CN106818104A - 一种石斛附生茶树生态栽培专用生物肥及其应用 - Google Patents

一种石斛附生茶树生态栽培专用生物肥及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及一种石斛附生茶树生态栽培专用生物肥，属于肥生物发酵肥技术领域。所述的生物肥为1‑50份铁皮石斛菌根真菌发酵液与5‑120份发酵培养基通气暗培养制得。本发明中的生物肥以石斛菌根真菌发酵泥炭藓和或酒糟，肥料中不但含有石斛菌根真菌，而且含有石斛和茶叶生长所需的必要元素(如钾、镁、锰、铵、腐植酸、氨基酸等)。尽管茶树本身生长得较好，但采用本发明低成本的生物肥后可明显提高石斛附生在茶树上的成活率和生长质量。经试验研究，使用本发明生物肥料比不使用肥料，成活率提高50％左右，产量提高5倍左右。

Description

一种石斛附生茶树生态栽培专用生物肥及其应用
技术领域
本发明涉及一种石斛附生茶树生态栽培专用生物肥，属于肥生物发酵肥技术领域。
背景技术
石斛为我国传统名贵中药材，我国历版药典均有记载。中药石斛的原植物为兰科(Orchidaceae)石斛属(Dendrobium Sw.)多年生草本植物。多年以来，商品石斛主要依靠野生药用石斛资源，随着药用石斛开发利用的不断深入和国内外需求量的逐年增加，我国野生药用石斛资源遭到了严重破坏，有些地区甚至面临枯竭。近年来，人们逐渐开始对石斛的野生植物进行家种栽培、高产栽培技术等加以实践。
当前的人工栽培中，繁殖主要依靠分株繁殖和扦插繁殖，但该方法繁殖系数低，既不经济，又限制了石斛的产量潜力，不便栽植管理推广，因而扩大种植面积受到抑制。许多地方采用了组培繁殖方法以快速获得大量幼苗；由于石斛在组培繁殖时是在人工环境中进行的，其药用价值远不及野生的铁皮石斛，因此很有必要采用野生的方法种植铁皮石斛。
中国专利(申请号：201410024655.2)针对纯人工种植石斛所具有的药用价值的不足，提供了一种菌根化石斛苗茶树仿野生栽培方法：菌根真菌的发酵培养、石斛组培苗的培养、石斛苗与菌根真菌的共生栽培、菌根化的石斛苗炼苗方法、石斛组培苗与茶树附生栽培方法，以提高石斛的药用价值，提高经济效益，但是该专利中仅提及仿野生栽培方法并未涉及共生栽培中的肥料，且石斛苗与茶树共生中的存活率及产量并不稳定。
发明内容
本发明的目的在于针对上述存在的问题，提供一种可以提高石斛附生在茶树上的成活率和生长质量的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥。
本发明通过如下技术方案实现：一种石斛附生茶树生态栽培专用生物肥，所述的生物肥为1-50份铁皮石斛菌根真菌发酵液与5-120份发酵培养基通气暗培养制得。
本发明生物肥中的铁皮石斛菌根真菌在光照或不通气的情况下就会死亡，因此需要在避光通氧的情况下，才能存活。且铁皮石斛菌根真菌发酵液过多或过少都会影响发酵时间，增加成本，且还会影响生物肥的效率。
在上述石斛附生茶树生态栽培专用生物肥中，所述通气暗培养的温度为10-50℃，通气暗培养的时间为1-90h。
10-50℃是生物肥中菌种最适应和活跃生长的温度，若温度低于10℃或高于50℃均会影响菌种的存活，进而影响生物肥的功效。
在上述石斛附生茶树生态栽培专用生物肥中，所述的发酵培养基在通气暗培养前在120-125℃下灭菌10-30min。
在上述石斛附生茶树生态栽培专用生物肥中，发酵培养基为：泥炭藓和/或酒糟1-800g/L、金樱子2-300g/L、酒石酸铵1-100g/L、磷酸二氢钾0.1-20g/L、硫酸镁0.1-20g/L、氯化锰0.1-20g/L、其余为水；混合后匀浆并在121℃灭菌20min。
本发明以石斛菌根真菌发酵泥炭藓和/或酒糟，生物肥料中不但含有石斛菌根真菌，可以为石斛补充菌根真菌，同时含有石斛菌根真菌发酵产物，更容易被石斛和茶树吸收。因为石斛本身没有根毛，只有靠菌根真菌转化营养，所以本发明的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥与现有肥料有本质区别。
在上述石斛附生茶树生态栽培专用生物肥中，所述的铁皮石斛菌根真菌发酵液通过如下方法制得：选取铁皮石斛的新鲜营养根，并用次氯酸钙溶液进行表面灭菌处理，然后用无菌水冲洗3-5次，接着将根切成小段，放置在PAD分离培养基上，在10-50℃下暗培养，待菌丝自根段中长成菌落后，在菌落边缘打孔成菌片，将菌片接入扩大培养基中在2-30℃下振荡培养1-50天，即可得到铁皮石斛菌根真菌发酵液。
先进行表面灭菌处理再在10-50℃下暗培养然后在扩大培养基2-30℃下振荡培养1-50天可以把杂菌灭掉分离出真正的石斛菌根真菌且只有先把杂菌灭掉才可以分离出真正的石斛菌根真菌，这个过程是由固态菌种变成液态菌种的过程。
作为优选，所述扩大培养基的配方为：蔗糖1-30g/L、蛋白胨1-10g/L、酵母膏1-10g/L磷酸二氢钾0.1-20g/L、硫酸镁0.1-20g/L、研磨过的泥炭藓1-200g/L，pH值4-9。
上述石斛附生茶树生态栽培专用生物肥在菌根化石斛苗茶树仿野生栽培方法中的应用，将石斛附生茶树生态栽培专用生物肥稀释在水中，喷施在石斛根部。
作为优选，石斛附生茶树生态栽培专用生物肥与水按质量比为1：4-6进行稀释。进一步优选，石斛附生茶树生态栽培专用生物肥与水按质量比为1：5进行稀释。
作为优选，石斛附生茶树生态栽培专用生物肥的用量为60-150公斤/亩。进一步优选，石斛附生茶树生态栽培专用生物肥的用量为100公斤/亩。
每年的3-11月份是石斛的生长期，因此3-11月份中每10-20天喷施一次石斛附生茶树生态栽培专用生物肥，15天一次最佳，且需要避开高温天气喷施。
与现有技术相比，本发明中的生物肥以石斛菌根真菌发酵泥炭藓和或酒糟，肥料中不但含有石斛菌根真菌，而且含有石斛和茶叶生长所需的必要元素(如钾、镁、锰、铵、腐植酸、氨基酸等)。尽管茶树本身生长得较好，但采用本发明低成本的生物肥后可明显提高石斛附生在茶树上的成活率和生长质量。经试验研究，使用本发明生物肥料比不使用肥料，成活率提高50％左右，产量提高5倍左右。
具体实施方式
以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案作进一步的描述，但本发明并不限于这些实施例。
实施例1
所述的铁皮石斛菌根真菌发酵液通过如下方法制得：选取铁皮石斛的新鲜营养根，并用次氯酸钙溶液进行表面灭菌处理，然后用无菌水冲洗4次，接着将根切成小段，放置在PAD分离培养基上，在30℃下暗培养，待菌丝自根段中长成菌落后，在菌落边缘打孔成菌片，将菌片接入扩大培养基中在20℃下振荡培养30天，即可得到铁皮石斛菌根真菌发酵液；扩大培养基为：蔗糖1-30g/L、蛋白胨1-10g/L、酵母膏1-10g/L磷酸二氢钾0.1-20g/L、硫酸镁0.1-20g/L、研磨过的泥炭藓1-200g/L，pH值4-9。
将发酵培养基在122℃下灭菌处理20min；发酵培养基为：泥炭藓和/或酒糟1-800g/L、金樱子2-300g/L、酒石酸铵1-100g/L、磷酸二氢钾0.1-20g/L、硫酸镁0.1-20g/L、氯化锰0.1-20g/L、其余为水；混合后匀浆并在121℃灭菌20min。
取20份铁皮石斛菌根真菌发酵液与80份灭菌处理后的发酵培养基在25℃下通气暗培养40h得本发明石斛附生茶树生态栽培专用生物肥。
实施例2
所述的铁皮石斛菌根真菌发酵液通过如下方法制得：选取铁皮石斛的新鲜营养根，并用次氯酸钙溶液进行表面灭菌处理，然后用无菌水冲洗4次，接着将根切成小段，放置在PAD分离培养基上，在40℃下暗培养，待菌丝自根段中长成菌落后，在菌落边缘打孔成菌片，将菌片接入扩大培养基中在10℃下振荡培养20天，即可得到铁皮石斛菌根真菌发酵液；扩大培养基为：蔗糖1-30g/L、蛋白胨1-10g/L、酵母膏1-10g/L磷酸二氢钾0.1-20g/L、硫酸镁0.1-20g/L、研磨过的泥炭藓1-200g/L，pH值4-9。
将发酵培养基在124℃下灭菌处理25min；发酵培养基为：泥炭藓和/或酒糟1-800g/L、金樱子2-300g/L、酒石酸铵1-100g/L、磷酸二氢钾0.1-20g/L、硫酸镁0.1-20g/L、氯化锰0.1-20g/L、其余为水；混合后匀浆并在121℃灭菌20min。
取40份铁皮石斛菌根真菌发酵液与50份灭菌处理后的发酵培养基在30℃下通气暗培养20h得本发明石斛附生茶树生态栽培专用生物肥。
实施例3
所述的铁皮石斛菌根真菌发酵液通过如下方法制得：选取铁皮石斛的新鲜营养根，并用次氯酸钙溶液进行表面灭菌处理，然后用无菌水冲洗5次，接着将根切成小段，放置在PAD分离培养基上，在50℃下暗培养，待菌丝自根段中长成菌落后，在菌落边缘打孔成菌片，将菌片接入扩大培养基中在30℃下振荡培养1天，即可得到铁皮石斛菌根真菌发酵液；扩大培养基为：蔗糖1-30g/L、蛋白胨1-10g/L、酵母膏1-10g/L磷酸二氢钾0.1-20g/L、硫酸镁0.1-20g/L、研磨过的泥炭藓1-200g/L，pH值4-9。
将发酵培养基在125℃下灭菌处理10min；发酵培养基为：泥炭藓和/或酒糟1-800g/L、金樱子2-300g/L、酒石酸铵1-100g/L、磷酸二氢钾0.1-20g/L、硫酸镁0.1-20g/L、氯化锰0.1-20g/L、其余为水；混合后匀浆并在121℃灭菌20min。
取50份铁皮石斛菌根真菌发酵液与120份灭菌处理后的发酵培养基在50℃下通气暗培养1h得本发明石斛附生茶树生态栽培专用生物肥。
实施例4
所述的铁皮石斛菌根真菌发酵液通过如下方法制得：选取铁皮石斛的新鲜营养根，并用次氯酸钙溶液进行表面灭菌处理，然后用无菌水冲洗3次，接着将根切成小段，放置在PAD分离培养基上，在10℃下暗培养，待菌丝自根段中长成菌落后，在菌落边缘打孔成菌片，将菌片接入扩大培养基中在2℃下振荡培养50天，即可得到铁皮石斛菌根真菌发酵液；扩大培养基为：蔗糖1-30g/L、蛋白胨1-10g/L、酵母膏1-10g/L磷酸二氢钾0.1-20g/L、硫酸镁0.1-20g/L、研磨过的泥炭藓1-200g/L，pH值4-9。
将发酵培养基在120℃下灭菌处理30min；发酵培养基为：泥炭藓和/或酒糟1-800g/L、金樱子2-300g/L、酒石酸铵1-100g/L、磷酸二氢钾0.1-20g/L、硫酸镁0.1-20g/L、氯化锰0.1-20g/L、其余为水；混合后匀浆并在121℃灭菌20min。
取1份铁皮石斛菌根真菌发酵液与10份灭菌处理后的发酵培养基在10℃下通气暗培养90h得本发明石斛附生茶树生态栽培专用生物肥。
实施例5
在3-11月份中，将实施例1中的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥按100公斤/亩的用量与水按质量比为1：5进行稀释，每15天喷施一次喷施在石斛根部。
实施例6
在3-11月份中，将实施例2中的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥按80公斤/亩的用量与水按质量比为1：4进行稀释，每18天喷施一次喷施在石斛根部。
实施例7
在3-11月份中，将实施例3中的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥按60公斤/亩的用量与水按质量比为1：6进行稀释，每10天喷施一次喷施在石斛根部。
实施例8
在3-11月份中，将实施例4中的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥按150公斤/亩的用量与水按质量比为1：4进行稀释，每20天喷施一次喷施在石斛根部。
对比例1
菌根化石斛苗茶树仿野生栽培方法中未添加肥料。
对比例2
菌根化石斛苗茶树仿野生栽培方法中添加普通的肥料。
计算实施例5-8及对比例1-2中石斛苗的成活率及产量如表1所示。
表1：实施例5-8及对比例1-2中石斛苗的成活率及产量
实施例 石斛苗成活率 石斛苗产量
实施例1 98％ 11.2Kg/亩
实施例2 96.5％ 10.85Kg/亩
实施例3 96％ 10.55Kg/亩
实施例4 95％ 10.25Kg/亩
对比例1 40％ 2.2Kg/亩
对比例2 48％ 3.5Kg/亩
综上所述，本发明的生物肥以石斛菌根真菌发酵泥炭藓和或酒糟，肥料中不但含有石斛菌根真菌，而且含有石斛和茶叶生长所需的必要元素(如钾、镁、锰、铵、腐植酸、氨基酸等)。采用本发明低成本的生物肥后可明显提高石斛附生在茶树上的成活率和生长质量，成活率提高约50％，产量提高5倍左右。
本文中所描述的具体实施例仅仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。

Claims (10)

1.一种石斛附生茶树生态栽培专用生物肥，其特征在于，所述的生物肥为1-50份铁皮石斛菌根真菌发酵液与5-120份发酵培养基通气暗培养制得。
2.根据权利要求1所述的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥，其特征在于，所述通气暗培养的温度为10-50℃，通气暗培养的时间为1-90h。
3.根据权利要求1所述的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥，其特征在于，所述的发酵培养基在通气暗培养前在120-125℃下灭菌10-30min。
4.根据权利要求1或3所述的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥，其特征在于，发酵培养基为：泥炭藓和/或酒糟1-800g/L、金樱子2-300g/L、酒石酸铵1-100g/L、磷酸二氢钾0.1-20g/L、硫酸镁0.1-20g/L、氯化锰0.1-20g/L、其余为水；混合后匀浆并在121℃灭菌20min。
5.根据权利要求1所述的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥，其特征在于，所述的铁皮石斛菌根真菌发酵液通过如下方法制得：选取铁皮石斛的新鲜营养根，并用次氯酸钙溶液进行表面灭菌处理，然后用无菌水冲洗3-5次，接着将根切成小段，放置在PAD分离培养基上，在10-50℃下暗培养，待菌丝自根段中长成菌落后，在菌落边缘打孔成菌片，将菌片接入扩大培养基中在2-30℃下振荡培养1-50天，即可得到铁皮石斛菌根真菌发酵液。
6.根据权利要求5所述的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥，其特征在于，所述的扩大培养基为：蔗糖1-30g/L、蛋白胨1-10g/L、酵母膏1-10g/L磷酸二氢钾0.1-20g/L、硫酸镁0.1-20g/L、研磨过的泥炭藓1-200g/L，pH值4-9。
7.如权利要求1所述的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥在菌根化石斛苗茶树仿野生栽培方法中的应用，其特征在于，将石斛附生茶树生态栽培专用生物肥稀释在水中，喷施在石斛根部。
8.根据权利要求7所述的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥在菌根化石斛苗茶树仿野生栽培方法中的应用，其特征在于，石斛附生茶树生态栽培专用生物肥与水按质量比为1：4-6进行稀释。
9.根据权利要求7所述的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥在菌根化石斛苗茶树仿野生栽培方法中的应用，其特征在于，石斛附生茶树生态栽培专用生物肥的用量为60-150公斤/亩。
10.如权利要求7所述的石斛附生茶树生态栽培专用生物肥在菌根化石斛苗茶树仿野生栽培方法中的应用，其特征在于，3-11月份中每10-20天喷施一次石斛附生茶树生态栽培专用生物肥。
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