CN106943430A - 顺铂在治疗高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌中的应用 - Google Patents

顺铂在治疗高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN106943430A
CN106943430A CN201710191073.7A CN201710191073A CN106943430A CN 106943430 A CN106943430 A CN 106943430A CN 201710191073 A CN201710191073 A CN 201710191073A CN 106943430 A CN106943430 A CN 106943430A
Authority
CN
China
Prior art keywords
mdsc
carcinoma
urinary bladder
cancer
platinum
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201710191073.7A
Other languages
English (en)
Inventor
刘志宏
伍科
贺银燕
李明清
周文洁
王仁杰
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai First Peoples Hospital
Original Assignee
Shanghai First Peoples Hospital
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai First Peoples Hospital filed Critical Shanghai First Peoples Hospital
Priority to CN201710191073.7A priority Critical patent/CN106943430A/zh
Publication of CN106943430A publication Critical patent/CN106943430A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
    • G01N33/5047—Cells of the immune system
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/70—Mechanisms involved in disease identification
    • G01N2800/7023—(Hyper)proliferation
    • G01N2800/7028—Cancer

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明属医药技术领域，涉及顺铂的用途，具体涉及顺铂用于高水平G‑MDSC膀胱癌治疗中的用途和方法。经体外实验和体内动物试验显示，膀胱癌癌灶中G‑MDSC较癌旁对照组中明显增加，且CD8+T相应减少，进而诱导形成免疫抑制微环境，利于膀胱癌的建立和生长。顺铂化疗可显著抑制因G‑MDSC异常增加所致的膀胱癌进展，可进一步用于高水平G‑MDSC膀胱癌治疗。

Description

顺铂在治疗高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌中的 应用
技术领域
本发明属医药技术领域，涉及顺铂的用途，具体涉及顺铂在治疗高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌中的应用。经体外实验和体内动物试验显示，顺铂能有效减少膀胱癌组织中髓系粒细胞来源免疫抑制细胞(Granulocyte-myeloid-derived suppressorcell,G-MDSC)，进而增强肿瘤杀伤活性的CD8+效应T细胞的数量与活性，杀伤膀胱癌细胞。顺铂可明显减弱膀胱癌癌灶中免疫抑制作用，明显抑制膀胱癌细胞生长，促进膀胱癌细胞凋亡，进一步可用于膀胱癌治疗。
背景技术
膀胱癌是严重危害人类健康的常见肿瘤之一，其发病率呈逐年增高趋势。目前，男性中膀胱癌是继前列腺癌、肺癌和结、直肠癌之后，发病率排第四位的恶性肿瘤。中国癌症统计数据显示，2015年中国大陆新发膀胱癌8.05万例，死亡3.29万例，居泌尿系统恶性肿瘤首位。膀胱癌可分为非肌层浸润性膀胱non-muscle-invasive BC(NMIBC)和肌层浸润性膀胱癌muscle-invasive BC(MIBC)；NMIBC与MIBC的五年生存率为90％与60％。一旦发生远处转移，近80％的患者五年内死亡。目前，膀胱癌治疗方式主要为手术治疗与化学治疗，手术方式与化疗药物的革新对延长膀胱癌患者生存时间效果有限，因此寻找膀胱癌治疗的新靶点，阻止膀胱癌进程，是膀胱癌防治工作中亟待解决的问题。
膀胱癌的发生发展与其免疫微环境密不可分。膀胱癌细胞的侵袭与生长，造成局部正常组织的大量破坏，大量促炎细胞因子和趋化因子释放，继而招募包括NK细胞，巨噬细胞以及T细胞浸润。通过与肿瘤细胞表面相应分子结合，从而对肿瘤细胞进行识别，继而发挥抗肿瘤作用。除了直接的细胞毒作用外，还分泌多种效应分子，例如IFN-γ，其对抗肿瘤免疫反应的发生具有关键作用。其中，CD8+ T细胞通过T细胞受体(T cell receptor,TCR)有效识别和杀伤肿瘤，同时产生大量IFN-γ等效应分子，发挥抗肿瘤作用。研究提示，特异性地删除野生型小鼠的CD8+ T细胞，肿瘤会快速生长。但是，大量临床数据显示：膀胱癌组织处于免疫抑制环境，浸润的免疫效应细胞表现为不同程度的免疫功能低下，甚至严重缺陷。其中，诱导免疫抑制细胞增殖、分化以及向肿瘤部位募集是膀胱癌细胞免疫逃 逸的重要方式。免疫抑制细胞在癌灶中的大量蓄积，加速了膀胱癌的进程，严重危害患者健康。
髓系来源免疫抑制细胞是近年来研究发现的一类具有免疫调节功能的免疫细胞，研究表明，多种肿瘤患者肿瘤组织内出现MDSC的蓄积，这群细胞肿瘤的免疫逃逸机制中发挥重要作用。MDSC主要包括单核细胞来源的MDSC(M-MDSC)与粒细胞来源的MDSC(G-MDSC)。MDSC可以通过产生精氨酸和诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)以及产生大量活性氧(ROS)等途径来发挥免疫抑制作用，抑制效应T细胞的功能，其中，G-MDSC作用尤为明显。近年来关于肿瘤免疫和免疫逃逸的研究发现，免疫逃逸可能是影响膀胱癌治疗疗效的重要原因。由于MDSC在机体免疫调控中的负向作用，靶向MDSC进行肿瘤免疫治疗是膀胱癌治疗的新策略。
顺铂自上世纪70年代被发现可以抑制肿瘤细胞生长后，就广泛应用于癌症治疗，在化疗药物中占有重要位置，是目前膀胱癌一线化疗方案中的主要药物。然而，顺铂的副作用较强，主要表现在：1)恶心、呕吐等胃肠道反应。2)以肾小管为主的肾毒性作用。3)以听神经损害为主的神经毒性作用。4)白细胞和/或血小板下降等骨髓抑制作用。因此，根据患者的特点选择合适的药物是十分必要的。
基于现有技术的现状，本申请的发明人拟通过实验研究顺铂在高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌治疗膀胱癌中的作用，进一步评估顺铂在治疗免疫功能异常所致膀胱癌进展中的潜在价值，提供顺铂用于制备高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌治疗的用途和方法，为膀胱癌的临床治疗提供新方法和新思路。
发明内容
本发明的第一个目的是针对现有技术中的不足，提供顺铂的新用途。
本发明的第二个目的是针对现有技术中的不足，提供一种用于非治疗目的降低膀胱癌内G-MDSC水平的方法。
本发明的第三个目的是针对现有技术中的不足，提供检测G-MDSC含量的试剂的用途。
本发明的第四个目的是针对现有技术中的不足，提供一种检测受试者健康状态、监测膀胱癌进程或评估膀胱癌病因的方法
本发明的第五个目的是针对现有技术中的不足，提供一种治疗高水平G-MDSC膀胱癌 的药物组合。
本发明的第六个目的是针对现有技术中的不足，提供如上所述药物组合的用途。
为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：
顺铂在制备治疗高水平G-MDSC膀胱癌的药物中的用途。
进一步，所述药物杀伤膀胱癌组织中的G-MDSC，维持CD+8T细胞的肿瘤杀伤作用。
进一步，所述药物抑制因G-MDSC高水平而引起的膀胱癌进程。
为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：
一种用于非治疗目的降低膀胱癌内G-MDSC水平的方法，给对象施用顺铂。
为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：
检测G-MDSC含量的试剂在制备诊断膀胱癌、膀胱癌进程或膀胱癌病因的试剂盒中的应用
进一步，所述诊断包括如下步骤：
(1)检测膀胱癌癌灶及癌旁G-MDSC含量；
(2)将膀胱癌癌灶的G-MDSC含量与癌旁G-MDSC含量进行对比，比较膀胱癌癌灶的G-MDSC含量与癌旁G-MDSC含量的差异，根据含量的差异诊断膀胱癌、评估膀胱癌进程或评估膀胱癌病因。
为实现上述第四个目的，本发明采取的技术方案是：
一种检测受试者健康状态、监测膀胱癌进程或评估膀胱癌病因的方法，其包括如下步骤：
(1)检测膀胱癌癌灶及癌旁G-MDSC含量；
(2)将膀胱癌癌灶的G-MDSC含量与癌旁G-MDSC含量进行对比，比较膀胱癌癌灶的G-MDSC含量与癌旁G-MDSC含量的差异，根据含量的差异判断受试者健康状态、监测膀胱癌进程或评估膀胱癌病因。
为实现上述第五个目的，本发明采取的技术方案是：
一种治疗高水平G-MDSC膀胱癌的药物组合，所述药物组合物包括顺铂及抗Gr-1抗体。
为实现上述第六个目的，本发明采取的技术方案是：
如上所述药物组合在制备具有高水平G-MDSC膀胱癌的药物中的应用。
进一步，所述药物减少膀胱癌癌灶中G-MDSC的含量，促进CD8+ T细胞的肿瘤杀伤功能。
本发明中通过体外实验研究顺铂对G-MDSC以及CD8+ T细胞的作用，进一步通过体内试验评估过顺铂在治疗膀胱癌的价值；提供了一种顺铂用于制备高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌免疫治疗药物的用途。结果显示：1)膀胱癌患者外周血中CD8+ T细胞较肾囊肿患者外周血中CD8+ T细胞增多，但是膀胱癌癌灶中较膀胱癌周边正常组织CD8+ T细胞明显减少，提示，膀胱癌癌灶中CD8+ T细胞免疫作用受限；2)相对于正常膀胱组织，膀胱癌癌灶中G-MDSC明显增多，该趋势与CD8+ T细胞减少有强相关性；3)顺铂联合抗G-MDSC抗体耗竭膀胱癌癌灶中G-MDSC水平导致膀胱癌细胞增殖能力明显减弱，膀胱癌进程减缓。提示该联合用药可进一步用于膀胱癌的免疫治疗治疗。
具体而言，本发明公开了一种通过顺铂减少膀胱癌肿瘤微环境中G-MDSC，进而发挥抑制G-MDSC肿瘤中异常增加引起的膀胱癌癌灶中免疫抑制作用，可用于制备治疗高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌的药物。
本发明收集膀胱癌患者的癌灶组织和癌旁对照组织，结果显示膀胱癌患者癌灶组织较癌旁对照组织G-MDSC明显增加，但是CD8+T细胞，二者之间存在明显的负相关性(如图1所示)。随后通过体外实验发现顺铂能抑制膀胱癌细胞T24增殖，并且能促进其凋亡(如图2所示)。除此之外，顺铂处理外周血免疫细胞后，G-MDSC与M-MDSC均明显减少，并且MDSC分化的下游细胞，DC细胞，巨噬细胞和粒细胞均明显降低(如图3所示)。进一步研究发现CD8+T细胞能促进膀胱癌细胞凋亡，而G-MDSC与CD8+T细胞按照1：1比例共培养后能明显抑制CD8+T细胞的促凋亡能力。顺铂能通杀伤G-MDSC间接恢复CD8+T细胞的肿瘤杀伤能力(如图4所示)。抗G-MDSC抗体能有效减少肿瘤细胞中的G-MDSC。顺铂单独运用或者顺铂与抗G-MDSC抗体联合应用使G-MDSC进一步降低，同时CD8+T细胞相应的增加(如图5所示)。小鼠膀胱癌细胞系MBT-2于C57小鼠体外构建膀胱癌模型，顺铂单独运用或者顺铂与抗G-MDSC抗体联合应用能明显减缓膀胱癌的生长，肿瘤重量明显降低。
本发明优点在于：
1、本发明提供了顺铂用于高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌治疗的用途和方法；经体外实验和动物实验证实，顺铂用药可明显减少膀胱癌癌灶中G-MDSC的比例，进而促进了CD8+ T细胞的肿瘤杀伤功能，表明顺铂可用于高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌的化学治疗。
2、与单独使用顺铂相比，本发明提供的抗Gr-1抗体可以协同增强顺铂对膀胱癌生长的抑制作用。
附图说明
附图1是G-MDSC细胞与CD8+ T细胞在膀胱癌癌灶与癌旁对照组织中的水平。
其中，Normal：健康人外周血CD8+ T细胞比例，
Cancer：膀胱癌患者CD8+ T细胞比例，
Adjacent bladder tissues：癌旁膀胱组织，
PMN：多形核中性粒细胞，
G-MDSC：粒系骨髓来源的免疫抑制细胞，
*P<0.05,**P<0.01。
附图2是顺铂抑制膀胱癌细胞增殖，促进凋亡。
其中，Ctrl：对照组，
Cisplatin：顺铂处理组，
PI：Propidium Iodide，溴化丙啶，
*P<0.05,and***P<0.001。
附图3是顺铂杀伤MDSC。
其中，G-MDSC:粒系骨髓来源免疫抑制细胞，
M-MDSC：单核系骨髓来源免疫抑制细胞，
Dendritic cell：树突细胞，
Macrophage:巨噬细胞，
Granulocyte：粒细胞
WBC:White Blood Cell，白细胞，
*P<0.05,**P<0.01和***P<0.001。
附图4是顺铂减弱G-MDSC对CD8+ T细胞的抑制作用。
其中，T cells+G-MDSC:与G-MDSC细胞共培养后分离的CD8+ T细胞，
T cells+CDDP treated G-MDSC:与顺铂处理的G-MDSC细胞共培养后分离的CD8+T细胞，
*P<0.05and**P<0.01；NS:无统计学差异。
附图5是顺铂和/或抗Gr-1抗体有效减少膀胱癌癌灶中G-MDSC。
其中，Cisplatin+anti-Gr-1:顺铂+抗Gr-1抗体，
*P<0.05and**P<0.01；NS:无统计学差异。
附图6是顺铂和/或抗Gr-1抗体明显抑制膀胱癌生长，其中，*P<0.05。
具体实施方式
下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1分析膀胱癌癌组织粒系骨髓来源的免疫抑制细胞水平
1)膀胱癌癌灶组织中G-MDSC水平增加
首先收集相关检验数据，发现膀胱癌患者外周血中CD8+ T细胞较健康人增加(如图1A所示)；随后原代分离获得膀胱癌癌灶组织和癌旁膀胱组织中的免疫细胞，利用流式细胞技术检测(流式抗体均来自Biolegend公司)发现癌灶组织中CD3+CD8+ T细胞较癌旁膀胱组织明显减少(如图1B所示)，且CD11b+CD33+CD15+CD14-G-MDSC较癌旁膀胱组织明显增加(如图1C，1D所示)。膀胱癌癌灶组织中G-MDSC比例与CD8+ T细胞呈明显负相关性(如图1E所示)。说明G-MDSC可能是膀胱癌癌灶中CD8+ T细胞减少的重要原因。
实施例2体外实验证实顺铂杀伤膀胱癌细胞和G-MDCS的功能
1)顺铂抑制膀胱癌细胞T24增殖并促进凋亡
顺铂为含有铂的化学物质(如图2A所示)。浓度梯度0，0.1，1，10μM顺铂处理T24细胞24h后应用Cell Counting Kit-8试剂盒活检测细胞数量并且与对照组进行比较。10μM顺铂处理T24细胞0，12，24，48，72小时后用Cell Counting Kit-8试剂盒检测活细胞数量(T24细胞来自上海南方模式动物中心，Cell Counting Kit-8试剂盒来自Yeasen公司)。发现在一定范围内，顺铂浓度的增加和处理时间的延长均能有效抑制膀胱癌细胞T24的增殖(如图2B，2C所示)。Hochest染色法和流式细胞技术分别检测10μM顺铂处理48小时后T24细胞的凋亡情况(Hochest溶液来自sigma)，发现顺铂明显促进膀胱癌细胞的凋亡(如图2D、2E所示)。
2)顺铂杀伤骨髓来源的免疫抑制细胞
10μM顺铂处理外周血分离出的PBMC和PMN细胞，48小时后流式细胞技术分析PBMC中CD11b+CD33+CD14+CD15-M-MDSC和CD11b+CD33+CD14-CD15+G-MDSC的比例(流式抗体均来自Biolegend)，发现M-MDSC和G-MDSC均明显减少(如图3A所示)。进一步流式分析发现，M-MDSC下游分化的CD45+CD11b+CD11c+CD1c+骨髓来源树突状细胞以及CD45+CD14+CD80+巨噬细胞与G-MDSC下游分化的CD11b+CD33-CD15+粒细胞明显减少(如图3B，3C，3D所示)。说明顺铂能有效杀伤MDSC，并且导致其下游细胞相应减少。
实施例3体外实验证实顺铂能通过杀伤G-MDSC间接增强CD8+ T细胞的免疫功能
首先我们用10μM顺铂处理外周血分离出的CD8+ T细胞(CD8+ T细胞分选磁珠购自美天旎)，48小时后应用流式细胞技术分析CD8+ T细胞的比例，发现经顺铂处理后的CD8+T细胞并无明显改变(如图4A所示)。磁珠分选法从PMN中分离出CD33+细胞加入细胞因子IL-6和GM-CSF训导7天后加入10μM顺铂处理48小时，分别按照G-MDSC：CD8+T细胞为1:100、1:10、1:1共培养48h后，流式细胞技术分析CFSE标记的CD8+ T细胞的增殖情况(CFSE试剂来自Biolegend)，发现G-MDSC：CD8+ T细胞为1:1时G-MDSC对CD8+ T细胞的抑制作用最强，同时，顺铂能通过减少G-MDSC而间接促进CD8+ T细胞的增殖(如图4B所示)。经顺铂处理或者未处理的G-MDSC与CD8+ T细胞共培养后分离出CD8+ T细胞并且与T24细胞共培养48小时，Hochest染色法和流式细胞技术分析T24细胞的凋亡情况，发现顺铂能通过杀伤G-MDSC间接促进CD8+ T细胞的肿瘤杀伤作用(如图4C、4D所示)。
实施例4体外实验证实顺铂和/或抗Gr-1抗体能通过杀伤G-MDSC抑制裸鼠膀胱癌移植瘤的生长
1)体外实验证实顺铂和/或抗Gr-1抗体能有效杀伤膀胱癌癌灶中G-MDSC
首先我们验证了抗Gr-1抗体对G-MDSC的杀伤作用，MBT-2小鼠膀胱癌细胞系(107/只)于C57小鼠皮下注射成瘤1周后(MBT-2小鼠膀胱癌细胞系来自南方模式动物中心，C57小鼠来自斯莱克实验动物中心)，腹腔注射抗Gr-1抗体(200mg/只)(抗Gr-1抗体来自Abcam)，对照组注射生理盐水，每48小时注射一次。抗Gr-1抗体注射2周后检测小鼠膀胱癌皮下移植瘤中G-MDSC含量，流式细胞技术发现抗Gr-1抗体能有效去除肿瘤中G-MDSC(如图5A所示)。成瘤后一周，顺铂(7.5mg/kg)每3天腹腔注射一次，对照组注射生理盐水，2周后流式细胞技术检测发现膀胱癌中G-MDSC比例明显降低，CD8+ T细胞比例明显增加。抗Gr-1抗体具有协同作用(如图5B、5C所示)。
2)体外实验证实顺铂和/或抗Gr-1抗体明显抑制膀胱癌的生长
将成瘤小鼠随机分为3组，对照组注射生理盐水，顺铂治疗组成瘤后1周每3天腹腔注射顺铂(7.5mg/kg)，顺铂和抗Gr-1抗体共同作用组除了注射顺铂外每48小时注射一次抗Gr-1抗体(200mg/只)。成瘤后2周每3天测量一次肿瘤体积，计算公式为：体积＝(长*宽2)/2。我们发现，顺铂处理组肿瘤的生长、外观、重量均明显受限，抗Gr-1抗体能增强这种作用(如图6A、6B、6C所示)。上述结果说明顺铂能有效抑制膀胱癌生长，而抗Gr-1抗体与顺铂发挥协同作用显著增加抑癌效果。
3)两药联合作用评价
两药协同作用判断标准：采用国内金(正均)氏公式评价顺铂和抗Gr-1抗体的联合作用是否具有协同性。公式为：Q值＝E(A+B)/(EA+EB-EA×EB)。EA表示A药单独用药的效应，EB为B药单独用药的效应，E(A+B)表示药物A和药物B联合用药的效应。通过判读Q值来评价两个药物在联合使用后的治疗效果是否优于单独给药，如果Q值介于0.85-1.15为单纯相加，介于1.15-2.0为增强，大于2.0为明显增强，介于0.85-0.55为拮抗，小于0.55为明显拮抗。金氏公式计算得到：顺铂与抗Gr-1抗体联合使用，Q＝2.06＞2.0，联合作用为明显增强，由此可以证实，抗Gr-1抗体可以协同增强顺铂对膀胱癌生长的抑制作用。
本发明经体外和体内试验结果证实，顺铂能杀伤膀胱癌组织中的G-MDSC，间接维持CD8+ T细胞的杀伤活性。应用顺铂能通过限制肿瘤微环境中的免疫抑制作用进一步限制膀胱癌的生长。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.顺铂在制备治疗高水平G-MDSC膀胱癌的药物中的用途。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物杀伤膀胱癌组织中的G-MDSC，维持CD+8T细胞的肿瘤杀伤作用。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物抑制因G-MDSC高水平而引起的膀胱癌进程。
4.一种用于非治疗目的降低膀胱癌内G-MDSC水平的方法，其特征在于，给对象施用顺铂。
5.检测G-MDSC含量的试剂在制备诊断膀胱癌、膀胱癌进程或膀胱癌病因的试剂盒中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述诊断包括如下步骤：(1)检测膀胱癌癌灶及癌旁G-MDSC含量；
(2)将膀胱癌癌灶的G-MDSC含量与癌旁G-MDSC含量进行对比，比较膀胱癌癌灶的G-MDSC含量与癌旁G-MDSC含量的差异，根据含量的差异诊断膀胱癌、评估膀胱癌进程或评估膀胱癌病因。
7.一种检测受试者健康状态、监测膀胱癌进程或评估膀胱癌病因的方法，其包括如下步骤：
(1)检测膀胱癌癌灶及癌旁G-MDSC含量；
(2)将膀胱癌癌灶的G-MDSC含量与癌旁G-MDSC含量进行对比，比较膀胱癌癌灶的G-MDSC含量与癌旁G-MDSC含量的差异，根据含量的差异判断受试者健康状态、监测膀胱癌进程或评估膀胱癌病因。
8.一种治疗高水平G-MDSC膀胱癌的药物组合，其特征在于，所述药物组合物包括顺铂和抗Gr-1抗体。
9.权利要求8所述药物组合在制备具有高水平G-MDSC膀胱癌的药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述药物减少膀胱癌癌灶中G-MDSC的含量，促进CD8+T细胞的肿瘤杀伤功能。
CN201710191073.7A 2017-03-28 2017-03-28 顺铂在治疗高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌中的应用 Pending CN106943430A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710191073.7A CN106943430A (zh) 2017-03-28 2017-03-28 顺铂在治疗高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710191073.7A CN106943430A (zh) 2017-03-28 2017-03-28 顺铂在治疗高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌中的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN106943430A true CN106943430A (zh) 2017-07-14

Family

ID=59473056

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710191073.7A Pending CN106943430A (zh) 2017-03-28 2017-03-28 顺铂在治疗高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106943430A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108254301A (zh) * 2018-04-23 2018-07-06 上海交通大学医学院附属仁济医院 粒细胞型髓源性抑制细胞作为诊断生物标记物的用途
CN110846413A (zh) * 2019-11-23 2020-02-28 中南大学湘雅三医院 Mafg/mafg-as1/mafg正反馈环作为靶位点检测试剂的应用

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
杨轩等: "顺铂通过诱导膀胱癌细胞自噬促进细胞凋亡", 《北京大学学报(医学版)》 *
梁建明等: "膀胱癌患者外周血髓系来源的抑制细胞的比例及其临床意义", 《中国肿瘤临床与康复》 *
郭红叶: "粒细胞样髓源性抑制细胞自噬对小鼠 Lewis 肺癌移植瘤发", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 *
雷爱华等: "髓系衍生的抑制性细胞与肿瘤免疫耐受关系的研究进展", 《生物化学与生物物理进展》 *
黄香 等: ""顺铂对荷瘤鼠髓源性抑制细胞的选择性下调作用"", 《中华临床医师杂志(电子版)》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108254301A (zh) * 2018-04-23 2018-07-06 上海交通大学医学院附属仁济医院 粒细胞型髓源性抑制细胞作为诊断生物标记物的用途
CN110846413A (zh) * 2019-11-23 2020-02-28 中南大学湘雅三医院 Mafg/mafg-as1/mafg正反馈环作为靶位点检测试剂的应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109718208B (zh) 多糖修饰的纳米硒复合物在恶性腹水治疗药物中的应用
CN107744518B (zh) 乙莫克舍在治疗结直肠癌方面的应用
CN104758292B (zh) Pd-0332991在制备防治耐药肿瘤药物的用途
CN106943430A (zh) 顺铂在治疗高水平粒系骨髓来源免疫抑制细胞膀胱癌中的应用
Li et al. Graphdiyne oxide nanosheets exert anti-lymphoma effect by killing cancer stem cells and remodeling tumor microenvironment
Campbell et al. Acute reactions to mega ascorbic acid therapy in malignant disease
Ma et al. Antineoplastic agents in chemotherapy facilitating tumor growth and angiogenesis in the interval administrations
Wang et al. [Retracted] Clinical Efficacy of Yiqi Yangyin Decoction Combined with Docetaxel on Advanced Ovarian Cancer and the Effect on the Levels of Serum Markers VEGF, HE4, and CA125
CN109316474B (zh) 去铁胺在制备预防和/或治疗肿瘤药物中的应用
CN109730983A (zh) 丹叶大黄素在制备治疗脓毒症药物中的应用
CN113893338A (zh) Cd38 car-t细胞在慢性粒细胞白血病急髓变中的应用
CN111529538A (zh) 黄杨碱在制备治疗胃癌的药物中的应用
CN105497900A (zh) 一种抗未分化甲状腺癌耐药靶点及其应用
CN110464736A (zh) 一种用于治疗膀胱癌的组合物、氢生理盐水的应用
CN103405542B (zh) 一种治疗化疗后白细胞减少的中药
CN101843606B (zh) 大黄素作为急性白血病化疗药物的增敏剂和多药耐药逆转剂的应用
Spinazzi et al. Treatment of Recurrent Glioblastoma by Chronic Convection-Enhanced Delivery of Topotecan
Liu et al. Selenium Nanoparticles Enhance NK Cell‐Mediated Tumoricidal Activity in Malignant Pleural Effusion via the TrxR1‐IL‐18RAP‐pSTAT3 Pathway
CN116983310B (zh) 一种治疗肝癌的药物组合物及其应用
Zhu et al. Clinical trials of lung cancer after chemotherapy and traditional medicine (12 cases)
CN107714719A (zh) 雷帕霉素在制备治疗白细胞介素‑27低表达子宫内膜癌的药物中的应用
CN115006418B (zh) 地高辛在制备抑制结直肠癌转移的药物中的应用
CN108853073A (zh) 二甲双胍在逆转卵巢癌顺铂耐药性中的应用
CN109913413B (zh) 一种加载pd-1抗体的t细胞体外培养方法、其细胞制剂及其应用
Xuening Oncology treatment and complications of treatment strategies

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20170714