CN106913900A - 丝素蛋白止血材料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及丝素蛋白应用领域,尤其涉及丝素蛋白止血材料及其制备方法;丝素蛋白止血材料制备方法包括步骤:S1、制备质量百分比为1‑6%的丝素蛋白溶液;S2、制备质量百分比为10‑40%的聚乙二醇溶液,其中聚乙二醇的分子量为1000‑10000;S3、将丝素蛋白溶液与聚乙二醇溶液以体积比10:0.25‑10:3的比例相互混合,经冷冻干燥制得丝素蛋白止血材料;本发明的丝素蛋白止血材料,吸水性好、与创口结合紧密不易掉落、对体表和体内出血均有良好的止血效果、并且可降解吸收、防止手术产生的组织粘连、无炎症反应、成本低。
Description
技术领域
本发明涉及丝素蛋白应用领域,尤其涉及丝素蛋白止血材料及其制备方法。
背景技术
常规的止血方法有人工挤压、烧灼术和伤口缝合,但这些方法有时并不能有效止血,从而延长了手术时间,此外,不完善的止血手段常需要进行二次手术。多年来,在皮肤创伤和脾、肾等软组织器官损伤的出血治疗中,大都采用天然衍生可降解止血材料,主要有明胶海绵、氧化纤维素、微纤维胶原粉末、纤维蛋白胶、壳聚糖类、胶原海绵等,而它们各自都有一定的不足之处:1)明胶和胶原的组织吸附力较差,两者的止血功能均依赖于足量的血小板和凝血因子,故应用受到限制;2)纤维蛋白胶来自血液,可能会导致病毒感染;3)壳聚糖材料一般溶解性较差,力学强度低,加工过程中一般需要加酸溶解,而加酸后容易对人体产生副反应如周围组织充血、红肿、流泪等反应;4)传统的药棉纱布医治皮肤伤口不仅愈合期较长、伤口疤痕明显,而且在换药过程中患者相当痛苦。因此,研制一种具有生物安全性、生物相容性,且有较强的止血功能的新型止血材料已显得非常重要。
蚕丝是天然大分子聚合物,天然蚕丝主要由丝素蛋白和丝胶蛋白组成,而丝素蛋白的主要成分有甘氨酸、丙氨酸及丝氨酸。蚕丝蛋白纤维表面疏水,血浆蛋白与丝素蛋白之间存在强的疏水相互作用,能交联血浆蛋白从而凝血。此外,凝血因子也能交联丝素蛋白形成凝块。天然蚕丝具有成本低廉、原材料充沛、易于操作、在潮湿环境中强度也较大、对于生长的细胞有生物适应性、药物可渗透性、生物相容性好、可降解等优点,广泛运用于生物医学、生物技术领域,是可研发的最具发展潜力的止血材料。
目前有关蚕丝制备的止血材料主要有丝素肽、丝素蛋白复合材料、改性蚕丝等。然而这些材料具有以下缺点:1)丝素肽一般是被酶解、碱解、水解、酸解等技术手段分解成小分子肽链,其分子量低,机械性能差,制备工艺繁杂废水造成污染不宜大规模生产。2)改性蚕丝通过物理接枝聚合、X-射线辐射或有机溶剂如甲醇等对蚕丝进行处理,改变蚕丝部分结构和特性,如中国专利公开号为CN102505453A的发明专利,即公开了一种改性蚕丝的制备方法,然而改性蚕丝的吸水性差,无法使得丝素蛋白与血液充分结合,限制了止血效果,而且操作工艺繁杂、成本较高,难以工业化生产。3)丝素蛋白复合材料,例如丝素蛋白和壳聚糖类结合,丝素蛋白和羟基磷灰石结合等,这类复合材料并不比单一种类材料更有效止血,反而提高了成本,得不偿失。
发明内容
为解决上述技术问题,本发明的目的是提供一种吸水性好、与创口结合紧密不易掉落、对体表和体内出血均有良好的止血效果、并且可降解吸收、防止手术产生的组织粘连、无炎症反应、成本低的丝素蛋白止血材料及其制备方法。
本发明第一方面提供一种丝素蛋白止血材料的制备方法,包括以下步骤:
S1、制备质量百分比为1-6%的丝素蛋白溶液;
S2、制备质量百分比为10-40%的聚乙二醇溶液,其中聚乙二醇的分子量为1000-10000;
S3、将丝素蛋白溶液与聚乙二醇溶液以体积比10:0.25-10:3的比例相互混合,经冷冻干燥制得丝素蛋白止血材料。
进一步的,所述丝素蛋白溶液的质量百分比为3%。
应当说明的是,丝素溶液的制备方法应当包括多种,包括但不限于由溴化锂法或变性剂透析法制得,其中,
所述溴化锂法包括以下步骤:
将已脱胶的熟丝浸润在9.3M的LiBr溶液中加热溶解得到丝素蛋白原液,然后将该丝素蛋白原液倒入透析袋中用去离子水透析,透析结束后离心去除不溶物杂质得到丝素蛋白溶液的步骤;
所述变性剂透析法包括以下步骤:
使用含氯化钙三元溶液溶解脱胶蚕丝得到丝素蛋白原液,使用蛋白质变性剂溶液按浓度梯度由高至低依次透析处理所述丝素蛋白原液后,再使用水透析处理得到丝素蛋白溶液。
进一步的,将质量百分比为1-6%的丝素蛋白溶液,与分子量为1000-4000、质量百分比为10-40%的聚乙二醇溶液,以体积比10:0.25-10:3的比例相互混合,以制备膜状的丝素蛋白止血材料。
进一步的,将质量百分比为1-6%的丝素蛋白溶液,与分子量为4000-10000、质量百分比为10-40%的聚乙二醇溶液,以体积比10:0.5-10:3的比例相互混合,以制备粉状的丝素蛋白止血材料。
进一步的,所述丝素蛋白溶液或聚乙二醇溶液中还混合有一种或多种止血药物,所述止血药物包括抗纤溶系统类药物、降低毛细血管通透性药物、凝血酶类药物、凝血因子类药物。
具体的,所述止血药物包括氨基己酸、氨甲苯酸、氨甲环酸、酚磺乙胺、卡巴克络、巴曲亭、凝血酶、维生素K1、亚硫酸氢钠甲萘醌和甲萘氢醌。
本发明第二方面提供一种采用前述制备方法获得的丝素蛋白止血材料。
应当说明的是,经由上述步骤制得的所述丝素蛋白止血材料为膜状、粉状、或膜-粉混合物,还可进一步加工为多种形状,以便适应不同创口的止血过程。
应当说明的是,本发明技术方案区别于现有技术中丝素蛋白与聚乙二醇溶液混合成胶的使用方法,包括以下几点:
1)使用低质量百分比(10-40%)的聚乙二醇溶液与丝素蛋白溶液相互混合,阻止混合液在冻干前成胶,避免了使用前止血材料成胶失效,由于丝素蛋白-聚乙二醇混合冻干材料在加工过程中部分丝素蛋白形成β-折叠结构,该结构是稳定疏水性结构,使得冻干材料在遇血液时保持一定的骨架和孔隙,有利于快速吸收水分,同时避免骨架结构坍塌。吸收的水分在局部溶解未形成β-折叠结构的丝素蛋白,进而在富含羟基的聚乙二醇作用下,丝素蛋白分子通过分子间氢键作用产生交联,形成高粘性的凝胶态物质,粘附于破损的血管处,起到封堵止血的作用。同时,血液中的凝血因子也会在快速形成的高粘性丝素蛋白凝胶中包埋和富集,起到加速止血的目的。因此,将丝素蛋白与聚乙二醇预混形成包含一定β-折叠结构的冻干膜或粉是达到快速止血效果的必要条件,而现有技术中丝素蛋白与聚乙二醇溶液混合成胶方法则将丝素蛋白完全诱导形成稳定的β-折叠结构,不具有组织粘附特性,因此难以达到物理封堵血管和止血目的。
2)现有技术的丝素蛋白冻干粉,其中并不包含聚乙二醇,其使用功能为溶解获得丝素蛋白溶液以便后续使用,而本发明技术方案的冻干粉为丝素蛋白和聚乙二醇混合冻干膜或粉,其使用功能为遇水成胶;
3)本发明技术方案的止血材料,不需要术前预成胶,使用时仅需将止血材料覆盖在创口表面即可,根据创口类型,还可相应选择膜状或粉状或膜-粉混合状的止血材料,从而实现快速止血,节省了手术时间,提高手术的成功率。
本发明中,术语“止血药物”是指能够制止体内外出血的药物,包括以下几个常见种类:
1、抗纤溶系统类药物
(1)氨基己酸
通过抑制纤溶系统而起作用。主要用于纤维蛋白溶酶活性升高所致的出血,如妇产科出血,前列腺、肝、胰、肺等内脏手术后的出血。术中早期用药或术前用药,可减少手术中渗血,并减少输血量。用过量时可形成血栓有血栓形成倾向或有血栓性血管疾病病史者禁用,肾功能不全者慎用。
(2)氨甲苯酸(止血芳酸)
机制同氨基己酸,且作用较氨基己酸强4-5倍。适用于肺、肝、胰、前列腺、甲状腺、肾上腺等手术时的异常出血,妇产科和产后出血及肺结核咯血、痰中带血、血尿,前列腺肥大出血、上消化道出血等,对慢性渗血效果较显著。
(3)氨甲环酸(止血环酸,凝血酸)
机制同氨己酸,且作用比氨甲苯酸稍强。适应症与止血芳酸相似。用于各种出血性疾病,手术时异常出血等。副作用可有头痛、头晕、恶心、呕吐等反应。
2、降低毛细血管通透性药物
(1)酚磺乙胺(止血敏)
本品是通过促进凝血过程而发挥作用。能够增加血液中血小板聚集性和粘附性,促进凝血物质的释放,以加速凝血。临床上用于预防和治疗外科手术出血过多,血小板减少性紫癜或过敏性紫癜以及其它原因引起的出血。可与其他类型止血药合用,副作用较少。
(2)卡巴克络(安络血)
为肾上腺素氧化产物肾上腺色素的缩氨脲,常用其水杨酸钠盐(卡巴克洛)或磺酸钠盐(卡络磺钠),能促进毛细血管收缩,降低毛细血管通透性,增进断裂毛细血管断端的回缩,而起到止血作用。适应症:本品常用于特发性紫癜、视网膜出血,慢性肺出血、胃肠道出血、鼻衄、咯血、血尿、痔出血、子宫出血、脑溢血等。
3、凝血酶类药物
(1)巴曲亭(立止血)
通用名称为注射用蛇毒血凝酶,是从巴西矛头中提取出来的巴特罗酶。临床上用于治疗各种原因引起的出血,特别是应用于传统止血药无效的出血病人。
(2)凝血酶
凝血酶能直接作用于血液中的纤维蛋白原,促使转变为纤维蛋白,加速血液的凝固而止血。临床用于外伤、手术及口服用于消化道出血的止血。不能注射给药。
4、凝血因子类
(1)维生素K1
为天然维生素,用于注射。作用较K3、K4强。
(2)亚硫酸氢钠甲萘醌(维生素K3)。
为合成类维生素,临床上用于治疗维生素K缺乏症,注射给药。
(3)甲萘氢醌(维生素K4,乙酰甲萘醌)
为合成维生素,用于口服。
借由上述方案,本发明至少具有以下优点:
本发明从蚕丝中提取出大分子量的丝素蛋白,并选择药用助剂聚乙二醇与丝素蛋白溶液共混后冻干,从而制得具有吸水快速、成凝胶快、粘附性好的止血膜/粉,制备过程不需要复杂的装置,操作简单、耗时短、成本低;所制备的止血膜/粉,遇水收缩,形成凝胶,物理封堵出血口,并局部浓缩血小板和凝血因子,加速止血,与血液混合快速形成血块凝胶(层)并与创口紧密粘合贴附,既可以用于体表止血,亦可用于体内,其生物相容性好,可降解、无菌、无细胞毒性、无致敏和无刺激作用,止血效果好、止血速度快,具有较大实用价值。丝蛋白止血材料在体内不引起炎症反应,根据材料的用量在1-4周内被蛋白酶降解成多肽和氨基酸,不影响周围组织和血管的长入和修复。
上述说明仅是本发明技术方案的概述,为了能够更清楚了解本发明的技术手段,并可依照说明书的内容予以实施,以下以本发明的较佳实施例并配合附图详细说明如后。
附图说明
图1为丝素蛋白止血材料傅立叶红外光谱;
图2为丝素蛋白止血材料分子二级结构含量解析;
图3为丝素蛋白止血材料成胶后傅立叶红外光谱;
图4为丝素蛋白止血材料成胶后分子二级结构含量解析;
图5为丝素蛋白止血材料流变仪检测不同浓度条件下力学性能图;
图6为丝素蛋白止血材料兔耳缘静脉止血实验结果对比图;
图7为丝素蛋白止血材料新西兰兔肝脏面止血实验结果对比图;
图8为丝素蛋白止血材料新西兰兔肝脏面止血实验结果图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例,对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
实施例一丝素蛋白止血材料
1)丝素蛋白溶液的制备
将10克脱胶丝置于40ml9.3M溴化锂溶液中,用玻璃棒搅拌使得脱胶丝充分浸透,放于60℃烘箱加热4小时。使用截流分子量为3500-10000道尔顿的Pierce透析装置或普通透析袋,透析36小时,换水7-8次,可以去除溶液中的溴化锂成分,而丝素蛋白保留在透析袋中。
将透析袋中的丝素蛋白溶液移入离心容器中,离心后弃去沉淀,取上层溶液即是所要制取的丝素蛋白溶液。
2)聚乙二醇溶液制备
将分子量为1000-10000的聚乙二醇(PEG)溶液配置成溶液,浓度为1-40wt%。
3)丝素溶液混合聚乙二醇溶液
将丝素蛋白溶液稀释至1-6wt%与聚乙二醇溶液以体积比10:0.25-10:3进行混合,混合均匀后分装于容器中,然后放入冷冻干燥机,通过预冻、干燥、二次干燥后完成冻干过程,得到丝素蛋白止血材料。
实施例二丝素蛋白止血材料制备
将浓度为3wt%的丝素蛋白溶液与聚乙二醇2000(10wt%)以体积比10:1-10:3混合均匀后分装于容器中,然后放入冷冻干燥机通过预冻、干燥、二次干燥后完成冻干过程,得到丝素蛋白止血材料。
按丝素蛋白止血材料的含量加入相应的超纯水,得到一定浓度的混合溶液,37℃恒温恒湿培养箱中放置成凝胶,将装有混合溶液的试管倒置,以溶液不流动为指标观察成凝胶状况。每支丝素蛋白终浓度为6%和12%,取5支平行样,各取100ul溶液置于拉力测试机中测试起始状态下溶液粘合力,该方法是通过将一定量待测液粘附于两块金属薄板之间,以一定速度将其中一块金属薄板均匀垂直向上拉伸,测得两块金属薄板分离时最大所需的拉力。结果如表1所示。
表1 3wt%丝素蛋白溶液与10wt%聚乙二醇2000混合制备止血材料特性
实施例三丝素止血膜/粉制备
将浓度为3wt%的丝素蛋白溶液与聚乙二醇4000(40wt%)以10:0.25-10:3混合均匀后分装于容器中,然后放入冷冻干燥机,通过预冻、干燥、二次干燥后完成冻干过程,得到丝素蛋白止血材料。
按丝素蛋白止血材料的含量加入相应的超纯水,得到一定浓度的混合溶液,37℃恒温恒湿培养箱中放置成凝胶。每支丝素蛋白终浓度为6%和12%,取5支平行样,各取100ul溶液置于拉力测试机中测试起始状态下溶液粘合力,该方法是通过将一定量待测液粘附于两块金属薄板之间,以一定速度将其中一块金属薄板均匀垂直向上拉伸,测得两块金属薄板分离时最大所需的拉力。结果如表2所示。
表2 3wt%丝素蛋白溶液与40wt%聚乙二醇4000混合制备止血材料特性
实施例四丝素止血膜/粉制备
将浓度为3wt%的丝素蛋白溶液与聚乙二醇6000(40wt%)以10:0.25-10:3混合均匀后分装于容器中,然后放入冷冻干燥机,通过预冻、干燥、二次干燥后完成冻干过程,得到丝素蛋白止血材料。
按丝素蛋白止血材料的含量加入相应的超纯水,得到一定浓度的混合溶液,37℃恒温恒湿培养箱中放置成凝胶。每支丝素蛋白终浓度为6%和12%,取5支平行样,各取100ul溶液置于拉力测试机中测试起始状态下溶液粘合力,该方法是通过将一定量待测液粘附于两块金属薄板之间,以一定速度将其中一块金属薄板均匀垂直向上拉伸,测得两块金属薄板分离时最大所需的拉力。结果如表3所示。
表3 3wt%丝素蛋白溶液与40wt%聚乙二醇6000混合制备止血材料特性
实施例五丝素止血膜/粉制备
将浓度为3wt%的丝素蛋白溶液与聚乙二醇8000(40wt%)以10:0.25-10:3混合均匀后分装于容器中,然后放入冷冻干燥机,通过预冻、干燥、二次干燥后完成冻干过程,得到丝素蛋白止血材料。
按丝素蛋白止血材料的含量加入相应的超纯水,得到一定浓度的混合溶液,37℃恒温恒湿培养箱中放置成凝胶。每支丝素蛋白终浓度为6%和12%,取5支平行样,各取100ul溶液置于拉力测试机中测试起始状态下溶液粘合力,该方法是通过将一定量待测液粘附于两块金属薄板之间,以一定速度将其中一块金属薄板均匀垂直向上拉伸,测得两块金属薄板分离时最大所需的拉力。结果如表4所示。
表4 3wt%丝素蛋白溶液与40wt%聚乙二醇8000混合制备止血材料特性
实施例六丝素止血膜/粉制备
将浓度为3wt%的丝素蛋白溶液与聚乙二醇10000(40wt%)以10:0.25-10:3混合均匀后分装于容器中,然后放入冷冻干燥机,通过预冻、干燥、二次干燥后完成冻干过程,得到丝素蛋白止血材料。
按丝素蛋白止血材料的含量加入相应的超纯水,得到一定浓度的混合溶液,37℃恒温恒湿培养箱中放置成凝胶。每支丝素蛋白终浓度为6%和12%,取5支平行样,各取100ul溶液置于拉力测试机中测试起始状态下溶液粘合力,该方法是通过将一定量待测液粘附于两块金属薄板之间,以一定速度将其中一块金属薄板均匀垂直向上拉伸,测得两块金属薄板分离时最大所需的拉力。结果如表5所示。
表5 3wt%丝素蛋白溶液与40wt%聚乙二醇10000混合制备止血材料特性
实施例七丝素蛋白止血材料性质
实施例二至六中,不同分子量的聚乙二醇混合丝素蛋白得到的冻干制品,结构如图1所示,丝素蛋白在红外吸收光谱上的1652、1249、1532处有明显特征峰,说明其二级结构主要为α-螺旋与无规卷曲,以及部分β-折叠结构。由于β-折叠结构是稳定疏水性结构,可以使得冻干材料保持一定的骨架和孔隙,避免骨架结构坍塌,有利于冻干材料快速吸收血液中的水分。将丝素蛋白与聚乙二醇预混形成包含一定β-折叠结构的冻干膜或粉是达到快速止血效果的必要条件,而现有技术中丝素蛋白与聚乙二醇溶液混合成胶方法则将丝素蛋白完全诱导形成稳定的β-折叠结构,不具有组织粘附特性,因此难以达到物理封堵血管和止血目的。具体各个结构含量如图2所示。
不同分子量的聚乙二醇混合丝素蛋白得到的冻干制品溶解成胶后的结构如图3所示,丝素蛋白在红外吸收光谱上的1626、1530处有明显特征峰,说明其结构主要为β-折叠,分子之间通过氢键和疏水作用力产生交联,具体各个结构含量如图4所示。
根据图1至图4可知,低质量百分比(10-40%)的聚乙二醇溶液与丝素蛋白溶液相互混合并冻干得到冻干膜或粉,该材料的丝素蛋白分子结构以α-螺旋与无规卷曲为主,部分丝素蛋白转变为β-折叠结构。冻干材料中未形成β-折叠结构的丝素蛋白在遇血液时吸收血液中的水分并局部溶解,进而在富含羟基的聚乙二醇作用下,丝素蛋白分子通过分子间氢键作用产生交联,形成高粘性的凝胶态物质,粘附于破损的血管处,起到封堵止血的作用。同时由于β-折叠结构是稳定疏水性结构,可以使得冻干材料保持一定的骨架和孔隙,避免骨架结构坍塌,有利于冻干材料快速吸收血液中的水分。血液中的凝血因子也会在快速形成的高粘性丝素蛋白凝胶中包埋和富集,起到加速止血的目的。
另外,本发明丝素蛋白止血材料也具有较好的力学性能,如图5所示,为丝素蛋白混合聚乙二醇6000,经流变仪检测不同浓度条件下的力学性能。通过将丝素蛋白止血材料溶解为3%、6%、12%三种不同浓度的溶液,经应变扫描分析得出,随着丝素蛋白浓度的增加,凝胶的弹性模量越高,20%左右的应变会破坏凝胶。
实施例八丝素蛋白止血材料的使用效果
1)兔缘耳静脉止血效果
以特制模具在兔耳缘静脉处制作5mm长创口,迅速加入等量止血材料至敷于创口处,各自记录止血材料止血时间及平均出血量,止血膜/粉的平均出血时间及平均出血量均较低,结果如图6所示,纱布的平均止血时间为140s,止血海绵的平均止血时间为170s,明胶海绵的平均止血时间为270s,而丝素蛋白1500膜的平均止血时间为72s,丝素蛋白4000膜平均止血时间为195s,丝素蛋白6000粉平均止血时间为160s,丝素蛋白10000粉平均止血时间为170s,并且丝素蛋白止血材料处理耳缘静脉出血量较明胶海绵、止血海绵、纱布更少。
2)肝脏止血效果
建立新西兰兔肝脏止血实验模型,具体操作如下:先对兔实施腹腔麻醉注射,兔子仰卧位,70%乙醇消毒腹部并备皮,打开腹腔找到肝脏,以特制模具在肝左叶制作15mm×15mm创面,迅速加入等量各止血材料至肝脏,各自记录止血材料止血时间及平均出血量,止血膜/粉的平均出血时间及平均出血量均较低,结果如图7和图8所示,纱布平均止血时间为214s,止血海绵平均止血时间为200s,明胶海绵的平均止血时间为246s,1961平均止血时间为260s,而丝素蛋白止血材料1500膜平均止血时间为166s,4000膜平均止血时间为126s,6000粉平均止血时间为252s,10000粉的平均止血时间为189s,丝素蛋白止血材料处理肝脏出血比止血海绵、1961、明胶海绵、纱布都有更少的出血量,表明本研究的止血膜/粉能迅速促进脏器血栓形成,从而迅速止血。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,并不用于限制本发明,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明技术原理的前提下,还可以做出若干改进和变型,这些改进和变型也应视为本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种丝素蛋白止血材料的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
S1、制备质量百分比为1-6%的丝素蛋白溶液;
S2、制备质量百分比为10-40%的聚乙二醇溶液,其中聚乙二醇的分子量为1000-10000;
S3、将丝素蛋白溶液与聚乙二醇溶液以体积比10:0.25-10:3的比例相互混合,经冷冻干燥制得丝素蛋白止血材料。
2.根据权利要求1所述的丝素蛋白止血材料的制备方法,其特征在于:所述丝素蛋白溶液的质量百分比为3%。
3.根据权利要求1所述的丝素蛋白止血材料的制备方法,其特征在于:所述丝素蛋白溶液由溴化锂法或变性剂透析法制得,其中,
所述溴化锂法包括以下步骤:
将已脱胶的熟丝浸润在9.3M的LiBr溶液中加热溶解得到丝素蛋白原液,然后将该丝素蛋白原液倒入透析袋中用去离子水透析,透析结束后离心去除不溶物杂质得到丝素蛋白溶液的步骤;
所述变性剂透析法包括以下步骤:
使用含氯化钙三元溶液溶解脱胶蚕丝得到丝素蛋白原液,使用蛋白质变性剂溶液按浓度梯度由高至低依次透析处理所述丝素蛋白原液后,再使用水透析处理得到丝素蛋白溶液。
4.根据权利要求1所述的丝素蛋白止血材料的制备方法,其特征在于:将质量百分比为1-6%的丝素蛋白溶液,与分子量为1000-4000、质量百分比为10-40%的聚乙二醇溶液,以体积比10:0.25-10:3的比例相互混合,以制备膜状的丝素蛋白止血材料。
5.根据权利要求1所述的丝素蛋白止血材料的制备方法,其特征在于:将质量百分比为1-6%的丝素蛋白溶液,与分子量为4000-10000、质量百分比为10-40%的聚乙二醇溶液,以体积比10:0.5-10:3的比例相互混合,以制备粉状的丝素蛋白止血材料。
6.根据权利要求1所述的丝素蛋白止血材料的制备方法,其特征在于:所述丝素蛋白溶液或聚乙二醇溶液中还混合有一种或多种止血药物,所述止血药物包括抗纤溶系统类药物、降低毛细血管通透性药物、凝血酶类药物、凝血因子类药物。
7.根据权利要求6所述的丝素蛋白止血材料的制备方法,其特征在于:所述止血药物包括氨基己酸、氨甲苯酸、氨甲环酸、酚磺乙胺、卡巴克络、巴曲亭、凝血酶、维生素K1、亚硫酸氢钠甲萘醌和甲萘氢醌。
8.一种采用根据权利要求1至7任一项所述制备方法获得的丝素蛋白止血材料。
9.根据权利要求8所述的丝素蛋白止血材料,其特征在于:所述丝素蛋白止血材料为膜状、粉状、或膜-粉混合物。
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