CN106967224B

CN106967224B - 酒糟富里酸及其提取方法和应用

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Publication number: CN106967224B
Application number: CN201710257952.5A
Authority: CN
Inventors: 赵萍; 芮文君; 邱悦; 王欢; 杨恒; 刘金涛
Original assignee: Lanzhou University of Technology
Current assignee: Lanzhou University of Technology
Priority date: 2017-04-19
Filing date: 2017-04-19
Publication date: 2019-09-20
Anticipated expiration: 2037-04-19
Also published as: CN106967224A

Abstract

本发明提供了一种提取酒糟富里酸的方法。本发明首先调节酒糟为碱性，然后顺次进行热提取、酸析、沉淀和浓缩处理，提取得到酒糟富里酸。由实施例的实验结果可知，本发明提供的提取方法能够成功的从酒糟中提取出酒糟富里酸，并且酒糟富里酸的得率为4.2～6.25％。此外，本发明得到的酒糟富里酸为微晶态物质，可溶于水、酸和碱，微溶于乙醇，不溶于氯仿和丙酮出现明显分层现象；除了能够抑制大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、硫色镰刀菌和互隔交链孢霉，还能够抑制乳腺癌细胞MAD‑231增殖。

Description

酒糟富里酸及其提取方法和应用

技术领域

本发明涉及富里酸提取技术领域，尤其涉及酒糟富里酸及其提取方法和应用。

背景技术

酒糟是酒醅发酵完成后再经蒸馏出酒而残留的混合固形物，酒糟中有许多未利用的蛋白质、淀粉和脂肪等成分。目前，我国酒厂产生的固体酒糟大都作为烧柴、饲料或者农肥等来使用，然而这些利用并没有做到物尽其用。鲜酒糟因为含水量较高，所以在利用方面会提高干燥和运输等成本，从而导致大量酒糟被随意丢弃或焚烧。鲜酒糟如果不及时加以处理，易发霉变质，不仅浪费了宝贵的资源，还会污染周围环境。另外，由于酿酒发酵过程中产生了复杂的生化变化，所以酒糟中也产生了大量的新成分，如核糖核酸、嘌呤、嘧啶和其他一些次级代谢等产物，为酒糟的高值化利用提供了条件。

腐植酸中颜色最浅和分子量最低的组分称为富里酸(Fulvic acid，简称FA)，是人类已知的最好天然电解质，因为其功能基团比较密集、溶解性好、渗透力强，所以在某些生物活性方面高于其他组分的腐植酸。富里酸的形成是由微生物的分泌物和植物性化学物质相结合且在腐殖化(分解)过程中不断进行结构重组而产生的一种分子结构极其复杂的有机物。

现有技术中，富里酸主要是通过从自然界中肥沃的堆肥土壤中的腐殖质中进行提取，含量极其稀少。目前，尚未有成功从酒糟中提取出富里酸的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种酒糟富里酸及其提取方法和应用，本发明能够成功的从酒糟中提取出酒糟富里酸，不仅拓展了富里酸的提取途径，增大富里酸的来源和产量，同时以酒糟为原料，节约资源且减少了环境污染。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种提取酒糟富里酸的方法，包含以下步骤：

调节酒糟水匀浆为碱性，得到碱性酒糟液；

对所述碱性酒糟液进行热提取，对提取后的酒糟混合物进行离心；

调节所述离心得到的上清液的pH值为1～3，进行沉淀处理；

对所述沉淀处理得到的上清液进行浓缩处理，得到酒糟富里酸。

优选的，所述酒糟水匀浆中酒糟和水的质量比为1:(2.5～15)。

优选的，所述酒糟水匀浆中还添加有焦磷酸钠；

所述焦磷酸钠在酒糟水匀浆中的浓度为0.1～10mmol/L。

优选的，所述热提取在超声条件下进行，所述超声的功率为220～260W；

所述热提取的温度为35～45℃；

所述热提取的时间为10～30min。

优选的，所述离心的速率为3700～4100r/min，离心的时间为10～20min。

优选的，所述浓缩处理为减压浓缩，所述减压浓缩的温度为50～60℃，压力为-0.06～-0.08MPa。

本发明提供了一种上述技术方案所述的提取方法得到的酒糟富里酸，表面呈多孔状，为微晶态结构。

本发明提供了一种上述技术方案所述的酒糟富里酸在抑制细菌和真菌中的应用，所述细菌包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌；

所述真菌为半知菌亚门类真菌。

优选的，所述真菌包括硫色镰刀菌和互隔交链孢霉。

本发明提供了一种上述技术方案所述的酒糟富里酸在制备抑制乳腺癌细胞MAD-231药物中的应用。

本发明提供了一种提取酒糟富里酸的方法。本发明首先调节酒糟为碱性，然后顺次进行热提取、酸析、沉淀和浓缩处理，提取得到酒糟富里酸。由实施例的实验结果可知，本发明提供的提取方法能够成功的从酒糟中提取出酒糟富里酸，并且酒糟富里酸的得率为4.2～6.25％。此外，本发明得到的酒糟富里酸为微晶态物质，可溶于水、酸和碱，微溶于乙醇，不溶于氯仿和丙酮出现明显分层现象；除了能够抑制大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、硫色镰刀菌和互隔交链孢霉，对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、真菌为硫色镰刀菌和互隔交链孢霉的最低抑菌浓度分别为1.605g/L、1.605g/L、1.284g/L、2.257g/L和3.210g/L；此外，还能够抑制乳腺癌细胞MAD-231增殖，可用于制备抑制乳腺癌细胞MAD-231增殖的药物。

附图说明

图1为固液比对酒糟富里酸得率的影响；

图2为pH值对酒糟富里酸得率的影响；

图3为超声功率对酒糟富里酸得率的影响；

图4为超声时间对酒糟富里酸得率的影响；

图5为超声温度对酒糟富里酸得率的影响；

图6为酒糟富里酸对细菌的抑制效果；

图7为酒糟富里酸对真菌的抑制效果。

具体实施方式

本发明提供了一种提取酒糟富里酸的方法，包含以下步骤：

调节酒糟水匀浆为碱性，得到碱性酒糟液；

调节所述离心得到的上清液的pH值为1～3，进行沉淀处理；

本发明调节酒糟水匀浆为碱性，得到碱性酒糟液。本发明对所述酒糟的种类没有任何的特殊要求，具体的可以为白酒糟或者红酒糟。在本发明实施例中，所述酒糟为甘肃金徽酒业集团提供的白酒糟，水分含量为63.67wt％。

在本发明中，所述酒糟水匀浆中酒糟和水的质量比优选为1:(2.5～15)，更优选为1:(5～10)。本发明优选向所述酒糟水匀浆中加入焦磷酸钠，然后再进行pH值的调整；所述焦磷酸钠在酒糟水匀浆中的浓度优选为0.1～10mmol/L，更优选为4～5mmol/L。在本发明中，所述焦磷酸钠能够促进富里酸在碱性环境中的溶出，提高酒糟富里酸的溶出效率并最终提高酒糟富里酸的得率。本发明优选向酒糟水匀浆中加入焦磷酸钠后再对其pH值进行调整。

现有技术中的原料酒糟均为酸性，本发明采用碱性物质调节酒糟水匀浆为碱性，具体的向酒糟水匀浆中加入碱性物质进行调整。在本发明中，所述碱性物质优选为碱金属氢氧化物，更优选以碱金属氢氧化物水溶液的形式使用；所述碱金属氢氧化物优选为氢氧化钠或氢氧化钾；所述碱金属氢氧化物水溶液的浓度优选为0.1～1.5mol/L，更优选为0.5～1mol/L。

在本发明中，所述碱性酒糟液的pH值优选为8～13，更优选为10～11。在本发明具体实施例中，酒糟水匀浆加入焦磷酸钠后无明显变化，加入碱液后颜色明显加深，接近深棕色，且pH值越大颜色越深。

得到所述碱性酒糟液后，本发明对所述碱性酒糟液进行热提取，对提取后的酒糟混合物进行离心。在本发明中，所述热提取具体的为：对碱性酒糟液进行加热处理。在本发明中，所述热提取优选为超声热提取；所述超声的功率优选为220～260W，更优选为240～250W；所述热提取的温度优选为35～45℃，更优选为40℃；所述热提取的时间优选为10～30min，更优选为15～25min。在本发明中，所述热提取能够更进一步的促进酒糟富里酸的溶出。

所述热提取后，本发明对提取后的酒糟混合物进行离心。在本发明中，所述离心的离心速率优选为3700～4100r/min，更优选为3900～4000r/min；离心时间优选为10～20min，更优选为15min。

所述离心后，本发明优选对离心混合物进行抽滤，得到上清液。在本发明中，所述抽滤的真空度优选为-0.06～-0.08MPa，更优选为-0.07MPa；所述抽滤在室温下进行。

本发明调节所述离心得到的上清液的pH值为1～3，进行沉淀处理。在本发明具体实施例中，本发明采用酸液调节所述上清液的pH值为1～3，具体的向所述上清液中逐渐滴加酸液进行调整。在本发明中，所述酸液优选为无机酸，更优选为盐酸、硝酸或硫酸；所述酸液的浓度优选为0.1～1.5mol/L，更优选为0.5～1mol/L。在本发明实施例中，向上清液中加入酸液后，颜色明显变浅，接近黄棕色，且有絮状物出现。在本发明中，对所述上清液进行pH值调节之后沉淀处理即开始进行，继续将得到的酸性混合液进行静置沉淀即可。在本发明中，所述沉淀处理的温度优选为8～15℃，更优选为10～12℃；时间优选为10～15h，更优选为12～13h。

所述沉淀处理后，本发明对沉淀处理得到的上清液进行浓缩处理，得到酒糟富里酸。本发明优选对所述静置沉淀后的混合物进行离心，得到沉淀和上清液。在本发明实施例中，上述技术方案得到的沉淀作为酒糟废弃物可按照现有技术中的常规处理方式进行处理，具体的如作为牛饲料使用。在本发明中，可具体由上述技术方案所述的离心条件独立设置此处的所述离心方案，在此不再进行赘述。

在本发明中，所述浓缩处理优选为减压浓缩；所述减压浓缩的温度优选为50～60℃，更优选为55℃，压力优选为-0.06～-0.08MPa，更优选为-0.07MPa。本发明对所述浓缩的时间没有任何的特殊要求，优选的浓缩至12～18倍浓度时停止即可，更优选为15倍。在本发明实施例中，所述浓缩处理能够去除溶剂和溶剂中附带的一些挥发性物质，浓缩前的液体呈清亮的棕黄色，浓缩后变为深棕色偏黑的膏状物。

本发明优选对所述浓缩处理得到的浓缩产物进行干燥处理，得到干燥的酒糟富里酸。在本发明中，所述干燥处理优选的包含顺次进行的常压干燥过程和真空冷冻干燥过程。在本发明中，所述常压干燥的温度优选为-30～-10℃，更优选为-20℃，时间优选为45～50h，更优选为48h；所述真空冷冻干燥的真空度优选为0～0.001MPa，更优选为0～0.0001MPa；温度优选为-45～-35℃，更优选为-40℃。在本发明实施例中，真空冷冻干燥后的酒糟富里酸为浅棕色粉末，类似于棕色泥土的颜色。

本发明提供了一种上述技术方案所述的提取方法得到的酒糟富里酸，表面呈多孔状，为微晶态结构。本发明得到的酒糟富里酸为无规则多孔状物质，最大的不规则长方形孔隙的尺寸约为860nm×100nm,最小的不规则长方形孔隙的尺寸约为80nm×20nm；圆形不规则孔的直径尺寸约为20～140nm。

本发明提供了一种上述技术方案所述的酒糟富里酸在抑制细菌和真菌中的应用，所述细菌包括大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌；所述真菌为半知菌亚门类真菌，优选的包括硫色镰刀菌和互隔交链孢霉。在本发明中，酒糟富里酸对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为1.605g/L、1.605g/L和1.284g/L。在本发明中，酒糟富里酸对真菌为硫色镰刀菌和互隔交链孢霉的最低抑菌浓度分别为2.257g/L和3.210g/L。

下面结合实施例对本发明提供的酒糟富里酸及其提取方法和应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。

实施例1

取定量的甘肃金徽酒业集团提供的白酒糟(水分含量为63.67wt％)于250mL磨口锥形瓶中，加50mL蒸馏水摇匀，继续加入1mL 0.5mol/L的焦磷酸钠后再用1mol/L的NaOH调节pH值。充分摇匀后放入温度为40℃水浴锅中提取20min，以3900r/min离心15min，取上清液再抽滤(-0.07MPa，室温)，用1mol/LHCl调节滤液pH至2。以10℃的温度冷沉12h后以3900r/min速率离心15min，收集上清液即为DFA提取液。在55℃、-0.07MPa下进行旋蒸浓缩，浓缩后在-20℃下冷冻48h，继续放入冷冻干燥机中在-40℃、0.0001MPa下进行干燥，得到酒糟富里酸(DFA)。

实施例2

以白酒糟和蒸馏水的质量比为固液比，控制pH值为11，按照实施例1的方法提取酒糟富里酸。本实施例分别控制固液比为1:2.5、1:5、1:7.5、1:10、1:12.5和1:15，计算酒糟富里酸得率，结果如图1所示，图1为固液比对酒糟富里酸得率的影响。

由图1的结果可知，当酒糟和水的质量比为1:(2.5～15)时，酒糟富里酸的得率为4.1～5.3％，且随着水量的增加，DFA的提取率也逐渐增加，当固液比为1:7.5时，DFA得率最高，然后逐渐趋于平缓。

实施例3

按照实施例1的方法提取酒糟富里酸，控制固液比为1:7.5，分别控制碱性酒糟液的pH值为8、9、10、10.5、11、11.5、12、12.5，计算酒糟富里酸得率，结果如图2所示，图2为pH值对酒糟富里酸得率的影响。

由图2的结果可知，当pH值为8～12.5时，酒糟富里酸的得率为4.9～5.65％。随着pH值的增加，DFA的提取率先增加后降低，当pH值为11时，DFA得率最高。当pH值大于11时，DFA得率下降是由于碱溶物达到饱和之后，在酸沉时析出产生更多沉淀，从而影响了DFA的得率。

实施例4

按照实施例1的方法提取酒糟富里酸，同时控制pH值为11、固液比为1:7.5，平行控制热提取条件为：40℃水浴锅中提取20min；在40℃、240W的超声波中提取20min。计算酒糟富里酸得率：其中正常热提取条件下得率为4.16％，微波热提取条件下的得率为5.21％。本实施例表明，超声波提取利用超声空穴破坏细胞壁从而增加溶剂穿透力，能够辅助提取。

实施例5

按照实施例4的超声方法提取酒糟富里酸，分别超声功率为：240W、300W、360W、420W、480W、540W和600W，计算酒糟富里酸得率，结果如图3所示，图3为超声功率对酒糟富里酸得率的影响。

由图3的结果可知，当超声功率为240～600W时，酒糟富里酸的得率为4.1～5.3％。随着超声功率的增加，DFA的提取率先增加后降低，当超声功率为360W时，DFA得率最高。当超声功率大于360W时，DFA得率下降是由于较高的超声功率促进了溶液中各成分的相互作用，发生聚合氧化等反应从而降低提取率。

实施例6

按照实施例4的超声方法提取酒糟富里酸，分别超声时间为：10min、20min、30min、40min、50min、60min，计算酒糟富里酸得率，结果如图4所示，图4为超声时间对酒糟富里酸得率的影响。

由图4的结果可知，当超声时间为10～60min时，酒糟富里酸的得率为5.5～5.95％。随着超声时间的增加，DFA的提取率先增加后降低，当超声时间为30min时，DFA得率最高。当超声功率大于30min时，DFA得率下降是由于随着时间的延长，碱溶物发生降解、氧化或相互之间缩合等反应的几率也相应增高，所以酸沉时会产生更多沉淀从而影响提取率，而且过长的超声时间也可能使酒糟中的其他物质溶出使DFA含更多杂质，从而影响得率。

实施例7

按照实施例4的超声方法提取酒糟富里酸，分别超声温度为：20℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃，计算酒糟富里酸得率，结果如图5所示，图5为超声温度对酒糟富里酸得率的影响。

由图5的结果可知，当超声温度为20～60℃时，酒糟富里酸的得率为5.9～6.25％。随着超声温度的增加，DFA的提取率先增加后降低，当超声温度为45℃时，DFA得率最高。当超声温度大于45℃时，DFA得率下降是由于较高的超声温度促进了溶液中各成分之间的相互作用以及分解缩合氧化等反应使提取率下降，或是高温不利于DFA的稳定，从而影响了提取率。

实施例8

按照实施例1的方法提取酒糟富里酸，控制固液比为1:7.5，碱性酒糟液的pH值为11，超声功率为360W，超声时间为30min，超声温度为45℃。

菌种活化与菌悬液制备

牛肉膏蛋白胨培养基的配制：牛肉膏3g，蛋白胨10g，琼脂20g，氯化钠5g，加水至1000mL，调节pH值7.3。121℃的条件下灭菌20min。

PDA培养基配制：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂20g，加水至1000mL，pH值自然。121℃的条件下灭菌20min。

在无菌的条件下，用划线的方法将供试菌种接入到斜面培养基上。大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)接入到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上，放入培养箱中，37℃培养24h；接入硫色镰刀菌(Fusarium sulphureum)和互隔铰链孢霉(Alternaria alternate)到PDA培养基斜面上，放入培养箱中28℃培养48h，重复上述步骤2到3次，选出生长良好的菌进行实验。在本实施例中，所述大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)、枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、硫色镰刀菌(F.sulphureum)和互隔交链孢霉(A.alternate)均由兰州理工大学生命科学与工程学院实验中心提供。

将3种供试细菌分别用200mL无菌水洗脱至已灭菌的三角瓶中，用血细胞计数板计数其中含菌量，然后分别从中吸取1mL含菌液转移至装有9mL无菌水的试管中，依次稀释至菌悬液含菌量为10⁶CFU/mL，分别得到大肠杆菌(E.coli)、枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)的菌悬液。

DFA对细菌的抑菌试验：

采用滤纸片法做细菌抑菌试验，将融化并冷却至50℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基倒入培养皿内约20mL，待琼脂凝固后每个平板加入0.2mL浓度为10⁶CFU/mL的菌悬液，使用涂布平板法制成含菌平板。将灭菌后的滤纸片(5mm)浸泡于配置好的不同浓度的DFA溶液中10min后取出，每个培养皿内用无菌镊子放入蘸有同一浓度抑菌溶液的4片大小相同的滤纸片。对照组为蒸馏水浸泡的滤纸片，三次重复。将培养皿放入37℃恒温培养箱中培养16-18h，之后用游标卡尺使用十字交叉法测量抑菌圈直径(mm)，并计算其平均值。以DFA浓度为横坐标，菌落直径平均值为纵坐标制作曲线图，结果如表1和图6所示，图6为酒糟富里酸对细菌的抑制效果。由表1和图6可知，DFA在所试浓度范围内对大肠杆菌(E.coli)、枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、金黄色葡萄球菌(S.aureus)的生长都有显著抑制作用，随着其浓度的提高，抑菌圈直径明显增大。三种细菌在DFA最小浓度下(10g/L)的生长已受到显著抑制(P<0.05)；在DFA的所试浓度内大肠杆菌(E.coli)的平均抑菌圈最大，当DFA浓度为60g/L时抑菌圈直径达到了11.53mm，其次为金黄色葡萄球菌(S.aureus)和枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。

DFA对真菌的抑菌试验：

取等量不同浓度的DFA溶液加入到PDA培养基中，使最终培养基体积调整到20mL并倒入培养皿中。然后从培养7d的真菌菌落边缘取直径为5mm的菌块，分别倒置培养在含有不同浓度DFA的PDA培养基中，每个培养皿中放置4个真菌琼脂块。放入28℃下培养24h后用游标卡尺测量菌落直径(mm)，并计算其平均值，并以DFA浓度为横坐标，菌落直径平均值为纵坐标制作曲线图，结果如表1和图7所示，图7为酒糟富里酸对真菌的抑制效果。由表1和图7可知，DFA对硫色镰刀菌(F.sulphureum)和互隔铰链孢霉(A.alternate)的生长产生显著抑制，随着其浓度的提高，两种真菌的菌落直径明显减小。在没有添加DFA的培养基中硫色镰刀菌(F.sulphureum)的菌落直径达到了16.01mm，而随着DFA浓度的提高，其菌落直径明显减小，在DFA浓度为1g/L时即可显著抑制硫色镰刀菌(F.sulphureum)的生长(P<0.05)，且随着浓度的不断提高，菌落直径一直在下降，当浓度为3g/L时菌落直径平均仅为5.08mm。互隔铰链孢霉(A.alternate)的生长活性相对较低，在无DFA的培养基中菌落直径仅为9.54mm，而随着DFA浓度的提高，其生长活性也在不断下降，当浓度高于0.5g/L时即可显著抑制互隔铰链孢霉(A.alternate)的生长(P<0.05)。在DFA所试浓度内对硫色镰刀菌(F.sulphureum)的抑制活性相对互隔铰链孢霉(A.alternate)更高。

表1酒糟富里酸的抑菌活性

注：表1中数值为平均值a-e为失拟项P<0.05水平下的显著水平

最小杀菌浓度(MBC)的测定：

分别将培养24h的三种供试细菌悬浮液浓度调整到10⁶CFU/mL做细菌最小杀菌浓度实验。使用培养7d的硫色镰刀菌(F.sulphureum)和互隔铰链孢霉(A.alternate)做真菌最小抑菌浓度的实验，取两种真菌的孢子，悬浮在含有0.05％吐温-80的无菌水中，使用4层纱布过滤去除菌丝。将最终孢子浓度调整到10⁶个/mL。将0.3mL各种菌悬液加入到含有不同浓度DFA溶液的PDA培养基上，使用涂布棒涂布均匀。细菌在37℃恒温培养箱中培养18h，真菌在28℃下培养24h后观察菌落生长状态。以抑制99％以上的微生物的浓度作为该微生物的最小杀菌浓度，结果如表2所示。

表2 DFA的最小杀菌浓度

菌种	E.coli	S.aureus	B.subtilis	F.sulphureum	A.alternate
						DFA浓度(g/L)	1.605	1.605	1.284	2.257	3.210

根据表2中DFA对五种菌的最小杀菌浓度可知，DFA对于细菌的抑制活性要明显高于真菌，且对枯草芽孢杆菌的抑制活性最强。在1.284g/L时即可完全抑制枯草芽孢杆菌的生长，而金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的完全抑制浓度需达到1.605g/L。对于真菌，硫色镰刀菌(F.sulphureum)的抑制活性强于互隔铰链孢霉(A.alternate)。

由以上实施例可知，本发明提供了一种提取酒糟富里酸的方法。本发明首先调节酒糟为碱性，然后顺次进行热提取、酸析、沉淀和浓缩处理，提取得到酒糟富里酸。由实施例的实验结果可知，本发明提供的提取方法能够成功的从酒糟中提取出酒糟富里酸，并且酒糟富里酸的得率为4.2～6.25％。此外，本发明得到的富里酸为微晶态物质，可溶于水、酸和碱，微溶于乙醇，不溶于氯仿和丙酮出现明显分层现象；除了能够抑制大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、硫色镰刀菌和互隔交链孢霉，对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、真菌为硫色镰刀菌和互隔交链孢霉的最低抑菌浓度分别为1.605g/L、1.605g/L、1.284g/L、2.257g/L和3.210g/L；此外，还能够抑制乳腺癌细胞MAD-231增殖。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种提取酒糟富里酸的方法，包含以下步骤：

调节酒糟水匀浆为碱性，得到碱性酒糟液；

调节所述离心得到的上清液的pH值为1～3，进行沉淀处理；

对所述沉淀处理得到的上清液进行浓缩处理，得到酒糟富里酸；

所述酒糟水匀浆中还添加有焦磷酸钠；所述焦磷酸钠在酒糟水匀浆中的浓度为0.1～10mmol/L；

所述热提取在超声条件下进行，所述超声的功率为220～260W；所述热提取的温度为35～45℃；所述热提取的时间为10～30min；

所述碱性酒糟液的pH＝11；

所述酒糟水匀浆中酒糟和水的质量比为1:(2.5～15)。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述离心的速率为3700～4100r/min，离心的时间为10～20min。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述浓缩处理为减压浓缩，所述减压浓缩的温度为50～60℃，压力为-0.06～-0.08M Pa。