癌症是胶质瘤、前列腺癌、结肠直肠癌、乳癌、非小细胞肺癌、胃癌、口腔癌、鼻咽癌、T细胞淋巴瘤、或B细胞淋巴瘤。

7.根据权利要求6的用途，其中该癌症是胶质瘤、前列腺癌、或结肠直肠癌。

8.根据权利要求5的用途，其中该化合物是经口投与给有需要的个体。

9.根据权利要求8的用途，其中该化合物是每天投与一次。