CN106821939A - 羊胚胎素的提取方法及含有其提取物的制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种羊胚胎素的提取方法及含有其提取物的制剂，其选用怀孕2～8周的羊胚胎作为原料，经过洗净、绞碎、浸泡、破碎后置于低温下进行多次速冻、融化、研磨操作，然后在通过加入蒸馏水进行离心操作，然后再将离心操作后的离心液分别利用10万分子量和1万分子量的超滤膜进行过滤，即得成品。该成品羊胚胎素在保留具有生物活性物质的同时，除去可能致敏的蛋白质，使得该提取物只具有美容功效而不致皮肤敏感，而利用该成品制备的美容制剂能有效淡化皱纹，增强皮肤弹性，延缓皮肤衰老。
Description
技术领域
本发明涉及生物制剂的提取制备领域，具体涉及一种羊胚胎素的提取方法及含有其提取物的制剂。
背景技术
在现代快节奏的城市生活中，高强度的生活节奏使得人们往往会呈现出疲劳倦怠、精力不济的亚健康状态，同时也会造成红斑、暗疮、气色差、细胞活性下降等问题，究其原因主要是由于气损精亏、营养不良以及体内积存代谢物过多造成。而针对上述问题，许多消费者都会选择含羊胎素的保健品进行身体保养，其中就包括含羊胎素的护肤品。
胎盘的中药名为紫河车，多采用羊胎盘制成，含有多种免疫球蛋白、活性肽等生物活性物质及氨基酸、矿物质等成分(统称活细胞素)，可有效增强机体免疫功能、调节机体内分泌、维持机体正常功能、增强机体耐力、改善造血功能，并具有养颜美容、延缓衰老等神奇功效，还能补充人体必需的各种能量与营养，使机体快速恢复活力，被认为是一种机体免疫功能的调节剂和营养、美容保健品。
目前市面上宣称添加羊胎素的护肤品很多，但实际添加的多为羊胎盘素，其是以羊胎盘为主要原料或主要原料之一提取制得。羊胎盘是一种特异化的功能性器官，其中含有较多的绒毛膜促性腺激素、雌激素、孕激素等，且在精制过程中无有效手段可将激素去除或灭活。《化妆品安全技术规范》(2015版)中已明确将雌激素类物质列入化妆品禁用组分名单，同时，这些羊胎盘素中含有的激素类物质也会对部分人群(少年儿童、孕妇及子宫、卵巢、乳房肿瘤患者)产生不利影响，同时，由于加工工艺和技术手段落后，导致其活性成份损失很大活性成分损失严重，羊胎素提取率降低。
发明内容
本发明所解决的技术问题在于提供一种羊胚胎素的提取方法，并提供了一种利用该提取方法提取的羊胚胎素所制备的美容制剂，以解决上述技术背景中的缺陷。
本发明所解决的技术问题采用以下技术方案来实现：
一种羊胚胎素的提取方法，其具体步骤为：
1、选取怀孕2～8周的羊胚胎，洗净后用绞肉机或者其他食物绞碎机绞碎成糊状物，然后加入羊胚胎重量10～15倍的蒸馏水进行浸泡使胚胎糊料处于膨胀状态，以使胚胎糊料在后续研磨时细胞能破碎均匀，充分保护其中活性物质。
2、将步骤1中处理的胚胎糊料置于-30℃下速冻，使羊胚胎细胞位置迅速固定，细胞破裂少细胞液流失少，待胚胎糊料完全冻住后取出室温下融化，并在融化后采用用胶体磨在室温条件下研磨成细浆。
3、研磨完成后加入所处理羊胚胎重量1倍的蒸馏水离心，整个离心过程中溶液温度控制在-15～-10℃的温度范围内。
4、取离心后的上清液，并利用10万分子量的超滤膜进行过滤，然后再通过1万分子量的超滤膜进行过滤，过滤完成后即得成品。
作为本发明的进一步改进：
所述步骤1中，所述羊胚胎优选采用怀孕4-6周的羊胚胎。
所述步骤1中，所述蒸馏水加水量优选为所处理羊胚胎重量10倍，以获得最佳的活性物质保护效果。
所述步骤2中，胚胎糊料在-30℃下速冻的时间优选为21～22h。
所述步骤2中，所述胚胎糊料在胶体磨中研磨的时间为1～2h
在所述步骤2中，为了缩短工艺用时并进一步提高胚胎的破碎程度，需要将冻住的羊胚胎在常温下用食品破碎机破碎10～20min，此时的破碎能加速溶解并进一步绞碎羊胚胎以增强其流动性，便于后继过程中在胶体磨中进行后继研磨。
为了充分破碎细胞，可以将步骤2中依次进行的冷冻、溶解、破碎和研磨作为一个循环，充分上述循环3次即可达到镜检无完整细胞结构，此时活性物质均已溶于蒸馏水中。
所述步骤4中，所制得的成品置于-10℃下保存，以抑制其中所含的分解酶的活性。
本发明同时还公开了一种美容制剂，该美容制剂含有羊胚胎素以及美容液基质，其中，羊胚胎素按上述方法制得，美容液基质配方按质量比为：透明质酸钠0.1％-0.5％，海藻糖1％-2％，甘油5％-10％，丁二醇5％-10％，苯氧乙醇0.5％-1％，剩余组分为蒸馏水，制备时将羊胚胎素以占原料总质量比2％的比例添加于美容液基质中混合均匀，即得成品。
有益效果：本发明利用羊胚胎经搅碎、冷冻、溶解、研磨、离心等步骤后，制得羊胚胎素，能有效利用羊胚胎素中含有的较全面的生物营养以及活性物质，同时激素含量极低，以羊胚胎素代替羊胎盘素应用于美容护肤品，能使皮肤得到更全面的营养而无激素副作用之弊端，同时通过与美容液基质复配使用可增强羊胚胎素的皮肤吸收利用度，使得其作用得到加强。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
实施例一：
在本实施例中采用怀孕4-6周的羊胚胎作为原料，并采用常用食物绞碎机进行初步绞碎，绞碎2h，将羊胚胎绞碎至糊状，并加入所处理羊胚胎重量12倍的蒸馏水浸泡，使细胞吸足水分并处于膨胀状态，以方便后续研磨时细胞能破碎均匀，充分保护其中活性物质。然后将通过蒸馏水浸泡的糊状羊胚胎置于-30℃下冷冻22h，使其完全冻成固态，以使羊胚胎细胞位置迅速固定，减少细胞破裂以及细胞液流失，再将冰冻羊胚胎糊在室温下溶解，后采用胶体磨研磨90min。为充分破碎细胞，以依次进行的冷冻、溶解、研磨为一个循环，充分上述循环3次，重复3次后可达到镜检无完整细胞结构，此时活性物质均已溶于蒸馏水中。
为使活性物质充分溶出，在研磨混合物中加入所处理羊胚胎重量1倍的蒸馏水离心，整个离心过程中溶液温度为-15～-10℃以下进行以防止由于液体升温导致提取物中活性物质失活。取离心后的上清液采用10万分子量的超滤膜进行过滤，进行初步除杂。之后还需采用1万分子量的超滤膜进行过滤，即得成品，此时能将提取物中大分子蛋白质除去，而分子量小于1万的活性物质，具有抗衰老作用，可得到保留。同时所得提取物置于-10℃下可抑制其中分解酶的活性以便于长期保存。
实施例二：
在本实施例中采用怀孕4-6周的羊胚胎作为原料，制备时，将羊胚胎洗净后采用常用食物绞碎机进行初步绞碎，绞碎1h以将羊胚胎绞碎至糊状，加入所处理羊胚胎重量10倍的蒸馏水浸泡，使细胞吸足水分并处于膨胀状态，以方便后续研磨时细胞能破碎均匀，充分保护其中活性物质。然后将通过蒸馏水浸泡的糊状羊胚胎置于-30℃下冷冻21h，待其完全冻住后将冻住的羊胚胎在常温下用食品破碎机破碎18min，此时研磨对细胞的破碎效果优于为经速冻直接研磨的羊胚胎，能加速溶解并进一步绞碎羊胚胎以增强其流动性，便于其后过程中在室温条件下利用胶体磨中研磨2h，为充分破碎细胞，以依次进行的冷冻、溶解、破碎和研磨为一个循环，充分上述循环3次，重复3次后可达到镜检无完整细胞结构，此时活性物质均已溶于蒸馏水中。
为使活性物质充分溶出，在研磨混合物中加入所处理羊胚胎重量1倍的蒸馏水离心，整个离心过程中溶液温度为-15～-10℃以下进行以防止由于液体升温导致提取物中活性物质失活。取离心后的上清液采用10万分子量的超滤膜进行过滤，进行初步除杂。之后还需采用1万分子量的超滤膜进行过滤，即得成品，此时能将提取物中大分子蛋白质除去，而分子量小于1万的活性物质，具有抗衰老作用，可得到保留。同时所得提取物置于-10℃下可抑制其中分解酶的活性以便于长期保存。
将上述两个实施例中制备的羊胚胎素成品与美容液基质混合，其中，美容液基质配方为(质量百分比)：透明质酸钠0.3％，海藻糖1.5％，甘油7％，丁二醇8％，苯氧乙醇0.8％，剩余组分为蒸馏水；将羊胚胎素以质量百分比2％的比例添加于美容液基质中混合均匀，得到羊胚胎素美容液。
随机选取50名年龄30～40的女性，50人脸部均长有皱纹且皮肤松弛缺乏弹性。每人每日使用羊胚胎素美容液3次，每次2ml，使用2周。其中45人皮肤弹性得到增强、皱纹明显消退，5人未感到明显变化。说明本发明提供的羊胚胎素美容液能有效淡化皱纹，增强皮肤弹性，延缓皮肤衰老。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (9)
1.一种羊胚胎素的提取方法，其特征在于，具体制备步骤为：
①选取怀孕2～8周的羊胚胎，洗净后用绞肉机或者其他食物绞碎机绞碎成糊状物，然后加入羊胚胎重量10～15倍的蒸馏水进行浸泡使胚胎糊料处于膨胀状态，以使胚胎糊料在后续研磨时细胞能破碎均匀，充分保护其中活性物质；
②将步骤1中处理的胚胎糊料置于-30℃下速冻，使羊胚胎细胞位置迅速固定，细胞破裂少细胞液流失少，待胚胎糊料完全冻住后取出室温下融化，并在融化后采用用胶体磨在室温条件下研磨成细浆；
③研磨完成后加入所处理羊胚胎重量1倍的蒸馏水离心，整个离心过程中溶液温度控制在-15～-10℃的温度范围内；
④取离心后的上清液，并利用10万分子量的超滤膜进行过滤，然后再通过1万分子量的超滤膜进行过滤，过滤完成后即得成品。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤①中，所述羊胚胎采用怀孕4-6周的羊胚胎。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤①中，所述蒸馏水加水量为所处理羊胚胎重量10倍。
4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤②中，胚胎糊料在-30℃下速冻的时间为21～22h。
5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤②中，胚胎糊料在胶体磨中研磨的时间为1～2h。
6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于，所述步骤②中，将速冻操作后的冻住的羊胚胎在常温下用食品破碎机破碎10～20min，在进行胶体磨研磨。
7.根据权利要求6所述的提取方法，其特征在于，所述步骤②中，依次进行的冷冻、溶解、破碎和研磨作为一个循环，充分上述循环3次再进入步骤③的操作流程。
8.一种羊胚胎素，其特征在于，为采用如权利要求1～7中任意一种所述的方法制备的羊胚胎素。
9.一种美容制剂，其特征在于，该美容制剂含有羊胚胎素以及美容液基质，所述羊胚胎素为权利要求8中所述的羊胚胎素，所述美容液基质配方按质量比为：透明质酸钠0.1％-0.5％，海藻糖1％-2％，甘油5％-10％，丁二醇5％-10％，苯氧乙醇0.5％-1％，剩余组分为蒸馏水，制备时将羊胚胎素以占原料总质量比2％的比例添加于美容液基质中混合均匀，即得成品。
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